JPS63208534A

JPS63208534A - 線維素溶解剤

Info

Publication number: JPS63208534A
Application number: JP62039699A
Authority: JP
Inventors: Shunji Kasai; 俊二笠井; Hirobumi Arimura; 有村　博文
Original assignee: Green Cross Corp Japan
Current assignee: Mitsubishi Tanabe Pharma Corp
Priority date: 1987-02-23
Filing date: 1987-02-23
Publication date: 1988-08-30

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野〕本発明はウロキナーゼ（以下、単にＬＩＫという）前駆
体を主成分とする薬剤の新規な医薬用途ないしは用法に
関する。

さらに詳しくは、十分量のＵＫ前駆体製剤を急速静脈内
投与することに関するＵＫ前駆体の使用に関する。

〔従来技術〕

ＵＫ前駆体はヒト腎細胞から分泌され、それ自身では線
溶活性を発現しないが、プラスミン等の作用を受けると
ＵＫに変換して著しい線溶活性を発現する。ＵＫ前駆体
はフィブリンに対する親和性が高く、血中のフィブリノ
ゲンに作用することなく血栓を構成するフィブリンに到
達し、血栓中の微量のプラスミンの作用により線溶活性
を有する（特開昭６０−６２９８１号公報参照）。

〔本発明が解決しようとする問題点〕

ＵＫ前駆体はＵＫの前駆物質であり、それ自体では活性
を有さない、即ち、活性型となるためには２本鎖に開裂
する必要があり、開裂するためには何がしかの時間が必
要である。特に、プラスミン等がほとんど含まれていな
いヒトの血液中にＵＫ前駆体を混じておいても数時間は
活性化が見られない。

さらに健常ヒト及び動物の血流中においてもＵＫ前駆体
の活性化は認められず、血中より排泄されて濃度が低下
するのみである。

従って、ＵＫ前駆体を主成分とする線維素溶解剤の臨床
上における効果は未だ＆ｉ　ＬＷされていないのが実情
である。

また、ＵＫ前駆体の活性体、即ちＵＫは大量投与すると
全身的な線溶の活性化を惹起することがあり、循環血液
中のフィブリノーゲンや種々の凝固因子の分解を引き起
こし、副作用である出血傾向を招くことが危惧される。

従って、本発明の目的は線維素溶解効果に著しく優れ、
かつ副作用のない線維素溶解剤を提供することである。

本発明者の他の目的はＵＫ前駆体の効果的な使用を提供
することである。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明者らは、ＵＫ前駆体の線維素溶解剤としての投与
方法について検討を重ねてきた。

その結果、Ｉｎ　ｖｉｔｒｏの血栓溶解実験（実験例１
参照）においてＵＫ前駆体の低量投与群（３７，５Ｉ　
Ｕ　／　ｍ　ｌ　）では２時間目以降にしか溶解が開始
しないが、ＵＫ前駆体の添加量が増すとＵＫと同程度の
溶解が同一時間程度で起こることが判明した。

このことはＵＫ前駆体の添加量が少ない場合−ＵＫ前駆
体はまず血栓部位のフィブリンに結合し、血栓に存在す
る微量のプラスミンによりＵＫ前駆体が活性化され、血
栓部位でプラスミノーゲンをプラスミンに変換し、この
プラスミンにより新たなＵＫ前駆体が活性化されるとい
う一連の活性化のメカニズムが起こるのに時間が費るこ
とを示唆しており、逆にＵＫ前駆体の添加量が多い場合
、一連の活性化のスピードが速くなることを示唆してい
る。

Ｉｎ　ｖｉｖｏの動物での血栓溶解実験（実験例２参照
）においても上記と同様であり、ＵＫ前駆体の低量投与
群（１万／ｋｇ）では活性発現に遅れが認められ、投与
量が多くなると両者の差はほとんど認められず、ＵＫ前
駆体の投与量が少ない場合活性化される迄の間に大部分
は排泄されてしまうことが判明した。

即ち、ＵＫ前駆体は不活性型であるので出血傾向などの
副作用は現れないが、血栓溶解をすみやかに発現させる
ためには、血中よりの排泄を上まわる量の大量のＵＫ前
駆体を投与する必要があることを知見した。

