JPS6261969A - アクリジニウムエステルの合成法 - Google Patents
アクリジニウムエステルの合成法Info
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- JPS6261969A JPS6261969A JP21051486A JP21051486A JPS6261969A JP S6261969 A JPS6261969 A JP S6261969A JP 21051486 A JP21051486 A JP 21051486A JP 21051486 A JP21051486 A JP 21051486A JP S6261969 A JPS6261969 A JP S6261969A
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- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
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- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D219/00—Heterocyclic compounds containing acridine or hydrogenated acridine ring systems
- C07D219/04—Heterocyclic compounds containing acridine or hydrogenated acridine ring systems with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the ring system
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/531—Production of immunochemical test materials
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- G01N33/533—Production of labelled immunochemicals with fluorescent label
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明はアクリジニウムエステルの合成法に関する。
（従来技術）
アクリジニウムエステルはたとえばこれらを蛋白質また
は変性核酸に化学的に結合させることにより高分子を標
識するために使用できる化学発光化合物である（カンイ
ルら、欧州特許出願第００８２６３６号：およびモツク
らの“標識核酸”と題する米国特許出願第７６６０３８
号明細書、本出願と同一の譲受人に譲渡：ここに参考と
して引用する）。この種の高分子にこれまで用いられて
きた放射性標識と比較して、この種のエステル標識は高
分子を他の高分子に対する結合性に著しい影響を与える
ことなく比較的安全に検出するのを可能にした。
は変性核酸に化学的に結合させることにより高分子を標
識するために使用できる化学発光化合物である（カンイ
ルら、欧州特許出願第００８２６３６号：およびモツク
らの“標識核酸”と題する米国特許出願第７６６０３８
号明細書、本出願と同一の譲受人に譲渡：ここに参考と
して引用する）。この種の高分子にこれまで用いられて
きた放射性標識と比較して、この種のエステル標識は高
分子を他の高分子に対する結合性に著しい影響を与える
ことなく比較的安全に検出するのを可能にした。
アクリジニウムエステルの合成についてはウイークスら
により記述され（１９８３年、クリニカル・ケミストリ
ー、２９ ：１４７４）、第１図に示される。第１図を
参照すると一般に塩化アクリジン−９−カルボニル（種
３）が対応するアクリジン（種１）からレームシュテッ
トらの方法（ベリヒテ、１９２８．６１：２０４４）に
より合成され、種３からまず保護基を付加しく種４）、
矢いで除去する（種５）二工程法により誘導された櫃６
をメチル化することにより目的とするエステル（種７）
が得られる。
