JPWO2020002598A5 - - Google Patents
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特許請求の範囲において、単語「含む／備える」は、他の構成要素または工程を排除せず、不定冠詞の「１つの（“ａ”または“ａｎ”）」は、複数形を排除しない。特定の手段が互いに異なる従属項に再引用されるという単なる事実は、これらの手段の組み合わせが利点のために使用され得ないことを示さない。特許請求の範囲内の任意の引用符号は、当該範囲を限定するものとして理解されるべきではない。
［付記１］ （ａ）磁性粒子、ＤＮＡ鋳型、ＤＮＡ固定化バッファー、ＤＮＡ磁性粒子およびＩＶＴマスターミックスを保持するのに適した反応容器（２）であって、前記ＤＮＡ磁性粒子は浮動性の前記磁性粒子上に固定化されたＤＮＡ鋳型である、前記反応容器（２）と、（ｂ）前記反応容器に位置する磁石ユニット（３）であって、前記磁石ユニットは、前記磁性粒子および前記ＤＮＡ磁性粒子を捕捉するように、または、前記磁性粒子および前記ＤＮＡ磁性粒子の運動を導入するように構成される、前記磁石ユニット（３）と、を備えるＲＮＡインビトロ転写用バイオリアクター（１）。
［付記２］ 前記反応容器（２）の内面は、楕円形、長円形内部形状または卵形内部形状を有する、付記１に記載のバイオリアクター（１）。
［付記３］ 前記反応容器（２）の前記内面は、角縁のない形状を有する、付記１または２に記載のバイオリアクター（１）。
［付記４］ 前記磁性粒子または前記ＤＮＡ磁性粒子のうちの少なくとも１つの前記運動は、当該粒子の沈殿を避けるように、または当該粒子を浮動させ続けるように、または当該粒子の沈殿を避けかつ浮動させ続けるように構成される、付記１～３のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５］ 前記磁石ユニット（３）は、前記反応容器の外面上にまたは外面に近接して置かれた電磁石のアレイである、付記１～４のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記６］ 前記磁石ユニット（３）は、前記反応容器（２）の長手軸に沿った長手方向（３６２）と、前記反応容器（２）対して接離する横断方向（３６３）とのうちの少なくとも１つの方向に可動である永久磁石または電磁石である、付記１～４のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記７］ 前記磁石ユニット（３）は、前記反応容器（２）の長手軸に沿って長手方向（１１０）に可動でありかつ前記反応容器（２）の垂直軸の周りに回転可能（１１１）である、電磁石および好ましくは少なくとも誘導コイルまたは１組のヘルムホルツコイルである、付記１～４のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記８］ 前記磁石ユニット（３）は、前記反応容器（２）の前記長手軸の周りに回転可能なように構成され、かつ前記磁石ユニット（３）の回転方向は混合中に切り替え可能である、付記１～７のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記９］ 前記磁石ユニット（３）は磁性リング（３１）を備え、前記磁性リング（３１）は、前記反応容器（２）を取り囲むように設計される、付記１～８のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記１０］ 前記磁性リング（３１）は、第１ロッド（３２０）および第２ロッド（３２２）の自由端（３２１，３２３）が互いに向かい合うように前記磁性リング（３１）の内周（３４）から前記磁性リング（３１）の中心（３３）に延在する少なくとも前記第１ロッド（３２０）および前記第２ロッド（３２２）を備える、付記９に記載のバイオリアクター（１）。
［付記１１］ 前記第１ロッド（３２０）の前記自由端（３２１）は、Ｎ極の磁石を備え、前記第２ロッド（３２２）の前記自由端（３２３）は、Ｓ極の磁石を備える、付記１０に記載のバイオリアクター（１）。
［付記１２］ 前記磁性リング（３１）は、複数のロッド（３２０，３２２）を備え、前記複数のロッド（３２０，３２２）は、前記磁性リング（３１）の内周（３４）から前記磁性リング（３１）の中心（３３）に延在し、互いに等間隔をおいて星形に配置され、Ｎ極の磁石およびＳ極の磁石が各ロッドの自由端に交互に配置される、付記８または９に記載のバイオリアクター（１）。
［付記１３］ 前記磁性リング（３１）および前記ロッド（３２０，３２２）は、磁場からの周辺成分を遮蔽するための積層スタックを形成するように構成される、付記８～１２のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記１４］ 前記磁性リング（３１）は、前記磁性リング（３１）の内周（３４）から前記磁性リング（３１）の中心に延在する複数のガイドプレート（３５０）を備え、各ガイドプレート（３５０）は、磁場を生成するように構成された電気コイル（３５１）を備える、付記９に記載のバイオリアクター（１）。
［付記１５］ 前記磁性リング（３１）は、冷却手段を有するハウジング（３５２）内に配置される、付記１４に記載のバイオリアクター（１）。
［付記１６］ 前記磁石ユニット（３）は、前記磁性リング（３１）を回転するように構成された第１駆動手段（３６）と、前記磁性リング（３１）を垂直方向に動かすように構成された第２駆動手段（３７）とをさらに備える、付記１～１５のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記１７］ 前記反応容器（２）は、常磁性体であるか、または前記反応容器壁に磁性粒子およびＤＮＡ磁性粒子を引き止めるために磁場を透過させるように構成される、付記１～１６のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記１８］ 前記磁石ユニット（３）は、前記磁性粒子または前記ＤＮＡ磁性粒子を混合するために周期的に活性化されるように構成される、付記１～１７のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記１９］ 