JPWO2018070510A1 - 筋分化誘導剤 - Google Patents
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Abstract
Description
(2)miR-199がmiR-199-3pである、(1)に記載の筋分化誘導剤。
(3)miR-199がmiR-199aである、(1)又は(2)に記載の筋分化誘導剤。
(4)前記miR-199が以下の(a)〜(c)に示す塩基配列からなる、(3)に記載の筋分化誘導剤。
(a)配列番号1で示す塩基配列
(b)配列番号1で示す塩基配列において1〜3個の塩基が欠失、置換又は付加された塩基配列
(c)配列番号1で示す塩基配列に対して85%以上の塩基同一性を有する塩基配列
(5)前記miR-199遺伝子が発現ベクターに発現可能な状態で包含されている、(1)〜(4)のいずれかに記載の筋分化誘導剤。
(6)(1)〜(5)のいずれかに記載の筋分化誘導剤を有効成分として含む筋萎縮又は筋損傷を伴う障害又は疾患の治療又は予防用組成物。
(7)前記筋委縮又は筋損傷を伴う疾患が筋原性疾患である、(6)に記載の治療又は予防用組成物。
(8)前記筋原性疾患が筋ジストロフィーである、(7)に記載の治療又は予防用組成物。
(9)(1)〜(5)のいずれかに記載の筋分化誘導剤を有効成分として含む筋再生促進用組成物。
1−1.概要
本発明の第1の態様は、筋分化誘導剤である。本発明の筋分化誘導剤は、生体内で発現しているmiRNAの1つであるmiR-199又はそれをコードするmiR-199遺伝子を包含するDNAからなる核酸分子で構成される。本発明の筋分化誘導剤は、筋分化誘導用組成物として、後述する第2又は第3態様に記載の筋再生促進用組成物又は筋萎縮を伴う障害又は疾患の治療又は予防用組成物の有効成分となる。
本明細書において頻用する下記用語について定義する。
本態様の筋分化誘導剤は、miR-199又はそれをコードするmiR-199遺伝子を包含するDNAからなる核酸分子で構成されている。
2−1.概要
本発明の第2の態様は、筋萎縮又は筋損傷を伴う障害又は疾患の治療又は予防用組成物(以下、本明細書では単に「治療予防用組成物」と表記する)に関する。前記第1態様に記載の核酸分子で構成される筋分化誘導剤は、それを包含する組成物として利用することができる。本発明の治療予防用組成物は、第1態様に記載の筋分化誘導剤を有効成分として含み、筋委縮又は筋損傷を伴う障害や疾患を有する、又は将来的に有する可能性のある、被験体に投与することで、それらの障害や疾患を治療又は予防するための組成物である。
本発明の治療予防用組成物は、構成成分として有効成分及び担体を含む。以下それぞれの構成成分について説明をする。
本態様の治療予防用組成物は、前記第1態様に記載の筋分化誘導剤を有効成分として含む。本発明の治療予防用組成物は、第1態様に記載の筋分化誘導剤を一又は二以上含むことができる。例えば、ヒト野生型miR-199a-3pとヒト変異型miR-199a-3pの2種類の筋分化誘導剤を有効成分として含んでいてもよい。また、筋分化を誘導することが知られている公知の他の筋分化誘導剤、例えばmiR-1、miR-133a、miR-26a、及びmiR-214等と組み合わせることができる。
本発明の治療予防用組成物は、薬学的に許容可能な担体を含む。「薬学的に許容可能な担体」とは、製剤技術分野において通常使用する添加剤をいう。例えば、溶媒、賦形剤が挙げられる。
本発明の治療予防用組成物の剤形は、治療予防用組成物の剤形は、投与法及び/又は処方条件によって異なるが、有効成分である第1態様に記載の筋分化誘導剤又は他の付加的な有効成分を分解等によって不活化させることなく、投与後に生体内でその薬理効果を発揮し得る形態であれば特に限定しない。
本態様の治療予防用組成物の治療又は予防の対象となる障害又は疾患は、筋萎縮又は筋損傷と筋力低下を伴う障害又は疾患である。本明細書において「治療」とは、障害又は罹患した疾患及び/又はそれに伴う症状の緩和又は治癒をいう。また本明細書において「予防」とは、障害の発生又は疾患の罹患を未然に防ぐことをいう。
3−1.概要
本発明の第3の態様は、筋再生促進用組成物に関する。前記第1態様に記載の筋分化誘導剤は、前記第2態様の治療予防用組成物の他にも、その用途に応じて様々な組成物として利用することができる。本発明の筋再生促進用組成物は、第1態様に記載の筋分化誘導剤を有効成分として含み、第2態様の筋萎縮を伴う障害又は疾患の治療又は予防用とは異なる用途として、筋断裂等の物理的な要因によって損傷した骨格筋の再生を促進するための組成物として利用する。
