JPS6328384A - 細菌発育培地 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、細菌発育のための装置および培地に関する。

具体的には、本発明は、細菌を、最初の細調教から最終
的なあらかじめ定められた数まで発育さすための装置お
よび培地に関する。この装置は、そのような発育のため
の培地および培地に接種するためのあらかじめ定められ
た細調教をうるための手段を包含している。

本発明の発育を制限する培地は、細菌を同定しそして細
菌の抗生物質に対する感受性を測定するために用いられ
るいくつかの操作にイｉ用である。

このような操作では、試験操作の開始時に、細菌を、あ
る調度範囲（Ｃ，Ｃ，当たりのコロニー形成単位、ＣＦ
　ｔＪ　／ｃ、ｃ、　）にしておく必要がある。さもな
いと、最終結果は正確でない。たとえばＴｈＣＡｍｅｒ
ｉｃａｎ　　Ｊｏｕｒｎａｌ　　ｏｆ　　Ｃｌ１ｎｉｃ
ａｌ　　Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ１４５巻、４号、４月、１
９６６．２９３−２９６頁の゛１八ｎｔｉｂｉｏｔｉｃ
ｓ　５ｕｓｃｅｐｊｔｂｉｌｉｔｙ　Ｔｅｓｔｉｎｇ　
ｂｙＳｔａｎｄａｒｉｚｅｄ　Ｓｉｎｇｌｅ−Ｄｉｓｃ
　Ｍｅｔｈｏｄ″およびｔｈｅ　　Ｎａｔｉｏｎａｌ　
　Ｃｏｍｍ１ｔｔｅｅ　　ｆｏｒ　　Ｃｌ１ｎｉｃａｌ
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　　５ｔａｎｄａｒｄｓ　　ｏｆ
　　ｔｈｅ　　Ｌｌｎｉｔｃｄ　　５ｔａｔｅｓ　　ｏ
ｆ＾ｍｅｒｉｃａにより発行された’　ｐｅｒｒｏｒｓ
ａｎｃｅＳｔａｎｄａｒｄｓ　ｆｏｒ　Ａｎｔｉｍｉｃ
ｒｏｂｉａｌ　Ｄｉｓｃ　５ｕｓｃｅｐローｂｉｌｉｔ
ｙ　Ｔｅ５ｔ　“ＡＳＭ−２に、迅速に発育する細菌の
抗生物質および化学療法剤に対する感受性を測定する、
Ｋ　ｉ　ｒｂｙ−Ｂａｕｅｒ法が記載されている。

Ｋ　ｉ　ｒｂｙ−８ａｕｅｒ法は、ふつう、患各より得
られた細菌のコロニーを寒天プレート上に発育さすこと
を包含する。細菌の４から５個のコロニーを白金耳を用
いて釣菌し、それらを、大豆カゼイン消化物ブロスの４
から５ｃ、ｃ、を含有する試験管中に加える。試験管は
２から８時間インキュベートし、中程度の濁り細菌懸濁
液とする。この懸濁液は、ついで、必要ならば、塩溶液
または類似のブロスで希釈しＱ、５ｃ、ｃの１％ＢａＣ
ｌ２を９９．５ｃ、ｃ、の１％Ｈ２Ｓｏ４　（０，３６
規定）に添加し調製されるスタンダード（０、５ＨｃＦ
ａｒｌａｎｄスタンダード、以降、ＨｃＦａｒｌａｎｄ
スタンダードと称する）と児）赴は上同じ密度とする。

Ｈｕｅｌｌｃｒ−Ｈｉｎｔｏｎ寒天含有プレートに、こ
の細菌ブ１」ス懸濁液を木綿塊を用いて塗沫する。接種
物が乾燥したあと、抗生物質または化学療剤を含有する
ディスクを寒天上におく。プレートはついで１夜イン４
ユベートシ、細菌発育のない各ディスクのまわりの面積
を測定する。これは阻止域として知られており、特定の
細菌に対して有用な抗生物質を決定するのに使用する。

にｉ　ｒｂｙ−Ｂａｕｅｒ法が正確であるためには、寒
天プレート上に塗沫する培地中には約１×１０８ＣＦ　
Ｕ　／ｃ、ｃ、が含有されねばならない。ふつう、発育
のレベルは上記のＨｃＦａｒｌａｎｄスタンダードと肉
眼で比較して測定する。細菌がこの濃度に達するに要す
る時間は、細菌に応じて変化するが、２から８時間に変
化する。細１４が１Ｘ１０８ＣＦＵ／Ｃ，Ｃ，を超える
ほどに発育したＨｃＦａｒｌａｎｄスタンダードよりよ
り濁るならば、培地は、スタンダードに等しくするよう
に希釈されねばならぬ。

種々の細菌に対する細菌の感受性を測定するための別の
方法は、ＭＩＧまたは最小に１１濃度試論と称されるも
のである。この試験は、ＡｌｂｅｒｔＢａｌＯＷＳ　、
０１９７４．７７から８７頁、被、１ｉｌＩ菌の発育を
支える液体または固体培地中、抗生物質を一連の希釈濃
度としたものを調製する。

液体培地は試験管中に加えるのが便宜であり、固体培地
にふつうベトリ皿に注入する。この試験を行なうには、
１定範囲の濃度の抗生物質を１連の２１８希釈に調製す
るのがふつうである。各チューブまたはベトリ皿には、
問題となっている細菌を接種する。一定時間インキュベ
ーションしてから、細菌が発育しているかまたは発育し
ていないかの状態を、各抗生ｖｌＪｉｎ度について測定
する。このようにして、系列希釈した時の、もつとも近
い希釈度として、抗生物質の最小阻止濃度を測定する。

これが、阻止濃度を測定するもつとも正確な方法である
。しかし、希釈溶液を調製する面倒な努力がｌｌｌｌ１
１！化された最近までは、この方法は一般的に普及しな
かった。ＭＩＣ試験では、希釈された抗生物質には、あ
る濃度範囲つまり１０５から１０６ＣＦ　Ｕ／ｃ、ｃ、
の細菌を接種する。

）１ｃＦａｒｌａｎｄスタンダードに相当するまで発育
した細菌を含有するブロス、つまり約１×１０８ＣＦＬ
Ｊ／ｃ、ｃ、までに発育したものを希釈して、この濃度
とする。

上記の感受性試験ならびに、細菌の型またはそれの抗生
物質に対する感受性を測定するための別の試験では、Ｋ
ｉｒｂｙ−Ｂａｕｅｒ試験の場合にペーパーディスクを
おこうとするベトリ皿に接種するかまたはＭＩＣ試験の
場合には系列希釈抗牛物Ｙ１含有ブロスに接種しようと
ゴる場合、ある定められた聞の細菌を試験に使用する必
要を生ずる。このことは、試験が正確であるのに必要な
のである。より少ない細菌濃度では、実際よりもより抗
生物質に対して感受性であるような結果を与えるであろ
う。使方、細菌がより高濃度に存在すると、試験の結果
は、細菌の発育を阻止づ゛るのに必要であるよりもより
高い抗生物質濃度を必要とすることを示すことになるで
あろう。いずれの指示をら誤まつていることになる。

