JPS63258490A - カルシトニン遺伝子関連ペプチド誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上−の−利」■し１野一 本発明は、カルシウム代謝異常、心臓病、潰瘍などの治
療薬または脳ｗ４璋改善薬などの医薬として有用な新規
ニワＩ・リカルシトニン遺伝子関連ペプチド（ｃｈｉｃ
ｋｅｎ　　Ｃａ１ｃｉｔｏｎｉｎＧｅｎｅ　　Ｒｅ１ａ
ｔｅｄ　　Ｐｅｐｔｉｄｅ；以下ｃ−ＣＧ　ＲＰという
）誘導体に関する。

従沫−Δ皮街 最近、二１ノトリのＤＮＡ構造解析により、Ｃ−Ｃ０Ｒ
Ｐのアミノ酸順序が）１（定されている〔Ｆ［）ＢＳ　
　Ｌｅｔｔｅｒｓ、Ｖｏｌ、２０３．Ｎｏ。

１．７−１．０．Ｊｕ１７　１９８６）。

−発−明ジケ（込」す（メイ−７よ、−う−六す−る一
…Ｌ題ｊ仄しかしながら、ｃ−ＣＯＲＰが単離もしくは
合成された報告はなく、どのような作用あるいは活性を
有しているか否か不明であり、このｃ−ＣＯＲＰ誘導体
を合成し、その生物活性を公知のＣ０ＲＰと比較し、そ
の有用性を探索することは医学上重要なことである。

一間□題ＪＶ（解決する隘偉ｐ」一段 本発明者らは、このｃ−ＣＯＲＰ誘導体を合成し、その
生物活性について比較した結果、既知のヒトＣ０ＲＰ　
　（ｈ−ＣＧＲＰ）　　（Ｎａｔｕｒｅ。

３０８　（１９）、７４６−７４８　（１９８４）、Ｎ
ｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅｓ、４，４２５−４３４　　（
１９８４）　、Ｎａｔｕｒｅ、３１３　　（３）。

５４−５６　　（１９８４））より血清カルシウムおよ
びリン低下作用活性が強く、しかもその活性発現の持続
性の優れた新規ｃ　−ＣＯＲＰ誘導体を提供するもので
ある。即ち、本発明は、弐ＣＩ（２−ＣＩＩ２−−−−
−−−Ｙ−−−−Ｙ−−−−−□ｃ■■２Ｐｈｅ−ＮＨ
２Ｃ１） （式中、Ｙは硫黄原子またはメチレン基を示し、ＡはＡ
ｓｎまたはＡｓｐを示す）で表されるペプチドまたはそ
の塩である。

本発明において、Ｙが硫黄源Ｙ＝、ＡがＡｓｎであるペ
ブチｌ　〔１〕をデスアラニル−デアミノ−ｃ−ＣＯＲ
Ｐと称し、Ｙが硫黄原子、ＡがＡｓｐであるペフ゛チド
（１〕をデスアラニルか一デアミノー（Ａｓ　ｐ’　）
−ｃ−ＣＧＲＰと称し、Ｙがメチレン基、ＡがＡ　ｓ　
ｎであるペプチド〔１〕をデスアラニル−（Ａｓｕ２°
７〕−〇−ＣＧＲＰと称し、ＡがＡｓｐであるペプチド
　〔１〕をデスアラニル（Ａｓｐ″、Ａｓｕ”　）　−
ｃ−ＣＯＲＰと称することがある。

本発明のペプチド〔１〕は、公知のペプチド合成の常法
手段に従って合成できる。

（１）液相法によって製造する場合 例えば、Ｙが硫黄原子であるペプチド〔１〕を得る場合
には、Ｃ末端のフェニルアラニル基のカルボキシル基を
アミド基に転化し、式〔１〕で示されるアミノ酸順序に
個々の保護されたアミノ酸および（または）保護された
低級ペプチドを縮合し、縮合反応の最終段階でＬ−シス
テイニル基およびβ−メルカプトプロピオン酸のメルカ
プト基の保８ｉ［およびその他の側鎖の官能基の保１Ｍ
を酸分解により脱離し、メルカプト基を酸化してジスル
フィド橋を形成することにより得られる。

また、Ｙがメチレン基であるペプチド〔１〕を得る場合
には、Ｃ末端のフェニルアラニル基のカルボキシル基を
アミド基に転化し、式〔１〕で示されるアミノ酸順序に
個々の保護されたアミノ酸および（または）保護された
低級ペプチドを縮合し、４）−成された弐 −Ａ　−Ｔ　ｈ　ｒ　−Ａ　Ｉ　ａ　−Ｔ　ｈ　ｒ　−
（ＣＨ２）ｆｉ　Ｃ０ＯＲ □ −ＮＩ（ＣＨＣＯ− （式中、Ｒは活性エステル残基を示し、Ａは前記と同じ
意味を有する）を含む構成単位を上記縮合反応の任意の
過程で環化反応に付し、縮合反応の最終段階で活性基の
保護基を酸分解により脱離することにより得られる。

縮合反応自体はペプチド合成のための常法手段に従って
、保護基の脱着、縮合反応を繰り返すことにより行われ
る。即ち、本ペプチド〔１〕の原料ならびにすべての中
間体の製造において使用される各種の保護基ＧＪペプチ
ド合成において既知なもの、例えば、加水分解、酸分解
、還元、アミツリシス、ヒドラジツリシスなどのような
既知手段によって容易に脱離することのできる保護基が
用いられる。このような保ｉＭはペプチド合成化学の分
野の文献ならびに参考書に記載されている。

本発明においては、α−アミノ基の保護に１−ブチルオ
キシカルボニル基、ヘンシルオキシカルボニル基、ｐ−
メトキシヘンシルオキシカルボニル基を用い、側鎖のア
ミノ基、即ちリジンのε−アミノ基の保護にベンジルオ
キシカルボニル基、ｐ−クロロヘンシルオキシカルボニ
ル基を用い、α−カルボキシル基の保護にメチルエステ
ル基、ヘンシルエステル基を用い、側鎖のカルボキシル
基、即ちアスパラギン酸の側鎖カルボキシル基の保護に
ヘンシルエステル基を用い、α−アミノスペリン酸の側
鎖カルボキシル基の保護にｔ−ブチルエステル基を用い
、セリンおよびスレオニンの水酸基の保護にヘンシル基
を用い、アルギニンのグアニジノ基中のアミノ基の保護
にメシチレン−２−スルホニル基またはトシル基を用い
るのが好ましい。

本ペプチド〔１〕の合成においては、個々のアミノ酸お
よび（または）低級ペプチドの縮合は、例えば、保護さ
れたα−アミノ基および活性化末端α−カルボキシル基
をもつアミノ酸または低級ペプチドと遊離のα−アミノ
基および保護された末端カルボキシル基をもつアミノ酸
または低級ペプチドとを反応させるか、あるいは活性化
α−アミノ基および保護された末端カルボキシル基をも
つアミノ酸または低級ペプチドと遊離の末端α−カルボ
キシル裁をもつアミノ酸または低級ペプチドとを反応さ
せることにより実施することができる。

この場合、カルボキシル基は、例えば、酸アジド、酸無
水物、酸イミダゾリドまたは活性エステル、例えば、シ
アノメチルエステル、ｐ−二トロフェニルエステル、Ｎ
−ヒドロキシコハク酸イミドエステルなどに変換するこ
とによって活性化することができる。また、カルボジイ
ミド、例えばＮ、Ｎ’−ジシクロへキシル−カルボジイ
ミド（１）ＣＣ）、Ｎ−エチル−Ｎ’　　−３−ジメチ
ルアミノブロビルー力ルポジイミド、Ｎ、Ｎ’　　−カ
ルボニル−ジイミダゾールなどの縮合剤を使用して反応
させることによって活性化することができる。

本発明において好ましい縮合方法は、アジド法、活性エ
ステル法、混合酸無水物法およびカルボジイミド法であ
る。縮合の各段階ではラセミ化が起こらない方法または
ラセミ化が最小になる方法を用いるのが望ましく、好ま
しくはアジド法、活性エステル法、Ｗｕｎｓｃｈ法（Ｚ
、Ｎａｔｕｒｆｏｒｓｃｈ、、２１ｂ、４２６　（１９
６６））またはＧｅｉｇｅｒ法（Ｃｈｅｍ、Ｂｅｒ、、
１０３．７８８　（１９７０））などを用いる。

縮合順序は式〔１〕で示されるアミノ酸順序であれば、
如何なる順序からも合成し得るが、Ｃ末端側から順次ア
ミノ酸および（または）低級ペプチドを連結させるのが
好ましい。

か（して得られる鎖状保護ペプチドから目的のペプチド
〔１〕を得るには、Ｙが硫黄原子であるペプチド〔１〕
を得るか、またはＹがメヂレン基であるペプチド〔１〕
を得るかにより、その後の製造工程が異なる。

Ｙが硫黄原子であるペプチＦ　（１）を得る場合には、
先ず上記鎮状保護ペプチド、即ち保護されたω−アミノ
基、側鎖カルボキシル基、水酸基、グアニジノ基および
メルカプト基をイ１するβ−メルカブトプロピオン酸で
アシル化されたペンタトリアコンタペプチドアミドの保
３１ｇが脱離される。

これらの保ｍＷ基は、好ましくは、酸分解、例えばトリ
フルオロメタンスルホン酸、無水弗化水素などによる方
法によって一段階で脱離され、遊離メルカプト基を有す
るβ−メルカブトプロピオニルーペンタトリアコンタベ
プチドアミドが得られる。

