JPS63307828A - ニューカッスル病ウイルスワクチン及びその適用方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ワクチン及びその適用のための新しいアプロ
ーチに関する。より詳しくは、本発明は、ニューカッス
ル病ウィルス（Ｎ　ｅｗｃａｓｔ　ＩｅＤ　１ｓｅａｓ
ｅ　　Ｖ　１ｒｕｓ、即ちＮＤＶ）に対し、孵化後の任
意の時点でひな鳥（ｃｈｉｃｋｓ）及び若鳥（ｐｏｕｌ
ｔｓ）にワクチン接種するための新しい方法に関する。

ＮＤＶはミクソウィルスの群に属するパラミクソウィル
スである。これは、家禽産業において主たる経済学的重
要性を有している。なぜならば、ＮＤＶによる損失は、
年間何百万ドル（米国ドル）にも達し得るからである。

ニューカッスル病（ＮＤ）の流行は１９２６年から知ら
れている。この病気は、伝染性があり、感染した家禽か
ら、更には、各種の温度における該ウィルスの安定性の
ため、感染した冷凍家禽肉のくず肉（ｏｆｆａｌ　）又
は臓腑からさえも容易に伝播される。該ウィルスは、主
として鶏及び七面鳥更にはその他多くの鳥類、例えばあ
ひる（ｄｕｃｋｓ　）　、がちょう（ｇｅｅｓｅ　）、
はと（ｐｉｇｅｏｎｓ　）　、うずら、ペット用鳥類等
を襲うものである。

感染の程度は、重篤な致命的なものから無症候性のもの
の範囲に亘る。鶏のＮＤの最も一般的な徴候は性質状呼
吸器系に関するものであり、例えばあえぎ、せき等であ
る。また、神経系に関する徴候として体肢の部分的な又
は完全な麻痺があり、通常、筋肉の振せんが上記呼吸器
系徴候と同時又はこれに引き続き起きる。神経系の徴候
は、それ単独で起きることもある。

より若い鳥においては、死亡率は低いパーセンテージか
ら１００％の範囲に亘る。この病気は、通常、突然生じ
、充分感染し易い鳥の群れの中で急速に広がる。産卵鳥
においては、呼吸器系の徴候が現われ、卵の生産量が低
いレベル又は皆無に低下することもある。産卵鳥の死亡
率は、ウィルス株にもよるが０〜１００％の範囲である
。

ＮＤＶの全ての株は、形態学的、構造的及び血清学的に
は区別できない。しかし、各法の鶏、卵及び組織培養シ
ステムに対するビルレンス（ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ　）に
は大きな相違がある。これら相違は、各法の分類におい
てベロジェニック株（ｖｅｌｏｇｅｎｉｃ　５ｔｒａｉ
ｎ）　、メソジェニック株（ｍｅｓｏｇｏｎｉｃ　５ｔ
ｒａｉｎ）及びレントジエニツク株（Ｉｅｎｔｏｇｅｎ
ｌｃ　５ｔｒａｉｎ　）のように表現されるＯレントジ
ェニック株は、非病原性であって、はとんどの生ワクチ
ンの製造に使用される。メソジェニック株は、中間的な
病原性を有し、例えばコマロフ（Ｋ　ｏｍａｒｏｖ）　
　（ハイファ、Ｈａｉｆａ）及びロアキン（Ｒｏａｋｉ
ｎ　）のような市販のメソジェニック株におけるが如く
、より年齢の高い鳥の免疫をブースターするためのワク
チン株として使用される。

ベロジェニック株は、高度に病原性であり、対抗（ｃｈ
ａｌｌｅｎｇｅ　）　、即ち免疫及び死亡率を試験する
のに用いられる。該ウィルスは、多形態性であって、１
００〜２５．０ｎｍの範囲の直径を有する。