前記磁石ユニット（３）は、同一のＤＮＡ鋳型上での２回の連なるＲＮＡインビトロ転写の間、前記ＤＮＡ磁性粒子を捕捉するために活性化されるように構成される、付記１～１８のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記２０］ 前記磁石ユニット（３）は、前記反応容器を洗浄するために、前記ＤＮＡ磁性粒子を取り除くために活性化されるように構成される、付記１～１９のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記２１］ 前記ＤＮＡ磁性粒子または前記反応容器（２）のうちの少なくとも１つのための機械的運動を導入する手段がない、付記１～２０のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記２２］ 前記反応容器のための機械的運動がオービタルシェーカーによって導入される、付記１～２０のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記２３］ 前記反応容器（２）は、前記反応容器（２）の長手方向に、前記反応容器（２）の内面（２１）に少なくとも部分的に沿って配置された少なくとも１つのフローブレーカ（４）を備える、付記１～２２のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記２４］ 前記反応容器（２）は、前記反応容器（２）の径方向に互いに間隔をあけて離れている２つのフローブレーカ（４）を備える、付記２３に記載のバイオリアクター（１）。
［付記２５］ 前記フローブレーカ（４）がリブ形である、付記２３または２４に記載のバイオリアクター（１）。
［付記２６］ 前記リブ形のフローブレーカ（４）は、Ｔ形またはＬ形の断面を備える、付記２５に記載のバイオリアクター（１）。
［付記２７］ 前記フローブレーカ（４）は、波状である、付記２３または２４に記載のバイオリアクター（１）。
［付記２８］ 前記フローブレーカ（４）は、複数の突出部を備え、前記突出部は、好ましくは互いに間隔をあけて離れている、付記２３または２４に記載のバイオリアクター（１）。
［付記２９］ 前記反応容器（２）の温度を調整するために前記反応容器（２）の前記内面（２１）と前記外面（２３）との間に温度素子（５）が置かれる、付記１～２８のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記３０］ 前記温度素子（５）は、前記反応容器（２）の径方向に前記反応容器（２）を少なくとも部分的にらせん状に取り囲む熱交換チャネル（５１）を備える、付記２９に記載のバイオリアクター（１）。
［付記３１］ 前記熱交換チャネル（５１）は、第１端（５２）と第２端（５３）とを備え、前記第１端（５２）は前記反応容器（２）の上部に配置され、前記第２端（５３）は、前記反応容器（２）の底部に置かれる、付記３０に記載のバイオリアクター（１）。
［付記３２］ 前記熱交換チャネル（５１）または前記反応容器（２）のうちの少なくとも１つは、追加の製造プロセス手段によって製造される、付記３０または３１のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記３３］ 前記反応容器（２）は、前記反応容器（２）の径方向に、少なくとも部分的にらせん状に前記反応容器（２）を取り囲む加熱ワイヤ（５４）を備える温度素子（５）をさらに備える、付記１～２８のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記３４］ 前記加熱ワイヤ（５４）は、前記反応容器（２）の外面内に少なくとも部分的に組み込まれるか、または、前記反応容器（２）の前記外面において少なくとも部分的にコートされる、付記３３に記載のバイオリアクター（１）。
［付記３５］ 前記反応容器（２）は、少なくとも２０ｍｌの液体、好ましくは２０ｍｌ～１００ｍｌまたは２０ｍｌ～５０ｍｌの流体の汲み上げのために構成される、付記１～３４のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記３６］ 前記ＩＶＴマスターミックスは、リボヌクレオシド３リン酸およびＤＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼを含む、付記１～３５のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記３７］ 前記ＤＮＡ固定化バッファーは、ＤＮＡ鋳型および塩含有バッファーを含む、付記１～３６のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記３８］ 前記ＤＮＡ鋳型は、直鎖状二本鎖ＤＮＡ鋳型、好ましくはＰＣＲ増幅されたＤＮＡ鋳型である、付記１～３７のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記３９］ 前記磁性粒子は磁性ビーズ、好ましくはストレプトアビジン磁性ビーズまたは化学的に機能化された磁性ビーズである、付記１～３８のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記４０］ 前記反応容器（２）の内面は、Ｒａ＜＝０．８、好ましくはＲａ＜＝０．６のＲａ値を有する、付記１～３９のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記４１］ 前記反応容器（２）は、前記反応容器（２）の底部に、媒質を前記反応容器（２）に対して給排するためのポート（２４）を備え、前記ポート（２４）はバルブ手段（６０）に接続可能である、付記４０に記載のバイオリアクター（１）。
［付記４２］ 前記バルブ手段（６０）が磁性トラップ（６１）を備え、前記磁性トラップ（６１）は、磁性粒子およびＤＮＡ磁性粒子を捕らえるように構成される、付記４１に記載のバイオリアクター（１）。
［付記４３］ 前記磁性トラップ（６１）は、電磁石半球または磁化可能な半球または磁化可能なリングまたは半透過性フィルタのうちの少なくとも１つを備える、付記４２に記載のバイオリアクター（１）。
