JPWO2011052748A1 - 抗がん剤の感受性判定方法 - Google Patents
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Abstract
Description
進行性・転移大腸癌に対する化学療法は、1990年代に登場したCPT−11、オキサリプラチンなどのkey drugと、それまで大腸癌治療の中心的薬剤であったフルオロウラシル(5−FU)を中心とするフッ化ピリミジン製剤とを併用することにより、生存率をはじめとする臨床成績が劇的に改善された。しかしそれでもなお奏効率はおよそ50%程度であり、重篤な副作用という高リスクを冒して抗がん剤が投与された患者の半分では効果が得られていないのが現状であり、個々の治療反応性(レスポンダー・ノンレスポンダー)を判別する抗がん剤感受性予測マーカーの確立は急務である。
重篤な下痢や好中球減少症などの副作用は、UGT1A1遺伝多型がもたらすSN−38体内曝露量の変化が一因であることが示されている。しかし治療効果に関しては、プロドラッグであるCPT−11から活性代謝物SN−38への変換とその解毒、さらに腸管循環の過程におけるSN−38の再生成や、CPT−11自体の代謝と代謝物からのSN−38の生成といった体内動態の複雑性により、また、抗腫瘍効果が腫瘍側の要因により規定されることが多いため、薬物動態により治療効果を予測できるとする報告は未だなされていない。末梢血単核球細胞のカルボキシルエステラーゼmRNA発現量がSN−38とSN−38GのAUC比とは相関するものの腫瘍縮小効果とは相関がなかったとする報告もなされている(非特許文献8)。
しかし、すべての報告において必ずしも一致する結果は得られておらず、さらに5−FUに対する治療反応性を治療早期に予測する明確なバイオマーカーは知られていない。
さらに、一般にがん化学療法の治療スケジュールは長期に渡るため、治療継続中における抗がん剤に対する感受性の経時的モニターは治療継続の是非の判定を可能とし、患者負担や副作用軽減につながるのみならず医療経済の観点からも有用であると考えられる。個々の患者における治療反応性を予測、そして早期に診断して適切な薬剤や治療レジメンを選択する「個別化治療」実現のためには、5−FU、CPT−11、及び5−FU/CPT−11併用時の効果予測もしくは治療応答性の早期診断を可能とするバイオマーカーの確立は急務である。
同様に、SN−38曝露後に、高感受性細胞における細胞内発現レベルが上昇するピークを見出し、そのピークが、質量分析計において、本体もしくはそのフラグメントがm/z 16,450〜16,620のピークとして検出されるタンパク質、あるいは本体もしくはそのフラグメントがm/z 22,080〜22,310のピークとして検出されるタンパク質であることを見出した。
さらに、5−FU/SN−38併用曝露後に、高感受性細胞における細胞内発現レベルが上昇するピークを見出し、そのピークが、質量分析計において、本体もしくはそのフラグメントがm/z 16,450〜16,620のピークとして検出されるタンパク質であること、また、低感受性細胞における細胞内発現レベルが上昇するピークを見出し、そのピークが、質量分析計において、本体もしくはそのフラグメントがm/z 17,100〜17,270のピークとして検出されるタンパク質であることを見出した。
また、高感受性細胞と低感受性細胞において、薬剤曝露前の細胞内発現レベルが異なるピークを見出し、そのピークが、質量分析計において、本体もしくはそのフラグメントがm/z 16,450〜16,620のピークとして検出されるタンパク質、m/z 17,100〜17,270のピークとして検出されるタンパク質、m/z 22,080〜22,310のピークとして検出されるタンパク質であることを見出した。
かかる知見に基づき、さらに検討した結果、がん患者由来の生体試料中の当該タンパク質の濃度を測定すれば、当該がん患者のがんが、5−FU、SN−38、或いは5−FU/SN−38の併用療法に対して感受性を有するか否かを判定できること、また、この物質の発現抑制を指標とすれば抗がん剤感受性亢進剤のスクリーニングが可能になること、さらに当該抗がん剤感受性亢進剤と感受性亢進の対象となる抗がん剤を併用すれば、当該抗がん剤の治療効果が飛躍的に向上することを見出し、本発明を完成した。
また、本発明は、検体中のタンパク質A、タンパク質B、タンパク質Cを測定することを特徴とする抗がん剤感受性の判定方法を提供するものである。
また、本発明は、検体中のタンパク質A、タンパク質B、タンパク質Cを測定するためのプロトコールを含むことを特徴とする抗がん剤感受性の判定方法を実施するためのキットを提供するものである。
