JPS63112536A

JPS63112536A - γ−リノレン酸の濃縮精製方法

Info

Publication number: JPS63112536A
Application number: JP61259495A
Authority: JP
Inventors: Takeshi Sako; 猛佐古; Toshihiro Yokochi; 俊弘横地; Shinji Sato; 佐藤　真士; Osamu Suzuki; 修鈴木; Toshikatsu Shirata; 白田　利勝; Takeshi Sugata; 菅田　孟; Nobuaki Nakazawa; 中沢　宣明
Original assignee: Agency of Industrial Science and Technology
Current assignee: National Institute of Advanced Industrial Science and Technology AIST
Priority date: 1986-10-30
Filing date: 1986-10-30
Publication date: 1988-05-17
Also published as: JPH0142933B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔技術分野〕本発明はγ−リノレン酸含有天然油脂からγ−リノレン
酸を脂肪酸または低級アルコールエステルとして濃縮精
製する方法に関する。

〔従来技術〕

γ−リノレン酸は、月見草の種子油等の植物種子油に含
まれる他、菌体油脂にも含まれる。この場合、菌体油脂
としては、モルティエレラ属に属するイサベリナ、ビナ
セア、ラマニアナ、ラマニアナ・アングリスポラ及びナ
ナの糸状菌体中に生産される油脂が挙げられる。このよ
うな糸状菌を、炭水化物を炭素源とする培地に培養する
ことにより、γ−リノレン酸含有油脂含量の高い菌体を
高密度で生産することができる（特開昭５９−２０５９
７９号）。また菌体中のγ−リノレン酸含有油脂は、先
に特許出願した超臨界流体抽出法（特願昭６１−１８１
４８１号）や溶媒抽出法などにより分離することができ
、抽出油脂中の全脂肪酸に対するγ−リノレン酸の重量
分率は５〜７％程度であり１月見草種子油中の濃度に匹
敵することが示されている。しかし、これらの植物種子
油や菌体油脂に含まれるγ−リノレン酸は低濃度であり
、濃縮精製することが必要とされている。濃縮法につい
ては、従来スグリ属果実種子油を原料とし、極性溶媒混
合物のグラディエンドを用いて逆相分配液体クロマトグ
ラフィーによるγ−リノレン酸を分取する方法（特開昭
５８−１９２８２８号）、及びγ−リノレン酸含有油脂
を加水分解し、脂肪酸あるいはその誘導体として、オク
タデシル基を化学結合させたシリカゲル系またはスチレ
ン−ジビニルベンゼン共重合型合成高分子系逆相分配液
体クロマトグラフィーによるγ−リノレン酸の濃縮方法
（特開昭６１−１９２７９８号）がある。しかし、これ
らの方法はいずれも、γ−リノレン酸の濃縮方法として
は未だ満足し得るものではなかった。

〔目　　的〕

本発明は、超臨界流体抽出法や溶媒抽出法などにより分
離されたγ−リノレン酸含有油脂中のγ−リノレン酸成
分を効率よく濃縮精製し得る方法を提供することを目的
とする。

〔構　　成〕

本発明によれば、γ−リノレン酸を含有する天然油脂を
加水分解し得られた脂肪酸混合物または低級アルコール
でエステル交換して得られた脂肪酸低級アルキルエステ
ル混合物をそのまま、あるいは尿素付加処理した後に、
超臨界流体を移動相とするクロマトグラフィーで分画し
、γ−リノレン酸画分を分取することを特徴とするγ−
リノレン酸の濃縮精製方法が提供される。

本発明の方法を好まし〈実施するには、まずはじめにγ
−リノレン酸を含有する植物油または菌体油脂等の天然
油脂を、慣用の方法を用いて加水分解して脂肪酸混合物
あるいはメチルアルコールやエチルアルコール等の炭素
数１〜６の低級アルコールでエステル交換反応を行って
脂肪酸低級アルキルエステル混合物を得る。この場合、
対象の天然油脂は、パルミチン酸、オレイン酸、リノー
ル酸、γ−リノレン酸等の脂肪酸のグリセリドになって
いるため、この油脂を加水分解すると、各々の脂肪酸を
含んだ脂肪酸混合物が得られる。また。

低級アルコールによりエステル交換反応すると各々の脂
肪酸に対応する低級アルキルエステルを含んだエステル
混合物が得られる。この脂肪酸混合物あるいは脂肪酸低
級アルキルエステル混合物を超臨界流体を移動相とする
クロマトグラフィー（以下、超臨界流体クロマトグラフ
ィーと言う）にかけると、γ−リノレン酸あるいはその
低級アルキルエステルは他の脂肪酸あるいは他のエステ
ルとは保持時間が異なるため、γ−リノレン酸画分の分
離、濃縮、精製が可能になる。また超高純度のγ−リノ
レン酸が必要な場合には、前処理として慣用の尿素付加
処理方法を用いて、大部分の飽和脂肪酸あるいはそのエ
ステルを除去して得たγ−リノレン酸含有量の増加した
濃縮物を用いると、カラムの負荷が少なく、１回の処理
で９９．９％以上のγ−リノレン酸画分を得ることがで
きる。分画されたγ−リノレン酸あるいはそのエステル
は、活性炭などの吸着剤によりトラップした後に脱着し
て製品とすることができるし、γ−リノレン酸画分を含
んだ超臨界流体を減圧して系外にγ−リノレン酸あるい
はそのエステルを析出させて製品とすることができる。