により記述され（１９８３年、クリニカル・ケミストリ
ー、２９ ：１４７４）、第１図に示される。第１図を
参照すると一般に塩化アクリジン−９−カルボニル（種
３）が対応するアクリジン（種１）からレームシュテッ
トらの方法（ベリヒテ、１９２８．６１：２０４４）に
より合成され、種３からまず保護基を付加しく種４）、
矢いで除去する（種５）二工程法により誘導された櫃６
をメチル化することにより目的とするエステル（種７）
が得られる。
（発明の構成）
本発明は蛋白質または変性核酸に直接に結合しつるアク
リジニウムエステルを合成するための改良法を提供する
。一般に、本発明方法においては、Ｃ＝〇 〔式中８２およびＲ５はそれぞれ無関係に、Ｒ４と下記
の式（２）のＯＨ基との特異的結合の化学を妨げない置
換基であり、ルおよびｐはそれぞれ無関係に１〜４であ
り、ただしＲ２およびＲ１はそれぞれ同一でも異なって
もよく：Ｒ４は脱離基、たとえばルーヒドロキシスクシ
ンイミド、イミダゾール、またはそれらの同族体（たと
えばトリアゾールもしくはテトラゾール）の残基または
ノ・ライドである〕の化合物を次式 ％式％） 〔式中Ｒ６は上記の種またはこれが一部をなす分子の残
部と実質的に非反応性の置換基たとえばエチル、Ｏ−メ
チル、Ｓ−メチル、カルボキシメチル、Ｎ、Ｎ−ジメチ
ルアミド、）・ライド、アジド、ＮＣ８゜ υ または （式中８１はＨ，ｔたは１〜３０個の炭素原子を含む脂
肪族鎖であり、これはたとえばアルキル基アルケニル基
、アルキニル基またはアリール基により置換されていて
もよく；Ｘは無であるか、ハライドまたは脱離基、たと
えばバークロレート、フルオロスルホネート、ヨーシト
もしくはサルフェート残基であり；Ｒ５およびＲ７はそ
れぞれ無関係にＨまたはアルキル基（炭素原子１〜３０
個）であり、ＲｏとＲ７は同一でも異なってもよい）で
あり：ｑは１〜４であり：各８５はそれぞれ同−でも′
Ａなってもよく；Ｚは誘導体化された核酸（モツクら、
前掲）または蛋白質上のアミン基と反応しつる基、たと
えば υ Ｎ、。
リジニウムエステルを合成するための改良法を提供する
。一般に、本発明方法においては、Ｃ＝〇 〔式中８２およびＲ５はそれぞれ無関係に、Ｒ４と下記
の式（２）のＯＨ基との特異的結合の化学を妨げない置
換基であり、ルおよびｐはそれぞれ無関係に１〜４であ
り、ただしＲ２およびＲ１はそれぞれ同一でも異なって
もよく：Ｒ４は脱離基、たとえばルーヒドロキシスクシ
ンイミド、イミダゾール、またはそれらの同族体（たと
えばトリアゾールもしくはテトラゾール）の残基または
ノ・ライドである〕の化合物を次式 ％式％） 〔式中Ｒ６は上記の種またはこれが一部をなす分子の残
部と実質的に非反応性の置換基たとえばエチル、Ｏ−メ
チル、Ｓ−メチル、カルボキシメチル、Ｎ、Ｎ−ジメチ
ルアミド、）・ライド、アジド、ＮＣ８゜ υ または （式中８１はＨ，ｔたは１〜３０個の炭素原子を含む脂
肪族鎖であり、これはたとえばアルキル基アルケニル基
、アルキニル基またはアリール基により置換されていて
もよく；Ｘは無であるか、ハライドまたは脱離基、たと
えばバークロレート、フルオロスルホネート、ヨーシト
もしくはサルフェート残基であり；Ｒ５およびＲ７はそ
れぞれ無関係にＨまたはアルキル基（炭素原子１〜３０
個）であり、ＲｏとＲ７は同一でも異なってもよい）で
あり：ｑは１〜４であり：各８５はそれぞれ同−でも′
Ａなってもよく；Ｚは誘導体化された核酸（モツクら、
前掲）または蛋白質上のアミン基と反応しつる基、たと
えば υ Ｎ、。
（式中Ｖはアルキル基またはフェニル基であり、１≦ル
≦３０であり、Ｒ８、Ｒ７およびＸは前記のものである
）、 （式中くル≦３０である）、 ｒ） （式中１≦ｎ≦３０である）、 （式中Ｗはハロゲン原子、好ましくは臭素原子である）
、 チオシアネートまたけイミダゾール（またはその同族体
、たとえばトリアゾールおよびテトラゾール）である〕
の第２の種と無水ピリジンの存在下で反応させる。得ら
れる生成物を、極性分離（ｐｏｌａｒ ５ｅｐａｒｃＬ
ｔｉｏｎ） （フラッシュクロマトグラフィーな用いて
）により、または疎水性（逆相クロマトグラフィーを用
いて）により精製される。
≦３０であり、Ｒ８、Ｒ７およびＸは前記のものである
