JPS6337085B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明はオタネニンジンのサポニンである精製
ギンセノシドからなる抗腫瘍剤に関するものであ
る。さらに詳しくはオタネニンジン（Panax
Ginseng C.A.Meyer）（以下、ニンジンという）
の精製ギンセノシドR_g1（以下、単にR_g1という）、
またはR_g1を主成分とするギンセノシドR_g2（以
下、単にR_g2という）およびギンセノシドR_f（以
下、単にR_f1という）の一方まは両方を含有する
抗腫瘍剤と、精製ギンセノシドR_b1（以下、単に
R_b1という）、またはR_b1を主成分とするギンセノ
シドR_b2（以下、単にR_b2という）、ギンセノシド
R_a（以下、単にR_aという）およびギンセノシドR_p
（以下、単にR_pという）のいづれかまたは全部を
含有する抗腫瘍剤に関するものである。 該サポニンの生理学的意義および薬理作用等に
ついては多くの研究がなされその広範な薬効は科
学的にも次第に明らかにされつつある（代謝、第
10巻、臨時増刊号、第556頁、1973年）。その内容
をまとめると次の如くである。 ニンジンの薬理学的研究は、いままで粗エキス
の段階で行なわれていたが、十数年前より、柴
田、田中、庄司ら、またソ連のエリアコブ
（Elyakov）らによりサポニンの構造決定が行な
われ、さらに薬理学的有効成分の抽出が行なわ
れ、各サポニンおよびそのゲニンの薬理学的研究
が行なわれている。ブレクマン（Brekhman）ら
はニンジンのメタノール抽出物から６種のグリコ
シド〔パナキソシド（panaxoside）とよばれ、
中性のダンマラン ゲニン（dammaran genin）
を有する。パナキソシドＡ，Ｂ，Ｃは極性の弱
い、糖の少ないグリコシドであり、Ｄ，Ｅ，Ｆは
極性が強く糖を多く含んでいる。前者からトリテ
ルペノイド パナキサジオール（triterpenoid
panaxadiol）、後者からパナキサトリオール
（panaxatriol）が得られている。〕を得て種々の
実験を行なつている。ニンジンのグリコシドは水
抽出エキスより持続的な刺激作用があり、ゲニン
も同程度の効力を示している。トリオール群はジ
オール群より高活性が得られたとマウスの遊泳試
験、網登り試験で報告している。抗警告作用はパ
ナキソシドＣとＦおよびそのゲニンで得られた。
パナキソシドＤ，Ｅ，Ｆはラジオメトリツクサブ
スタンス（radiometricsubstance）に赤血球がさ
らされたとき、強力な防御効果を示す。また、加
来らもニンジンより６個のグリコシド（ギンセノ
シドＢ群、ジオール系サポニン３個、ギンセノシ
ドＧ群、トリオール系サポニン３個）をとりだ
し、その薬理作用を検討している。ある成分は一
過性の血圧下降と心拍数の減少、末梢血流量の増
大を示した。また、モルモツト摘出回腸に対する
AChの収縮に拮抗、抗疲労、条件回避抑制、ラ
イテイング挙動（righingbehavior）抑制を認め
ており、ニンジンサポニンの主作用は中枢抑制で
あるとのべている。各サポニンは１％以下の濃度
ではヒト血球を溶血しない。これに対し難波らは
あるトリオール系サポニンはヒト血球に対し強力
な溶血作用を示すが、ジオール系は溶血防御作用
があると報告している。 また、ニンジン抽出物の癌に対する有効性につ
いては臨床試験の結果が公知である（代謝、第10
巻、臨時増刊号、第601頁、1973年）。 一方、癌および担癌動物に対する生理学的作用
についての結果も公知であるが（上記同文献、第
125頁）、結論として腹水肝癌ラツトの延命効果は
顕著にみられなかつた。 しかしながら上記試験で使用された薬剤≪プロ
スチゾール≫は肝の核RNA合成促進作用を目標
にしたスクリーニングでニンジン抽出物よりある