本発明の筋再生促進用組成物の基本構成は、第2態様に記載の治療予防用組成物に準ずる。すなわち、第2態様に記載の治療予防用組成物が、筋萎縮を伴う障害又は疾患を有する被験体を適用対象とするのに対して、本発明の筋再生促進用組成物は、創傷により骨格筋を損傷した被験体や老化や衰弱等により骨格筋が減少した被験体が適用対象となる。つまり、第3態様の治療予防用組成物とは、その用途のみが異なる。したがって、第3態様に準ずる構成、及び剤形及び投与法に関しては、具体的な説明を省略する。
本発明の骨格筋再生促進剤は、過度の運動による物理的負荷や創傷により骨格筋の一部が損傷した場合、又は老化により筋細胞の減少や筋委縮が増加した場合に、筋芽細胞から筋細胞への筋分化を促進することで、損傷箇所の骨格筋を補填又は充填し、筋肉量を元の水準に回復させることができる。したがって、適用対象は、事故や手術等により骨格筋の一部を損傷した被験体、老化による骨格筋が減少した被験体が適用対象となる。
以下に記載する各実施例で使用した実験材料及び実験方法を説明する。
1.培養細胞株と細胞培養
培養細胞株には、マウス筋芽細胞株C2C12細胞、マウス初代筋芽細胞、及びヒト筋衛星細胞を用いた。
実施例で使用したmiRNA又はsiRNAは、市販のMISSION miRNA mimic(Sigma社)、又は配列設計した塩基配列情報に基づいてSigma社にて化学合成した合成miRNA又は合成siRNAを用いた。
・miR-199a-3p#4 s :5'-acaguagucugcacauugguua-3':(配列番号8)
・miR-199a-3p#4 as:5'-accaaugugcagacuacucauu-3':(配列番号9)
・siControl s: 5'-uucuccgaacgugucacguuu-3': (配列番号10)
・siControl as: 5'-acgugacacguucggagaauu-3': (配列番号11)
・siSuz12P s: 5'-acucguccaggaagaagagaauuu-3':(配列番号12)
・siSuz12P as :5'-uaaauucucuucuuccuggacgagu-3':(配列番号13)
・siSuz12M s: 5'-gagaauuuaauggaaugauuuu-3':(配列番号14)
・siSuz12M as : 5'-aaucauuccauuaaauucucuu-3':(配列番号15)
・siLin28b#1 s: 5'-ggauucaucuccaugauaauu-3': (配列番号16)
・siLin28b#1 as :5'-uuaucauggagaugaauccuu-3': (配列番号17)
・siLin28b#2 s: 5'-aggauuuagaagcuugaaauu-3': (配列番号18)
・siLin28b#2 as :5'-uuucaagcuucuaaauccuuu-3': (配列番号19)
・siLin28b#3 s: 5'-guggaauuuacauuuaaaauu-3': (配列番号20)
・siLin28b#3 as :5'-uuuuaaauguaaauuccacuu-3': (配列番号21)
・siLin28b#4 s: 5'-gagccaguggaauuuacauuu-3': (配列番号22)
・siLin28b#4 as :5'-auguaaauuccacuggcucuu-3': (配列番号23)
前記「1.培養細胞株と細胞培養」で培養した各細胞へのmiRNA又はsiRNAの導入には、エレクトロポレーション法を用いた。
実験用動物には8〜9週齢オスのC57BL/6J(日本チャールズリバー社)、又は生後2年以上成育させた自然老化ICRマウス(日本クレア社)を用いた。
筋損傷付与後10日目のマウスから前脛骨筋を摘出し、液体窒素で冷却したイソペンタン(Wako社)中で、急速冷凍した。クライオスタットCM1900(Leica社)を用いて、厚さ10μmの前脛骨筋の横断凍結切片を作製し、HE染色を行った。染色した筋組織は、Axiovert 40 CFL(Carl Zeiss社)及びAxiovision Rel 4.6 software(Carl Zeiss社)を用いて観察した。ImageJ softwareを用いて、損傷から再生した筋肉の指標である中心核を有する筋線維の横断面積を測定した。マウス一個体あたり、少なくとも700本(老齢マウスは少なくとも100本)の筋線維の横断面積を測定した。siControlとmiR-199a-3p mimic投与群との間の統計学的な有意差の有無は、student's t-testによって検定した。