ピリオンは、一本鎖ＲＮＡ及び６〜１０の構造ポリペプ
チド（分子量２０，０００〜１８０，０００）を含むら
せん状ヌクレオカプシドから成る。

該ヌクレオカプシドは、蛋白及び脂質エンベロープ内に
収容されている。脂質層には２種の糖蛋白質、ＨＮ及び
Ｆが挿入されており、これらＨＮ及びＦは、赤血球凝集
及びノイラミニダーゼ活性（ＨＮ）及び融合及び溶血活
性（Ｆ）に関与する。

これら表面糖蛋白質は、ウィルスの抗原性や免疫原性に
おいて重大な役割を果す。これら表面糖蛋白質Ｆ及びＨ
Ｎの開裂状態（ｓｔａｔｅ　ｏｆ　ｃｌｅａｖａｇｅ　
）が、当該株のビルレンスを決定する。ワクチン接種に
よりこれら糖蛋白質に対する抗体を誘出することによっ
て、鳥は保護される。

そのようなワクチンが広く切望されているにも拘らず、
ＮＤに対する有効なワクチンは未だ存在しないのが現状
である。生ワクチン及び不活化ワクチンが共に使用され
ているが、いずれも利点と欠点を有している。免疫され
るべき鳥類の年齢に応じ各種の方法で、レントジェニッ
ク株及びメソジェニック株が生ワクチンに使用され、ベ
ロジェニック株が不活化ワクチンに使用されている。

レントジェニック株で若いひな鳥を免疫化することはこ
れまで非効率的で短期間しか持続しないものであった。

また、従来、より年齢の高い鶏のワクチン接種にのみ使
用されていたメソジェニック株の使用は、その病原性及
びその後の特に非免疫化ひな鳥への伝染の危険性がある
ために、限られたものとなっている。

不活化油液アジュバントワクチンが数年前に導入された
。これは、生のウィルスワクチンではなく、殺した（不
活化）ウィルスを使用することに基いて、現在、広く使
用されており、筋肉的投与又は皮下投与されている。し
かしながら、このタイプのワクチンは、ＮＤ撲滅に関す
る問題の一部を解決するものにすぎない。即ち、不活化
油液アジュバントワクチンでひな鳥を免疫化する際の大
きな障害として、母性抗体の存在がある。母性抗体は、
非常に高濃度の抗原を使用しない限り、活性な免疫の充
分な確立を阻害するのである。この障害を克服するため
に、１日齢のひな鳥に対して、レントジェニック生ワク
チンを含有する水溶液のエアロゾールと不活化油液アジ
ュバントワクチンの全身的（非経口的）注射とを同時に
用いる複合的な免疫化スケジュールが導入されている。

現在入手し得るワクチンで家禽をワクチン接種するスケ
ジュールは、繁雑である。一般的に、短期間に数回繰返
して接種することが必要であり、しかもそれによっても
常に満足の行く結果が得られるとは限らない。前記不活
化ワクチンは高価なので、ＮＤと闘うためのワクチン接
種の新しいアプローチが要望されている。

理想的なワクチンは、若いひな鳥、好ましくは詳化時点
に近いひな鳥に免疫を与え得るワクチンである。

本発明によれば、ニューカッスル病ウィルスの生の免疫
原性のレントジェニック又はメソジェニック株を、鉱油
及び植物油から選ばれたアジュバントキャリヤーを含有
する液体と共に含有し、且つ若鳥又はひな鳥の気道に投
与されることを更に含有するニューカッスル病に対する
ワクチンが提供される。

本発明者の研究によれば、鉱油もしくは植物油が存在す
ると、本発明方法に従い使用した場合、ＮＤＶのレント
ジェニック株及びメソジェニック株の双方に関し、ウィ
ルスの抗原性が増強され、免疫システムの細胞が増大し
、気道中に抗原が保持されるという驚くべき事実が明ら
かになった。