上記の血栓部位での活性化が一度起こるとその後の活性
化のサイクルは非常にスムーズに進むのでｉｎ　ｖｉｔ
ｒｏでは最終的にはＵＫと同程度の線維素の溶解が起こ
るが（図１の３時間目参照）　％　１ｎｖｉｖｏでは排
泄される分だけ線維素の溶解が低い（図２の低投与群参
照）、これらのギャップを解消するためには投与初期に
活性化をすみやかに引起こすような大量のＵＫ前駆体を
投与し、次後は排泄される分を補う程度の量のＵＫ前駆
体を投与すればよいことになる。

本願発明はかかる知見に基づいて完成されたものであり
、その要旨は次の通りである。

■　ｔＪＫ前駆体を有効成分とし、投与初期に（好まし
くは、投与開始後７〜１５分以内に）ウロキナーゼ前駆
体の活性化を速やかに引き起こすに十分量〔好ましくは
、１５万〜３０万ＩＵ（ウロキナーゼ変換時）／分〕の
ウロキナーゼ前駆体を静注するものである線維素溶解剤
。

■　ＵＫ前駆体を含み、投与初期に（好ましくは、投与
開始後７〜１５分以内に）活性化を速やかに引き起こす
に十分量〔好ましくは、１５万〜３０万ＩＵ（ウロキナ
ーゼ変換時）／分〕を静注するための医薬製造用として
のウロキナーゼ前駆体の使用。

■　線維素熔解を目的とし、投与初期に（好ましくは、
投与開始後７〜１５分以内に）活性化を速やかに引き起
こすに十分量〔好ましくは、１５万〜３０万ＩＵ（ウロ
キナーゼ変換時）／分〕を静注するウロキナーゼ前駆体
の使用。

■　ウロキナーゼ前駆体を含み、かつ締維素溶解を目的
として投与初期に（好ましくは、投与開始後７〜１５分
以内に）ウロキナーゼ前駆体の活性化を速やかに引き起
こすに十分量（好ましくは、１５万〜３０万ＩＵ（ウロ
キナーゼ変換時）／分〕を静注する指示を付したコマー
シャルパッケージ。

ＵＫ前駆体としては細胞培養または遺伝子工学等のいず
れの方法により得られたものを用いてもよい、たとえば
、細胞培養法としては特開昭６０−６２９８１号公報、
遺伝子工学法としては特開昭６０−１８０５９１号公報
等に開示のものが挙げられる。また、ＵＫ前駆体はフィ
ブリン親和性が高く、プラスミン等の作用を受けて活性
化される性質を保持するものであり、かかる特性を有す
るものであればＵＫ前駆体に、たとえば特定部位（たと
えば、エビダーマルグロースファクタードメイン）の全
領域またはその一部を欠失、または該全領域もしくはそ
の一部を他のアミノ酸残基で置換された所の修飾型ＵＫ
前駆体であってもよい（特願昭６１−１５６９３６号明
細書参照）。

ＵＫ前駆体は高度精製品であることが好ましい。

たとえば、比活性１０万ＩＵ／■蛋白（ＵＫ変換時）程
度が例示されている。なお、■ＵはＵＫの国際単位の略
である。

また、製剤化も公知の方法により行われる。たとえば、
特開昭６１−２３８７３２号公報に開示の方法等が例示
される。

ＩＪＫ前駆体の投与に際しては、投与初期にＵＫへの活
性化を速やかに引き起こすに十分量を投与し、後は血中
より排泄される分を補うに十分量を投与すればよい、具
体的な投与量、投与態様は患者の年齢・体重・症状によ
って異なるが少なくとも１５万〜３０万ＩＵ（ＵＫ変換
時）７分（就中、１０万〜２５万ＩＵ（ＵＫ変換時）７
分）で約７〜１５分間（就中、約８〜１２分間）静注し
、さらに好ましくは、その後２．５万〜１５万１０／分
（就中、５万〜１０万ＩＵ（ＵＫ変喚時）７分）で１０
〜２５分間（就中、約１０〜２０分間）投与する。

用法としては静脈内投与が好ましく、特に点滴投与が望
ましい。

本発明者の線維素溶解剤は、血栓症、特に血栓症に由来
する心筋梗塞の治療に適用することが好ましい。

本発明の線維素溶解剤は、通常コマーシャルパッケージ
に入れて上型されるが、その際通常上記投与量、投与時
間等をそのコマーシャルパッケージに直接付すか、また
は上記投与量、投与時間等を記した能書をコマーシャル
パッケージに添付して市場に供される。