上記の試験またはそれに類似する試験を実／Ａするには
、実験室の技術省は細菌の発Ｒしている寒天平板より４
から５１！Ｉのコロニーを取りそれを上記した７０ス発
育培地中で２から８時間おく必要がある。培地は一定時
間おぎに調べて、細菌の濃度がＨｃＦａｒｌａｎｄスタ
ンダードに等しいかどうかをみる。培地を肉眼でみると
、細菌のある培養物は適当な濃度まで発育しないのに、
他は適当な濃度以上に発育している。前者の場合、細菌
はより長く発育させ、後名の場合、希釈して標準の濃度
に戻す。これらはいずれも面倒であるし、時間がかかる
。

本出願人は、１８菌が発育しつるが、しかし、細菌が発
育１り達する濃度レベルをｆｉｌ＋限する培地を発見し
たのである。具体的には、本出願人は、２つの責なる属
の、好気的、病原性の、迅速に発育する［ｌ菌より少な
くともひとつの種を、出発時の数よりあらかじめ定めら
れた終りの数まで発育させ、その時点で、細菌は、培地
中の栄養分の欠如により実質的に発育を終止しそして該
細菌が少なくとも１８時間は生存状態にいる水性培地を
発見したのである。この培地は、炭素原、窒素原、ビタ
ミンおよび無ｎ質を発育さすに十分の■でそして細菌の
発育に使用されうる形で含有している。

培地が有用である細菌は、好気的の、つまり発育するの
に酸素を使用する細菌である。細菌はまた病気をおこす
点で病原性であり５０分または以下の分裂時間を有する
点ですみやかに発育するものである。

この培地は、グラム陽性およびグラム陰性両方の、病原
性の迅速に発育する細菌である。しかし、培地中の種々
の成分の型および伍は、グラム陽性菌はグラム陰性菌と
ふつうは界なり、そしてグラム陽性菌について必要な濃
度とするには、グラム陰性菌より長くかかる傾向を示す
。

本発明の発育培地は、２つの異なる属の好気的、病原性
Ｗ＋菌のうちの少なくともひとつの種を発育させる。ふ
つう、培地は、２つの居のグラム陽性菌より少なくとも
ひとつの種を発育ざぽるかまたは少なくとも２つの属の
グラム陰性菌より少な（ともひとつの居を発育させる。

グラム陽性の好気的細菌では、ふつうの細菌および感受
性試験を実施する必要のある、大部分の病気をおこすａ
ｌｌ菌を包含するのに２つの届がある。それらは、スタ
フィロコッカスおよびストレプトコッカスである。

もしも培地がこれらの２つの属のそれぞれよりの秤を発
育さすならば、ダラム染色試験を用いて、それがグラム
陽性が陰性かを決定するために細菌を試験するだけです
む。細菌がグラム陽性ならば、グラム陽性細菌を発育さ
す培地を使用し、培地は、ＨｃＦａｒｌａｎｄスタンダ
ードに等しいような望むレベルまで細菌を発育させる。

ダラム染色試験でＩＩＩ菌がグラム陰性であるとなると
、細菌はさらに多くの数の属に由来することになる。グ
ラム陰性の好気的細菌でおこされる病気の９９％は、１
６種の属に入る細菌によりおこされる。これらグラム陰
性菌には、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ。

Ｓｈｉｇｅｌｌａ、　Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ、　Ｓ
ａ１ｍｏ’ｈｌｌａ。

Ａｒ１ｚｏｎａ、　Ｃ１ｔｒｏｂａｃｔｅｒ、　Ｋｌｅ
ｂｓｉｅｌｌａ。

Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、　　５ｅｒｒａｔｉａ、　
　Ｐｒｏｔｅｕｓ。

Ｐｒｏｖｉｄｃｎｃｉａ、　　Ｙｃｒｓｉｎｉａ、　　
Ｐｓｃｕｄｏｍｏｎａｓ。

八ｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ、　Ｈｏｒａｘｅｌｌａお
よびＰａ５ｔｅｕｒｃｌ　ｌａがある。

培地は、ふつうは上記定義のようなＣＦＵで記載されそ
しである容量の培地をす準として表わされる、つまりＣ
Ｆ　Ｕ　／ｃ、ｃ、として表わされるある細調教より発
育さＶる。最初のＱ度は１ｃ　ｔ＝　ｕ程度に低くあり
うるが、ふつうは、そして、なるべくは、少なくとも５
　Ｘ　１０６ＣＦ　ＬＪ／ｃ、ｃ、とする。

より低い細調教または濃度から出発してｂ、より高い濃
度から出光した場合と著しく異なる最終細調教を与える
ことはないけれども、員終濃度に達するまでのけ、１間
が異４τる。そして、インキコベーション時間を調節し
ようとするならば、最初の濃度を調節せねばならぬ。細
菌の到達するＩｉ終濃度は、安定相といわれる。

上記Ｑ７ｊ＋のように、ＨｃＦａｒｌａｎｄスタンダー
ドに等しい濃度に達するための時間は、試験操作に応じ
て、２から８時間を要し、大部分の細菌では、その澗磨
に達するのに少なくとも５から６時間を要する。、Ｒｉ
′ｌｆ制限培地を用いて、細菌は、５時間のうちに、最
終Ｑ度または安定相に到達さすのが右利である。発育お
１限培地を用いて細菌が２時間で安定相に達しても、技
術者が５時間のあいだ培地をチェックしなくても、その
状態に留まり、ＨＣＦａｒｌａｎｄスタンダードに等し
い濃度とするのに希釈を必要としない。

安定相または最終濃度に達すると、細菌の発育は実質的
におらこむ。これは、細菌の連続的発育に不可欠な栄養
分の少なくとも１種の消耗によるのであって、発育を停
止させそして細調教を実質的に減少させうる毒性副生成
物を細菌が生産することによるものでない。本発明収面
に用いられそしてにｉ　ｒｂｙ−Ｂａｕｅｒ操作に用い
られている標準培地では、発育の生長が落ちこむ細調教
は、細菌のみ性ｚ１産物により決定されたのであった。

この場合の細調教はＨｃＦａｒｌａｎｄスタンダードを
超えている。

最終濃度または最大安定相は、１種または１種より多く
の栄養分の消耗により達せられる。この点で生きている
ＣＦＵ／ｃ、ｃカランｌ−ｉよ、平らとなりそして少な
くとも約１８１１．’ｉ間間質質的不変に留まる。細菌
は、上記のように実施しようとする種々の−を験を実施
するに有用な８．１間のあいだ生存している。ふつうこ
のような生存のあいだの時間は少なくとも１８時間であ
る。

