JPWO2018132556A5

JPWO2018132556A5 -

Info

Publication number: JPWO2018132556A5
Application number: JP2019537830A
Authority: JP
Publication date: 2022-03-29
Anticipated expiration: 2038-01-11

Description

このような形質転換植物から種子が生成され、このような種子が、植物ゲノムに導入された検出可能量のポリヌクレオチド構築物を含有する場合、種子も本発明の特徴であることを意図する。それぞれのこのような形質転換植物から生成される花粉、種子、子孫植物細胞、植物組織及び商品生産物は、検出可能量のポリヌクレオチド構築物を含有する。

更に、加工植物製品は検出可能量の開示組換えポリヌクレオチドを含むように提供される。このような加工製品としては、植物バイオマス、油、粗びき粉、動物飼料、穀粉、フレーク、糠、リント、外皮及び加工種子が挙げられるがこれらに限定されない。

特定の実施形態では、植物製品は、形質転換植物または形質転換植物部位に由来する商品（commodity）またはその他の商品（other products of commerce）を含んでいてもよく、商品またはその他の製品は、ヌクレオチドセグメント、または、ＢＣＷ毒性タンパク質の極めて特徴的な部位をコードするかまたはそれらを含む発現ＲＮＡもしくは発現タンパク質を検出することにより、商業を介して追跡することができる。このような商品またはその他の商品としては、植物部位、バイオマス、油、粗びき粉、砂糖、動物飼料、穀粉、フレーク、糠、リント、加工種子及び種子が挙げられるがこれらに限定されない。

本明細書ではまた加工植物製品を提供し、上記加工製品は、ＢＣＷ毒性タンパク質、そのセグメント、その昆虫阻害性フラグメントまたは極めて特徴的な任意のその部位をコードする検出可能量の組換えポリヌクレオチドを含む。特定の実施形態では、加工製品は、植物バイオマス、油、粗びき粉、動物飼料、穀粉、フレーク、糠、リント、外皮及び加工種子からなる群から選択される。特定の実施形態では、加工製品は再生不可能である。