［付記４４］ 前記反応容器から磁性粒子およびＤＮＡ磁性粒子の漏れを防ぐように制御可能である、付記４２または４３のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記４５］ 前記磁性トラップ（６１）は、前記反応容器（２）の外側で少なくとも部分的に媒質パイプ（６６）を取り囲むように置かれ、前記ポート（２４）の下流に当接する、付記４２～４４のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記４６］ 前記ポート（２４）は、前記反応容器（２）の最下部に置かれる、付記４５のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記４７］ 前記磁性トラップの下流に置かれ、前記ポート（２４）から磁性粒子およびＤＮＡ磁性粒子を取り除くために、前記ポート（２４）を通る洗浄ガスまたは洗浄液を方向づけるように構成される、マルチポジションバルブ（６２）をさらに備える、付記１～４６のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記４８］ 前記マルチポジションバルブ（６２）は、前記ＤＮＡ磁性粒子を混合するために、前記反応容器（２）内にプロセスガスまたはプロセス流体を方向づけるよう構成される、付記４７に記載のバイオリアクター（１）。
［付記４９］ 前記バイオリアクターは、前記バイオリアクターを垂直に支持する少なくとも第１脚部（２５）および第２脚部（２６）を備え、前記第１脚部（２５）は第１導管（２５１）を備え、前記第２脚部（２６）は第２導管（２６１）を備え、前記第１導管（２５１）は、前記バルブ手段（６０）と流体連結するように構成され、前記第２導管（２６１）は、前記温度素子（５）の前記熱交換チャネル（５１）の前記第２端（５３）と流体連結するように構成される、付記１～４８のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５０］ 排気ダクト（７３）および廃棄チャネル（７４）のうちの少なくとも１つに接続された出口ポート（７）をさらに備え、前記出口ポート（７）の下流に配置された出口フローセル（７２）を任意選択的に備える、付記１～４９のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５１］ 前記磁性トラップ（６１）の下流に置かれ、磁性粒子またはＤＮＡ磁性粒子から発生する磁場を方向づけるように構成されるホールセンサ（６３）をさらに備える、付記１～５０のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５２］ 前記反応容器（２）はチタンを含む、付記１～５１のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５３］ 前記反応容器（２）内に前記磁性粒子を引き止めるために前記ポート（２４）にフィルタ要素、好ましくは単回使用フィルタをさらに備え、前記フィルタ要素の前記孔は、好ましくは１μｍのオーダー、また、より好ましくは０．１μｍ～０．９μｍの間のサブミクロンサイズを有する、付記１～５２のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５４］ 前記温度素子（５）は、前記反応容器温度を２０～３７℃の転写温度に調整するように、好ましくは７５～８５℃の洗浄温度にも調整するように構成される、付記１～５３のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５５］ 前記バルブ手段（６０）は、前記ポート（２４）の下流に配置されたフローセル（６４）をさらに備える、付記１～５４のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５６］ 前記反応容器（２）は、ＲＮＡインビトロ転写に適したバッファー、キャップアナログ、修飾されたリボヌクレオシド３リン酸、リボヌクレアーゼ阻害剤、ピロホスファターゼ、ＭｇＣｌ ２ 、抗酸化剤、ポリアミンおよび、洗浄または衛生化のうちの１つ以上のための溶液、の要素のうちの少なくとも１つを保持するようにさらに構成される、付記１～５５のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５７］ 前記反応容器（２）は、ｐＨ、塩濃度、マグネシウム濃度、リン酸塩濃度、温度、圧力、流速、ＲＮＡ濃度またはリボヌクレオチド三リン酸濃度のうちの１つ以上を、測定、または調整、または測定および調整するための少なくとも１つの手段を保持するように構成される、付記１～５６のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５８］ 前記バイオリアクターは、バッチ、セミバッチ、または繰り返しバッチモード、または、半連続または連続モードで作動する、付記１～５７のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５９］ 前記ポートに磁性粒子の沈殿を防ぐために前記反応容器を回転させるための回転手段をさらに備える、付記１～２０、２２～５８のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記６０］ ＲＮＡインビトロ転写の方法であって、付記１～５９のうちのいずれか１項に記載のバイオリアクター（１）の反応容器にＤＮＡ磁性粒子およびＩＶＴマスターミックスを提供する工程、ＲＮＡを得るために、浮動性のＤＮＡ磁性粒子とともに前記ＩＶＴマスターミックスを前記ＤＮＡ磁性粒子および前記磁石ユニットの協働の手段によって混合する工程（Ｓ３）を含む、前記方法。
［付記６１］ 付記６０に記載の方法であって、付記１～５９のうちのいずれか１項に記載のバイオリアクター（１）の反応容器に磁性粒子、ＤＮＡ鋳型、ＤＮＡ固定化バッファーを提供する工程（Ｓ１）、前記浮動性の磁性粒子上に固定化された前記ＤＮＡ鋳型である、ＤＮＡ磁性粒子を得るために、前記磁性粒子および前記バイオリアクターの磁石ユニットの協働の手段によって前記磁性粒子、前記ＤＮＡ鋳型および前記ＤＮＡ固定化バッファーを混合する工程（Ｓ２）、をさらに含み、工程Ｓ１およびＳ２は、付記６０で定義された前記工程の前に実施される、前記方法。
［付記６２］ 付記６１に記載の方法であって、前記磁石ユニットの手段によってＤＮＡ磁性粒子を捕捉する工程、および工程Ｓ３から得られたＲＮＡを回収／集積する工程（Ｓ４ａ）、バイオリアクター（１）の反応容器内に新たなＩＶＴマスターミックスを提供する工程（Ｓ４ｂ）、浮動性のＤＮＡ磁性粒子を提供するために捕捉されたＤＮＡ磁性粒子を解離する工程（Ｓ４ｃ）、ＲＮＡを得るために前記ＤＮＡ磁性粒子および前記磁石ユニットの協働の手段によって、前記浮動性のＤＮＡ磁性粒子を前記ＩＶＴマスターミックスと混合する工程（Ｓ４ｄ）をさらに含み、工程Ｓ４ａ～Ｓ４ｄは付記６０で定義された前記工程の後に実施される、前記方法。