さらに本発明は、タンパク質A、タンパク質B、タンパク質Cの発現変動を指標とする抗がん剤感受性亢進剤のスクリーニング方法を提供するものである。
さらにまた本発明は、上記のスクリーニング方法により得られた抗がん剤感受性亢進剤を提供するものである。
さらに本発明は、上記の抗がん剤感受性亢進剤と感受性亢進の対象となる抗がん剤を組み合わせてなるがん治療用組成物を提供するものである。
さらに本発明は、抗がん剤感受性を判定するためのタンパク質A、タンパク質B、タンパク質Cを提供するものである。
さらに、また、このマーカーを用いれば、抗がん剤感受性を亢進させる薬剤がスクリーニングでき、その対象となった抗がん剤と抗がん剤感受性亢進剤とを併用すれば、がん治療効果が飛躍的に向上する。本発明の抗がん剤感受性判定マーカーの測定試薬は、抗がん剤感受性判定試薬として有用である。
また、投与後早期の段階において、タンパク質A、タンパク質Bの濃度が所定の標準濃度より低いと判断される濃度を有する場合は、そのがんは対象とする抗がん剤に対して感受性ではないと判定できる。対象とする抗がん剤に対して感受性を有さない場合は、その薬効を期待することができず、このような薬効の期待できない抗がん剤の投与が続けられた場合、がんの進行、副作用の増大が危惧される。このように、本発明における抗がん剤感受性判定マーカーは、抗がん剤治療反応性の判定のみならず、薬効の期待できない抗がん剤の継続投与に伴うがんの進行や副作用の増大を回避するためのマーカーとしても使用できる。
また、投与後早期の段階において、タンパク質Cの濃度が所定の標準濃度より高いと判断される濃度を有する場合は、そのがんは対象とする抗がん剤に対して感受性ではないと判定できる。対象とする抗がん剤に対して感受性を有さない場合は、その薬効を期待することができず、このような薬効の期待できない抗がん剤の投与が続けられた場合、がんの進行、副作用の増大が危惧される。このように、本発明における抗がん剤感受性判定マーカーは、抗がん剤治療反応性の判定のみならず、薬効の期待できない抗がん剤の継続投与に伴うがんの進行や副作用の増大を回避するためのマーカーとしても使用できる。
また、これらのタンパク質の濃度が所定の標準濃度より高いと判断される濃度を有する場合は、そのがんは対象とする抗がん剤に対して感受性を有すると判定できるため、治療効果を期待できる患者を積極的に選出するためのマーカーとしても使用できる。
ここで用いられる対象となる抗がん剤としては、前記と同様であり、オキサリプラチン、シクロフォスファミド(cyclophosphamide)、イフォスファミド(ifosfamide)、チオテパ(thiotepa)、メルファラン(melphalan)、ブスルファン(busulfan)、ニムスチン(nimustine)、ラニムスチン(ranimustine)、ダカルバジン(dacarbazine)、プロカルバジン(procarbazine)、テモゾロミド(temozolomide)、シスプラチン(cisplatin)、カルボプラチン(carboplatin)、ネダプラチン(nedaplatin)、メトトレキサート(methotrexate)、ペメトレキセド(pemetrexed)、フルオロウラシル(fluorouracil)、テガフール/ウラシル(tegaful・uracil)、ドキシフルリジン(doxifluridine)、テガフール/ギメラシル/オテラシル(tegaful・gimeracil・oteracil)、カペシタビン(capecitabine)、シタラビン(cytarabine)、エノシタビン(enocitabine)、ゲムシタビン(gemcitabine)、6−メルカプトプリン(6−mercaptopurine)、フルダラビン(fuludarabin)、ペントスタチン(pentostatin)、クラドリビン(cladribine)、ヒドロキシウレア(hydroxyurea)、ドキソルビシン(doxorubicin)、エピルビシン(epirubicin)、ダウノルビシン(daunorubicin)、イダルビシン(idarubicine)、ピラルビシン(pirarubicin)、ミトキサントロン(mitoxantrone)、アムルビシン(amurubicin)、アクチノマイシンD(actinomycin D)、ブレオマイシン(bleomycine)、ペプレオマイシン(pepleomycin)、マイトマイシンC(mytomycin