JPS63179831A - インシュリン製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明はマグネシウムイオンを含有するインシュリン製
剤に関する。この製剤は改良された治療特性を示す。

〔従来技術及び発明が解決しようとする問題点〕糖尿病
の治療に用いられているインシュリン製剤には、インシ
ュリン溶液及びインシュリン懸濁液の両方が含まれる。

持続性の全てのインシュリン懸濁液は、約７付近に…値
を有する。インシュリン溶液は３付近（速効性並びに持
続性の溶液）又は７付近（速効性溶液のみ）の何れかの
ｐＨ値を有する。

インシュリン溶液に対する二種の一間隔の違いの理由は
、亜鉛イオンが存在しない場合（タンフォード及びエゾ
スティ：／　：　Ｊ、Ａｍ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、７６（
１９５４）、２１６３−６９．Ｆｌｇ、１）及び亜鉛イ
オンが存在する場合（フレデリック及びニュー　ラｙ、
Ｘ、　：　Ｊ、Ａｍ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｅ、７２（１９５
０）　ａ２６８４−９１．Ｆｉｇ、４）の双方において
インシュリンの等電ｐＨ（約５．３）付近でインシュリ
ンが水が対し溶解性が低いからである。

酸性のインシュリン溶液は、インシュリン時代の初期に
おける如くそのようには広く今日では用いられていない
、というのは脱アミド化によりインシュリンが分解する
からである。

以下仝白 〔問題点を解決する為の手段、作用及び発明の効果〕本
発明は次の驚くべき知見に基づく： １）治療に適した濃度のインシュリン含有溶液が、約４
〜６．２の声範囲で、即ちインシュリンの等電点付近で
１１当シ約０．０５〜０．５モルのマグネシウムイオン
濃度で製造できる。

２）化学的には不安定である為インシュリンに対し不適
当、でおる約３〜４０−範囲において、インシュリン誘
導体の有用な溶液が、マグネシウムイオンの存在下、約
０．０５〜０．５Ｍの濃度で製造できる。但しＡｓｎＡ
２１は、アミド基を含有しないアミノ酸残基によジ置換
されている。

３）又約６．２〜８．５の一範囲において、所望によジ
インシュリン沈殿物を含有する有用なインシュリン溶液
が約０．００５〜０．５Ｍの濃度のマグネシウムイオン
の存在下で製造できる。

本発明の製剤は今日までの通常のインシュリン製剤より
も優れた特性を有する。

１）に関し驚くべきことに以下の内容が見い出された。

即ち多くのマグネシウム塩、例えば塩化マグネシウムは
それ自体及び対応するナトリウム、カリウム及びアンモ
ニウム塩と比較して（例１参照）の双方で、声約４〜６
．２でインシュリンに対し可溶化作用を有する。マグネ
シウム塩の種々の混合物は同様の効果を有する。従って
、一定濃度のマグネシウムイオンの存在は約４〜６．２
の声値でインシュリンの溶解に対し重要な／４ラメータ
ーである。

語句「マグネシウムイオン」は、本発明において遊離の
及び詰合したマグネシウムイオンの双方を含むものとす
る。

更に驚くべきことに以下の内容が見い出された。

即ちプロタミンが、約４〜６．２の−を有する本発明の
インシュリン溶液において、プロタミン−インシュリン
錯体の沈殿物が形成されることなく、含まれ得る。約７
の−に調節すると、錯体は沈殿する。

カルシウムイオンは又約４〜６．２の−でインシュリン
の溶解性を増大する。しかし、擬装した生理的条件のも
とて試験管内実験における結果は以下の内容を示してい
る。即ち組織にカルシウムイオンを含有する溶液を注入
すると、０．０５Ｍよシもはるかに低い濃度のカルシウ
ム濃度においてさえ炭酸カルシウム及び燐酸カルシウム
の沈殿をもたらすであろう。他の実験は又以下の内容を
示している。即ち対応するマグネシウム化合物の沈殿は
、本発明に係る溶液の注入によっては生じないであろう
。１組織内にカルシウム化合物が沈殿することは有害（
人工的な石灰沈着の危険性の為）であるので、本発明の
インシュリン製剤における遊離イオンの含量は、細胞外
の液体中のカルシウムレベルに相当するよシも実質的に
より高くありてはならない。好ましくは、本発明の製剤
は約１０−未満のカルシウム、更に好ましくは約２ｍＭ
７１ｉ、満のカルシウムイオンを含有する。