［付記６３］ ポート（２４）の手段によって前記反応容器（２）から前記ＤＮＡ磁性粒子を除去する工程をさらに含む、付記６０～６２のうちの１つに記載の方法。
［付記６４］ 前記反応容器（２）を２０℃～３７℃の間の温度に温度を合わせる工程（ＳＴ）をさらに含む、付記６０～６２のうちの１つに記載の方法。
［付記６５］ 洗浄ガスまたは洗浄液のうちの少なくとも１つによって前記反応容器（２）を洗浄する工程（ＳＣ）をさらに含む、付記６２～６２のうちのいずれか１項に記載の方法。
［付記６６］ 前記工程Ｓ４が少なくとも２回実施される、付記６０～６５のうちの１つに記載の方法。
［付記６７］ 付記６０～６６のうちのいずれか１項に記載の方法における付記１～５９のうちのいずれか１項に記載のバイオリアクター（１）の使用。
［付記６８］ 付記１～５９のうちのいずれか１項のバイオリアクター（１）を含む、ＤＮＡ鋳型をＲＮＡに転写するためのモジュール（１５）であって、前記モジュールは、ＩＶＴマスターミックス（１２）を調製するためのユニット、固定化バッファーを調製するためのユニット、得られたＲＮＡ産物を前処理するための装置（１３）、得られたＲＮＡ産物を精製するための装置（１４）、ＲＮＡを前処理するための装置またはＲＮＡ滅菌ろ過のための装置のうちの少なくとも１つ以上をさらに含む、前記モジュール。
［付記６９］ 前記ＩＶＴマスターミックス（１２）を調製するために前記ＩＶＴマスターミックスの成分を前記ユニットに供給する媒質供給ユニットをさらに備える、付記６８に記載のモジュール（１５）。
［付記７０］ 前記ＤＮＡ鋳型は、末端修飾または末端機能化されたＰＣＲ生成されたＤＮＡ鋳型、好ましくはビオチン化されたＰＣＲ生成されたＤＮＡ鋳型、末端修飾または修飾されていない線状化プラスミドＤＮＡ、または末端修飾または修飾されていない線状化ドギーボーンＤＮＡである、付記６８～６９のうちの１つに記載のモジュール（１５）。
［付記７１］ 付記１～５９のうちのいずれか１項に記載のバイオリアクター（１）を備える自動化されたＲＮＡ製造装置であって、ＤＮＡ合成（Ｔ）用モジュール、およびＲＮＡ配合（Ｆ）用モジュールのうちの少なくとも１つをさらに備える、前記装置。
［付記７２］ ＲＮＡ配合のための前記モジュールがＬＮＰカプセル化されたＲＮＡを生成するように構成される、付記７１に記載の装置。
［付記７３］ 前記装置が層流空気流生成のためのユニットのある密閉コンテナ内、好ましくは単一コンテナ内に配置される、付記７１または７２に記載の装置。
［付記７４］ ＤＮＡ固定化モジュール、ＤＮＡ線状化モジュール、インビトロ転写されたＲＮＡにｃａｐ０またはｃａｐ１構造を加えるためのＲＮＡキャッピングモジュール、ＲＮＡポリアデニル化モジュール、ＲＮＡ混合モジュール、ＲＮＡ噴霧乾燥モジュール、ＲＮＡ凍結乾燥モジュール、または最終生成物貯蔵のためのモジュールのうちの少なくとも１つをさらに備える、付記７１～７３のうちのいずれかに記載の装置。
［付記７５］ ＲＮＡ配合のための前記モジュールは、プロタミン複合ＲＮＡまたはポリエチレングリコール／ペプチドポリマー複合ＲＮＡを生成するように構成される、付記７１～７４のうちのいずれかに記載の装置。
［付記７６］ ＮＧＳモジュール、ＭＳモジュール、キャピラリー電気泳動モジュール、ｄｄＰＣＲモジュール、媒質供給ラックまたは媒質供給モジュール、文書化モジュールまたは全ての処理工程のためのコンピュータ支援制御のためのモジュールのうちの少なくとも１つ以上をさらに備える、付記７１～７５のうちのいずれかに記載の装置。
［付記１］ （ａ）磁性粒子、ＤＮＡ鋳型、ＤＮＡ固定化バッファー、ＤＮＡ磁性粒子およびＩＶＴマスターミックスを保持するのに適した反応容器（２）であって、前記ＤＮＡ磁性粒子は浮動性の前記磁性粒子上に固定化されたＤＮＡ鋳型である、前記反応容器（２）と、（ｂ）前記反応容器に位置する磁石ユニット（３）であって、前記磁石ユニットは、前記磁性粒子および前記ＤＮＡ磁性粒子を捕捉するように、または、前記磁性粒子および前記ＤＮＡ磁性粒子の運動を導入するように構成される、前記磁石ユニット（３）と、を備えるＲＮＡインビトロ転写用バイオリアクター（１）。
［付記２］ 前記反応容器（２）の内面は、楕円形、長円形内部形状または卵形内部形状を有する、付記１に記載のバイオリアクター（１）。
［付記３］ 前記反応容器（２）の前記内面は、角縁のない形状を有する、付記１または２に記載のバイオリアクター（１）。
［付記４］ 前記磁性粒子または前記ＤＮＡ磁性粒子のうちの少なくとも１つの前記運動は、当該粒子の沈殿を避けるように、または当該粒子を浮動させ続けるように、または当該粒子の沈殿を避けかつ浮動させ続けるように構成される、付記１～３のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５］ 前記磁石ユニット（３）は、前記反応容器の外面上にまたは外面に近接して置かれた電磁石のアレイである、付記１～４のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記６］ 前記磁石ユニット（３）は、前記反応容器（２）の長手軸に沿った長手方向（３６２）と、前記反応容器（２）対して接離する横断方向（３６３）とのうちの少なくとも１つの方向に可動である永久磁石または電磁石である、付記１～４のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記７］ 前記磁石ユニット（３）は、前記反応容器（２）の長手軸に沿って長手方向（１１０）に可動でありかつ前記反応容器（２）の垂直軸の周りに回転可能（１１１）である、電磁石および好ましくは少なくとも誘導コイルまたは１組のヘルムホルツコイルである、付記１～４のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記８］ 前記磁石ユニット（３）は、前記反応容器（２）の前記長手軸の周りに回転可能なように構成され、かつ前記磁石ユニット（３）の回転方向は混合中に切り替え可能である、付記１～７のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記９］ 前記磁石ユニット（３）は磁性リング（３１）を備え、前記磁性リング（３１）は、前記反応容器（２）を取り囲むように設計される、付記１～８のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記１０］ 前記磁性リング（３１）は、第１ロッド（３２０）および第２ロッド（３２２）の自由端（３２１，３２３）が互いに向かい合うように前記磁性リング（３１）の内周（３４）から前記磁性リング（３１）の中心（３３）に延在する少なくとも前記第１ロッド（３２０）および前記第２ロッド（３２２）を備える、付記９に記載のバイオリアクター（１）。
