JPWO2018016474A1 - 小児急性リンパ性白血病の血液学的病期の判定補助方法 - Google Patents
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Abstract
Description
(I−1)下記の(1)〜(3)のステップを有する小児急性リンパ性白血病(小児ALL)の血液学的病期の判定を補助する方法:
(1)被験者の生体試料中のウイルムス腫瘍−1遺伝子(WT1)のmRNA量を入手するステップ
(2)前記同生体試料中のグリセルアルデヒド−3−リン酸脱水素酵素(GAPDH)の mRNA量を入手するステップ、及び
(3)前記(1)及び(2)のステップでそれぞれ入手されたWT1 mRNA量とGAPDH mRNA量との比に基づいて上記の判定補助に必要な指標値を算出するステップ。
(4)前記(3)のステップで得られた指標値を予め設定されたカットオフ値(参考基準値)と対比し、その大小に基づいて、被験者の血液学的病期を示すステップ。
前記カットオフ値が、非寛解期にある小児ALL患者(非寛解期群)と寛解期にある小児ALL患者(寛解期群)の両群をそれぞれ対象として統計学的解析により求めた値である、(I−10)〜(I−13)のいずれかに記載する方法。
(b)配列番号5に示す塩基配列からなるフォワードPCRプライマーと配列番号6に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、を用いる、(I−2)乃至(I−19)のいずれかに記載する方法。
(a’)配列番号2に示す塩基配列からなるフォワードPCRプライマーと配列番号3に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、および標識された配列番号4に示す塩基配列からなるプローブ、または
(b’)配列番号5に示す塩基配列からなるフォワードPCRプライマーと配列番号6に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、および標識された配列番号7に示す塩基配列からなるプローブ
を用いる、(I−2)乃至(I−19)のいずれかに記載する方法。
(c)配列番号9に示す塩基配列からなるフォワードPCRプライマーと配列番号10若しくは12に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセットを用いる、(I−3)乃至(I−21)のいずれかに記載する方法。
(c’)配列番号9に示す塩基配列からなるフォワードPCRプライマーと配列番号10若しくは12に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、及び標識された配列番号11に示す塩基配列からなるプローブを用いる、(I−3)乃至(I−21)のいずれかに記載する方法。
(b’)配列番号5に示す塩基配列からなるフォワードPCRプライマーと配列番号6に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、および標識された配列番号7に示す塩基配列からなるプローブを用い、
前記(2)のステップの1ステップRT-PCR法において、GAPDH mRNA量の測定に
(c’)配列番号9に示す塩基配列からなるフォワードPCRプライマーと配列番号10若しくは12に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、及び標識された配列番号11に示す塩基配列からなるプローブを用いる、(I−3)乃至(I−23)のいずれかに記載する方法。
(I−28)生体試料が末梢血、好ましくは末梢血白血球であるか、または骨髄液、好ましくは骨髄液有核細胞である(I−1)乃至(I−27)のいずれかに記載する方法。
(II−1)(a)配列番号2に示す塩基配列からなるフォーワードPCRプライマーと配列番号3に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、または
(b)配列番号5に示す塩基配列からなるフォーワードPCRプライマーと配列番号6に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット
を含むALLの被験者のWT1 mRNA量を測定するためのリアルタイムPCR用キット。
(b’)配列番号5に示す塩基配列からなるフォーワードPCRプライマーと配列番号6に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、および標識された配列番号7に示す塩基配列からなるプローブ
を含むALLの被験者のWT1 mRNA量を測定するためのリアルタイムPCR用キット。