大部分の細菌について最終の望む濃度は６×１０　から
３．ＯＸ　１０８ＣＦＵ／ｃ、ｃ、とする。

これはＱ　、　５　ＨｃＦａｒｌａｎｄスタンダードに
相当する。

培地（よ種々の望む濃度レベルに到達づるように変型さ
れうる。

培地の型および成分は、細菌に望む最終濃度Ｊ３よび発
育させる細菌の型に応じて変化させうる。

すべての場合、細菌の発育に有用な形状の炭素および窒
素を与える形状で、炭素および窒素原が存在しうる。ふ
つうビタミンおよび無磯物もまた存在する。しかし、上
記したように、１秤または１種より多くのこれらの成分
は、ｔ４Ｊ菌が最終のあらかじめ定められた濃度に達し
実質的に発育を停止するように制限する。

ダラム陰性細菌では、有利な培地は培地ｉ　ｃ、ｃ。

について約０．４２から０．７０ミリグラムの炭素を含
有する。炭素は、細菌が発育に有用な形状とする。この
形は、炭素がペプトンまたは類似の形状で存在するもの
であることが分った。有利な培地はさらに、ペプトン中
に存在する窒素と類似の形で、培地Ｃ，Ｃ，当たり０．
０９から０．１５ミリグラムの窒素を含有する。有利な
培地は約７から８までのｐＨを有する。ブ［１テオース
ベブトンを用いる場合、炭素の第四は、培地Ｃ，Ｃ，に
ついて約０．１６から０．２７ミリグラムで、窒素は、
培地Ｃ，Ｃ５について０．０３５から０．０５６ミリグ
ラムで、炭素および窒素は、プロテオースペブトンまた
はそれに類似の形で存在するものとする。

ペプトンの代表的な分析結宋をつぎに示す。

パーセント ペプトン　プロテオ− スベブトン 全窒素　　　　　　　　　１６．１Ｇ　　　　１４．３
７１級プロテオースＮ　　　　Ｏ，０６０，６０２級プ
ロテオースＮ　　　　Ｏ，６８４，０３ペプトンＮ　　
　　　　　　１５．３８　　　　９．７４アンモニヤＮ
　　　　　　　０．０４　　　　０．００Ｔ１離アミノ
基　　　　　　　３．２０　　　　２．６６アミドＮ　
　　　　　　　　　Ｏ，４９０，９４モノアミノＮ　　
　　　　　９．４２　　　　７．６１ジアミノＮ　　　
　　　　　　４．０７　　　　４．５１トリプトフアン
　　　　　０．２９０．５１チロシン　　　　　　　　
０．９８　　　　２．５１シスチン　　　　　　　　　
０．２２　　　　０．５［３右機イオウ　　　　　　　
　０．３３　　　　０．６０無機イオウ　　　　　　　
　０．２９　　　　０．０４リン　　　　　　　　　　
　０．２２　　　　０．４７１！索　　　　　　　　　
　０．２７　　　　３．９５ナトリウム　　　　　　　
１，０８２．８４カリウム　　　　　　　　０．２２　
　　　０．７０カルシウム　　　　　　　　０．０５８
　　　０．１３７マグネシウム　　　　　　　０．０５
６　　　０１１８マンガン　　　　　　　　な　し　　
　０．０００２鉄　　　　　　　　　　　　０．００３
３　　　０．００．５６灰分　　　　　　　　　　　３
．５３　　　　９．６１エーテル可溶性抽出物　　０．
３７　　　　０．３２反応、ｐｌ＋　　　　　　　　　
７．０　　　　　Ｇ、８９Ｈは、１％蒸留水中溶液を１
２１１１１１ｊＣで１５分間オートクレーブしたあとの
ものである。

この有利な培地は、ペプトンまたはプロテオースベブト
ン中に存在するビタミンおよび無機塩を含有する。５時
間より少ない時間のうちに６×１０　から３　Ｘ　１０
８ＣＦ　ＬＪ／ｃ、ｃ、の最終濃度までグラム隘性菌ま
で発育ざすに有用なことの分った、２つの特に有用な処
方物は、０．８グラムのベグ１〜ンまたｌ；ｔＱ、３グ
ラムのプロテオースベブトン、０．０３グラムのデキス
トロース、２．５グラムのリン酸ジカリウム、１．２５
グラムのリン酸モノカリウムおよび５．０グラムの塩化
カリＣシムを含有する１００ｃ、ｃ、、の水の混合物で
ある。

リン酸塩は、緩衝材料として加えて、組成物を約７．０
のｐｌ＋に保つように添加する。細菌の種類によっては
、緩衝が必要である。上記の′２つの処方物は、細菌の
最初の濃度が十分であるならば、たとえば、少なくとも
約５　Ｘ　１０６ＣＦ　Ｕ／Ｃ，Ｃ，である場合に、ダ
ラム陰性、好気性、病原性細菌の大部分よりの種が、５
時間のうらにＬ記ＣＦＵ／Ｃ，Ｃ，の範囲まで発育しう
る培地を提供する。

上記のように、炭素原および窒素原の右利なものは、グ
ラム院性菌については、ペプトンおよびプロテオースベ
ブトンとづる。ネオペプトン、トリプトンおよびポリペ
プトンもまた用いうるが、これらは同じ時間の枠内でＨ
ｃＦａｒｌａｎｄのスタンダードまでの発育を来たさぬ
こと、そして、あるダラム陰性細菌については、な／ν
ら有Ｒな０度にまでの発育を与えぬことが分った。それ
ゆえに、これらの材料は、より限定された数の細菌だけ
に有用であることになる。しかし、このような材料のペ
プトンまたはプロテオースベブトンとの組合わせは、よ
り多数の細菌に有用な培地を提供するのに使用しうる。

グラム陽性細菌に用いるに有用な培地は、１．７グラム
のトリブテイケースと、０．３グラムのフイトン（ｐｈ
ｙｔｏｎｃ　）と、０．２５グラムのデキストロースと
、０．５グラム塩化ナトリウムと、０．２５グラムのリ
ン酸ジカリウムとを含有する１０００ｃ、ｃ、の水の溶
液を包含する。

これら種々の培地のすべては、培地に細菌を接種しそし
て培地を２から８時間インキュベートすることにより使
用しうる。

上記の発育υｊ限培地を使用し、そして、発育制限培地
に接種するための細菌のコロニーよりのあるあらかじめ
定められた川の細菌をうろことを可能とブる、ひとつの
装置が考案された。この装置は、細菌の発ｎのための時
間をあらかじめ定めることも可能とするという利点を有
する。ダラム陰ｔｉｔ細菌について５時間以内の右利な
時間内に必要な発育がおこるようにするためには、値切
の調教は、少なくとも約５　Ｘ　１０６ＣＦ　Ｕ／ｃ、
ｃ、とぜねばならない。