〔本発明の効果〕

本発明の線維素溶解剤は、実験例として示した臨床試験
において、冠動脈内血栓の再開率が公知のＵＫ前駆体よ
りなる線維素溶解剤に比して約２倍以上の効果を示した
。

本発明により線溶活性の増強が可能である。

〔実施例・実験例〕

本発明をより詳細に説明するために実施例および実験例
を挙げるが、本発明はこれらにより限定されるものでは
ない。

実施例ＩＵＫ前駆体〔比活性１０万ＩＵ／■蛋白（ＵＫ変換時）
〕５０■、ヒト血清アルブミン５０ａＫ＋。

クエン酸４■、クエン酸三ナトリウム・２Ｈｚ。

体７５■、リン酸−ナトリウム・２Ｈ２Ｏ体４０■およ
びリン酸二ナトリウム・１２８１０体１５．５■を注射
用生理食塩液１５＋１に溶解して、静注用製剤を製遺し
た。

実験例１実施例１により得られたＵＫ前駆体製剤を第■相急性心
筋梗塞の患者に投与し、本発明者の効果を確認した。

検体は、表１に示すＢ様で、静脈内に投与した。

（以下余白）表１実験例２（Ｉｎ　ｖｉｔｒｏ人工血栓の環流血液中での血栓溶解
）Ｃｈａｎｄｌｅｒ’ｓ　１ｏｏｐ法（Ｊ、Ｃｌ１ｎ、
Ｐａｔｈｏｌ、、　　３４＋１４００　（１９８１））
テｌ＝　ト全血より作製シタ１）％　ｒ標識血栓をＵＫ
前駆体またはウロキナーゼ（３７，５〜１５０１　Ｕ／
ｍｌ）を含むヒト全血に入れ、３７℃にて４時間環流し
、経時的に環流液の一部をサンプリングして放射活性（
ＵＫ前駆体はＵＫ変換時の活性）を測定し、血栓溶解率
（％）を算出した。

結果は図１に示す通りであり、ＵＫ前駆体低濃度域では
、環流初期にｌａｇ−ｐｈａｓｅがみられ、直ぐには溶
解が始まり難いが、環流後期にはウロキナーゼを凌駕す
る溶解を示した。

また、高濃度ではｌａｇ−ｐｈａｓｅがなく、環流初期
から１５０１　Ｕ／ｍｌのＵＫと同等以上の高い血栓溶
解率を示した。

実験例２（家兎の肺塞栓症モデルに対する作用：　ｉｎ　ｖｉｖ
ｏ）ＵＫ前駆体とＵＫの血栓溶解速度を、家兎肺塞栓症
モデルにおいて比較した。

＋ＲＪ標識ヒト・フィブリン浮遊液を静脈内に投与して
肺塞栓症モデル（Ｊ、　Ｂ、　Ｃ，、２５８，４２４９
（１９８３））を作製した後、引き続いてＵＫ前駆体ま
たはＵＫを静脈内投与し、血清中の放射活性を測定して
”’Ｉ−ＦＤＰの血中への遊離量より血栓溶解率を算出
した。

ＵＫ前駆体ｌＸ１０’１Ｕ（ＵＫ変換時活性）／ｋｇ投
与の血栓溶解速度はＵＫのＩ　Ｘ　１−０　’１０／ｋ
ｇ投与に比較して、投与直後は遅かった。しかし時間の
経過とともに血栓は溶解し、投与１８分後には両者の血
栓溶解率に差を認めなかった。他方、ＵＫ前駆体Ｉ　Ｘ
　１０’ｌ　Ｕ／ｋｇ投与の際には、投与後初期からＵ
ＫのＩ　Ｘ　１０’ｌ　Ｕ／ｋｇ　　投与とほぼ同等の
血栓溶解速度および血栓溶解率が認められた（図２参照
）。