該油は、単独のアジュバントキャリヤーとして使用する
こともできるし、蒸留水、リン酸緩衝生理食塩水又はこ
れに類する溶液と該油とを１＝１〜１：２０の割合で混
合することもでき、いずれの場合も、該油は、更に好ま
しくは、例えばマンニットモノオレエート、マンニット
モノアセテート等のマンニット（マンニトール無水物）
のモノエステル及び例えばツイーン（ｔｗｅｅｎ　）　
４０゜６０又は８０のようなソルビタン系界面活性剤等
の界面活性剤を含有し、エマルジョンを形成させる。　
　　゛ また、本発明によれば、ニューカッスル病に対しひな鳥
及び若鳥にワクチン接種する方法であって、ひな鳥及び
若鳥の気道に、孵化の直後又はそれ以降の任意の時点で
、ニューカッスル病ウィルス（ＮＤＶ）の生の免疫原性
レントジェニック株を、鉱油及び植物油から選ばれたア
ジュバントキャリヤー含有液体と共に投与し、その気道
中に局所抗体（ｌｏｃａｌ　ａｎｔｌｂｏｄｌａｓ）を
生成させ、ニューカッスル病に対する３０日以上の長期
の免疫を与える方法が提供される。

発明者の研究によれば、母鳥を免疫化することによりひ
な鳥における活性な免疫の確立を阻害する母性抗体がも
たらされていた従来の方法とは異なり、母性抗体は本発
明方法の効果を全く阻害しないか又は阻害するとしても
きわめてわずかに阻害するだけである。

他方、本発明の方法は、母性抗体の存在しない非免疫化
雌鳥からのひな鳥に対しても有効であり、いずれの場合
も、母性抗体が存在しないことにより本発明の効果が減
少するものではないことが見出された。

本発明の第二の側面として、本発明は免疫化された雌鳥
の卵から瞬化したひな鳥及び若鳥に、ニューカッスル病
に対してワクチン接種する方法であって、上記ひな鳥及
び若鳥の気道に、孵化の直後又はそれ以降の任意の時点
で、ニューカッスル病ウィルス（ＮＤＶ）の生の免疫原
性メソジェニック株を、鉱油及び植物油から選ばれたア
ジュバントキャリヤー含有液体と共に含有するワクチン
を投与（て、その気道中に局所抗体を生成させ、ニュー
カッスル病に対する長期の免疫を与える方法を提供する
ものでもある。

母鳥を免疫化することによりひな鳥における免疫の確立
を阻害する母性抗体がもたらされていた従来の方法とは
異なって、ＮＤＶのメソジェニック株を用いる本発明方
法においては、該メソジェニック株を好ましくは６週齢
未満程度のひな鳥及び若鳥に投与した場合には、尚存在
している母性抗体は局所免疫の出現を妨げないのである
。

従って、上記本発明方法は、通常苛酷な副作用を伴って
好ましくない反応を起こす非常に若いひな鳥において、
ＮＤＶのメソジェニック株を使用することを可能とする
ものである。

従って、この本発明の第二の方法においては、免疫の連
続性が、母性抗体が本発明ワクチンに基づく局所的免疫
化の確立によって補足され重なり合った状態で、確立さ
れる。

既述のように、レントジェニック株は、過去において、
ひな鳥の免疫化に用いられていたが、その場合、常に水
溶液の形態で粗いスプレー、エアロゾル又は眼内もしく
は鼻内滴下による免疫化及び／又はこれと同時に筋肉内
又は皮下注射による不活化ワクチンの全身的投与を行な
うものであった。

後記比較例Ｂから明らかなように、１日齢の時点でレン
トジェニック（ラ　ツク（Ｌａ　５ｏｔａ　）　）　　
。

株の水溶液のみで免疫化されたひな鳥の大多数は、１ケ
月後には免疫を有していなかった。これに対し、本発明
に従い、ＮＤＶの生の免疫原性レントジェニック株と鉱
油もしくは植物油アジュバントキャリヤー含有液体とを
組合わせて免疫化されたひな鳥は、その９７％が、免疫
化から５１日後の対抗（ｃｈａｌｌｅｎｇｅ　）に対し
ても生存していた。

本発明の第二の側面において、本発明方法は、ひな鳥に
おいて、より高いビルレンスを有する生の株（メソジェ
ニック株）を使用することを可能とし、それにより長期
の免疫を確立し、しかも免疫化されたひな鳥において好
ましくない副作用を惹起しないのである。