Claims

（ａ）配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０及び配列番号：１２からなる群から選択される配列のアミノ酸１～６０７を含むアミノ酸配列を有する殺虫性タンパク質またはその殺虫性タンパク質フラグメント、
（ｂ）配列番号：４、配列番号：６、配列番号：１０または配列番号：１２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の同一性を示すポリペプチドフラグメントであって、昆虫阻害活性を有するポリペプチドフラグメント、
（ｃ）配列番号：２または配列番号：８のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の同一性を示すポリペプチドフラグメントであって、昆虫阻害活性を有するポリペプチドフラグメント、または、
（ｄ）配列番号：２、４、６、８、１０または１２のいずれか１つに記載の７位から６０７位までの前記アミノ酸配列を有する殺虫性タンパク質、
をコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド構築物であって、
前記ヌクレオチド配列は異種プロモーター配列に機能的に連結する、
前記ポリヌクレオチド構築物。
（ａ）配列番号：２の２５６位から６０６位までに記載のアミノ酸配列と、
（ｂ）配列番号：４の２５７位から６０７位までに記載のアミノ酸配列と、
（ｃ）配列番号：６の２５７位から６０７位までに記載のアミノ酸配列と、
を含む、
クロヨトウムシ種に対する毒性を有するタンパク質。
前記殺虫性タンパク質は、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａｅｘｉｇｕａ、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａｌｉｔｕｒａ、Ｍａｍｅｓｔｒａｃｏｎｆｉｇｕｒａｔａ、Ｓｔｒｉａｃｏｓｔａａｌｂｉｃｏｓｔａ、Ｔｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａｎｉ、Ｐｓｅｕｄｏｐｌｕｓｉａｉｎｃｌｕｄｅｎｓ、Ａｎｔｉｃａｒｓｉａｇｅｍｍａｔａｌｉｓ、Ｈｙｐｅｎａｓｃａｂｒａ、Ｈｅｌｉｏｔｈｉｓｖｉｒｅｓｃｅｎｓ、Ａｇｒｏｔｉｓｓｕｂｔｅｒｒａｎｅａ、Ｐｓｅｕｄａｌｅｔｉａｕｎｉｐｕｎｃｔａ、Ａｇｒｏｔｉｓｉｐｓｉｌｏｎ、Ａｇｒｏｔｉｓｏｒｔｈｏｇｏｎｉａ、Ｏｓｔｒｉｎｉａｎｕｂｉｌａｌｉｓ、Ａｍｙｅｌｏｉｓｔｒａｎｓｉｔｅｌｌａ、Ｃｒａｍｂｕｓｃａｌｉｇｉｎｏｓｅｌｌｕｓ、Ｈｅｒｐｅｔｏｇｒａｍｍａｌｉｃａｒｓｉｓａｌｉｓ、Ｈｏｍｏｅｏｓｏｍａｅｌｅｃｔｅｌｌｕｍ、Ｅｌａｓｍｏｐａｌｐｕｓｌｉｇｎｏｓｅｌｌｕｓ、Ｃｙｄｉａｐｏｍｏｎｅｌｌａ、Ｅｎｄｏｐｉｚａｖｉｔｅａｎａ、Ｇｒａｐｈｏｌｉｔａｍｏｌｅｓｔａ、Ｓｕｌｅｉｍａｈｅｌｉａｎｔｈａｎａ、Ｐｌｕｔｅｌｌａｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ、Ｐｅｃｔｉｎｏｐｈｏｒａｇｏｓｓｙｐｉｅｌｌａ、Ｌｙｍａｎｔｒｉａｄｉｓｐａｒ、Ａｌａｂａｍａａｒｇｉｌｌａｃｅａ、Ａｒｃｈｉｐｓａｒｇｙｒｏｓｐｉｌａ、Ａｒｃｈｉｐｓｒｏｓａｎａ、Ｃｈｉｌｏｓｕｐｐｒｅｓｓａｌｉｓ、Ｃｎａｐｈａｌｏｃｒｏｃｉｓｍｅｄｉｎａｌｉｓ、Ｃｒａｍｂｕｓｃａｌｉｇｉｎｏｓｅｌｌｕｓ、Ｃｒａｍｂｕｓｔｅｔｅｒｒｅｌｌｕｓ、Ｄｉａｔｒａｅａｇｒａｎｄｉｏｓｅｌｌａ、Ｄｉａｔｒａｅａｓａｃｃｈａｒａｌｉｓ、Ｅａｒｉａｓｉｎｓｕｌａｎａ、Ｅｇｒｉａｓｖｉｔｔｅｌｌａ、Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａａｒｍｉｇｅｒａ、Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａｚｅａ、Ｈｅｌｉｏｔｈｉｓｖｉｒｅｓｃｅｎｓ、Ｈｅｒｐｅｔｏｇｒａｍｍａｌｉｃａｒｓｉｓａｌｉｓ、Ｌｏｂｅｓｉａｂｏｔｒａｎａ、Ｐｅｃｔｉｎｏｐｈｏｒａｇｏｓｓｙｐｉｅｌｌａ、Ｐｈｙｌｌｏｃｎｉｓｔｉｓｃｉｔｒｅｌｌａ、Ｐｉｅｒｉｓｂｒａｓｓｉｃａｅ、Ｐｉｅｒｉｓｒａｐａｅ、Ｐｌｕｔｅｌｌａｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ、及びＴｕｔａａｂｓｏｌｕｔａからなる群から選択されるＬｅｐｉｄｏｐｔｅｒａｎ種に対する阻害活性を示す、請求項１に記載のポリヌクレオチド構築物。
Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａｅｘｉｇｕａ、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａｌｉｔｕｒａ、Ｍａｍｅｓｔｒａｃｏｎｆｉｇｕｒａｔａ、Ｓｔｒｉａｃｏｓｔａａｌｂｉｃｏｓｔａ、Ｔｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａｎｉ、Ｐｓｅｕｄｏｐｌｕｓｉａｉｎｃｌｕｄｅｎｓ、Ａｎｔｉｃａｒｓｉａｇｅｍｍａｔａｌｉｓ、Ｈｙｐｅｎａｓｃａｂｒａ、Ｈｅｌｉｏｔｈｉｓｖｉｒｅｓｃｅｎｓ、Ａｇｒｏｔｉｓｓｕｂｔｅｒｒａｎｅａ、Ｐｓｅｕｄａｌｅｔｉａｕｎｉｐｕｎｃｔａ、Ａｇｒｏｔｉｓｉｐｓｉｌｏｎ、Ａｇｒｏｔｉｓｏｒｔｈｏｇｏｎｉａ、Ｏｓｔｒｉｎｉａｎｕｂｉｌａｌｉｓ、Ａｍｙｅｌｏｉｓｔｒａｎｓｉｔｅｌｌａ、Ｃｒａｍｂｕｓｃａｌｉｇｉｎｏｓｅｌｌｕｓ、Ｈｅｒｐｅｔｏｇｒａｍｍａｌｉｃａｒｓｉｓａｌｉｓ、Ｈｏｍｏｅｏｓｏｍａｅｌｅｃｔｅｌｌｕｍ、Ｅｌａｓｍｏｐａｌｐｕｓｌｉｇｎｏｓｅｌｌｕｓ、Ｃｙｄｉａｐｏｍｏｎｅｌｌａ、Ｅｎｄｏｐｉｚａｖｉｔｅａｎａ、Ｇｒａｐｈｏｌｉｔａｍｏｌｅｓｔａ、Ｓｕｌｅｉｍａｈｅｌｉａｎｔｈａｎａ、Ｐｌｕｔｅｌｌａｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ、Ｐｅｃｔｉｎｏｐｈｏｒａｇｏｓｓｙｐｉｅｌｌａ、Ｌｙｍａｎｔｒｉａｄｉｓｐａｒ、Ａｌａｂａｍａａｒｇｉｌｌａｃｅａ、Ａｒｃｈｉｐｓａｒｇｙｒｏｓｐｉｌａ、Ａｒｃｈｉｐｓｒｏｓａｎａ、Ｃｈｉｌｏｓｕｐｐｒｅｓｓａｌｉｓ、Ｃｎａｐｈａｌｏｃｒｏｃｉｓｍｅｄｉｎａｌｉｓ、Ｃｒａｍｂｕｓｃａｌｉｇｉｎｏｓｅｌｌｕｓ、Ｃｒａｍｂｕｓｔｅｔｅｒｒｅｌｌｕｓ、Ｄｉａｔｒａｅａｇｒａｎｄｉｏｓｅｌｌａ、Ｄｉａｔｒａｅａｓａｃｃｈａｒａｌｉｓ、Ｅａｒｉａｓｉｎｓｕｌａｎａ、Ｅｇｒｉａｓｖｉｔｔｅｌｌａ、Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａａｒｍｉｇｅｒａ、Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａｚｅａ、Ｈｅｌｉｏｔｈｉｓｖｉｒｅｓｃｅｎｓ、Ｈｅｒｐｅｔｏｇｒａｍｍａｌｉｃａｒｓｉｓａｌｉｓ、Ｌｏｂｅｓｉａｂｏｔｒａｎａ、Ｐｅｃｔｉｎｏｐｈｏｒａｇｏｓｓｙｐｉｅｌｌａ、Ｐｈｙｌｌｏｃｎｉｓｔｉｓｃｉｔｒｅｌｌａ、Ｐｉｅｒｉｓｂｒａｓｓｉｃａｅ、Ｐｉｅｒｉｓｒａｐａｅ、Ｐｌｕｔｅｌｌａｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ、及びＴｕｔａａｂｓｏｌｕｔａからなる群から選択されるＬｅｐｉｄｏｐｔｅｒａｎ種に対する阻害性生物活性を更に含む、請求項２に記載のタンパク質。
請求項１に記載のポリヌクレオチド構築物を含むベクター。
請求項１に記載のポリヌクレオチド構築物を含む宿主細胞であって、前記宿主細胞は、細菌細胞、イースト細胞及び植物細胞からなる群から選択される、前記宿主細胞。