C)、アクラルビシン(aclarubicin)、ジノスタチン(zinostatin)、ビンクリスチン(vincristine)、ビンデシン(vindesine)、ビンブラスチン(vinblastine)、ビノレルビン(vinorelbine)、パクリタキセル(paclitaxel)、ドセタキセル(docetaxel)、イリノテカン(irinotecan)、イリノテカン活性代謝物(SN−38)、ノギテカン(nogitecan、topotecan)、エトポシド(etoposide)、プレドニゾロン(prednisolone)、デキサメタゾン(dexamethasone)、タモキシフェン(tamoxifen)、トレミフェン(toremifene)、メドロキシプロゲステロン(medroxyprogesterone)、アナストロゾール(anastrozole)、エキセメスタン(exemestane)、レトロゾール(letrozole)、リツキシマブ(rituximab)、イマチニブ(imatinib)、ゲフィチニブ(gefitinib)、ゲムツズマブ・オゾガマイシン(gemtuzumab ozogamicin)、ボルテゾミブ(bortezomib)、エルロチニブ(erlotinib)、セツキシマブ(cetuximab)、ベバシズマブ(bevacizumab)、スニチニブ(sunitinib)、ソラフェニブ(sorafenib)、ダサチニブ(dasatinib)、パニツムマブ(panitumumab)、アスパラギナーゼ(asparaginase)、トレチノイン(tretinoin)、三酸化ヒ素(arsenic trioxide)、又はそれらの塩、又はそれらの活性代謝物等が挙げられる。このうちフッ化ピリミジン系抗がん剤、植物アルカロイド系抗がん剤が好ましく、特にフルオロウラシル、イリノテカン、SN−38又はそれらの塩が好ましい。さらに、フルオロウラシル又はその塩と、イリノテカン、SN−38又はそれらの塩との併用剤を好適に利用することができる。
(1)方法
(a)使用細胞
ヒト大腸癌細胞株2種類(HCT−116、DLD−1)は、ECACCより入手した。培養は、φ100mm/Tissue Culture Dish(IWAKI)、培地(D−MEM、2mM Glutamine、10% Fetal Bovine Serum)、37℃、5%CO2の条件下にて行なった。
フルオロウラシル(5−FU)はSigma社より購入し、SN−38原末は、株式会社ヤクルト本社より入手した。
2種類の大腸癌細胞株HCT116、DLD−1(いずれもECACCより入手)を用い、薬剤曝露48時間後、72時間後の細胞生存率をMTS assay(CellTiter96TMAQueous One Solution Cell Proliferation Assay、Promega)にて評価した。薬剤曝露条件は5−FU単剤としてControl(0μM)、0.001μM、0.01μM、0.1μM、1μM、3μM、10μM、30μM、100μM、1000μM、10000μMの11条件、SN−38単剤としてControl(0nM)、0.001nM、0.01nM、0.1nM、0.3nM、1nM、3nM、10nM、30nM、100nM、1000nMの11条件を用いた。併用としては5−FUの2μM、10μM、30μM、100μMの4濃度それぞれに、SN−38の0.001nM、0.01nM、0.1nM、0.3nM、1nM、3nM、10nM、30nM、100nM、1000nMの10濃度を加えた40条件、及び各併用条件と同濃度の5−FU単剤として4条件とControl(0μM)を用いた。感受性の評価は、1回の試験においてそれぞれの細胞株、薬剤曝露時間、薬剤曝露条件について3サンプルずつ測定し、異なる継代数の細胞にて3回実施した。
解析は、MTS assayの結果から算出した生存率をもとに行った。併用効果の有無の判定は、併用時における生存率(viability)と、併用時に用いたのと同濃度での各薬剤の単剤曝露時における生存率とを比較し、双方から有意に生存率が低下していれば併用効果があると判定した。
前記(c)の結果にもとづき、曝露実験に用いる薬剤濃度は、5−FU+SN−38の併用として2μM+10nM、2μM+100nM、100μM+10nM、100μM+100nMの4種類、これら併用曝露で用いるのと同じ濃度の各薬剤単独曝露として5−FUは2μM、100μM、SN−38は10nM、100nM、及びこれらに薬剤フリーのControlを加えた全9条件で曝露実験を行った。薬剤曝露時間は曝露直前(0時間)、4時間、24時間、48時間の4通りとし、曝露終了時点における細胞数を計測し、細胞内タンパク質を抽出した。
