JPS6296089A - 新規微生物を用いた発酵によるポリオ−ル類の製造方法 - Google Patents
新規微生物を用いた発酵によるポリオ−ル類の製造方法Info
- Publication number
- JPS6296089A JPS6296089A JP23781786A JP23781786A JPS6296089A JP S6296089 A JPS6296089 A JP S6296089A JP 23781786 A JP23781786 A JP 23781786A JP 23781786 A JP23781786 A JP 23781786A JP S6296089 A JPS6296089 A JP S6296089A
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- Japan
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- polyol
- medium
- polyols
- torulopsis
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、新規微生物を用いた発酵によるポリオール類
の製造方法に関する。更に詳細には、トルロプシス(T
orulopsis)属に属する新規微生物を用いて発
酵性糖類をポリオール類に変換することよりなる発酵に
よるポリオール類の製造方法に関する。。
の製造方法に関する。更に詳細には、トルロプシス(T
orulopsis)属に属する新規微生物を用いて発
酵性糖類をポリオール類に変換することよりなる発酵に
よるポリオール類の製造方法に関する。。
発酵によるポリオール類の製造方法、就中トルロプシス
属に属する微生物を使用してグリセロール又はマンニト
ールを製造する方法は公知である。
属に属する微生物を使用してグリセロール又はマンニト
ールを製造する方法は公知である。
例えば特公昭47−8589号公報にはトルロプシス・
マンニドファシェンス(T、 mannitofaci
ens)を使用する方法が述べられており、また同47
−20393号公報にはトルロプシス・アノマーラ(T
、 anomala)を使用する方法が述べられている
。
マンニドファシェンス(T、 mannitofaci
ens)を使用する方法が述べられており、また同47
−20393号公報にはトルロプシス・アノマーラ(T
、 anomala)を使用する方法が述べられている
。
更に、G、 H,l1ajny他; Applied
Miclobiology。
Miclobiology。
8:5(1960)にはトルロプシス・マグノルア(T
、 懸v囮ユ耗)を使用する方法が述べられている。し
かしながら、これら公知の方法で用いられる微生物は、
生育上低い基質濃度が必要であったり、あるいはポリオ
ール類への変換率が必ずしも十分でないことから、未だ
工業的に利用されていない。
、 懸v囮ユ耗)を使用する方法が述べられている。し
かしながら、これら公知の方法で用いられる微生物は、
生育上低い基質濃度が必要であったり、あるいはポリオ
ール類への変換率が必ずしも十分でないことから、未だ
工業的に利用されていない。
本発明者らは、かねてより生体触媒としての微生物の有
用性に注目し、種々の微生物についてそのポリオールへ
の変換能の検索を行なってきたが、偶々、ある種の発酵
食品から分離された微生物が著しく高いポリオール類へ
の変換能を有することを見出し、本発明に到達したもの
である。
用性に注目し、種々の微生物についてそのポリオールへ
の変換能の検索を行なってきたが、偶々、ある種の発酵
食品から分離された微生物が著しく高いポリオール類へ
の変換能を有することを見出し、本発明に到達したもの
である。
本発明は、トルロプシス属に属し、栄養細胞が2〜6×
2〜6μの球形で、多極出芽により増殖し、子のう胞子
、菌糸、偽菌糸が見られず、ガラクトース発酵性ならび
にガラクトース、D−アラビノース、L−アラビノース
資化性があり、YM寒天培地上に2週間培養するとうす