従って、本発明により、若いひな鳥好ましくは新しく孵
化したひな鳥、即ち１週齢未満のひな鳥を、ＮＤＶのメ
ソジェニック株で安全に免疫化することが始めて可能に
なったのである。尚、ここで、メソジェニックなる語は
、通常メソジェニックとして分類される株に加えて、レ
ントジェニックとメソジェニックとの中間的な株であっ
てそのより高いビルレンス故にレントジエニツクの範ち
ゅうに属しないものをも含むものとする。

ワクチンは、鼻内投与及び／又は眼内投与される。眼内
又は鼻内への滴下により各個体をワクチン接種するのが
最良の使用方法であるが、エアロゾルによるワクチン接
種法又は大きな液滴の粗いスプレーをひな鳥及び若鳥の
頭部に散布するワクチン接種法も使用可能である。又、
本発明方法においては、くちばし浸漬（ｂｅａｋ−ｄｉ
ｐｐｉｎｇ）法も採用できる。

本発明のレントジェニックワクチン及びメソジェニック
ワクチンは、いずれもその製造が容易である。いずれの
ワクチンも、使用が容易で、それらの主要な利点は、た
った１回の適用により、１日齢又はそれ以上の年齢のひ
な鳥に免疫を与えることができる点である。

鉱油もしくは植物油アジュバントキャリヤー含有液体と
適切な生のメソジェニック株とを組合わせて用いてワク
チン接種するこの方法は、免疫化されたひな鳥を流行地
に配送するのに特に適している。また、瞬化場が、事前
に免疫化されたひな鳥を市場に送ることも可能になると
いう大きな経済的利点もある。しかも、家禽についての
権限のある当局も、ひな鳥及び若鳥が搬送された多くの
農場ではなく、貯化場を査察するだけでよいので、ワク
チン接種プログラムを容易に監督することができる。

本発明は、適切な生のメソジェニック又はレントジェニ
ックＮＤＶ株を用いるワクチン接種の新しいアプローチ
を提供することにより家禽ワクチン接種の各種の問題点
を解決するものである。

メソジェニック株の使用に関し、本発明方法によれば、
該株を非伝播性のものとできる。即ち、該株は気道中で
良好に複製されるが、その複製範囲は、通例通り免疫化
された産卵鳥の子孫であるひな鳥の免疫により、気道環
境内に限定されるのである。この方法により、免疫ひな
鳥は局所抗体を生成し、これにより、体液性抗体は低い
レベルでしか存在しないが長期の免疫が付与される。そ
のようなひな鳥の免疫状態は、後記のＮＤのベロジェニ
ック株に対する対抗試験（第２表）により明らかであっ
た。ひな鳥の免疫は、ワクチンの単回投与により瞬化日
においてさえも確立され得るものであり、しかも驚くべ
き長期間持続するのである。該免疫状態は、局所抗体の
存在故に、気道システム内の局所免疫の成立に依存する
。免疫が存在することは対抗試験により明かにされ、該
試験においてワクチン接種された鳥の生存率は高い（８
０〜１００％）ものである。

また、本発明のレントジェニック株の使用に関し、ひな
鳥における免疫は、ワクチンの単回投与により貯化日に
おいてさえも確立され得るものである。その免疫状態は
、局所抗体の存在故に、気道システム内の局所免疫の成
立に依存する。免疫の存在は、対抗試験により明かにさ
れ、該試験においてワクチン接種された鳥の生存率は高
いものである（７５〜１００％）。

本発明方法は、その株（ｓｔｒａｉｎ）を問わず、全て
の国における感染に対して有効である。なぜならば、１
９７７年のアトラック決定（Ａｔｌａｎｔａｄｅｃｉｓ
ｉｏｎ　）によれば、全てのＮＤ株は血清学的に同一で
あるとされているからである。