dishより培地を除き氷冷PBSで3回洗浄後、ラバーポリスマンにて剥がしてかき集め、細胞懸濁液を1.5mLマイクロチューブに移した。4℃にて1,200×g、10分間遠心して細胞を集め、上清を除いた後に、細胞数1000万個あたり200μLの細胞溶解バッファー(9mol/L Urea、2% CHAPS、1mM DTT、プロテアーゼインヒビターカクテル(Sigma))を加え、氷冷下で超音波破砕処理を行なった後、4℃にて16,000×g、20分間遠心し、上清を液体窒素にて急速凍結後、分析するまで−80℃にて保存した。上清の一部を用いてタンパク質定量(DC Protein Assay Kit、Bio−Rad)を行なった。
細胞溶解バッファー(プロテアーゼインヒビターを除く)にて2.5mg/mLに調製し、さらに、pH4.5の希釈/洗浄バッファー(50mM sodium acetate buffer)(以下、バッファー)にて0.5mg/mLに調製したサンプル100μLを、同バッファーにて前処理した陽イオン交換チップアレイ(CM10、Bio−Rad)のスポットにapplyし、1時間インキュベートして反応させた後、バッファーにて3回洗浄、milliQ水にて2回リンスした。風乾後、energy absorbing molecule(EAM:50% ACN/0.5% TFA溶液によるsinapinic acidの飽和溶液)1.0μLを、0.5μLずつ2回に分けて各スポットにapplyし、スポット表面が乾いた後、プロテインチップアレイの分析を行なった。
タンパク質発現解析は、表面エンハンス型レーザー脱離イオン化飛行時間型質量分析計(surface−enhanced laser desorption/ionization time−of−flight mass spectrometry:SELDI−TOF MS)にて行なった。分析機器としては、ProteinChipTM Reader(Model PCS4000 Personal Edition、Bio−Rad)を用い、Mass Range 0〜70,000 Daltons、Focus Mass 8,000 Dalton、Energy 4000 nJ、1サンプルあたり合計265shotsの条件にて分析を行なった。
signal−to−noise ratio(S/N比)2以上のピークの抽出とタンパク質発現比較解析は、CiphergenExpressTM Data Manager 3.0を用いて行なった。
SELDI−TOF MSによる分析の結果、S/N比2以上の条件で各サンプルにつき112〜147個のタンパク質ピークを抽出した。まず、CiphergenExpressTM Data Manager 3.0によりピーククラスターを作成した。次に、各条件において、薬剤曝露後に経時的に有意にピーク強度が変化しているピークと、各曝露時間(4、24、48時間)において、薬剤曝露条件によってピーク強度が有意に変化しているピークをピックアップした。さらに、両者に共通して検出されるピーク、すなわち曝露時間による発現変化と薬剤条件による発現変化のいずれをも認めるピークを絞り込んだ。
(a)HCT−116及びDLD−1における薬剤感受性の評価
100μMの5−FUにて48時間曝露後の細胞生存率は、HCT116で約24%、DLD−1で約49%となり、DLD−1がHCT116に比べ5−FU低感受性であると判断した。100nMのSN−38にて72時間曝露後の細胞生存率は、HCT116で約24%、DLD−1で約76%となり、DLD−1はHCT116に比べSN−38低感受性であると判断した。5−FU/SN−38併用曝露後においては、5−FU 2μM+SN−38 10nM、及び5−FU 100μM+SN−38 100nMの72時間曝露後、HCT116では各々の単剤曝露後の細胞生存率よりも併用時において有意に低い細胞生存率を示し併用効果を認めたが、DLD1では有意な併用効果は認められなかった。したがって、HCT116は5−FU/SN−38併用に対する高感受性細胞、DLD−1は低感受性細胞と判断した(図1)。
SELDI−TOF MSを用いたプロテオーム解析手法により、5−FU曝露、SN−38曝露、5−FU/SN−38併用曝露に伴う細胞内タンパク質の変動を網羅的に解析した。(1)方法で示した手法により解析した結果、各薬剤曝露後に特徴的な変動を示す以下のタンパク質を見出した。
(1)5−FU曝露後、HCT116で細胞内レベルの上昇が認められたピーク(図2)・m/z 16,450〜16,620(タンパク質A)
(2)SN−38曝露後、HCT116で細胞内レベルの上昇が認められたピーク(図2、3)
・m/z 16,450〜16,620(タンパク質A)
・m/z 22,080〜22,310(タンパク質B)