本発明により超臨界流体クロマトグラフィーを用いて天
然油脂からの脂肪酸混合物又は脂肪酸低級アルキルエス
テル混合物を処理する場合、超臨界流体としては、超臨
界状態にある二酸化炭素、フロンなどの他、メタン、エ
タンなどの炭化水素が用いられ、それら超臨界条件はい
ずれも公知であり、例えば、二酸化炭素の超臨界条件は
、圧カニ７２．４Ｋｇ／ａｌｆ以上、温“度：３１．０
℃以上である。この場合、超臨界流体を単独で用いても
十分な分離性能を得ることが出来るが、超臨界流体に沸
点範囲４０〜１２０℃までの小量のエタノール、プロパ
ツールなどのアルコール類やブタン、ペンタン、ヘキサ
ン、ヘプタン、シクロヘキサンなどの炭化水素系溶媒を
添加することにより、分離性能を向上させることが可能
で、これらを超臨界の混合流体として用いてもよい。こ
の超臨界流体は、超臨界条件下に保持されたカラムに対
し、移動相として流通される、被処理原料である脂肪酸
混合物又は脂肪酸低級アルキルエステル混合物は、カラ
ムに対し、超臨界流体の移動方向と並流に流通される。

この場合、脂肪酸混合物又は脂肪酸低級アルキルエステ
ル混合物は、単独に超臨界流体に溶解した状態で、ある
いは有機溶媒、例えば、ｎ−へキサンや、クロロホルム
、アセトン、低級アルコール、シクロヘキサン等の液体
クロマトグラフィーに使用される溶媒に溶解した溶液と
してカラムに供給することができる。また、カラムとし
ては、オクタデシル基を結合したシリカゲル系や、スチ
レン−ジビニルベンゼン共重合型高分子系充填剤等を充
填したカラムが用いられる。超臨界流体クロマトグラフ
ィーによる分取条件は温度については３５〜１００℃、
好ましくは４０〜６０℃、圧力については８０〜３００
Ｋｇ／ｃｉ、好ましくは９０〜２５０Ｋｇ／ｆｆｌであ
る。

分取されたγ−リノレン酸両分は、減圧し系外にγ−リ
ノレン酸あるいは、そのエステルを析出させることが好
ましい。あるいは、γ−リノレン酸画分を含んだ超臨界
流体を活性炭等の吸着剤充填カラムを用いて吸着処理す
るのが好ましい。この吸着剤充填カラムでは、超臨界流
体の超臨界条件でγ−リノレン酸又はそのエステル分が
吸着される。分取終了後、吸着剤充填カラムは、減圧し
。

超臨界流体のみカラムから分離される。吸着されたγ−
リノレン酸又はそのエステルは、＠着剤から脱着して製
品として回収される。この場合の脱着処理は、慣用の方
法であるｎ−ヘキサンやクロロホルム等の溶剤で、γ−
リノレン酸又はそのエステルを吸着した吸着剤を洗浄す
ることによって実施される。

〔効　　果〕

本発明では、γ−リノレン酸のクロマトグラムは他の脂
肪酸のクロマトグラムと分離しているため、またγ−リ
ノレン酸エステルのクロマトグラムは他の脂肪酸エステ
ルのクロマトグラムと分離しているため、高純度のγ−
リノレン酸両分を高い収率で分取することができる。ま
た移動相として超臨界流体を用いており、従来の液体ク
ロマトグラフィーによる分取法や尿素付加法による分離
法などのように、最終工程での脱有機溶剤のための減圧
蒸留の必要がない。このため、分離生成物の熱変性によ
る収率の低下もない。更に、用いている移動相が安価で
、人体に対して無害であるという利点の他、処理に要す
る時間が数分から数十分であり、従来法の数時間に比べ
て非常に短縮できるという利点が得られる。

〔実施例〕

次に本発明を実施例によりさらに詳細に説明す、る。な
お実施例における気は、いずれも重量基準である。

実施例１モルティエレラ属糸状菌体より抽出された油脂を、慣用
のエステル交換法によりメチルエステル化し、脂肪酸メ
チル混合物を得た。この脂肪酸メチル混合物の組成は、
ガスクロマトグラフ分析で。