後述する実験は、３種の代表的なメソジェニック株、即
ち、コマロフ（ハイファ）株（Ｋ　ｏｍａｒｏｖ（Ｈａ
ｉｆａ）　　５ｔｒａｉｎ　）　、ロアキン（Ｒｏａｋ
ｌｎ　）株及び家禽農場でＮＤの発生時に感染した鳥か
ら分離されたメンジェニック株（以下ｒＥＲ３Ｊという
）について行なったものである。

上記ＥＲ３株は６４．５時間のＭＤＴ　（平均死亡時間
）を有しており、添加剤なしにプラークを形成する。

以下本発明をより詳しく説明するために、実施例におい
て好ましい実施態様に関して説明するが、本発明はこれ
ら特定の実施態様に限定されるものではない。むしろ、
特許請求の範囲に記載された発明の範囲内に含まれ得る
全ての変更、改良及び均等物をも包含することを意図す
るものである。

従って、好ましい実施態様を包含する下記の実施例は、
本発明の実施法を例示するものであり、具体的に記載さ
れた事項はあくまでも例示であって、本発明の好ましい
実施態様を例示的に説明するためのものであり、組成物
形成法及び本発明の原理と思想についての最も有用で容
易に理解し得ると考えられる記載を与えるものである。

１）ＮＤ株の調製 発育（ｅｍｂｒｙｏｎａｔｅｄ　）鶏卵の尿膜包中で、
ウィルス培養の通例の手法を用いた。種ウィルスを９〜
１２日の発育卵に０．１〜０．２１ｎＱ／卵の量で接種
した。感染した尿膜膣液を集め遠心分離により清澄化し
、４〜１０℃にて貯蔵した。該抗原は凍結乾燥し、使用
するまで貯蔵してもよい。保存ウィルス（ｓｔｏｃｋ　
ｖｉｒｕｓ　）を−７０℃又は−２０℃に維持する。市
販のレントジェニックＶＨもしくはラック（Ｌ　ａｓｏ
ｔａ）株を購入して使用してもよい。

２）ワクチンの調製 ワクチン接種前に、ＮＤ生ウィルスを予め定めたようζ
某緩衝液ＰＢＳ、ｐＨ７，２〜７．６中に希釈し、１０
５〜１０７Ｅ　Ｉ　Ｄ５ｏ／ｄｏｓｅとする（ＥＩＤ５
ｏ＝５０％卵感染投与量）。該抗原を、１：５の割合で
鉱油と混合し、０．０５〜０．１鵬の量をひな鳥に接種
する。使用した鉱油又は植物油は、ＵＳＰ　（米国薬局
方）適合品質のものであるが、これら油は多種類のもの
が入手可能であって、はとんどのものが本発明の目的に
適したものである。

３）ひな鳥のレントジェニック株によるワクチン接種 一日齢以上の市販ライトブリード又はブロイラータイプ
のひな鳥の個々に、鼻内投与（１，Ｎ、）及び／又は眼
内投与（１，Ｏ，）にて、両性鼻孔に、０．０５〜０．
　１１１１１２の量でワクチン接種した。

エアロゾル又は粗いスプレー又はくちばし浸漬も使用で
きる。

４）対抗試験 ひな鳥を、前記と同様にして、鼻内又は眼内投与により
、１日齢又は４〜５日齢の時点で免疫化した。

接触による対抗（ｃｈａｌｌｅｎｇｅ　）を行なった。

ベロジェニックＮＤＶに感染した鶏を、試験群と接触さ
せた。

１回のワクチン接種の後、免疫化されたひな鳥を隔離し
、各種の時間間隔でベロジェニック株を用いて対抗試験
を行なった。軽品種（ｌｉｇｈｔｂｒｅｅｄ　）及び重
品種（ｈｅａｖｙ　ｂｒｅｅｄ　）ともに同一の結果が
得られた。免疫化されたひな鳥と一緒にさせていた対照
の非免疫化ひな鳥を同時に対抗させた。対照ひな鳥は全
て死亡した。これより、本発明のワクチンは、本発明方
法に従い接種された場合、接触により伝播されず、また
、偶発的にＮＤと接触することによる追加抗原刺激（ｂ
ｏｏｓｔｉｎｇ）もないことが判る。