次いで、このペプチドアミドは酸化により分子内ジスル
フィド橋が形成され、目的のペプチド〔１〕が得られる
のであるが、このジスルフィド橋の形成は通常、水中の
大気酸素、有機溶媒中のショートエタン、氷酢酸中の沃
素、水溶液中のフェリシアン化カリウムなどで酸化する
ことによって行われる。

Ｙがメチレン基であるペプチド〔１〕を得る場合には、
上記鎖状保護ペプチド合成の段階で、弐−Ａ−”ｒ’ｈ
ｒ−Ａｌａ−Ｔｈｒ　　−（ＣｔＬ）！、Ｃ０ＯＲ □ −Ｎ　ＨＣＨＣＯ− （式中、ＲおよびＡは前記と同じ意味を有する）を含む
構成単位を縮合反応の任意の段階で環化反応に付すので
あるが、この環化は前述の方法で活性化されたα−アミ
ノスペリン酸の０位カルボキシル基とＮ−末端アミノ酸
の遊離アミノ基との縮合反応により行われる。その際ス
レオニンの水酸基およびアスパラギン酸の側鎖カルボキ
シル基は保護しておくことが好ましい。

このようにして得られたα−アミノスペリン酸を含む活
性基の保護されたまたは保護されていない環状ペプチド
とそれ以外の活性基の保護されたまたは保護されていな
い大きなペプチドを縮合させ、引続き保護基のある場合
は、保護基を脱離させることにより行われる。

こうして保護されたε−アミノ基、側鎖カルボキシル基
、グアニジノ基および水酸基を有するペンタトリアコン
タペプチドアミドが得られる。これらの保護基は好まし
くは、酸分解、例えばトリフルオロメタンスルホン酸、
無水弗化水素などによる方法によって一段階で脱離され
、目的のペプチド〔１〕が得られる。

（２）同相法によって製造する場合 本発明においては、上記の液相法によるペプチド合成法
の他に、同相法によるペプチド合成法を一部または全部
利用してペプチド〔１〕を合成することができる。

例えば、Ｙが硫黄原子であるペプチド〔１〕を得る場合
には、３番目から３７番目までのペプチドフラグメント
を固相法により合成し、α−アミノ基をβ−メルカプト
プロピオン酸でアシル化することにより保護されたペン
タトリアコンタペプチド結合樹脂が得られる。これらの
保護基および樹脂は、公知の方法、例えば、トリフルオ
ロメタンスルポン酸、無水弗化水素などによる方法によ
って一段階で脱離され、遊離メルカプト基を有するβ−
メルカプトプロピオニル−ペンタトリアコンタペプチド
アミドが得られる。このペプチドアミドは前記の液相法
で述べたと同じ方法で分子内ジスルフィド橋を形成する
ことにより目的のペプチド〔１〕が得られる。

また、Ｙがメチレン基であるペプチド（１，）を得る場
合には、例えば９番目から３７番目までのペプチドフラ
グメントを同相法により合成し、Ｎ−末端部のα−アミ
ノスへリン酸を含む環状ペプチドフラグメントを液相法
により合成し、引続き上記２つのペプチドフラグメント
を同相法により縮合して保護されたペンタトリアコンタ
ペプチド結合樹脂が得られる。これらの保護基および樹
脂は、公知の方法、例えば、トリフルオロメタンスルホ
ン酸、無水弗化水素などによる方法によって一段階で脱
離され、目的のペプチド〔１〕が得られる。

上記の同相法で用いられる樹脂としては、固相法で通常
用いられる樹脂、例えばヘンズヒドリルアミン樹脂、ｐ
−メチルベンズヒドリルアミン樹脂などが挙げられる。

この樹脂は官能基当量や架橋度の違いによって所望の性
状を有する樹脂が入手可能であり、市販品を購入するこ
ともできる。

上記の固相法においては、樹脂に式〔１〕で示されるア
ミノ酸順序にＣ−末端のアミノ酸から３番目のアミノ酸
（Ｙが硫黄原子である場合）またはＣ−末端のアミノ酸
から９番目のアミノ酸（Ｙがメチレン基である場合）ま
でを順次−・っずっ縮合さセて行う。該アミノ酸の官能
基は公知の方法により保護基で保護される。上記の保護
基の例としては、１−記で述べた通りである。

上記の同相反応に際しては、樹脂を反応器に入れ、ジク
ロロメタン、クロロホルム、ジメチルホルムアミＦ、ヘ
ンゼンまたは樹脂を膨潤させる溶媒を樹脂１ｇに対し、
溶媒２〜２０ｍ１の割合で添加する。これに、予め別の
反応器で、樹脂中のアミノ基１当量に対し１〜６当量の
Ｂｏｃ（１−ブヂルオキソカルボニル）−アミノ酸とＤ
ＣＣを反応させ、得られた対称酸無水物を副生じたジシ
クロへキシル尿素（ＤＣＵ）より分離して、上記樹脂の
入った反応器に加える。縮合剤（Ｄ　ＣＣ）の使用量は
Ｂ　ｏ　ｃ−アミノ酸１当量に対し、０゜５から３当量
を用いる。反応は通常５〜６０分行われる。

各工程で得られたＢｏｃ−アミノ酸−樹脂またはＢ　ｏ
　ｃ−ペプチド−樹脂の一部を採取し、常法（Ｔ、　　
Ｆａｉｒｗｅｌｌ、　　ｅｔ　　　ａｌ、、　　Ｂｉ。

ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２２．２６９１　　＜１９８３）
〕に従い反応したＢｏｃ−アミノ酸量を測定してカンプ
リング量を求めればよい。

次に、α−アミノ基の保護基であるＢｏｃをトリフルオ
ロ酢酸の如き酸で脱離して、順次縮合反応を遂行すれば
よい。上記の同相法によるペプチド合成は自動同相合成
機を用いるが、手動法で遂行してもよい。これらの操作
は全て窒素ガス気流下で行うのが望ましい。

このようにして３番目または９番目から３７番目までの
ペプチドフラグメントが結合した樹脂が得られる。

３番目から３７番目までのペプチドフラグメント結合樹
脂は、最後にβ−メルカプトプロピオン酸でアシル化さ
れて、β−メルカプトプロピオニル−保護されたペンタ
トリアコンタペプチドアミド結合樹脂が得られる。

このようにして得られた保護されたペンタトリアコンタ
ペプチドアミド結合樹脂は、上記で述べた通り、無水弗
化水素などにより一段階で保護基と樹脂が脱離され、遊
離メルカプト基を有するβ−メルカプトブロビオニベン
タトリアコンタベプチドアミドが得られる。

前記遊離メルカプト基を有するβ−メルヵブトプロピオ
ニベンタトリアコンタベプチドアミドは前記の通り分子
内ジスルフィド橋を形成することにより目的のペプチド
〔１〕が得られる。

９番目から３７番目までのペプチドフラグメント結合樹
脂に前記のα−アミノスペリン酸を含む環状ペプチドフ
ラグメントを縮合させればよい。

このようにして得られたα−アミノスペリン酸を含む保
護されたペンタトリアコンタペプチドアミド結合樹脂は
上記で述べた通り、無水弗化水素などにより一段階で保
護基と樹脂が脱離され、目的のペプチド〔１〕が得られ
る。

（３）分離精製、その他 このようにして得られたペプチド〔１〕は、ペプチドま
たは蛋白質を精製する公知の手段によって分離精製する
ことができる。例えば、セフアゾソクスＧ−２５、セフ
ァデックスＧ−５０、セファデックスＬ　Ｈ−２０など
のゲル濾過剤を用いるゲル濾過法、カルボキシメチルセ
ルロース、その他のイオン交換樹脂などを用いるカラム
クロマトクラフィー、高速液体クロマトグラフィーなど
により行うことができる。

