JPS63290860A - アミノエチルシステイン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規なアミ／エチルシスティン誘導体に関し、
さらに詳しくは、強力なノ＼プチグーゼ阻害作用をもつ
式 ％式％（１） 式中、Ｙｌ及びＹ２は同一もしくは相異なり、それぞれ
ベンゾイルアミノ基又は７タルイミド基を表わす、 で示される化合物に関する。

近年、下記式 で示される基本骨格構造を有する一群のカルバペネム系
抗生物質が発見され、グラム陰性、グラム陽性及びβ−
ラクタマーゼ産生バクテリア等に対し広い抗菌スペクト
ルを有する次世代の抗生物質として注目されている。

このカルバペネム系抗生物質の抗菌力発現の作用機作は
、ペニシリン系抗生物質、セファロスポリン系抗生物質
等のβ−ラクタム系抗生物質と同様に＃Ｉ菌の細胞壁の
合成阻害によると考えられている。そのため、カルバペ
ネム系抗生物質は細胞壁をもたない高等動物にとって毒
性の少ない有用な抗菌剤としてその開発が急がれている
。

しかし、このカルバペネム系抗生物質は、例えばＫｒｏ
ｐｐ、　Ｈ，ｅＬ　ｍｌ、＊ＡｂｓｔｒａＣｔ　　Ｎｏ
２７２　？　２０ｔｌ＋　　　Ｉｎｔｅｒｓｃｉ、　Ｃ
ｏｎｒ、　　Ａｎｔｉｅｉｉｃｒ、　　Ａｇｅｎｔｓ＆
　　Ｃ１＋ｅｅ＋ｏｔｈ、ｅ　Ｎｅｗ　　０ｒｌｅａｎ
ｓ（１９８０）において報告されているように、動物の
生体内、待に賢臓において代謝を受けて不活性な物質に
変化するという致命的な欠点があることが知られている
。

この代謝ｆｉ構は賢臘内に存在する顆粒結合性（ｐａｒ
Ｌｉｃｌｅ　　ｂｏｕｎｄ）のノベプチグーゼによるβ
−ラクタム環の加水分解であると確信されている。

そのため、現在ノベプチグーゼの酵素阻害作用を有する
物質をカルバペネム系抗生物質と併用することにより、
カルバペネム系抗生物質の代謝を抑制して、該抗生物質
の血中濃度及び血中半減期を向上せしめるべく、い（つ
かの酵素阻害剤が見い出され、提案されている（例えば
特公昭６１−６０８１６号公報参照）。

本発明者らは先にカルバペネム系抗生物質として抗生物
１ｐｓ−ｓ（間材等、Ｊ　、　Ａ　ｎｔｉｂｉｏｔｉｃ
ｓ３２巻、２６２−２７１．１９７９）、抗生物質ＰＳ
−６及びＰＳ−７（柴本等、Ｊ　、Ａｎｔｉｌ＋１ｏｔ
ｉｃｓ　　３３巻、１１２Ｂ−１１３７，１９８０）等
を見い出し提案しており、本発明者Ｃ）もまた、これら
カルバペネム系抗生物質の代謝を抑制するためのノベブ
チダーゼ阻害剤について鋭ＩＬ研究を重ねた結果、今回
、前記式（１）で示されるアミノエチルシスティン誘導
体が強いノベプチグーゼ阻害作用を有していることを見
い出し、本発明を完成するに至った。

本発明により提供される前記式（１）の化合物において
、Ｙ’とＹ２とは同一であることができ、或いは互いに
異なってもよい。しかして、式（ｒ）には下記４つの化
合物が包含される。

本発明により提供される式（１）の化合物は、例えば、
以下に述べる方法で製造することができる。

（ａ）　　Ｙ’とＹ２とが同一の場合：下記式 ％式％（） で示される７ミノエチルシステインを、安息香酸又は７
タル酸の反応性誘導体の２倍モル量又はそれ以上と、そ
れ自体既知の７ミド化反応条件下に反応させる。