パルミチン酸メチル３０．６％、パルミトレン酸メチル
０．５％、ステアリン酸メチル４．１％、オレイン酸メ
チル５１．８％、リノール酸メチル７、寡、γ−リノレ
ン酸メチル５．３％であることが認められたにの混合脂
肪酸メチルの１４メヘキサン溶液２５μ２を超臨界流体
クロマトグラフィーにかけ、γ−リノレン酸メチル画分
を分取した。その時の超臨界流体クロマトグラフィーの
分離条件は、移動相：超臨界二酸化炭素、カラム充填剤
：５μｍのＯＤＳ、カラムサイズ：直径１０ｍｍ　Ｘ長
さ２５０ｍｍ、分離圧カニ　１２０−１４０ｋｇ／ａＩ
Ｆ、分離温度＝４０℃、移動相の流速：３．ＯＮｌｍｉ
ｎであった。以上の条件で約５〜７分後に、γ−リノレ
ン酸メチル画分のピークがあられれる。このγ−リノレ
ン酸メチル画分を吸着分取するために、６０〜１５０メ
ツシユの活性炭を約１０ｍＱ充填したトラップを用いた
。この実施に用いた超臨界流体クロマトグラフィーでは
分取カラムの処理量が小さいため、上記の条件で１０回
の分取を繰り返して、混合脂肪酸メチルの１４ヌ、ヘキ
サン溶液２５０μＱからγ−リノレン酸メチルを活性炭
に吸着トラップした。その結果、収率９０％で純度９４
．２％のγ−リノレン酸メチルを得ることができた。分
離したエステルの組成を表１に示した。

実施例２実施例１の脂肪酸メチルを慣用法により１回尿素付加処
理し、飽和脂肪酸メチルの大部分を試料から取り除いた
。得られた濃縮物の脂肪酸メチルの組成は、パルミトレ
イン酸メチル２．５％、オレイン酸メチル１５．３％、
リノール酸メチル４１．０％、γ−リノレン酸メチル４
１．２％であった。この混合脂肪酸メチルの５石ヘキサ
ン溶液１２５μΩを実施例１と同じ条件に設定した超臨
界流体クロマトグラフィーにかけ、γ−リノレン酸メチ
ル画分を分取したところ、収率７６．５％で純度９９．
９９％以上のγ−リノレン酸メチルを得た。ただしこの
時の収率は、尿素付加処理する前のエステル基準である
０分離したエステルの組成を実施例１と同様に表１に示
した。

実施例３モルティエレラ属糸状菌体より抽出された油脂を慣用法
により加水分解し、脂肪酸混合物を得た。

この脂肪酸混合物の組成は、ガスクロマトグラフ分析で
、パルミチン酸３０．１％、ステアリン酸５．４％、オ
レイン酸４５．７％、リノール酸９．３％、γ−リノレ
ン溶液２５０μ２を実施例１と同じ条件に設定した超臨
界流体クロマトグラフィーにかけ、γ−リノレン酸画分
を分取したところ、収率９Ｂで純度９５．錦のγ−リノ
レン酸を得た０分離した脂肪酸の組成を表１に示した。

実施例４実施例３で用いた脂肪酸混合物を実施例２と同様の慣用
法により１回尿素付加処理し、飽和脂肪酸の大部分を試
料から取り除いた。得られた濃縮物の脂肪酸組成は、パ
ルミトレイン酸１．錦、オレイン酸４．１％、リノール
酸４５．９％、γ−リノレン酸４８．２対であった。こ
の混合脂肪酸の１０％ヘキサン溶液２５０μΩを実施例
１と同じ条件に設定した超臨界クロマトグラフィーにか
け、γ−リノレン酸両分を分取したところ、収率７５％
で純度９９１部以上のγ〜リルン酸を得た。この時の収
率は尿素付加処理前の脂肪酸基準である。分離した脂肪
酸の組成を表１に示した。

実施例５殻５．８ｈであった。この′ａ當庸肪隙のｌυにへキサ
ンメチルエステル化し、脂肪酸メチル混合物を得た。

この脂肪酸メチル混合物の組成は、パルミチン酸メチル
６．５％、ステアリン酸メチル１．２％、オレイン酸メ
チル１０．５％、リノール酸メチル７４．５％、γ−リ
ノレン酸メチル７．６％であった。この混合脂肪酸メチ
ルの１０％ヘキサン溶液２５０μＱを超臨界流体クロマ
トグラフィーにより、実施例１の分離条件に準じてγ−
リノレン酸メチル画分を分取したところ、収率９０％で
、純度９３．７％のγ−リノレン酸メチルを得た。分離
したエステルの組成を表１に示した。

なお、表１において示した符号は次のことを意味する。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）γ−リノレン酸を含有する天然油脂を加水分解し
て得られる脂肪酸混合物または低級アルコールでエステ
ル交換して得られる脂肪酸低級アルキルエステル混合物
を超臨界流体を移動相とするクロマトグラフィーにより
分画し、γ−リノレン酸画分を分取することを特徴とす
るγ−リノレン酸の濃縮精製方法。
（２）γ−リノレン酸を含有する天然油脂を加水分解し
て得られる脂肪酸混合物又は低級アルコールでエステル
交換して得られる脂肪酸低級アルキルエステル混合物を
尿素付加処理に付した後、得られたγ−リノレン酸濃縮
物を超臨界流体を移動相とするクロマトグラフィーによ
り分画し、γ−リノレン酸画分を分取することを特徴と
するγ−リノレン酸の濃縮精製方法。