本発明の新規ペプチド〔１〕は、その方法の条件により
塩基またはその塩の形で得られる。例えば、酢酸などの
公知の有機酸との塩を形成することができる。

尚、本明細書および図面中に記載の略記号は、次の意味
を有する。

ＡｓｕＨＬ−α−アミノスペリン酸 ＡｓｎＨＬ−アスパラギン Ａｓｐ；Ｌ−アスパラギン酸 ＡＩａ　；Ｌ−アラニン Ｔｈｒ　；Ｌ−スレオニン Ｖ　ａ　ｌ　；　Ｌ−バリン Ｈｉ　ｓ　；　Ｉ−−ヒスチジン Ａｒｇ；Ｌ−アルギニン Ｌｅ　ｕ　；　Ｌ−ロイシン Ｐ　ｈ　（シ；Ｉ、−フェニルアラニンＳｅｒ；Ｌ−セ
リン Ｇ　ｌ　ｙ　；グリシン Ｌｙｓ；Ｌ−−リジン Ｐｒｏ；Ｌ−−プロリン Ｂｏｃ；ｔ−ブチルオキシカルボニル Ｚ；ヘンシルオキシカルボニル ＣＩ−Ｚ；ｐ−クロロヘンシルオキシカルボニルＢＺＩ
；ヘンシル Ｏ３ｕ；Ｎ−−ヒドロキシコハク酸イミドエステルｏＮ
ｒｌ；ｐ−ニトロフェニルエステルＯＭｅ；メチルエス
テル ０Ｂｕｔ；ｔ−ブチルエステル ０Ｂｚｌ；ベンジルエステル ＴＦＡ；トリフルオロ酢酸 コニ−チル；ジエチルエーテル ＤＭＦ、Ｎ、Ｎ’　　−ジメチルホルムアミドＭｅＯＨ
；メタノール １）ＣＭ；ジクロロメタン ＤＩＥＡ；ジイソプロピルグチルアミンＨＯＢｔ；１−
ヒドロキシベンゾトリアゾールＭ　Ｂ　ＨＡ樹脂；ｐ−
メチルベンズヒドリルアミン樹脂 丈肌■侠米 血清カルシウムおよびリン低下作用 〈活性測定法〉 本発明のデスアラニル−デアミノ−ｃ　−ＣＯＲＰ１デ
スアラニル−（Ａｓｕ”・’）−ｃ−ＣＯＲＰおよびデ
スアラニル−（Ａ　３　ｐ’　、　Ａ　ｓ　ｕ”〕−Ｃ
−ＣＯＲＰ各々８０μｇならびに対照としてｃ−ＣＯＲ
Ｐ　（特願昭６ｌ−２７３５８１）および公知のｈ−Ｃ
ＧＲＰ各々８０　ｐ　ｇを０．１％牛血清アルブミン含
有クエン酸緩衝液（ｐ　Ｈ６，５）〔以下単に溶解液と
称する〕　１ｍ１に溶かし、ウィスター系ラット（８０
−９０ｇ）１群５−６匹に８０ｇｇ／ｋｇになるよう尾
静脈より投与し、３０分および６０分後に腹部下行大動
脈より採血し、血清カルシウム濃度を原子吸光より測定
し、また血清リン濃度はゴールデンベルクらの方法［Ｃ
Ｉ　　ｉｎ、Ｃｈｅｍ、、　　１２．　８７１−８８２
　　（１９６６））により測定した。

〈結果〉 本発明品であるデスアラニル−デアミノ−Ｃ−ＣＯＲＰ
２０μｇ／ｋｇを投−リ（−〇−一）すると、第１図お
よび第２図に示す通り、コントロール群（溶解液投写群
）（−×−）に比べ血清カルシウムおよびリン濃度は３
０％以上も低下し、２時間後もこの作用は持続した。こ
の活性の強さは４倍量のｈ−ＣＧＲＰを投与した時の活
性（−ロー、８０ｇｇ／ｋ　ｇ＞より遥かに強くまた、
同量のｃ　−ＣＯＲＰを投与した群（−−−△−−−１
２０μｇ／ｋｇ）と比較しても、その活性は有意に強く
、その発現時間も有意に延長した。

一方、本発明品であるデスアラニル−デアミノ−Ｃ−Ｃ
ＧＲＰ８０μｇ／ｋ　ｇを投Ｉｊ、　（−・−−）する
と、第１図および第２図に示す通り、コントロール群（
溶解液投与群）（−Ｘ−）に比べ血清カルシウムおよび
リン濃度は３０％以上も低下し、２時間後もこの作用は
持続し、血清力ルシウム低下作用活性はさらに増強され
た。この活性の強さは同量のｈ−ＣＯＲＰを投）ルた時
の活性（−ロー、８０ｇｇ／ｋｇ）および同量のｃ−Ｃ
ＧＲＰを投与した時の活性（−ム一８０μｇ／ｋｇ＞よ
り海かに強しその発現時間も遥かに延長した。

また、本発明品であるデスアラニル＝（ＡＳｕ”７）−
ｅ−ＣＧＲＰ　（−・−）８０ｇｇ／ｋｇおよびデスア
ラニル−（Ａｓｐ′、ＡＳｕ２・’　）−ｃ−ＣＯＲＰ
　（−−−■−−−）８０ｇｇ／ｋｇを投与すると、第
３図および第４図に示す通り、コントロール群（溶解液
投与群）（−×−）ニ比べ血清カルシウムおよびリン濃
度は３０％以上も低下し、２時間後もこの作用は持続し
た。この活性の強さは同量のｈ−ＣＯＲＰを投与した時
の活性（−ロー）より墨かに強く、同量のＣ−ＣＲＲＰ
を投与した時の活性（−△−一）より強く、その発現時
間も延長した。

上記の通り、本発明のペプチド〔１〕は、既知物質のｍ
−Ｃ０ＲＰよりも血清カルシウム、リン低下作用粘性が
極めて強く、しがもその活性発現の持続性が優れている
だけでな（ｃ−ＣＯＲＰと比較しても、１Ｆ物活性が強
く、活性発現の持続性が長いという特徴を有しており、
生体内ではアミノペプチダーゼの酵素作用に対してより
安定であるため、カルシラ１、代謝異常、心臓病、潰瘍
などの治療薬または脳循環改善薬などとして有用である
。

実」１１ 次に実施例を挙げて本発明の製造例を具体的に説明する
。

尚、実施例中のＦ）Ｆ（）は（）内の数字のアミノ酸順
序を有するペプチドフラグメントを意味する。

また、実施例で使用した薄層クロマトグラフィー（ＴＬ
Ｃ）の担体および展開）容媒ならびにアミノ酸分析用の
加水分解の条件は特記しない限り次の通りである。

＜ＴＬＣ＞ 担体；シリカゲル（メルク社製Ａｒｔ５７１５）展開溶
媒； １；クロロホルム−メタノール−酢酸（９５：　５；３
） ２；クロロホルム−メタノール−酢酸（８５：１５：５
） 〈加水分解条件〉 試料を６Ｎ塩酸で１１０°０１２４〜４８時間封管中で
加水分解した。

実施例　１ デスアラニル−（Ａｓｕ”　）−ｃ　−ＣＯＲＰの製造 デスアラニル−（Ａｓｕ”°７〕−保護−Ｃ−ＣＧＲＰ
　（３−３７）−ＭＢＨＡ樹脂、即ちＣＨｔ　　　　　
　　（ＣＨｚ　）　３　□　ＣＨｔＣｏ−Ａｓｎ−Ｔｈ
ｒ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−ＮＨＣＨ−ＣＯ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ
　（Ｂｚｌ）　−Ｈ４ｓ−Ａｒｇ　（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ
−Ａｌａ−Ａｓｐ　（ＯＢｚｌ）−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−３
ｅｒ　（Ｂｚ　ｌ）　−Ａｒｇ　（Ｔｏｓ）−３ｅｔ　
（Ｂｚ　１）−Ｇｌｙ−Ｃ１ｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｌｙ
ｓ　　（ＣＩ−Ｚ）　−Ａｓｎ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｖａ
ｌ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ　　（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−Ｖａｌ−
Ｇｌｙ−３ｅｒ　　（Ｂｚ　　１）−Ｌｙｓ　　（ＣＩ
−Ｚ）−Ａｌａ−Ｐｈｅ　−ＭＢＨＡ樹脂１．０９ｇに
アニソール１ｍｌを加え、これに無水弗化水素２５ｍ１
を加え、０°Ｃで１時間攪拌した。反応後、無水弗化水
素を減圧下留去後、残渣をエーテルで洗浄し、これに０
゜１Ｍ酢酸２０ｍ１を加え、ペプチドを抽出した。

抽出液をＤｏｗｅｘ　　ＷＧＲのカラム（２，８Ｘ１５
ｃｍ）に通し、０．１Ｍ酢酸６０ｍ１で溶出した。得ら
れた溶出液を凍結乾燥し、３７０ｍｇの白色粉末を得た
。この粉末をカルボキシメチルセルロースのカラム（２
，３Ｘ　ｌ　３　ｃｍ）にチャージし、０．０１Ｍ酢酸
アンモニウム水溶液（ｐＨ４，５）３００ｍｌ−０，５
Ｍ酢酸アンモニウム水溶液（ｐｉ（５，３）３００ｍｌ
の直線型濃度勾配によるグラジェント溶出を行った。溶
出液を１０ｍ１づつ分画し、その１００μｍを使用して
フォリン・ローリ−法により発色させ、７５０ｎｍで測
定し、プラク９３フ３３〜３フ番目を集め、これをＣＨ
Ｐ−２０樹脂（三菱化成工業社製）のカラム（２，８Ｘ
５．５ｃｍ）にチャージし、２５％アセトニトリルを含
む０．１Ｍ酢酸水溶液１５０ｍ１〜４０％アセトニトリ
ルを含むＯ，１Ｍ酢酸水溶液１５０ｍ１の直線型濃度勾
配によるグラジェント溶出を行った。溶出液を６．４ｍ
ｌづつ分画し、フラクション１０〜１２番目を集め、凍
結乾燥して白色粉末３０．５ｍｇを得た。これを下記の
条件による逆相系高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬ
Ｃ）により精製し、デスアラニル−ＣＡｓｕ”　）−ｃ
−ＣＯＲＰの精製品３．４ｍｇを得た。

カラム；Ｎｕｃ　Ｉ　ｅ　ｏ　ｓ　ｉ　ｌ　　５Ｃ＋ｓ
緩衝液：０．１％ＴＦＡ−アセトニトリル（アセトニト
リルを２５分間に２８〜３８％に変化させるグラジェン
ト溶出） 流速；２．５ｍｌ／分 分取；１７．８分に溶出されるピークを分取した。