）、 （式中くル≦３０である）、 ｒ） （式中１≦ｎ≦３０である）、 （式中Ｗはハロゲン原子、好ましくは臭素原子である）
、 チオシアネートまたけイミダゾール（またはその同族体
、たとえばトリアゾールおよびテトラゾール）である〕
の第２の種と無水ピリジンの存在下で反応させる。得ら
れる生成物を、極性分離（ｐｏｌａｒ ５ｅｐａｒｃＬ
ｔｉｏｎ） （フラッシュクロマトグラフィーな用いて
）により、または疎水性（逆相クロマトグラフィーを用
いて）により精製される。
純粋なこの種を次いで好ましくはフルオルスルホン酸メ
チル、ヨウ化メチル、硫酸ジメチル、によリアルキル化
して、目的のアクリジニウムエステル； Ｃ＃Ｏ を・構造する。
チル、ヨウ化メチル、硫酸ジメチル、によリアルキル化
して、目的のアクリジニウムエステル； Ｃ＃Ｏ を・構造する。
上記の合成は保乃および脱保護の各工程を必要とぜずに
行われ、市販の出発物質を使用して、約２５％の総数率
をもつ。
行われ、市販の出発物質を使用して、約２５％の総数率
をもつ。
本発明の他の特色および利点は本発明の好ましい実施・
用様に［（Ｘコする下記の記述から、および特許請求の
範囲の記載から明らかであろう。
用様に［（Ｘコする下記の記述から、および特許請求の
範囲の記載から明らかであろう。
図面についてまずｔｌＸ）単に記述する。
２任１１ヅＩはウィークス島ｒ蒲才ｈ）≠：讐ｒコ述１
−六−アクリジニウムエステル合成に関する反応過程を
示す工程図である。
−六−アクリジニウムエステル合成に関する反応過程を
示す工程図である。
第２図はアクリジニウム合成に関する本発明の一般的反
応過程を示す工程図である。
応過程を示す工程図である。
構造
変性核酸の標識に有用なものを含めてアクリジニウムエ
ステルはウィークスら（前掲）、カン桑らの欧州特許ｍ
００８２６３６号、マツクカプラらの英国特許第１，４
６１，８７７号、およびンーハンの米国特許第３，５３
９．５７４芳容明細書に記載されている。これらをすべ
て０こに参考として引用する。本発明によるアクリジニ
ウムエステルは第２図にａｔ ＩＶとして示した一般式
をもつ。関連の基Ｅ１ＺおよびＸは後記のものである。
ステルはウィークスら（前掲）、カン桑らの欧州特許ｍ
００８２６３６号、マツクカプラらの英国特許第１，４
６１，８７７号、およびンーハンの米国特許第３，５３
９．５７４芳容明細書に記載されている。これらをすべ
て０こに参考として引用する。本発明によるアクリジニ
ウムエステルは第２図にａｔ ＩＶとして示した一般式
をもつ。関連の基Ｅ１ＺおよびＸは後記のものである。
種ｒ
第２図を参照すると１．（重Ｉけ一般に種Ｉと■の特異
的結合を妨げることなく種ＩＩＩを与える非求核性の基
により置換されている；ウィークスら（前掲）の記載に
よる。硅・削には、Ｒ２およびＲ１はＨ、アルキル基（
炭素原子１〜３０個の脂肪族鎖）ニジ置換アミン基（た
とえばジエチルアミノ基または炭素原子１〜３０個の他
のアルキル置換体：その際アルキル基はそれぞれ同一で
も異なってもよい）、アルコキシ基、ニトロ基、または
ハライドであり：ｎおよびｐ￥′ｉ、互いに無関係に１
〜４であり；Ｒ１およびＲ１はそれぞれ同一でも異なっ
てもよい。Ｒ４は離脱する基、たとえばＮ−ヒ下ロキシ
スクシンイミド、イミダゾール、またはハライドである
。
的結合を妨げることなく種ＩＩＩを与える非求核性の基
により置換されている；ウィークスら（前掲）の記載に
よる。硅・削には、Ｒ２およびＲ１はＨ、アルキル基（
炭素原子１〜３０個の脂肪族鎖）ニジ置換アミン基（た
とえばジエチルアミノ基または炭素原子１〜３０個の他
のアルキル置換体：その際アルキル基はそれぞれ同一で
も異なってもよい）、アルコキシ基、ニトロ基、または
ハライドであり：ｎおよびｐ￥′ｉ、互いに無関係に１
〜４であり；Ｒ１およびＲ１はそれぞれ同一でも異なっ
てもよい。Ｒ４は離脱する基、たとえばＮ−ヒ下ロキシ
スクシンイミド、イミダゾール、またはハライドである
。
種［
第２図を参照すると、種■は一般に種Ｉと反応し、かつ
変性核酸または蛋白質に結合することができる。詳細に
は、Ｒ５は実質的に種■と非反応性である（従って種■
と■の反応は［１のＲ４と種１のＯＨで生じる）か、あ