い橙黄色のコロニーとなり、液体培地では皮膜を形成し
、かつ発酵性[8をグリセロール、マンニトールなどの
ポリオール類に変換する能力を有する新規微生物をグル
コースなどの発酵性W類を主炭素源として含む培地に接
種し、好気的に培養して培養液中にポリオール類を生成
蓄積せしめ、次いで蓄積されたポリオール類を採取する
ことを特徴とするポリオール類の製造方法に関する。
2〜6μの球形で、多極出芽により増殖し、子のう胞子
、菌糸、偽菌糸が見られず、ガラクトース発酵性ならび
にガラクトース、D−アラビノース、L−アラビノース
資化性があり、YM寒天培地上に2週間培養するとうす
い橙黄色のコロニーとなり、液体培地では皮膜を形成し
、かつ発酵性[8をグリセロール、マンニトールなどの
ポリオール類に変換する能力を有する新規微生物をグル
コースなどの発酵性W類を主炭素源として含む培地に接
種し、好気的に培養して培養液中にポリオール類を生成
蓄積せしめ、次いで蓄積されたポリオール類を採取する
ことを特徴とするポリオール類の製造方法に関する。
本発明に係るトルロプシス属に属する新規微生物として
は、本発明者らが分離したトルロプシスsp.SN−1
8菌株があり、本菌は次のような菌学的性状を有する。
は、本発明者らが分離したトルロプシスsp.SN−1
8菌株があり、本菌は次のような菌学的性状を有する。
1、培地上の生育状況
1)顕微鏡的所見
栄養細胞の大きさく*1) 2〜6×2〜6μ栄養
細胞の形 状(*1) 円形 栄養細胞の増殖法(*1) 多極出芽菌 糸 体
(*2) 形成せず(註)*lYM寒天培地に27
℃、 5日間培養 *2 ポテトグルコース寒天 によるスライド培養 2)寒天斜面(*3) 生 育 良好光 沢
白色(光沢無し)色 素
2週間以上培養すると橙黄色の コロニー (註)*3YM寒天培地 3)液体培養(*4) 表面生育 皮膜形成濁 度
透明 性 査 大(註)*4YM
液体培地 2、子のう胞子の形成 ポテトグルコース寒天培地 形成せずコーンミール寒
天培地 形成せずYM寒天培地
形成せずニンジンエキス寒天培地 形成せずvll
寒天培地 形成せず3、生理的性質 酸素要求性 好気的 生育温度 20〜39℃最適生育温
度 33℃ 生育pH2,5〜10.0 最適生育pH7,0〜9.0 KNO3資化性(*5) 有り (NH4)2504資化性(*5)有り脂肪の分解(*
6) 無し 尿素の分解 無し ゼラチンの液化 有り スクロースの 生育可能最高濃度(*7) 約70% 生育最適温度(*7) 約30% 塩化ナトリウムの 生育可能最高濃度(*8) 0.5%生育最適濃度(
*8) 0.1%カロチノイドの生成
無し 有機酸の生成 有り デンプン様物質の生成 無し ビタミンの要求性(*5) 無し (註) * 5 Wickerhao+の合成培地を
用いたJ、 Lodderら の方法により判定 *6 牛脂を使用 *7 液体培地 *820%(w / w )グル コース培地中での生育、 液体 4、糖の発酵性(*5) グルコース + ラクトース − ガラクトース + メリビオース − スクロース + ラフィノース + マルトース − 5、I!の資化性(*5) グルコース + D−キシロース − ガラクトース + エリスリトール − 〇−アラビノース + L−アラビノース + D−ソルボース − し−ソルボース + D−リボース − スクロース + L−ラムノース − マルトース + エタノール − セロビオース − グリセロール − トレハロース − アドニトール − ラクトース − ズルシトール − メリビオース + D−マンニトール − ラフィノース + D−ソルビトール − フルクトース − α−メチル−D−グルコシド − イヌリン + サリシン − イノシトール − 可溶性デンプン − DL−乳酸 − コハク酸 − クエン酸 − 上記の如き菌学的性質を存する本菌株の分類学上の位置
をTHE YEASTS (J、 Lodder et
al ;1970年版) 、 YEASTS (J
、 A、 Barnett et al、1083年版
)及びA GUIDE To IDENTIFYING