を含む、(II−1)または(II−2)に記載するALLの被験者のWT1 mRNA量を測定するためのリアルタイムPCR用キット。
(i)当該キットがALLの血液学的病期の判定の補助に使用できること
(ii)ALLの血液学的病期判定補助のためのカットオフ値(参考基準値)。
(II−7)上記カットオフ値が、50 copies/μgRNAより大きい値である、(II−6)に記載する商業パッケージ。
(III−1)(I−1)乃至(I−28)のいずれかに記載の小児ALLの血液学的病期の判定を補助する方法を用いて、小児ALLの血液学的病期を経時的に追跡する方法(モニタリング方法)。
(IV−1)下記(I)及び(II)のステップをコンピュータによって実行させるコンピュータプログラム:
(I)被験者の生体試料中のWT1 mRNA 量、及び前記同生体試料中のGAPDH mRNA 量の入力を受けるステップ、及び
(II)前記(I)のステップで入力を受けたWT1 mRNA 量とGAPDH mRNA 量との比に基づいて、小児ALLの血液学的病期の判定を補助するために必要な指標値を算出するステップ。
(III)前記(II)のステップで得られた指標値に基づいて、被験者について、小児ALLの血液学的病期を決定するステップ。
(V−1)小児ALLの血液学的病期の判定に用いられるコンピュータシステムであって、
当該コンピュータシステムはプロセッサと、メモリとを含むコンピュータを備え、
前記メモリには、
(I)被験者の生体試料中のWT1 mRNA 量、及び前記同生体試料中のGAPDH mRNA 量の入力を受けるステップと
(II)前記(I)のステップで入力を受けたWT1 mRNA 量とGAPDH mRNA 量との比に基づいて、小児ALLの血液学的病期の判定を補助するために必要な指標値を算出するステップとを、前記コンピュータに実行させるコンピュータプログラムが記録されている。
(III)前記(II)のステップで得られた指標値に基づいて、被験者について、小児ALLの血液学的病期を決定するステップを、コンピュータに実行させるコンピュータプログラムである、(V−1)に記載するコンピュータシステム。
小児ALLは、白血球の中のB細胞やT細胞などからなるリンパ球が幼若な段階で悪性化し、主に骨髄で異常に増加し、急速に進行する疾患であり、一般に「血液のがん」といわれる白血病の1つである。小児ALLの症状(貧血症状、倦怠感、めまい、ふらつき、動悸、息切れ、むくみ(浮腫等)、感染に伴う発熱、鼻血、歯肉出血や皮下出血、リンパ節腫脹、肝脾腫等)は、主に白血病細胞(がん細胞)が骨髄および末梢血中で異常に増殖し、正常な血液細胞(白血球、赤血球、血小板)が圧迫されて減少することにより引き起こされる。上記のような症状を認めた場合、小児ALLの罹患が疑われるものの、その確定診断には骨髄穿刺が不可欠とされており、骨髄穿刺によって得られた骨髄液標本によってエステラーゼ染色陰性およびペルオキシダーゼ染色陰性(陰性の基準は3%未満とする)のリンパ芽球が全有核細胞の25%以上で認められる場合に小児ALLに罹患していると判断される。なお、小児ALLは、長期生存率が30〜40%に満たない成人ALLとは異なり、概ね80%以上が治療によって治癒するといわれている。これは、成人発症例と比べて、フィラデルフィア染色体の変異やT細胞性の急性リンパ性白血病の頻度が少ないためであると考えられている。この意味で小児ALLは、治療方法も含めて、成人ALLとは異なる疾患として位置づけられている。
(1)G-CSF投与なしで好中球が500/μL以上、
(2)血小板が8万/μL以上、
(3)輸血非依存性、
(4)末梢血に白血病細胞を認めない、
(5)白血病による臨床症状及び臨床所見が消失、並びに
(6)骨髄血において芽球が5%未満で明らかな白血病細胞の形態が認められない状態。
本発明は、小児ALLの血液学的病期の判定を補助する方法に関する。
(1)被験者の生体試料中のWT-1のmRNA量を入手するステップ(WT1 mRNA量入手ステップ)
(2)前記同生体試料中のGAPDH mRNA量を入手するステップ(GAPDH mRNA量入手ステップ)、及び
(3)前記(1)及び(2)のステップでそれぞれ入手したWT1 mRNA量とGAPDH mRNA量との比に基づいて判定補助に必要な指標値を算出するステップ(指標値算出ステップ)。
当該ステップは被験者の生体試料中に発現しているWT1 mRNA量を入手する工程である。
当該WT1 mRNA量の入手手段や入手方法は、このステップを実施した結果、WT1 mRNA量(情報)が得られた状態になればよく、その限りにおいて特に制限されるものではない。具体的には、自ら、被験者の生体試料を材料としてWT1 mRNA量を測定することで入手してもよいし、また第三者が測定したWT1 mRNA量について、直接または間接的にその提供を受けることで入手してもよい。