比較例Ａ 母性抗体を有しない３週齢のひな鳥を、鼻内投与及び眼
内投与により、鉱油を用い又は用いることな（ＮＤＶの
レントジェニックＶＨ株を用いて免疫化した。２５日後
、肺におけるＨＩ抗体レベルは、上記油を用いて免疫化
したひな鳥の肺において１：５６であり、上記油を用い
ることなく免疫化された場合の１：２２に比し、約２倍
高いものであり、対照の非免疫化ひな鳥においては１：
２であった。

このように長期にわたる保護効果は、免疫化されたひな
鳥の肺中に生成した局所分泌抗体レベルがより高いこと
に基づくものと考えられる。

比較例Ｂ １０齢のひな鳥を、レントジェニックラソタ（Ｌａ　５
ｏｔａ　）株の水溶液のみで及びレントジェニック株と
鉱油との混合物で免疫化した。

眼内投与により又はスプレーにより、ラック株のみで免
疫化された１日齢のひな鳥の９０％が対抗（ｃｈａｌｌ
ｅｎｇｅ　）により死亡した。

５０羽の１日齢のひな鳥に、ニューカッスル病ウィルス
のラック株と油との混合物をワクチン接種した。２０羽
のひな鳥をワクチン接種しない対照とした。３０羽のワ
クチン接種されたひな鳥及び１０羽の対照ひな鳥を、５
１日齢となった時点で、ベロジェニックＮＤＶで対抗し
、２０羽のワクチン接種しなかったひな鳥と１０羽の対
照を６４日齢となった時点で対抗した。結果を第１表に
示す。

対抗時齢　ワクチ　対照　ワクチン　対　照ン接種　　
　　接種 ５１日　　３０　１０　２９（９７％）０（０％）６４
０　２０　１０　１１（５５％）　　　１（１０％）５
）メソジェニック株によるひな鳥の接種　。

通例通り免疫化された鳥からの１日齢又はそれ以上のひ
な鳥を、個々に、鼻内投与（１，Ｎ、　）及び／又は眼
内投与（１，０，）により、両性鼻孔に０．０５〜０．
　１１１１１２の量でワクチン接種した。

アエロゾール又は粗いスプレー又はくちばし浸漬法を用
いてもよい。

該ワクチン株は、同一のケージ内に置かれた対照の非免
疫化ひな鳥に伝播しなかった。これは、対抗試験におけ
る曝露時に血清変換及び死亡が生じなかったことから証
明された（後記第２表及び第３表参照）。

ワクチン接種の結果としてのひな鳥における好ましくな
い副作用並びに対抗に対する抵抗性及び抗体応答（局所
性及び体液性）の追跡を行なった。

好ましくない副作用乃至死亡は、ワクチン接種されたひ
な鳥において観察されなかった。ＥＲ３株を用いた一つ
の実験において、ひな鳥は数ケ月維持され通常通り産卵
を開始し、その一方で肺における局所Ｈ１抗体の高いレ
ベルがその数ケ月持続した（後記第２表）。

血清中のＨ１抗体の力価は予測されたように低い（１：
４〜１：３２）ものであった。なぜならば、少量の抗原
が循環系に漏れ込むだけであって、大半は保護能のある
母性抗体により気道中に残留しているからである。

６）対抗試験 ひな鳥を、前記と同様にして、１０齢時又は４〜５日齢
時に、鼻内、眼内又はエアロゾールにより免疫化した。

接触による対抗を行なった。ベロジェニックＮＤＶで感
染されたひな鶏を試験群と接触させた。

−回のワクチン接種の後、免疫化されたひな鳥を分離し
、各種の時間間隔でベロジェニック株により対抗させた
。重品種及び軽品種のひな鳥を用いたところ、いずれの
場合も同一の結果が得られた。免疫化されたひな鳥と一
緒にしていた対照の非免疫ひな鳥も同時に対抗させた。

対照は全て死亡した。これより、該ワクチン株は接触に
より伝播されないこと、ＮＤとの偶発的接触による追加
抗原刺激（ｂｏｏｓｔｉｎｇ）がないこと及び使用した
ベロジェニックＮＤＶは実際感受性を有する鶏に対し致
命的であることが判る。