（ｂ）　　ＹｌとＹ２とが互に異なる場合：ｂ−１）　
前記式（ＩＩ）の７ミノエナルシスナインを安！Ｌ香酸
又は７タル酸の一方の酸の反応性誘導体のほぼ等モル量
と、それ自体既知の７ミド化反応条件下に反応させて、
式 ％式％（１） 式中、Ｙｌは前記定義のとおりである、で示される化合
物を得、次いで上記他方の酸の反応性誘導体のほぼ等モ
ル量又はそれ以上とそれ自体既知のアミド化反応条件下
に反応させるか、或いは ｂ−２）式 ％式％（） 式中、Ｈａｔはハロゲン原子、例えば塩素又は央′ｌｋ
原子を表わし、Ｙｌは前記定義のとおりである、 で示される化合物（例えば、Ｎ−クロロエチルベンズア
ミド、Ｎ−ブロモエチルベンズアミド、Ｎ−クロロエチ
ル７タルイミド、Ｎ−プロモエチル７夕ルイミドなど）
を式 ）１ｓ−Ｃ１１２−ＣＩｌ−ＣＯＯＩＩ　　　　　　　
　（Ｖ　）■ 式中、Ｙ２は前記定義のとおりである、で示される化合
物と反応させる。

」−記アミド反応において用いられる安息香酸又は７タ
ル酸の反応性誘導体としては、例えば、安息香酸クロリ
ド、安息香酸プロミド、などのハライド；安息香酸無水
物、７タル酸無水物などの無水物；安息香酸エチルエス
テル、安息香酸エチルエステルなどの活性エステル；Ｎ
−エトキシカルボニル７タルイミド等が挙げられ、反応
誘導体の種類に応じて、７ミド化反応は一般に０℃〜８
０℃の温度で行なうことができる。

また、上記式（■）の化合物と式（Ｖ）の化合物との反
応は、好ましくは例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリ
ウム、炭酸カリウム、等の無機塩基；トリエチルアミン
、ノエチル７ニリン、ビリノン等の有機塩基の如き酸結
合剤の存在下においてＯ℃〜１００℃の温度で実施する
ことができる。

得られる式（夏）の化合物はそれ自体既知の方法、例え
ば有機溶媒抽出、シリカゲル又はイオン交洟引脂カラム
クロマトグラフィー等の方法で反応混合物から分離し、
精製することができる。

本発明により提供される式（１）の化合物は、強いジペ
プチダーゼ阻害作用を有しており、゛その作用は以下の
ｉｎ　　ｙｉｔｒｏ及びｉｎ　　ｖｉｖｏテストにより
立証することができる。

ラットを斬首により放血させ、約１２げの新鮮な賢臓を
集める。ｌｏｇｂｏｏ醜の遠心分画による細胞分画方法
（Ｍｅｔｈｏｄｓ　　ｉｎ　　Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、
　Ｖｏｌ、　１．９１　６−ｐｉ　　９　、　Ａ　ｃａ
ｄｅｍｉｃ　　　Ｐ　ｒｅｓＯ％　Ｎ　ｅｗ　　　Ｙ　
ｏｒｋ１９５５）によりミクロゾーム分画を得た。この
ミクロゾーム分画を４００μｇ／−１のトリプシンで１
６時ｌ１１０℃で処理した後、６００分間　’Ｃで１０
’Ｇの超遠心分画を行う。

得られた沈澱を界面活性剤（０，４％トライトンＸ−１
００）を含むトリス塩ａ緩衝液（２０論Ｍ、ｐＨ７，６
）２０ａ＋Ｉｔ’可溶化ｔ、ｆ、６０ｊ）闇０　’Ｃｔ
’　１０’Ｇの超遠心分画を行い、その上清をＤＥＡＥ
セファデックス八−５へ（Ｃ１−型）カラム（１５Ｘ１
００ｍｓ＋）に仕込んだ後、界面活性剤（０，４％トラ
イトンＸ−１００）を含むトリス塩酸緩ｇＲ液（２０ｍ
Ｍ、　ｐＨ７，６）ノｆｌ、塩濃度０−０．５Ｍのグ？
ディエンド溶出を行った。

活性区分をポリエチレングリコール４０００で濃縮後、
上記と同じトリス塩ａａＷ液でセフアゾうりＸＧ−１５
０（２５Ｘ　９００ｍｍ）ツカ？Ａ（！　７７デフクス
Ｇ−２００（２５Ｘ９００ｓ輪）のカラムで順次精製し
、ジペプチダーゼの部分精製標品を得た。

