JPWO2016093202A1 - 二環式含窒素芳香族ヘテロ環アミド化合物を有効成分とする医薬組成物 - Google Patents
二環式含窒素芳香族ヘテロ環アミド化合物を有効成分とする医薬組成物 Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2016093202A1 JPWO2016093202A1 JP2016563669A JP2016563669A JPWO2016093202A1 JP WO2016093202 A1 JPWO2016093202 A1 JP WO2016093202A1 JP 2016563669 A JP2016563669 A JP 2016563669A JP 2016563669 A JP2016563669 A JP 2016563669A JP WO2016093202 A1 JPWO2016093202 A1 JP WO2016093202A1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- compound
- lung cancer
- small cell
- cell lung
- pharmaceutically acceptable
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 120
- -1 bicyclic nitrogen-containing aromatic heterocyclic amide compound Chemical class 0.000 title claims abstract description 29
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 title claims description 52
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 claims abstract description 225
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 claims abstract description 225
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 211
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 claims abstract description 173
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 132
- 102100026715 Serine/threonine-protein kinase STK11 Human genes 0.000 claims description 111
- 101710181599 Serine/threonine-protein kinase STK11 Proteins 0.000 claims description 109
- JTSLALYXYSRPGW-UHFFFAOYSA-N n-[5-(4-cyanophenyl)-1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-3-yl]pyridine-3-carboxamide Chemical compound C=1C=CN=CC=1C(=O)NC(C1=C2)=CNC1=NC=C2C1=CC=C(C#N)C=C1 JTSLALYXYSRPGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 109
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 107
- 230000007547 defect Effects 0.000 claims description 27
- JFDZBHWFFUWGJE-UHFFFAOYSA-N benzonitrile Chemical compound N#CC1=CC=CC=C1 JFDZBHWFFUWGJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 14
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 11
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 claims description 11
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 claims description 8
- UKEFJBWFBLUBFV-UHFFFAOYSA-N 4-[[4-[6-[1-[(5-ethoxypyrazin-2-yl)methyl]piperidin-4-yl]-1-methylindole-2-carbonyl]piperazin-1-yl]methyl]benzonitrile Chemical compound C1=NC(OCC)=CN=C1CN1CCC(C=2C=C3N(C)C(C(=O)N4CCN(CC=5C=CC(=CC=5)C#N)CC4)=CC3=CC=2)CC1 UKEFJBWFBLUBFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 abstract description 63
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 abstract description 63
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 abstract description 63
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 51
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 abstract description 13
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 11
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 abstract description 9
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 abstract description 3
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 abstract description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 154
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 80
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 description 79
- LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N protoneodioscin Natural products O(C[C@@H](CC[C@]1(O)[C@H](C)[C@@H]2[C@]3(C)[C@H]([C@H]4[C@@H]([C@]5(C)C(=CC4)C[C@@H](O[C@@H]4[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@H](CO)O4)CC5)CC3)C[C@@H]2O1)C)[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N 0.000 description 75
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 69
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 69
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 62
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 62
- 238000000034 method Methods 0.000 description 48
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 44
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 43
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 38
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 30
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 27
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 25
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 21
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 19
- 102100036009 5'-AMP-activated protein kinase catalytic subunit alpha-2 Human genes 0.000 description 16
- 101000783681 Homo sapiens 5'-AMP-activated protein kinase catalytic subunit alpha-2 Proteins 0.000 description 16
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 16
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 15
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 15
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 14
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 14
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 12
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 12
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 11
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 9
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 9
- XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N metformin Chemical compound CN(C)C(=N)NC(N)=N XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229960003105 metformin Drugs 0.000 description 9
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 8
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical compound CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 8
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 8
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 7
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 7
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 7
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N oxidanium;4-methylbenzenesulfonate Chemical compound O.CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N palladium;triphenylphosphane Chemical compound [Pd].C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 6
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 5
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 5
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 5
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 5
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 5
- 125000004194 piperazin-1-yl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])N(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 5
- 125000004482 piperidin-4-yl group Chemical group N1CCC(CC1)* 0.000 description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 5
- 238000000634 powder X-ray diffraction Methods 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 4
- 101000605639 Homo sapiens Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit alpha isoform Proteins 0.000 description 4
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 4
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000001144 powder X-ray diffraction data Methods 0.000 description 4
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 239000003656 tris buffered saline Substances 0.000 description 4
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000000452 Acetyl-CoA carboxylase Human genes 0.000 description 3
- 108010016219 Acetyl-CoA carboxylase Proteins 0.000 description 3
- 108010018763 Biotin carboxylase Proteins 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N Coenzym Q(11) Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(O)=O)C(O)C1O UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 3
- 108090000430 Phosphatidylinositol 3-kinases Proteins 0.000 description 3
- 102000003993 Phosphatidylinositol 3-kinases Human genes 0.000 description 3
- 102100038332 Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit alpha isoform Human genes 0.000 description 3
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 3
- LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N adenosine monophosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(CO)C(OP(O)(O)=O)C1O LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- NXJCBFBQEVOTOW-UHFFFAOYSA-L palladium(2+);dihydroxide Chemical compound O[Pd]O NXJCBFBQEVOTOW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 3
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 3
- 229940080817 rotenone Drugs 0.000 description 3
- JUVIOZPCNVVQFO-UHFFFAOYSA-N rotenone Natural products O1C2=C3CC(C(C)=C)OC3=CC=C2C(=O)C2C1COC1=C2C=C(OC)C(OC)=C1 JUVIOZPCNVVQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- UILKGKSBXMVERD-UHFFFAOYSA-N (5-ethoxypyrazin-2-yl)methanol Chemical compound C(C)OC=1N=CC(=NC1)CO UILKGKSBXMVERD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- IQFMJBIWYSXQLO-UHFFFAOYSA-N 2-(chloromethyl)-5-ethoxypyrazine Chemical compound ClCC1=NC=C(N=C1)OCC IQFMJBIWYSXQLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DDBCEFQQLNKFRL-UHFFFAOYSA-N 4-[[4-(6-bromo-1h-indole-2-carbonyl)piperazin-1-yl]methyl]benzonitrile Chemical compound N1C2=CC(Br)=CC=C2C=C1C(=O)N(CC1)CCN1CC1=CC=C(C#N)C=C1 DDBCEFQQLNKFRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011729 BALB/c nude mouse Methods 0.000 description 2
- OZNMZNCYBIQWTM-UHFFFAOYSA-N BrC1=CC2=C(NC(=N2)C(=O)N2CCN(CC2)CC2=CC=C(C=C2)C(F)(F)F)C=C1 Chemical compound BrC1=CC2=C(NC(=N2)C(=O)N2CCN(CC2)CC2=CC=C(C=C2)C(F)(F)F)C=C1 OZNMZNCYBIQWTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KUILXNPZDPFYNO-UHFFFAOYSA-N C(C)(C)(C)OC(=O)N1CCC(CC1)C=1C=C2C=C(N(C2=CC1)C)C(=O)O Chemical compound C(C)(C)(C)OC(=O)N1CCC(CC1)C=1C=C2C=C(N(C2=CC1)C)C(=O)O KUILXNPZDPFYNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IDNDVOTXDIBVDO-UHFFFAOYSA-N CCOC(=O)C1=CC2=CC(=CC=C2N1)C1=CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C Chemical compound CCOC(=O)C1=CC2=CC(=CC=C2N1)C1=CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C IDNDVOTXDIBVDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UYHMDFPWJLPHOW-UHFFFAOYSA-N CN1C(=CC2=CC(=CC=C12)C1CCNCC1)C(=O)N1CCN(CC2=CC=C(C=C2)C#N)CC1 Chemical compound CN1C(=CC2=CC(=CC=C12)C1CCNCC1)C(=O)N1CCN(CC2=CC=C(C=C2)C#N)CC1 UYHMDFPWJLPHOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HVUFKWXLRAXNQV-UHFFFAOYSA-N Cl.Cl.N#Cc1ccc(CN2CCNCC2)cc1 Chemical compound Cl.Cl.N#Cc1ccc(CN2CCNCC2)cc1 HVUFKWXLRAXNQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N Diisopropyl ether Chemical compound CC(C)OC(C)C ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 101000628562 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase STK11 Proteins 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010065917 TOR Serine-Threonine Kinases Proteins 0.000 description 2
