JPS62503102A - 眼房水流出増加剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 眼房水流出の増加 発明の背景 本発明は人の眼の障害、特に緑内障の治療に関するものである。

緑内障は少くとも一部には柱（小柱）のメツシュワーク（ｔｒａｂａｅｓｌａｒ 　ｍｍａｈｗｏｒｋ　）を通る眼房水の流出減少から生ずる眼圧ヲ特徴としてい る。

エプスタインら（１９８２年）のＩ％ｖｇａｔ、Ｏｐλｔｈａ−１ｍｏ１．　Ｖ ｉａ、　Ｓｃｉ、２２．６．７５２−７５６は死んだ子牛、マカクザル、および ヒトからの眼にステンレス鋼製の角膜部品を装着した実験を記述している。それ らの眼には、前部を１５ｗＨｒおよび２２℃において充満させることにより、毒 性化合物Ｎ−エチルマレイミド（ＨＥＭ）、スルフヒドリル基と反応性の化合物 、で以て満たした。ｒｍｈｔで４．７またはそれより多いＨＥＭの施用量が子牛 の眼において流出の容易さの者しい増加をもたらす」ことが発見された。「ＮＭ Ｅはまた猿の眼における流出の増加をおこさせた。」その論文はさらに続いてＸ 、する： 我々の結果は細胞−８Ｈ基の化学的変性がまたトラベキュラ・メツシュワーク（ ｔｒａｂｇｃｓｌａｒ　ｔｓｓｇａ五−ｗｏｒｋ）からの眼房水の流出を変える ことができることを示している。眼房水路中の流体の流れに対する細胞の透過性 または細胞間透過性は細胞膜蛋白質スルフヒドリルの状態によって影響されるか もしれない。トラペキュラーＳＨ基は、細管近接の組織あるイハシュレムの導管 の内皮において正常抵抗の部位に位置する場合には脣に、水性流出の正常の過程 において密接１ｃ関係する。また、−８Ｈ基はトラベキュラ細胞膜の非特異的構 造変化を通して流出に第二次的影響のみを及ぼす。

発明の要約 一般的には、本発明は、眼のトラベキュラ・メツシュワークの中のスルフヒドリ ル基と反応することができる１個または１個より多くの基を含み、オクタツール ニ水の分配係数が少くともｏ、ｏｏｓであり、そして、少くとも２、Ｏの安全” ４　（ｍ５ｒｇｉｓ　ｏｆ　ａａｆｇｔｌｌ　）　’ａ’もつことを特徴とする 化合物の、流出Ｉ増加性の蓋を、眼に対して局所的に投与することから成る、ヒ トの患者の眼の中の眼房水流出を増加させる方法を特色としている。その重度の 脂肪親和性（オクタツール：水の分配係数に関して弐現される）はその化合物を 眼の角膜に浸透させ、従って局所的に施用することができる。局所的安全投与は また低毒性（安全率に関して課税される）によって容易と表る。

本発明のもう一つの側面は、有効で低毒性のスルフヒドリル基反応性の基をトラ ベキュラ・メツシュワーク中へ直接的に顕微注射することによって、患者の眼の 中の眼房水流出を増加させることを特色とする。

両投与方法において、好ましい化合物はエタクリン酸またはその同族体、および それらの医薬的に許容できる塩である。

本発明は、最小限度の非訛体関連の眼科的機能をもち々から流体流出を増加させ るような様式で、緑内障の有効で非外科的治療を提供するものである。

不発明のその他の特色と利点はそれに関する好ましい具体化についての以下の記 述と請求の範囲とから明らか上述のと２つ、本発明の方法において有用である化 合物はここでさらに詳細に縞する数多くの性質をもっている。

スルフヒドリル基反応性 それらの化合物はトラベキュラ・メツシュワークのスルフヒドリル基と反応する ことができて眼房水流出を増す化学基を含まねばならない。それらの化合物はま た、トラペキュラ・メツシュワークの細胞、特にシュレム導管内壁の内皮細胞が 許容不能量の膨潤をひきおこさないような球式でスルフヒドリル基と反応せねば ならない。