種の分画を選び出したものであり当初より癌に対
する効果を目標にしていないこと、また、その分
離精製法によればニンジンの総サポニンを含有し
ている可能性が大きくしかもそれ以外の成分が混
入しているものでありいづれにしてもその成分は
明らかでない（上記同文献、第564頁）。 そこで本発明者らは該ニンジンの抗腫瘍活性を
示す有効成分を研究し、先にその有効成分の本体
が該ニンジンの抽出物中に含まれていることを始
めて明らかにした。（第37回日本癌学会総会記事、
第160頁、1978年） 本発明者らは更に研究を進め該総サポニンを公
知の方法（Chem.Pharm.Bull.，22，421，1974，
同22，2407，1974）によるシリカゲルカラムクロ
マト法により各種のギンセノシドに分画し、これ
らの精製したギンセノシドを用いた抗腫瘍試験の
結果から有効成分を明らかにした。その結果、精
製されたギンセノシドのR_g1またはR_g1を主成分
としたR_g2およびR_fの一方または両方を含有する
分画（GR―Ａと称す）とR_b1またはR_b1を主成分
とするR_a，R_b2，R_pのいづれかを含有する分画
（GR―Ｄと称す）が粗サポニン（総サポニンと
同じ）には認め得なかつた強力な（粗サポニンに
比べて２倍以上の）抗腫瘍活性を示すことを明ら
かにする事に成功し、本発明に到達したものであ
る。 前記の如く総サポニンを有効成分分画に精製し
ない限り投与量のいかんにかかわらず抗腫瘍活性
は90％までに達しない。また本発明の物質は前記
粗サポニンに該当する≪プロスチゾール≫よりも
強力でしかも広範な種類のガン（後述）に有効で
あることが明らかとなつた。 本発明よる有効成分GR―ＡおよびGR―Ｄは
その含有量に差はあるが、該ニンジンの地上部、
胴部、皮部および毛根の生または乾燥および水蒸
気処理したいわゆる紅参のいづれを原料にしても
製造出来る。また、日本、朝鮮、中国などの産地
を問わない。 上記原料より本発明物質を得るには、公知の方
法で調整された粗サポニンを原料とし、原料サポ
ニンの20倍から100倍量（重量）のシリカゲルを
充填したガラスまたはステンレスのカラムにか
け、クロロホルム―メタノール―水の各種混合比
（例えば65：35：10の下層）の溶媒またはｎ―ブ
タノール―酢酸エチル―水の各種混合比（例えば
４：１：２の上層）の溶媒、またはクロロホルム
―メタノール―酢酸エチル―水の各種混合比（例
えば２：２：４：１の下層）などを用いて展開す
る。上記の分離操作が終つた後、各分画を減圧濃
縮または蒸発乾固し乾燥して各々の粉末を得る。
必要に応じては溶媒を変えてこの操作をりかえす
事により上記有効分画を得るものである。かくし
て得られた分画は公知の方法である薄層クロマト
グラフ法により各分画の成分組成を確認し
（Chem.Pharm.Bull.，22，421，1974）、有効部分
を集めて製品化する（第１図参照）。 第１図はニンジンサポニンの薄層クロマトグラ
フの状態を示したものである。１は粗サポニン、
２はGNS（中性サポニン群）、３はR_b混合物、４
はR_c、５はR_g混合物の展開を示してある。吸着
剤としてシリカゲルを用い、発色はH₂SO₄によ
つて行なつた。展開溶剤はＡの場合にはｎ―ブタ
ノール：酢酸エチル：水＝15：１：４を用い、ま
たＢの場合にはクロロホルム：メタノール：水
65：35：10を用いた。 次に抗腫瘍活性の強かつたGR―ＡとGR―Ｄ
の成分についてその物性を示す。

【表】 これらの化学構造式は次の如くである（第２図
参照）。 ギンセノシド R_x GR―Ａ……（ （ （ （ （ （ （ （ （ （ （ （R_f R_g1 R_g2 Ｒ＝Ｄ−Glcβ（１→２）Ｄ−Glc R′＝Ｈ Ｒ＝Ｄ−Glc R′＝Ｄ−Glc Ｒ＝Ｌ−R_haα（１→２）Ｄ−Glc R′＝Ｈ R′＝Ｈ （20S）―プロトバナキサトリオール類 第２図上