- 102000013530 TOR Serine-Threonine Kinases Human genes 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 2
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 2
- 102000044633 Tuberous Sclerosis Complex 2 Human genes 0.000 description 2
- 108700019205 Tuberous Sclerosis Complex 2 Proteins 0.000 description 2
- KKRRTZFDLYCBDK-UHFFFAOYSA-N [6-[1-[(6-methoxypyridin-3-yl)methyl]piperidin-4-yl]-1h-benzimidazol-2-yl]-[4-[[4-(trifluoromethyl)phenyl]methyl]piperazin-1-yl]methanone Chemical compound C1=NC(OC)=CC=C1CN1CCC(C=2C=C3NC(=NC3=CC=2)C(=O)N2CCN(CC=3C=CC(=CC=3)C(F)(F)F)CC2)CC1 KKRRTZFDLYCBDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- YKPUWZUDDOIDPM-SOFGYWHQSA-N capsaicin Chemical compound COC1=CC(CNC(=O)CCCC\C=C\C(C)C)=CC=C1O YKPUWZUDDOIDPM-SOFGYWHQSA-N 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- DHFBOLUXYOFKOB-UHFFFAOYSA-N ethyl 5-[1-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]piperidin-4-yl]-1h-indole-2-carboxylate Chemical compound C=1C=C2NC(C(=O)OCC)=CC2=CC=1C1CCN(C(=O)OC(C)(C)C)CC1 DHFBOLUXYOFKOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- LEQAOMBKQFMDFZ-UHFFFAOYSA-N glyoxal Chemical compound O=CC=O LEQAOMBKQFMDFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 102000057995 human PIK3CA Human genes 0.000 description 2
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000000752 ionisation method Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 230000010627 oxidative phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 2
- 239000012321 sodium triacetoxyborohydride Substances 0.000 description 2
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N (2R)-2-hydroxy-2-phenylacetic acid Chemical compound O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1.O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1 QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- FAFAFWFQFVLXGF-UHFFFAOYSA-N 1-[[4-(trifluoromethyl)phenyl]methyl]piperazine Chemical compound C1=CC(C(F)(F)F)=CC=C1CN1CCNCC1 FAFAFWFQFVLXGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CCBICDLNWJRFPO-UHFFFAOYSA-N 2,6-dichloroindophenol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1N=C1C=C(Cl)C(=O)C(Cl)=C1 CCBICDLNWJRFPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RDZSXLXGRSWNAQ-UHFFFAOYSA-N 2-(chloromethyl)-5-methoxypyrazine Chemical compound COC1=CN=C(CCl)C=N1 RDZSXLXGRSWNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KMGUEILFFWDGFV-UHFFFAOYSA-N 2-benzoyl-2-benzoyloxy-3-hydroxybutanedioic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)C(C(C(O)=O)O)(C(O)=O)OC(=O)C1=CC=CC=C1 KMGUEILFFWDGFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WOAAEYPSFPKZPF-UHFFFAOYSA-N 4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-2,5-dihydropyridine Chemical compound N1=CCC(=CC1)B1OC(C)(C)C(C)(C)O1 WOAAEYPSFPKZPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WZWIQYMTQZCSKI-UHFFFAOYSA-N 4-cyanobenzaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=C(C#N)C=C1 WZWIQYMTQZCSKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BNNMDMGPZUOOOE-UHFFFAOYSA-N 4-methylbenzenesulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1.CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 BNNMDMGPZUOOOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ULTDLMITPWHISY-UHFFFAOYSA-N 6-bromo-1h-benzimidazole-2-carboxylic acid Chemical compound C1=C(Br)C=C2NC(C(=O)O)=NC2=C1 ULTDLMITPWHISY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SVBVYRYROZWKNJ-UHFFFAOYSA-N 6-bromo-1h-indole-2-carboxylic acid Chemical compound C1=C(Br)C=C2NC(C(=O)O)=CC2=C1 SVBVYRYROZWKNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VMEGFMNVSYVVOM-UHFFFAOYSA-N 6-decylubiquinone Chemical compound CCCCCCCCCCC1=C(C)C(=O)C(OC)=C(OC)C1=O VMEGFMNVSYVVOM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182536 Antimycin Natural products 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- NOSIMTYABQUAGP-UHFFFAOYSA-N CCOC(=O)C1=CC2=CC(=CC=C2N1C)C1CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C Chemical compound CCOC(=O)C1=CC2=CC(=CC=C2N1C)C1CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C NOSIMTYABQUAGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IPWODDIJGZUCRR-UHFFFAOYSA-N CN1C(=CC2=C1C=C(C=C2)C1CCNCC1)C(=O)N1CCN(CC2=CC=C(C=C2)C#N)CC1 Chemical compound CN1C(=CC2=C1C=C(C=C2)C1CCNCC1)C(=O)N1CCN(CC2=CC=C(C=C2)C#N)CC1 IPWODDIJGZUCRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 239000005973 Carvone Substances 0.000 description 1
- WQZJGEIZEIJRKW-UHFFFAOYSA-N Cl.N1CCC(CC1)C1=CC2=C(NC(=N2)C(=O)N2CCN(CC2)CC2=CC=C(C=C2)C(F)(F)F)C=C1 Chemical compound Cl.N1CCC(CC1)C1=CC2=C(NC(=N2)C(=O)N2CCN(CC2)CC2=CC=C(C=C2)C(F)(F)F)C=C1 WQZJGEIZEIJRKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NKCWRTBIYGYIMM-UHFFFAOYSA-N ClCC1=NC=C(N=C1)OC.C(C)(C)N(C(C)C)CC Chemical compound ClCC1=NC=C(N=C1)OC.C(C)(C)N(C(C)C)CC NKCWRTBIYGYIMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 239000005656 Fenazaquin Substances 0.000 description 1
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101001059454 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase MARK2 Proteins 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- FRUFQRBBEQVBNW-UHFFFAOYSA-N N1CCC(CC1)C1=CC2=C(NC(=N2)C(=O)N2CCN(CC2)CC2=CC=C(C=C2)C(F)(F)F)C=C1 Chemical compound N1CCC(CC1)C1=CC2=C(NC(=N2)C(=O)N2CCN(CC2)CC2=CC=C(C=C2)C(F)(F)F)C=C1 FRUFQRBBEQVBNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006746 NADH Dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108010086428 NADH Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- JAUOIFJMECXRGI-UHFFFAOYSA-N Neoclaritin Chemical compound C=1C(Cl)=CC=C2C=1CCC1=CC=CN=C1C2=C1CCNCC1 JAUOIFJMECXRGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710093328 Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit alpha isoform Proteins 0.000 description 1
- ZQLBCAUKNYXILZ-UGKGYDQZSA-N Piericidin A Natural products COc1nc(CC=C(/C)C=CCC(=C[C@H](C)[C@@H](O)C(=CC)C)C)c(C)c(O)c1OC ZQLBCAUKNYXILZ-UGKGYDQZSA-N 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 239000005663 Pyridaben Substances 0.000 description 1
- IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N R-2-phenyl-2-hydroxyacetic acid Natural products OC(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100028904 Serine/threonine-protein kinase MARK2 Human genes 0.000 description 1
- 208000019802 Sexually transmitted disease Diseases 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- WTVQQXGHNYQSSQ-UHFFFAOYSA-N [6-[1-[(5-methoxypyrazin-2-yl)methyl]piperidin-4-yl]-1h-benzimidazol-2-yl]-[4-[[4-(trifluoromethyl)phenyl]methyl]piperazin-1-yl]methanone Chemical compound C1=NC(OC)=CN=C1CN1CCC(C=2C=C3NC(=NC3=CC=2)C(=O)N2CCN(CC=3C=CC(=CC=3)C(F)(F)F)CC2)CC1 WTVQQXGHNYQSSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- CQIUKKVOEOPUDV-IYSWYEEDSA-N antimycin Chemical compound OC1=C(C(O)=O)C(=O)C(C)=C2[C@H](C)[C@@H](C)OC=C21 CQIUKKVOEOPUDV-IYSWYEEDSA-N 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 101150117004 atg18 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000000065 atmospheric pressure chemical ionisation Methods 0.000 description 1
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L caesium carbonate Chemical compound [Cs+].[Cs+].[O-]C([O-])=O FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000024 caesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 description 1
- 235000017663 capsaicin Nutrition 0.000 description 1
- 229960002504 capsaicin Drugs 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- SKCNIGRBPJIUBQ-UHFFFAOYSA-N chloroform;ethyl acetate Chemical compound ClC(Cl)Cl.CCOC(C)=O SKCNIGRBPJIUBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940000425 combination drug Drugs 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- VAYGXNSJCAHWJZ-UHFFFAOYSA-N dimethyl sulfate Chemical compound COS(=O)(=O)OC VAYGXNSJCAHWJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002009 diols Chemical class 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940112141 dry powder inhaler Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M ethanesulfonate Chemical compound CCS([O-])(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- LWRLKENDQISGEU-UHFFFAOYSA-N ethyl 5-bromo-1h-indole-2-carboxylate Chemical compound BrC1=CC=C2NC(C(=O)OCC)=CC2=C1 LWRLKENDQISGEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BAZQNLGMKSJRSN-UHFFFAOYSA-N ethyl 5-ethoxypyrazine-2-carboxylate Chemical compound CCOC(=O)C1=CN=C(OCC)C=N1 BAZQNLGMKSJRSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- DMYHGDXADUDKCQ-UHFFFAOYSA-N fenazaquin Chemical compound C1=CC(C(C)(C)C)=CC=C1CCOC1=NC=NC2=CC=CC=C12 DMYHGDXADUDKCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940015043 glyoxal Drugs 0.000 description 1
- MOTRZVVGCFFABN-UHFFFAOYSA-N hexane;2-propan-2-yloxypropane Chemical compound CCCCCC.CC(C)OC(C)C MOTRZVVGCFFABN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940071870 hydroiodic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 229960002510 mandelic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000004170 methylsulfonyl group Chemical group [H]C([H])([H])S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000005787 mitochondrial ATP synthesis coupled electron transport Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 1
- 239000003883 ointment base Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003243 phenformin Drugs 0.000 description 1
- ICFJFFQQTFMIBG-UHFFFAOYSA-N phenformin Chemical compound NC(=N)NC(=N)NCCC1=CC=CC=C1 ICFJFFQQTFMIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- BBLGCDSLCDDALX-LKGBESRRSA-N piericidin A Chemical compound COC=1NC(C\C=C(/C)C\C=C\C(\C)=C\[C@@H](C)[C@@H](O)C(\C)=C\C)=C(C)C(=O)C=1OC BBLGCDSLCDDALX-LKGBESRRSA-N 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- DWFZBUWUXWZWKD-UHFFFAOYSA-N pyridaben Chemical compound C1=CC(C(C)(C)C)=CC=C1CSC1=C(Cl)C(=O)N(C(C)(C)C)N=C1 DWFZBUWUXWZWKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 238000000611 regression analysis Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 1