それは膨潤が匹出量を減らすからである。「許容不能量の膨潤」とは、ここで用 いるときには、化合物の流出増大効果を完全に相殺して正味の流量増２７０をも たらさない膨潤量を意味する。膨潤が特定化合物によってひきおこされるかどう かは、化合物をニブシュタインらの前記文献に記載される系の中で試験し、トラ 、ベキュラ・メツシュワーク細胞を形態学的に検査することによって決定できる 。

適当なスルフヒドリル基反応性の基はｃ＝ｃ、　ｃ＝ｏ。

スルフヒドリル、良好な離脱性の基例えば、Ｉ・ロゲン、トシルまたメシルで以 て置換したアルキル（例えばメチルまたはエチル）およびアリール（例えばフェ ニル）を含む。好１しくに、置換アルキル基の場合には、置換＆工、より大きい 反応性のためには、二級または三級エリはむしろ一級である。

ここで使用するとき、「安全率」とは医薬的に許容できない毒性副効果をひきお こす流出童増犬性化合物の投与量と、オープンアングル（ｏｐｅｎ　ａｓｇｊｇ ）緑内障の進んだ代表的なヒトの患者における眼房水流出量の実質的（すなわち 、医薬的に有用の）増大をもたらす投与量との北軍のことをいう。化合物の安全 率は少くとも２．０、より好ましくは少くとも４．０でなければならない。

また、化合物が有効投与量において眼の中の長期の有害変化をもたらさないこと が重要である。

脂肪親和性 眼に施用されるべき化合物は代表的には角膜に浸透するよう十分に親脂性でなけ ればならない。十分な親脂性は、非極性構造、少くとも一つのアリール基（例え ば置換または非置換フェニル環）、少くとも一つの７％ロゲン原子、および／ま たは疎水性アルキル基によって提供することができる。親脂性にとっては、化合 物が生理学的ｐＨにおいて過度の電荷すなわち２より大きい絶対値をもたないこ とが望ましい。

親脂性は、化合物に放射性標識を与え、少量を、オクタツールおよびトリス緩衝 液（５０悟Ｍ、ｐＨ７，４）の等容積のものの中Ｉｃ４人することによって決定 される、オクタツール：水係数に関して表現される。化合物のその係数は好まし くは少くともｏ、ｏｏｓ、さらに好ましくは少くとも０．０１である。

投与 浦出貴増加性化合物は局所的にまたは顕微注射のいずれかでトラベキュラ・メツ シュワークの中へ投与することができる。局所的投与のためには、化合物を医薬 的に許容できる担体物質、例えば、生理食塩水の中で溶解する。水浴性に限りが ある化合物（例えば、エタクリン酸のナトリウム塩、水中で約０．０ｔＭ’！で たけ可溶）ｒｃついては、液体担体媒体は有機溶剤、例えば３％のメチルセルロ ースを含むことができる。メチルセルロースは、それの高粘度によって、化合物 と版表面との間の接触時間を増し、従って角膜浸透を増す。角膜浸透はまた、角 膜をわずかに中断（ｄｉａｒすｔ）する薬剤、例えば、（１０２５％のベンズア ルコニウムクロライド、と混合した化合物を投与することによって増すことがで きる。

施用は点眼器を使い、化合物の有効量が角膜を通ってトラペキュラ・メツシュワ ークへ与えられるように、溶液状の化合物の滴を周期的に（例えば１回／週から １０回７日）施用することによって行なう。１回の施用において与えられるべき 化合物の量は個々の患者の特徴、例えば病気の重さ、並びに化合物の特性、例え ばトラベキコーラ・メツシュワークのスルフヒドリル基に対する特異的親和性、 および安全率の大きさ、に依存する。代表的には、各部は、化合物の（ＬＯ２５ モルから０．１０モルが毎日各々の眼へ与えられるように、化合物の５５−１Ｏ Ａｆ　浴液の５０−１００マイクロリツトルを含む。