るいは［１１の残部と非反応性である（従って種■のジ
アミンは形成されない）ような基であればいずれの基で
もよい。
変性核酸または蛋白質に結合することができる。詳細に
は、Ｒ５は実質的に種■と非反応性である（従って種■
と■の反応は［１のＲ４と種１のＯＨで生じる）か、あ
るいは［１１の残部と非反応性である（従って種■のジ
アミンは形成されない）ような基であればいずれの基で
もよい。
たとえばＲ５は下記のものである。エチル、Ｑ−メチル
、Ｓ−メチル、カルボキシメチル、Ｎ、Ｎ−ジメチルア
ミド、ハライド、アジド、ＮＣ８゜または （式中Ｒ１はＨｌまたは１〜３０個の炭素原子を含む脂
肪族鎖であり、これはアルキル基、アルケニル基、アル
キニル基またはアリール基により置換されていてもよく
：Ｘは無であるか、ハライドまたけ脱離基、たとえばフ
ルオルスルホン醒メチル残基であり：Ｒ６およびＲ７は
互いに無関係にＨまたはアルキル基（炭素原子１〜３０
個）であり、Ｒ６とＲ？は同一でも異なってもよい）。
、Ｓ−メチル、カルボキシメチル、Ｎ、Ｎ−ジメチルア
ミド、ハライド、アジド、ＮＣ８゜または （式中Ｒ１はＨｌまたは１〜３０個の炭素原子を含む脂
肪族鎖であり、これはアルキル基、アルケニル基、アル
キニル基またはアリール基により置換されていてもよく
：Ｘは無であるか、ハライドまたけ脱離基、たとえばフ
ルオルスルホン醒メチル残基であり：Ｒ６およびＲ７は
互いに無関係にＨまたはアルキル基（炭素原子１〜３０
個）であり、Ｒ６とＲ？は同一でも異なってもよい）。
ｑは１〜４であり、各Ｒ５はそれぞれ同一でも異なって
もよい。Ｚは変性核酸（モツクら、前掲）またけ蛋白質
に結合しつる基、たとえば下記のものである。
もよい。Ｚは変性核酸（モツクら、前掲）またけ蛋白質
に結合しつる基、たとえば下記のものである。
ＮＣ８。
Ｎ、。
〔式中Ｖはアルキル基（好ましくは１〜４個の炭素原子
をもつもの）またはフェニル基であり、１≦ル≦３０で
あり、Ｒｏ、Ｒ７およびＸは前記のものである〕、 υ （式中ｌ≦ｎ≦３０である）、 （式中１≦ル≦３０である）、 −ｃＨ，−ｃ−ｃ４−ｗ （ｕ）（
式中Ｗはハロゲン原子、好壕しくけ臭素原子である）。
をもつもの）またはフェニル基であり、１≦ル≦３０で
あり、Ｒｏ、Ｒ７およびＸは前記のものである〕、 υ （式中ｌ≦ｎ≦３０である）、 （式中１≦ル≦３０である）、 −ｃＨ，−ｃ−ｃ４−ｗ （ｕ）（
式中Ｗはハロゲン原子、好壕しくけ臭素原子である）。
Ｚはさらに、チオシアネートまたはイミダゾールまたは
それらの同族体、たとえばトリアゾールおよびテトラゾ
ールであってもよい。
それらの同族体、たとえばトリアゾールおよびテトラゾ
ールであってもよい。
フェニル基は種【とＨの特異的反応を妨げないスイーサ
ー分子を介してＺに結合しつる。この種のスイーサーは
、希望しない目的外の反応に関与する反応性基、たとえ
ば水酸基、アミン基、カルボキシル基またはチオール基
を含まないことが好ましい。
ー分子を介してＺに結合しつる。この種のスイーサーは
、希望しない目的外の反応に関与する反応性基、たとえ
ば水酸基、アミン基、カルボキシル基またはチオール基
を含まないことが好ましい。
種■をアルキル化剤でアルキル化して基Ｒ，Ｘ−（Ａ’
＋およびＸは前記のものである）を導入する。
＋およびＸは前記のものである）を導入する。
好ましいアルキル化剤はフルオルスルホン酸メチル、ヨ
ウ化メチル−または硫酸ジメチルである。
ウ化メチル−または硫酸ジメチルである。
合成法
第２図を参照すると、種■は第１図に示すように対応す
るアタリジンまたは酸から容易に得られ（レームシュテ
ットら、前掲）、種■は容易に入手できる（アルドリッ
チ）。これらの２種を無水ピリジンの存在下で約１５〜
６０分間混合し、得られた種を精製する。この生成した
種（種■）を、一般に極性分離により、または疎水性に
よって、未反応の種Ｉおよび■から精製する。好ましい
方法はシリカゲルもしくは中性アルミナのクロマトグラ
フィーまたは逆相Ｃ−１８クロマトグラフイーである。
るアタリジンまたは酸から容易に得られ（レームシュテ
ットら、前掲）、種■は容易に入手できる（アルドリッ
チ）。これらの２種を無水ピリジンの存在下で約１５〜
６０分間混合し、得られた種を精製する。この生成した