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- KKCBUQHMOMHUOY-UHFFFAOYSA-N sodium oxide Chemical compound [O-2].[Na+].[Na+] KKCBUQHMOMHUOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910001948 sodium oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 238000009495 sugar coating Methods 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 125000005490 tosylate group Chemical group 0.000 description 1
- 210000003437 trachea Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/4164—1,3-Diazoles
- A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
- A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
- A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
- A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
Abstract
【課題】ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌、特に非小細胞肺癌の治療用医薬組成物を提供する。【解決手段】本発明者は、ミトコンドリアComplex I阻害作用を有する化合物について検討し、本発明の二環式含窒素芳香族ヘテロ環アミド化合物がミトコンドリアComplex I阻害作用を有し、これらの化合物が非小細胞肺癌由来担癌マウスに対して抗腫瘍効果を有することを確認し、本発明を完成した。【選択図】なし
Description
本発明は、二環式含窒素芳香族ヘテロ環アミド化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分とするミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌、特に非小細胞肺癌の治療用医薬組成物に関する。
肺癌は、気管、気管支、肺胞の細胞が正常機能を失った結果、無秩序に増殖することにより発生するものであり、肺癌による死亡者数は全癌死の17%を占め最も多く、世界中で年間130万人ほどが肺癌で死亡している。
肺癌に対する治療は、手術（外科療法）、抗癌剤（化学療法）、放射線照射（放射線療法）に大別されるが、その組織型によりその治療が奏効するかどうかは変動する。例えば、肺癌の確定診断は、病理医の手による顕微鏡標本の細胞病理組織診断で行われるが、肺癌の20%程度を占める小細胞肺癌は一般的に悪性度が高く、急速に増大、進展し、他の臓器への転移が多く見られることから、発見時にすでに進行癌であることが多い。このため、化学療法や放射線療法が行われることが多いが、これらに対して比較的感受性はあっても多くは再発するため、予後はあまりよくない。一方、残る80%程度を占める非小細胞肺癌は、あるステージまでは手術療法が検討されるものの、そのステージ以降では手術の適応となることはあまりなく、化学療法や放射線療法が治療の主体となる。従って、いずれの肺癌においても、化学療法はその治療の重要な選択肢である。
そのような背景のもと、2型糖尿病治療薬の第一選択薬として知られるメトホルミンが注目を集めている。疫学的な解析ではメトホルミン使用者における肺癌発症のリスクは有意に非メトホルミン使用者より低いことが報告されている（BMC Cancer 2012, 12: 410）。また非臨床においてもメトホルミンは非小細胞肺癌を含む様々な癌種に対して抗腫瘍効果を発揮することが報告されており、肺癌治療へと応用すべく複数の臨床試験が実施されている（Expert Opin. Investig. Drugs. 2013, 22: 1401-1409）。
肺癌に対する治療は、手術（外科療法）、抗癌剤（化学療法）、放射線照射（放射線療法）に大別されるが、その組織型によりその治療が奏効するかどうかは変動する。例えば、肺癌の確定診断は、病理医の手による顕微鏡標本の細胞病理組織診断で行われるが、肺癌の20%程度を占める小細胞肺癌は一般的に悪性度が高く、急速に増大、進展し、他の臓器への転移が多く見られることから、発見時にすでに進行癌であることが多い。このため、化学療法や放射線療法が行われることが多いが、これらに対して比較的感受性はあっても多くは再発するため、予後はあまりよくない。一方、残る80%程度を占める非小細胞肺癌は、あるステージまでは手術療法が検討されるものの、そのステージ以降では手術の適応となることはあまりなく、化学療法や放射線療法が治療の主体となる。従って、いずれの肺癌においても、化学療法はその治療の重要な選択肢である。
そのような背景のもと、2型糖尿病治療薬の第一選択薬として知られるメトホルミンが注目を集めている。疫学的な解析ではメトホルミン使用者における肺癌発症のリスクは有意に非メトホルミン使用者より低いことが報告されている（BMC Cancer 2012, 12: 410）。また非臨床においてもメトホルミンは非小細胞肺癌を含む様々な癌種に対して抗腫瘍効果を発揮することが報告されており、肺癌治療へと応用すべく複数の臨床試験が実施されている（Expert Opin. Investig. Drugs. 2013, 22: 1401-1409）。
メトホルミンの抗腫瘍メカニズムについてはadenosine monophosphate (AMP）-activated protein kinase（AMPK）を活性化することで、癌細胞の増殖を阻害することがよく知られている（Cancer Res. 2006, 66: 10269-10273, Trends Endocrinol. Metab. 2013, 24: 469-480）。AMPKは高度に保存されたセリン・スレオニンキナーゼで、種々の細胞においてエネルギー代謝を制御しており、細胞内でAMP/ATP比の変動をモニターして応答する（Annu. Rev. Biochem. 1998, 67: 821-855）。メトホルミンによるAMPK活性化は、ミトコンドリアComplex I阻害作用に基づくことが知られている（Diabetes Metab. 2003, 29(4 Pt 2): 6S88-94）。ミトコンドリアComplex Iとは、ミトコンドリアの内膜に位置するNADH脱水素酵素であり、ミトコンドリアにおける酸化的リン酸化の「入り口酵素」として知られている。ミトコンドリアComplex I阻害によって細胞内ATPレベルが低下するとAMP/ATP比が上昇し、AMPがAMPKにアロステリックに結合してliver kinase B1（LKB1もしくはSTK11とも言う）によってAMPKのαサブユニットの172番目のスレオニンがリン酸化されることでAMPKが活性化する。活性化したAMPKは、tuberous sclerosis complex 2（TSC2）のリン酸化を介してmammalian target of rapamycin （mTOR）のシグナルを阻害する（Genes Cells. 2003, 8: 65-79）。このことは、メトホルミンが非小細胞肺癌を含む癌細胞の増殖を阻害する理由の一つと考えられている（Clin. Cancer Res. 2013, 19: 3508-3519）。
また、前述したようにAMPKの活性化にはLKB1によるAMPKのリン酸化が重要であるが、非小細胞肺癌においてはLKB1の変異/欠損が高頻度に見られる（Fam. Cancer. 2011, 10: 447-453）。このような癌においてはメトホルミンの構造類似体であるフェンホルミンがミトコンドリアComplex Iを阻害することでreactive oxygen species（ROS）が過剰に産生され、細胞死を誘導することが近年報告されている（Cancer Cell. 2013, 23: 143-158）。すなわち、メトホルミンなどのミトコンドリアComplex I阻害作用を有する化合物は主にミトコンドリアComplex I阻害を起点とし非小細胞肺癌細胞の細胞死を誘導すると考えられる。
ミトコンドリアComplex I阻害作用を有する化合物としては、ロテノン(rotenone)、ピリダベン(pyridaben)、ブラタシン(bullatacin)、ピエリシジンA(piericidin A)、カプサイシン(capsaicin)、フェナザキン(fenazaquin)等、天然・非天然を問わず、多数の化合物が知られている他、例えば、下記式（Ａ）の化合物がミトコンドリアComplex I阻害作用を有し、肺癌細胞を含む各種癌細胞の増殖を阻害することが報告されている（特許文献１）。
また、AMPK活性化作用を有する化合物としては、例えば、下記式（Ｂ）及び（Ｃ）の化合物がAMPK活性化作用を有し、2型糖尿病、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患等の代謝性疾患の治療等に有用であることが報告されている（それぞれ特許文献２及び特許文献３）。しかし、当該文献には癌の治療等への有用性を示唆する具体的記載はない。
ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物、特に、非小細胞肺癌治療用医薬組成物を提供する。
本発明者は、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物、特に非小細胞肺癌治療用医薬組成物の創製を目的に鋭意検討した結果、本発明の二環式含窒素芳香族ヘテロ環アミド化合物又はその製薬学的に許容される塩が優れたミトコンドリアComplex I阻害作用を有し（本願の優先権の基礎となる特許出願後に国際公開された本出願人による国際公開第2014/199933号）、これらの化合物が非小細胞肺癌由来担癌マウスに対して抗腫瘍効果を有すること知見して本発明を完成させた。
即ち、本発明は、(5-{1-[(6-メトキシピリジン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（以下、「化合物Ａ」と言うことがある）、
(5-{1-[(5-メトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（以下、「化合物Ｂ」と言うことがある）、
4-({4-[(6-{1-[(5-エトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1-メチル-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリル（以下、「化合物Ｃ」と言うことがある）、及び
4-({4-[(5-{1-[(5-メトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1-メチル-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリル（以下、「化合物Ｄ」と言うことがある）から選択される化合物、又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物、ある態様としては、非小細胞肺癌治療用医薬組成物、ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物、ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物、ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物に関する。
即ち、本発明は、(5-{1-[(6-メトキシピリジン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（以下、「化合物Ａ」と言うことがある）、
(5-{1-[(5-メトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（以下、「化合物Ｂ」と言うことがある）、
4-({4-[(6-{1-[(5-エトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1-メチル-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリル（以下、「化合物Ｃ」と言うことがある）、及び
4-({4-[(5-{1-[(5-メトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1-メチル-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリル（以下、「化合物Ｄ」と言うことがある）から選択される化合物、又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物、ある態様としては、非小細胞肺癌治療用医薬組成物、ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物、ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物、ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物に関する。
また、本発明は、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄから選択される化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有するミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療剤、ある態様としては、非小細胞肺癌の治療剤、ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療剤、ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療剤、ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療剤である。
また、本発明は、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物の製造のための、ある態様としては、非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄから選択される化合物、又はその製薬学的に許容される塩の使用；ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための、ある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための、ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための、ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄから選択される化合物、又はその製薬学的に許容される塩の使用；ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための、ある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための、ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための、ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄから選択される化合物、又はその製薬学的に許容される塩；及び、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄから選択される化合物、又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなるミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療方法、ある態様としては、非小細胞肺癌の治療方法、ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法、ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療方法、ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法に関する。なお、「対象」とは、その治療を必要とするヒト又はその他の動物であり、ある態様としては、その治療を必要とするヒトである。
本発明の医薬組成物の有効成分である化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄから選択される化合物、又はその製薬学的に許容される塩は、ミトコンドリアComplex I阻害作用を有し、非小細胞肺癌由来担癌マウスに対して抗腫瘍効果を有し、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物、ある態様としては、非小細胞肺癌治療用医薬組成物、ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物、ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物、ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の有効成分として使用できる可能性がある。
以下、本発明を詳細に説明する。
本明細書において、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌とは、ミトコンドリアの電子伝達系が活性化することでミトコンドリアにおける酸化的リン酸化が亢進している肺癌、ある態様としては、非小細胞肺癌、ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌を挙げることが出来る。また、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌とは、LKB1によるAMPKのリン酸化が抑制されている非小細胞肺癌、ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌を挙げることができる。
本明細書において、「化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄから選択される化合物の製薬学的に許容される塩」とは、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ若しくは化合物Ｄの酸付加塩を意味し、具体的には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の無機酸や、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、マンデル酸、酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、ジトルオイル酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸（メシル酸）、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸（トシル酸）、アスパラギン酸、グルタミン酸等の有機酸との酸付加塩が挙げられる。
なお、「化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄから選択される化合物」には、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ若しくは化合物Ｄの各種溶媒和物、具体的には、水和物やエタノール和物が含まれる。さらに、「製薬学的に許容される塩」にはこれらの溶媒和物の酸付加塩も含まれる。
また、「化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄから選択される化合物、又はその製薬学的に許容される塩」のある態様としては、塩を形成していないフリーベース、即ち、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ若しくは化合物Ｄが挙げられ、ある態様としては、化合物Ａであり、さらにある態様としては、化合物Ｂであり、さらにある態様としては、化合物Ｃであり、またさらにある態様としては、化合物Ｄである。また、ある態様としては、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ若しくは化合物Ｄのトシル酸塩であり、さらにある態様としては、化合物Ａ 二トシル酸塩であり、さらにある態様としては、化合物Ｂ 二トシル酸塩であり、さらにある態様としては、化合物Ｃ 二トシル酸塩であり、またさらにある態様としては、化合物Ｄ 二トシル酸塩である。
なお、「化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄから選択される化合物」には、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ若しくは化合物Ｄの各種溶媒和物、具体的には、水和物やエタノール和物が含まれる。さらに、「製薬学的に許容される塩」にはこれらの溶媒和物の酸付加塩も含まれる。
また、「化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄから選択される化合物、又はその製薬学的に許容される塩」のある態様としては、塩を形成していないフリーベース、即ち、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ若しくは化合物Ｄが挙げられ、ある態様としては、化合物Ａであり、さらにある態様としては、化合物Ｂであり、さらにある態様としては、化合物Ｃであり、またさらにある態様としては、化合物Ｄである。また、ある態様としては、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ若しくは化合物Ｄのトシル酸塩であり、さらにある態様としては、化合物Ａ 二トシル酸塩であり、さらにある態様としては、化合物Ｂ 二トシル酸塩であり、さらにある態様としては、化合物Ｃ 二トシル酸塩であり、またさらにある態様としては、化合物Ｄ 二トシル酸塩である。
本発明のある態様を以下に示す。
（１−１）化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ａ 二トシル酸塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ａ 二トシル酸塩を有効成分として含有する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ａ 二トシル酸塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ａ 二トシル酸塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ａ 二トシル酸塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。