つまり、本出願人等は、細菌を、最初の数より定められ
た最終数まで発育させ、その時点で、培地の欠乏により
該細菌の発育が実質的に落ち込む装置を発見したのであ
る。この装置は、（ａ）該細菌を、その初めの調教から
定められた最後の調教まで発育さけうる発育培地の供給
原を含有する、開口部を有する容器と：（ｂ）該容器の
外部にあるところの該細菌の少なくともひとつの発育コ
ロニーより既知楢の細菌をうるためにそして該発育培地
に接種するために用いられる、該容器中に存在する手段
と；（Ｃ）該容器の内部に無菌状態を保つために該容器
中の該開口部をおおうためにあり、該培地に接種するた
めに使用する、該容器の外部にある該細菌の該コロニー
より■知最の細菌をうるために細菌を採取するために、
該細菌を得る際に取り外しつるようにした。そして、接
種された該培地をインキュベートするあいだ該容器を閉
じておくための、取除きうる１段とを包含している。

装置は、図面を参照して説明する。第１図は、本発明の
装置の内部断面図である。第２図は、部分的に断面図と
した、本発明の装置の透視図である。第３図は、本発明
のＲ買の棒の１部の内面図である。第４図は、その中に
細菌の含まれているところを示す。第３図の杯状製品で
ある。第５図は、発育培地に細菌を接種した直後の本発
明の装置の断面図である。第６図は、第５図に承す本発
明の装置のライン６−６に沿った断面図である。

第７図は、接種しそして最大安定相またはあらかじめ定
められた光合段階までインキュベーションしたあとの本
発明の装置の断面図である。第８図は、第７図の装ｄを
ライン８−８に沿って切断した断面図である。

本発明の装置は、ポリプロピレン、ポリアミド、セルロ
ーズアレテート、ブチレートまたは種々のポリニスデル
のような透明の変型しうる材料より作られている容器ま
たはスリーブを含有する。スリーブ１の内部には、ガラ
スアンプル２が含有され、その中には上記のように、発
育制限培地３が含有される。あとから記載するように、
ガラスアンプルは脆弱性で、変型しつるスリーブ１を圧
迫すると破壊される。装置のアンプル２に対して並列し
て棒４が存在する。これは先細りの満５を含有している
。これは、第３および４図によりさらにくわしく記載す
る。棒４は、細菌の種々のコロニーより細菌を釣菌する
のに用いられ、コロニーより先細りの満５へ細菌のあら
かじめ定められたωを取り込むように作られている。捧
４はキャップ６に固定する。キャップ６および棒４は、
ポリプロピレンのようなプラスチック材料より作られる
、キャップ６の内部には、２つのリム（ｒｉｍ）７およ
び８を有し、キャップ６およびスリーブ１のあいだに無
菌的な栓をするようにしである。これは、装置を接種す
るより前およびインキュベーションのあいだ、他の微生
物がスリーブ１ｍｌ入るのを防止する。キャップ６には
、３個のブロンジ（Ｐｒｏｎｇｅ）　９が含まれるが、
それらのうち２つが第１図に含まれる。これらのブロン
ジは、キャップ６中の孔１０を、変型しうるスリーブ１
が変型されて細菌および培地３を孔１０から押出す際に
、つまり装置を作動さす際にアンプルよりの砕かれたガ
ラスで詰まってしまうのを防止づる。孔１０は感圧性の
接テープ１１（タブ１２を含有する）で装置の使用前お
よび装置をインキュベーションの完了するまでおおう。

その時点でテープ１１を露出する孔１０より剥がす。そ
れにより、スリーブ１より、培地３および細菌をしぼり
出す。

第２図は、感圧性接着テープ１１が存在しないことを除
いては、使用前の正常の形状の装置を示す。見られるよ
うに、棒４はアンプル２に隣接し、リム７．１５よび８
はスリーブ１の上部に並置されている。この場合孔１０
は露出させて透視的に見せており、感圧性テープ１１は
示してない。ブロンジ９はここには示してない。ガラス
アンプル２は、ふつう３５．６ミリメードル×６．３ミ
リメートルの大きさで、約Ｑ、５ｃ、ｃ、の発育培地を
含有する。スリーブＩ　Ｇ、ｔふつう４３．Ｏミリメー
トルの長さで８．６ミリメードルのｔｉ径である。

本発明の装置の重要な特徴は、先細りの満５を含有する
棒４である。溝５は、第３図によりくわしく示しである
。示しであるように溝５は先細りにしである。この溝は
、細菌が溝５に押込められるように毛細管作用を与えら
れている。先細りしている溝５の大きい方の端がコロニ
ーにまず接触するように、コロニーの表面に６角に棒４
を押しつける手段により細菌を押しつけると、細菌は溝
を上部し、空気は、溝の先細りになっている方の端より
押出される。あるあらかじめ定められたレベルとなると
、満５に連結的に押込まれる細菌は、溝５の先細りにな
った端の方へ移動づるのでなく、ｉ笥５の頂部より移動
して出るので、それ双子の細菌１ま溝の中に押込まれえ
ない。第３図は、正常に詰められた状態の、満５の中に
おける細菌１３を模式的に示している。溝５は、ある数
の細菌が溝の中に入るのを可能とするようになっている
。これは、本発明の装置の培地中に細菌をおくときに、
Ｃ，Ｃ，当たり少なくとち５×１０６個の細菌に等しい
。先細りしている溝は約０．４３ミリメートルの深さ、
０．２５ミリメートルの巾（もつとし広い末端のところ
）、そし−Ｃ３，１ミリメートルの良さで、これが上記
の量の釣菌を可能とするはづである。溝は、細菌の種々
の数に合わけて変型されうる。

この装置の使用を、第５図から第８図までにより記載す
る。第５図は、捧４を用いる装置の接種直後の本発明の
装置を模式的に示している。キャップ６をスリーブ１よ
りはづし、棒４の先細りしている溝５により、４から５
１１！ａの細菌コロニーより、装置を接種するに十分量
、通常少なくと６５×１０６個の細菌を釣菌プる。キャ
ップ６をふたたびはめ、棒４および溝５３経由して、細
菌を、アンプル２に隣接しておく。第５図に示すように
、アンプル２は、スリーブ１を変型して破壊する。

細菌１３は、琵育υ１限培地３中に模式的に示しである
。この形状のＷ置は、ふつう約３５度Ｃに２から８時間
インキュベートする。有利な発育培地では、あらかじめ
定められたａの細調教、つまり５　ｘ　１０　　から３
　Ｘ　１０８ＣＦ　Ｕ／ｃ、ｃ、とするのに５時間を要
する。第６図は、インキュベーション開始時の第５図の
装置の断面図を示し、破壊されたアンプル２、発育培地
３および細菌１３を示す。

インキュベーションしたあとの装置は、第７図の形で示
づ゛。この場合、装置のすべては、細菌１３の数が著し
く増加する以外は、前と同様である。

第８図は、この段階での第７図の装置の断面図を示す、
インキュベーション模の使用に際しての第７図の装Ｆｆ
は、テープ１１が取除かれ、発育した細菌が孔１０を経
由して押出されつる状態となっている。この装置は、孔
１０を下方に向けるだけでよい。スリーブ１を圧迫し変
型し細菌１３および培地３を孔１ｏより押出づ−、アン
プル２に由来するこわれたガラスは、ブロンジ９により
孔を詰めることがない。