数ケ月にわたる高いレベルの保護効果が下記第２表に示
されている。ＥＲ３株によってワクチン接種されたひな
鳥における免疫が最長のものであるが、ロアキン（Ｒｏ
ａｋｉｎ　）及びコマロフ（Ｋ　０１ａｒｏの株も同様
に予想外に良好で長期の免疫を付与する。

保護作用のある局所免疫状態を示す他の証拠としては、
対抗曝露時に用いられたベロジェニック株へ曝露した後
に、追加抗原刺激（ｂｏｏｓｔｉｎｇ）がないことであ
る。対抗試験後に血清ＨＩ抗体力価の上昇は認められな
かった。このことは、引続くウィルス感染に対するバリ
ヤーが、初期の免疫処置により気道に形成されているこ
とを示すものである。

第　　２　　表 １日齢時にＥＲ３で免疫化されたひな鳥におけるＨＩ抗
体力価群　　　　力価逆数、免疫化後月数 ワクチン　局所　＄３２−６４　３２−６４　３２−６
４　　３２　３２−６４　３２−６４接種　　体液性　
　８−１６　１６−３２　１６　　１６−３２　　８　
　８−１６対　　照　局所　　ｎｅｇ　　　ｎ、ｄ、　
　ｎ、ｄ、　　ｎ、ｄ、　　ｎ、ｄ、　　ｎｅｇ体液性
　　　　４　　　　　＜２　　　　　ｎ、ｄ、　　　　
　２　　　　　　＜４　　　　　＜４＊　　ｒ３２−６
４４等は、赤血球凝集反応を抑制する肺ホモジネート又
は血清の最大希釈率の逆数である（ＨＩ力価）。

ｒｎｃｇＪ：陰性（抗体検出されず）。

ｒｎ、ｄ、Ｊ　　：測定せず。

第３表 対抗曝露後の鶏の生存数 処　　置　部数　ワクチン接　死亡数　生存率＊ワクチ
ン　　　　種後月数　　　　　　（％）ＥＲ３３４１０
１００，０ ２７３４８５，２ Ｂ　　　　４　　　　　０　　１００．０１３　　　５
　　　　　２　　　８４．６１１　　　７　　　　　０
　　１００．０１０　　　　ｔｏ　　　　　　０　　１
００．０ロアキン　１０　　１１／２　　　　０　　１
００．０７　　　３　　　　　４　　　４２．９コマロ
フ　１０　　１２／３　　　　１　　　９０．０免疫化
されていない対照ひな鶏群（ＩＮＩＯ〜１２羽）は、免
疫化されたひな鶏と同一部屋内に入れ、同時に対抗曝露
に供された。全ての対照鶏は６〜８日以内に死亡した。

零対抗曝露から３〜４週間後に観察された生存率。

本発明は前記詳細な実施例に示された事項に限定される
ものではなく、本発明の本質を逸脱することなく他の実
施態様も包含するものである。従って、前記実施態様及
び実施例は、全面的に例示的なものであって、限定的な
ものではない。参照すべきは、特許請求の範囲であって
前記説明ではなく、特許請求の範囲の意味又はその均等
の範囲内の変更は本発明に包含されるものである。

（以　上）

Claims (24)

