JPWO2020097346A5

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Publication number: JPWO2020097346A5
Application number: JP2021524959A
Authority: JP
Publication date: 2022-11-11

Claims

遺伝子操作型造血細胞であって、
（ｉ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）ポリペプチドと、
（ｉｉ）共刺激ポリペプチドと
を共発現し、
前記ＣＡＲポリペプチドが、
（ａ）細胞外抗原結合ドメインであってグリピカン－３（ＧＰＣ３）に対して特異的な一本鎖抗体断片（ｓｃＦｖ）である前記細胞外結合ドメイン、
（ｂ）膜貫通ドメイン、及び
（ｃ）細胞質側シグナル伝達ドメイン
を含むものであり、
前記共刺激ポリペプチドが、Ｂ７／ＣＤ２８スーパーファミリーのメンバー、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーのメンバー、またはそのリガンドであり、前記共刺激ポリペプチドが外来核酸にコードされている、前記造血細胞。
（ｉ）ＣＤ２８、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＶＩＳＴＡ、ＴＭＩＧＤ２、Ｂ７－Ｈ６、及びＢ７－Ｈ７
からなる群から選択されるＢ７／ＣＤ２８スーパーファミリーのメンバーまたはそのリガンドであるか、または
（ｉｉ）前記共刺激ポリペプチドが、４－１ＢＢ、４－１ＢＢＬ、ＢＡＦＦ、ＢＡＦＦＲ、ＣＤ２７、ＣＤ７０、ＣＤ３０、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＤＲ３、ＧＩＴＲ、ＧＩＴＲＬ、ＨＶＥＭ、ＬＩＧＨＴ、ＴＮＦベータ、ＯＸ４０、ＯＸ４０Ｌ、ＲＥＬＴ、ＴＡＣＩ、ＴＬ１Ａ、ＴＮＦアルファ、ＴＮＦＲＩＩ、ＢＣＭＡ、ＥＤＡＲ２、ＴＲＯＹ、ＬＴＢＲ、ＥＤＡＲ、ＮＧＦＲ、ＯＰＧ、ＲＡＮＫ、ＤＣＲ３、ＴＮＦＲ１、ＦＮ１４（ＴｗｅａｋＲ）、ＡＰＲＩＬ、ＥＤＡ－Ａ２、ＴＷＥＡＫ、ＬＴｂ（ＴＮＦ－Ｃ）、ＮＧＦ、ＥＤＡ－Ａ１、ＡＰＰアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）、及びＴＲＡＩＬからなる群から選択されるＴＮＦスーパーファミリーのメンバーまたはそのリガンドである、請求項１に記載の造血細胞。
前記ＣＡＲポリペプチドが少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含み、そして前記少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインが、４－１ＢＢ、ＣＤ２８、ＣＤ２８ _LL→GG 変異体、ＯＸ４０、ＩＣＯＳ、ＣＤ２７、ＧＩＴＲ、ＩＣＯＳ、ＨＶＥＭ、ＴＩＭ１、ＬＦＡ１及びＣＤ２からなる群から選択される共刺激分子のものである、請求項２に記載の造血細胞。
（ｉ）前記ＣＡＲポリペプチドがＣＤ２８共刺激分子の共刺激ドメインを含み、かつ
（ｉｉ）前記共刺激ポリペプチドがＢＡＦＦＲまたはＣＤ２７であるか、または
（ｉｉｉ）前記ＣＡＲポリペプチドが４－１ＢＢ共刺激分子の共刺激ドメインを含み、かつ
（ｉｖ）前記共刺激ポリペプチドがＣＤ７０、ＬＩＧＨＴまたはＯＸ４０Ｌである
請求項３に記載の造血細胞。
（ａ）前記ＣＤ２８共刺激分子が配列番号１２のアミノ酸配列を含むか、
（ｂ）前記４－１ＢＢ共刺激分子が配列番号２２のアミノ酸配列を含むか、
（ｃ）前記ＣＤ７０が配列番号３４のアミノ酸配列を含むか、
（ｄ）前記ＬＩＧＨＴが配列番号４３のアミノ酸配列を含むか、
（ｅ）前記ＯＸ４０Ｌが配列番号４７のアミノ酸配列を含むか、
（ｆ）前記ＢＡＦＦＲが配列番号３２のアミノ酸配列を含むか、および／または
（ｇ）前記ＣＤ２７が配列番号３３のアミノ酸配列を含む、
請求項２～４のいずれか１項に記載の造血細胞。
前記ｓｃＦｖが、配列番号７４として示される重鎖可変領域、及び配列番号７５として示される軽鎖可変領域を含む、請求項１～５のいずれか１項に記載の造血細胞。
前記（ｂ）の膜貫通ドメインが、ＣＤ８α、ＣＤ８β、４－１ＢＢ、ＣＤ２８、ＣＤ３４、ＣＤ４、ＦｃεＲＩγ、ＣＤ１６Ａ、ＯＸ４０、ＣＤ３ζ、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＣＤ３２、ＣＤ６４、ＶＥＧＦＲ２、ＦＡＳ及びＦＧＦＲ２Ｂからなる群から選択される膜タンパク質であり、そして前記（ｃ）の細胞質側シグナル伝達ドメインが、ＣＤ３ζまたはＦｃεＲ１γの細胞質側ドメインである、請求項１～６のいずれか１項に記載の造血細胞。