棒４の中の先細りした満５は、釣菌される細菌の数が上
記より大きいかまたは小さいように、秤杆の細菌接秤数
に応じて変化さぜうる。棒または釣菌装ｄが、あらかじ
め定められた量の細菌を反復操作により釣菌しうる限り
、先細りした１ｉｌｉ以外の他の構造物も使用されつる
。この装置は、細菌が、釣菌装置により定められるあら
かじめ定めた出より、発育制限培地により定められる最
終レベルに、ある一定時間で達することを可能とする。

この時間は、最初の調教、発育υ１限培地の処方および
細菌の型で決まる。にｉ　ｒｂｙ−Ｂａｕｅｒ試験また
ＭＩＣ試験に用いるためには、５時間のうちに杓６Ｘ１
０　から３　Ｘ　１０８ＣＦ　Ｕ／ｃ、ｃ、の濃度まで
発育さす装置が有利である。

示した装置は、ガラスアンプル２の中に発育ａＩｌｊ限
培Ｉａ３を含有する。同じ結果をうるのに他の変型も可
能である。たとえば、装置は、ねじのついたキ）フツブ
を有する、ねじを切ったスリーブでありうる。そして、
それに棒を取付ける。この場合、発育υ１限培地がスリ
ーブの中にあり、キャップをスリーブにふたたびはめる
時に、直接に接種しうる。細菌は捧で釣菌し、培地中に
棒を入れると同時に４１７ツブをねじって戻す。他の変
型も専門家にとって明らかであろうが、これらも本発明
鞘囲内に含めるものとする。

第１図に記載の装置は、種々のガラスおよびガラス成分
を成型し成形して作られる。約０．６Ｃ，Ｃ，の培地３
をガラスアンプル２の中に入れガラスアンプル２を熱密
封する。アンプル２は１２１度ｃ　−ｃ　ｉ　ｏ分間蒸
気滅菌する。スリーブ１、ギヤツブ６；！′３よびテー
プ１１は、１００度Ｆで３時間酸化エチレンでガス滅菌
ザる。ついで８■島間通気−４る。閉じられそして滅菌
されたガラスアンプル２はスリーブ１ｍｌ無菌的に付け
る。キャップを取り付け、チー１１１をつける。

つぎの実施例で用いる材料および細菌を記載しておく、
入手先ら記載しておく。これらの例で゛発育装置″は、
上記のような大きさを有する装置を意味する。

トリプトン、カゼインの酵素水解物、ＤｉｒＣＯ。

Ｉｎｃ、、　Ｄｃｔｒｏｉｔ、　Ｈｉｃｈｉｇａｎ、　
Ｕ、Ｓ、＾。

ペプトン、カゼインの酵素水解物、ＤｉｒＣＯ。

Ｉｎｃ、、　Ｄｃｔｒｏｉｔ、　Ｈｉｃｈｉｇａｎ、　
Ｕ、Ｓ、Ａ。

デキストロース、Ｄｉｆｃｏ、　Ｔｎｃ、、　Ｄｃｔｒ
ｏｉｔ。

Ｈｉｃｈｉｇａｎ、　Ｕ、Ｓ、Ａ ポリペプトン、カゼインおよび動物組織の酵素水解物、
Ｂｉｏｑｕｅｓｔ、　Ｉｎｃ、、　ＢａｌｔｉｍＯｒＱ
、　Ｍａｒｙｌａｎｄ。

Ｕ、　Ｓ、　Ａ。

ネオペプトン、蛋白質の酵素水解物、ＤｉｆＣＯ。

Ｉｎｃ、、　Ｄｅｔｒｏｉｔ、　Ｈｉｃｈｉｇａｎ、Ｕ
Ｓ、Ａブ【」テオースベブトン、蛋白質の酵素氷解物、
Ｄｉｒｃｏ、　　Ｉｎｃ、、　Ｄｅｔｒｏｉｔ、　Ｈｉ
ｃｈｉｇａｎ、υ、Ｓ、Ａ。

Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　　ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、　
　八ｍｅｒｉｃａｎ　　ＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅ　　Ｃ
ｏ１１ｅｃｔｉｏｎ、　　　（ＡＴＣＣ）　　Ｎｏ、１
９０２８Ｓｈｉｇｅｌｌａ　　５ｏｎｎｃｉ、　　（Ａ
ＴＣＣ２５３３１）Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ｃｌｏ
ａｃａｅ（ＡＴＣＣ２３３５５）およびＳｔ。

Ｐａｕｌ　　Ｒａｍ５ｅｙ　　１ｌｏｓｐｉｔａｌ、　
　Ｓｔ、　　Ｐａｕｌ、　　Ｈｉｎｎｅｓｏｔａ。

ＵＳ、八。

Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｃｕｍｏｎｉａｅ、　　（
八ＴＣＣ２３３５７）およびＳｔ、　　Ｐａｕｌ　　Ｒ
ａ１ｓｅｙ　Ｈｏ５ｐｉｔａｌ、　　Ｓｔ、　　Ｐａｕ
ｌ。

Ｈｉｎｎｅｓｏｔａ、　　１１．ｓ　　八。

Ｐｒｏｔｃｕｓ　　Ｖｕｌｇａｒｉｓ　　（Ａ１ＣＣ６
３８０）Ｐｒｏｔｃｕｓ　１ｉｒａｂｉｌｉｓ、　　Ｓ
ｔ、　　Ｊｏｈｎ’ｓ　１ｌｏｓｐｉｔａｌ。

Ｓｊ、　Ｐａｕｌ、　）ｌＩｌｌｎｅｓＯｔａおよびＳ
ｔ、　Ｐａｕｌ　Ｒａ１ｓｅｙＨｏｓｐｉｔａｌ、　　
Ｓｔ、　　Ｐａｕｌ、　　Ｈｉｎｎｅｓｏｔａ、　　Ｕ
、Ｓ、Ａ。

５ｅｒｒａｊｉａ　ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ　（ＡＴＣＣ
８１００）およびＳｔ、Ｐａｕｌ　　Ｒａ１ｓｅｙ　　
ｔｌｏｓｐｉｔａｌ、　　Ｓｔ、　　Ｐａｕｌ、　　Ｈ
ｉｎｎｅｓｏｔａ。

Ｕ、Ｓ、八 Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ　　５ｐｅｃｉｅｓ、　　Ｕｎ
ｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｒＨｉｎｎｅｓｏｔａ、　　Ｈｉ
ｎｎｅａｐｏｌｉｓ、旧ｎｎｃｓｏｔａ、　Ｕ、Ｓ、Ａ
、Ｃ１ｔｒｏｂａｃｔｅｒ　　５ｐｅｃｉｅｓ、　ｕｎ
ｉｖｅｒｓｒｔｙ　ｏｒ　５ｉｎｎｃ−ｓｏｔａ、　　
Ｈｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、　Ｈｉｎｎｅｓｏｔａ、　　
Ｉｌ、Ｓ、ＡＥｄｖａｒｄｓｉｃｌｌａ、Ｕｎｉｖｅｒ
ｓｉｔｙ　　ｏｒ　　Ｈｉｎｎｅｓｏｔａ。