【特許請求の範囲】
1. （１）ニューカッスル病ウィルスの生の免疫原性レント
   ジェニック又はメソジェニック株を、鉱油及び植物油か
   ら選ばれたアジュバントキャリヤーを含有する液体と共
   に含有し、且つひな鳥又は若鳥の気道へ投与されること
   を特徴とするニューカッスル病に対するワクチン。
2. （２）ニューカッスル病ウィルスの生の免疫原性レント
   ジェニック株を、鉱油及び植物油から選ばれたアジュバ
   ントキャリヤーを含有する液体と共に含有し、且つひな
   鳥又は若鳥の気道へ投与されることを特徴とするニュー
   カッスル病に対するワクチン。
3. （３）液体が、水溶液と鉱油もしくは植物油を含有する
   ものである請求項２に記載のワクチン。
4. （４）マンニットモノエステルを更に含有する請求項２
   に記載のワクチン。
5. （５）ソルビタン界面活性剤を更に含有する請求項２に
   記載のワクチン。
6. （６）ニューカッスル病ウィルスの生の免疫原性メソジ
   ェニック株を、鉱油及び植物油から選ばれたアジュバン
   トキャリヤーを含有する液体と共に含有し、且つ免疫化
   された雌鳥の卵から孵化した若鳥又はひな鳥の気道へ投
   与されることを特徴とするニューカッスル病に対するワ
   クチン。
7. （７）液体が、水溶液と鉱油もしくは植物油を含有する
   ものである請求項６に記載のワクチン。
8. （８）マンニットモノエステルを更に含有する請求項６
   に記載のワクチン。
9. （９）ニューカッスル病に対してひな鳥及び若鳥にワク
   チン接種する方法であって、ひな鳥及び若鳥の気道に、
   孵化直後又はそれ以降の任意の時点で、ニューカッスル
   病ウィルス（ＮＤＶ）の生のレントジェニック株と鉱油
   及び植物油から選ばれたアジュバントキャリヤー含有液
   体とを含有するワクチンを投与し、その気道中に局所抗
   体を生成させ、ニューカッスル病に対する少なくとも３
   ０日の長期の免疫を付与することを特徴とする方法。
10. （１０）前記ワクチンを、新しく孵化したひな鳥に投与
    する請求項９に記載の方法。
11. （１１）前記ワクチンを、６週齢未満のひな鳥及び若鳥
    に投与する請求項９に記載の方法。
12. （１２）前記生のＮＤＶ株を、鼻内投与する請求項９に
    記載の方法。
13. （１３）前記生のＮＤＶ株を、眼内投与する請求項９に
    記載の方法。
14. （１４）前記生のＮＤＶ株を、エアロゾールワクチン接
    種により投与する請求項９に記載の方法。
15. （１５）前記生のＮＤＶ株を、大きな液滴の粗いスプレ
    ーとして、ひな鳥及び若鳥の頭部上に散布することによ
    り投与する請求項９に記載の方法。
16. （１６）前記生のＮＤＶ株を、前記ワクチン中にひな鳥
    又は若鳥のくちばしを浸漬することにより投与する請求
    項９に記載の方法
17. （１７）免疫された雌鳥の卵から孵化したひな鳥及び若
    鳥をニューカッスル病に対してワクチン接種する方法で
    あって、該ひな鳥及び若鳥の気道に、孵化直後又はそれ
    以降の任意の時点で、ニューカッスル病ウィルス（ＮＤ
    Ｖ）の生の免疫原性メソジェニック株と鉱油及び植物油
    から選ばれたアジュバントキャリヤー含有液体とを含有
    するワクチンを投与し、その気道内に局所抗体を生成さ
    せ、ニューカッスル病に対する長期の免疫を付与するこ
    とを特徴とする方法。
18. （１８）前記ワクチンを、新しく孵化したひな鳥に投与
    する請求項１７に記載の方法。
19. （１９）前記ワクチンを、６週齢未満のひな鳥及び若鳥
    に投与する請求項１７に記載の方法。
20. （２０）前記生のＮＤＶ株を、鼻内投与する請求項１７
    に記載の方法。
21. （２１）前記生のＮＤＶ株を、眼内投与する請求項１７
    に記載の方法。
22. （２２）前記生のＮＤＶ株を、前記ワクチン中にひな鳥
    及び若鳥のくちばしを浸漬することにより投与する請求
    項１７に記載の方法。
23. （２３）前記生のＮＤＶ株を、エアロゾルワクチン接種
    により投与する請求項１７に記載の方法。
24. （２４）前記生のＮＤＶ株を、大きな液滴の粗いスプレ
    ーとして、ひな鳥及び若鳥の頭部上に散布することによ
    り投与する請求項１７に記載の方法。