細胞由来、及び筋損傷3日目の前脛骨筋由来の総RNAは、TRI Reagent(MRC社)を用いて抽出した。cDNAは、cDNA合成用プライマーとしてOligo dT15 primer(Promega社)及び逆転写酵素としてSuperScript III(Thermo Fisher Scientific社)を用いて、添付のプロトコルに従い、総RNA中のmRNAから合成した。合成したcDNA、Fast SYBR Green Master Mix(Roche社)そして各遺伝子に対するPerfect Real Time primers(TAKARA社)を用いて、StepOne Plus Real-Time PCR system(Thermo Fisher Scientific社)によるqPCR(定量PCR)解析を行った。得られたデータは、培養細胞の場合はGapdh遺伝子を、筋組織サンプルの場合はActb遺伝子を、それぞれ内在性標準遺伝子としたComparative CT法(ΔΔCT法)解析によって相対的な発現量を測定した。
各細胞由来の細胞抽出液は、protease inhibitor(Complete Mini; Roche社)含有RIPA Lysis and Extraction buffer(Thermo Fisher Scientific社)を用いて調製した。得られた細胞抽出液中のタンパク質は、SDS-ポリアクリルアミドゲルを用いた電気泳動法(SDS-PAGE)により分子量に応じて分離した後、ゲル中のタンパク質を電気泳動的にPVDFメンブレン(ミリポア社)に転写した。続いて、5% スキムミルク(Wako社)及び0.1% Tween20(ナカライテスク社)含有TBS(20mM Tris, 500mM NaCl, pH7.5)を用いて転写後のメンブレンをブロッキングした。ブロッキング後のメンブレンは、5% BSA(sigma社)(あるいは1% スキムミルク)及び0.1%Tween20含有TBSで希釈した一次抗体液に浸し、4℃にて一晩振盪させた。一次抗体には、Anti-Suz12(#3737、1000倍希釈、CST社)、Anti-Lin28b(#5422、1000倍希釈、CST社)、Anti-Myosin heavy chain(MF20)(#MAB4470、200倍希釈、R&D systems社)、及びAnti-α-Tubulin(#F2168、5000倍希釈、Sigma社)を使用した。メンブレンを洗浄後、1%スキムミルク及び0.1% Tween20含有TBSで5000倍に希釈したHRP標識ヤギ抗マウスIgG(又はHRP標識ヤギ抗ウサギIgG)(Sigma社)を用いて、室温にて30分間二次抗体反応を行った。再度メンブレンを洗浄後、ECL Prime Western Blotting Detection Reagent(GE healthcare社)を用いて発光反応を行い、LAS500(GE healthcare社)を用いて露光及びバンドの検出を行った。
(目的)
本発明の筋分化誘導剤を構成するmiR-199a-3pの筋芽細胞に対する筋分化誘導活性を検証した。
マウス筋芽細胞株C2C12細胞にmiR-199a-3p、miR-1、miR-133a、miR-26a、miR-214、miR-125a、miR-133b及びLet-7eの各miRNAをエレクトロポレーションにより導入後、筋分化用培地(2%HS/DMEM)に播種して30℃にて3日間培養した細胞の総RNAを用いて、筋分化マーカータンパク質Myogenin(Myog)及びMyh1の発現量をRT-qPCRで検証した。
(目的)
本発明の筋分化誘導剤を構成するmiR-199a-3p導入後のC2C12細胞における筋分化関連miRNAの発現量を検証した。
miR-199a-3p導入後のC2C12細胞におけるmiR-1、miR-133a、miR-26a、let-7g及びmiR-214の発現量をU6 snRNAを内部標準遺伝子に用いてΔΔCt法解析により測定した。導入したmiR-199a-3pには、MISSION miRNA mimicのmiR-199a-3p(HMI0338)(「199s」と略称する)及びmiR-199a-3p#4(「199#4」と略称する)を用いた。
(目的)
miR-199a-3pの塩基配列からmiR-199a-3pの標的候補遺伝子は、Lin28b遺伝子、及びSuz12遺伝子と推定された。図3−1で示すように、マウスmiR-199a-3pは、Lin28b遺伝子上に2カ所(A:81位〜102位、及びB:983位〜1004位)、またSuz12遺伝子上に1カ所(C:973位〜994位)の候補標的部位を有する。そこで、C2C12細胞にmiR-199a-3pを導入したときに、細胞内で標的候補遺伝子であるLin28b遺伝子及びSuz12遺伝子の発現が抑制されるか否かについて検証した。
C2C12細胞にmiR-199a-3pを導入して培養した後、常法に従い細胞抽出液を調製した。その細胞抽出液に対してウェスタンブロットを行い、Lin28bタンパク質及びSuz12タンパク質のそれぞれに対する抗体を用いてそれらの発現量を検出した。