(3)5−FU/SN−38併用曝露後、HCT116で細胞内レベルの上昇が認められたピーク(図2)
・m/z 16,450〜16,620(タンパク質A)
(4)5−FU/SN−38併用曝露後、DLD−1で細胞内レベルの上昇が認められたピーク(図4)
・m/z 17,100〜17,270(タンパク質C)
(5)薬剤曝露前(非曝露時)の細胞内レベルが、DLD−1と比較してHCT116で有意に高値を示したピーク
・m/z 16,450〜16,620(タンパク質A)
・m/z 22,080〜22,310(タンパク質B)
・m/z 17,100〜17,270(タンパク質C)
タンパク質Aにおける薬剤曝露前の細胞内レベルは、SELDI−TOF MS分析によるピーク強度(μA)(平均値±S.D.、n=27)として、HCT116では15.0±3.30、DLD−1では8.59±3.49、同様にタンパク質Bでは、HCT116 5.95±1.10、DLD−1 2.99±0.81、タンパク質Cでは、HCT116 26.9±3.94、DLD−1 5.01±2.01であり、いずれもHCT116における薬剤曝露前(非曝露時)細胞内レベルはDLD−1よりも有意に高値を示した。
実施例1において、本体もしくはそのフラグメントとして、m/z 16,450〜16,620として検出されたタンパク質(タンパク質A)、m/z 22,080〜22,310として検出されたタンパク質(タンパク質B)、m/z 17,100〜17,270として検出されたタンパク質(タンパク質C)について、分子量既知の標準物質として、Cytochrome c(equine)(m/z 12360.96+1H)、Apomyoglobin(equine)(m/z 16952.27+1H)、Aldorase(reabbit muscle)(m/z 39212.28+1H)を用い、各目的ピークを挟む2種類の標準物質の分子量2点を用いた分子量補正(internal calibration)によりm/zの確認を行った。その結果、実施例1において、検出されたタンパク質A、タンパク質B及びタンパク質Cは、それぞれ、m/z 16,450〜16,620、m/z 22,080〜22,310、m/z 17,100〜17,270の間に検出されることを確認した。
実施例1において、m/z 16,450〜16,620(タンパク質A)、m/z 22,080〜22,310(タンパク質B)、m/z 17,100〜17,270(タンパク質C)のピークとして検出されたタンパク質について、その性質をさらに詳細に調べるために、pHの変化に伴うピーク強度の変化について検討を行った。
(a)検討に用いたプロテインチップアレイとバッファー条件
陽イオン交換チップアレイ(CM10、Bio−Rad)に対して、pH3.0(50mM Glycine−HCl buffer)、pH3.5(50mM sodium acetate buffer)、pH4.0(50mM sodium acetate buffer)、pH4.5(50mM sodium acetate buffer)、pH5.0(50mM sodium acetate buffer)、pH5.5(50mM sodium acetate buffer)、pH6.0(50mM phosphate buffer)、pH6.5(50mM phosphate buffer)、pH7.0(50mM phosphate buffer)、pH7.5(50mM phosphate buffer)、pH8.0(50mM Tris−HCl buffer)、pH8.5(50mM Tris−HCl buffer)、pH9.0(50mM Glycine−NaOH buffer)、pH9.5(50mM Glycine−NaOH buffer)、pH10.0(50mM Glycine−NaOH buffer)の15種類のバッファーを用いた。
CM10チップアレイを用いた分析のためのサンプル調製及びプロテインチップの作製は、(a)の各バッファーを用いて実施例1の(1)方法前記(f)に準じて実施した。
CM10チップアレイを用いた分析において、ピーク強度の低下を認めるpHがそのタンパク質のイオン化が失われる等電点(pI)付近と判断できる。その結果、実施例1で検出したピークの等電点(pI)は、m/z 16,450〜16,620(タンパク質A)ではpH4.5〜7.5、m/z 22,080〜22,310(タンパク質B)ではpH4.0〜7.0、m/z 17,100〜17,270(タンパク質C)ではpH5.0〜8.0がpI付近に相当すると推定された。