氷晶の物性； ｐＩ；１０．２５以上 〔α〕２６・５−５３．　３　　（ｃ＝０．　０９４．
．０゜１Ｍ酢酸） アミノ酸分析値； Ａｓｐ４．９６　（５）　、’ｒｈｒ３．７７　（４）
、５ｅｔ２．８３　（３）　、Ｐｒｏｌ、１２　（１）
、Ｇｌｙ４．１５　（４）　、Ａｈａ３．００　（３）
、Ｖａｌ３．８９　（４）　、Ｌｅｕ２．００　（２）
、Ｐｈｅ３．１０　（３）、ＬｙＳ２．１１　　（２）
、Ｈｉｓｓ、９Ｂ　（１）　、Ａｒｇ２．１０　（２）
、Ａｓｕｌ、１２　（１） 」１記のデスアラニル−（Ａ　Ｓ　ｕ”７）−保護−〇
−ＣＯＲＰ（３−３７）−ＭＢＨＡ樹脂は次の方法によ
り得た。

同相合成装置としてＡｐｐｌｉｅｄ　　Ｂｉｏｓｙｓｔ
ｅｍｓ社製４３０−Ａペプチドシンセサイザーを用いて
同相合成を行った。

（１）ＰＦ　（９−３７）−ＭＢＨＡ樹脂、即ちＨ−Ｔ
ｈｒ　　（Ｂｚ　ｌ）−１（ｉｓ−Ａｒｇ　（Ｔｏｓ）
　−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ａｓｐ　（ＯＢｚ　Ｉ）−Ｐｈｅ
−Ｌｅｕ−３ｅｒ　（Ｂｚ　ｌ）−Ａｒｇ　　（Ｔｏｓ
）−３ｅｒ　　（Ｂｚ　１．）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｖａ
　１−Ｇｌｙ−ＬｙＳ　（Ｃ１−Ｚ）−Ａｓｎ−Ａｓｎ
−Ｐｈｅ−Ｖａ　　１−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ　　（Ｂｚ　　
Ｉ）　　−Ａｓｎ　−Ｖａ　　Ｉ　−Ｇｌｙ−３ｅｒ　
　（Ｂｚ　１）−Ｌｙｓ　　（ＣＩ　−Ｚ）−Ａｌａ−
Ｐｈｅ−ＭＢＨＡ樹脂の製造Ｍ　Ｂ　ＨＡ樹脂（Ａｐｐ
ｌｉｅｃｌ　　Ｂｉｏｓｙｓｔ　ｅｍｓ社製、アミノ基
０．６１ｍモル／ｇ）０゜８ｇをペプチド同相合成用反
応容器に入れ、ＤＣＭ８ｍｌ（４回、各１分）、６０％
ＴＦＡ含有ＤＣＭ溶液８ｍｌ　　（２０分）　、ＤＣＭ
４ｍｌ　　（３回、各１５秒）、ＤＩＥＡ］ｍｌ含有Ｄ
ＭＦ溶液３ｍｌ　　（２回、各１分）　、ＤＭＦ８ｍｌ
　　（６回、各４０秒）の順に窒素ガス気流中攪拌下処
理し、各々の処理後濾過した。

一方、アミノ酸順序３７番目のＢｏｃ−Ｐｈｅ２ｍモル
をＤＣＭ５ｍｌに溶解し、アミノ酸活性化容器中でＤＣ
Ｃ（０，５Ｍ−ＤＣＭ溶液１１２ｍ１を加え、５分間反
応させた。反応液を濾過して濃縮容器に移し、これにＤ
ＭＦ３ｍｌを加え、窒素ガス気流下ＤＣＭを留去した。

これにＤＭＦ　３ｍｌを加え、前記の反応容器に移して
２５分間反応させた。次いで、ＤＣＭ８ｍｌ　　（６回
、各２０秒）で洗浄、濾過してＢｏｃ−Ｐｈｅ−ＭＢＨ
Ａ樹脂を得た。

次に、前記のＢｏｃ−Ｐｈｅ−ＭＢＨＡ樹脂を反応容器
中ＤＣＭ８ｍｌ　　（４回、各１分）で洗浄し、濾過し
た。これに６０％ＴＦＡ含有４０％ＤＣＭ溶液８ｍｌを
加え、２０分間攪拌し、Ｂｏｃを脱離した。得られた樹
脂をＤＣＭ４ｍｌ　　（３回、各１５秒）、ＤＩＥＡ１
ｍｌ含有ＤＭＦ溶液３ｍｌ　（２回、各１分）　、ＤＭ
Ｆ８ｍｌ　　（６回、各４０秒）で順次洗浄し、濾過し
た。

さらに、アミノ酸順序３６番目のＢｏｃ−Ａ１３２ｍモ
ルをＤＣＭ５ｍｌに溶解し、アミノ酸活性化容器中でＤ
ＣＣ（０，５Ｍ−ＤＣＭ溶液）２ｍｌを加え、５分間反
応させた。次いで、Ｂｏｃ−Ｐｈｅの場合と同様に処理
し、ＤＭＦを加えて窒素ガス気流下で濃縮した後、反応
容器に移して２０分間反応させた。次いで、ＤＣＭ８ｍ
ｌ（６回、各２０秒）で洗浄、濾過してＢｏｃ−Ａｈａ
−Ｐｈｅ−ＭＢＨＡ樹脂を得た。

以下、順次３５番目から９番目までのアミノ酸をカップ
リングしてＰＦ　（９−３７）−ＭＢＨＡ樹脂を得た。

用いた保護アミノ酸は次の通りである。

アミノ酸　　保護アミノ酸　　　　　　使用量順序　　
　　　　　　　　　　　　　ｍモル３５　　　Ｂｏｃ−
Ｌｙｓ　　（ＣＩ−Ｚ）　　　２３４　　　Ｂｏｃ−３
ｅｒ　（Ｂｚ　Ｉ）　　　　２３３　　　Ｂｏｃ−Ｇｌ
ｙ　　　　　　　　２３２　　　Ｂｏｃ−Ｖａｌ　　　
　　　　　’１３１　　　ＢｏＣ−Ａｓｎ　　　　　　
　２Ｘ２３０　　　Ｂｏｃ−Ｔｈｒ　（Ｂｚｌ）　　　
　２２９　　　Ｂｏｃ−Ｐｒｏ　　　　　　　　２２８
　　　Ｂｏｃ−Ｖａｌ　　　　　　　　２２７　　　Ｂ
ｏｃ−Ｐｈｅ　　　　　　　　２２６　　　Ｂｏｃ−Ａ
ｓｎ　　　　　　　２Ｘ２２５　　　Ｂｏｃ−Ａｓｎ　
　　　　　　２Ｘ２２４　　　Ｂｏｃ−Ｌｙｓ　　（Ｃ
Ｉ−Ｚ）　　　２２３　　　　ＢｏｃＧｌｙ　　　　　
　　　　　　２２２　　　　Ｂ　ｏ　ｃ　　　Ｖａ　　
Ｉ　　　　　　　　　　　２２１　　　　Ｂ　ｏ　ｃ　
−Ｇ　Ｉ　ｙ　　　　　　　　　　　２２０　　　　Ｂ
ｏｃ−Ｇｌｙ　　　　　　　　　　　２１．９　　　　
Ｂｏｃ−３ｅｒ　　（Ｂｚｌ）　　　　　２１８　　　
　Ｂｏ　Ｃ−Ａｒｇ　　（Ｔｏｓ）　　　２Ｘ２１７　
　　　Ｂｏｃ−３ｅｒ　　（Ｂｚｌ）　　　　　２１６
　　　ＢＯＣ−■、ｅｕ　　　　　　　　　　２１５　
　　　Ｂｏｃ−Ｐｈｅ　　　　　　　　　　　２１４　
　　　Ｂｏｃ−Ａｓｐ　　（ＯＢｚｌ）　　　２１３　
　　　Ｂｏｃ−Ａｌａ　　　　　　　　　　　２１２　
　　　Ｂｏ　Ｃ−Ｌｅｕ　　　　　　　　　　　２１１
　　　　Ｂｏｃ−Ａｒｇ（”ｌ”ｏｓ）　　　２Ｘ２１
０　　　　Ｂｏｃ−Ｈｉｓ　　（Ｔｏｓ）　　　　　２
９　　　　Ｂｏｃ−Ｔｈｒ　　（Ｂｚ　　ｌ）　　　　
　２上記固相合成において、Ａ　ｓ　ｎ　％　Ａ　ｒ　
ｇを用いた場合は、２ｍモルのアミノ酸をＤＭＩ−ＤＣ
Ｍ（３：　１）混合溶媒４ｍｌ中、Ｄ　ＣＣ溶液２ｍｌ
、ＨＯＢｔ溶液（０，５Ｍ−ＤＭＦ溶液）２ｍｌを加え
、１分間反応させた後、他のアミノ酸と同様に処理し、
反応容器に移してカップリング反応させ、ＤＣＭ洗浄、
濾過後、もう一度２ｍモルアミノ酸をＤＭＩ−ＤＣＭ　
（３：　１）混合溶媒４ｍｌ中、ＤＣＣ溶液２ｍ１．Ｈ
ＯＢｔ溶液（０，５Ｍ−ＤＭＦ溶液）２ｍｌを加え、２
５分間反応させたものを反応容器に移してカップリング
反応させる、いわゆるダブル・カップリング法で行った
。