Ｃυ−」〔梵活九ｆｆｌ 上記でえちれた酵素５０１を阻害剤溶液３０μｍと共に
キュベツト中で３７℃にて５分間ブリインキュベートし
た後、基質として３７℃に予熱した抗生物質Ｐ　Ｓ　−
５（１ｍｇ／＋＊Ｉ）ノド’Ｊ　Ｘ塩！（０゜１Ｍ　　
ｐ１４８．０＞溶液を０　、１　ｓ＋Ｉ加え反応を開始
する。反応は恒温（３７℃）装置を付した日立分光光度
計のキュベツト内で行い、記録計により波長３０１ｎｍ
における吸光度の５分間の減少を求めた。

以上でえられた値と阻害剤を含まない対照の値より一定
阻害濃度における阻害％及びＩＤ１．を求めた。

その結果を下記表１にまとめて示す。

表−１ ５週令のｄｄＹマウスを５西一群とし８ｏ及び２５０鯵
ｇ／鰺１濃度の本発明のジペプチダーゼ阻害剤の水溶［
（ｐｌ−１７，５となるようＩＮ　　ＮａＯＨで調り０
　、２５　ｍｌ（１ｇ／ｋｇ）を静脈内投与した。対照
群には同容量の純水を投与した。３〜５分後に５又は２
０輸ｇ／ｋｇ：マウスの抗生物ｆｉ８８６１７Ｎｎ塩Ｍ
／１００ＰＢＳ（＋＋８７，０）溶液を０．２５Ｌ１１
皮下投与した。

抗２生物質８８６１７本投与の６時間後にマウスの全尿
を採取し、採取した全尿中の抗生物質８８６１７の濃度
をコマモナス−テリブナ（、Ｃｏｍａｍｏｎｍｓ　　ｄ
ａ）　Ｂ　−９９６を被検菌としたｄｉｓｃ−ａｇａｒ
　　ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ法で定量し、５匹の平均値を求
めた。

その結果を表−２に示す。

表−２ ＊抗生物質８８０１７ （特開昭５９−８４８８６号、公報参照）以上の実験Ａ
及びＢの結果から明らかなように、式（１）の化合物は
動物生体内のジベブチグーゼに対する優れた阻害作用を
有しており、カルバペネム系抗生物質の生体内、殊に腎
臓内における代謝を抑制するために、カルバペネム系抗
生物質と組合わ讐て平行投与するのに有用であると考え
られる。

本発明の式（１）の化合物と組合わせて効果のあるカル
バペネム系抗生物質としては、例えば抗生物質ＰＳ−５
、ＰＳ−６及びＰＳ−７、チェナマイシン、ホルムイミ
ドイルチェナマイシン、エビチェナマイシン、カーベチ
マイシン、アスパｌ／／マイシン、オリパン酸、５Ｆ２
１０３Ａ、抗生物質８８６１７及びそれらの誘導体等が
挙げられる。

本発明の式（１）の化合物はかかるカルバペネム系抗生
物質との合剤として或いはカルバペネム系抗生物質とは
別個の製剤の形態で、経口的又は非経口的（例えば筋肉
内、静脈内、直腸内）に投与することができ、その投与
量としては通常０．１〜５ｇ／ｋｇ／日、好ましくは１
００〜１０００−ｇ／ｋｇ／日の範囲内が考えられる。

また、剤型として錠剤、カプセル剤、糖衣丸、生薬等の
固体の形態、或いは溶ａ幾濁液もしくは乳化液等の液体
の形態をとるとかでさ、これら製剤は常法に従い、経口
又は非経口投与に適した通常の製薬学的に許容しうる担
体又は希釈剤、例えば、水、ゼラチン、乳糖、でんぷん
、ステアリン酸マグネシウム、メルク植物油、アラビア
ゴム、ポリフルキレングリコール及び黄色ワセリン等を
用いて！１１にすることができる。