【図面の簡単な説明】

図１は、Ｃｈａｎｄｌｅｒ’ｓ　１ｏｏｐ法による人工
血栓溶解能、図２は、家兎肺塞栓モデルにおける血栓溶
解速度を示すグラフである０図中ＰＰＡとはＵＫ前駆体
、ＵＫとは人尿由来ウロキナーゼを意味し、ＩＵは、Ｕ
Ｋの国際単位を意味する。なおＰＰＡの活性はＵＫｆ：
換時の活性である。手ｄｌＥ争甫正３（自発）昭和６２年４月３０日昭和６２年特許願第３９６９９号２、発明の名称線維素溶解剤３、補正をする者事件との関係　特許出願人氏名（名称）　株式会社　ミドリ十字４、代理人■５４１住所　大阪市東区平野町４丁目５３番地３ニューライフ
平野町４０６号置　（０６）　２２７−１）５６明細書の「特許請求の範囲」の欄および「発明の詳細な
説明」の欄別紙（特許請求の範囲）＋ｌ）　　ウロキナーゼ前駆体を有効成分とし、投与初
期にウロキナーゼ前駆体の活性化を速やかに引き起こす
に十分量のウロキナーゼ前駆体を静注するものである線
維素熔解剤。（２）　　投与初期後は血中より排泄される分を補うに
十分量のウロキナーゼ前駆体を静注するものである特許
請求の範囲第１）１項記載の線維素溶解剤。（３）投与初期の投与条件が１５万〜３０万ＩＵ（ウロ
キナーゼ変換時）７分を７〜１５分で投与するものであ
る特許請求の範囲第＋１）又は（２）項記載の線維素溶
解剤。（４）投与初期後、さらに２．５万〜１５万１０（ウロ
キナーゼ変換時）７分を１０〜２５分間静注するもので
ある特許請求の範囲（１）〜（３）項のいずれかに記載
の線維素溶解剤。（５）　　適応症が血栓症に由来する心筋梗塞である特
許請求の範囲第（１）〜（４）項のいずれかに記載の線
維素溶解剤。（６）線維素溶解を目的とし、投与初期に活性化を速や
かに引き起こすに十分量を静注するための医薬製造用と
してのウロキナーゼ前駆体の使用。（７）　　線維素溶解を目的とし、投与初期には活性化
を速やかに引き起こすに十分量を静注するウロキナーゼ
前駆体の使用。（８）　　ウロキナーゼ前駆体を含み、かつ線維素溶解
を目的として投与初期にはウロキナーゼ前駆体の活性化
を速やかに引き起こすに十分量を静注する指示を付した
コマーシャルパッケージ。手続士甫正書印発）昭和６２年９月２９日。昭和６２年特許願第３９６９９号２、発明の名称線維素溶解剤３、補正をする者事件との関係　特許出願人氏名（名称）　株式会社　ミドリ十字４、代理人■５４１住所　大阪市東区平野町４丁目５６番地（湯水ビル）置　　（０６）　２２７−１）５６（２）明細書第１０真下から第４行の「５０■」を「５
■」に訂正する。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）ウロキナーゼ前駆体を有効成分とし、投与初期に
ウロキナーゼ前駆体の活性化を速やかに引き起こすに十
分量のウロキナーゼ前駆体を静注するものである線維素
溶解剤。
（２）投与初期後は血中より排泄される分を補うに十分
量のウロキナーゼ前駆体を静注するものである特許請求
の範囲第（１）項記載の線維素溶解剤。
（３）投与初期の投与条件が１５万〜３０万ＩＵ（ウロ
キナーゼ変換時）／分を７〜１５分で投与するものであ
る特許請求の範囲第（１）又は（２）項記載の線維素溶
解剤。
（４）投与初期後、さらに２．５万〜１５万ＩＵ（ウロ
キナーゼ変換時）／分を１０〜２５分間静注するもので
ある特許請求の範囲（１）〜（３）項のいずれかに記載
の線維素溶解剤。
（５）適応症が血栓症である特許請求の範囲（１）〜（
４）項のいずれかに記載の線維素溶解剤。（５）適応症が血栓症に由来する心筋梗塞である特許請
求の範囲第（１）〜（４）項のいずれかに記載の線維素
溶解剤。
（６）線維素溶解を目的とし、投与初期に活性化を速や
かに引き起こすに十分量を静注するための医薬製造用と
してのウロキナーゼ前駆体の使用。
（７）線維素溶解を目的とし、投与初期には活性化を速
やかに引き起こすに十分量を静注するウロキナーゼ前駆
体の使用。
（８）ウロキナーゼ前駆体を含み、かつ線維素溶解を目
的として投与初期にはウロキナーゼ前駆体の活性化を速
やかに引き起こすに十分量を静注する指示を付したコマ
ーシャルパッケージ。