JPS63133921A - オタネニンジン幼苗の大量生産方法 - Google Patents
オタネニンジン幼苗の大量生産方法Info
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- JPS63133921A JPS63133921A JP28072786A JP28072786A JPS63133921A JP S63133921 A JPS63133921 A JP S63133921A JP 28072786 A JP28072786 A JP 28072786A JP 28072786 A JP28072786 A JP 28072786A JP S63133921 A JPS63133921 A JP S63133921A
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Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
［産業上の利用分野］
本発明は、オタネニンジン（Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎ
ｇ Ｃ。
ｇ Ｃ。
Ａ、Ｍｅｙｅｒ）の組織培養により、幼苗を大量に生産
する方法に関する。
する方法に関する。
［従来の技術］
オタネニンジン（通称、朝鮮人参）は、薬用植物として
栽培され、通常は種子により増殖されているが、最近、
このオタネニンジンを組織培養により増殖することが試
みられている。この方法として、オタネニンジンの根、
茎、葉等の植物組織をオーキシン類及びサイトカイニン
類を含有するカルス誘導培地を用いてカルスを誘導し、
当該カルスを増殖し、次いで、該カルスを光照射下に再
分化させる方法（特開昭６１−２１６６１９号公報）ま
た、カルスから不定胚を誘導増殖して、次いで再分化さ
せる方法（Ｗ。
栽培され、通常は種子により増殖されているが、最近、
このオタネニンジンを組織培養により増殖することが試
みられている。この方法として、オタネニンジンの根、
茎、葉等の植物組織をオーキシン類及びサイトカイニン
類を含有するカルス誘導培地を用いてカルスを誘導し、
当該カルスを増殖し、次いで、該カルスを光照射下に再
分化させる方法（特開昭６１−２１６６１９号公報）ま
た、カルスから不定胚を誘導増殖して、次いで再分化さ
せる方法（Ｗ。
Ｃ，Ｃｈａｎｇ、 ’／、１．Ｈｓｉｎｇ：セオリティ
カル、アンド、アプライド、ゼネティクス（Ｔｈｅｏｒ
ｉｔｉｃａｌ ａｎｄＡｐｐｌｉｅｄ Ｇｅｎｅｔｉｃ
ｓ） ５７，１３３（１９８０））等が、提案されてい
る。
カル、アンド、アプライド、ゼネティクス（Ｔｈｅｏｒ
ｉｔｉｃａｌ ａｎｄＡｐｐｌｉｅｄ Ｇｅｎｅｔｉｃ
ｓ） ５７，１３３（１９８０））等が、提案されてい
る。
尚、オアタネニンジンの組織培養を行なうための外植片
としては、根、葉柄、葉、花柄等が試みられているが（
Ｒ，Ｇ、Ｂｕｔｅｎｋｏ ｅｔ、ａｌ、 ：ボタニチェ
スキイ、ジェルナール（ＢｏｔａｎｉｃｈａｓｋｉｉＺ
ｈｕｒｎａｌ）ヱ、９０６（１９６８））、花芽が用い
られた例はない。さらに、上記文献において、花柄を用
いた時は、全く培養物は得られなかった旨記載されてい
る。
としては、根、葉柄、葉、花柄等が試みられているが（
Ｒ，Ｇ、Ｂｕｔｅｎｋｏ ｅｔ、ａｌ、 ：ボタニチェ
スキイ、ジェルナール（ＢｏｔａｎｉｃｈａｓｋｉｉＺ
ｈｕｒｎａｌ）ヱ、９０６（１９６８））、花芽が用い
られた例はない。さらに、上記文献において、花柄を用
いた時は、全く培養物は得られなかった旨記載されてい
る。
一方、外植片として花芽を用いる例は、フリージアにあ
る（Ｒ，Ｌ、Ｍ、Ｐｉｅｒｉｋ ｅｔ、ａｌ、：ネザー
ランド、ジャーナル、オブ、アグリカルチャー、サイエ
ンス（Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ） ２３，
３３４（１９７５））が、この例は、不定芽の誘導を目
的としたもので、不定胚にっては何ら記載されていない
。
る（Ｒ，Ｌ、Ｍ、Ｐｉｅｒｉｋ ｅｔ、ａｌ、：ネザー
ランド、ジャーナル、オブ、アグリカルチャー、サイエ
ンス（Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ） ２３，
３３４（１９７５））が、この例は、不定芽の誘導を目
的としたもので、不定胚にっては何ら記載されていない
。
［発明が解決しようとする開運点］