（２）デスアラニル−（Ａ３ｕ”’）−保１−Ｃ−ＣＯ
ＲＰ　（３−３７）−ＭＢＨＡ樹脂の製造 環状ＰＦ　（３−８）（１０）即ち、 ＣＩ］２−−−−−□（ＣＨ２）３□−−−−−−−Ｏ
Ｈ２Ｃｏ−Ａｓ　ｎ−Ｔｈ　ｒ−Ａ　ｌ　ａ−Ｔｈ　ｒ
−ＮＨＣＨ−ＣＯ−Ｖａ　１−−ＮＨＮＨｚ　２２０ｍ
ｇをＤＭＦＩＱｍｌに溶かし、これに−４０６０に冷却
下ジオキサン中４Ｎ−塩化水素０．９３ｍ１を加え、−
３０’Ｃで亜硝酸イソアミル６０μｌを加えた。

３０分後にヒドラジン・テストが陰性になったので、−
７０°Ｃに冷却下トリエチルアミン５２０μρを加え、
中和した。これにＰＦ　（９−３７）−ＭＢＨＡ樹脂１
．１３ｇを加え、さらにトリエチルアミン９０μｌを加
え、−２０〜−１０℃で５時間撹拌した後、４°Ｃで１
昼夜攪拌した。反応終了後、吸引濾過し、ＤＭＦｌｏｍ
ｌ、０．１Ｍ酢酸１０ｍ１、エタノール１０ｍ１の順で
洗浄後、減圧乾燥してデスアラニル−（Ａｓｕ２″７〕
−保護−ｃ−ＣＧＲＰ　（３−３７）−ＭＢＨＡ樹脂１
．０９ｇを得た。

上記環状ＰＦ（３−８）〔１０〕は次の方法により製造
した。

（３）環状保護ＰＦ　（３−８）ｉ ＣＨｚ　　　　　　　（ＣＨｚ　）ｙ−−−−−ＣＨｚ
ｌ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　］］Ｃｏ−
Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−ＴｈｒＮＨＣＨ−Ｂｚ　Ｉ　
　　　　Ｂｚ　Ｉ Ｃｏ−Ｖａ　１−ＯＭｅ　（８） Ｂｏｃ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ　（Ｂｚ　Ｉ）−Ａｌａ　−Ｔ
ｈｒ　　（Ｂｚ　１）−Ａｓｕ　−Ｖａ　ｌ　−ＯＭｅ
　（７）３．４ｇをピリジン５０ｍ１に溶かし、これに
５．７当量のｐ−ニトロフェニルトリフルオロアセテー
トを加え、４５°Ｃで４時間攪拌した。ピリジンを留去
後、エーテルを加え、生じた沈澱物を集めた。これにＴ
ＦＡ３０ｍｌを加えて脱Ｂ。

Ｃ化した後、ＴＦＡを減圧留去し、エーテルを加え、生
じた沈澱物を集めた。沈澱物をＤＭＦ８２ｍｌに溶解し
、これを４５’Ｃのピリジン２．３１に滴下し、５０°
Ｃで６時間、次いで室温で一夜攪拌した。反応液を減圧
下ピリジンを留去し、残渣に０．５％重曹水１００ｍ１
を加え、生じた沈澱物を充分水洗した後、デシケータで
乾燥して環状保護ＰＦ（３−８）（８）を得た。収量３
゜６ｇ （４）環状ＰＦ　（３−８）； ＣＨｚ　　　　　　　（ＣＨｚ　）　３　　　　　０Ｈ
ｚｌ Ｃｏ−Ａｓ　　ｎ−Ｔｈ　　ｒ−Ａ　　Ｉ　　ａ−Ｔｈ
　　ｒ−ＮＨＣＨ−ＣＯ−Ｖａ　Ｉ−ＯＭｅ　（９） 環状保［ＰＦ　（Ｌ−８）（８）１．４８ｇにアニソー
ル１．５ｍｌを加え、０°Ｃに冷却下無水弗化水素１５
ｍ１を加え、１時間攪拌した。反応後、減圧上無水弗化
水素を留去した。残渣をエーテルで洗浄し、白色粉末１
．１５ｇを得た。これを酢ｉ１１２３ｍｌに溶解し、こ
れにＯ，ＩＭ酢酸９ｍＩを加え、３３％ＤＭＦ含有０．
ｉＭ酢酸で充填したＣＨＰ−２０のカラム（３，２Ｘ２
５ｃｍ）にチャージし、３３％酢酸７００ｍ１から７ｏ
％ＤＭＦ含有３３％酢酸７００ｍ１の直線型濃度勾配に
よるグラジェント溶出を行゛った。溶出液を１０ｍ１づ
つ分画し、フラクション３２−４９番目を隼め、Ｄ　Ｍ
　Ｆ留去後、凍結乾燥して白色粉末の環状ＰＦ　（３−
８）（９）を得た。収１６００ｍアミノ酸分析値； Ａｓｐｏ、９９　（１）　、Ｔｈｒ　１．９５　（２）
、Ａｌａｌ、００　　（１）、Ｖａｌｌ、０１　　（１
）、ＡＳｕｌ、０７　　（］） （５）環状ＰＦ（３−８）〔１ｏ〕 環状ＰＦ　（３−８）（卸６００ｍｇをＴ　ＨＦ２０ｍ
１に溶解し、６０゛ｃに加熱しで溶解した後、３０℃に
保ち、これに２ｍｌのＮｌ２　Ｎｌ２　　・Ｈ２Ｏを加
え、６時間室温で攪拌した。次いで、１゛ＨＦ２０ｍ１
、ＤＭＦｌｏｍｌを追加し、−夜撹拌した。反応後、減
圧上溶媒を留去し、残渣を酢酸５　ｍ　ｌに溶解し、こ
れに水１５ｍ１を加え、ＣＨＰ−２００カラム（２，８
Ｘ１６．０ｃｍ）にチャージし、０．１Ｍ酢酸３００ｍ
１から４０％アセトニトリル含有０．１　Ｍ酢酸３００
ｍ１の直線型濃度勾配によるグラジェント溶出を行−っ
た。ｆ？ＨＪ’ｒ液を９．６ｍｌづつ分画し、フラクシ
ョン４６−５６番目を集め、凍結乾燥して白色粉末の環
状ＰＦ　（１−８）（１０）を得た。収量２２４ｍｇ上
記のＢｏｃ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ　　（Ｂｚ　１）−Ａ！ａ
−Ｔｈｒ　　（Ｂｚ　１）−Ａｓｕ−Ｖａ　ｌ−ＯＭｅ
〔７〕は、第５図のベブチｌフラグメント（３−８）の
製造工程図に示される工程により製造された。尚、製造
中の中間ペプチドフラグメントの物理化学的性質は次の
通りである。

（１１ＰＦ　（５−６）；Ｂｏｃ−Ａｌａ−Ｔｈｒ　（
Ｂｚ　１）−０Ｂｚ　ｌ Ｔ　Ｌ　Ｃ；　Ｒｆ　＋　　；　０　、　９３融点；　
８９−９５°Ｃ アミノ酸分析値１Ｔｈｒ１．００　（１）、Ａｌａ（２
１ＰＦ　（４−６）；Ｂｏｃ−Ｔｈｒ　（Ｂｚｌ）−Ａ
ｌａ−Ｔｈｒ　　（Ｂｚｌ）−０ＢｚｌＴ　Ｌ　Ｃ；　
Ｒｆ　＋　　ｉ　０　、　７３融点；９２−９４°Ｃ アミノ酸分析値；Ｔｈｒｌ、９７　（２）　、Ａｌａｌ （α）””　　５．４２　（ｃ＝１．００．ＤＭＦ）（
３１ＰＦ　（４−６）；Ｂｏｃ−Ｔｈｒ　　（Ｂｚ　Ｉ
）−Ａｌａ−Ｔｈｒ　　（Ｂｚ　ｌ）　　−０ＨＴ　Ｌ
　Ｃ；　Ｒｆ　＋　　；　０　、　３２融点；５４−５
８″Ｇ アミノ酸分析値； Ｔｈｒ　１．８６　（２）　、Ａｌａ　１（α）””　
　２４．２０　（ｃ−１，０３，ＤＭＦ（４１ＰＦ　（
７−８）；　Ｚ−Ａｓｕ　　（ＯＢｕ　ｔ）−Ｖａｌ　
−ＯＭｅ Ｔ１．、Ｃ；Ｒｆ、；ｏ、９０ 融点；室温で油状 Ｇ １５１　　ＰＦ　　（７−８）　　；Ｈ−Ａｓｕ　　（
ＯＢｕｔ）　　−Ｖａ　ｌ　−ＯＭｃ ＴＬＣ；Ｒｆ、　　；０．　２５ 融点；室温で油状 （６１ＰＦ　＜４．−８）；Ｂｏｃ−Ｔｈｒ　（Ｂｚ　
１）Ａｌａ−Ｔｈｒ　（Ｂｚ　Ｉ）　−Ａｓｕ　（ＯＢ
ｕ　ｔ）　−Ｖａ　ｌ　−ＯＭｅ ＴＬＣ；Ｒｆ、ｉｏ、６４ 融点；１０７−１１３°Ｃ アミノ酸分析値； Ｔｈｒｌ、８３　（２）　、Ａｌａ　１．００　（１）
、Ｖａｌｌ、０５　（１）　、Ａｓｕｌ、１８　（１）
Ｃｔｘ〕２６・’　　５．４６　（ｃ−１，０３，ＤＭ
Ｆ）（７１ＰＦ　（３−８）（７）； ＴＬＣ：Ｒｆｚ　　；０．５４ 融点；　２１６−２１８℃ アミノ酸分析値； Ａｓｐｌ、００　（１）、Ｔｈｒｌ、９２　（２）、Ａ
ｌａｌ、００　（１）、Ｖａｌｌ、００　（１）、Ａｓ
　ｕ　１．　０６　（１） 実施例　２ デスアラニル−（Ａｓｐ’　、Ａｓｕ”・７〕−ｃ　　
ＣＧＲＰの製造 デスアラニル−［Ａｓｎ３．Ａｓｕ”７）−保護−ｅ−
ＣＧＲＰ　（３−３７）　　ＭＢＨＡ樹脂、即ち、 Ｃ）ｌｚ　　　　　　−（ＣＨｚ　）　ｘ　　　　　　
　ＣＨｚＣｏ−Ａｓ　ｐ−Ｔｈ　ｒ−Ａ　ｌ　ａ−Ｔｈ
　ｒ−ＮＨＣＨ−ＣＯ−Ｖａ　１−Ｔｈｒ　　（Ｂｚ　
ｌ）　　Ｈｉｓ−Ａｒｇ　（Ｔｏｓ＞−Ｌｅｕ−Ａｌａ
−Ａ、ｓｐ　（ＯＢｚｌ）　−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−３ｅｒ
　　（ＢＺ　Ｉ）−Ａｒｇ　（Ｔｏｓ）−３ｅｒ　　（
Ｂｚ　１）−ｃｒｙ　　Ｇｌｙ−■ａ１−Ｇ１ｙ−Ｌｙ
ｓ　（ＣＩ−Ｚ）−Ａｓｎ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−■ａ１−
Ｐｒｏ−Ｔ１１ｒ　（ＢＺＩ）−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｇｌ
ｙ−３ｅｒ　　（ＢｚＩ）−Ｌｙｓ　（ＣＩ−Ｚ）−Ａ
Ｉａ−Ｐｈｃ−Ｍ　Ｂ　ＨＡ樹脂１．０９ｇにアニソー
ルｌ　ｍ　ｌを加え、これに無水弗化水素２５ｍ１を加
え、０６Ｃで１時間攪拌した。反応後、無水弗化水素を
減圧下留去後、残渣をエーテルで洗浄し、これに００１
Ｍ酢酸２０ｍ１を加え、ペプチドを抽出した。