本発明者の知る限シにおいて、マグネシウムイオンを含
有するインシュリン溶液に関する先行技術は、ｐＨ４〜
６．２０−範囲、又は０．００５〜０．５モル／ｌのマ
グネシウムイオン濃度を意図していない。

デンマーク特許６３，０００は、インシュリン、持続剤
（即ちプロタミン）及びｐＨ６，５〜７のマグネシウム
イオンによって形成される錯体の沈殿物を含有する製剤
を開示しておシ、開示されたマグネシウム濃度は０．０
０４Ｍ未満である。

米国特許４，１９６，１９６は疾患状態における血管の
潅流及び再潅流を増強させる為の組成物に関し、この組
成物はグルコース、インシュリン及びエチレンジアミン
四酢酸マグネシウムニカリウムから成る。実施例によれ
ば、公知の製剤はＩＷＬｌ当ｊり０．０２インシュリン
単位を有する。

米国特許４，４７２，３８５は、Ｐ）１７〜８で亜鉛イ
ンシュリン溶液の安定化を開示しておシ、改良された安
定性は約０．０００４〜０．０１Ｍのカルシウム又はマ
グネシウムイオンの添加によって得られる。公知の例に
おけるマグネシウム濃度の上限は０．００２Ｍである。

上記三種の特許の主題は本発明の範囲外である。

本発明によれば上記濃度範囲のマグネシウムイオンが、
インシュリン又はインシュリン誘導体の溶液に添加され
、所望により、更に持続作用を有する沈殿したインシュ
リン又は沈殿したインシュリン誘導体を含有する。皮下
投与の目的に対し、よシ急速な開始作用又は、もしも溶
液がプロタミンを含有する場合持続作用を有する溶液を
得る為、マグネシウムイオンが添加される。もしも本発
明の組成物が又沈殿インシュリン又は沈殿インシュリン
誘導体、を含有する場合、二相製剤を得ることができる
。公知の二相インシュリン製剤に比較し、本発明による
二相製剤は、急速な血糖低下作用を有する。沈殿インシ
ュリンの実施例は亜鉛インシュリン結晶及びグロタミン
亜鉛インシエリン結晶である。

かくして本発明は、所望によりインシエリン沈殿物を含
有しつつ、非経口投与に対し一約３〜８．５の範囲を有
し且つ約０．００５〜０．５　Ｍの濃度範囲のマグネシ
ウムイオンを含有するインシュリン溶液に関する。

溶解したインシュリン拠度は、１１１Ｌｌ当シ約２０〜
５００インシュリン単位の範囲内におる。

公知技術の安定剤及び保存剤もインシュリン製剤に存在
し得る。

プロタミンはインシュリンの重量基準で好ましくは８％
から４０％（重量／重量）で存在でき、１０〜３０％（
重量／重量）が好ましい範囲である。

本発明のインシュリン溶液中に遅延物質が存在しない場
合、インシュリンの吸収は基準インシュリンのそれよシ
も速いことが判明した（以下の実施例２〜９及び１１参
照）。この特性は、速効性のインシュリンに対し、特に
食事前にインシュリンを投与するような多数回投与に関
しては有用である。作用開始がよシ速やかなので、イン
シュリンは通常の速効性インシュリン溶液よシも、食事
により接近して通常投与できる。更に、インシュリンの
よシ速い消失はおそらく食事後の低血糖症の危険を減少
するであろう。

ｐＨ３〜６．２を有する本発明のインシュリン溶液は又
、ポンプによる注入の目的に対し特に有用である。何故
ならばカテーテル内での二酸化炭素拡散によってもたら
されるインシュリンの沈殿が生じないからである。この
ような沈殿は時折中性の注入溶液に観察されてきておシ
、更に二酸化炭素によってもたらされる声の低下に寄与
すると考えられている。

インシュリン基準で約５チ超、好ましくは約８チ超、更
に好ましくは約１０％超（重量／重量）を含有する１本
発明のインシュリン溶液は、基準インシュリンに比較し
て豚に皮下投与した後インシュリンの遅延吸収を示す（
以下の例４及び５参照）。

