JPS639831B2 - - Google Patents
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Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、発酵によるポリオール類の製造方法
に関し、更に詳細には、オーレオバシデイウム
(Aureobasidium)属に属する微生物を用いて発
酵性糖類をポリオール類に変換することを特徴と
する発酵によるポリオール類の製造方法に関す
る。
に関し、更に詳細には、オーレオバシデイウム
(Aureobasidium)属に属する微生物を用いて発
酵性糖類をポリオール類に変換することを特徴と
する発酵によるポリオール類の製造方法に関す
る。
従来より、発酵によるポリオール類、就中エリ
スリトールの製造方法に於て使用される微生物と
しては、例えばキヤンジダ属、デバリオミセス
属、トリゴノプシス属、トルロプシス属、ハンゼ
ヌラ属などに属するものが知られている。
スリトールの製造方法に於て使用される微生物と
しては、例えばキヤンジダ属、デバリオミセス
属、トリゴノプシス属、トルロプシス属、ハンゼ
ヌラ属などに属するものが知られている。
例えば、特公昭47−41549号公報には培地中の
主炭素源としてグリセロールなどの発酵性糖類を
用いてキヤンジダ属、トリゴノプシス属に属する
微生物によるポリオール類への変換方法が記載さ
れている。しかしながら、この方法に従えば微生
物の耐糖性の問題から主炭素源としての糖質濃度
(基質濃度)に限界があり、比較的低濃度で発酵
を行なう必要があり、またポリオール類への変換
率も必ずしも十分でないことから、未だ工業的に
利用されるに至つていない。
主炭素源としてグリセロールなどの発酵性糖類を
用いてキヤンジダ属、トリゴノプシス属に属する
微生物によるポリオール類への変換方法が記載さ
れている。しかしながら、この方法に従えば微生
物の耐糖性の問題から主炭素源としての糖質濃度
(基質濃度)に限界があり、比較的低濃度で発酵
を行なう必要があり、またポリオール類への変換
率も必ずしも十分でないことから、未だ工業的に
利用されるに至つていない。
本発明者らは、かねてより生体触媒としての微
生物の有用性についてそのポリオール類への変換
能の検索を行なつてきたが、偶々、沖縄県の澱粉
工場の廃カスから分離された不完全菌類のオーレ
オバシデイウム属に属する微生物が高いポリオー
ル類への変換能を有することを見出し、本発明に
到達したものである。
生物の有用性についてそのポリオール類への変換
能の検索を行なつてきたが、偶々、沖縄県の澱粉
工場の廃カスから分離された不完全菌類のオーレ
オバシデイウム属に属する微生物が高いポリオー
ル類への変換能を有することを見出し、本発明に
到達したものである。
即ち、本発明はオーレオバシデイウム属に属し
ポリオール類生産能を有する微生物をグルコース
などの発酵性糖類を主炭素源として含む培地に接
種し、好気的に培養して培養液中にポリオール類
を生成蓄積せしめ、これを採取することを特徴と
する発酵によるポリオール類の製造方法に関す
る。
ポリオール類生産能を有する微生物をグルコース
などの発酵性糖類を主炭素源として含む培地に接
種し、好気的に培養して培養液中にポリオール類
を生成蓄積せしめ、これを採取することを特徴と
する発酵によるポリオール類の製造方法に関す
る。
尚、本発明於て使用されるオーレオバシデイウ
ム属に属する微生物のポリオール類生産能につい
ては未だ知られておらず、本発明に於て分離、確
認されたオーレオバシデイウムsp.SN―45菌株が
最初のものである。
ム属に属する微生物のポリオール類生産能につい
ては未だ知られておらず、本発明に於て分離、確
認されたオーレオバシデイウムsp.SN―45菌株が
最初のものである。
本発明に於て用いられる微生物オーレオバシデ
イウムsp.SN―45菌株は、次のような菌学的性質
を有する。
イウムsp.SN―45菌株は、次のような菌学的性質
を有する。
1 培地上の生育状況
(1) 顕微鏡的所見
栄養細胞の大きさ(〓1) 8〜10×8μ
栄養細胞の形 状(〓1) 単胞、卵形又は
楕円形 栄養細胞の増殖法(〓1) 多極出芽 菌 糸 体(〓2) 真正菌糸を形成