段の式 GR−Ｄ……（ （ （ （ （ （ （ （ （ （ （ （ （R_b1 R_b2 R_p Ｒ＝Ｄ−Glcβ（１→２）Ｄ−Glc R′＝Ｄ−Glcβ（１→６）Ｄ−Glc Ｒ＝Ｄ−Glcβ（１→２）Ｄ−Glc R′＝Ｌ−Ara（pyr）α（１→６）Ｄ−Glc （20S）−プロトバナキサジオール類 Ｒ＝Ｄ−Glcβ（１→２） グルクロニツクアシツド R′＝Ｄ−Glc 第２図中段の式 第２図下段の式 R_aは第１図のAlの薄層クロマトグラフ展開図
に示されているようにR_pとR_bの中間に表わされ
る成分である。その化学構造は未定であるが、各
種ギンセノシドの分離の過程で他の類似構造のも
のとともに集まり、H₂SO₄によつて他のギンセ
ノシドと極めて類似した赤紫色に発色し、また例
えば日本薬学会発行、“ケミカル・アンド・フア
ーマシユーテイカル・ビユレテイン”、第22巻、
No.２、1974年２月、第421〜428頁にも示されてい
るように従来からよく知られているギンセノシド
成分である。 本発明の抗腫瘍剤の主成分であるギンセノシド
R_g1およびR_b1と本物質の原料であるニンジン根
と葉の総サポニンのマウスにおける急性毒性値を
第２表に示した。

【表】 ス
腹腔内 1600 1208 345 306
静脈内 396 492 367 299

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ オタネニンジンの全草から得られる総サポニ
   ンを、各種溶媒によるシリカゲルクロマトグラフ
   法によつて分画したことを特徴とするギンセノシ
   ドR_g1、またはギンセノシドR_g1を主成分とする
   ギンセノシドR_g2およびギンセノシドR_fの一方ま
   たは両方を含有するギンセノシドおよびギンセノ
   シドR_b1、またはギンセノシドR_b1を主成分とす
   るギンセノシドR_b2、ギンセノシドR_aおよびギン
   セノシドR_pのいずれかまたは全部を含有するギ
   ンセノシドからなる群から選ばれた抗腫瘍剤。 ２ ギンセノシドR_g1からなる特許請求の範囲第
   １項に記載の抗腫瘍剤。 ３ ギンセノシドR_g1を主成分とし、ギンセノシ
   ドR_g2をも含有する特許請求の範囲第１項に記載
   の抗腫瘍剤。 ４ ギンセノシドR_g1を主成分とし、ギンセノシ
   ドR_fをも含有する特許請求の範囲第１項に記載
   の抗腫瘍剤。 ５ ギンセノシドR_g1を主成分とし、ギンセノシ
   ドR_g2およびギンセノシドR_fをも含有する特許請
   求の範囲第１項に記載の抗腫瘍剤。 ６ ギンセノシドR_b1からなる特許請求の範囲第
   １項に記載の抗腫瘍剤。 ７ ギンセノシドR_b1を主成分とし、ギンセノシ
   ドR_b2をも含有する特許請求の範囲第１項に記載
   の抗腫瘍剤。 ８ ギンセノシドR_b1を主成分とし、ギンセノシ
   ドR_aをも含有する特許請求の範囲第１項に記載
   の抗腫瘍剤。 ９ ギンセノシドR_b1を主成分とし、ギンセノシ
   ドR_b2およびギンセノシドR_aをも含有する特許請
   求の範囲第１項に記載の抗腫瘍剤。 １０ ギンセノシドR_b1を主成分とし、ギンセノ
   シドR_b2、ギンセノシドR_aおよびギンセノシドR_p
   をも含有する特許請求の範囲第１項に記載の抗腫
   瘍剤。 １１ 溶液の形態にある特許請求の範囲第１項ま
   たは第２〜１０項のいずれかに記載の抗腫瘍剤。 １２ 固体組成物の形態にある特許請求の範囲第
   １項または第２〜１０項のいずれかに記載の抗腫
   瘍剤。 １３ 粉末の形態にある特許請求の範囲第１項ま
   たは第２〜１０項のいずれかに記載の抗腫瘍剤。