Ｈｉｎｒ＋ｅａｐ０１ｉＳ、　　　Ｈｉｎｎｃｓｏｔａ
、　　Ｕ、Ｓ、八。

＾ｒｌＺＯｎａ、ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　　Ｏ（Ｈｌｎ
ｎｅＳＯｔａ。

Ｈｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、　　）ｌｉｎｎｃｓｏｔａ、
　　Ｕ、Ｓ、Ａ。

Ｙｅｒｓｉｎｉａ、　　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｒ　
Ｈｉｎｎｃｓｏｔａ、　Ｈｉｎｎｅａ−ｐｏｌｉｓ、　
　ＨｉｎｎｅＳＯｔａ、１１．ｓ、Ａ。

Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ　　
（八ＴＣＣ２７８５３）　　５ｔＰａｕｌ　　Ｒａ１ｓ
ｅｙ　　Ｈｏ５ｐｉｔａｌ、　　Ｓｔ、　　Ｐａｕｌ、
　　Ｈｉｎｎｅｓｏｔａ。

１１、　Ｓ、　Ａ。

Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　（八ＴＣＣ２５９
２２）およびＳｔ。

Ｐａｕｌ　　Ｒａｍ５ｅｙ　　ＨＯ３ｐｔ（ａｌ、Ｓｊ
、Ｐａｕｌ、Ｈｉｎｎｅｓｏｔａ。

ｕ　Ｓ、八。

Ａｃ１ｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ　　ｃａｌｃｏａｃｅｔｉ
ｃｕｓ、　　　Ｓｔ、ＰａｕｌＲａｍｓｅｙ　　Ｉｔｏ
ｓｐｉｔａｌ、Ｓｔ、　Ｐａｕｌ、　）Ｉｉｎｎｅｓｏ
ｔａ、　Ｕ、Ｓ、Ａ。

Ｐｒｏｔｅｕｓ　　ａｏｒｇａｎｉｉ、Ｓｔ、　　Ｐａ
ｕｌ　　Ｒａｍ５ｅｙ　　Ｈｏ５ｐｉｔａｌ。

Ｓｔ、　　Ｐａｕｌ、　　Ｈｉｎｎｃｓｏｔａ、　　Ｕ
、Ｓ、Ａ。

Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　　ａｃｒｏｇｅｎｅｓ、Ｓ
ｔ、Ｐａｕｌ　　Ｒａｍ５ｅｙ１１ｏｓｐｉｔａｌ、Ｓ
ｔ、Ｐａｕｌ、Ｈｉｎｎｃｓｏｔａ、　　Ｕ、Ｓ、＾。

Ｐａ５ｔｅｕｒｅｌｌａ　　（ｓｐｅｃｉｅｓ）、Ｓｔ
、Ｐａｕｌ　　Ｒａｍ５ｅｙ１１ｏｓｐｉｔａｌ、　Ｓ
ｔ、　Ｐａｕｌ、　Ｈｉｎｎｅｓｏｔａ、　Ｌｌ、Ｓ、
Ａ。

ＣＤＣＧｒｏｕｐ　ＩＩ　Ｆ、　Ｓｔ、　Ｐａｕｌ　Ｒ
ａｍ５ｅｙ　Ｈｏ５ｐｉｔａｌ。

Ｓｔ、　　Ｐａｕｌ、　　Ｈｉｎｎｃｓｏｔａ、　　υ
、Ｓ、Ａ。

Ｈｏｒａｘｅｌｌａ、Ｓｔ、Ｐａｕｌ　　Ｒａｍ５ｅｙ
　Ｈｏ５ｐｉｔａｌ、Ｓｔ。

Ｐａｕ　ｌ、ＨｉｎｎＱＳＯｔａ、ＵＳ、　Ａ。

Ｃ１ｔｒｏｂａｃｔｅｒ　　ｒｒｅｕｎｄｉｉ、Ｓｔ、
Ｐａｕｌ　　Ｒａｍ５ｅｙＨｏｓｐｉｔａｌ、　　Ｓｔ
、　　Ｐａｕ！、　　Ｈｉｎｎｅｓｏｔａ、　　Ｕ、Ｓ
、Ａ。

＠１ 上記のような構造の装置に、装置付底の棒の先細りの溝
を用いて種々の細菌を接種した。細菌の最初の濃度を記
録した。各装置のアンプル中に含まれるＲｎ制限培地は
、つぎの成分を含有した。

０．８グラム　　　ペプトン ０．０３グラム　　デキストロース ２．５グラム　　　リン酸ジカリウム １．２５グラム　　リン酸モノカリウム５．０グラム　
　　塩化ナトリウム ０．２グラムのペプトンおよび１．６グラムのペプトン
を含有する培地溶液もｖＡ製した。

他に４種の発育ルリ限培地をＡ特した。それらは、ブロ
テオースベブトン、トリプトン、ネオペプトンおよびポ
リペプトンを営為した。これらは、上記処方物中のペプ
トンに代えて加えた。生ずる初１！Ｊ　１１度を測定す
ると、ＣＦＬＪ／ｃ、ｃでつぎのようである。結果は、
各培地について、３つの調）＋１０ツトを用いて、それ
ぞれから５個の（Ｊンブルをとった、１５の試料の平均
である。

ペプトン　　　　　　プロプＡ−スペブトンＥｓｃｈｅ
ｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ　　　　　　　１．　５ｘｉｏ　
　　　　　　　２．　１ｘｌＯ７Ｓｈｉｇｅｌｌａ　　
　　　　　３．　ＯＸ　１０　　　　６．○×１０１Ｋ
ｌｃｂｓｉｃｌｌａ　　　　　　２．７Ｘ１０　　　　
３．７Ｘ１０７Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　　　　　　
　　　　　　　４．　５Ｘ　１０　　　　　　　　　　
　４．　　Ｑｘ　１０７ρｒｏｖｉｄｃｎｃｉａ　　　
　　　　　　　　　　　　　　７．　５ｘ　１　０　　
　　　　　　　　　　　７．　　ＯＸ　１　０７Ｐｒｏ
ｔｃｕｓ　）Ｉｉｒａｂｉｌｉｓ　　　　　　４．　８
Ｘ　１０　　　　　　　５．　６刈Ｏ７Ｓａｌｍｏｎｅ
ｌｌａ　　　　　２．８Ｘ　１０　　　４．　Ｏ刈０７
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　　　　　０．８Ｘ　１０　　
　１　、９刈Ｏ７Ｃ１ｔｒｏｂａｃｔｅｒ　　　　　　
４．５ｘ　１０　　　　４．５ｘ　１０７Ａｒ１ｚｏｎ
ａ　　　　　　　１．５ｘ１０７２．４Ｘ１０７Ｅｄｗ
ａｒｄｓｉｅｌｌａ　　　　２．４刈０７Ｙｅｒｓｉｎ
ｉａ　　　　　　３．３Ｘ１０　　　　５．１Ｘ１０７
５ｅｒｒａｔｉａ　　　　　　１．３Ｘ１０７７、５刈
０７Ｐｒｏｔｅｕｓ　ｖｕｌｇａｒｉｓ　　　ｉ　、　
２刈０７細菌の種は上記のようである。