好ましくは、プロタミンの含量は約５０％未満、好まし
くは約４０チ未満、更に好ましくは約３０チ未満（重ｆ
／重！！：）である。本発明のプロタミンインシュリン
製剤は、持続作用を有する中性のインシュリングロタミ
ン懸濁液よシも利点を有している。何故なら沈殿の不都
合が生じないからである。公知の中性プロタミンインシ
ュリン製剤は懸濁液でｓｂ、−力木発明の好ましいプロ
タミンインシュリン製剤は約６．２未満の−で浴液であ
る。

本発明の溶液は、特に多数回注入のインシュリン治療に
対して用いられる液体貯蔵容器のような装置において特
に良好に適用できるものと考えられる。

本発明の製剤は、天然のインシュリン及び／又はその誘
導体を含有する。本発明の実施に対し好ましいインシュ
リンは、ヒト、豚及び牛のインシュリンでｓｂ、最も好
ましくはヒトのインシュリンである。又本発明の実施に
おいて他の天然のインシュリンも使用できる。好ましく
は高純度のインシュリンが使用される。本発明に関し、
複数の又は一般的意味において用いられている場合語句
「インシュリン」は、天然のインシュリン及びその誘導
体の両方を含むものとする。

天然のインシュリン及びその誘導体においてはいくらか
の特性の違いが存在し得る。

本発明において語句、インシュリン（又はインシュリン
誘導体）の誘導体は、血糖低下作用及びヒトインシュリ
ンのアミノ酸組成と同一であるアミノ酸組成を有するペ
ゾチドに適用されるが、但しアミノ酸残基の少数は、他
のアばノ酸残基にょシ交換されておシ、更に所望により
、Ｂ鎖のＣ末端カルボキシ基が保護されていることを条
件とする。このようなインシュリン誘導体の実施例は、
それ自身二種のヨーロッパ特許出願に開示されておシ、
その公告番号は８６３０１７５５及び８６３０６７２１
で、１その内容は参考の為本発明に導入される。

ヒト、豚及び牛インシュリンが本発明に係る溶液用とし
て用いられる場合、インシュリンの亜鉛含量は、約４超
の−でインシュリンの沈殿を避ける為、インシュリンの
亜鉛濃度は低くあるべきで、１、好ましくは０．１未満
の亜鉛イオン／ヘキサマー（インシュリン基準で０．０
２％（重量／重量）未満に対応する）であシ更にこれは
又プロタミン含有溶液に対しても適用てれる。亜鉛イン
シュリン結晶は、例えば塩析出手順次いで−５で沈殿（
Ｓｅｈｌｉｅｈｔｋｒｕｌｌ：Ａｅｔａ　Ｃｈｅｍ、５
ｃａｎｄ、　１０（１９５６）、１４５５−５８）によ
り、亜鉛を排除できる。しかし、もしも亜鉛と錯体を形
成し得る試剤、例えばシトレートが存在する場合、亜鉛
の含量はよシ高くなるであろう。

インシュリン誘導体を用いる場合、亜鉛含量は同程度に
は重要でない。インシュリン誘導体のおる場合において
、高レベルの亜鉛イオン（例えば１０までの亜鉛イオン
／ヘキサマー）は本発明に係る溶液条件のもとてインシ
ュリンの溶解性と両立し、更に望ましい（ヨーロッノ母
特詐出願８６３０１７５５参照）。

プロタミンは異種の混合物であることが知られている。

プロタミンはオンコルヒンカス　ケタ（Ｏｎｅｏｒｈｙ
ｎｅｈｕｓ　ｋ＠ｔａ）の如き魚から得ることができる
。しかし、他の魚からのプロタミンも使用できる０通常
、プロタミンはプロタミン硫酸塩として市販されている
。しかし、他の塩も又使用できる。好ましくは高純度の
プロタミンが用いられる。

本発明の他の好ましい製剤の実施例として、亜鉛及びプ
ロタミンの双方を含有する製剤が言及できる。ｐｉ−１
３〜４の範囲にあるインシュリン誘導体の溶液、又は哺
乳動物のインシュリンの中性懸濁液の如き製剤において
、亜鉛含量はヘキサマーインシュリン又はインシュリン
誘導体当シ約２５までの亜鉛イオンである。