当該ステップは、上記(1)のステップで対象とした被験者の生体試料を対象として、同生体試料中に発現しているGAPDH(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)のmRNA量を入手する工程である。
以下は、1ステップRT-PCR法を用いる場合について説明をする。
当該ステップは、前記(1)及び(2)のステップでそれぞれ入手したWT1 mRNA量とGAPDH mRNA量との比に基づいて判定補助に必要な指標値を算出するステップである。
本発明の方法は、さらに下記のステップを含むことができる。
(4)前記(3)のステップで得られた指標値を予め設定されたカットオフ値と対比し、その大小に基づいて、被験者の小児ALLの血液学的病期を示すステップ。
「指標値の検出下限値」とは、指標値が検出できる最小量(値)を意味する。具体的にはRT-PCR法を用いて測定した場合における検出最小量を意味する。より好ましくは本発明のリアルタイムPCR用キットを用いて測定した場合においてキットの性能上、測定できる検出下限の値である。
本発明のALL被験者のWT1 mRNA量を測定するためのリアルタイムPCR用キットは、ヒトWT1 mRNAをRT-PCR法に供するためのプライマーセットと、ハウスキーピング遺伝子としてのGAPDH mRNAをRT-PCR法に供するためのプライマーセットの両方を包含することを特徴とする。また当該キットには、RT-PCR法で増幅されたヒトWT1 mRNAの増幅産物、及びハウスキーピング遺伝子(GAPDH mRNA)の増幅産物を検出するために使用されるプローブを含めることができる。
本発明には、小児ALLの血液学的病期の判定をコンピュータに実施させるためのコンピュータプログラム製品も含まれる。コンピュータプログラム製品には、インターネット等を介してダウンロード可能なコンピュータプログラムや、当該プログラムを記録した媒体(ディスク、CD、DVDなど)が例示される。
(I)被験者の生体試料中のWT1 mRNA 量、及び前記同生体試料中のGAPDH mRNA 量の入力を受けるステップ、及び
(II)前記(I)のステップで入力を受けたWT1 mRNA 量とGAPDH mRNA 量との比に基づいて、小児ALLの血液学的病期の判定を補助するために必要な指標値を算出するステップ。なお、上記(I)のステップはWT1 mRNA 量とGAPDH mRNA 量の入力を同時に受けるものであっても、別々に受けるものであってもよい。
(III)前記(II)のステップで得られた指標値に基づいて、被験者について、小児ALLの血液学的病期を決定するステップ。
以下に、当該コンピュータプログラムを実行させるために好適な装置(コンピュータ装置)の一形態を図面を参照して説明する。但し、本発明は当該実施形態に限定されるものではない。図1は被験者の血液学的病期の判定補助に用いる装置(以下、単に「判定補助装置」とも称する)の一例を示した概略図である。図1に示される判定補助装置1は、測定装置2と、当該測定装置2と接続されたコンピュータシステム3を含んでいる。この実施形態において、測定装置2は、被験者の生体試料におけるWT1 mRNA量及び/またはGAPDH mRNA量を測定する装置である。この測定装置2は、被験者の生体試料におけるWT1 mRNA量及び/またはGAPDH mRNA量そのもの、またはRT-PCR法等により増幅された各遺伝子増幅物に起因するの蛍光若しくは発光強度等のWT1 mRNA量及び/またはGAPDH RNA量に関係する情報を取得する。具体的には、被験者から採取された生体試料を測定装置2にセットすると、測定装置2は、当該生体試料におけるWT1 mRNA量及び/またはGAPDH RNA量に関連する情報を取得し、得られた情報をコンピュータシステム3に送信する。但し、本発明の判定補助装置において、上記の測定装置2は任意であり、本発明の判定補助装置はコンピュータシステム3からなるものであってもよい。
図4に記載するフローチャートを用いて、判定補助装置1による、被験者の小児ALLの血液学的病期判定の手順を説明する。ここでは、被験者由来の生体試料を用いて得られたWT1 mRNA量とGAPDH mRNA量から指標値(WT1 mRNA発現量)を算出し、得られた指標値が基準値(カットオフ値)以上であるか否かの判断を行う場合を例として挙げて説明する。しかし、本発明は、この実施形態のみに限定されるものではない。
本発明には、被験者の小児ALLの血液学的病期判定の実施に適したコンピュータシステムも含まれる。当該システムは、プロセッサと、メモリ(記憶部302)とを含むコンピュータを備え、前記メモリには、以下のステップをコンピュータシステムで実行させるためのコンピュータプログラムが記録されている。
(I)被験者の生体試料中のWT1 mRNA 量、及び前記同生体試料中のGAPDH mRNA 量の入力を受けるステップと