［付記１１］ 前記第１ロッド（３２０）の前記自由端（３２１）は、Ｎ極の磁石を備え、前記第２ロッド（３２２）の前記自由端（３２３）は、Ｓ極の磁石を備える、付記１０に記載のバイオリアクター（１）。
［付記１２］ 前記磁性リング（３１）は、複数のロッド（３２０，３２２）を備え、前記複数のロッド（３２０，３２２）は、前記磁性リング（３１）の内周（３４）から前記磁性リング（３１）の中心（３３）に延在し、互いに等間隔をおいて星形に配置され、Ｎ極の磁石およびＳ極の磁石が各ロッドの自由端に交互に配置される、付記８または９に記載のバイオリアクター（１）。
［付記１３］ 前記磁性リング（３１）および前記ロッド（３２０，３２２）は、磁場からの周辺成分を遮蔽するための積層スタックを形成するように構成される、付記８～１２のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記１４］ 前記磁性リング（３１）は、前記磁性リング（３１）の内周（３４）から前記磁性リング（３１）の中心に延在する複数のガイドプレート（３５０）を備え、各ガイドプレート（３５０）は、磁場を生成するように構成された電気コイル（３５１）を備える、付記９に記載のバイオリアクター（１）。
［付記１５］ 前記磁性リング（３１）は、冷却手段を有するハウジング（３５２）内に配置される、付記１４に記載のバイオリアクター（１）。
［付記１６］ 前記磁石ユニット（３）は、前記磁性リング（３１）を回転するように構成された第１駆動手段（３６）と、前記磁性リング（３１）を垂直方向に動かすように構成された第２駆動手段（３７）とをさらに備える、付記１～１５のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記１７］ 前記反応容器（２）は、常磁性体であるか、または前記反応容器壁に磁性粒子およびＤＮＡ磁性粒子を引き止めるために磁場を透過させるように構成される、付記１～１６のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記１８］ 前記磁石ユニット（３）は、前記磁性粒子または前記ＤＮＡ磁性粒子を混合するために周期的に活性化されるように構成される、付記１～１７のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記１９］ 前記磁石ユニット（３）は、同一のＤＮＡ鋳型上での２回の連なるＲＮＡインビトロ転写の間、前記ＤＮＡ磁性粒子を捕捉するために活性化されるように構成される、付記１～１８のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記２０］ 前記磁石ユニット（３）は、前記反応容器を洗浄するために、前記ＤＮＡ磁性粒子を取り除くために活性化されるように構成される、付記１～１９のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記２１］ 前記ＤＮＡ磁性粒子または前記反応容器（２）のうちの少なくとも１つのための機械的運動を導入する手段がない、付記１～２０のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記２２］ 前記反応容器のための機械的運動がオービタルシェーカーによって導入される、付記１～２０のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記２３］ 前記反応容器（２）は、前記反応容器（２）の長手方向に、前記反応容器（２）の内面（２１）に少なくとも部分的に沿って配置された少なくとも１つのフローブレーカ（４）を備える、付記１～２２のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記２４］ 前記反応容器（２）は、前記反応容器（２）の径方向に互いに間隔をあけて離れている２つのフローブレーカ（４）を備える、付記２３に記載のバイオリアクター（１）。
［付記２５］ 前記フローブレーカ（４）がリブ形である、付記２３または２４に記載のバイオリアクター（１）。
［付記２６］ 前記リブ形のフローブレーカ（４）は、Ｔ形またはＬ形の断面を備える、付記２５に記載のバイオリアクター（１）。
［付記２７］ 前記フローブレーカ（４）は、波状である、付記２３または２４に記載のバイオリアクター（１）。
［付記２８］ 前記フローブレーカ（４）は、複数の突出部を備え、前記突出部は、好ましくは互いに間隔をあけて離れている、付記２３または２４に記載のバイオリアクター（１）。
［付記２９］ 前記反応容器（２）の温度を調整するために前記反応容器（２）の前記内面（２１）と前記外面（２３）との間に温度素子（５）が置かれる、付記１～２８のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記３０］ 前記温度素子（５）は、前記反応容器（２）の径方向に前記反応容器（２）を少なくとも部分的にらせん状に取り囲む熱交換チャネル（５１）を備える、付記２９に記載のバイオリアクター（１）。
［付記３１］ 前記熱交換チャネル（５１）は、第１端（５２）と第２端（５３）とを備え、前記第１端（５２）は前記反応容器（２）の上部に配置され、前記第２端（５３）は、前記反応容器（２）の底部に置かれる、付記３０に記載のバイオリアクター（１）。
［付記３２］ 前記熱交換チャネル（５１）または前記反応容器（２）のうちの少なくとも１つは、追加の製造プロセス手段によって製造される、付記３０または３１のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記３３］ 前記反応容器（２）は、前記反応容器（２）の径方向に、少なくとも部分的にらせん状に前記反応容器（２）を取り囲む加熱ワイヤ（５４）を備える温度素子（５）をさらに備える、付記１～２８のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記３４］ 前記加熱ワイヤ（５４）は、前記反応容器（２）の外面内に少なくとも部分的に組み込まれるか、または、前記反応容器（２）の前記外面において少なくとも部分的にコートされる、付記３３に記載のバイオリアクター（１）。