本発明の浴液中のインシュリン含量は、注入用製剤にお
いて、ＩＩＩＬｌ当９２０〜５００ＩＵ、好ましくは４
０〜１００ＩＵの範囲内におる。しかし、非経口投与の
他の目的に対し、インシュリン含量はよシ高い。インシ
ュリン溶液は、亜鉛インシュリン結晶又は亜鉛プロタミ
ンインシュリン結晶の如き固体のインシュリン物質と混
合できる。

本発明によれば、多様の可溶性マグネシウム塩が別々に
又は混合して使用できる。適用できるアニオンの例は、
クロリド、スルフェート、アセテート、プロピオネート
及びブチレートの如きモノカル？キシレート、並びにマ
クシネート、フェノぐラテート及びグルタメートの如き
シカ／Ｉ／〆キシレートである。マグネシウムイオンの
最適浸度は、適用される塩に依存し、更に所望の調製時
間、インシュリン溶解性及び等張命件に組成物を近ずけ
ることに対する要求事項に関して選択されるべきである
。塩化マグネシウム及び硫酸マグネシウムの濃度がそれ
ぞれ約０．１　Ｍ及び０．２６Ｍである仁とによって説
明される如く、マグネシウム塩の等張濃度は大きい変化
を示す。他の塩、アミノ酸及び非イオン性試剤（保存剤
の他に）は、もしもそれ等が非毒性でｓｂ且つ全体とし
てインシュリン製剤と結合する場合に存在し得る。

本発明によれば、適用可能なマグネシウムイオン濃度の
範囲は、約０．００５〜０．５Ｍ、好ましくは０．０５
Ｍ超でおる。上限は、ある場合（例えば腹腔内注入に対
し）等張の幾分の超過が許容できるとの仮定から選択さ
れる幾分任意のものでおる。

本発明の好ましい態様によれば、製剤は約０．０８モル
〜０．３モルのマグネシウムイオンを含有−ｔ−ル。

本発明のインシュリン製剤中に含まれる保存剤は、通常
のこれまでのインシュリン製剤における如き本のであシ
、例えばフェノール、ｍ−クレゾール及びメチルノ膏う
ペンである。

本発明に係る水性インシュリン溶液の調製に対し、僅か
に酸性のイン７．　ＩＪン溶液は、最終調製品の全ての
他の成分を含有する溶液と混合できる。

次すで所望ならば澄明な溶液が得られるまで攪拌しなが
ら−を調節し、更に滅菌濾過する。所望により、滅菌し
た持続性インシュリン懸濁液を滅菌インシュリン溶液に
添加し、二相の作用を有する製剤を得る。時折の加熱及
び振とうにより生ずる変質から製剤を保護する為、公知
の安定剤、例えばリン脂質を含ませることができる。

インシュリン誘導体を含有する製剤も同様に調製される
。

本発明のインシュリン製剤は糖尿病の治療において用い
ることができる。本発明のインシュリン製剤の投与量は
、注入用の公知のインシュリン製剤の投与の選択と同様
に医者によって選択される。

次に、マグネシウムイオンが以下にインシュリンの溶解
性を増加し、本発明の好ましいインシュリン製剤が以下
に調製され更に豚に注入をどのように作用するか実施例
をもって説明する。

以下余白 〔実施例〕 例１ １ゴ当、ｊ２００ＩＵの亜鉛を含有しないヒトモノ成分
インシュリン、微量のヒトモノ−１２５Ｉ、、。

（Ａ１９）−インシュリン、２１１のフェノ−Ｖ！及び
ほぼ等張濃度の塩（下記の第１表に掃けたもの）を含有
する酸浴液を、第１表に示す声価に鉤節した。上澄み液
中の放射活性濃度を測定し次いで結果をＩＵ／ｍＪ（Ｉ
ＩＵは３８μｇのインシュリンに対応する）に変換する
ことによって演１」定した。

室温でインシュリンの溶解性（ＩＵ／ｄ）に対する塩の
効果は第１表から明らかである。

第１表 ０．１Ｍ　　　０．１５Ｍ　　　０１１５Ｍ　　　０．
１５Ｍ４．０　　１３５　　　７９　　　９８　　１０
９４．５　　　８５　　　２０　　　２６　　　２９５
．０　　１０４　　　１６　　　１７　　　２２５．５
　　１２４　　　１８　　　２１　　　２５６．０　　
　７０　　　２５　　　３２　　　２９６．５　　　２
１　　　４１　　　５６　　　２７第１表は以下の内容
を示す。即ち塩化マグネシウムのほぼ等張溶液中のイン
シュリンの溶解性は、全てｐＨ４〜６で塩化ナトリウム
、塩化カリウム及び塩化アンモニウムの対応する溶液中
の溶解性よりも驚くべきほどはるかにより高く、更に注
入用のインシュリン製剤において通常用いられている濃
度、１００ＩＵ／ｄに達する。