(目的)
miR-199a-3pの標的遺伝子であるLin28b及びSuz12の発現抑制による筋分化関連遺伝子の発現量について検証した。
Lin28b及びSuz12の発現抑制には、それぞれに対するsiRNAを用いた。また筋分化関連遺伝子は、Myog、Myh1、及びCkmとした。C2C12細胞に各siRNA導入後、筋分化用培地に播種し、30℃で3日間培養後、細胞から抽出した総RNAを用いて、RT-qPCRを実施した。
(目的)
マウス長趾伸筋由来の初代培養細胞にmiR-199a-3pを導入した場合にもマウス筋芽細胞株C2C12細胞と同様の効果が得られるか検証した。
2匹のマウスから初代培養細胞を調製して、それをng用、199s用、及び199#4用に3等分して1回のculture群とし、それを独立に4回(c5〜c8)おこなった。miR-199a-3pとして199s又は199#4を導入後、2日間増殖培地で培養した後に分化誘導を行った。分化誘導の1日後に細胞からRNAを回収し、RT-qPCRによりmiR-1の発現量、並びに筋分化マーカーのCkm、Myog、Mef2c及びMyh4の発現量を測定した。
(目的)
筋損傷を付与したマウスに本発明の筋分化誘導剤を構成するmiR-199a-3pを導入したときの筋分化誘導について検証した。
8週齢のC57/BL6Jマウスの前脛骨筋(TA muscle)にBaCl2投与によって筋損傷を与えた。24時間後、miR-199a-3pを同部位に投与した。その48時間後、TA muscleを摘出し、その総RNAを用いたRT-qPCR解析により、筋分化マーカーMyog、Myod1、及びMyf5の発現を調べた。
(目的)
miR-199a-3pが老齢マウスに対しても筋再生促進活性を有することを検証した。
8週齢のC57/BL6Jマウス及び2年齢のICRマウスの前脛骨筋(TA muscle)にBaCl2投与によって筋損傷を与えた。24時間後、miR-199a-3pを同部位に投与した。その9日後、TA muscleの凍結切片を作製しHE染色により、再生過程にある筋線維の横断面積を測定した。再生過程にある筋線維は中心に核を持っており、カウントの際はそれを目印とした。1個体当り測定した筋線維数は、8週齢で700繊維<、2年齢マウスで100繊維<である。
(目的)
ヒト筋衛星細胞(Human Skeletal Muscle Satellite Cells)にmiR-199a-3pを導入した場合にもマウス筋芽細胞株と同様の効果が得られることを検証した。
miR-199a-3pを導入して3日間増殖培地で培養後、細胞からRNAを回収し、RT-qPCRにより筋分化マーカーMEF2C及びMYH4の発現を調べた。
(目的)
miR-199a-3pを投与した筋ジストロフィーモデルマウス(mdxマウス)における筋力の改善をグリップテストで検証する。
7週齢の雄mdxマウス、及び同腹雄正常マウス(B10)の尾静脈にmiR-199a-3pとして199#4を、また対照用としてsiControlを、それぞれ1匹当たり1.6μg/Kg B.W.の投与量でAteloGene(登録商標) Systemic Use(高研社)キットを用いて投与した。
(目的)
筋ジストロフィー患者そしてmdxマウスでは、健常者や正常マウスと比較して、筋特異的な3種のmiRNA(miR-1、miR-133a、miR-206)の量が血清中で統計学的有意に増加していることが知られている(Matsuzaka Y, et al., PLoS One. 2016 Dec 15;11(12):e0167811.)。そこで、miR-199a-3p投与によって筋力が回復したmdxマウスの血中で、それらのmiRNAの改善について検証する。
実施例9でmiR-199a-3pを投与した各マウスから、筋力測定後に抗凝固剤EDTAを用いて心採血を行い、さらに採取した全血から常法により血漿を得た。続いて、Plasma/serum circulating and exosoal RNA purification mini kit(NORGEN社)を用いて、添付のプロトコルに従い、各マウスの血漿200μLからRNAを抽出した。なお、RNA抽出時に外部標準遺伝子としてcel-miR-39を添加した。
(目的)
筋ジストロフィー患者では、骨格筋の筋線維が変性又は壊死することにより、筋細胞中に含まれるクレアチンキナーゼが血液中に漏出する。それ故に、筋ジストロフィー患者は、健常者と比較して、血中クレアチンキナーゼ活性(CK活性)の値が統計学的に有意に高いことが知られている(Allen D.G., et al., 2016, Physiol Rev. Jan;96(1):253-305)。そこで、mdxマウスにmiR-199a-3pを投与した場合の、血中のCK活性について検証する。