（１−１）化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ａ 二トシル酸塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ａ 二トシル酸塩を有効成分として含有する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ａ 二トシル酸塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ａ 二トシル酸塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ａ 二トシル酸塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。
（１−２）ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩の使用。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ａ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ａ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ａ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ａ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ａ 二トシル酸塩の使用。
（１−３）ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩の使用。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための化合物Ａ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための化合物Ａ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ａ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ａ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ａ 二トシル酸塩の使用。
（１−４）ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩。ある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩。ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための、化合物Ａ 二トシル酸塩。さらにある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ａ 二トシル酸塩。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ａ 二トシル酸塩。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ａ 二トシル酸塩。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ａ 二トシル酸塩。
（１−５）化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療方法。ある態様としては、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、非小細胞肺癌の治療方法。ある態様としては、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法。ある態様としては、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療方法。ある態様としては、化合物Ａ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ａ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、ミトコンドリアComplex Iが関与する癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ａ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、非小細胞肺癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ａ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ａ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ａ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法。
（２−１）化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ｂ 二トシル酸塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ｂ 二トシル酸塩を有効成分として含有する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ｂ 二トシル酸塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ｂ 二トシル酸塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ｂ 二トシル酸塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。
（２−２）ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩の使用。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｂ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｂ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｂ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｂ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｂ 二トシル酸塩の使用。
（２−３）ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩の使用。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための化合物Ｂ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｂ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｂ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｂ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｂ 二トシル酸塩の使用。
（２−４）ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩。ある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩。ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための、化合物Ｂ 二トシル酸塩。さらにある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｂ 二トシル酸塩。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｂ 二トシル酸塩。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｂ 二トシル酸塩。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｂ 二トシル酸塩。
（２−５）化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療方法。ある態様としては、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、非小細胞肺癌の治療方法。ある態様としては、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法。ある態様としては、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療方法。ある態様としては、化合物Ｂ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ｂ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、ミトコンドリアComplex Iが関与する癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ｂ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、非小細胞肺癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ｂ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ｂ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ｂ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法。
（３−１）化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ｃ 二トシル酸塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ｃ 二トシル酸塩を有効成分として含有する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ｃ 二トシル酸塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ｃ 二トシル酸塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ｃ 二トシル酸塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。
（３−２）ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩の使用。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｃ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｃ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｃ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｃ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｃ 二トシル酸塩の使用。
（３−３）ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩の使用。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための化合物Ｃ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｃ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｃ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｃ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｃ 二トシル酸塩の使用。
（３−４）ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩。ある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩。ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための、化合物Ｃ 二トシル酸塩。さらにある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｃ 二トシル酸塩。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｃ 二トシル酸塩。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｃ 二トシル酸塩。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｃ 二トシル酸塩。
（３−５）化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療方法。ある態様としては、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、非小細胞肺癌の治療方法。ある態様としては、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法。ある態様としては、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療方法。ある態様としては、化合物Ｃ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ｃ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、ミトコンドリアComplex Iが関与する癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ｃ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、非小細胞肺癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ｃ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ｃ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ｃ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法。
（４−１）化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。ある態様としては、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ｄ 二トシル酸塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ｄ 二トシル酸塩を有効成分として含有する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ｄ 二トシル酸塩を有効成分として含有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ｄ 二トシル酸塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。さらにある態様としては、化合物Ｄ 二トシル酸塩を有効成分として含有するLKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療用医薬組成物。
（４−２）ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩の使用。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｄ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｄ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｄ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｄ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌治療用医薬組成物の製造のための、化合物Ｄ 二トシル酸塩の使用。
（４−３）ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩の使用。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩の使用。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための化合物Ｄ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｄ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｄ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｄ 二トシル酸塩の使用。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための化合物Ｄ 二トシル酸塩の使用。
（４−４）ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩。ある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩。ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩。ある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療のための、化合物Ｄ 二トシル酸塩。さらにある態様としては、非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｄ 二トシル酸塩。さらにある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｄ 二トシル酸塩。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｄ 二トシル酸塩。さらにある態様としては、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療のための、化合物Ｄ 二トシル酸塩。
（４−５）化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌の治療方法。ある態様としては、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、非小細胞肺癌の治療方法。ある態様としては、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法。ある態様としては、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療方法。ある態様としては、化合物Ｄ又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ｄ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、ミトコンドリアComplex Iが関与する癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ｄ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、非小細胞肺癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ｄ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ｄ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、LKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌の治療方法。さらにある態様としては、化合物Ｄ 二トシル酸塩の有効量を対象に投与することからなる、LKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療方法。
本発明の医薬組成物の薬理的効果は、以下の試験例により確認した。以下の試験例では化合物Ａ 二トシル酸塩（以下、化合物Ａ１と言う）、化合物Ｂ 二トシル酸塩（以下、化合物Ｂ１と言う）、化合物Ｃ 二トシル酸塩（以下、化合物Ｃ１と言う）、及び、化合物Ｄ 二トシル酸塩（以下、「化合物Ｄ１と言う）を被験化合物として使用した。なお、それぞれの試験例において、化合物Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、及び、Ｄ１の濃度は、各々のフリーベースの濃度に換算して記載した。
試験例１ ヒトミトコンドリアComplex I阻害作用の評価
ヒトPIK3CA変異陽性乳癌であるMDA-MB-453腫瘍よりミトコンドリアを抽出し、化合物Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、及び、Ｄ１のComplex I阻害活性を評価した。
なお、PIK3CA変異陽性乳癌とは、phosphatidylinositol 3-kinase（PI3K）経路の遺伝子変異の内、PI3Kの触媒ユニットであるp110αの遺伝子名であるPIK3CAに変異を有する乳癌をいう。
また、本試験例及び次の試験例２で使用するMDA-MB-453細胞はAmerican Type Culture Collection (以下、ATCCと記載する場合がある)から入手した。
4週齡の雄性ヌードマウス（日本チャールス・リバー社）の皮下にヒトPIK3CA変異陽性乳癌由来のMDA-MB-453細胞を担癌し、一定の大きさになった後にMDA-MB-453腫瘍を摘出して、ミトコンドリア抽出用液(0.275M Sucrose, 2.2mM EDTA, 11mM Tris/HCl pH7.5, Complete-EDTA-free (Roche Diagnostics社))を腫瘍重量の9倍量加え、破砕した。600xg, 4℃で10分間遠心して上清を得た後に14000xg, 4℃で10分間遠心してペレットを得た。ペレットを、摘出した腫瘍重量の5倍量の10mM Tris/HCl pH7.5に懸濁して、ヒトミトコンドリア懸濁液を得た。