室温で、ｐ１４５．５で且つ塩の異なった濃度でのイン
シュリンの溶解性（ＩＵ／ｄ）を測定し結果を下記の第
■表に示す。

第■表 塩 濃度　　ＭｇＣｔ２ＮＡＣｔ　　　ＫＣｔ　　ＮＨ４Ｃ
ｔ　Ｍ Ｏ，０２５１２４４５ ０，０５０３３５６５ ０，０７５７２７９８ ０，１０１０１１１１２１１ ０，１５２００超　　２１　　　２１　　　２５０．２
０　　　　２００超　　３７　　　３４　　　３９０．
２５　　　　２ｏｏｊ；　　　４１　　　５４　　　６
６０．３０　　　　２００だ　　７６　　　７４　　１
０８０．３５　　　２００超　６９　　８４　１２３第
Ｈ表は、塩化ナトリウム、塩化カリウム及び塩化アンモ
ニウム溶液に比較して広範囲の塩濃度に亘って塩化マグ
ネシウム溶液の優れた溶解性を実証している。

例２ 以下の組成を有する溶液（１と称する）を調製した：０
．１５モルの酪酸マグネシウム、０．００６モルのクエ
ン酸、２９／ｌのフェノ−〃及ヒ１００ＩＵ／ｄの亜鉛
を含有しないヒトモノ成分インシュリン；ｐＨ：５．８
゜ 次の組成を有する、標準の速効性インシュリン製剤とし
て製造されたアクトラビッド（Ａｃｔｒａｐｉｄ）（商
標）ＨＭの溶液（旦と称する）を基準として用いた：１
６ｇのグリセロール／ｌ、２９のフェノール／ｌ及び１
００ＩＵ／ｄのヒトモノ成例ンシュリン（２亜鉛イオン
／ヘキサマー）；７．４゜媒質は中性のインシュリン注
入に対する米国薬局法ＸＩＸの要求に合致している。

ヒトモノ−Ｉ−（Ａ１９　）−インシュリンを、微量濃
度（０，３〜１μＣＶｍｔ）で両方の溶液に添加した。

次いで各々の溶液０．１　ｍＪを別々に、二種の豚に皮
下注入した。吸収は、ヒトにおける吸収研究に対し開発
された方法（ビンダー（１９６９）：ｒＡｂｓｏｒｐｔ
ｉｏｎ　ｏｆ　１ｎｊｅｃｔｅｄ　１ｎｓｕｌｉｎＪテ
シス）と同様にして、分光計に接続したシンチレーショ
ン計数管を用いて注入部位に残存する放射活性を外部監
視することにより追跡した。血液サングルを、プラズマ
グルコース及びプラズマインシュリンの測定に対し採取
した。結果を下記の第■表に示す。

第■表は残留放射活性、プラズマグルコース及びプラズ
マＩＲＩ　（免疫−反応インシュリン、放射イムノアッ
セイによって測定）の時間経過を示す。

注入部位の放射活性の量は、注入後直ちに測定した（至
）間＝Ｏ）量の％で示される。プラズマグルコース濃度
は、注入前直ちに（時間＝０）採取した血液サンプルに
対する値のチで与えられる。

溶液且ニ一方の豚（重量７７に９）に投与した基準溶液 溶液１：他の豚（重量７９ｋｇ）に投与した試験溶液 第■表から明らかなように、試験インシュリンは、基準
インシュリンよシもよシ速やかに吸収される。これは、
溶液Ｏ及び１に対するプラズマグルコースチの時間経過
における関係並びに溶液０及び１に対するプラズマＩＲ
Ｉの時間経過に対する関係と完全に一致している。