実施例1で見出した、本体もしくはそのフラグメントがm/z 16,450〜16,620のタンパク質(タンパク質A)、m/z 22,080〜22,310のタンパク質(タンパク質B)、m/z 17,100〜17,270のタンパク質(タンパク質C)について、実施例2及び3の情報にもとづき、The ExPASy proteomics serverのTagIdent tool(http://au.expasy.org/tools/tagident.html)を用いてデータベース検索を行った。その結果は以下のとおりであった。
Claims (25)
- 質量分析計において、本体もしくはそのフラグメントがm/z 16,450〜16,620のピークとして検出されるタンパク質、本体もしくはそのフラグメントがm/z 22,080〜22,310のピークとして検出されるタンパク質、及び本体もしくはそのフラグメントがm/z 17,100〜17,270のピークとして検出されるタンパク質から選ばれるタンパク質からなる抗がん剤感受性判定マーカー。
- 抗がん剤が、フッ化ピリミジン系抗がん剤及び植物アルカロイド系抗がん剤から選ばれる抗がん剤である請求項1記載の抗がん剤感受性判定マーカー。
- 抗がん剤が、フルオロウラシル、イリノテカン、SN−38及びそれらの塩から選ばれるものである請求項1又は2記載の抗がん剤感受性判定マーカー。
- 抗がん剤が、フルオロウラシル又はその塩とイリノテカン、SN−38又はそれらの塩との組み合わせである請求項1又は2記載の抗がん剤感受性判定マーカー。
- 検体中の請求項1〜4のいずれか1項記載のタンパク質を測定することを特徴とする抗がん剤感受性の判定方法。
- 検体が、がんを有する被験者由来の生体試料である請求項5記載の判定方法。
- 検体が、抗がん剤を投与された、がんを有する被験者由来の生体試料である請求項5又は6記載の判定方法。
- 抗がん剤が、フッ化ピリミジン系抗がん剤及び植物アルカロイド系抗がん剤から選ばれる抗がん剤である請求項5〜7のいずれか1項記載の判定方法。
- 抗がん剤が、フルオロウラシル、イリノテカン、SN−38及びそれらの塩から選ばれるものである請求項5〜8のいずれか1項記載の判定方法。
- 抗がん剤が、フルオロウラシル又はその塩とイリノテカン、SN−38又はそれらの塩との組み合わせである請求項5〜8のいずれか1項記載の判定方法。
- 検体中の請求項1〜4のいずれか1項記載のタンパク質を測定するためのプロトコールを含むことを特徴とする請求項5〜10のいずれか1項記載の判定方法を実施するためのキット。
- 検体が、がんを有する被験者由来の生体試料である請求項11記載のキット。
- 検体が、抗がん剤を投与された、がんを有する被験者由来の生体試料である請求項11又は12記載のキット。
- 抗がん剤が、フッ化ピリミジン系抗がん剤及び植物アルカロイド系抗がん剤から選ばれる抗がん剤である請求項11〜13のいずれか1項記載のキット。
- 抗がん剤が、フルオロウラシル、イリノテカン、SN−38及びそれらの塩から選ばれるものである請求項11〜14のいずれか1項記載のキット。
- 抗がん剤が、フルオロウラシル又はその塩とイリノテカン、SN−38又はそれらの塩との組み合わせである請求項11〜14のいずれか1項記載のキット。
- 請求項1〜4のいずれか1項記載のタンパク質の発現変動を指標とする抗がん剤感受性亢進剤のスクリーニング方法。
- 抗がん剤が、フッ化ピリミジン系抗がん剤及び植物アルカロイド系抗がん剤から選ばれる抗がん剤である請求項17記載のスクリーニング方法。
- 抗がん剤が、フルオロウラシル、イリノテカン、SN−38及びそれらの塩から選ばれるものである請求項17又は18記載のスクリーニング方法。
- 抗がん剤が、フルオロウラシル又はその塩とイリノテカン、SN−38又はそれらの塩との組み合わせである請求項17又は18記載のスクリーニング方法。
- 請求項17〜20のいずれか1項記載の方法により得られた抗がん剤感受性亢進剤。
- 請求項21記載の抗がん剤感受性亢進剤と、感受性亢進の対象となる抗がん剤とを組み合せてなるがん治療用組成物。
- 抗がん剤が、フッ化ピリミジン系抗がん剤及び植物アルカロイド系抗がん剤から選ばれる抗がん剤である請求項22記載のがん治療用組成物。
- 抗がん剤が、フルオロウラシル、イリノテカン、SN−38及びそれらの塩から選ばれるものである請求項22又は23記載のがん治療用組成物。
- 抗がん剤が、フルオロウラシル又はその塩とイリノテカン、SN−38又はそれらの塩との組み合わせである請求項22又は23記載のがん治療用組成物。
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