次に、Complex I活性測定用液(25mM potassium phosphate pH7.6, 0.35% Bovine Serum Albumin(BSA), 60μM 2,6-dichlorophenol-indophenol, 70μM decylubiquinone, 1μM antimycin) 1mlあたりヒトミトコンドリア懸濁液を25若しくは50μl加えた。96若しくは384ウェルプレートに分取した後に、被験化合物を終濃度10000nMから終濃度0.3nMまでの任意の範囲で添加した。陰性対照として被験化合物の溶媒であるジメチルスルホキシド（DMSO）を終濃度1%となるように、陽性対照としてComplex I阻害剤であるrotenoneを終濃度1μMとなるように、それぞれ添加した。さらにNADHを終濃度0.2若しくは0.5mMとなるように各ウェルに加え、予め37℃に設定したSpectraMax（Molecular Device社）にて波長600nmにおける吸光度の変化を測定した。DMSO処理でのシグナル値をtop、rotenone 1μM処理でのシグナル値をbottomとし、反応が線形である範囲内でシグナルの変動を算出し、50%阻害値(IC50)をSigmoid-Emaxモデル非線形回帰分析法にて算出した。被験化合物Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、及び、Ｄ１の結果を表１に示す。なお、化合物Ａ１〜Ｄ１は後記の実施例１〜４に記載の方法で製造した（以下同様）。
ヒトPIK3CA変異陽性乳癌であるMDA-MB-453腫瘍よりミトコンドリアを抽出し、化合物Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、及び、Ｄ１のComplex I阻害活性を評価した。
なお、PIK3CA変異陽性乳癌とは、phosphatidylinositol 3-kinase（PI3K）経路の遺伝子変異の内、PI3Kの触媒ユニットであるp110αの遺伝子名であるPIK3CAに変異を有する乳癌をいう。
また、本試験例及び次の試験例２で使用するMDA-MB-453細胞はAmerican Type Culture Collection (以下、ATCCと記載する場合がある)から入手した。
4週齡の雄性ヌードマウス（日本チャールス・リバー社）の皮下にヒトPIK3CA変異陽性乳癌由来のMDA-MB-453細胞を担癌し、一定の大きさになった後にMDA-MB-453腫瘍を摘出して、ミトコンドリア抽出用液(0.275M Sucrose, 2.2mM EDTA, 11mM Tris/HCl pH7.5, Complete-EDTA-free (Roche Diagnostics社))を腫瘍重量の9倍量加え、破砕した。600xg, 4℃で10分間遠心して上清を得た後に14000xg, 4℃で10分間遠心してペレットを得た。ペレットを、摘出した腫瘍重量の5倍量の10mM Tris/HCl pH7.5に懸濁して、ヒトミトコンドリア懸濁液を得た。
次に、Complex I活性測定用液(25mM potassium phosphate pH7.6, 0.35% Bovine Serum Albumin(BSA), 60μM 2,6-dichlorophenol-indophenol, 70μM decylubiquinone, 1μM antimycin) 1mlあたりヒトミトコンドリア懸濁液を25若しくは50μl加えた。96若しくは384ウェルプレートに分取した後に、被験化合物を終濃度10000nMから終濃度0.3nMまでの任意の範囲で添加した。陰性対照として被験化合物の溶媒であるジメチルスルホキシド（DMSO）を終濃度1%となるように、陽性対照としてComplex I阻害剤であるrotenoneを終濃度1μMとなるように、それぞれ添加した。さらにNADHを終濃度0.2若しくは0.5mMとなるように各ウェルに加え、予め37℃に設定したSpectraMax（Molecular Device社）にて波長600nmにおける吸光度の変化を測定した。DMSO処理でのシグナル値をtop、rotenone 1μM処理でのシグナル値をbottomとし、反応が線形である範囲内でシグナルの変動を算出し、50%阻害値(IC50)をSigmoid-Emaxモデル非線形回帰分析法にて算出した。被験化合物Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、及び、Ｄ１の結果を表１に示す。なお、化合物Ａ１〜Ｄ１は後記の実施例１〜４に記載の方法で製造した（以下同様）。
試験例２ AMPK活性化作用の評価
AMPKの基質であるAcetyl-CoA Carboxylase (ACC)の79番目のセリン（Ser79）のリン酸化をCell ELISAにより測定することで化合物Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、及び、Ｄ１によるAMPK活性化作用を評価した。
MDA-MB-453細胞を1ウェルあたり15000細胞となるように10% 牛胎児血清を含むLeibovitz's L-15培地（Life technologies社）で36μlずつ384ウェルプレートに播種し、CO2非存在下37℃で一晩培養した。翌日、被験化合物Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、及び陰性対照として被験化合物の溶媒であるDMSOを終濃度の10倍濃度となるように新鮮な培地で希釈し、各ウェルに4μlずつ添加した（被験化合物は終濃度10000nMから終濃度0.3nMまでの10段階、DMSOは終濃度0.1%）。その後CO2非存在下37℃で2時間培養した。培養後、各ウェルに40%グリオキサール溶液（ナカライテスク社）を20μl添加し、30分間室温で静置することで細胞を固定した。その後、プレートを遠心（Ecospin；C.A.N.社，800rpm, 8秒間, 以下特記しない限り遠心は同条件で行った）することで上清を除き、0.1% Triton X-100含有Phosphate-Buffered Saline(PBS)を20μlずつ各ウェルに添加し、10分間室温で静置した。遠心により0.1% Triton X-100含有PBSを除き、ブロッキング溶液（Odyssey Blocking Buffer；LI-COR Biosciences社）を20μlずつ各ウェルに添加して1時間室温で静置した。遠心によりブロッキング溶液を除き、1次抗体としてACC Ser79のリン酸化抗体（Cell Signaling社）を原液に対して1/500量含有したブロッキング溶液を10μlずつ各ウェルに添加して4℃にて一晩静置した。その翌日、プレートを遠心して反応液を除き、0.05% Tween-20含有Tris-Buffered Saline(TBS）（Thermo Scientific社；20x TBS Tween-20をイオン交換水で希釈し1xで使用）を25μlずつ各ウェルに添加し、遠心により除去することで各ウェルを洗浄した。洗浄は計3回行った。洗浄後、2次抗体としてIRDye（登録商標） 800CW Goat anti-Rabbit IgG（LI-COR Biosciences社）を原液に対して1/1000量含有したブロッキング溶液を10μlずつ各ウェルに添加して1時間室温で静置した。プレートを遠心して反応液を除き、0.05% Tween-20含有TBSで1次抗体反応後と同様にして各ウェルを3回洗浄した。洗浄液を除いた後にそのままプレートを室温で3時間以上風乾させ、Aerius（LI-COR Biosciences社）にてシグナルを測定した。DMSO処理でのシグナル値をbottom、プラトーに達した時のシグナル値をtopとし、50%活性化値（EC50）をSigmoid-Emaxモデル非線形回帰分析法にて算出した。被験化合物Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、及び、Ｄ１の結果を表２に示す。
AMPKの基質であるAcetyl-CoA Carboxylase (ACC)の79番目のセリン（Ser79）のリン酸化をCell ELISAにより測定することで化合物Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、及び、Ｄ１によるAMPK活性化作用を評価した。
MDA-MB-453細胞を1ウェルあたり15000細胞となるように10% 牛胎児血清を含むLeibovitz's L-15培地（Life technologies社）で36μlずつ384ウェルプレートに播種し、CO2非存在下37℃で一晩培養した。翌日、被験化合物Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、及び陰性対照として被験化合物の溶媒であるDMSOを終濃度の10倍濃度となるように新鮮な培地で希釈し、各ウェルに4μlずつ添加した（被験化合物は終濃度10000nMから終濃度0.3nMまでの10段階、DMSOは終濃度0.1%）。その後CO2非存在下37℃で2時間培養した。培養後、各ウェルに40%グリオキサール溶液（ナカライテスク社）を20μl添加し、30分間室温で静置することで細胞を固定した。その後、プレートを遠心（Ecospin；C.A.N.社，800rpm, 8秒間, 以下特記しない限り遠心は同条件で行った）することで上清を除き、0.1% Triton X-100含有Phosphate-Buffered Saline(PBS)を20μlずつ各ウェルに添加し、10分間室温で静置した。遠心により0.1% Triton X-100含有PBSを除き、ブロッキング溶液（Odyssey Blocking Buffer；LI-COR Biosciences社）を20μlずつ各ウェルに添加して1時間室温で静置した。遠心によりブロッキング溶液を除き、1次抗体としてACC Ser79のリン酸化抗体（Cell Signaling社）を原液に対して1/500量含有したブロッキング溶液を10μlずつ各ウェルに添加して4℃にて一晩静置した。その翌日、プレートを遠心して反応液を除き、0.05% Tween-20含有Tris-Buffered Saline(TBS）（Thermo Scientific社；20x TBS Tween-20をイオン交換水で希釈し1xで使用）を25μlずつ各ウェルに添加し、遠心により除去することで各ウェルを洗浄した。洗浄は計3回行った。洗浄後、2次抗体としてIRDye（登録商標） 800CW Goat anti-Rabbit IgG（LI-COR Biosciences社）を原液に対して1/1000量含有したブロッキング溶液を10μlずつ各ウェルに添加して1時間室温で静置した。プレートを遠心して反応液を除き、0.05% Tween-20含有TBSで1次抗体反応後と同様にして各ウェルを3回洗浄した。洗浄液を除いた後にそのままプレートを室温で3時間以上風乾させ、Aerius（LI-COR Biosciences社）にてシグナルを測定した。DMSO処理でのシグナル値をbottom、プラトーに達した時のシグナル値をtopとし、50%活性化値（EC50）をSigmoid-Emaxモデル非線形回帰分析法にて算出した。被験化合物Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、及び、Ｄ１の結果を表２に示す。
試験例３ 非小細胞肺癌由来細胞担癌マウスにおける抗腫瘍試験１
PBSとMatrigel（登録商標）とを1:1に混合した溶液に懸濁したLKB1変異陽性非小細胞肺癌細胞株であるA427細胞及びNCI-H1395細胞並びに、LKB1野生型非小細胞肺癌細胞株であるHARA細胞及びNCI-H1993細胞について、各、3×106個を、4-5週齡の雄性Balb/cヌードマウス（日本チャールス・リバー社）の背部皮下に注射して植えつけた。その後平均腫瘍体積が100mm3を超えたのを確認し、被験化合物の投与を開始した。試験は溶媒群及び化合物投与群各4-5匹で行い、溶媒群には6%シクロデキストリン水溶液を、化合物投与群には6%シクロデキストリン水溶液に被験化合物を8 mg/kgになるよう混合し、経口投与した。投与は14日間（NCI-H1993, HARA）、21日間（A427）、または35日間（NCI-H1395）、それぞれ1日1回行い、体重及び腫瘍径を１週間に２度測定した。腫瘍体積の算出には以下の式を用いた。
[腫瘍体積（mm3）]=[腫瘍の長径（mm）] ×[腫瘍の短径（mm）]2×0.5
腫瘍体積の平均値から，下記の式に従い腫瘍増殖阻害率および腫瘍退縮率を算出した。腫瘍退縮率は、腫瘍増殖阻害率 ＞ 100%の群に関して算出した。
腫瘍増殖阻害率 (%) = (1 - 各群の平均腫瘍体積増加 ÷ 対照群の平均腫瘍体積増加) × 100
腫瘍退縮率 (%) = (1 - 各群の測定日における平均腫瘍体積 ÷ 各群の群分け時における平均腫瘍体積) × 100
なお、非小細胞肺癌由来のA427細胞、NCI-H1395細胞、NCI-H1993細胞、及びHARA細胞はATCC、JCRB細胞バンクなどから購入できる。
被験化合物Ａ１の測定最終日の抗腫瘍効果を表３に示す。
PBSとMatrigel（登録商標）とを1:1に混合した溶液に懸濁したLKB1変異陽性非小細胞肺癌細胞株であるA427細胞及びNCI-H1395細胞並びに、LKB1野生型非小細胞肺癌細胞株であるHARA細胞及びNCI-H1993細胞について、各、3×106個を、4-5週齡の雄性Balb/cヌードマウス（日本チャールス・リバー社）の背部皮下に注射して植えつけた。その後平均腫瘍体積が100mm3を超えたのを確認し、被験化合物の投与を開始した。試験は溶媒群及び化合物投与群各4-5匹で行い、溶媒群には6%シクロデキストリン水溶液を、化合物投与群には6%シクロデキストリン水溶液に被験化合物を8 mg/kgになるよう混合し、経口投与した。投与は14日間（NCI-H1993, HARA）、21日間（A427）、または35日間（NCI-H1395）、それぞれ1日1回行い、体重及び腫瘍径を１週間に２度測定した。腫瘍体積の算出には以下の式を用いた。
[腫瘍体積（mm3）]=[腫瘍の長径（mm）] ×[腫瘍の短径（mm）]2×0.5
腫瘍体積の平均値から，下記の式に従い腫瘍増殖阻害率および腫瘍退縮率を算出した。腫瘍退縮率は、腫瘍増殖阻害率 ＞ 100%の群に関して算出した。
腫瘍増殖阻害率 (%) = (1 - 各群の平均腫瘍体積増加 ÷ 対照群の平均腫瘍体積増加) × 100
腫瘍退縮率 (%) = (1 - 各群の測定日における平均腫瘍体積 ÷ 各群の群分け時における平均腫瘍体積) × 100
なお、非小細胞肺癌由来のA427細胞、NCI-H1395細胞、NCI-H1993細胞、及びHARA細胞はATCC、JCRB細胞バンクなどから購入できる。
被験化合物Ａ１の測定最終日の抗腫瘍効果を表３に示す。
試験例４ 非小細胞肺癌由来細胞担癌マウスにおける抗腫瘍試験２
PBSとMatrigel（登録商標）とを1:1に混合した溶液に懸濁したLKB1変異陽性非小細胞肺癌細胞株であるA427細胞及びNCI-H1395細胞並びに、LKB1野生型非小細胞肺癌細胞株であるHARA細胞及びNCI-H1993細胞について、各、3×106（A427細胞については5×106）個を、4-5週齡の雄性Balb/cヌードマウス（日本チャールス・リバー社）の背部皮下に注射して植えつけた。腫瘍体積がおよそ100〜300 mm3になったところで群分けを行い、被験化合物の投与を開始した。試験は溶媒群及び化合物投与群各5匹で行い、溶媒群には6%シクロデキストリン水溶液を、化合物投与群には6%シクロデキストリン水溶液に被験化合物を表４の用量になるよう混合し、経口投与した。投与は14日間（HARA）、21日間（A427、NCI-H1993）、または35日間（NCI-H1395）、それぞれ1日1回行い、体重及び腫瘍径を１週間に２度測定した。腫瘍体積の算出には以下の式を用いた。
[腫瘍体積（mm3）]=[腫瘍の長径（mm）] ×[腫瘍の短径（mm）]2×0.5
腫瘍体積の平均値から，下記の式に従い腫瘍増殖阻害率および腫瘍退縮率を算出した。腫瘍退縮率は、腫瘍増殖阻害率 ＞ 100%の群に関して算出した。
腫瘍増殖阻害率 (%) = (1 - 各群の平均腫瘍体積増加 ÷ 対照群の平均腫瘍体積増加) × 100
腫瘍退縮率 (%) = (1 - 各群の測定日における平均腫瘍体積 ÷ 各群の群分け時における平均腫瘍体積) × 100
なお、非小細胞肺癌由来のA427細胞、NCI-H1395細胞及びNCI-H1993細胞はATCCから、HARA細胞はJCRB細胞バンク等から入手できる。
被験化合物Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１の測定最終日の抗腫瘍効果を表４に示す。
PBSとMatrigel（登録商標）とを1:1に混合した溶液に懸濁したLKB1変異陽性非小細胞肺癌細胞株であるA427細胞及びNCI-H1395細胞並びに、LKB1野生型非小細胞肺癌細胞株であるHARA細胞及びNCI-H1993細胞について、各、3×106（A427細胞については5×106）個を、4-5週齡の雄性Balb/cヌードマウス（日本チャールス・リバー社）の背部皮下に注射して植えつけた。腫瘍体積がおよそ100〜300 mm3になったところで群分けを行い、被験化合物の投与を開始した。試験は溶媒群及び化合物投与群各5匹で行い、溶媒群には6%シクロデキストリン水溶液を、化合物投与群には6%シクロデキストリン水溶液に被験化合物を表４の用量になるよう混合し、経口投与した。投与は14日間（HARA）、21日間（A427、NCI-H1993）、または35日間（NCI-H1395）、それぞれ1日1回行い、体重及び腫瘍径を１週間に２度測定した。腫瘍体積の算出には以下の式を用いた。
[腫瘍体積（mm3）]=[腫瘍の長径（mm）] ×[腫瘍の短径（mm）]2×0.5
腫瘍体積の平均値から，下記の式に従い腫瘍増殖阻害率および腫瘍退縮率を算出した。腫瘍退縮率は、腫瘍増殖阻害率 ＞ 100%の群に関して算出した。
腫瘍増殖阻害率 (%) = (1 - 各群の平均腫瘍体積増加 ÷ 対照群の平均腫瘍体積増加) × 100
腫瘍退縮率 (%) = (1 - 各群の測定日における平均腫瘍体積 ÷ 各群の群分け時における平均腫瘍体積) × 100
なお、非小細胞肺癌由来のA427細胞、NCI-H1395細胞及びNCI-H1993細胞はATCCから、HARA細胞はJCRB細胞バンク等から入手できる。
被験化合物Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１の測定最終日の抗腫瘍効果を表４に示す。
以上の結果から、本発明の医薬組成物の有効成分である、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物ＤがミトコンドリアComplex Iを阻害し、さらにAMPK活性化作用をも有することが確認された。また、非小細胞肺癌由来細胞担癌マウスに対して抗腫瘍作用を有することが確認された。さらにLKB1変異陽性非小細胞肺癌由来細胞担癌マウスに対して抗腫瘍作用を有することが確認された。特にLKB1変異陽性非小細胞肺癌由来細胞を移植したマウスでは、被験化合物のいくつかは腫瘍の退縮という強い抗腫瘍効果を示すことが確認された。
従って、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄから選択される化合物、又はその製薬学的に許容される塩は、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌、ある態様としては、非小細胞肺癌、ある態様としては、ミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌、ある態様としてはLKB1に変異及び／又は欠損を有する非小細胞肺癌、ある態様としてはLKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌の治療に使用できる。
化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄから選択される化合物、又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物は、任意の添加剤として賦形剤を含んでいてもよく、また当分野において通常用いられている賦形剤、即ち、薬剤用賦形剤や薬剤用担体等を用いて、通常使用されている方法によって調製することができる。
投与は錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤等による経口投与、又は、関節内、静脈内、筋肉内等の注射剤、坐剤、経皮用液剤、軟膏剤、経皮用貼付剤、経粘膜液剤、経粘膜貼付剤、吸入剤等による非経口投与のいずれの形態であってもよい。
投与は錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤等による経口投与、又は、関節内、静脈内、筋肉内等の注射剤、坐剤、経皮用液剤、軟膏剤、経皮用貼付剤、経粘膜液剤、経粘膜貼付剤、吸入剤等による非経口投与のいずれの形態であってもよい。
経口投与のための固体組成物としては、錠剤、散剤、顆粒剤等が用いられる。このような固体組成物においては、1種又は2種以上の有効成分を、少なくとも1種の不活性な賦形剤と混合される。組成物は、常法に従って、不活性な添加剤、例えば滑沢剤や崩壊剤、安定化剤、溶解補助剤を含有していてもよい。錠剤又は丸剤は必要により糖衣又は胃溶性若しくは腸溶性物質のフィルムで被膜してもよい。
経口投与のための液体組成物は、薬剤的に許容される乳濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤又はエリキシル剤等を含み、一般的に用いられる不活性な希釈剤、例えば精製水又はエタノールを含む。当該液体組成物は不活性な希釈剤以外に可溶化剤、湿潤剤、懸濁剤のような補助剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、防腐剤を含有していてもよい。
経口投与のための液体組成物は、薬剤的に許容される乳濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤又はエリキシル剤等を含み、一般的に用いられる不活性な希釈剤、例えば精製水又はエタノールを含む。当該液体組成物は不活性な希釈剤以外に可溶化剤、湿潤剤、懸濁剤のような補助剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、防腐剤を含有していてもよい。
非経口投与のための注射剤は、無菌の水性又は非水性の溶液剤、懸濁剤又は乳濁剤を含有する。水性の溶剤としては、例えば注射用蒸留水又は生理食塩液が含まれる。非水性の溶剤としては、例えばエタノールのようなアルコール類がある。このような組成物は、さらに等張化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、又は溶解補助剤を含んでもよい。これらは例えばバクテリア保留フィルターを通す濾過、殺菌剤の配合又は照射によって無菌化される。また、これらは無菌の固体組成物を製造し、使用前に無菌水又は無菌の注射用溶媒に溶解又は懸濁して使用することもできる。