上記オタネニンジンの根、茎、葉からカルスを誘導して
再分化する方法、あるいはこのようなカルスから不定胚
を誘導増殖して再分化させる方法は、カルスから不定胚
を誘導するのに長期間の培養を必要とし、また不定胚の
誘導率も低いという問題があった。
再分化する方法、あるいはこのようなカルスから不定胚
を誘導増殖して再分化させる方法は、カルスから不定胚
を誘導するのに長期間の培養を必要とし、また不定胚の
誘導率も低いという問題があった。
本発明者は、これらの問題を解決するために鋭意研究を
進めた結果、オタネニンジンの花芽を外植片として用い
ることによりカルスから不定胚が極めて短期間のうちに
誘導され、またその誘導率も極めて高いこと、不定胚か
ら形成されるシュート（ｓｈｏｏｔ）を増殖してマルチ
プルシュート（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ５ｈｏｏｔ）化でき
ること、さらには、未熟な不定胚は継代培養することに
より二次胚形成により増殖し、再分化できること、等を
見い出した。
進めた結果、オタネニンジンの花芽を外植片として用い
ることによりカルスから不定胚が極めて短期間のうちに
誘導され、またその誘導率も極めて高いこと、不定胚か
ら形成されるシュート（ｓｈｏｏｔ）を増殖してマルチ
プルシュート（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ５ｈｏｏｔ）化でき
ること、さらには、未熟な不定胚は継代培養することに
より二次胚形成により増殖し、再分化できること、等を
見い出した。
本発明は、かかる知見に基づいてなされたもので、本発
明の目的は、短期間にしかも効率良くオタネニンジンの
クローン苗を大量に得る方法を提供することにある。
明の目的は、短期間にしかも効率良くオタネニンジンの
クローン苗を大量に得る方法を提供することにある。
［問題卓を解決するための手段］
本発明は、オタネニンジンの花芽を外植片として用いて
組織培養を行ない、幼苗とすることから成るもので、特
に好ましくは、前記組織培養による幼苗の生産をカルス
から不定胚を誘導増殖した後に、再分化させることから
成り、さらには、この再分化を、不定胚からシュートを
形成し、当該シュートを増殖させた後、発根させること
及び前記不定胚が未熟胚のとき、当該胚の成熟と二次胚
の形成増殖を行なった後、再分化させるものであること
から成るオアネニンジン幼苗の大量生産方法である。
組織培養を行ない、幼苗とすることから成るもので、特
に好ましくは、前記組織培養による幼苗の生産をカルス
から不定胚を誘導増殖した後に、再分化させることから
成り、さらには、この再分化を、不定胚からシュートを
形成し、当該シュートを増殖させた後、発根させること
及び前記不定胚が未熟胚のとき、当該胚の成熟と二次胚
の形成増殖を行なった後、再分化させるものであること
から成るオアネニンジン幼苗の大量生産方法である。
本発明で用いられるオタネニンジンの花芽は。
特に制限はないが、花芽分化直後から６力月程度以内の
植物体から得たもので、花柄および花がくを除き、１〜
１０＋ｕ＋の大きさの切片としたものを用いることが好
ましい。
植物体から得たもので、花柄および花がくを除き、１〜
１０＋ｕ＋の大きさの切片としたものを用いることが好
ましい。
この花芽の切片は、ツイーン（Ｔｗｅｅｎ） ８０を添
加した次亜塩素酸ナトリウム水溶液やエタノール等の滅
菌液で滅菌した後、組織培養に供する。
加した次亜塩素酸ナトリウム水溶液やエタノール等の滅
菌液で滅菌した後、組織培養に供する。
本発明においては、まず、この花芽の切片を、２．４−
ジクロロフェノキシ酢酸（２，４−Ｄ）、インドール酢
酸、ナフタレン酢酸（ＮＡＡ）等のオーキシン類、或い
はベンジルアミノプリン（ＢＡＰ） 、カイネチン等の
サイトカイニン類を添加したムラシゲ−スクーグ（ＭＳ
）、ホワイト、リンスマイヤー−スクーグ、ガウスレッ
ト、ヘラ−等のカルス化及び不定胚誘導培地で、暗黒下
に、約１２週間培養する。これにより。
ジクロロフェノキシ酢酸（２，４−Ｄ）、インドール酢
酸、ナフタレン酢酸（ＮＡＡ）等のオーキシン類、或い
はベンジルアミノプリン（ＢＡＰ） 、カイネチン等の
サイトカイニン類を添加したムラシゲ−スクーグ（ＭＳ
）、ホワイト、リンスマイヤー−スクーグ、ガウスレッ
ト、ヘラ−等のカルス化及び不定胚誘導培地で、暗黒下
に、約１２週間培養する。これにより。
花芽はカルス化し、次いで不定胚が誘導される。
このようにして誘導された不定胚のうち成熱狂は、光照
