JPWO2015151350A1 - 卵アレルゲンに結合する核酸分子およびその用途 - Google Patents
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Abstract
Description
(a)配列番号1−4のいずれかの塩基配列からなるポリヌクレオチド
(b)前記(a)のいずれかの塩基配列において、1もしくは数個の塩基が欠失、置換、挿入および/または付加された塩基配列からなり、前記卵アレルゲンに結合するポリヌクレオチド
(c)前記(a)のいずれかの塩基配列に対して、80%以上の同一性を有する塩基配列からなり、前記卵アレルゲンに結合するポリヌクレオチド
(d)前記(a)のいずれかの塩基配列からなるポリヌクレオチドに対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドに、相補的な塩基配列からなり、卵アレルゲンに結合するポリヌクレオチド
本発明の卵アレルゲン結合核酸分子は、前述のように、卵アレルゲンに対する解離定数が、20nM以下の核酸分子であることを特徴とする。
(a)配列番号1−4のいずれかの塩基配列からなるポリヌクレオチド
(b)前記(a)のいずれかの塩基配列において、1もしくは数個の塩基が欠失、置換、挿入および/または付加された塩基配列からなり、前記卵アレルゲンに結合するポリヌクレオチド
(c)前記(a)のいずれかの塩基配列に対して、80%以上の同一性を有する塩基配列からなり、前記卵アレルゲンに結合するポリヌクレオチド
(d)前記(a)のいずれかの塩基配列からなるポリヌクレオチドに対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドに、相補的な塩基配列からなり、卵アレルゲンに結合するポリヌクレオチド
本発明の卵アレルゲン分析用センサは、前述のように、本発明の卵アレルゲン結合核酸分子を含むことを特徴とする。本発明のセンサは、前記本発明の卵アレルゲン結合核酸分子を含んでいればよく、その他の構成は、何ら制限されない。
本発明の分析方法は、前述のように、卵アレルゲンの分析方法であって、試料と前記本発明の卵アレルゲン結合核酸分子とを接触させ、前記試料中の卵アレルゲンと前記核酸分子とを結合させることにより、前記試料中の卵アレルゲンを検出する工程を含むことを特徴とする。本発明の分析方法は、前記本発明の核酸分子を使用することが特徴であって、その他の工程および条件等は、特に制限されない。また、本発明の分析方法は、前記本発明の核酸分子として、前記本発明の卵アレルゲン分析用センサを使用してもよい。
本発明の検出キットは、前記本発明の卵アレルゲン結合核酸分子を含むことを特徴とする。本発明の検出キットは、前記本発明の核酸分子を含んでいればよく、その他の構成は何ら制限されない。本発明の検出キットを使用すれば、前述のように、例えば、前記卵アレルゲンの検出等を行うことができる。
各アプタマーについて、卵アレルゲンに対する結合能および動態パラメータを確認した。
下記ポリヌクレオチドを合成し、実施例のアプタマーとした。なお、配列番号5および6において、Xは、天然チミンに代えて、前記修飾ウラシルの前記BndUTPであり、Zは、天然シトシンに代えて、前記修飾シトシンの5−Me−dCである。
市販の加熱オボトランスフェリン(商品名C0755-100MG、Conalbumin from chicken egg white/heat denatured、別名 オボトランスフェリン、SIGMA-ALDRICH社製)を、試料として、以下の試験に使用した。
結合能の解析には、ProteON XPR36(BioRad社)を、その使用説明書にしたがって使用した。
Claims (12)
- 卵アレルゲンに対する解離定数が、20nM以下の核酸分子であることを特徴とする卵アレルゲン結合核酸分子。
- 前記卵アレルゲンが、オボトランスフェリン(Ovotransferrin)またはそのサブユニットである、請求項1記載の卵アレルゲン結合核酸分子。
- 前記卵アレルゲンが、未変性アレルゲンまたは加熱変性アレルゲンである、請求項1または2記載の卵アレルゲン結合核酸分子。
- 下記(a)〜(d)からなる群から選択された少なくとも一つのポリヌクレオチドを含む、請求項1から3のいずれか一項に記載の卵アレルゲン結合核酸分子。
(a)配列番号1−4のいずれかの塩基配列からなるポリヌクレオチド
(b)前記(a)のいずれかの塩基配列において、1もしくは数個の塩基が欠失、置換、挿入および/または付加された塩基配列からなり、前記卵アレルゲンに結合するポリヌクレオチド
(c)前記(a)のいずれかの塩基配列に対して、80%以上の同一性を有する塩基配列からなり、前記卵アレルゲンに結合するポリヌクレオチド
(d)前記(a)のいずれかの塩基配列からなるポリヌクレオチドに対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドに、相補的な塩基配列からなり、卵アレルゲンに結合するポリヌクレオチド - 前記ポリヌクレオチドが、DNAである、請求項4記載の卵アレルゲン結合核酸分子。
- 前記ポリヌクレオチドが、修飾塩基を含む、請求項4または5記載の卵アレルゲン結合核酸分子。
- 請求項1から6のいずれか一項に記載の卵アレルゲン結合核酸分子を含むことを特徴とする、卵アレルゲン分析用センサ。
- さらに、Gカルテット構造を形成する核酸分子を含む、請求項7記載の卵アレルゲン分析用センサ。
- 前記Gカルテット構造を形成する核酸分子が、DNAzymeまたはRNAzymeである、請求項8記載の卵アレルゲン分析用センサ。
- さらに、ポルフィリンを含む、請求項7から9のいずれか一項に記載の卵アレルゲン分析用センサ。
- 試料と請求項1から6のいずれか一項に記載の卵アレルゲン結合核酸分子とを接触させ、前記試料中の卵アレルゲンと前記核酸分子とを結合させることにより、前記試料中の卵アレルゲンを検出する工程を含むことを特徴とする、卵アレルゲンの分析方法。
- 前記試料が、食品、食品原料および食品添加物からなる群から選択された少なくとも一つである、請求項11記載の卵アレルゲンの分析方法。
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