外用剤としては、軟膏剤、硬膏剤、クリーム剤、ゼリー剤、パップ剤、噴霧剤、ローション剤等を包含する。一般に用いられる軟膏基剤、ローション基剤、水性又は非水性の液剤、懸濁剤、乳剤等を含有する。
吸入剤や経鼻剤等の経粘膜剤は固体、液体又は半固体状のものが用いられ、従来公知の方法に従って製造することができる。例えば公知の賦形剤や、更に、pH調整剤、防腐剤、界面活性剤、滑沢剤、安定剤や増粘剤等が適宜添加されていてもよい。投与は、適当な吸入又は吹送のためのデバイスを使用することができる。例えば、計量投与吸入デバイス等の公知のデバイスや噴霧器を使用して、化合物を単独で又は処方された混合物の粉末として、もしくは医薬的に許容し得る担体と組み合わせて溶液又は懸濁液として投与することができる。乾燥粉末吸入器等は、単回又は多数回の投与用のものであってもよく、乾燥粉末又は粉末含有カプセルを利用することができる。あるいは、適当な駆出剤、例えば、クロロフルオロアルカン又は二酸化炭素等の好適な気体を使用した加圧エアゾールスプレー等の形態であってもよい。
通常経口投与の場合、1日の投与量は、体重当たり約0.001〜100mg/kg、好ましくは0.1〜30mg/kg、更に好ましくは0.1〜10mg/kgが適当であり、これを1回であるいは2回〜4回に分けて投与する。静脈内投与される場合は、1日の投与量は、体重当たり約0.0001〜10mg/kgが適当で、1日1回〜複数回に分けて投与する。また、経粘膜剤としては、体重当たり約0.001〜100mg/kgを1日1回〜複数回に分けて投与する。投与量は症状、年令、性別等を考慮して個々の場合に応じて適宜決定される。
投与経路、剤形、投与部位、賦形剤や添加剤の種類によって異なるが、本発明の医薬組成物は0.01〜100重量%、ある態様としては0.01〜50重量%の有効成分である化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄから選択される化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する。
本発明の医薬組成物は、肺癌、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌、特に非小細胞肺癌に有効性を示すと考えられる種々の治療剤と併用することができる可能性がある。当該併用は、同時投与、あるいは別個に連続して、若しくは所望の時間間隔をおいて投与してもよい。同時投与の場合には、配合剤であっても別個に製剤化されていてもよい。
以下、実施例に基づき、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄの製造法を詳細に説明する。また、それらの原料化合物の製法を製造例に示す。また、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄの製造法は、以下に示される具体的実施例の製造法のみに限定されるものではなく、これらの製造法の別の組み合わせ、あるいは当業者に自明である方法によっても製造されうる。
本明細書において、化合物の命名にACD/Name（登録商標、Advanced Chemistry Development, Inc.）等の命名ソフトを使用している場合がある。
また、便宜上、濃度mol/lをMとして表す。例えば、1M水酸化ナトリウム水溶液は1mol/lの水酸化ナトリウム水溶液であることを意味する。
粉末X線回折は、RINT-TTRII(RIGAKU社)を用い、管球：Cu、管電流：300mA、管電圧：50kV、サンプリング幅：0.020°、走査速度：4°/min、波長：1.54056Å、測定回折角範囲（2θ）：2.5〜40°の条件で測定し、データ処理を含む装置の取り扱いは、各装置で指示された方法及び手順に従った。
各結晶はそれぞれ粉末X線回折パターンで特徴付けられるが、粉末X線回折はデータの性質上、結晶の同一性認定においては、結晶格子間隔や全体的なパターンが重要であり、回折角及び回折強度は結晶成長の方向、粒子の大きさ、測定条件によって多少変わりうるものであるから、厳密に解されるべきではない。粉末X線回折パターンにおける回折角（2θ（°））は、当該測定方法において通常許容される誤差範囲を考慮して解釈され、ある態様としては、±0.2°の誤差範囲を取りうる。
各結晶はそれぞれ粉末X線回折パターンで特徴付けられるが、粉末X線回折はデータの性質上、結晶の同一性認定においては、結晶格子間隔や全体的なパターンが重要であり、回折角及び回折強度は結晶成長の方向、粒子の大きさ、測定条件によって多少変わりうるものであるから、厳密に解されるべきではない。粉末X線回折パターンにおける回折角（2θ（°））は、当該測定方法において通常許容される誤差範囲を考慮して解釈され、ある態様としては、±0.2°の誤差範囲を取りうる。
製造例１
5-ブロモ-1H-ベンゾイミダゾール-2-カルボン酸(1.0g)、1-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン（1.0g）、1H-ベンゾトリアゾール-1-オール（840mg）及びN,N-ジメチルホルムアミド（10ml：以下、DMFと略記する）の混合物にN-[3-(ジメチルアミノ)プロピル]-N'-エチルカルボジイミド 塩酸塩(1.2g)を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、室温で1時間撹拌し、生じた固体を濾取後、減圧下乾燥した。得られた固体をクロロホルム（100ml）及びエタノール(1ml)の混合物に加熱還流下溶解した。混合物を室温まで冷却後、ヘキサン（100ml）を加えた。生じた固体を濾取後、減圧下乾燥し、(5-ブロモ-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（1.4g）を固体として得た。
5-ブロモ-1H-ベンゾイミダゾール-2-カルボン酸(1.0g)、1-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン（1.0g）、1H-ベンゾトリアゾール-1-オール（840mg）及びN,N-ジメチルホルムアミド（10ml：以下、DMFと略記する）の混合物にN-[3-(ジメチルアミノ)プロピル]-N'-エチルカルボジイミド 塩酸塩(1.2g)を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、室温で1時間撹拌し、生じた固体を濾取後、減圧下乾燥した。得られた固体をクロロホルム（100ml）及びエタノール(1ml)の混合物に加熱還流下溶解した。混合物を室温まで冷却後、ヘキサン（100ml）を加えた。生じた固体を濾取後、減圧下乾燥し、(5-ブロモ-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（1.4g）を固体として得た。
製造例２
(5-ブロモ-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（1.2g）、4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-3,6-ジヒドロピリジン-1(2H)-カルボン酸tert-ブチル（1.6g）、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(590mg)、炭酸ナトリウム(2.2g)、ジオキサン（40ml）及び水（10ml）の混合物をアルゴン雰囲気下、95℃で24時間撹拌後、室温まで放冷した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、4-[2-({4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}カルボニル)-1H-ベンゾイミダゾール-5-イル]-3,6-ジヒドロピリジン-1(2H)-カルボン酸tert-ブチル(1.2g)を油状物として得た。
(5-ブロモ-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（1.2g）、4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-3,6-ジヒドロピリジン-1(2H)-カルボン酸tert-ブチル（1.6g）、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(590mg)、炭酸ナトリウム(2.2g)、ジオキサン（40ml）及び水（10ml）の混合物をアルゴン雰囲気下、95℃で24時間撹拌後、室温まで放冷した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、4-[2-({4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}カルボニル)-1H-ベンゾイミダゾール-5-イル]-3,6-ジヒドロピリジン-1(2H)-カルボン酸tert-ブチル(1.2g)を油状物として得た。
製造例３
4-[2-({4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}カルボニル)-1H-ベンゾイミダゾール-5-イル]-3,6-ジヒドロピリジン-1(2H)-カルボン酸tert-ブチル（1.4g）のエタノール(40ml)溶液に10%パラジウム-活性炭（約50%含水品、500mg）を加え、水素雰囲気下、室温で6時間撹拌した。不溶物を除去後、減圧下溶媒を留去し、得られた残渣のエタノール(40ml)溶液に10%パラジウム-活性炭（約50%含水品、500mg）を加え、3.0kgf/cm2の水素雰囲気下、室温で4時間撹拌した。不溶物を除去後、減圧下溶媒を留去し、得られた残渣のメタノール(41ml)溶液に20%水酸化パラジウム-活性炭（約50%含水品、800mg）を加え、3.0kgf/cm2の水素雰囲気下、室温で24時間撹拌した。不溶物を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、4-[2-({4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}カルボニル)-1H-ベンゾイミダゾール-5-イル]ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(1.1g)を油状物として得た。
4-[2-({4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}カルボニル)-1H-ベンゾイミダゾール-5-イル]-3,6-ジヒドロピリジン-1(2H)-カルボン酸tert-ブチル（1.4g）のエタノール(40ml)溶液に10%パラジウム-活性炭（約50%含水品、500mg）を加え、水素雰囲気下、室温で6時間撹拌した。不溶物を除去後、減圧下溶媒を留去し、得られた残渣のエタノール(40ml)溶液に10%パラジウム-活性炭（約50%含水品、500mg）を加え、3.0kgf/cm2の水素雰囲気下、室温で4時間撹拌した。不溶物を除去後、減圧下溶媒を留去し、得られた残渣のメタノール(41ml)溶液に20%水酸化パラジウム-活性炭（約50%含水品、800mg）を加え、3.0kgf/cm2の水素雰囲気下、室温で24時間撹拌した。不溶物を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、4-[2-({4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}カルボニル)-1H-ベンゾイミダゾール-5-イル]ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(1.1g)を油状物として得た。
製造例４
4-[2-({4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}カルボニル)-1H-ベンゾイミダゾール-5-イル]ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(1.1g)の酢酸エチル（30ml）溶液に4M塩化水素/酢酸エチル溶液(5ml)を加え、室温で6時間撹拌し、終夜静置した。減圧下溶媒を留去し、得られた残渣に酢酸エチル及びヘキサンを加えた。生じた固体を濾取後、減圧下乾燥し、[5-(ピペリジン-4-イル)-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル]{4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノンの塩酸塩(740mg：但し、塩化水素とのモル比は未決定)を固体として得た。
4-[2-({4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}カルボニル)-1H-ベンゾイミダゾール-5-イル]ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル(1.1g)の酢酸エチル（30ml）溶液に4M塩化水素/酢酸エチル溶液(5ml)を加え、室温で6時間撹拌し、終夜静置した。減圧下溶媒を留去し、得られた残渣に酢酸エチル及びヘキサンを加えた。生じた固体を濾取後、減圧下乾燥し、[5-(ピペリジン-4-イル)-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル]{4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノンの塩酸塩(740mg：但し、塩化水素とのモル比は未決定)を固体として得た。
製造例５
4-[2-({4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}カルボニル)-1H-ベンゾイミダゾール-5-イル]ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル（270mg）のジクロロメタン（2ml）溶液にトリフルオロ酢酸（1ml）を加え、室温で30分間撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、[5-(ピペリジン-4-イル)-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル]{4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（150mg）をアモルファスとして得た。
4-[2-({4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}カルボニル)-1H-ベンゾイミダゾール-5-イル]ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル（270mg）のジクロロメタン（2ml）溶液にトリフルオロ酢酸（1ml）を加え、室温で30分間撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、[5-(ピペリジン-4-イル)-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル]{4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（150mg）をアモルファスとして得た。
製造例６
6-ブロモ-1H-インドール-2-カルボン酸（1.0g）、N-[3-(ジメチルアミノ)プロピル]-N'-エチルカルボジイミド 塩酸塩（1.1g）、1H-ベンゾトリアゾール-1-オール（770mg）及びジクロロメタン（15ml）の混合物を室温で10分間撹拌した。反応混合物に4-(ピペラジン-1-イルメチル)ベンゾニトリル 二塩酸塩（1.2g）及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン（1.6ml）を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した後、クロロホルム-メタノールで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、4-({4-[(6-ブロモ-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリル（1.1g）を固体として得た。
6-ブロモ-1H-インドール-2-カルボン酸（1.0g）、N-[3-(ジメチルアミノ)プロピル]-N'-エチルカルボジイミド 塩酸塩（1.1g）、1H-ベンゾトリアゾール-1-オール（770mg）及びジクロロメタン（15ml）の混合物を室温で10分間撹拌した。反応混合物に4-(ピペラジン-1-イルメチル)ベンゾニトリル 二塩酸塩（1.2g）及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン（1.6ml）を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した後、クロロホルム-メタノールで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、4-({4-[(6-ブロモ-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリル（1.1g）を固体として得た。
製造例７
4-({4-[(6-ブロモ-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリル（1.1g）、4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-3,6-ジヒドロピリジン-1(2H)-カルボン酸tert-ブチル（1.6g）、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム（480mg）、炭酸ナトリウム（790mg）、ジオキサン（18ml）及び水（1.8ml）の混合物をアルゴン雰囲気下、100℃で終夜撹拌後、室温まで放冷した。反応混合物に水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール、次いでヘキサン-酢酸エチル）により精製し、得られた固体をジイソプロピルエーテルを用いて洗浄して4-(2-{[4-(4-シアノベンジル)ピペラジン-1-イル]カルボニル}-1H-インドール-6-イル)-3,6-ジヒドロピリジン-1(2H)-カルボン酸tert-ブチル（470mg）を固体として得た。
4-({4-[(6-ブロモ-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリル（1.1g）、4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-3,6-ジヒドロピリジン-1(2H)-カルボン酸tert-ブチル（1.6g）、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム（480mg）、炭酸ナトリウム（790mg）、ジオキサン（18ml）及び水（1.8ml）の混合物をアルゴン雰囲気下、100℃で終夜撹拌後、室温まで放冷した。反応混合物に水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール、次いでヘキサン-酢酸エチル）により精製し、得られた固体をジイソプロピルエーテルを用いて洗浄して4-(2-{[4-(4-シアノベンジル)ピペラジン-1-イル]カルボニル}-1H-インドール-6-イル)-3,6-ジヒドロピリジン-1(2H)-カルボン酸tert-ブチル（470mg）を固体として得た。
製造例８
4-(2-{[4-(4-シアノベンジル)ピペラジン-1-イル]カルボニル}-1H-インドール-6-イル)-3,6-ジヒドロピリジン-1(2H)-カルボン酸tert-ブチル（470mg）、テトラヒドロフラン（以下、THFと略記する）（14ml）及びエタノール（3ml）の混合物に10%パラジウム-活性炭（約50%含水品、230mg）を加え、水素雰囲気下、室温で2時間撹拌した。不溶物を除去後、減圧下溶媒を留去し、得られた残渣、THF（14ml）及びエタノール（3ml）の混合物に10%パラジウム-活性炭（約50%含水品、230mg）を加え、水素雰囲気下、室温で終夜撹拌した。不溶物を除去後、減圧下溶媒を留去し、得られた残渣、THF（14ml）及びエタノール（3ml）の混合物に20%水酸化パラジウム-活性炭（約50%含水品、230mg）を加え、3.0kgf/cm2の水素雰囲気下、室温で4時間撹拌した後、3日間静置した。不溶物を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、4-[2-(ピペラジン-1-イルカルボニル)-1H-インドール-6-イル]ピペリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル（360mg）を油状物として得た。
4-(2-{[4-(4-シアノベンジル)ピペラジン-1-イル]カルボニル}-1H-インドール-6-イル)-3,6-ジヒドロピリジン-1(2H)-カルボン酸tert-ブチル（470mg）、テトラヒドロフラン（以下、THFと略記する）（14ml）及びエタノール（3ml）の混合物に10%パラジウム-活性炭（約50%含水品、230mg）を加え、水素雰囲気下、室温で2時間撹拌した。不溶物を除去後、減圧下溶媒を留去し、得られた残渣、THF（14ml）及びエタノール（3ml）の混合物に10%パラジウム-活性炭（約50%含水品、230mg）を加え、水素雰囲気下、室温で終夜撹拌した。不溶物を除去後、減圧下溶媒を留去し、得られた残渣、THF（14ml）及びエタノール（3ml）の混合物に20%水酸化パラジウム-活性炭（約50%含水品、230mg）を加え、3.0kgf/cm2の水素雰囲気下、室温で4時間撹拌した後、3日間静置した。不溶物を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、4-[2-(ピペラジン-1-イルカルボニル)-1H-インドール-6-イル]ピペリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル（360mg）を油状物として得た。
製造例９
4-[2-(ピペラジン-1-イルカルボニル)-1H-インドール-6-イル]ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル（350mg）、4-ホルミルベンゾニトリル（140mg）及びジクロロメタン（3ml）の混合物にトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（360mg）を加え、室温で1.5時間撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及びメタノールを加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、4-(2-{[4-(4-シアノベンジル)ピペラジン-1-イル]カルボニル}-1H-インドール-6-イル)ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル（450mg）を油状物として得た。