AND CLASSIFYING YEASTS U、
A、 Barnett et al;1979年版)
を参照して検討した結果、本菌株はトルロプシス属に属
するが、菌種について厳密に既知株と同定すべき記載が
見られないので新菌種であると判定し、これをトルロプ
シスsp。
細胞の形 状(*1) 円形 栄養細胞の増殖法(*1) 多極出芽菌 糸 体
(*2) 形成せず(註)*lYM寒天培地に27
℃、 5日間培養 *2 ポテトグルコース寒天 によるスライド培養 2)寒天斜面(*3) 生 育 良好光 沢
白色(光沢無し)色 素
2週間以上培養すると橙黄色の コロニー (註)*3YM寒天培地 3)液体培養(*4) 表面生育 皮膜形成濁 度
透明 性 査 大(註)*4YM
液体培地 2、子のう胞子の形成 ポテトグルコース寒天培地 形成せずコーンミール寒
天培地 形成せずYM寒天培地
形成せずニンジンエキス寒天培地 形成せずvll
寒天培地 形成せず3、生理的性質 酸素要求性 好気的 生育温度 20〜39℃最適生育温
度 33℃ 生育pH2,5〜10.0 最適生育pH7,0〜9.0 KNO3資化性(*5) 有り (NH4)2504資化性(*5)有り脂肪の分解(*
6) 無し 尿素の分解 無し ゼラチンの液化 有り スクロースの 生育可能最高濃度(*7) 約70% 生育最適温度(*7) 約30% 塩化ナトリウムの 生育可能最高濃度(*8) 0.5%生育最適濃度(
*8) 0.1%カロチノイドの生成
無し 有機酸の生成 有り デンプン様物質の生成 無し ビタミンの要求性(*5) 無し (註) * 5 Wickerhao+の合成培地を
用いたJ、 Lodderら の方法により判定 *6 牛脂を使用 *7 液体培地 *820%(w / w )グル コース培地中での生育、 液体 4、糖の発酵性(*5) グルコース + ラクトース − ガラクトース + メリビオース − スクロース + ラフィノース + マルトース − 5、I!の資化性(*5) グルコース + D−キシロース − ガラクトース + エリスリトール − 〇−アラビノース + L−アラビノース + D−ソルボース − し−ソルボース + D−リボース − スクロース + L−ラムノース − マルトース + エタノール − セロビオース − グリセロール − トレハロース − アドニトール − ラクトース − ズルシトール − メリビオース + D−マンニトール − ラフィノース + D−ソルビトール − フルクトース − α−メチル−D−グルコシド − イヌリン + サリシン − イノシトール − 可溶性デンプン − DL−乳酸 − コハク酸 − クエン酸 − 上記の如き菌学的性質を存する本菌株の分類学上の位置
をTHE YEASTS (J、 Lodder et
al ;1970年版) 、 YEASTS (J
、 A、 Barnett et al、1083年版
)及びA GUIDE To IDENTIFYING
AND CLASSIFYING YEASTS U、
A、 Barnett et al;1979年版)
を参照して検討した結果、本菌株はトルロプシス属に属
するが、菌種について厳密に既知株と同定すべき記載が
見られないので新菌種であると判定し、これをトルロプ
シスsp。
5N−18菌株と命名した。
即ち、本発明に用いる微生物はある種の発酵食品から常
法に従って純粋分離されたもので、トルロプシス属に属
し、栄養細胞が2〜6×2〜6μ球形で、多極出芽によ
り増殖し、子のう胞子、菌糸、偽菌糸が見られず、ガラ
クトース発酵性並びにガラクトース、D−アラビノース
、L−アラビノース資化性があり、YM寒天培地上に2
週間培養するとうすい橙黄色のコロニーとなり、液体培
地では皮膜を形成し、かつ発酵性I糖類をグリセロール
、マンニトールなどのポリオール類に変換する能力を有
する点で他の微生物と区別されるものである。
法に従って純粋分離されたもので、トルロプシス属に属
し、栄養細胞が2〜6×2〜6μ球形で、多極出芽によ
り増殖し、子のう胞子、菌糸、偽菌糸が見られず、ガラ
クトース発酵性並びにガラクトース、D−アラビノース