(II)前記(I)のステップで入力を受けたWT1 mRNA 量とGAPDH mRNA 量との比に基づいて、小児ALLの血液学的病期の判定を補助するために必要な指標値を算出するステップ。なお、上記(I)のステップはWT1 mRNA 量とGAPDH mRNA 量の入力を同時に受けるものであっても、別々に受けるものであってもよい。
(III)前記(II)のステップで得られた指標値に基づいて、被験者について、小児ALLの血液学的病期を決定するステップ。
ウイルムス腫瘍−1遺伝子(WT1)mRNAキットである「WT1 mRNA測定キットII『オーツカ』」(大塚製薬株式会社製)を用いて、小児ALL患者及びALLの疑いのある小児を対象として、末梢白血球及び骨髄液有核細胞より抽出したRNA中のWT1 mRNA量を測定した。当該キットは、RT-PCR用ミックス液、金属イオン溶液(酢酸マンガンなど)、WT1及びGAPDH混合溶液RNA標準液(WT1 RNA、GAPDH RNAなど)、及び標準液希釈液(緩衝剤等)等から構成されている。またRT-PCR用ミックス液には、表5に示すWT1フォワードプライマー、WT1リバースプライマー、WT1プローブ、GAPDHフォワードプライマー、GAPDH リバースプライマー、及びGAPDHプローブが含まれている。WT1プローブは5’末端がHEX(6-ヘキサクロロフルオレセイン)で標識されており、GAPDHプローブは5’末端がFAM(6-カルボキシフルオレセイン)で標識されている。またそれぞれのプローブの3’末端は消光色素であるATTO-540Q(ATTO-TEC GmbH社)で標識されている。
2014年12月から2015年12月末までに全国14の医療機関で実施された初発未治療の小児ALL患者及び小児ALLが疑われる小児患者のうち、本試験に対して同意が取得できた計49例を対象とした。但し、対象症例のうち、1例は、寛解導入療法終了前に他院に転院したため、寛解導入療法終了後及び早期強化療法終了後の2タイムポイントにおける検体が採取できなかった。なお、ALLが疑われる患者(疑ALL患者)で、後日、ALL以外の疾患とされた
ときは、治療開始前の1ポイントで試験を終了した。
治療開始から4〜6ヶ月間を観察期間として、下記のタイムポイントで骨髄液1mL及び末梢血7mLを採取し、これらの被験試料中のWT1 mRNAを測定した(図5参照)
(a)治療開始前(TP 0)
(b)寛解導入療法終了後(TP 1)
(c)早期強化療法終了後(TP 2)
(d)早期強化療法終了以降の骨髄検査時(診療目的で骨髄検査をする場合に限る)
解析対象症例49例のうち、解析対象とした検体の内訳を下記表7に示す。
(3−1)経過観察時のWT1 mRNA 発現量(指標値)の推移
対象とする49例のうち、試験途中で転院した1例を除く48例について、治療開始後4〜6ヶ月間に亘り1ヶ月毎に経過観察を行った。その結果、48例の全ての症例において、治療開始前(TP0)以外の経過観察ポイントは、すべて血液学的病期は寛解期であった。
小児ALL患者49例の解析対象検体である末梢血検体149検体及び骨髄液検体142検体を、それぞれ未治療期及び寛解期の2群に分け、WT1 mRNA 発現量を比較した。結果を図8及び表9に示す。
2 測定装置
3 コンピュータシステム
3a コンピュータ本体
3b 入力部
3c 表示部
30 CPU
31 ROM
32 RAM
33 補助記憶部
34 入出力インターフェイス
35 メディアインターフェイス
36 通信インターフェイス
37 画像出力インターフェイス
38 バス
40 記録媒体
301 受信部
302 記憶部
303 算出部
304 判定部
305 出力部
Claims (29)
- (1)〜(3)のステップを含む小児急性リンパ性白血病の血液学的病期の判定を補助する方法:
(1)被験者の生体試料中のウイルムス腫瘍−1遺伝子(WT1)のmRNA量を入手するステップ
(2)前記同生体試料中のグリセルアルデヒド−3−リン酸脱水素酵素(GAPDH)の mRNA量を入手するステップ、及び
(3)前記(1)及び(2)のステップでそれぞれ入手したWT1 mRNA量とGAPDH mRNA量との比に基づいて上記判定補助に必要な指標値を算出するステップ。 - 前記(1)のステップが、RT-PCR法を用いてWT1 mRNA量を測定するか、またはRT-PCR法を用いて測定されたWT1 mRNA量の提供を受けるステップである、請求項1記載の方法。
- 前記(2)のステップが、RT-PCR法を用いてGAPDH mRNA量を測定するか、またはRT-PCR法を用いて測定されたGAPDH mRNA量の提供を受けるステップである、請求項1または2に記