し、側面に出芽
型分生子を多数
生ずる。
楕円形 栄養細胞の増殖法(〓1) 多極出芽 菌 糸 体(〓2) 真正菌糸を形成
し、側面に出芽
型分生子を多数
生ずる。
(註)〓1 YM寒天培地に27℃、5日間培
養 〓2 ポテトグルコース寒天によるスライ
ド培養 (2) 寒天斜面(〓3) 生育 良好 光沢 無し 色調 3日以上培養すると白色クリーム状か
ら暗色、黒色のコロニーとなる。
養 〓2 ポテトグルコース寒天によるスライ
ド培養 (2) 寒天斜面(〓3) 生育 良好 光沢 無し 色調 3日以上培養すると白色クリーム状か
ら暗色、黒色のコロニーとなる。
(註)〓3 YM寒天培地
(3) 液体培養(〓4)
表面生育 皮膜形成
濁 度 透明
沈 査 大
(註)〓4 YM液体培地
2 子のう胞子の形成
ポテトグルコース寒天培地 形成せず
コーンミール寒天培地 形成せず
YM寒天培地 形成せず
ニンジンエキス寒天培地 形成せず
V8寒天培地 形成せず
3 生理学的性質
酸素要求性 好気的
生育温度 20〜37℃
最適生育温度 34℃
生育PH 2.5〜9.0
最適生育PH 5.0〜7.0
KNO3資化性(〓5) 有り
(NH4)2SO4資化性(〓5) 有り
脂肪の分解(〓6) 無し
尿素の分解 有り
ゼラチンの液化 有り
スクロースの
生育可能最高濃度(〓7) 約60%
生育最適濃度(〓7) 約20%
カロチノイドの生成 無し
有機酸の生成 有り
デンプン様物質の生成 無し
ビタミンの要求性(〓5) 無し
(註)〓5 Wickerhamの合成培地を用い
たJ.Lodderらの方法により判定 〓6 牛脂を使用 〓7 液体培地 4 糖の発酵性(〓5) グルコース + ラクトース − ガラクトース + メリビオース − スクロース + ラフイノース + マルトース + 5 糖の資化性(〓5) グルコース + D―キシロース + ガラクトース + エリスリトール + D―アラビノース + L―アラビノース + D―ソルボース + L―ソルボース + D―リボース + スクロース + L―ラムノース + マルトース + エタノール − セロビオース − グリセロール + トレハロース + アドニール + ラクトース + ズルシトール + メリビオース + D―マンニトール + ラフイノース + D―ソルビトール + メレジトース + α―メチル―D―グルコシド + イヌリン + サリシン − イノシトール + 可溶性デンプン + DL―乳酸 − コハク酸 + クエン酸 + 上記のごとき菌学的性質を有する本菌株の分類
学上の位置をTHE GENERA OF FUNGI
SPORULATING IN PURE CULTURE(J.A.
VON ARX;1974年)を参照にして検討した結
果、本菌株はYM寒天培地上での培養後期に於て
白色から黒色のコロニーを形成し、栄養細胞に菌
糸を形成し、多くのBlast sporeを生じ、かつ厚
膜胞子を持つ、などの特徴を有していることから
オーレオバシデイウム属に属するものと考えら
れ、これをオーレオバシデイウムsp.SN―45菌株
と命名した。
たJ.Lodderらの方法により判定 〓6 牛脂を使用 〓7 液体培地 4 糖の発酵性(〓5) グルコース + ラクトース − ガラクトース + メリビオース − スクロース + ラフイノース + マルトース + 5 糖の資化性(〓5) グルコース + D―キシロース + ガラクトース + エリスリトール + D―アラビノース + L―アラビノース + D―ソルボース + L―ソルボース + D―リボース + スクロース + L―ラムノース + マルトース + エタノール − セロビオース − グリセロール + トレハロース + アドニール + ラクトース + ズルシトール + メリビオース + D―マンニトール + ラフイノース + D―ソルビトール + メレジトース + α―メチル―D―グルコシド + イヌリン + サリシン − イノシトール + 可溶性デンプン + DL―乳酸 − コハク酸 + クエン酸 + 上記のごとき菌学的性質を有する本菌株の分類
学上の位置をTHE GENERA OF FUNGI
SPORULATING IN PURE CULTURE(J.A.