、L−アラビノース資化性があり、YM寒天培地上に2
週間培養するとうすい橙黄色のコロニーとなり、液体培
地では皮膜を形成し、かつ発酵性I糖類をグリセロール
、マンニトールなどのポリオール類に変換する能力を有
する点で他の微生物と区別されるものである。
本菌株は、工業技術院微生物工業技術研究所に「微生物
受託番号 微工研菌寄 第7593号」として寄託され
ている。
受託番号 微工研菌寄 第7593号」として寄託され
ている。
本発明は上記新規微生物をグルコース、フルクトースな
どの発酵性糖類を主炭素源として含み、更に窒素源、無
機塩類などを含有してなる発酵培地に接種し、好気的に
培養して培養液中にグリセロール、マンニトールなどの
ポリオール類を生成蓄積させ、次いで蓄積されたポリオ
ールを培養液から採取することよりなる発酵によるポリ
オール類の製造法に関する。
どの発酵性糖類を主炭素源として含み、更に窒素源、無
機塩類などを含有してなる発酵培地に接種し、好気的に
培養して培養液中にグリセロール、マンニトールなどの
ポリオール類を生成蓄積させ、次いで蓄積されたポリオ
ールを培養液から採取することよりなる発酵によるポリ
オール類の製造法に関する。
炭素源としては上記のグルコース、フルクトース、マン
ノースなどが用いられる。これらの炭素源は培地中に1
0〜40%(w/w)、特に好ましくは20〜30%(
W/W)となるように添加使用することが出来る。窒素
源としては酵母により利用可能な窒素化合物、例えば脱
脂大豆粉、酵母エキス、ペプトン、コーンスチープリカ
ー、カゼイン分解物などが使用されるが、酵母エキス。
ノースなどが用いられる。これらの炭素源は培地中に1
0〜40%(w/w)、特に好ましくは20〜30%(
W/W)となるように添加使用することが出来る。窒素
源としては酵母により利用可能な窒素化合物、例えば脱
脂大豆粉、酵母エキス、ペプトン、コーンスチープリカ
ー、カゼイン分解物などが使用されるが、酵母エキス。
コーンスチープリカーなどが特に好ましい。
無機塩類としては例えばリン酸、マグネシウム。
カルシウム、カリウム、鉄などの塩類が使用される。ま
た、必要に応じて酵母の生育に必要な各種の有機物、無
機物などを培地に添加することができる。
た、必要に応じて酵母の生育に必要な各種の有機物、無
機物などを培地に添加することができる。
本発明の方法における培養は、通常液体培地を用いて好
気的条件下に行なわれるが、工業的には通気攪はん培養
を行なうのが有利である。培養温度は微生物が生育しう
る範囲内、即ち26〜36℃で行なわれるが、特に好ま
しくは30〜35℃の範囲である。培地のpHは6.0
〜9.3、特に8.5〜9.0の範囲が好ましく、また
、培養期間は培養条件などによって一概には言えな、い
が、通常2〜15日間程度であって、培地の栄養源が最
大限に利用され、かつ培養液中のポリオール生成量が最
高に達した時点で培養を終了すればよい。
気的条件下に行なわれるが、工業的には通気攪はん培養
を行なうのが有利である。培養温度は微生物が生育しう
る範囲内、即ち26〜36℃で行なわれるが、特に好ま
しくは30〜35℃の範囲である。培地のpHは6.0
〜9.3、特に8.5〜9.0の範囲が好ましく、また
、培養期間は培養条件などによって一概には言えな、い
が、通常2〜15日間程度であって、培地の栄養源が最
大限に利用され、かつ培養液中のポリオール生成量が最
高に達した時点で培養を終了すればよい。
尚、培養液中のポリオール量はガスクロマトグラフィー
、高速液体クロマトグラフィーなどの周知の方法を用い
て速やかに測定することが出来る。
、高速液体クロマトグラフィーなどの周知の方法を用い
て速やかに測定することが出来る。
かくして、培養液中に蓄積されたポリオール類は次いで
常法に従って培養液から分離される。即ち、かかる場合
に当該分野において通常使用されている周知の手段、例
えばろ過、遠心分離、イオン交換又は吸着クロマトグラ
フィー、溶媒抽出。
常法に従って培養液から分離される。即ち、かかる場合
に当該分野において通常使用されている周知の手段、例
えばろ過、遠心分離、イオン交換又は吸着クロマトグラ