血漿CK活性は、実施例10で採取した血漿を用いて、Creatine Kinase Activity Assay Kit (Colorimetric) (Abcam社)により、添付のプロトコルに従って測定した。使用測定装置には、SYNERGY H1 microplate reader (BioTek社)を、解析ソフトにはGen5 2.07を用い、データを解析後、Welch’s t-testにより統計検定を行った。
Claims (9)
- miR-199又はそれをコードするmiR-199遺伝子を包含するDNAからなる筋分化誘導剤。
- 前記miR-199がmiR-199-3pである、請求項1に記載の筋分化誘導剤。
- 前記miR-199がmiR-199aである、請求項1又は2に記載の筋分化誘導剤。
- 前記miR-199が以下の(a)〜(c)に示す塩基配列からなる、請求項3に記載の筋分化誘導剤。
(a)配列番号1で示す塩基配列
(b)配列番号1で示す塩基配列において1〜3個の塩基が欠失、置換又は付加された塩基配列
(c)配列番号1で示す塩基配列に対して85%以上の塩基同一性を有する塩基配列 - 前記miR-199遺伝子が発現ベクターに発現可能な状態で包含されている、請求項1〜4のいずれか一項に記載の筋分化誘導剤。
- 請求項1〜5のいずれか一項に記載の筋分化誘導剤を有効成分として含む筋萎縮又は筋損傷を伴う障害又は疾患の治療又は予防用組成物。
- 前記筋委縮又は筋損傷を伴う疾患が筋原性疾患である、請求項6に記載の治療又は予防用組成物。
- 前記筋原性疾患が筋ジストロフィーである、請求項7に記載の治療又は予防用組成物。
- 請求項1〜5のいずれか一項に記載の筋分化誘導剤を有効成分として含む筋再生促進用組成物。
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CN111218451B (zh) * | 2020-02-05 | 2021-08-10 | 华中农业大学 | 一种提高猪肌肉量的方法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
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CN101954094A (zh) * | 2010-10-11 | 2011-01-26 | 天津医科大学 | miR-199a-3p在制备抗乙型肝炎病毒药物中的应用 |
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Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
CHEN X.ET AL.: "MiRNAs regulates skeletal muscle development via down-regulation of myosin heavy chain", FASEB J., vol. 27, JPN6017046614, 2013, pages 939 - 12, XP009515264, ISSN: 0004597894, DOI: 10.1096/fasebj.27.1_supplement.939.12 * |
JIA L.ET AL.: "MiRNA-199a-3p regulates C2C12 myoblast differentiation through IGF-1/AKT/mTOR signal pathway", INT.J.MOL.SCI., vol. 15, JPN6017046612, 2013, pages 296 - 308, XP055476192, ISSN: 0004597893, DOI: 10.3390/ijms15010296 * |
ZHOU B.ET AL.: "MicroRNA expression profiles of porcine skeletal muscle", ANIMAL GENETICS, vol. 41, JPN6017046611, 2010, pages 499 - 508, XP055476188, ISSN: 0004597892, DOI: 10.1111/j.1365-2052.2010.02026.x * |
福岡聖之他: "若齢および老齢マウスの血中miRNAの解析:若齢マウス高発現miRNAの筋分化への関与", 第38回日本分子生物学会年会、第88回日本生化学会大会 合同大会 要旨集, JPN7017004021, 2015, pages 1 - 1174, ISSN: 0004597895 * |
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