VON ARX;1974年)を参照にして検討した結
果、本菌株はYM寒天培地上での培養後期に於て
白色から黒色のコロニーを形成し、栄養細胞に菌
糸を形成し、多くのBlast sporeを生じ、かつ厚
膜胞子を持つ、などの特徴を有していることから
オーレオバシデイウム属に属するものと考えら
れ、これをオーレオバシデイウムsp.SN―45菌株
と命名した。
即ち、本発明の微生物は沖縄県の澱粉工場の廃
カスから常法に従つて純粋分離されたもので、オ
ーレオバシデイウム属に属し、栄養細胞が8〜10
×8〜14μの卵形もしくは楕円形で、多極出芽に
より増殖し、子のう胞子は見られず、真正菌糸が
見られ、殆どの糖類を資化する性質を有し、YM
寒天培地上での生育も速く3日間で白色から黒色
のコロニーとなり、液体培地では皮膜を形成し、
かつ発酵性糖類をエリスリトール、グリセロール
などのポリオール類に変換する能力を有する。
カスから常法に従つて純粋分離されたもので、オ
ーレオバシデイウム属に属し、栄養細胞が8〜10
×8〜14μの卵形もしくは楕円形で、多極出芽に
より増殖し、子のう胞子は見られず、真正菌糸が
見られ、殆どの糖類を資化する性質を有し、YM
寒天培地上での生育も速く3日間で白色から黒色
のコロニーとなり、液体培地では皮膜を形成し、
かつ発酵性糖類をエリスリトール、グリセロール
などのポリオール類に変換する能力を有する。
本菌株は、工業技術院微生物工業技術研究所に
「微生物受託番号 微工研菌寄 第7594号」とし
て寄託されている。
「微生物受託番号 微工研菌寄 第7594号」とし
て寄託されている。
以下に、本発明に係わるポリオール類の製造方
法について述べる。
法について述べる。
本発明に於る培養方法は、通常液体培地を用い
て好気的条件以下に撹はん培養により実施される
ことが望ましい。
て好気的条件以下に撹はん培養により実施される
ことが望ましい。
当該液体培養の主炭素源としてはグルコース、
フルクトース、スクロースなどの糖質が使用され
るが、これらの糖質の培地中に於る量的割合とし
ては10〜40%(W/W)、特に好ましくは20〜30%
(W/W)の範囲で添加使用されることが好まし
い。窒素源としては微生物により利用可能な窒素
化合物、例えば酵母エキス、ペプトン、麦芽エキ
ス、コーンスチープリカーなどが使用されるが、
酵母エキス、コーンスチープリカーなどが特に好
ましい。また、培地に加える無機塩類としては例
えばリン酸、マグネシウム、カルシウム、カリウ
ム、鉄などの塩類が使用される。更に、必要に応
じて酵母の生育に必要な各種の有機物、無機物な
どを培地に添加することが出来る。
フルクトース、スクロースなどの糖質が使用され
るが、これらの糖質の培地中に於る量的割合とし
ては10〜40%(W/W)、特に好ましくは20〜30%
(W/W)の範囲で添加使用されることが好まし
い。窒素源としては微生物により利用可能な窒素
化合物、例えば酵母エキス、ペプトン、麦芽エキ
ス、コーンスチープリカーなどが使用されるが、
酵母エキス、コーンスチープリカーなどが特に好
ましい。また、培地に加える無機塩類としては例
えばリン酸、マグネシウム、カルシウム、カリウ
ム、鉄などの塩類が使用される。更に、必要に応
じて酵母の生育に必要な各種の有機物、無機物な
どを培地に添加することが出来る。
培養は、前記組成からなる液体培地に微生物菌
体を直接接種するか、又は、別に前培養によつて
得られる種培養液を接種して行なわれる。この種
培養液の調製は、例えば前記のごとき本培養と同
様な組成からなる液体培地に直接菌体を接種して
33〜36℃の温度で2〜3日間程度培養することに
より可能である。
体を直接接種するか、又は、別に前培養によつて
得られる種培養液を接種して行なわれる。この種
培養液の調製は、例えば前記のごとき本培養と同
様な組成からなる液体培地に直接菌体を接種して
33〜36℃の温度で2〜3日間程度培養することに
より可能である。
培養温度は微生物が生育しうる範囲内、即ち30
〜37℃で行なわれるが、特に好ましくは33〜36℃
の範囲である。
〜37℃で行なわれるが、特に好ましくは33〜36℃
の範囲である。
また、培地のPHは3.5〜8.0、好ましくは4.5〜
5.5の範囲で調節される。
5.5の範囲で調節される。
培養期間は使用する培地の種類及び主炭素源で
ある糖質の濃度により異なるが、通常5〜6日間
程度である。
ある糖質の濃度により異なるが、通常5〜6日間
程度である。
本発明に於る培養は、培地の栄養源が最大限に
利用され、かつ培養液中のポリオール類の生成量
が最高に達した時点で培養を終了させることが望
ましい。
利用され、かつ培養液中のポリオール類の生成量
が最高に達した時点で培養を終了させることが望
ましい。
尚、培養液中のポリオール類生成量はガスクロ
マトグラフイー、高速液体クロマトグラフイーな