射下に、サイトカイニン類及びジベレリン（ＧＡ）等を
含有させた再分化用培地で培養することにより、４週間
程度で発芽し、シュートが得られる。
射下に、サイトカイニン類及びジベレリン（ＧＡ）等を
含有させた再分化用培地で培養することにより、４週間
程度で発芽し、シュートが得られる。
一方、未成熱狂は、光照射下に、サイトカイニン類及び
オーキシン類等を含有させた培地で継代培養し、胚の成
熟促進と二次胚の形成増殖を行い、上記再分化用培地で
再分化させると良い。
オーキシン類等を含有させた培地で継代培養し、胚の成
熟促進と二次胚の形成増殖を行い、上記再分化用培地で
再分化させると良い。
上記シュートは、ＢＡＰ−ＧＡ又はＮＡＡ−ＢＡＰを添
加した培地で、光照射下に培養するとマルチプルシュー
トを形成する。
加した培地で、光照射下に培養するとマルチプルシュー
トを形成する。
このようにして得られるシュートは、ＮＡＡ、インドー
ル酪酸（ＩＢＡ）等のオーキシン類を含む発根培地で、
光照射下に培養すると７週間程度で発根し、幼苗が得ら
れる。
ル酪酸（ＩＢＡ）等のオーキシン類を含む発根培地で、
光照射下に培養すると７週間程度で発根し、幼苗が得ら
れる。
この幼苗を土壌へ移植することにより、オタネニンジン
を栽培することができる。
を栽培することができる。
［実施例］
（実施例）
オタネニンジンの芽から、発芽後約２週間口の花芽の花
柄および花がくを除いた５ｍｍの花芽切片をツイーン８
０を０．１重量％添加した３重量％の次亜塩素酸ナトリ
ウム水溶液で１０分間、さらに７０容量％のエタノール
溶液で３ｏ秒間滅菌した後、滅菌精製水で２回洗浄した
。
柄および花がくを除いた５ｍｍの花芽切片をツイーン８
０を０．１重量％添加した３重量％の次亜塩素酸ナトリ
ウム水溶液で１０分間、さらに７０容量％のエタノール
溶液で３ｏ秒間滅菌した後、滅菌精製水で２回洗浄した
。
この滅菌後の花芽切片を２．４−Ｄを１ ｐｐｍ添加し
たＭＳ培地に移植し、２５±１℃の温度で、暗黒下に１
２週間培養した。この結果、１００％カルス化し、その
８０％から不定胚誘導が認められた。
たＭＳ培地に移植し、２５±１℃の温度で、暗黒下に１
２週間培養した。この結果、１００％カルス化し、その
８０％から不定胚誘導が認められた。
この不定胚のうち成熟胚を取り出し１ＭＳ培地組成液を
２倍に希釈し、これにＢＡＰ及びＧＡをそれぞれ０．５
ｐｐｍづつ、さらにシュークロース（ｓｕｃｒｏｓｅ）
を１．５重量％あるいは３重量％添加して調製した寒天
培地に移植し、２２±１℃の温度で、１６時間／日照明
下に４週間培養した。この結果、シュークロースを１．
５重量％添加した培地では７０％の胚から、また３重量
％の培地では４５％の胚から正常なシュートが得られた
。
２倍に希釈し、これにＢＡＰ及びＧＡをそれぞれ０．５
ｐｐｍづつ、さらにシュークロース（ｓｕｃｒｏｓｅ）
を１．５重量％あるいは３重量％添加して調製した寒天
培地に移植し、２２±１℃の温度で、１６時間／日照明
下に４週間培養した。この結果、シュークロースを１．
５重量％添加した培地では７０％の胚から、また３重量
％の培地では４５％の胚から正常なシュートが得られた
。
尚、上記不定胚のうち未熟胚について、ＮＡＡ ２ｐｐ
ｍ、 Ｂ Ａ Ｐ ２．５ｐｐｍ添加したＭＳ寒天培地
で継代培養した結果、未熟胚は、すべて成熟し、二次胚
形成による不定胚の増殖が盛んに起こった。この成熟胚
を上記シュークロース１．５重量％添加の培地で、同様
の条件で培養した結果。
ｍ、 Ｂ Ａ Ｐ ２．５ｐｐｍ添加したＭＳ寒天培地
で継代培養した結果、未熟胚は、すべて成熟し、二次胚
形成による不定胚の増殖が盛んに起こった。この成熟胚
を上記シュークロース１．５重量％添加の培地で、同様
の条件で培養した結果。
上記と同様に正常なシュートが得られた。
次に、このシュートを、ＭＳ培地組成液を２倍に希釈し
、これにＧＡ及びＢＡＰをそれぞれ５ＰＰ鵬づつ、さら
番こシュークロース１．５％を添加した寒天培地で、２
２±１℃の温度で、１６時間／日照明下に８週間培養し
た。この結果、全てのシュートから平均シュート数５．
９本のマルチプルシュートが得られた。
、これにＧＡ及びＢＡＰをそれぞれ５ＰＰ鵬づつ、さら
番こシュークロース１．５％を添加した寒天培地で、２
２±１℃の温度で、１６時間／日照明下に８週間培養し
た。この結果、全てのシュートから平均シュート数５．
９本のマルチプルシュートが得られた。
上記で得られたシュートを、ＮＡＡ、ＩＢＡをそれぞれ
１ ｐｐｍづつ添加したＭＳ寒天培地で、２ｏ±１℃の