種（種■）を、一般に極性分離により、または疎水性に
よって、未反応の種Ｉおよび■から精製する。好ましい
方法はシリカゲルもしくは中性アルミナのクロマトグラ
フィーまたは逆相Ｃ−１８クロマトグラフイーである。
最終のアルキル化反応はワイークら（前掲）に従って行
われる。この種の反応の例を以下に示す。
われる。この種の反応の例を以下に示す。
実施例
アクリジン−９−カルボン酸（８７０■）を塩化チオニ
ル（１０ｍ）に添加し、混合物を油浴中で３時間還流し
た。反応混合物を真空中で回転蒸発器により蒸発させ、
乾燥した残渣を無水ピリジン（ｓｏｍ）に６０℃以下に
加熱しながら再溶解した。Ｃの溶液を水浴中で約２０℃
に冷却した。
ル（１０ｍ）に添加し、混合物を油浴中で３時間還流し
た。反応混合物を真空中で回転蒸発器により蒸発させ、
乾燥した残渣を無水ピリジン（ｓｏｍ）に６０℃以下に
加熱しながら再溶解した。Ｃの溶液を水浴中で約２０℃
に冷却した。
ｐ−ヒドロキシフェニルプロピオン酸ルーヒドロキシス
クシンイミドエステル（１，Ｆ）を無水ピリジン（１０
ｍｇ）に溶解し、上記の塩化アクリジン−９−カルボン
酸−ピリジン溶液に撹拌下に添加した。反応混合物を１
５〜３０℃に約３０分間撹拌し、次いで氷水（２５０ｍ
／）に撹拌下に注入した。この混合物を分液ろうとに移
し、酢酸エチル（２５０ｔ／）で抽出した。有機相を分
離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中
で蒸発させた。残渣を無水トルエン（５Ｑｍ）から３回
蒸発させ、無水ジメトキシエタン（１５Ｍ）に再溶解し
た。得られた溶液を１５〜３０℃で約１５時間、遮光容
器に入れた。このインキュベーノヨン期間中に沈殿が生
じた場合は戸去し、溶液をシリカゲルカラム（３００ｇ
）に施し、酢酸エチルおよびヘキサン（２：１）を溶離
液として用いるフラッシュクロマトグラフィー（ダブリ
ュー・シー・ステイルら、ジャーナル・オブ・オーガニ
ック・ケミストリー（１９７８年）、４３巻、２９２３
頁）により精製した。純粋な両分を合わせてテフロン製
の４７正、０．４５μｍのフィルターで濾過し、真空中
で蒸発させた。収率は約３６％であった。これを無水ク
ロロホルム（２５ｍＡ’）に溶解し、混合物にフルオル
スルホン酸メチル（１ｙｔｍｇ）を添加し、これを１５
〜３０℃で約２０時間撹拌した。生じた沈殿を戸別し、
無水トルエンで３回、無水ジメトキシエタンで２回洗浄
した。乾燥した結晶を乾燥状態で遮光下に一２０′Ｃで
保存した。最終的な総数１には純アクリジンエステル約
５５６ｎそ（２５％）である。
クシンイミドエステル（１，Ｆ）を無水ピリジン（１０
ｍｇ）に溶解し、上記の塩化アクリジン−９−カルボン
酸−ピリジン溶液に撹拌下に添加した。反応混合物を１
５〜３０℃に約３０分間撹拌し、次いで氷水（２５０ｍ
／）に撹拌下に注入した。この混合物を分液ろうとに移
し、酢酸エチル（２５０ｔ／）で抽出した。有機相を分
離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中
で蒸発させた。残渣を無水トルエン（５Ｑｍ）から３回
蒸発させ、無水ジメトキシエタン（１５Ｍ）に再溶解し
た。得られた溶液を１５〜３０℃で約１５時間、遮光容
器に入れた。このインキュベーノヨン期間中に沈殿が生
じた場合は戸去し、溶液をシリカゲルカラム（３００ｇ
）に施し、酢酸エチルおよびヘキサン（２：１）を溶離
液として用いるフラッシュクロマトグラフィー（ダブリ
ュー・シー・ステイルら、ジャーナル・オブ・オーガニ
ック・ケミストリー（１９７８年）、４３巻、２９２３
頁）により精製した。純粋な両分を合わせてテフロン製
の４７正、０．４５μｍのフィルターで濾過し、真空中
で蒸発させた。収率は約３６％であった。これを無水ク
ロロホルム（２５ｍＡ’）に溶解し、混合物にフルオル
スルホン酸メチル（１ｙｔｍｇ）を添加し、これを１５
〜３０℃で約２０時間撹拌した。生じた沈殿を戸別し、
無水トルエンで３回、無水ジメトキシエタンで２回洗浄
した。乾燥した結晶を乾燥状態で遮光下に一２０′Ｃで
保存した。最終的な総数１には純アクリジンエステル約
５５６ｎそ（２５％）である。