4-[2-(ピペラジン-1-イルカルボニル)-1H-インドール-6-イル]ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル（350mg）、4-ホルミルベンゾニトリル（140mg）及びジクロロメタン（3ml）の混合物にトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（360mg）を加え、室温で1.5時間撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及びメタノールを加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、4-(2-{[4-(4-シアノベンジル)ピペラジン-1-イル]カルボニル}-1H-インドール-6-イル)ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル（450mg）を油状物として得た。
製造例１０
4-(2-{[4-(4-シアノベンジル)ピペラジン-1-イル]カルボニル}-1H-インドール-6-イル)ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル（450mg）のDMF（4ml）溶液に、氷冷下、水素化ナトリウム(流動パラフィン約45%含有、40mg)を加え、室温で1時間撹拌した。反応混合物に室温にてヨウ化メチル（58μl）を加え、室温で1時間撹拌した。反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液及び水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を水、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、4-(2-{[4-(4-シアノベンジル)ピペラジン-1-イル]カルボニル}-1-メチル-1H-インドール-6-イル)ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル（200mg）を油状物として得た。
4-(2-{[4-(4-シアノベンジル)ピペラジン-1-イル]カルボニル}-1H-インドール-6-イル)ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル（450mg）のDMF（4ml）溶液に、氷冷下、水素化ナトリウム(流動パラフィン約45%含有、40mg)を加え、室温で1時間撹拌した。反応混合物に室温にてヨウ化メチル（58μl）を加え、室温で1時間撹拌した。反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液及び水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を水、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、4-(2-{[4-(4-シアノベンジル)ピペラジン-1-イル]カルボニル}-1-メチル-1H-インドール-6-イル)ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル（200mg）を油状物として得た。
製造例１１
4-(2-{[4-(4-シアノベンジル)ピペラジン-1-イル]カルボニル}-1-メチル-1H-インドール-6-イル)ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル（200mg）のジクロロメタン（1ml）溶液に室温にてトリフルオロ酢酸（500μl）を加え、室温で2時間撹拌した。減圧下溶媒を留去し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、4-[(4-{[1-メチル-6-(ピペリジン-4-イル)-1H-インドール-2-イル]カルボニル}ピペラジン-1-イル)メチル]ベンゾニトリル（120mg）を固体として得た。
4-(2-{[4-(4-シアノベンジル)ピペラジン-1-イル]カルボニル}-1-メチル-1H-インドール-6-イル)ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル（200mg）のジクロロメタン（1ml）溶液に室温にてトリフルオロ酢酸（500μl）を加え、室温で2時間撹拌した。減圧下溶媒を留去し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、4-[(4-{[1-メチル-6-(ピペリジン-4-イル)-1H-インドール-2-イル]カルボニル}ピペラジン-1-イル)メチル]ベンゾニトリル（120mg）を固体として得た。
製造例１２
5-エトキシピラジン-2-カルボン酸エチル（4.5g）のメタノール（100ml）溶液に氷冷下、水素化ホウ素ナトリウム（2.6g）を数回に分けて加え、室温で6時間撹拌した。反応混合物に1M塩酸を加えてpH4とした後、室温で15分間撹拌した。混合物に1M水酸化ナトリウム水溶液を加えてpH9とした後、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル）により精製し、(5-エトキシピラジン-2-イル)メタノール（2.6g）を油状物として得た。
5-エトキシピラジン-2-カルボン酸エチル（4.5g）のメタノール（100ml）溶液に氷冷下、水素化ホウ素ナトリウム（2.6g）を数回に分けて加え、室温で6時間撹拌した。反応混合物に1M塩酸を加えてpH4とした後、室温で15分間撹拌した。混合物に1M水酸化ナトリウム水溶液を加えてpH9とした後、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル）により精製し、(5-エトキシピラジン-2-イル)メタノール（2.6g）を油状物として得た。
製造例１３
(5-エトキシピラジン-2-イル)メタノール（150mg）のジクロロメタン（3ml）溶液に氷冷下、塩化チオニル（200μl）を加え、室温で30分間撹拌した。減圧下濃縮し、2-(クロロメチル)-5-エトキシピラジン（160mg）を油状物として得た。
(5-エトキシピラジン-2-イル)メタノール（150mg）のジクロロメタン（3ml）溶液に氷冷下、塩化チオニル（200μl）を加え、室温で30分間撹拌した。減圧下濃縮し、2-(クロロメチル)-5-エトキシピラジン（160mg）を油状物として得た。
製造例１４
5-ブロモ-1H-インドール-2-カルボン酸エチル（5.2g）、4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-3,6-ジヒドロピリジン-1(2H)-カルボン酸tert-ブチル（13g）、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム（5.3g）、2M炭酸ナトリウム水溶液（28ml）及びジオキサン（110ml）の混合物をアルゴン雰囲気下、95℃で17時間撹拌後、室温まで放冷した。反応混合物に水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル、次いでクロロホルム-メタノール）及びアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル）により精製し、得られた固体（6.5g）にヘキサン-ジイソプロピルエーテルを加え、粉末化した。固体を濾取後、減圧下乾燥して、5-[1-(tert-ブトキシカルボニル)-1,2,3,6-テトラヒドロピリジン-4-イル]-1H-インドール-2-カルボン酸エチル（5.0g）を固体として得た。
5-ブロモ-1H-インドール-2-カルボン酸エチル（5.2g）、4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-3,6-ジヒドロピリジン-1(2H)-カルボン酸tert-ブチル（13g）、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム（5.3g）、2M炭酸ナトリウム水溶液（28ml）及びジオキサン（110ml）の混合物をアルゴン雰囲気下、95℃で17時間撹拌後、室温まで放冷した。反応混合物に水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル、次いでクロロホルム-メタノール）及びアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル）により精製し、得られた固体（6.5g）にヘキサン-ジイソプロピルエーテルを加え、粉末化した。固体を濾取後、減圧下乾燥して、5-[1-(tert-ブトキシカルボニル)-1,2,3,6-テトラヒドロピリジン-4-イル]-1H-インドール-2-カルボン酸エチル（5.0g）を固体として得た。
製造例１５
5-[1-(tert-ブトキシカルボニル)-1,2,3,6-テトラヒドロピリジン-4-イル]-1H-インドール-2-カルボン酸エチル（5.0g）、エタノール（55ml）及びTHF（55ml）の混合物に20%水酸化パラジウム-活性炭（約50%含水品、1.0g）を加え、水素雰囲気下、室温で3時間撹拌した。不溶物を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル）により精製し、5-[1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-4-イル]-1H-インドール-2-カルボン酸エチル（4.8g）を固体として得た。
5-[1-(tert-ブトキシカルボニル)-1,2,3,6-テトラヒドロピリジン-4-イル]-1H-インドール-2-カルボン酸エチル（5.0g）、エタノール（55ml）及びTHF（55ml）の混合物に20%水酸化パラジウム-活性炭（約50%含水品、1.0g）を加え、水素雰囲気下、室温で3時間撹拌した。不溶物を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル）により精製し、5-[1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-4-イル]-1H-インドール-2-カルボン酸エチル（4.8g）を固体として得た。
製造例１６
5-[1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-4-イル]-1H-インドール-2-カルボン酸エチル（4.8g）、炭酸セシウム（7.0g）及びアセトニトリル（70ml）の混合物に硫酸ジメチル（1.8ml）を加え、75℃で2時間撹拌後、室温まで放冷した。反応混合物に酢酸エチルを加えた後、水、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去し、5-[1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-4-イル]-1-メチル-1H-インドール-2-カルボン酸エチル（5.7g）を油状物として得た。
5-[1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-4-イル]-1H-インドール-2-カルボン酸エチル（4.8g）、炭酸セシウム（7.0g）及びアセトニトリル（70ml）の混合物に硫酸ジメチル（1.8ml）を加え、75℃で2時間撹拌後、室温まで放冷した。反応混合物に酢酸エチルを加えた後、水、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去し、5-[1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-4-イル]-1-メチル-1H-インドール-2-カルボン酸エチル（5.7g）を油状物として得た。
製造例１７
5-[1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-4-イル]-1-メチル-1H-インドール-2-カルボン酸エチル（5.7g）、ジオキサン（23ml）及びエタノール（23ml）の混合物に1M水酸化ナトリウム水溶液(23ml)を加え、60℃で終夜撹拌後、室温まで放冷した。反応混合物に氷冷下、1M塩酸（23ml）を加えクロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去し、5-[1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-4-イル]-1-メチル-1H-インドール-2-カルボン酸（4.8g）をアモルファスとして得た。
5-[1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-4-イル]-1-メチル-1H-インドール-2-カルボン酸エチル（5.7g）、ジオキサン（23ml）及びエタノール（23ml）の混合物に1M水酸化ナトリウム水溶液(23ml)を加え、60℃で終夜撹拌後、室温まで放冷した。反応混合物に氷冷下、1M塩酸（23ml）を加えクロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去し、5-[1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-4-イル]-1-メチル-1H-インドール-2-カルボン酸（4.8g）をアモルファスとして得た。
製造例１８
5-[1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-4-イル]-1-メチル-1H-インドール-2-カルボン酸（4.8g）、1H-ベンゾトリアゾール-1-オール（1.9g）、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（6.8ml）及びジクロロメタン（55ml）の混合物に4-(ピペラジン-1-イルメチル)ベンゾニトリル 二塩酸塩（4.0g）及びN-[3-(ジメチルアミノ)プロピル]-N'-エチルカルボジイミド 塩酸塩（3.1g）を加え、室温で2時間撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル）により精製し、4-(2-{[4-(4-シアノベンジル)ピペラジン-1-イル]カルボニル}-1-メチル-1H-インドール-5-イル)ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル（6.8g）をアモルファスとして得た。
5-[1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-4-イル]-1-メチル-1H-インドール-2-カルボン酸（4.8g）、1H-ベンゾトリアゾール-1-オール（1.9g）、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（6.8ml）及びジクロロメタン（55ml）の混合物に4-(ピペラジン-1-イルメチル)ベンゾニトリル 二塩酸塩（4.0g）及びN-[3-(ジメチルアミノ)プロピル]-N'-エチルカルボジイミド 塩酸塩（3.1g）を加え、室温で2時間撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル）により精製し、4-(2-{[4-(4-シアノベンジル)ピペラジン-1-イル]カルボニル}-1-メチル-1H-インドール-5-イル)ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル（6.8g）をアモルファスとして得た。
製造例１９
4-(2-{[4-(4-シアノベンジル)ピペラジン-1-イル]カルボニル}-1-メチル-1H-インドール-5-イル)ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル（6.8g）のジクロロメタン（10ml）溶液に室温にてトリフルオロ酢酸（5ml）を加え、室温で2時間撹拌した。減圧下溶媒を留去し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去し、4-[(4-{[1-メチル-5-(ピペリジン-4-イル)-1H-インドール-2-イル]カルボニル}ピペラジン-1-イル)メチル]ベンゾニトリル（7.1g）をアモルファスとして得た。
4-(2-{[4-(4-シアノベンジル)ピペラジン-1-イル]カルボニル}-1-メチル-1H-インドール-5-イル)ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル（6.8g）のジクロロメタン（10ml）溶液に室温にてトリフルオロ酢酸（5ml）を加え、室温で2時間撹拌した。減圧下溶媒を留去し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去し、4-[(4-{[1-メチル-5-(ピペリジン-4-イル)-1H-インドール-2-イル]カルボニル}ピペラジン-1-イル)メチル]ベンゾニトリル（7.1g）をアモルファスとして得た。
実施例１
[5-(ピペリジン-4-イル)-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル]{4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピぺラジン-1-イル}メタノンの塩酸塩（200mg）、6-メトキシニコチンアルデヒド（100mg）、トリエチルアミン（140μl）、酢酸（100μｌ）及びジクロロメタン（4ml）の混合物を室温で10分間撹拌した。反応混合物にトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（580mg）を室温にて加え、室温で2時間撹拌した後、室温で終夜静置した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた粗生成物をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、得られた油状物（化合物Ａ；110mg）のアセトン溶液にトシル酸一水和物（69mg）を加え、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣にエタノール（3ml）及びジイソプロピルエーテル（20ml）を加え、室温で撹拌した。生じた固体を濾取後、減圧下乾燥して、(5-{1-[(6-メトキシピリジン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピぺラジン-1-イル}メタノン（化合物Ａ）の二トシル酸塩（180mg）をアモルファスとして得た。また、上記と同様にして製造した化合物Ａ（200mg）とアセトニトリル（10ml）の混合物を95℃で30分間撹拌した後、トシル酸一水和物（130mg）を加えた。混合物を室温まで撹拌下放冷後、室温で7日間撹拌した。生じた固体を濾取後、減圧下乾燥して、(5-{1-[(6-メトキシピリジン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（化合物Ａ）の二トシル酸塩（300mg）を結晶として得た。この結晶の粉末X線回折データを後記表１０に示す。
[5-(ピペリジン-4-イル)-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル]{4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピぺラジン-1-イル}メタノンの塩酸塩（200mg）、6-メトキシニコチンアルデヒド（100mg）、トリエチルアミン（140μl）、酢酸（100μｌ）及びジクロロメタン（4ml）の混合物を室温で10分間撹拌した。反応混合物にトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（580mg）を室温にて加え、室温で2時間撹拌した後、室温で終夜静置した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた粗生成物をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、得られた油状物（化合物Ａ；110mg）のアセトン溶液にトシル酸一水和物（69mg）を加え、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣にエタノール（3ml）及びジイソプロピルエーテル（20ml）を加え、室温で撹拌した。生じた固体を濾取後、減圧下乾燥して、(5-{1-[(6-メトキシピリジン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピぺラジン-1-イル}メタノン（化合物Ａ）の二トシル酸塩（180mg）をアモルファスとして得た。また、上記と同様にして製造した化合物Ａ（200mg）とアセトニトリル（10ml）の混合物を95℃で30分間撹拌した後、トシル酸一水和物（130mg）を加えた。混合物を室温まで撹拌下放冷後、室温で7日間撹拌した。生じた固体を濾取後、減圧下乾燥して、(5-{1-[(6-メトキシピリジン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（化合物Ａ）の二トシル酸塩（300mg）を結晶として得た。この結晶の粉末X線回折データを後記表１０に示す。
実施例２
[5-(ピペリジン-4-イル)-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル]{4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（47mg）、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(68μl)、アセトニトリル（1ml）及びDMF(1ml)の混合物に2-(クロロメチル)-5-メトキシピラジン（16mg）を加え、室温で5日間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、得られた油状物（化合物Ｂ；38mg）のアセトン（2ml）溶液にトシル酸一水和物（24mg）及び酢酸エチル（3ml）を加え、室温で終夜撹拌した。生じた固体を濾取後、減圧下乾燥して、(5-{1-[(5-メトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（化合物Ｂ）の二トシル酸塩（53mg）を固体として得た。また、上記と同様にして製造した化合物Ｂ（200mg）、アセトン（18ml）及びアセトニトリル（3ml）の混合物を80℃で撹拌した後、トシル酸一水和物（130mg）を加えた。混合物を室温まで撹拌下放冷後、室温で72時間撹拌した。生じた固体を濾取後、減圧下乾燥して、(5-{1-[(5-メトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（化合物Ｂ）の二トシル酸塩（300mg）を結晶として得た。この結晶の粉末X線回折データを後記表１０に示す。