どの周知の方法を用いて速やかに測定することが
出来る。
マトグラフイー、高速液体クロマトグラフイーな
どの周知の方法を用いて速やかに測定することが
出来る。
かくして、培養液中に蓄積されたポリオール類
は次いで常法に従つて培養液中から分離される。
即ち、かかる場合に当該分野に於て通常使用され
ている周知の手段、例えばろ過、遠心分離、イオ
ン交換又は吸着クロマトグラフイー、溶媒抽出、
蒸留、結晶化などの操作が必要に応じて適宜組み
合せて用いられる。一例を挙げれば、培養液から
ろ過、遠心分離などによつて菌体を除去し、次い
でこの液を活性炭で処理して着色物質などを除
き、更にイオン交換樹脂により脱イオンした後、
液を濃縮してシロツプとする。次に、このシロツ
プからエリスリトールを結晶化して分離し、更に
エリスリトールを分離した後の母液は、これを更
に減圧(真空)蒸留により精製してグリセロール
を得る。
は次いで常法に従つて培養液中から分離される。
即ち、かかる場合に当該分野に於て通常使用され
ている周知の手段、例えばろ過、遠心分離、イオ
ン交換又は吸着クロマトグラフイー、溶媒抽出、
蒸留、結晶化などの操作が必要に応じて適宜組み
合せて用いられる。一例を挙げれば、培養液から
ろ過、遠心分離などによつて菌体を除去し、次い
でこの液を活性炭で処理して着色物質などを除
き、更にイオン交換樹脂により脱イオンした後、
液を濃縮してシロツプとする。次に、このシロツ
プからエリスリトールを結晶化して分離し、更に
エリスリトールを分離した後の母液は、これを更
に減圧(真空)蒸留により精製してグリセロール
を得る。
次に実施例を示し、本発明の態様を更に具体的
に説明する。
に説明する。
実施例 1
グルコース30%(W/W)、酵母エキス(Difco
製)1.0%、KH2PO40.02%を含む培地50mlを綿栓
した500mlの三角フラスコに入れ、120℃、15分間
滅菌した。放冷後、培地のPHを無菌的に5.0に調
整した。このフラスコにオーレオバシデイウム
sp.SN―45菌株「微工研菌寄第7594号」を接種
し、30℃、220rpmで11日間振とう培養を行なつ
た。その結果、この培養液中に2.0gのエリスリ
トールが蓄積した。
製)1.0%、KH2PO40.02%を含む培地50mlを綿栓
した500mlの三角フラスコに入れ、120℃、15分間
滅菌した。放冷後、培地のPHを無菌的に5.0に調
整した。このフラスコにオーレオバシデイウム
sp.SN―45菌株「微工研菌寄第7594号」を接種
し、30℃、220rpmで11日間振とう培養を行なつ
た。その結果、この培養液中に2.0gのエリスリ
トールが蓄積した。
この培養液を遠心分離し菌体を分離した後、活
性炭処理及びイオン交換樹脂(IRA―410:IR―
120B=2:1)による脱塩を行なつた。次いで、
エタノール抽出を行ない、これを濃縮し、冷所
(5℃)保存することにより結晶を得た。生成し
た結晶をエタノールより再結晶して得られた白色
結晶は、融点121℃で甘味を有していた。高速液
体クロマトグラフイー、TMS誘導体によるガス
クロマトグラフイーの保持時間による同定及び旋
光度の測定結果から、この結晶はエリスリトール
と確認された。
性炭処理及びイオン交換樹脂(IRA―410:IR―
120B=2:1)による脱塩を行なつた。次いで、
エタノール抽出を行ない、これを濃縮し、冷所
(5℃)保存することにより結晶を得た。生成し
た結晶をエタノールより再結晶して得られた白色
結晶は、融点121℃で甘味を有していた。高速液
体クロマトグラフイー、TMS誘導体によるガス
クロマトグラフイーの保持時間による同定及び旋
光度の測定結果から、この結晶はエリスリトール
と確認された。
実施例 2
グルコース40%(W/W)、酵母エキス0.5%、
KH2PO40.02%からなる培地50mlを500mlの三角
フラスコに入れ滅菌した。放冷後、培地のPHを無
菌的に7.0に調整した。このフラスコにオーレオ
バシデイウムsp.SN―45菌株「微工研菌寄第7594
号」を接種し、30℃、220rpmで15日間振とう培
養を行なつた。
KH2PO40.02%からなる培地50mlを500mlの三角
フラスコに入れ滅菌した。放冷後、培地のPHを無
菌的に7.0に調整した。このフラスコにオーレオ
バシデイウムsp.SN―45菌株「微工研菌寄第7594
号」を接種し、30℃、220rpmで15日間振とう培
養を行なつた。
その結果、この培養液中には4.8gのエリスリ
トール及び1.2gのグリセロールが蓄積した。
トール及び1.2gのグリセロールが蓄積した。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 オーレオバシデイウム属に属しポリオール類
生産能を有する微生物をグルコースなどの発酵性
糖類を主炭素源として含む培地に接種し、好気的