例３ 以下の組成を有する溶液（主と称する）をｉＩＩ製した
：０．１７５モルの酢酸マグネシウム、０．０３７５モ
ルの酢酸、２１１／ＩＩのフェノール、１００ＩＩυの
亜鉛不含ヒトモノ成分インシュリン；　ｐＨ５，５゜ト
レサーインシュリンを例２における如く添加した。Ｑ、
１ｍｌの溶液ｌを、豚の首の片側に皮下注入し、一方０
．１　ｍ７の基準インシュリン溶液０（例２で記載した
如く調製）を、同じ豚の首の別の側に皮下注入した。吸
収を例２における如く追跡した。−週間後、注入部位を
交互に変えて実験を繰り返した。結果を第■表に示す。

以下余白 第■表 残留放射活性（％）の時間経過。同じ豚における二回の
実験から得られた平均値。

注入後の時間　　　　　放射活性（チ）（分）　　　　
　　　０２ ６０　　　　　　　　ｇ６　　　６３ この表から明らかなように、試験インシュリンは基準イ
ンシュリンよシもよシ速やかに吸収される。

例４ 次の組成を有する二種の溶液（３Ａ及び３Ｂと称する）
を！ｉｔ’ｌｌた：　３　Ａ　：　０．１４　’Ｅ：ｋ
（Ｄ　ＭｇＳＯ４，０、０５モＡ／　）ＭｇＣｌ２．２
１１／１（Ｄ７．／−＃、Ｚｏ。

ＩＵ／ｍｌの亜鉛不含ヒトモノ成分インシュリン：塩酸
で声５．５に調節。１１：１人と同じであるが、１１ｎ
９のプロタミンスルフェート／ｄを添加。

トレイサーインシ具リンを例２における如く添加した。

０．１　ｍの溶液３Ａを、豚Ｉ及び豚Ｈの首の片側に皮
下注入した。０．１ｄの溶液止１を、豚■及び豚■にお
いて対応して注入した。０．１１１Ｌｌの基準インシュ
リン溶液、０（例２に記載した如く調製）を、４匹の豚
の各々の首の他の側に皮下注入した。例２における如く
吸収を追跡した。結果を第７表に示す。

第　　　ｖ　　　表 残留放射活性の時間経過。

３Ａ：プロタミンなし。　３Ｂ＝プロタミンあシ。

この表から以下の内容が明らかである。即ち試験インシ
ュリンは、プロタミンが存在しない基準インシュリンよ
シもよシ速やかに吸収されるが、しかしプロタミンの存
在する基準インシュリンよシも前の方がよシゆっくシ吸
収される。

例５ 次の組成を有する三種の溶液（す、す及び（Ｓと称する
）を調製した：■：０．１８モルのコハク酸マグネシウ
ム、０．０１モルのＭｇＣｌ２．０．００２モルのＭｎ
ＳＯ４，０，０２モルのコハク酸、２１１／ｌのフェノ
ール、１００　Ｉ　Ｕ／ｍｌの亜鉛不含ヒトモノ成分イ
ンシュリン；ｐｉ−１５，６゜４Ｂ：４Ａと同じである
が、０．５Ｆ１９のプロタミンスルフェート／ｒｎｌを
添加。４Ｃ：　４Ａと同じであるが、０．７３〜のプロ
タミンスルフェート／ｄを添加。

トレイサーインシュリンを例２における如く添加した。

０．１コの溶液４Ａ、４Ｂ及び４Ｃを、豚Ａ、Ｂ及びＣ
の首の片側にそれぞれ皮下注入した。

０．１Ｍの基準インシュリン溶液、旦（例２で記載した
如く調製）を、３匹の豚の首の片側に各々皮下注入した
。吸収を例２における如く追跡した。

１週間後、注入部位を変えて実験を繰シ返した。

試験結果を第■表に示す。

第　　　■　　　表 例５の結果。残留放射活性の時間経過。

二種の実験の平均値。工人：ゾロタミンなし。

４Ｂ：プロタミンあｐ、低含量。土旦：ｆロタミンあシ
、高含量。

この表から以下の内容が明らかである。即ち基準インシ
ュリンに比較して、試験インシーリンは、プロタミンの
存在しない場合よシ速やかに吸収され、プロタミンの低
濃度ではよシゆっくシ吸収され更にプロタミンの高含量
でも更にゆっくシ吸収てれる。