[5-(ピペリジン-4-イル)-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル]{4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（47mg）、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(68μl)、アセトニトリル（1ml）及びDMF(1ml)の混合物に2-(クロロメチル)-5-メトキシピラジン（16mg）を加え、室温で5日間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を除去後、減圧下溶媒を留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）により精製し、得られた油状物（化合物Ｂ；38mg）のアセトン（2ml）溶液にトシル酸一水和物（24mg）及び酢酸エチル（3ml）を加え、室温で終夜撹拌した。生じた固体を濾取後、減圧下乾燥して、(5-{1-[(5-メトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（化合物Ｂ）の二トシル酸塩（53mg）を固体として得た。また、上記と同様にして製造した化合物Ｂ（200mg）、アセトン（18ml）及びアセトニトリル（3ml）の混合物を80℃で撹拌した後、トシル酸一水和物（130mg）を加えた。混合物を室温まで撹拌下放冷後、室温で72時間撹拌した。生じた固体を濾取後、減圧下乾燥して、(5-{1-[(5-メトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン（化合物Ｂ）の二トシル酸塩（300mg）を結晶として得た。この結晶の粉末X線回折データを後記表１０に示す。
実施例３
4-[(4-{[1-メチル-6-(ピペリジン-4-イル)-1H-インドール-2-イル]カルボニル}ピペラジン-1-イル)メチル]ベンゾニトリル（120mg）、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（160μl）、アセトニトリル（1ml）の混合物に2-(クロロメチル)-5-エトキシピラジン（53mg）のアセトニトリル（500μl）溶液を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物の溶媒を減圧下留去した後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）及びDIOLシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル）により精製した。得られた固体（110mg）とアセトン（3ml）の混合物を80℃にて撹拌した後、トシル酸一水和物（68mg）を加えた。混合物を室温まで撹拌下放冷後、室温で終夜撹拌した。生じた固体を濾取後、減圧下乾燥して、4-({4-[(6-{1-[(5-エトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1-メチル-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリル（化合物Ｃ）の二トシル酸塩（130mg）を結晶として得た。この結晶の粉末X線回折データを後記表１０に示す。
4-[(4-{[1-メチル-6-(ピペリジン-4-イル)-1H-インドール-2-イル]カルボニル}ピペラジン-1-イル)メチル]ベンゾニトリル（120mg）、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（160μl）、アセトニトリル（1ml）の混合物に2-(クロロメチル)-5-エトキシピラジン（53mg）のアセトニトリル（500μl）溶液を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物の溶媒を減圧下留去した後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）及びDIOLシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル）により精製した。得られた固体（110mg）とアセトン（3ml）の混合物を80℃にて撹拌した後、トシル酸一水和物（68mg）を加えた。混合物を室温まで撹拌下放冷後、室温で終夜撹拌した。生じた固体を濾取後、減圧下乾燥して、4-({4-[(6-{1-[(5-エトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1-メチル-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリル（化合物Ｃ）の二トシル酸塩（130mg）を結晶として得た。この結晶の粉末X線回折データを後記表１０に示す。
実施例４
4-[(4-{[1-メチル-5-(ピペリジン-4-イル)-1H-インドール-2-イル]カルボニル}ピペラジン-1-イル)メチル]ベンゾニトリル（2.0g）、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（2.7ml）、アセトニトリル（10ml）の混合物に2-(クロロメチル)-5-メトキシピラジン（760mg）のジクロロメタン（5ml）溶液を加え、室温で5日間撹拌した。反応混合物の溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）およびアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル、次いでクロロホルム-メタノール）により精製し、アモルファス（1.4g）を得た。得られたアモルファス（1.2g）をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-酢酸エチル）により精製し、得られた固体（760mg）とアセトン（100ml）の混合物を80℃で30分間加熱撹拌した後、トシル酸一水和物（510mg）を加えた。混合物を室温まで撹拌下放冷後、室温で4時間撹拌した。生じた固体を濾取後、減圧下乾燥して、4-({4-[(5-{1-[(5-メトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1-メチル-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリル（化合物Ｄ）の二トシル酸塩（1.1g）を結晶として得た。この結晶の粉末X線回折データを後記表１０に示す。
製造例化合物及び実施例化合物の構造、及び物理化学的データを後記表５〜表１０に示す。
4-[(4-{[1-メチル-5-(ピペリジン-4-イル)-1H-インドール-2-イル]カルボニル}ピペラジン-1-イル)メチル]ベンゾニトリル（2.0g）、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（2.7ml）、アセトニトリル（10ml）の混合物に2-(クロロメチル)-5-メトキシピラジン（760mg）のジクロロメタン（5ml）溶液を加え、室温で5日間撹拌した。反応混合物の溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール）およびアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル、次いでクロロホルム-メタノール）により精製し、アモルファス（1.4g）を得た。得られたアモルファス（1.2g）をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-酢酸エチル）により精製し、得られた固体（760mg）とアセトン（100ml）の混合物を80℃で30分間加熱撹拌した後、トシル酸一水和物（510mg）を加えた。混合物を室温まで撹拌下放冷後、室温で4時間撹拌した。生じた固体を濾取後、減圧下乾燥して、4-({4-[(5-{1-[(5-メトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1-メチル-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリル（化合物Ｄ）の二トシル酸塩（1.1g）を結晶として得た。この結晶の粉末X線回折データを後記表１０に示す。
製造例化合物及び実施例化合物の構造、及び物理化学的データを後記表５〜表１０に示す。
なお、後記表５〜表１０中において、以下の略号を用いる。
Pre：製造例番号、Ex：実施例番号、Str：化学構造式、Dat：物理化学的データ、ESI+:質量分析におけるm/z値（イオン化法ESI、断りのない場合[M+H]+）、ESI-:質量分析におけるm/z値（イオン化法ESI、断りのない場合[M-H]-）、APCI/ESI：APCI/ESI-MS (大気圧化学イオン化法APCI、APCI/ESIはAPCIとESIの同時測定を意味し、APCI/ESI+は[M+H]+）、NMR1：CD3OD中の1H-NMRにおけるピークのδ(ppm)、NMR2：DMSO-d6中の1H-NMRにおけるピークのδ(ppm)、Me：メチル、Et：エチル、Boc：tert-ブトキシカルボニル、及び2θ（°）：粉末X線回析における回析角。
Pre：製造例番号、Ex：実施例番号、Str：化学構造式、Dat：物理化学的データ、ESI+:質量分析におけるm/z値（イオン化法ESI、断りのない場合[M+H]+）、ESI-:質量分析におけるm/z値（イオン化法ESI、断りのない場合[M-H]-）、APCI/ESI：APCI/ESI-MS (大気圧化学イオン化法APCI、APCI/ESIはAPCIとESIの同時測定を意味し、APCI/ESI+は[M+H]+）、NMR1：CD3OD中の1H-NMRにおけるピークのδ(ppm)、NMR2：DMSO-d6中の1H-NMRにおけるピークのδ(ppm)、Me：メチル、Et：エチル、Boc：tert-ブトキシカルボニル、及び2θ（°）：粉末X線回析における回析角。
さらに、化学構造式中のxHClはその化合物が塩酸塩であるものの塩化水素とのモル比が未決定であること、2TsOHはその化合物が二トシル酸塩であることをそれぞれ示す。
本発明の医薬組成物の有効成分である、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄから選択される化合物、又はその製薬学的に許容される塩は、ミトコンドリアComplex I阻害作用を有し、非小細胞肺癌由来担癌マウスに対して抗腫瘍効果を有し、ミトコンドリアComplex Iが関与する肺癌、特に非小細胞肺癌の治療用医薬組成物の有効成分として使用できる可能性がある。
Claims (11)
- (5-{1-[(6-メトキシピリジン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン、
(5-{1-[(5-メトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン、
4-({4-[(6-{1-[(5-エトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1-メチル-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリル、及び
4-({4-[(5-{1-[(5-メトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1-メチル-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリルから選択される化合物、又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有する、非小細胞肺癌治療用医薬組成物。 - 非小細胞肺癌がミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌である、請求項1に記載の医薬組成物。
- 非小細胞肺癌がLKB1に変異及び／又は欠損を有するミトコンドリアComplex Iが関与する非小細胞肺癌である、請求項1に記載の医薬組成物。
- (5-{1-[(6-メトキシピリジン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン又はその製薬学的に許容される塩、及び製薬学的に許容される賦形剤を含有する請求項１、２又は３のいずれかに記載の医薬組成物。
- (5-{1-[(5-メトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン又はその製薬学的に許容される塩、及び製薬学的に許容される賦形剤を含有する請求項１、２又は３のいずれかに記載の医薬組成物。
- 4-({4-[(6-{1-[(5-エトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1-メチル-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリル又はその製薬学的に許容される塩、及び製薬学的に許容される賦形剤を含有する請求項１、２又は３のいずれかに記載の医薬組成物。
- 4-({4-[(5-{1-[(5-メトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1-メチル-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリル又はその製薬学的に許容される塩、及び製薬学的に許容される賦形剤を含有する請求項１、２又は３のいずれかに記載の医薬組成物。
- (5-{1-[(6-メトキシピリジン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン 二トシル酸塩、及びその製薬学的に許容される賦形剤を含有する、請求項１、２又は３のいずれかに記載の医薬組成物。
- (5-{1-[(5-メトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル){4-[4-(トリフルオロメチル)ベンジル]ピペラジン-1-イル}メタノン 二トシル酸塩、及びその製薬学的に許容される賦形剤を含有する、請求項１、２又は３のいずれかに記載の医薬組成物。
- 4-({4-[(6-{1-[(5-エトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1-メチル-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリル 二トシル酸塩、及びその製薬学的に許容される賦形剤を含有する、請求項１、２又は３のいずれかに記載の医薬組成物。
- 4-({4-[(5-{1-[(5-メトキシピラジン-2-イル)メチル]ピペリジン-4-イル}-1-メチル-1H-インドール-2-イル)カルボニル]ピペラジン-1-イル}メチル)ベンゾニトリル 二トシル酸塩、及びその製薬学的に許容される賦形剤を含有する、請求項１、２又は３のいずれかに記載の医薬組成物。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2014249348 | 2014-12-09 | ||
| JP2014249348 | 2014-12-09 | ||
| PCT/JP2015/084340 WO2016093202A1 (ja) | 2014-12-09 | 2015-12-08 | 二環式含窒素芳香族ヘテロ環アミド化合物を有効成分とする医薬組成物 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPWO2016093202A1 true JPWO2016093202A1 (ja) | 2017-09-14 |
Family
ID=56107385
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2016563669A Pending JPWO2016093202A1 (ja) | 2014-12-09 | 2015-12-08 | 二環式含窒素芳香族ヘテロ環アミド化合物を有効成分とする医薬組成物 |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20170360779A1 (ja) |
| EP (1) | EP3231424A1 (ja) |
| JP (1) | JPWO2016093202A1 (ja) |
| KR (1) | KR20170088881A (ja) |
| CN (1) | CN107106557A (ja) |
| AU (1) | AU2015362515A1 (ja) |
| BR (1) | BR112017012376A2 (ja) |
| CA (1) | CA2970226A1 (ja) |
| IL (1) | IL252664A0 (ja) |
| MA (1) | MA41157A (ja) |
| MX (1) | MX2017007640A (ja) |
| RU (1) | RU2017120189A (ja) |
| SG (1) | SG11201704590RA (ja) |
| TW (1) | TW201634050A (ja) |
| WO (1) | WO2016093202A1 (ja) |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002020008A1 (en) * | 2000-09-06 | 2002-03-14 | The Scripps Research Institute | Inhibitors of nadh:ubiquinone oxidoreductase |
| JP5924453B2 (ja) * | 2013-06-10 | 2016-05-25 | アステラス製薬株式会社 | 二環式含窒素芳香族ヘテロ環アミド化合物 |
-
2015
- 2015-12-07 MA MA041157A patent/MA41157A/fr unknown
- 2015-12-08 CN CN201580067151.1A patent/CN107106557A/zh active Pending
- 2015-12-08 KR KR1020177015805A patent/KR20170088881A/ko unknown
- 2015-12-08 MX MX2017007640A patent/MX2017007640A/es unknown
- 2015-12-08 CA CA2970226A patent/CA2970226A1/en not_active Abandoned
- 2015-12-08 JP JP2016563669A patent/JPWO2016093202A1/ja active Pending
- 2015-12-08 SG SG11201704590RA patent/SG11201704590RA/en unknown
- 2015-12-08 BR BR112017012376-2A patent/BR112017012376A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2015-12-08 EP EP15867129.7A patent/EP3231424A1/en not_active Withdrawn
- 2015-12-08 TW TW104141108A patent/TW201634050A/zh unknown
- 2015-12-08 RU RU2017120189A patent/RU2017120189A/ru not_active Application Discontinuation
- 2015-12-08 AU AU2015362515A patent/AU2015362515A1/en not_active Abandoned
- 2015-12-08 US US15/534,318 patent/US20170360779A1/en not_active Abandoned
- 2015-12-08 WO PCT/JP2015/084340 patent/WO2016093202A1/ja active Application Filing
-
2017
- 2017-06-05 IL IL252664A patent/IL252664A0/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2970226A1 (en) | 2016-06-16 |
| IL252664A0 (en) | 2017-08-31 |
| SG11201704590RA (en) | 2017-07-28 |
| KR20170088881A (ko) | 2017-08-02 |
| AU2015362515A1 (en) | 2017-06-29 |
| CN107106557A (zh) | 2017-08-29 |
| BR112017012376A2 (pt) | 2018-04-24 |
| EP3231424A1 (en) | 2017-10-18 |
| MX2017007640A (es) | 2017-09-11 |
| TW201634050A (zh) | 2016-10-01 |
| WO2016093202A1 (ja) | 2016-06-16 |
| US20170360779A1 (en) | 2017-12-21 |
| MA41157A (fr) | 2017-10-17 |
| RU2017120189A (ru) | 2019-01-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| WO2017019804A2 (en) | Compounds and methods for kinase modulation, and indications therefor | |
| CN109790141B (zh) | 吲唑衍生物的盐及其晶体 | |
| US20200071326A1 (en) | Tam kinase inhibitors | |
| JP5924453B2 (ja) | 二環式含窒素芳香族ヘテロ環アミド化合物 | |
| JP7430656B2 (ja) | Ｃｄｋ４／６活性阻害化合物の結晶形およびその使用 | |
| US10173995B2 (en) | Pyridine compounds used as PI3 kinase inhibitors | |
| WO2016093203A1 (ja) | 二環式含窒素芳香族ヘテロ環アミド化合物を有効成分とする医薬組成物 | |
| EP3386988B1 (en) | Novel dihydropyranopyrimidinone derivatives, and use thereof | |
| JPWO2016093202A1 (ja) | 二環式含窒素芳香族ヘテロ環アミド化合物を有効成分とする医薬組成物 | |
| JPWO2016093255A1 (ja) | 二環式含窒素芳香族ヘテロ環アミド化合物を有効成分とする医薬組成物 | |
| WO2023008577A1 (ja) | Ｒａｓ／Ｒａｆ結合阻害化合物 |