［付記３５］ 前記反応容器（２）は、少なくとも２０ｍｌの液体、好ましくは２０ｍｌ～１００ｍｌまたは２０ｍｌ～５０ｍｌの流体の汲み上げのために構成される、付記１～３４のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記３６］ 前記ＩＶＴマスターミックスは、リボヌクレオシド３リン酸およびＤＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼを含む、付記１～３５のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記３７］ 前記ＤＮＡ固定化バッファーは、ＤＮＡ鋳型および塩含有バッファーを含む、付記１～３６のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記３８］ 前記ＤＮＡ鋳型は、直鎖状二本鎖ＤＮＡ鋳型、好ましくはＰＣＲ増幅されたＤＮＡ鋳型である、付記１～３７のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記３９］ 前記磁性粒子は磁性ビーズ、好ましくはストレプトアビジン磁性ビーズまたは化学的に機能化された磁性ビーズである、付記１～３８のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記４０］ 前記反応容器（２）の内面は、Ｒａ＜＝０．８、好ましくはＲａ＜＝０．６のＲａ値を有する、付記１～３９のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記４１］ 前記反応容器（２）は、前記反応容器（２）の底部に、媒質を前記反応容器（２）に対して給排するためのポート（２４）を備え、前記ポート（２４）はバルブ手段（６０）に接続可能である、付記４０に記載のバイオリアクター（１）。
［付記４２］ 前記バルブ手段（６０）が磁性トラップ（６１）を備え、前記磁性トラップ（６１）は、磁性粒子およびＤＮＡ磁性粒子を捕らえるように構成される、付記４１に記載のバイオリアクター（１）。
［付記４３］ 前記磁性トラップ（６１）は、電磁石半球または磁化可能な半球または磁化可能なリングまたは半透過性フィルタのうちの少なくとも１つを備える、付記４２に記載のバイオリアクター（１）。
［付記４４］ 前記反応容器から磁性粒子およびＤＮＡ磁性粒子の漏れを防ぐように制御可能である、付記４２または４３のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記４５］ 前記磁性トラップ（６１）は、前記反応容器（２）の外側で少なくとも部分的に媒質パイプ（６６）を取り囲むように置かれ、前記ポート（２４）の下流に当接する、付記４２～４４のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記４６］ 前記ポート（２４）は、前記反応容器（２）の最下部に置かれる、付記４５のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記４７］ 前記磁性トラップの下流に置かれ、前記ポート（２４）から磁性粒子およびＤＮＡ磁性粒子を取り除くために、前記ポート（２４）を通る洗浄ガスまたは洗浄液を方向づけるように構成される、マルチポジションバルブ（６２）をさらに備える、付記１～４６のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記４８］ 前記マルチポジションバルブ（６２）は、前記ＤＮＡ磁性粒子を混合するために、前記反応容器（２）内にプロセスガスまたはプロセス流体を方向づけるよう構成される、付記４７に記載のバイオリアクター（１）。
［付記４９］ 前記バイオリアクターは、前記バイオリアクターを垂直に支持する少なくとも第１脚部（２５）および第２脚部（２６）を備え、前記第１脚部（２５）は第１導管（２５１）を備え、前記第２脚部（２６）は第２導管（２６１）を備え、前記第１導管（２５１）は、前記バルブ手段（６０）と流体連結するように構成され、前記第２導管（２６１）は、前記温度素子（５）の前記熱交換チャネル（５１）の前記第２端（５３）と流体連結するように構成される、付記１～４８のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５０］ 排気ダクト（７３）および廃棄チャネル（７４）のうちの少なくとも１つに接続された出口ポート（７）をさらに備え、前記出口ポート（７）の下流に配置された出口フローセル（７２）を任意選択的に備える、付記１～４９のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５１］ 前記磁性トラップ（６１）の下流に置かれ、磁性粒子またはＤＮＡ磁性粒子から発生する磁場を方向づけるように構成されるホールセンサ（６３）をさらに備える、付記１～５０のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５２］ 前記反応容器（２）はチタンを含む、付記１～５１のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５３］ 前記反応容器（２）内に前記磁性粒子を引き止めるために前記ポート（２４）にフィルタ要素、好ましくは単回使用フィルタをさらに備え、前記フィルタ要素の前記孔は、好ましくは１μｍのオーダー、また、より好ましくは０．１μｍ～０．