抽出液をＤｏｗｅｘ　　ＷＧＲのカラム（２，８Ｘ１６
Ｃｍ）に通し、０．１Ｍ酢酸６０ｍ１で溶出した。得ら
れた溶出液を凍結乾燥し、４１　Ｑｍｇの白色粉末を得
た。この粉末をカルボキシメチルセルロースのカラム（
２，８Ｘ１４ｃｍ）にチャージし、０．０１Ｍ酢酸アン
モニウム水溶液（ｐＨ４，５）３００ｍｌ　〜０．５Ｍ
酢酸アンモニウム水溶液（ｐＨ５，９Ｓ　３００ｍ１の
直線型濃度勾配によるグラジェント溶出を行った。溶出
液を１０ｍ１づつ分画し、その１００μｍを使用してフ
ォリン・ローリ−法により発色させ、７５０ｎｍで測定
し、フラグ９３フ２９〜３１番目を集め、これをＣＨＰ
−２０樹脂（三菱化成工業社製）のカラム（２，８Ｘ６
．５ｃｍ）にチャージし、２５％アセトニトリルを含む
Ｏ，１Ｍ酢酸水溶液１５　Ｑ　ｍ　１〜４０％アセトニ
トリルを含む０，１Ｍ酢酸水溶液１５０ｍ１の直線型濃
度勾配によるグラジェント溶出を行った。？容出液を５
．４ｍｌづつ分画し、プラク９３フ１０〜１２番目を集
め、凍結乾燥して白色粉末１８．２ｍｇを得た。これを
下記の条件による逆相系高速液体クロマトグラフィー（
ＨＰ　Ｌ　Ｃ）　により精製し、デスアラニル−（Ａｓ
ｐ’　、Ａｓｕ”　）−ｃ−ＣＯＲＰの精製品２．　８
ｍｇを得た。

カラム；Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ　　ｓｃ＋ａ緩衝液；０．
１％ＴＦＡ−アセトニトリル（アセトニトリルを２５分
間に２８〜３８％に変化させるグラジェント溶出） 流速；２．５ｍｌ／分 分取；１７．７分に溶出されるピークを分取した。

本市の物性； ｐｌ；１０．２５以上 （α）”５−５６．８　（ｃ＝０．０９１．０゜１Ｍ酢
酸） アミノ酸分析値； Ａｓｎ４．９１　　（５）　、Ｔｈｒ３．８０　（４）
、５ｅｔ２．８０　（３）　、Ｐｒｏｌ、０３　　（１
）、Ｇｌｙ４．０５　（４）　、ＡＩａ３．００　（３
）、Ｖａｌ３．８０　（４）、Ｌｅｕｌ、９９　　（２
）、Ｐｈｃ３．　０８　　（３）　　、Ｌｙｓ２．　０
８　　（２）　　、Ｈｔｓｏ、　　９２　　（１）　　
、Ａｒｇ２．　０３　　（２）　　、Ａｓｕｌ、　　０
９　　（１） 上記のデスアラニル−（Ａｓ　Ｔ）、　Ａｓ　ｕ”°７
〕−保護−ｃ−ＣＧＲＰ　（３３７）−ＭＢＨＡ樹脂は
次の方法により製造した。

（１）ＰＦ　（９−３７）−ＭＢＨＡ樹脂は、実施例１
に記載の通りである。

（２）デスアラニル−（Ａｓｎ３．Ａｓｕ”　）−保護
−ｃ−ＣＯＲＰ　（３３７）　　ＭＢＨＡ樹脂の製造 環状ＰＦ　（１Ｂ）（１４，）即ち、 ＣＨ２□−−−−−−（ＣＨ２）３−−−−−−−−−
−−ＣＨ２Ｃｏ−Ａｓ　ｐ−Ｔｈ　ｒ−Ａ　ｌ　ａ−Ｔ
ｈ　ｒ−ＮＨＣＨ−ＧＯ−Ｖａ　１−ＮＨＮＨｚ　２５
０ｍｇ＠ＤＭＦ１０ｍｌに溶かし、これに−４０°Ｃに
冷却下ジオキサン中４Ｎ−塩化水素０．９３ｍ１を加え
、−３０６Ｃで亜硝酸イソアミル６０μｐを加えた。

３０分後にヒドラジン・テストが陰性になったので、−
７０’Ｃに冷却丁トリエチルアミン５２０μｐを加え、
中和した。これにＰＦ　（９−３７）−ＭＢＨＡ樹脂１
．１３ｇを加え、さらにｌ・リエチルアミン９０μＣを
加え、−２０〜−−１０℃で５時間攪拌した後、４°Ｃ
で１昼夜攪拌した。反応終了後、吸引濾過し、ＤＭＦｌ
ｏｍｌ、０．１Ｍ酢酸１０ｍ１、エタノール１０ｍ１の
順で洗浄後、減圧乾燥してデスアラニル−（Ａｓｐ３．
Ａｓ　ｕ　？＋　７　）−保護−ｃ−ＣＯＲＰ　（３−
３７＞−Ｍ　Ｂ　ＨＡ樹脂１．０９ｇを得た。

上記環状ＰＦ　（３−８）［１４）は次の方法により製
造した。

（３）環状保護ＰＦ　（３−８）； ＣＨｚ　−−−−□　（ＣＨ２）：ｌ　　−−−ＣＨｚ
］　　　　　　　　　　　　　　　　　　　ＩＣｏ−Ａ
　ｓ　ｐ−Ｔｈ　ｒ−Ａ　＋　ａ−Ｔｈ　ｒ−ＮＨＣＨ
−Ｂｚ　Ｉ　　　　　Ｂｚ　Ｉ Ｃ０−■ａＩ−ＯＭｅ　（１２〕 Ｂｏｃ　＝Ａｓｐ　　（ＯＢｚ　］）−１”ｈｒ　　（
Ｂｚ　１）　　−Ａｌａ−Ｔｈｒ　　（Ｂｚｌ）　＝Ａ
ｓｕ−Ｖａｌ−ＯＭｅ　（１１）３．２ｇをピリジン４
０ｍ１に７容かし、これに７当量のｐ−ニトロフェニル
トリフルオロアセテ−１・を加え、４５６Ｃで３時間攪
拌した。ピリジンを留去後、エーテルを加え、生じた沈
澱物を集めた。これにＴＦＡ３０ｍｌを加えて脱Ｂｏｃ
化した後、ＴＦＡを減圧留去し、エーテルを加え、生じ
た沈澱物を集めた。沈澱物をＤＭＦ　７０ｍ　ｌに溶解
し、これを４５６Ｃのピリジン２ｐに滴下し、５０６Ｃ
で７時間、次いで室温で一夜攪拌した。反応液を減圧下
ピリジンを留去し、残渣をクロロホルム４００ｍ１で抽
出して環状保護ＰＦ　（３−８）［１２）を得た。