載する方法。 - 前記(3)のステップで得られる指標値が、(1)及び(2)のステップでそれぞれ入手されたWT1 mRNA量とGAPDH mRNA量との比(WT1 mRNA量/GAPDH mRNA量)を正規化して得られる値である、請求項1乃至3のいずれかに記載する方法。
- 上記正規化が、WT1 mRNA量とGAPDH mRNA量との比(WT1 mRNA量/GAPDH mRNA量)に健康成人1μgRNA中に含まれるGAPDH mRNA量の平均値である2.7x107 copies/μgRNA を乗ずることで行われる、請求項4に記載する方法。
- さらに下記のステップを有する請求項1乃至5のいずれかに記載する方法:
(4)前記(3)のステップで得られた指標値を予め設定されたカットオフ値と対比し、その大小に基づいて、被験者の血液学的病期を示すステップ。 - 前記カットオフ値が、前記指標値の検出下限値よりも高い、請求項6に記載の方法。
- 小児急性リンパ性白血病の血液学的病期の判定が非寛解期と寛解期の別を判定することであって、
前記カットオフ値が、非寛解期にある小児ALL患者(非寛解期群)と寛解期にある小児ALL患者(寛解期群)の両群をそれぞれ対象として統計学的解析により求めた値である、請求項6又は7に記載する方法。 - 前記カットオフ値が、生体試料のうち末梢血については220 copies/μgRNA、骨髄液については1,820 copies/μgRNAである、請求項8に記載する方法。
- 前記RT-PCR法が、2ステップRT-PCR法、または、1ステップRT-PCR法である、請求項2乃至9のいずれかに記載する方法。
- 前記RT-PCR法が、1ステップRT-PCR法である、請求項2乃至9のいずれかに記載する方法。
- 前記(1)及び(2)のステップにおける1ステップRT-PCR法が、WT1 mRNAおよびGAPDH mRNAの逆転写反応および伸長反応を、被験者の生体試料において同時かつ同一容器内で連続して進行させる方法である、請求項11に記載する方法。
- 前記(1)のステップの1ステップRT-PCR法において、WT1 mRNA量の測定に
(a)配列番号2に示す塩基配列からなるフォワードPCRプライマーと配列番号3に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、または
(b)配列番号5に示す塩基配列からなるフォワードPCRプライマーと配列番号6に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、
を用いる、請求項11または12に記載する方法。 - 前記(1)のステップの1ステップRT-PCR法において、WT1 mRNA量の測定に
(a’)配列番号2に示す塩基配列からなるフォワードPCRプライマーと配列番号3に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、および標識された配列番号4に示す塩基配列からなるプローブ、または
(b’)配列番号5に示す塩基配列からなるフォワードPCRプライマーと配列番号6に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、および標識された配列番号7に示す塩基配列からなるプローブ
を用いる、請求項11または12に記載する方法。 - 前記(2)のステップの1ステップRT-PCR法において、GAPDH mRNA量の測定に
(c)配列番号9に示す塩基配列からなるフォワードPCRプライマーと配列番号10若しくは12に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセットを用いる、請求項11〜14のいずれかに記載する方法。 - 前記(2)のステップの1ステップRT-PCR法において、GAPDH mRNA量の測定に
(c’)配列番号9に示す塩基配列からなるフォワードPCRプライマーと配列番号10若しくは12に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、及び標識された配列番号11に示す塩基配列からなるプローブ
を用いる、請求項11〜14のいずれかに記載する方法。 - (a)配列番号2に示す塩基配列からなるフォーワードPCRプライマーと配列番号3に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、または
(b)配列番号5に示す塩基配列からなるフォーワードPCRプライマーと配列番号6に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット
を含む急性リンパ性白血病の被験者のWT1 mRNA量を測定するためのリアルタイムPCR用キット。 - (a’)配列番号2に示す塩基配列からなるフォーワードPCRプライマーと配列番号3に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、および標識された配列番号4に示す塩基配列からなるプローブ、または