９μｍの間のサブミクロンサイズを有する、付記１～５２のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５４］ 前記温度素子（５）は、前記反応容器温度を２０～３７℃の転写温度に調整するように、好ましくは７５～８５℃の洗浄温度にも調整するように構成される、付記１～５３のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５５］ 前記バルブ手段（６０）は、前記ポート（２４）の下流に配置されたフローセル（６４）をさらに備える、付記１～５４のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５６］ 前記反応容器（２）は、ＲＮＡインビトロ転写に適したバッファー、キャップアナログ、修飾されたリボヌクレオシド３リン酸、リボヌクレアーゼ阻害剤、ピロホスファターゼ、ＭｇＣｌ ２ 、抗酸化剤、ポリアミンおよび、洗浄または衛生化のうちの１つ以上のための溶液、の要素のうちの少なくとも１つを保持するようにさらに構成される、付記１～５５のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５７］ 前記反応容器（２）は、ｐＨ、塩濃度、マグネシウム濃度、リン酸塩濃度、温度、圧力、流速、ＲＮＡ濃度またはリボヌクレオチド三リン酸濃度のうちの１つ以上を、測定、または調整、または測定および調整するための少なくとも１つの手段を保持するように構成される、付記１～５６のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５８］ 前記バイオリアクターは、バッチ、セミバッチ、または繰り返しバッチモード、または、半連続または連続モードで作動する、付記１～５７のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記５９］ 前記ポートに磁性粒子の沈殿を防ぐために前記反応容器を回転させるための回転手段をさらに備える、付記１～２０、２２～５８のうちの１つに記載のバイオリアクター（１）。
［付記６０］ ＲＮＡインビトロ転写の方法であって、付記１～５９のうちのいずれか１項に記載のバイオリアクター（１）の反応容器にＤＮＡ磁性粒子およびＩＶＴマスターミックスを提供する工程、ＲＮＡを得るために、浮動性のＤＮＡ磁性粒子とともに前記ＩＶＴマスターミックスを前記ＤＮＡ磁性粒子および前記磁石ユニットの協働の手段によって混合する工程（Ｓ３）を含む、前記方法。
［付記６１］ 付記６０に記載の方法であって、付記１～５９のうちのいずれか１項に記載のバイオリアクター（１）の反応容器に磁性粒子、ＤＮＡ鋳型、ＤＮＡ固定化バッファーを提供する工程（Ｓ１）、前記浮動性の磁性粒子上に固定化された前記ＤＮＡ鋳型である、ＤＮＡ磁性粒子を得るために、前記磁性粒子および前記バイオリアクターの磁石ユニットの協働の手段によって前記磁性粒子、前記ＤＮＡ鋳型および前記ＤＮＡ固定化バッファーを混合する工程（Ｓ２）、をさらに含み、工程Ｓ１およびＳ２は、付記６０で定義された前記工程の前に実施される、前記方法。
［付記６２］ 付記６１に記載の方法であって、前記磁石ユニットの手段によってＤＮＡ磁性粒子を捕捉する工程、および工程Ｓ３から得られたＲＮＡを回収／集積する工程（Ｓ４ａ）、バイオリアクター（１）の反応容器内に新たなＩＶＴマスターミックスを提供する工程（Ｓ４ｂ）、浮動性のＤＮＡ磁性粒子を提供するために捕捉されたＤＮＡ磁性粒子を解離する工程（Ｓ４ｃ）、ＲＮＡを得るために前記ＤＮＡ磁性粒子および前記磁石ユニットの協働の手段によって、前記浮動性のＤＮＡ磁性粒子を前記ＩＶＴマスターミックスと混合する工程（Ｓ４ｄ）をさらに含み、工程Ｓ４ａ～Ｓ４ｄは付記６０で定義された前記工程の後に実施される、前記方法。
［付記６３］ ポート（２４）の手段によって前記反応容器（２）から前記ＤＮＡ磁性粒子を除去する工程をさらに含む、付記６０～６２のうちの１つに記載の方法。
［付記６４］ 前記反応容器（２）を２０℃～３７℃の間の温度に温度を合わせる工程（ＳＴ）をさらに含む、付記６０～６２のうちの１つに記載の方法。
［付記６５］ 洗浄ガスまたは洗浄液のうちの少なくとも１つによって前記反応容器（２）を洗浄する工程（ＳＣ）をさらに含む、付記６２～６２のうちのいずれか１項に記載の方法。
［付記６６］ 前記工程Ｓ４が少なくとも２回実施される、付記６０～６５のうちの１つに記載の方法。
［付記６７］ 付記６０～６６のうちのいずれか１項に記載の方法における付記１～５９のうちのいずれか１項に記載のバイオリアクター（１）の使用。
［付記６８］ 付記１～５９のうちのいずれか１項のバイオリアクター（１）を含む、ＤＮＡ鋳型をＲＮＡに転写するためのモジュール（１５）であって、前記モジュールは、ＩＶＴマスターミックス（１２）を調製するためのユニット、固定化バッファーを調製するためのユニット、得られたＲＮＡ産物を前処理するための装置（１３）、得られたＲＮＡ産物を精製するための装置（１４）、ＲＮＡを前処理するための装置またはＲＮＡ滅菌ろ過のための装置のうちの少なくとも１つ以上をさらに含む、前記モジュール。
［付記６９］ 前記ＩＶＴマスターミックス（１２）を調製するために前記ＩＶＴマスターミックスの成分を前記ユニットに供給する媒質供給ユニットをさらに備える、付記６８に記載のモジュール（１５）。
［付記７０］ 前記ＤＮＡ鋳型は、末端修飾または末端機能化されたＰＣＲ生成されたＤＮＡ鋳型、好ましくはビオチン化されたＰＣＲ生成されたＤＮＡ鋳型、末端修飾または修飾されていない線状化プラスミドＤＮＡ、または末端修飾または修飾されていない線状化ドギーボーンＤＮＡである、付記６８～６９のうちの１つに記載のモジュール（１５）。
［付記７１］ 付記１～５９のうちのいずれか１項に記載のバイオリアクター（１）を備える自動化されたＲＮＡ製造装置であって、ＤＮＡ合成（Ｔ）用モジュール、およびＲＮＡ配合（Ｆ）用モジュールのうちの少なくとも１つをさらに備える、前記装置。
［付記７２］ ＲＮＡ配合のための前記モジュールがＬＮＰカプセル化されたＲＮＡを生成するように構成される、付記７１に記載の装置。
［付記７３］ 前記装置が層流空気流生成のためのユニットのある密閉コンテナ内、好ましくは単一コンテナ内に配置される、付記７１または７２に記載の装置。
［付記７４］ ＤＮＡ固定化モジュール、ＤＮＡ線状化モジュール、インビトロ転写されたＲＮＡにｃａｐ０またはｃａｐ１構造を加えるためのＲＮＡキャッピングモジュール、ＲＮＡポリアデニル化モジュール、ＲＮＡ混合モジュール、ＲＮＡ噴霧乾燥モジュール、ＲＮＡ凍結乾燥モジュール、または最終生成物貯蔵のためのモジュールのうちの少なくとも１つをさらに備える、付記７１～７３のうちのいずれかに記載の装置。
［付記７５］ ＲＮＡ配合のための前記モジュールは、プロタミン複合ＲＮＡまたはポリエチレングリコール／ペプチドポリマー複合ＲＮＡを生成するように構成される、付記７１～７４のうちのいずれかに記載の装置。