フィー、溶媒抽出。
蒸留、結晶化などの操作が必要に応じて適宜組み合わせ
て用いられる。−例を挙げれば、培養液からろ過、遠心
分離などによって菌体を除去し、次いでこの液を活性炭
で処理して着色物質などを除き、更にイオン交換樹脂に
より脱イオンした後、液を濃縮してシロップとする。次
に、このシロップからマンニトールを結晶化して分離し
、更にマンニトールを分離して後の母液は、これを更に
減圧(真空)蒸留により精製してグリセロールを得る。
て用いられる。−例を挙げれば、培養液からろ過、遠心
分離などによって菌体を除去し、次いでこの液を活性炭
で処理して着色物質などを除き、更にイオン交換樹脂に
より脱イオンした後、液を濃縮してシロップとする。次
に、このシロップからマンニトールを結晶化して分離し
、更にマンニトールを分離して後の母液は、これを更に
減圧(真空)蒸留により精製してグリセロールを得る。
次に実施例を示し、本発明の態様を更に具体的に説明す
る。
る。
実施例1
グルコース20%(W/W)、酵母エキス(Difco
製)0.5%を含む培地80mlを綿栓した5 00m
lの三角フラスコに入れ、120℃。
製)0.5%を含む培地80mlを綿栓した5 00m
lの三角フラスコに入れ、120℃。
15分間滅菌した。放冷後、2N−NaOHで培地のp
Hを無菌的に9,0に調整した。このフラスコにトルロ
プシスsp.SN−18菌株「微工研菌寄 第7593
号」を接種し、30℃、180rpmで8日間畿とう培
養を行なった。その結果、培養液中にグルコースは認め
られず、グリセロール6.9g(対糖収率43.1%)
及びD−マンニトール3.4g(対糖収率21.2%)
が生成した。遠心分離によって培養液より菌体を除去し
、活性炭処理を行なった後、イオン交換樹脂充填カラム
(I RA−410: IR−120B=2:1)を通
した。
Hを無菌的に9,0に調整した。このフラスコにトルロ
プシスsp.SN−18菌株「微工研菌寄 第7593
号」を接種し、30℃、180rpmで8日間畿とう培
養を行なった。その結果、培養液中にグルコースは認め
られず、グリセロール6.9g(対糖収率43.1%)
及びD−マンニトール3.4g(対糖収率21.2%)
が生成した。遠心分離によって培養液より菌体を除去し
、活性炭処理を行なった後、イオン交換樹脂充填カラム
(I RA−410: IR−120B=2:1)を通
した。
この処理液を減圧下に濃縮し、シロップ状とした。これ
に熱エタノールを加えて抽出し、抽出液を適度に濃縮し
たのち5℃に保存して結晶化を行なった。得られた結晶
を同様にエタノールより再結晶し、白色の甘味を有する
結晶2.1gを得た。
に熱エタノールを加えて抽出し、抽出液を適度に濃縮し
たのち5℃に保存して結晶化を行なった。得られた結晶
を同様にエタノールより再結晶し、白色の甘味を有する
結晶2.1gを得た。
この結晶は融点165〜166℃を示した。また飽和ホ
ウ妙法による旋光度、TMS誘導体を用いたガスクロマ
トグラフィー、高速液体クロマトグラフィーによる同定
から標品のD〜マンニトールに一致することが確認され
た。
ウ妙法による旋光度、TMS誘導体を用いたガスクロマ
トグラフィー、高速液体クロマトグラフィーによる同定
から標品のD〜マンニトールに一致することが確認され
た。
また、エタノール抽出残香に含まれるグリセロールは上
記クロマトグラフィーの保持時間から同定された。
記クロマトグラフィーの保持時間から同定された。
実施例2
グルコース20%(W/W)、酵母エキス1.0%、K
H2PO40,02%からなる培地50m7!を300
m、 Itの三角フラスコに入れ120°c、15分
間滅菌した。放冷後、培地のpHを無菌的に9.0に富
周整した。これにトルロプシス 菌株「微工研菌寄 第7593号」を接種し、30’C
,220rpmで11日間扱≧う培養を行なった。
H2PO40,02%からなる培地50m7!を300
m、 Itの三角フラスコに入れ120°c、15分
間滅菌した。放冷後、培地のpHを無菌的に9.0に富
周整した。これにトルロプシス 菌株「微工研菌寄 第7593号」を接種し、30’C