例６〜８．１０及び１１において、試験製剤の吸収特性
を、例２〜５における如くヒトアクトラビッド基準溶液
に比較して調べた。例９において、基準溶液を用いた、
以下を参照。簡略にする為、比較の結果は平均割付とし
て示す： ””１５０％（試験）／Ｔ５ｏ％（基準）ここで１５０
％（試験）及び１５０％（基準）は、注入部位で測定し
た放射活性がそれぞれ試験及び基準の最初の値の半分に
減少するまでの注入時間から経過した時間である。含ま
れた豚の数はＮで示される。

例６ 試験溶液：０．１４モルのＭｇＳＯ４，０，０５モルの
ＭｇＣｌ２　、０．０１　％　ル（７）酢酸マグネシウ
ム、０．００２％／Ｌ／のＣａ　Ｃ１０，２Ｉのｍ−ク
レゾール／１３．ヒトトレーサーインシュリンに加えて
１００ＩＵ／ｄの亜鉛不合ヒトモノ成分インシュリン；
塩酸で−を５．７に調節。

試験溶液及び基準溶液の各々０゜０４ゴを各々の豚に注
入した。

Ｒ値は０．７３（Ｎ＝６）でおった。

例７ 試験溶液：０．０２モルのＭｇＣｌ２．０．１１モルの
アルギニン−塩酸塩、２ｇのフェノール／ｌ、）レーサ
ーインシュリンに加えて１００　Ｉ　Ｕ／１１Ｌｌ亜鉛
不含のヒトモノ成分インシエリン；水酸化ナトリウムで
−を７．７に調節。

試験溶液及び基準溶液の谷々ｏ、ｏｓＩＩＬｌを６豚に
注入した。

Ｒ値は０．７４（Ｎ＝２）であった。

例８ 試験溶液：０．０９５モルのＭｇＣｌ２．２　Ｆのフェ
ノール／１１　トレイサー誘導体に加えて１００ＩＵ当
量／ゴの亜鉛不含豚モノデスアミドインシ為リン：塩酸
で−を３．２に調節。

試験溶液及び基準溶液各々Ｑ、Ｑ８ｍを６豚に注入した
。

Ｒ値は０．７１　（Ｎ’＝２　）であった。

例９ 試験溶液：０．０９５モルのＭｇＣｌ２．２Ｉのフェノ
ール／ｌ、トレイサー誘導体に加えて、　Ｓ＠ｒ（Ｂ９
）をＡ＠ｐ及びＴｈｒ　（Ｂ　２７　）で置換した１０
０ＩＵ当−ｊｋ／ＩＬＩ亜鉛不含ヒ亜鉛不含ヒトインシ
ェリー誘導体４に調節。

アクトラピッドとして製剤化された誘導体は、ヒトアク
トラピッド（ヨーロッノ４特許出願８３３０６７２１参
照）よシもよシ速やかに吸収されていることが予め知ら
れていたので、この実施例における基準溶液は、アクト
ラピッドとして製剤化された誘導体であシ且つ、１００
ＩＵ当量ａの誘導体であった。

試験及び基準溶液の各々０．０８ｍを、６豚に注入した
。

Ｒ値は０．８５　（Ｎ＝５　）であった。

又この更に速やかな吸収可能性を有するインシュリン誘
導体に関し、吸収に関する増強作用がマグネシウムイオ
ンによってなされる。

例１０ 試験溶液１：０．０９５モルのＭｇＣｌ２．０．００２
モルの酢酸亜鉛、１■のグロタミンスルフェート／ゴ、
３１のｍ−クレゾール／ｄ、トレーサー誘導体に加えて
１００ＩＵ当量／ｒＩＬｌの亜鉛不含豚モノデスアミド
インシュリン；塩酸で−を３６２に調節。

試験溶液２：１と同じ、但し０．０９５−ＥニルのＭｇ
　Ｃ１２の代シに０．１４モルのＮａＣ２を用いた。

試験溶液（１又は２の何れか）のＱ、Ｑ５ｄ及び基準溶
液（ヒトアクトラピッド（商標）プラスヒトトレサーイ
ンシュリン）の０．０５１ｎｌを各々の豚に注入した。

Ｒ値は試験溶液１及び２のそれぞれに対し）３．７（Ｎ
＝２）及び２．９（Ｎ＝２）であった。

結果は、ゾロタミン含有モノデスアミドインシュリン溶
液に対し、亜鉛イオンの持続作用に加えて、マグネシウ
ムイオンの持続作用を証明する。

例１１ 薬力学的研究を、健康な志願者について行った。

試験溶液：０．１４モルのＭｇＳＯ４，０，０５モルの
ＭｇＣｚ２　、０．０１モルの酢酸マグネシウム、２Ｉ
のｍ−クレゾール／ｌ、１００ＩＵ／ｄの亜鉛不含ヒト
モノ成分インシュリン；塩酸で−を５．７に調節。