前記ＣＡＲポリペプチドが、前記（ａ）のＣ末端及び前記（ｂ）のＮ末端に位置するヒンジドメインをさらに含み、および／または前記ＣＡＲポリペプチドがそのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む、請求項１～７のいずれか１項に記載の造血細胞。
前記造血細胞が造血幹細胞または免疫細胞であり、任意選択的に前記免疫細胞が、ナチュラルキラー細胞、マクロファージ、好中球、好酸球またはＴ細胞である、請求項１～８のいずれか１項に記載の造血細胞。
前記免疫細胞が、
内在性Ｔ細胞受容体、内在性主要組織適合性複合体、内在性ベータ－２－ミクログロブリンまたはその組合せ
の発現が阻害または排除されたＴ細胞である、請求項９に記載の造血細胞。
前記造血細胞が、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、造血幹細胞（ＨＳＣ）または人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）に由来する、請求項１～１０のいずれか１項に記載の造血細胞。
前記造血細胞が、
（Ａ）前記共刺激ポリペプチドをコードする第１外来ヌクレオチド配列、及び
（Ｂ）前記ＣＡＲポリペプチドをコードする第２外来ヌクレオチド配列
を全体として含んだ核酸または核酸セットを含む、請求項１～１１のいずれか１項に記載の造血細胞。
前記核酸または前記核酸セットがＲＮＡ分子またはＲＮＡ分子のセットであるか、または
前記核酸または前記核酸セットが、ベクターまたはベクターのセットの中に含まれている、請求項１２に記載の造血細胞。
前記造血細胞が、前記第１外来ヌクレオチド配列と前記第２外来ヌクレオチド配列とを両方含んだ前記核酸を含み、
前記核酸が、前記第１外来ヌクレオチド配列と前記第２外来ヌクレオチド配列との間に位置する第３外来ヌクレオチド配列をさらに含み、前記第３外来ヌクレオチド配列が、リボソームスキッピング部位、配列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）または第２プロモーターをコードする、請求項１２または請求項１３に記載の造血細胞。
前記第３外来ヌクレオチド配列が、Ｐ２Ａペプチドであるリボソームスキッピング部位をコードする、請求項１４に記載の造血細胞。
前記核酸または前記核酸セットが、１つ以上のウイルスベクターを含む前記ベクターまたはベクターのセットである、請求項１２～１５のいずれか１項に記載の造血細胞。
請求項１～１６のいずれか１項に記載の造血細胞、及び薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
対象においてＧＰＣ３が発現している細胞を阻害するための、請求項１７に記載の医薬組成物。
前記造血細胞が対象に対して自家性である、請求項１８に記載の医薬組成物。
エクスビボで前記造血細胞を活性化させる、増殖させる、またはその両方を行う、請求項１９に記載の医薬組成物。
対象におけるＧＰＣ３ ⁺ がんの治療における使用のための、前記対象が、ＧＰＣ３⁺がん細胞に関連するがんを患っているヒト患者である、請求項１７～２０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
前記がんが、乳癌、胃癌、肺癌、皮膚癌、前立腺癌、大腸癌、腎細胞癌腫、卵巣癌、横紋筋肉腫、胚細胞癌、肝芽腫、中皮腫、膵臓癌、頭頸部癌、神経膠腫、神経膠芽腫、甲状腺癌、肝細胞癌、食道癌または子宮頸癌である、請求項２１に記載の医薬組成物。
（Ａ）請求項１及び請求項５～９のいずれか１項に記載のＣＡＲポリペプチドをコードする第１ヌクレオチド配列、ならびに
（Ｂ）請求項１～５のいずれか１項に記載の共刺激ポリペプチドをコードする第２ヌクレオチド配列
を全体として含む、核酸または核酸セット。
前記核酸または前記核酸セットが、ＲＮＡ分子またはＲＮＡ分子のセットであるか、または
前記核酸または前記核酸セットが、ベクターまたはベクターのセットの中に含まれている、請求項２３に記載の核酸または核酸セット。
前記核酸が、前記第１ヌクレオチド配列と前記第２ヌクレオチド配列とを両方含み、ここで、前記核酸が、前記第１ヌクレオチド配列と前記第２ヌクレオチド配列との間に位置する第３ヌクレオチド配列をさらに含み、前記第３ヌクレオチド配列が、リボソームスキッピング部位、配列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）または第２プロモーターをコードする、請求項２３または請求項２４に記載の核酸または核酸セット。
前記リボソームスキッピング部位がＰ２Ａペプチドである、請求項２５に記載の核酸または核酸セット。
前記核酸または前記核酸セットが、１つ以上のウイルスベクターを含む前記ベクターまたはベクターのセットである、請求項２３～２６のいずれか１項に記載の核酸または核酸。
インビボで改変型造血細胞を生み出すための、請求項２３～２７のいずれか１項に記載の核酸または核酸セットを含む、医薬組成物。