,220rpmで11日間扱≧う培養を行なった。
その結果、培養液中にグリセロール0.6g,D−マン
ニトール4.8gが生成した。
ニトール4.8gが生成した。
実施例3
グルコース20%(W/W)、酵母エキス0.5%,酒
石酸カリウム0.1%からなる培地5 9m1を5 0
0 m lの三角フラスコに入れ滅菌した。放冷後、
培地のpHを無菌的に9.0に調整した。この培地にト
ルロプシスsp.SN−18菌株[微工研菌寄 第75
93号」を接種し、30℃,220rpmで14日間灰
とう培養を行なった。
石酸カリウム0.1%からなる培地5 9m1を5 0
0 m lの三角フラスコに入れ滅菌した。放冷後、
培地のpHを無菌的に9.0に調整した。この培地にト
ルロプシスsp.SN−18菌株[微工研菌寄 第75
93号」を接種し、30℃,220rpmで14日間灰
とう培養を行なった。
その結果、この培養液中にグリセロール4.5g及びD
−マンニトール2.2gが生成した。
−マンニトール2.2gが生成した。
Claims (2)
- (1)発酵性糖類を主炭素源として含む培地に、トルロ
プシス属に属し、栄養細胞が2〜6×2〜6μの球形で
、多極出芽により増殖し、子のう胞子、菌糸、偽菌糸が
見られず、ガラクトース発酵性ならびにガラクトース、
D−アラビノース、L−アラビノース資化性があり、Y
M寒天培地上に2週間培養するとうすい橙黄色のコロニ
ーとなり、液体培地では皮膜を形成し、かつ発酵性糖類
をグリセロール、マンニトールなどのポリオール類に変
換する能力を有する微生物を接種し、好気的に培養して
培養液中にポリオール類を生成蓄積せしめ、これを採取
することを特徴とする発酵によるポリオール類の製造方
法。 - (2)トルロプシス属に属する微生物がトルロプシスs
p.SN−18菌株(微工研菌寄第7593号)である
特許請求の範囲第1項記載の方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP23781786A JPS6296089A (ja) | 1986-10-08 | 1986-10-08 | 新規微生物を用いた発酵によるポリオ−ル類の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP23781786A JPS6296089A (ja) | 1986-10-08 | 1986-10-08 | 新規微生物を用いた発酵によるポリオ−ル類の製造方法 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP15320784A Division JPS6131082A (ja) | 1984-07-25 | 1984-07-25 | 新規微生物 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS6296089A true JPS6296089A (ja) | 1987-05-02 |
JPS639833B2 JPS639833B2 (ja) | 1988-03-02 |
Family
ID=17020840
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP23781786A Granted JPS6296089A (ja) | 1986-10-08 | 1986-10-08 | 新規微生物を用いた発酵によるポリオ−ル類の製造方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS6296089A (ja) |
-
1986
- 1986-10-08 JP JP23781786A patent/JPS6296089A/ja active Granted
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS639833B2 (ja) | 1988-03-02 |
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