温度で、１６時間／日照明下に７週間培養した結果、Ｎ
ＡＡを添加した培地で７５％、ＩＢＡを添加した培地で
５０％のシュートが発根し、クローン苗が得られた。
１ ｐｐｍづつ添加したＭＳ寒天培地で、２ｏ±１℃の
温度で、１６時間／日照明下に７週間培養した結果、Ｎ
ＡＡを添加した培地で７５％、ＩＢＡを添加した培地で
５０％のシュートが発根し、クローン苗が得られた。
この幼苗を土壌に移植したが、順調に生育している。
（比較例）
実施例の花芽を得たのと同じオタネニンジンの組織から
根、茎１葉の部分を用いて実施例と同様の培地でカルス
及び不定胚の誘導を行った。
根、茎１葉の部分を用いて実施例と同様の培地でカルス
及び不定胚の誘導を行った。
尚、この場合、根は、表皮を除き厚さ約２ｍ＋ｎ直径約
５１１１１１の円盤状の切片とし、茎は、厚さ約２１の
円盤状の切片とし、葉は、葉身約１ｃｏｆ角の切片とし
て用いた。
５１１１１１の円盤状の切片とし、茎は、厚さ約２１の
円盤状の切片とし、葉は、葉身約１ｃｏｆ角の切片とし
て用いた。
この結果、根、茎、葉の切片のいずれにおいても、１０
０％カルス化したが、１２週間目で不定胚形成に至るも
のはなく、６〜９力月を経過しても不定胚分化に至るも
のは１〜１０％程度であった。
０％カルス化したが、１２週間目で不定胚形成に至るも
のはなく、６〜９力月を経過しても不定胚分化に至るも
のは１〜１０％程度であった。
［発明の効果コ
本発明は、オタネニンジンの花芽を外植片として用いて
組織培養を行なうようにしたため、短期間にしかも効率
良くオタネニンジンの不定胚が誘導でき、クローン苗を
大量に得ることができるという格別の効果を奏するもの
である。
組織培養を行なうようにしたため、短期間にしかも効率
良くオタネニンジンの不定胚が誘導でき、クローン苗を
大量に得ることができるという格別の効果を奏するもの
である。
Claims (4)
- （１）オタネニンジンの花芽を用いて組織培養を行ない
、幼苗とすることを特徴とするオタネニンジン幼苗の大
量生産方法。 - （２）上記組織培養による幼苗の生産が、カルスから不
定胚を誘導増殖した後に、再分化させるものであること
を特徴とする特許請求の範囲第１項に記載するオタネニ
ンジン幼苗の大量生産方法。 - （３）上記再分化が、不定胚からシュートを形成し、当
該シュートを増殖させた後、発根させるものであること
を特徴とする特許請求の範囲第２項に記載するオタネニ
ンジン幼苗の大量生産方法。 - （４）上記不定胚が未熟胚のとき、当該胚の成熟と二次
胚の形成増殖を行なった後、再分化させるものであるこ
とを特徴とする特許請求の範囲第２項及び第３項に記載
するオタネニンジン幼苗の大量生産方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28072786A JPS63133921A (ja) | 1986-11-27 | 1986-11-27 | オタネニンジン幼苗の大量生産方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28072786A JPS63133921A (ja) | 1986-11-27 | 1986-11-27 | オタネニンジン幼苗の大量生産方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63133921A true JPS63133921A (ja) | 1988-06-06 |
| JPH0251573B2 JPH0251573B2 (ja) | 1990-11-07 |
Family
ID=17629100
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP28072786A Granted JPS63133921A (ja) | 1986-11-27 | 1986-11-27 | オタネニンジン幼苗の大量生産方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS63133921A (ja) |
-
1986
- 1986-11-27 JP JP28072786A patent/JPS63133921A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0251573B2 (ja) | 1990-11-07 |
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