収量２．６２ｇ （４）環状ＰＦ　（３−８）； ＣＨ２−（ＣＩ□）３−−−−−−−−−−ＣＩＩ２Ｃ
Ｏ−Ａｓ　ｐ−Ｔｈ　ｒ−Ａ　ｌ　ａ−Ｔｈ　ｒ−ＮＨ
ＣＨ−ＣＯ−Ｖａ　ｌ　−ＯＭｅ　（１３） 環状保１ｉｐＦ（３−８）（１２）２．６７ｇにアニソ
ール１ｍｌを加え、０６Ｃに冷却下無水弗化水素１５ｍ
ｌを加え、１時間攪拌した。反応後、減圧下無水弗化水
素を留去した。残渣をエーテルで洗浄し、白色粉末１．
７５ｇを得た。これをＤＭＦ　１０ｍ　ｌに溶解し、こ
れに０．１Ｍ酢酸１０ｍ１を加え、２０％ＤＭＦ含有０
．１Ｍ酢酸で充填したＣＨＰ−２０のカラム（３，２Ｘ
３２ｃｍ）にチャージし、２０％ＤＭＦ含有０．１Ｍ酢
酸５００ｍ１から６６％Ｉ）　Ｍ　Ｆ含有０．１Ｍ酢酸
５００ｍ１の直線型濃度勾配によるグラジェント溶出を
行った。溶出液を１４．８ｍｌづつ分画し、フラクショ
ン５４−６３番目を集め、濃縮乾固して白色粉末の環状
ＰＦ　（１−８）（１３）を得た。

収量６７０ｍｇ 融点；　］、　５４−１６０°Ｃ アミノ酸分析値； Ａｓｐｏ、９８　（１）　、Ｔｈｒ　１．９０　（２）
、Ａｌａｌ、００　（１）、Ｖａｌｏ、９６　（１）、
Ａｓｕｌ、０７　（１，） マス・スペクトルｉ６７３（Ｍｌ（理論価６７２．７１
） （５）環状ＰＦ　（１８）（１４） 環状ＰＦ　（３−８）（１３）８００ｍｇをＴ　ＨＦ２
５ｍ１に加熱して溶解し、３０°Ｃに冷却後、これに２
ｍｌのＮ１−（２ＮＨ２・Ｈ，Ｏを加え、室温で６時間
攪拌後、０ＭＦ２０ｍｌを追加し、−夜攪拌した。反応
後、減圧上溶媒を留去し、残渣をＯ，１Ｍ酢酸１５ｍ１
に溶解し、ＣＨＰ−２０のカラム（２，６Ｘ１３．０ｃ
ｍ）にチャージし、０．１Ｍ酢酸３００ｍ１から３３％
アセトニトリル含有０．１Ｍ酢酸３００ｍ１の直線型濃
度勾配によるグラジェント溶出を行った。溶出液を７゜
９　ｍ　Ｉづつ分画し、フラクション２６−４０番目を
集め、凍結乾燥して白色粉末の環状ＰＦ　（３−８）（
１４）を得た。収量５０２ｍｇ 上記のＢｏｃ−Ａｓｐ　（ＯＢｚ　Ｉ）−Ｔｈｒ　（Ｂ
ｚ　Ｉ）−Ａｌａ−Ｔｈｒ　（Ｂｚ　Ｉ）−Ａｓｕ−−
Ｖａ　Ｉ　−ＯＭｅ　（１１）は、第６図のペプチドフ
ラグメント（３−８）の製造工程図に示される工程によ
り製造されるが、上記ペプチドフラグメン）（１１）の
物理化学的性質は次の通りである。

ＴＬＣ；Ｒｆｚ　　；０．５８ アミノ酸分析値； Ａｓｐｌ、０４　（１）、Ｔｈｒ２．０４　（２）、Ａ
ｌａｌ、　　００　　（１）、Ｖａｌｌ、　　０６　　
（１）　　、Ａｓｕｌ、　　２５　　（１） 実施例　３ デスアラニル−デアミノ−Ｃ−ＣＧ］ｌマ■）の製造 保護−デスアラニル−デアミノ−ｃ−ＣＧＲＰ−Ｍ　１
３　ＨＡ樹脂、即ちＭＢｚｌ　　Ｓ　　（ＣＨ２）２−
Ｃｏ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ　　（Ｂｚ　１）−Ａｌａ　−Ｔ
ｈｒ　　（Ｂｚ　１）−Ｃｙｓ　　（ＭＢ２１）　−Ｖ
ａ　ｌ　−Ｔｈｒ　（Ｂｚｌ）−Ｈｉｓ−Ａｒｇ　（Ｔ
ｏｓ）　−Ｌｅｕ−Ａｈａ−Ａｓｐ　　（ＯＢｚ　Ｉ）
　−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−３ｅｒ　　（Ｂｚ　］）−Ａｒｇ
　（Ｔｏｓ）　−３ｃｒ　（Ｂｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ
−Ｖａｌ　−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　（Ｃ１−Ｚ）−ＡＳｎ−
ＡＳｎ−Ｐｈｅ−Ｖａ　１−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ　　（Ｂｚ
　ｌ）　＝Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−３ｅｒ　　（Ｂｚ
ｌ）−Ｌｙｓ（ＣＩ−Ｚ）　　−Ａｌａ−Ｐｈｅ−ＭＢ
Ｉ＋Ａ樹脂２゜６５ｇにアニソール４ｍｌ、ジメチルス
ルフィド４ｍｌ、エタンジチオール０．８ｍｌを加え、
これに無水弗化水素４０ｍ１を加え、０°Ｃで１時間攪
拌した。反応後、無水弗化水素を減圧下留去後、残渣を
エーテルで洗浄し、これに２０％酢酸５０ｍ１を加え、
ペプチドを抽出した。抽出液をｌ）ｏｗｅｘ　　ＷＧＲ
のカラム（２，５Ｘ１５ｃｍ）に通し、ＩＭ酢酸１６０
ｍ１で溶出した。得られた溶出液を凍結乾燥し、７８　
Ｑｍｇの白色粉末を得た。この粉末１５　Ｑｍｇを８Ｍ
尿素、５ｍＭジチオスライトールを含む５０ｍＭＮａｚ
　ＨＰＯ４緩衝液（ｐＨ７，５）１０ｍｌに溶解し、室
温で１時間攪拌した。その後５０ｍＭＮａｚ　ＨＰＯ４
緩衝液（ｐＨ７，５）１１２５ｍｌで希釈し、２０ｍＭ
Ｋ、ｌＦ　ｅ　（ＣＮ）６水溶液８ｍｌを加えた。この
溶液をＣＨＰ−２０Ｐ　（三菱化成工業社製）のカラム
（２，５Ｘ１０ｃｍ）にチャージし、５％アセトニトリ
ル含有０．１Ｎギ酸水溶液５００ｍ１〜４５％アセトニ
トリル含有０．１Ｎギ酸水溶液５００ｍ１の直線型？震
度勾配によるグラジェント溶出を行った。溶出液を１０
ｍ１づつ分画し、その１００μｌを使用してフォリン・
ローリ−法により発色させ、７５０ｎｍで測定し、フラ
クシ３フ４６〜５３番目を集め、凍結乾燥して白色粉末
３５ｍｇを得た。得られた白色粉末を０゜１Ｍ酢酸に溶
解し、５ｅｐｈａｄｅｘ　　Ｇ−２５Ｆｉｎｅのカラム
（１，６Ｘ４５ｃｍ）にチャージし、０．１Ｍ酢酸で？
容出した。溶出液を６ｍｌづつ分画し、プラク９３フ５
〜１５番目を集め、凍結乾燥して白色粉末３１ｍｇを得
た。

これを下記の条件による逆相系高速液体クロマトグラフ
ィー（ＨＰＬＣ）により精製し、デスアラニル−デアミ
ノ−ｃ−ＣＧＲＰの精製品１０゜３ｍｇを得た。

カラム；ＹＭＣ−ＧＥＬ　　ＯＤＳ　　Ｓ−５ＡＭｔｙ
ｐｅ　（２０ｍｍｌＤＸ２５０ｍｍ）緩衝液；０．１％
ＴＦＡ−アセトニトリル（アセトニトリルを３０分間に
２７〜４０％に変化させるグラジェント溶出） 流速；　７ｍｌ／分 分取；約１７．３分に溶出されるピークを分取した。

氷晶の物性； ｐＩ；１０．２５以上 〔α）”　　−６０，４６６（ｃ　＝０．０８６．０゜
１Ｍ酢酸） アミノ酸分析値（６Ｎ塩酸加水分解）；ＡＳｎ４．７５
　（５）　、Ｔｈｒ３．６２　（４）、５ｅｔ２．７４
　　（３）　、Ｐｒｏｌ、０１　　（１）、Ｇｌｙ３．
８５　　（４）　、Ａｈａ３．００　（３）、Ｖａｌ３
．７０　　（４）、Ｌｅｕｌ、９４　　（２）、Ｐｈｅ
２．８３　（３）　、Ｌｙｓ２．０４　（２）、Ｈ４５
０，９５（１）　、Ａｒｇｌ、８９　　（２）、上記の
保護−デスアラニル−デアミノ−Ｃ−ＣＧＲＰ−ＭＢＨ
Ａ樹脂は次の方法により得た。

固相合成装置としてＡｐｐｌｉｅｄ　　Ｂｉｏｓｙｓｔ
ｅｍｓ社製４３０−Ａペプチドシンセサイザーを用いて
固相合成を行った。

Ｍ　Ｂ　ＨＡ樹脂（Ａｐｐｌｉｅｄ　　Ｂｉｏｓｙｓｔ
　ｅｍｓ社製、アミノ基０．４８ｍモル／ｇ）１゜０ｇ
をペプチド固和合成用反応容器に入れ、ＤＣＭ８ｍｌ　
　（４回、各１分）、６０％ＴＦＡ含有ＤＣＭ溶液３ｍ
ｌ　　（２０分）　、ＤＣＭ４ｍｌ　　（３回、各１５
秒）、Ｄ＋ＥＡ１ｍｌ含有ＤＭＦ溶液３ｍｌ　　（２回
、各１分）　、ＤＭＦ８ｍｌ　　（６回、各４０秒）の
順に窒素ガス気流中撹拌下処理し、各々の処理後濾過し
た。