次に実施例により式（１）の化合物の製造法をさらに具
体的に説明する。

実施例Ｉ　Ｎ−ベンゾイル−８−（２−ベンゾイル７凹
凪−シス−Ｎ２ｕｌ！ｊＬ Ｓ−（２−７ミノエチル）−Ｌ−システィン−塩酸塩１
　ｇ（５１ｏｌｅ）をジオキサン５曽１及び水５鵠１の
混合物に溶解後水冷し、ジオキサンに溶解したベンゾイ
ルクロライド１．４４ｍ１（１２，５−ｗｏｌｅ）をＩ
Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨ９−１０に保ちつつ、攪袢下
に徐々に滴下した。同温度で２時間攪拌後、反応液がニ
ンヒドリン反応陰性になるのを確かめて反応を停止する
０反応液を同量の酢酸エチルで抽出する。水層をＩＮ塩
酸でｐＨ２，０に、１１Ｉ整後、再び同量の酢酸エチル
で二面抽出する。この酢酸エチル層を合わせ、無水硫酸
す）　＋７ウムで脱水後減圧濃縮する。濃縮物をクロロ
フォルムに溶解し、結晶化させる。探題化合物が白色結
晶とし−〔定量的にえられた。

［αｌ’ｉ−３４，５’（ｃｌ、Ｏ、メタノール）１０
１Ｒ（ＣＤＣＩ　３、ＴＭＳ　） δ：２，７８（２１１、Ｌ、　Ｊ＝６，０Ｈｚ１Ｓ　　
Ｃｊｊｚ　　ＣＩ＋２）３、１３（２１１，ｍＳＳ　　
ＣＨ２ＣＨ）３．５９（２１１Ｓｔ、　Ｊ＝７．０１ｌ
ｚ、　Ｎ−Ｃ１１Ｌ−Ｃ１１，−５）４．９７（Ｉｌｌ
、輪、５−ＣＩｌ□−Ｃ４ｊ）７．１０−８．１０（１
２１１、鎗、ＮｌｌＸ２、＾ｒｉｌ）１０．９６（Ｉｌ
ｌ、Ｓ、　Ｃ００ＩＩ）実施例２　５−（２−７タルイ
ミドエチル）−Ｎ−７り只イルーＩ２二に一人ｊヨ仁乙
！す１光５−（２−７ミ／エチル）化−システィン−塩
酸塩５００論ｇ（２，４９ｍｍｏｌｅ）を水１０＋ｓｌ
に溶解し、炭酸ナトリウム０３６　Ｂ（６ｍｍｏｌｅ）
を加えた後、Ｎ−二ト斗ジカルボニル７タルイミド１．
６７ｇ（７，６ｓｍｏｔｅ）を徐々に加え室温で１６時
間反応させた。

反応液を塩化メチレン２０ｍ１にて２回抽出後ｐｒ−＋
を２．０に調節し、塩化メチレンにて各５０ｍ１にて３
回抽出した。抽出液を合わせ水洗を５回（各５０１）行
なった後芒硝上で乾燥した。　ｔ濾過後減圧濃縮液をシ
リカゲルカラム（５０ｇ）に吸゛着させ、トルエン−酢
酸エチル（１：１　）、酢酸エチルにて溶出した。溶出
区分中の酢酸エチル−メタノール（１：１）Ｊｊｌ闇の
シリカゲル薄層クロマトグラフィにてＲｒ値０．５９に
紫外線吸収を示す区分を集めて減圧乾固すると、標題化
合物が白色粉末として６４４Ｍｇ（収率６４％）得られ
た。

Ｅｌ冒−９７＠（ｃｌ、０、メタノール）８８１１（Ｃ
ＤＣ１，、ＴＭＳ　） δ：２．８０（２１１、ｄｄ、　、Ｊ”６，０１ｌｚ％
Ｊ＝７．５１１ｚ、　５−Ｃｌ１２−Ｃ１１，） ３．４２（２Ｈ，慟、５−Ｃ１１，−Ｃ１１）３．８１
（２Ｈ，ｔ、　Ｊ＝７．ＯＨｚ、　Ｓ　　ＣＨ２Ｃ１１
２Ｎ）４．９８（ｉｌｌ、ｄｄ、　Ｊ”５．ＯＨｚ、　
Ｊ＝１０．ＯＨｚ％Ｓ　　ＣＨ２−Ｃ１ｊ） ７．５９（８Ｈ，ｍ、＾ｒｉｌ） ８．０８（１１１、ｓ、　Ｃ００ＩＩ）手続層１１正書
く自発） 昭和６２年７月１５０

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 式 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） 式中、Ｙ＾１及びＹ＾２は同一もしくは相異なり、それ
   ぞれベンゾイルアミノ基又はフタルイミド基を表わす、 で示される化合物。