ブランクの所は、接トド菌がまらがっていたことを示す
。

トリブｉ〜ン　　　　　ネＡペプトン　　　　　ポリペ
プトン−１，４Ｘ１０７ ３、６Ｘ１０７ −　　　　　　　−　　　　　２．３Ｘ１０７−　　　
　　３．３Ｘ１０７ ５、３Ｘ１０７ ８、８Ｘ１０７ ３、６Ｘ１０７ ２、９Ｘ１０７ １．５刈０　　　２．９Ｘ１０　　　１．８Ｘ１０７３
、　ｌＸ１０７ −　　　　　６．４Ｘ１０７ ２、９Ｘ１０　　　　８．０Ｘ１０　　　２３．９Ｘ１
０７＝　　　　　３．０×１０７ ２．８Ｘ１０　　　５．７Ｘ１０　　　４．４刈Ｏ７３
，９刈０　　　３．９Ｘ１０　　　４．４Ｘ１０７−　
　　　　２．７ｘ１０　　　　２．６×１０７つぎの祠
ｆ１を１０００ｃ、ｃ、の脱イオン水に溶解し、１２１
１σＣで１５分間蒸気滅菌した。

０．８グラム　　　ペプトン ０．０３グラム　　デキストローズ ２．５グラム　　　リン酸二カリウム １．２５グラム　　リン酸−カリウム ５．０グラム　　　塩化ナトリウム ０．２グラｔ１のペプトンおよび１．６グラムのペプト
ンを含イｊＶる培地の溶液も調製した。それぞれの培地
を用いて発ｆ１￥ｉ置を調製した。発育装ｄ添付の棒を
用いて、次表に示す種々の細菌の４かう５時間までの令
、１８から２４時間までの令の細菌コ【Ｊニーを釣菌し
た。各細菌について５個の発育装置を使用し、各細菌に
ついて５試料の平均を求めた。１４種の異なる細菌を使
用した。それで３秤の培地のイれぞれについて、７０１
１８１の発育装置を使用した。８発育装置は回転させ１
０秒間混合し、３５　ｔｉ　ｃでインキュベートした。

Ｏｌえ ４．５および６時間（野に生きた調教を数Ｘた。結果を
次表に示す。

〒へ０（Ｏマ寸へ○４　　ののＯきＪ　　のマ■へ　　
［Ｆ］０■Ｏで　　　　　　　　　ｏ　　　　　　　　
　　（％Ｊ−（′ＩＪマ二　〇での００ママＯト■■マ
　０のＣ寸■Ｏへ囚　〜■■ト　で■「の　０■■の　
のへの■例３ 例２を反復するが、ペプトンに代えＣポリペプトンを用
いた。結果は次表に示づ。

！７　　　　　　　　　　　　ｃ− ＣＤθフ 一「「−へへ　ヘヘーへ ［Ｆ］ 例４ 例２を反復リ−るが、ペプトンに代えてネオペプトンを
用いる。結果を次表に示す。

：［２第−０吊０へＯｒｏｏ〜 へりトの　へＣｏｏ〜　■０００　へ■■００　Ｎ寸マ
ド寸０’）　　Ｏ（”）Ｏり　の０Ｊへ■　へののＯＪ
　　マ寸へ■！！　　　　　　　　９ 細　　菌　　　　　　　　　　　　　　時　ＬＡｒｉｚ
ｏｎａ　　　　　　　　　　　　　　　　Ｏ時５４時Ｌ ５峙Ｌ ６時１ Ｙｅｒｓｉｎｉａ　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　Ｏ時６４時Ｇ ５峙Ｌ ６峙Ｌ Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌ　Ｉａ　　　　　　　Ｑ時６４時
１ ５時Ｃ ６峙Ｌ Ｓｅｒｒａｔｉａ　ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ　　　　　０
８４時６ ５時１ ６時５ Ｐｒｏｔｅｕｓ　ｖｕｌｇａｒｉｓ　　　　　　　　　
　　Ｑ時１４時１ ５閤１１ ６峙Ｌ ４（続き） ＝ ｆｆｉ　　　　　３．４　　　　　３．０　　　　　２
．６ｆｆｉ　　　　　６．３　　　　　６．６　　　　
　７．６ｆｆｉ　　　　　７．９　　　　１３．０　　
　　１１．８ｉ　　　　　９．８　　　　１６．４　　
　　１７．４１　　　　４．９　　　　　６．２４　　
　　６．０コ　　　　６．０　　　　１０．７　　　　
１０．８ｊ　　　　半巳孕’？、’７　　１５．５　　
　　１６．０コ　　　１０．４　　　　２０．６　　　
　２１．０コ　　　　　　　　　　　　　− ｊ　　　　　　　　　　　　　− コ　　　　　　　　　　　　　− 寺門　　　　３．５　　　　　３．１６　　　　５．１
翳　　　　８．７　　　　１０．１　　　　　９．８１
　　　１１．３　　　　１１．６　　　　１２．３ｆｌ
　　　　　９．７　　　　１２．７　　　　１２．８１
　　　　２．４　　　　　３．５６　　　　２．０り　
　　　５．５　　　　１２．５　　　　　８．１ｎ　　
　　　８．６　　　　２３．８　　　　１６．４１）　
　１０．７　　　　２８．４　　　　２３．２Ｘ　５ 例２を反（（ツるが、ペプトンに代えてトリプトンを使
用する。結果３次表に示す。