前記植物細胞は、アルファルファ、バナナ、大麦、インゲン、ブロッコリー、キャベツ、アブラナ属、人参、キャッサバ、トウゴマ、カリフラワー、セロリ、ヒヨコマメ、ハクサイ、柑橘類、ココナッツ、コーヒー、トウモロコシ、クローバー、綿、ウリ科、キュウリ、ダグラスモミ、ナス、ユーカリ、亜麻、ニンニク、ブドウ、ホップ、リーキ、レタス、テーダマツ、キビ、メロン、ナッツ、オート麦、オリーブ、タマネギ、観賞植物、ヤシ、牧草、エンドウ、ピーナッツ、コショウ、キマメ、マツ、ジャガイモ、ポプラ、カボチャ、ラジアータマツ、ダイコン、菜種、イネ、根茎、ライ麦、ベニバナ、低木、モロコシ、ダイオウマツ、ダイズ、ホウレンソウ、トウナス、イチゴ、サトウダイコン、サトウキビ、ヒマワリ、スイートコーン、モミジバフウ、サツマイモ、スイッチグラス、茶、タバコ、トマト、ライ小麦、芝草、スイカ及び小麦の植物細胞からなる群から選択される、請求項６に記載の宿主細胞。
請求項１に記載のポリヌクレオチド構築物を含む植物。
請求項８に記載の植物から生成された種子であって、前記種子は検出可能量の前記ポリヌクレオチド構築物を含む、前記種子。
前記植物から生成された種子、花粉、子孫、植物細胞、植物組織及び商品生産物は、検出可能量の前記ポリヌクレオチド構築物を含み、前記商品生産物が、バイオマス、油、粗びき粉、動物飼料、穀粉、フレーク、糠、リント及び加工種子からなる群から選択される、請求項８に記載の植物。
検出可能量の請求項１に記載のポリヌクレオチド構築物を含む生物試料。
Ｌｅｐｉｄｏｐｔｅｒａｎ害虫種を防除するための殺虫剤として有効な量の請求項２に記載のタンパク質と、
（ａ）前記タンパク質とは異なり、同一のＬｅｐｉｄｏｐｔｅｒａｎ種に対する毒性を有する薬剤であって、前記薬剤は、前記タンパク質とは異なるアミノ酸配列を有するポリペプチド、ＲＮＡ分子及び化合物からなる群から選択される、前記薬剤、または、
（ｂ）Ｃｒｙ１Ａ、Ｃｒｙ１Ａｂ、Ｃｒｙ１Ａｃ、Ｃｒｙ１Ａ．１０５、Ｃｒｙ１Ａｅ、Ｃｒｙ１Ｂ、Ｃｒｙ１Ｃ、Ｃｒｙ１Ｄ、Ｃｒｙ１Ｅ、Ｃｒｙ１Ｆ、Ｃｒｙ１Ｇ、Ｃｒｙ１Ｈ、Ｃｒｙ１Ｉ、Ｃｒｙ１Ｊ、Ｃｒｙ１Ｋ、Ｃｒｙ１Ｌ、Ｃｒｙ２Ａ、Ｃｒｙ２Ａｂ、Ｃｒｙ２Ａｅ、Ｃｒｙ４Ｂ、Ｃｒｙ６、Ｃｒｙ７、Ｃｒｙ８、Ｃｒｙ９、Ｃｒｙ１５、Ｃｒｙ４３Ａ、Ｃｒｙ４３Ｂ、ＥＴ３５、ＥＴ６６、ＴＩＣ４００、ＴＩＣ８００、ＴＩＣ８０７、ＴＩＣ８３４、ＴＩＣ８５３、ＴＩＣ１４１５、ＶＩＰ３Ａ、ＶＩＰ３Ａｂ、ＡＸＭＩ殺虫性タンパク質、ＤＩＧ殺虫性タンパク質、ｅＨＩＰ、及びＶＩＰタンパク質からなる群から選択される薬剤、
を提供する組成物。
別の殺虫剤を更に含む請求項１２に記載の組成物であって、前記別の殺虫剤は、Ｃｒｙ１Ｃ、Ｃｒｙ３Ａ、Ｃｒｙ３Ｂ、Ｃｒｙ３４、Ｃｒｙ３５、Ｃｒｙ５１Ａａ１、ＥＴ２９、ＥＴ３３、ＥＴ３４、ＥＴ７０、ＴＩＣ４０７、ＴＩＣ４１７、ＴＩＣ４３１、ＴＩＣ９０１、ＴＩＣ１２０１、ＴＩＣ３１３１、５３０７、ＤＩＧ－１０、Ａｘｍｉ１８４、Ａｘｍｉ２０５及びＡｘｍｉＲ１からなる群から選択される、前記組成物。
請求項１に記載のポリヌクレオチド構築物を含む種子を生成するための方法であって、前記方法は、
（ａ）前記ポリヌクレオチド構築物を含む１つまたは複数の種子を植えることと、
（ｂ）前記種子から植物を栽培することと、
（ｃ）前記植物から多数の種子を収穫することであって、前記種子は前記ポリヌクレオチド構築物を含む、前記収穫することと、
を含む、
前記方法。
機能的に連結する、
（ａ）Ｃｒｙ１ＡドメインＩアミノ酸配列を含む第１のペプチドセグメントと、
（ｂ）配列番号：２のアミノ酸２５６～６０６を含む第２のペプチドセグメントと、
を含むＬｅｐｉｄｏｐｔｅｒａｎ毒性タンパク質であって、
前記Ｌｅｐｉｄｏｐｔｅｒａｎ毒性タンパク質は、クロヨトウムシ（Ａ．ｉｐｓｉｌｏｎ）、オオタバコガ（Ｈ．ｚｅａ）、西部インゲンヨトウムシ（Ｓ．ａｌｂｉｃｏｓｔａ）、ヨーロッパアワノメイガ（Ｏ．ｎｕｂｉｌａｌｉｓ）、南西部アワノメイガ（Ｄ．ｇｒａｎｄｉｏｓｅｌｌａ）、イラクサギンウワバ（Ｔ．ｎｉ）、ダイズシャクトリムシ（Ｐ．ｉｎｃｌｕｄｅｎｓ）、ツマジロクサヨトウ（Ｓ．ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）及びサトウキビメイガ（Ｄ．ｓａｃｃｈａｒａｌｉｓ）からなる群から選択されるＬｅｐｉｄｏｐｔｅｒａｎ害虫に対して試験を行う際に、毒性の生物活性を示す、
前記Ｌｅｐｉｄｏｐｔｅｒａｎ毒性タンパク質。