(b’)配列番号5に示す塩基配列からなるフォーワードPCRプライマーと配列番号6に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、および標識された配列番号7に示す塩基配列からなるプローブ
を含む急性リンパ性白血病の被験者のWT1 mRNA量を測定するためのリアルタイムPCR用キット。 - さらに(c)配列番号9に示す塩基配列からなるフォーワードPCRプライマーと配列番号10若しくは12に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、
を含む請求項17または18に記載する急性リンパ性白血病の被験者のWT1 mRNA量を測定するためのリアルタイムPCR用キット。 - さらに(c’)配列番号9に示す塩基配列からなるフォーワードPCRプライマーと配列番号10若しくは12に示す塩基配列からなるリバースPCRプライマーとからなるプライマーセット、及び標識された配列番号11に示す塩基配列からなるプローブを含む、
請求項17または18に記載する急性リンパ性白血病の被験者のWT1 mRNA量を測定するためのリアルタイムPCR用キット。 - 前記リアルタイムPCR用キットが、小児用である、請求項17乃至20のいずれかに記載する急性リンパ性白血病の被験者のWT1 mRNA量を測定するためのリアルタイムPCR用キット。
- 請求項17乃至21のいずれかに記載する急性リンパ性白血病の被験者のWT1mRNA量を測定するためのリアルタイムPCR用キット及び当該キットに関する説明書を含む商業パッケージであって、当該説明書及び/又は商業パッケージに下記のいずれか少なくとも一方の記載またはその内容が記載されている商業パッケージ:
(i)当該キットが急性リンパ性白血病の血液学的病期の判定の補助に使用できること
(ii)急性リンパ性白血病の血液学的病期の判定補助のためのカットオフ値。 - 上記急性リンパ性白血病が小児急性リンパ性白血病であって、(ii)急性リンパ性白血病の血液学的病期の判定補助のためのカットオフ値が、生体試料のうち末梢血については220 copies/μgRNA、骨髄液については1,820 copies/μgRNAである、請求項22に記載する商業パッケージ。
- 請求項1乃至14のいずれかに記載の急性リンパ性白血病の血液学的病期の判定を補助する方法を用いて、小児急性リンパ性白血病の血液学的病期を経時的に追跡する方法。
- 上記小児急性リンパ性白血病の血液学的病期の追跡が、非寛解期から寛解期への移行、および/または、寛解期から非寛解期への移行を追跡するものである、請求項24に記載する方法。
- 下記(I)及び(II)のステップをコンピュータによって実行させるコンピュータプログラム:
(I)被験者の生体試料中のウイルムス腫瘍−1遺伝子(WT1)のmRNA 量、及び前記同生体試料中のグリセルアルデヒド−3−リン酸脱水素酵素(GAPDH)の mRNA 量の入力を受けるステップ、及び
(II)前記(I)のステップで入力を受けたWT1 mRNA 量とGAPDH mRNA 量との比に基づいて、小児急性リンパ性白血病の血液学的病期の判定を補助するために必要な指標値を算出するステップ。 - さらに下記(III)のステップをコンピュータによって実行させるプログラムを有する請求項26に記載するコンピュータプログラム:
(III)前記(II)のステップで得られた指標値に基づいて、被験者について、小児急性リンパ性白血病の血液学的病期を決定するステップ。 - 小児急性リンパ性白血病の血液学的病期の判定に用いられるコンピュータシステムであって、
プロセッサと、メモリとを含むコンピュータを備え、
前記メモリには、
(I)被験者の生体試料中のウイルムス腫瘍−1遺伝子(WT1)のmRNA 量、及び前記同生体試料中のグリセルアルデヒド−3−リン酸脱水素酵素(GAPDH)の mRNA 量の入力を受けるステップと
(II)前記(I)のステップで入力を受けたWT1 mRNA 量とGAPDH mRNA 量との比に基づいて、小児急性リンパ性白血病の血液学的病期の判定を補助するために必要な指標値を算出するステップとを、
前記コンピュータに実行させるコンピュータプログラムが記録されているコンピュータシステム。 - 前記メモリに記録されているコンピュータプログラムが、さらに、
(III)前記(II)のステップで得られた指標値に基づいて、被験者について、小児急性リンパ性白血病の血液学的病期を決定するステップを、コンピュータに実行させるコンピュータプログラムである、
請求項28に記載するコンピュータシステム。
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