池の実施９桶もｉｉＩ記の特許請求の範囲に包含される
。
。
第１図は先行技術によるアクリジニウムエステル合成に
関する反応過程を示す工程図である。 第２図はアクリジニウム合成に関する本発明の一般的反
応過程を示す工程図である。 代 理 人 弁理士 湯 浅 恭 三−呵一一一□１
１ （外５名）
関する反応過程を示す工程図である。 第２図はアクリジニウム合成に関する本発明の一般的反
応過程を示す工程図である。 代 理 人 弁理士 湯 浅 恭 三−呵一一一□１
１ （外５名）
Claims (10)
- （１）種 I および種II、すなわち次式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＿２およびＲ＿３はそれぞれ無関係に、種 I
と種IIとの目的とする特異的結合の化学を妨げない置換
基であり、ｎおよびｐはそれぞれ無関係に１〜４であり
、ただし各Ｒ＿２はそれぞれ同一でも異なつてもよく、
各Ｒ＿３はそれぞれ同一でも異なってもよく；Ｒ＿４は
脱離基である）の種 I 、および次式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＿５は種 I または種IIと実質的に非反応性の
置換基であり；ｑは１〜４であり、Ｒ＿５はそれぞれ同
一でも異なつてもよく；Ｚは誘導体化された核酸のアミ
ノ基と反応しうる基である）の種IIの２種からアクリジ
ニウムエステルを合成する方法であつて、 種 I と種IIを共通の溶剤中で反応させて次式▲数式、
化学式、表等があります▼ の第３の種、すなわち種IIIを製造し、 種IIIを精製し、そして 精製された種IIIをアルキル化剤と反応させてアクリジ
ニウムエステルを製造する、 ことよりなる方法。 - （２）精製が酢酸エチルによる抽出からなる、特許請求
の範囲第１項に記載の方法。 - （３）精製がさらにフラッシュクロマトグラフィーまた
は逆相クロマトグラフィーからなる、特許請求の範囲第
２項に記載の方法。 - （４）溶剤、種 I および種IIを１５〜３０℃で１０〜
６０分間混合する、特許請求の範囲第１項に記載の方法
。 - （５）種IIIおよびアルキル化剤を１５〜３０℃で１５
〜２５時間混合する、特許請求の範囲第１項に記載の方
法。 - （６）アルキル化剤がフルオルスルホン酸メチル、ヨウ
化メチル、または硫酸ジメチルである、特許請求の範囲
第１項に記載の方法。 - （７）Ｒ＿５がエチル、Ｏ−メチル、Ｓ−メチル、カル
ボキシメチル、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミド、ハライド、ア
ジド、ＮＣＳ、 ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ または ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中Ｒ＿１はＨまたは１〜３０個の炭素原子を含む脂
肪族鎖（アルキル基、アルケニル基、アルキニル基また
はアリール基１個または２個以上で置換されていてもよ
い）から選ばれ；Ｘは無であるか、ハライドであるか、
または脱離基、すなわちバークロレート、フルオルスル
ホネート、ヨージドおよびサルフェート残基の１つであ
り；Ｒ＿６およびＲ＿７は互いに無関係にＨまたは１〜
３０個の炭素原子を含むアルキル基であり、Ｒ＿６とＲ
＿７は同一でも異なつてもよい〕である、特許請求の範
囲第１項に記載の方法。 - （８）Ｚが下記のアミノ−反応性官能基、すなわち▲数
式、化学式、表等があります▼； ▲数式、化学式、表等があります▼； −Ｎ＿３； ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｖはアルキル基またはフェニル基であり、１≦ｎ
＜３０であり、Ｒ＿６およびＲ＿７は互いに無関係にＨ
または１〜３０個の炭素原子を含むアルキル基であり、
Ｒ＿６とＲ＿７は同一でも異なつてもよく、Ｘは無であ