〕００〜寸ののＣｏ　　Ｏ■のへ　■■０　　マヘマト
Ｎ　（％Ｊ　（％Ｊ　Ｏ）　　　Ｃ”：　０１）　「Ｏ
ｙ　ｕ”）　ＣＣｏ　　　Ｍ　ＯＣＣ’：　（ＯＯ）　
０垂　　　　　　　　宍 細　　菌 Ａｒｉｚｏｎａ Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ ＹｅｒＳｉｎｉａ Ｓｅｒｒａｔｉａ　ＲｌａｒＣｅＳＣｅｎＳｐｒｏｔｅ
ｕｓ　ｖｕ１ｇａｒｉｓ 表　５（続き） ６時間　　　　６．４　　　　１７．３　　　　１４．
２６時間　　　　２．９　　　　　２．８　　　　　４
．８６時間　　　　７，１　　　　１２．８　　　　１
８．３６時間　　　１０．０　　　　２５．７　　　　
２２．３例６ 例２を反復するが、ペプトンに代えてブロースペプトン
を使用する。結果は次表に示すｒ″−００ＣＯｎｅｏ■
　　０〜■’ｆ　　　ＣＮ（”）Ｃｏｏ　　　きＨ℃へ
（で（’ＪＱ）■　■ののマ　０００の　のマｃト　寸
の■０；　　　　　　　　濯 細　　菌　　　　　　　　　　　　　　　ｌＡｒ１ｚｏ
ｎａ　　　　　　　　　　　　　　　　Ｏ時ｒ４時Ｒ□ ５時「 ６時ｍ Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌ　ｌａ　　　　　　　　　　　　
　０時ｍ４時ｍ ５時ｍ ６時ｍ Ｙｅｒｓｉｎｉａ　　　　　０ＲＥ ４時に ５時ｍ ６時ｍ ５ｅｒｒａｔｉａ　ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ　　　　Ｏ岨
４時ｍ ５時に ６時ｍ Ｐｒｏｔｅｕｓ　ｖｕｌｇａｒｉｓ　　　　０時ｍ４時
ｍ ５む招 ６時ｍ ６（続き） ■ ■ １間 ＋　　　　３３．８　　　　３７．８　　　　３５．８
９Ａ− 佼１７ 本発明の培地で得られた結果を、従来からのブロス培地
、たとえばトリブチイック　ソイブロスにより標準技術
を用いて得られた結果と比較してみた。ｌＡ２に記載と
同じ培地を含有する１００個の発ｎ装ｄを用意した。患
者より分離した臨床分離細菌１００個を、これらの発育
装置およびにｉ　ｒｂｙ−Ｂａｕｅｒ試験に対して確立
されたスタンダード発ｎ手法を用いて調べた。試験細菌
はつぎに示す。

Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　Ｃｏ１１ Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｃｕｍｏｎｉａｅＰｓｅｕ
ｄＯＩＯｎａＳ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ＾ｃｉｎｃｔｏ
ｂａｃｔｅｒ　ｃａｌｏｃｏａｃｃｔｉｃｕｓＰｒｏｔ
ｅｕｓ　ｍ１ｒａｂｉｌｉｓ ｐｒｏｔｃｕｓ　ｍｏｒｇａｎｉｉ ［ｎｔｃｒｏｂａｃｔｅｒ　ａｅｒｏｇｃｎｅｓＥｎｔ
ｅｒｏｂａｃｔｃｒ　ｃｌｏａｃａｅｓｃｒｒａｔｉａ
　ｍａｒｃｃｎｓｃｅｎｓＰａｓｔｅｕｒｅｌｌａ　（
ｓｐｅｃｉｅｓ）ＣＤＣグループ■ ）１ｏｒａｘｅｌ　Ｉａ Ｃｉｔｏｂａｃｔｅｒ　　ｒｒｃｕｎｄｉｉ具体的には
、１から５調の分離されたコロニーを発育装置より取り
出した棒と接触させた。そして棒を用いて発育装置中の
発育培地に接触させた。

全体は３Ｍ商標のインキュベーターモデル１０７中で４
時間インキュベートした。頂部のテープシールを発育中
位のキＡ７ツブより除き、細菌懸濁液の６から８滴を綿
塊に滴下した。塊は、ＨＵｅｌｌＯｒ−）１ｉｎｔｏｎ
寒天プレート上に３方向に塗床した。上記の、ｔｈｅ　
Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｌ１ｎｉｃａｌ　Ｃｏａ＋ｍ１ｔ
ｔｅｃ　ｆｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙ　５ｔａｎｄａｒ
ｄｓ　（ＮＣＣＬＳ）　　ｏｒ　ｔｈｅ　Ｕｎｉｔｅｄ
Ｓｔａｔｅｓ　ｏ（Ａｍｅｒｉｃａ　、　Ａｎｔｉｂｉ
ｏｔｉｃｓ　５ｕｓｃｃｐｔｉｂｉ−１ｉｔｙ　５ｔａ
ｎ＋ｊａｒｄに従ツＴ　Ｋｉｒｂｙ−８ａｕｅｒ試験は
実施した。本発明の発育培地装置を用いて得られた抗生
物質感受性試験の結果を、細菌発育に対する標準方法に
比較してみた。結果は同じようであった。

つぎの材料を脱イオン水１０００ｃ、ｃ、に溶解し、１
２１度Ｃで１５分間滅菌した。

１．７グラム　　　　トリプテイケース０．３グラム　
　　　ソイトン　　　　　　　４゜０．２５グラム　　
　デキストロース ０．５グラム　　　　ＮａＣ１ Ｏ１２５グラム　　　Ｋ２ＨＰＯ４ この例で用いられる発育装置は、培地を直接にその中に
入れである、上記のようなポリプロピレンスリーブであ
る。スリーブには、”　Ｔｙｖｅｃ　″フィルターを含
有するプラスデックキャップでキャップした。この培地
は、寒天プレート上の該細菌の４から５個の］ロニーよ
り得られた５ｔａｐｈｙｌｏ−ｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｃ
ｕｓの１白金４を用いて接種した。発育装置は回転させ
て、１０秒間混合した。ついで３５度Ｃでイン４ニユベ
ートした。０．１．２．５．４．５．５．５．６．５．
１１．５．１３．５．２３．５および３１時間後に調教
を数えた。結果として、最初の数は１　Ｘ　１０’　Ｃ
ＦＵ／ｃ、ｃｌ、１１．５時間後に、約１．７から１．
９Ｘ１０８ＣＦＵ／ｃ、ｃに増加した。そして、上記時
間／調教の間隔のあとの方については、実質的に減少し
なかった。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明の装置の内部断面図である。 第２図は、部分的に断面図とした、本発明の装置の透視
図である。第３図は、本発明の装置の棒の１部の内面図
である。第４図は、その中に細菌の含まれているところ
を示ザ、第３図の棒状装置である。第５図は、発育培地
に細菌を接種した直後の本発明の装Ｙの断面図である。 第６図は、第５図に示す本発明の装置のライン６−６に
沿った断面図である。第７図は、接種しそして最大安定
相またはあらかじめ定められた発育段階までインキュベ
ートしたあとの本発明の装置の断面図である。 第８図は、第７図をライン８−８に沿って切断した断面
図である。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 培地が、好気性で病原性で、迅速に発育する、２つの異
   なる属の細菌の少なくとも一種を最初の調教から６×１
   ０＾７〜３×１０＾８ＣＦＵ／ｍｌの予め定められた終
   りの調教まで発育さすことができ、そしてその時点で培
   地中の栄養分の欠如のために該細菌の該発育が実質的に
   落ちこむが、しかし該細菌は少なくとも１８時間生きた
   状態に留まつており、ペプトン中に存在する形において
   、培地１ｍｌ当り窒素０．０９〜０．１５ｍｇおよび培
   地１ｍｌ当り炭素０．４２〜０．７０ｍｇ、またはプロ
   テオース　ペプトン中に存在する形において、培地１ｍ
   ｌ当り窒素０．０３５〜０．０５６ｍｇ、および培地１
   ｍｌ当の炭素０．１６〜０．２７ｍｇ、並びに該発育を
   達成するに充分の量でしかも該細菌により該発育に用い
   られうる形のビタミンおよび無機物を含有する水溶液を
   含む水性培地であることを特徴とする細菌発育のための
   培地。