一方、アミノ酸順序３７番目のＢ　ｏ　ｃ　−Ｐ　ｈ、
　ｅ２ｍモルをＩ：ｌＣＭ５ｍｌに溶解し、アミノ酸活
性化容器中でＤＣＣ（０，５Ｍ−ＤＣＭ溶液）２ｍｌを
加え、５分間反応させた。反応液を濾過して濃縮容器に
移し、これにＤＭＦ　３ｍ　ｌを加え、窒素ガス気流下
１）　ＣＭを留去した。これにＤＭＦ３ｍｌを加え、前
記の反応容器に移して２５分間反応させた。次いで、Ｄ
ＣＭ８ｍｌ　　（６回、各２０秒）で洗浄、濾過してＢ
ｏｃ−Ｐｈｅ−ＭＢＨＡ樹脂を得た。

次に、前記のＢｏｃ−Ｐｈｅ−ＭＢＨＡ樹脂を反応容器
中ＤＣＭ８ｍｌ　　（４回、各１分）で洗浄し、濾過し
た。これに６０％ＴＦＡ含有４ｏ％ＤＣＭ溶液３　ｍ　
ｌを加え、２０分間攪拌し、ＢＯＣ基を脱離した。得ら
れた樹脂をＤＣＭ４ｍｌ（３回、各１５秒）、ＤＩＥＡ
１ｍｌ含有ＤＭＦ溶液３ｍｌ　　（２回、各１分）　、
ＤＭＦ８ｍｌ　　（６回、各４０秒）で順次洗浄し、濾
過した。

一方、アミノ酸順序３６番目のＢｏｒ、−Ａ１３２ｍモ
ルをＤＣＭ５ｍｌに溶解し、アミノ酸活性化容器中でＤ
ＣＣ（０，５Ｍ−ＤＣＭ溶液）２ｍｌを加え、５分間反
応させた。次いで、Ｂｏｃ−Ｐｈｅの場合と同様に処理
し、ＤＭＦを加えて窒素ガス気流下で濃縮した後、反応
容器に移して２０分間反応させた。次いで、ＤＣＭ８ｍ
ｌ　　（６回、各２０秒）で洗浄、濾過してＢｏｃ−Ａ
ｌａ−ｐｈｅ＝樹脂を得た。

以下、順次３５番目から３番目までのアミノ酸をカップ
リングし、最後にＭＢｚｌ−β−メルカプトプロピオン
酸でアシル化して、保護−デスアラニル−デアミノ−ｃ
−ＣＧ　ＲＰ　−Ｍ　Ｂ　ＨＡ樹脂を得た。

用いた保護アミノ酸は次の通りである。

アミノ酸　　保護アミノ酸　　　　　　使用量順序　　
　　　　　　　　　　　　　ｍモル３５　　　Ｂｏｃ−
Ｌｙｓ　（ＣＩ−Ｚ）　　２３４　　　　Ｂｏｃ−３ｅ
ｒ’（Ｂｚｌ）　　　　２３３　　　　Ｂ　ｏ　ｃ−Ｇ
　Ｉ　ｙ　　　　　　　　　２３２　　ｒ３ｏｃ−ｖａ
Ｉ　　　　　　　　　２３１　　　　Ｂｏｃ−Ａｓｎ　
　　　　　　　２Ｘ２３０　　　Ｂｏｃ−Ｔｈｒ　　　
　　　　　　２２９　　　ＢＯＣ−Ｐｒｏ　　　　　　
　　２２８　　　ＢＯＣ−Ｖａｌ　　　　　　　　　２
２７　　　Ｂｏｃ−Ｐｈｅ　　　　　　　　２２６　　
　　Ｂｏｃ−Ａｓｎ　　　　　　　　２Ｘ２２５　　　
　ＢｏＣ−Ａｓｎ　　　　　　　　２ｘ２２４　　　　
Ｂｏｃ−Ｌｙｓ　　（ＣＩ　−Ｚ）　　　２２３　　　
Ｂｏｃ−Ｇｌｙ　　　　　　　　　２２２　　　　Ｂｏ
ｃ−Ｖａｌ　　　　　　　　　　２２１　　　　Ｂｏｃ
−Ｇｌｙ　　　　　　　　　２２０　　　　Ｂｏｃ−Ｇ
ｌｙ　　　　　　　　　　２１９　　　　Ｂｏｃ−３ｅ
ｒ　　（Ｂｚｌ）　　　　２１８　　　　Ｂｏｃ−Ａｒ
ｇ　　（Ｔｏｓ）　　　２ｘ２１７　　　Ｔ３ｏｃ−３
ｅｒ　　（Ｂｚｌ）　　　　２１６　　　　Ｂｏｃ−Ｌ
ｅｕ　　　　　　　　　２１５　　　　Ｂｏｃ−Ｐｈｅ
　　　　　　　　　２１４　　　Ｂｏｃ−ＡＳｐ　（Ｏ
ＢＺＩ）　　　２１３　　　Ｂｏｃ−Ａｌａ　　　　　
　　　　２１２　　　Ｂ　ｏ　ｃ　−Ｌ　ｅ　１１　　
　　　　　２１１　　　Ｂｏｃ−Ａｒｇ　（Ｔｏｓ）　
　２Ｘ２１０　　　Ｂｏｃ−Ｈ４ｓ　　（Ｔｏｓ）　　
　　２９　　　Ｂｏｃ−Ｔｈｒ　（Ｂｚ　Ｉ）　　　　
２８Ｂｏｃ−Ｖａｌ２ ７　　　Ｂｏｃ−Ｃｙｓ　　（ＭＢｚ　ｌ）　　　２６
　　　Ｂｏｃ−Ｔｈｒ　　（Ｂｚ　ｌ）　　　　２５Ｂ
ｏｃ−Ａｌａ２ ４　　　Ｂｏｃ−Ｔｈｒ　　（Ｂ２１）　　　　２３　
　　Ｂｏｃ−Ａｓｎ　　　　　　　２Ｘ２２　　　ＭＢ
　ｚ　ｌ　　Ｓ　　（ＣＨ２）　ｚ−ＣＯＯＨ２ 上記固相合成において、Ａｓｎ、Ａｒｇを用いた場合は
、２ｍモルのアミノ酸をＤ　Ｍ　Ｆ−Ｄ　ＣＭ（３：１
）混合溶媒４ｍｌ中、ＤＣＣ溶液２ｍｌ、ＨＯＢ　を溶
液（０，５Ｍ−ＤＭＦ溶液）２ｍ１を加え、１分間反応
させた後、他のアミノ酸と同様に処理し、反応容器に移
してカップリング反応をし、ＤＣＭ洗浄、濾過後、もう
一度２ｍモルアミノ酸をＤＭＦ−ＤＣＭ　（３：　１）
混合溶媒４．ｍｌ中、ＤＣＣ溶液２ｍｌ、ＨＯＢ　を溶
液（０，５Ｍ−ＤＭＦ溶液）２ｍｌを加え、２５分間反
応させたものを反応容器に移してカップリング反応させ
る、いわゆるダブル・カンブリング法で行った。

【図面の簡単な説明】

第１図はラットの血清カルシウムに対するｈ−ＣＧＲＰ
、ｃ−ＣＧＲＰおよび本発明のデスアラニル−デアミノ
−ｃ−ＣＯＲＰの効果を表す曲線を示し、第２図はラッ
トの無機リン値に対するｈＣＧＲＰＸｃ−ＣＧＲＰおよ
び本発明のデスアラニル−デアミノ−ｃ−ＣＯＲＰの効
果を表す曲線を示し、第３図はラットの血清カルシウム
に対するｈ−ＣＧＲＰ、ｃ−ＣＧＲＰならびに本発明の
デスアラニル−（Ａｓ　ｕ”７）　　ｃ−ＣＧＲＰおよ
びデスアラニル−（Ａｓｐ’　、Ａｓｕ”°７〕−ｃ−
ＣＣ；ＲＰの効果を表す曲線を示し、第４図はラットの
血清リンに対するｈ−ＣＧＲＰ、ｃ−ＣＯＲＰならびに
本発明のデスアラニル−（Ａｓｕ２゛））−ｃ−ＣＧＲ
Ｐおよびデスアラニル−（Ａｓｐ’　Ａｓｕ”　）−ｃ
−ＣＧＲＰの効果を表す曲線を示し、第５図および第６
図は本発明の中間ペプチドフラグメントであるペプチド
フラグメント（３−８）の製造工程図を示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）、式 【遺伝子配列があります】 （式中、Ｙは硫黄原子またはメチレン基を示し、ＡはＡ
   ｓｎまたはＡｓｐを示す）で表されるペプチドまたはそ
   の塩。 ２）、式 【遺伝子配列があります】 で表されるペプチドである特許請求の範囲第１項記載の
   ペプチドまたはその塩。 ３）、式 【遺伝子配列があります】 で表されるペプチドである特許請求の範囲第１項記載の
   ペプチドまたはその塩。 ４）、式 【遺伝子配列があります】 で表されるペプチドである特許請求の範囲第１項記載の
   ペプチドまたはその塩。