に培養して培養液中にポリオール類を生成蓄積せ
しめ、これを採取することを特徴とする発酵によ
るポリオール類の製造方法。 2 生成するポリオール類が主としてエリスリト
ールである特許請求の範囲第1項記載の方法。 3 オーレオバシデイウム属に属する微生物が、
オーレオバシデイウムsp.SN―45菌株(微工研菌
寄第7594号)である特許請求の範囲第1項記載の
方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP15320884A JPS6131091A (ja) | 1984-07-25 | 1984-07-25 | 発酵によるポリオ−ル類の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP15320884A JPS6131091A (ja) | 1984-07-25 | 1984-07-25 | 発酵によるポリオ−ル類の製造方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS6131091A JPS6131091A (ja) | 1986-02-13 |
JPS639831B2 true JPS639831B2 (ja) | 1988-03-02 |
Family
ID=15557406
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP15320884A Granted JPS6131091A (ja) | 1984-07-25 | 1984-07-25 | 発酵によるポリオ−ル類の製造方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS6131091A (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0304915A1 (en) | 1987-08-25 | 1989-03-01 | Mitsubishi Kasei Corporation | Compression-moldet meso-erythritol products. |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4939091A (en) * | 1986-09-09 | 1990-07-03 | Director Of National Food Research Institute, Ministry Of Agriculture, Forestry And Fisheries | Novel auerobasidium sp. microorganisms, method for obtaining the same and method for preparing erythritol with the same |
JPS63196298A (ja) * | 1987-02-06 | 1988-08-15 | Natl Food Res Inst | 新規微生物 |
JPH0734749B2 (ja) * | 1988-02-03 | 1995-04-19 | 日本碍子株式会社 | エリスリトールの製造方法 |
JP4151089B2 (ja) * | 1997-10-07 | 2008-09-17 | 三菱化学株式会社 | 高純度エリスリトール結晶の製造方法 |
US9133554B2 (en) | 2006-02-08 | 2015-09-15 | Dynamic Food Ingredients Corporation | Methods for the electrolytic production of erythritol |
-
1984
- 1984-07-25 JP JP15320884A patent/JPS6131091A/ja active Granted
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0304915A1 (en) | 1987-08-25 | 1989-03-01 | Mitsubishi Kasei Corporation | Compression-moldet meso-erythritol products. |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS6131091A (ja) | 1986-02-13 |
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
EXPY | Cancellation because of completion of term | ||
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