［付記７６］ ＮＧＳモジュール、ＭＳモジュール、キャピラリー電気泳動モジュール、ｄｄＰＣＲモジュール、媒質供給ラックまたは媒質供給モジュール、文書化モジュールまたは全ての処理工程のためのコンピュータ支援制御のためのモジュールのうちの少なくとも１つ以上をさらに備える、付記７１～７５のうちのいずれかに記載の装置。
Claims (16)
- （ａ）磁性粒子、ＤＮＡ鋳型、ＤＮＡ固定化バッファー、ＤＮＡ磁性粒子およびＩＶＴマスターミックスを保持するのに適した反応容器（２）であって、
前記ＤＮＡ磁性粒子は浮動性の前記磁性粒子上に固定化されたＤＮＡ鋳型であり、
前記ＩＶＴマスターミックスは、リボヌクレオシド３リン酸およびＤＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼを含む、
前記反応容器（２）と、
（ｂ）前記反応容器に位置する磁石ユニット（３）であって、前記磁石ユニットは、前記磁性粒子および前記ＤＮＡ磁性粒子を捕捉するように、または、前記磁性粒子および前記ＤＮＡ磁性粒子の運動を導入するように構成される、前記磁石ユニット（３）と、
を備えるＲＮＡインビトロ転写用バイオリアクター（１）。 - 前記反応容器（２）の内面は、楕円形、長円形内部形状または卵形内部形状を有し、前記反応容器（２）の前記内面は、角縁のない形状を有する、請求項１に記載のバイオリアクター（１）。
- 前記磁石ユニット（３）は、前記反応容器（２）の長手軸に沿った長手方向（３６２）と、前記反応容器（２）対して接離する横断方向（３６３）とのうちの少なくとも１つの方向に可動である永久磁石または電磁石である、請求項１または２に記載のバイオリアクター（１）。
- 前記磁石ユニット（３）は、前記反応容器（２）の前記長手軸の周りに回転可能なように構成され、かつ前記磁石ユニット（３）の回転方向は混合中に切り替え可能である、請求項１～３のうちの１項に記載のバイオリアクター（１）。
- 前記磁石ユニット（３）は磁性リング（３１）を備え、前記磁性リング（３１）は、前記反応容器（２）を取り囲むように設計される、請求項１～４のうちの１項に記載のバイオリアクター（１）。
- 前記磁性リング（３１）は、第１ロッド（３２０）および第２ロッド（３２２）の自由端（３２１，３２３）が互いに向かい合うように前記磁性リング（３１）の内周（３４）から前記磁性リング（３１）の中心（３３）に延在する少なくとも前記第１ロッド（３２０）および前記第２ロッド（３２２）を備え、前記第１ロッド（３２０）の前記自由端（３２１）は、Ｎ極の磁石を備え、前記第２ロッド（３２２）の前記自由端（３２３）は、Ｓ極の磁石を備える、請求項５に記載のバイオリアクター（１）。
- 前記反応容器（２）は、常磁性体であるか、または前記反応容器壁に磁性粒子およびＤＮＡ磁性粒子を引き止めるために磁場を透過させるように構成される、請求項１～６のうちの１項に記載のバイオリアクター（１）。
- 前記反応容器のための機械的運動がオービタルシェーカーによって導入される、請求項１～７のうちの１項に記載のバイオリアクター（１）。
- 前記反応容器（２）は、前記反応容器（２）の長手方向に、前記反応容器（２）の内面（２１）に少なくとも部分的に沿って配置された少なくとも１つのフローブレーカ（４）を備える、請求項１～８のうちの１項に記載のバイオリアクター（１）。
- 前記反応容器（２）の温度を調整するために前記反応容器（２）の前記内面（２１）と前記反応容器（２）の外面（２３）との間に温度素子（５）が置かれ、前記温度素子（５）は、前記反応容器（２）の径方向に前記反応容器（２）を少なくとも部分的にらせん状に取り囲む熱交換チャネル（５１）を備える、請求項１～９のうちの１項に記載のバイオリアクター（１）。
- 前記反応容器（２）は、前記反応容器（２）の径方向に、少なくとも部分的にらせん状に前記反応容器（２）を取り囲む加熱ワイヤ（５４）を備える温度素子（５）をさらに備え、前記加熱ワイヤ（５４）は、前記反応容器（２）の外面内に少なくとも部分的に組み込まれるか、または、前記反応容器（２）の前記外面において少なくとも部分的にコートされる、請求項１～９のうちの１項に記載のバイオリアクター（１）。
- 前記反応容器（２）は、少なくとも２０ｍｌの液体、好ましくは２０ｍｌ～１００ｍｌまたは２０ｍｌ～５０ｍｌの流体の汲み上げのために構成される、請求項１～１１のうちの１項に記載のバイオリアクター（１）。
- 磁性トラップ（６１）の下流に置かれ、前記反応容器（２）のポート（２４）から磁性粒子およびＤＮＡ磁性粒子を取り除くために、前記ポート（２４）を通る洗浄ガスまたは洗浄液を方向づけるように構成されるか、および／または、前記ＤＮＡ磁性粒子を混合するために、前記反応容器（２）内にプロセスガスまたはプロセス流体を方向づけるよう構成される、マルチポジションバルブ（６２）を備えるバルブ手段（６０）をさらに備える、請求項１～１２のうちの１項に記載のバイオリアクター（１）。
- ＲＮＡインビトロ転写の方法であって、
請求項１～１２のうちのいずれか１項に記載のバイオリアクター（１）の反応容器に磁性粒子、ＤＮＡ鋳型、ＤＮＡ固定化バッファーを提供する工程（Ｓ１）、
前記浮動性の磁性粒子上に固定化された前記ＤＮＡ鋳型である、ＤＮＡ磁性粒子を得るために、前記磁性粒子および前記バイオリアクターの磁石ユニットの協働の手段によって前記磁性粒子、前記ＤＮＡ鋳型および前記ＤＮＡ固定化バッファーを混合する工程（Ｓ２）、
前記バイオリアクター（１）の前記反応容器にＤＮＡ磁性粒子およびＩＶＴマスターミックスを提供する工程であって前記ＩＶＴマスターミックスはリボヌクレオシド３リン酸およびＤＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼを含む、前記提供する工程、
ＲＮＡを得るために、浮動性のＤＮＡ磁性粒子とともに前記ＩＶＴマスターミックスを前記ＤＮＡ磁性粒子および前記磁石ユニットの協働の手段によって混合する工程（Ｓ３）
を含む、前記方法。 - 請求項１４に記載の方法における請求項１～１３のうちのいずれか１項に記載のバイオリアクター（１）の使用。
- 請求項１～１３のうちのいずれか１項に記載のバイオリアクター（１）を備える自動化されたＲＮＡ製造装置であって、
ＤＮＡ合成（Ｔ）用モジュール、および
ＲＮＡ配合（Ｆ）用モジュール
のうちの少なくとも１つをさらに備える、前記装置。
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