基準溶液（アクトラピッド（商標）ＨＭ）：１６Ｉのグ
リセロール／１．３１のｍ−フレジーｂ４．１００ＩＵ
／ｄのヒトモノ成分インシュリン（３亜鉛イオン／ヘキ
サマー）；ｐＨニア、４゜ヒト　　Ｉ−インシュリンを
、試験溶液及び基準溶液の各々に５及び３μＣ１７ｍの
微量濃度で添加した。４ＩＵの試験溶液を、各ヒトの一
方の腿に皮下注入し更に他方の腿に４ＩＵの基準溶液を
注入した。左と右の腿の間における二種の製剤の配分は
ランダムであった。各膝上の注入部位に残存する放射活
性の連続外部観察により吸収を追跡した。

Ｒ値は０．７８（Ｎ＝１５）でおった。かくして、遅延
物質がない場合で、インシュリンの吸収に対する増強作
用も又、ヒトにおけるマグネシウムイオンによって達成
される。

以上の説明及び特許請求の範囲において開示した特徴は
、別々に更にその組み合わせにおいて、その多様の形態
で本発明を実施する為重要である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、１ｍｌ当たり少なくとも２０インシュリン単位を含
   有する非経に投与用のインシュリン製剤であって、該製
   剤がインシュリン又はその誘導体並びにマグネシウム含
   量で約０．００５モル〜０．５モルの濃度のマグネシウ
   ムイオンから構成され、該製剤がｐＨ約３〜８．５、好
   ましくは８未満を有し、所望により持続性のインシュリ
   ン沈殿物又はインシュリン誘導体沈殿物を含有すること
   を特徴とする、インシュリン製剤。 ２、前記製剤が溶液である、特許請求の範囲第１項記載
   の製剤。 ３、ｐＨ約４〜約６．２、及び好ましくはマグネシウム
   濃度約０．０５Ｍ超を有する、特許請求の範囲第１項又
   は第２項に記載の製剤。 ４、マグネシウム濃度が、約０．０１モル超、好ましく
   は約０．０５モル超、更に好ましくは約０．０８モル〜
   ０．３モルである、特許請求の範囲第１項〜第３項の何
   れかに記載の製剤。 ５、１ｍｌ当り約５００未満のインシュリン単位、好ま
   しくは１ｍｌ当り約３０〜２００インシュリン単位、最
   も好ましくは１ｍｌ当り約４０〜１００インシュリン単
   位の活性を有する、特許請求の範囲第１項記載の製剤。 ６、ｐＨが約５〜６である、特許請求の範囲第１項〜第
   ５項の何れかに記載の製剤。 ７、亜鉛及び／又はプロタミンを含有する、特許請求の
   範囲第１項〜第６項の何れかに記載の製剤。 ８、ヘキサマーインシュリン又はインシュリン誘導体当
   り約１未満の亜鉛イオン、好ましくはヘキサマーインシ
   ュリン又はインシュリン誘導体当り約０．５未満の亜鉛
   イオン、更に好ましくはヘキサマーインシュリン又はイ
   ンシュリン誘導体当り約０．１未満の亜鉛イオンを有す
   る、特許請求の範囲第１項〜第７項の何れかに記載の製
   剤。 ９、速やかに作用するものである、特許請求の範囲第１
   項〜第８項の何れか１項に記載の製剤。 １０、インシュリン又はインシュリン誘導体含量基準で
   約５％（重量／重量）、好ましくは約１０％超、更に好
   ましくは約５０％未満のプロタミン、更に好ましくは４
   ０％未満のプロタミンを含有するが、但しｐＨは６．２
   未満である、特許請求の範囲第１項〜第９項の何れかに
   記載の製剤。 １１、マグネシウム塩、インシュリン又はインシュリン
   誘導体及び適当量の水を混合し更に、所望によりｐＨ値
   を調節することを含んで成る、特許請求の範囲第１項〜
   第１０項の何れかに記載のインシュリン製剤を調製する
   方法。