るか、ハライドまたは脱離基である）、 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中１≦ｎ≦３０である）、 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中１≦ｎ≦３０である）、 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｗはハロゲン原子である）、 チオシアネート、またはイミダゾールもしくはその同族
体の残基の１つを含む、特許請求の範囲第１項に記載の
方法。 - （９）溶剤が無水ピリジンである、特許請求の範囲第１
項に記載の方法。 - （１０）Ｒ＿４がＮ−ヒドロキシスクシンイミド、イミ
ダゾールまたはその同族体（たとえばテトラゾール）の
残基またはハライドである、特許請求の範囲第１項に記
載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
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|---|---|---|---|
| US77337785A | 1985-09-06 | 1985-09-06 | |
| US773377 | 1985-09-06 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6261969A true JPS6261969A (ja) | 1987-03-18 |
Family
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Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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| JP21051486A Pending JPS6261969A (ja) | 1985-09-06 | 1986-09-06 | アクリジニウムエステルの合成法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
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| JP (1) | JPS6261969A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2011503235A (ja) * | 2007-11-20 | 2011-01-27 | シーメンス・ヘルスケア・ダイアグノスティックス・インコーポレーテッド | イオン液体中でのアクリジン化合物の容易なｎ−アルキル化 |
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| DE3844954C2 (de) * | 1988-02-20 | 1998-07-16 | Hoechst Ag | Spezielle chemilumineszierende Acridinderivate und ihre Verwendung in Lumineszenzimmunoassays |
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-
1986
- 1986-09-06 JP JP21051486A patent/JPS6261969A/ja active Pending
- 1986-09-08 EP EP86306911A patent/EP0216553A3/en not_active Withdrawn
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2011503235A (ja) * | 2007-11-20 | 2011-01-27 | シーメンス・ヘルスケア・ダイアグノスティックス・インコーポレーテッド | イオン液体中でのアクリジン化合物の容易なｎ−アルキル化 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0216553A3 (en) | 1989-03-15 |
| EP0216553A2 (en) | 1987-04-01 |
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