トラベキュラ・メツシュワーク中への可溶化化合物の直接的顕微注射は、必要と される位置において化合物の濃厚化し、一方では、眼に化合物の一般化された露 出を受けさせることから生ずる副効果の恐れを回避する、という利点を提供する 。顕微注射はまた、局所的施用の場合に必要とされる頻度のより多い施用とは対 照的に、頻繁でない、例えば二、三週毎−二、三ケ月毎：さらには二、三年毎と いうような周期的施用を可能にする利点も提供する。また、直接的顕微注射Ｆｉ ａ体流出を妨害する細胞外物質のトラベキュラ・メツシュワークからの洗い出し を促進するかもしれない。顕微注射用の施用黛は、局所的施用の場合と同様、上 述因子とともに変動する。

代表的には、顕微注射量はトラベキュラ・メツシュワーク内の化合物の最終濃度 が０．０１から１．０ｗＭＩＣ達するようなものである。

エタクリン酸の体内使用 エタクリン酸（ナトリウム塩）を使って以下で述べるとおり、マカクザルにおけ る眼房水の流出を増加させた。

エタクリン酸はメルク、シャープ、およびドームから購入することができ、ここ で文献として組入れられている米国特許４３，２５５，２４１　において記述さ れている。エタクリン酸は化学式〔２，３−ジクロロ−４−（２−メチレン−１ −オキシブチル）フェノキシ〕酢酸、をもっ。

米国特許３，２５５，２４１に記載の適当な類似物も本明細において述べるとお りに使用できる。

各動物には、無作為的に一方の眼を実験用に、他方の眼を対照標準の潅注（ｐａ ｒｆｓｔａｔｏ％）に当てた。動物たちは実験前夜断食させた。彼らにメトヘキ シタール・ソジューム１５〜／に９トベントバービタール・ソシウム３５〜／＃ で以て筋肉注射で麻酔をかけた。注射針を角膜を通して前部室中に入れ、二段階 の定圧温性法を眼房水流出の容易さを測定するために、実施した。温性用の基本 媒体は５．５ｖｘＭグルコースを添加したダルベツコの燐酸塩緩衝化離水であっ た。実験溶液または対照標準溶液の１０マイクロリフト、ル（前Ｓ室中で所望最 ｉ濃度をつくり出す）を一度に注入配管中のＴ型遅結部品を通して注入した。

エタクリン酸の各バイアルはエタクリン酸の５Ｏ１１９に相当するエタクリン酸 ナトリウム粉末を含んでいた。不活性成分は６２．５〜のマンニトールと０．１ −のシメロゾ／’　（ｔｈｉｍａｒｏａｏｌ　）　（防腐剤として）であった。

粉末を上記の基本媒体（グルコースを添加したダルベツコ）で以て稀釈し、所望 濃度を得た。溶液を溶解するまで室温で混合し、使用前にｐＨ’ｌ測定しく常に ７．２）、溶液を０．２ミクロンのフィルター（ヌクレボア）で以てテ遇し、こ れによって、２４時間安定である耐液が生成した。

対照標準溶液は９．５ｍｇの塩化ナトリウム（同じ実験溶液を参透圧的に釣合わ せるため）、６２．５１Ｒ９のマンニトール、および（１１−のシメロゾルから 構成され、５．５ｍＷのグルコースを添加したダルベツコの燐酸塩緩衝化鍼水中 に溶かされて所望ｆｉ度を生ずる。

潅注実験中において、一度に１０マイクロリットル全部の注射乞ハミルトン注射 器！使って行なった。猿の前部室は約２００マイクロリツトルであるので、我々 の計算は次のとおりであった。０．５ｎ％ｙエタクリン酸の最終濃度を得るため に、１（１ｗＪ／のエタクリン酸の１０マイクロリツトルヲ池注した。

ｑ６Ｆｉｏ、ｉ愼ｙから０．５惰Ｍの、エタクリン識の眼房水中綴終濃度を使っ て実施した。少くとも３匹の動物が存在し、各々について、０．１　ｍＭ、　０ ．２５９１１Ｍ、　オＬ（ｊＯ，５ｗｃｙの濃度で別々の実験を実施した。

０、５　ｔｓｈ　Ｍ　Ｉｃおいては、エタクロン酸に基因する、流体流出の容易 さの１４０％の平均増が測定され、これに比べ、対照標準の眼においては変化が なかった。ｏ、２５ｔｎＭにおいては、動物の約半数はエタクロン酸に基づく流 出容易さの実質的な増大で以て応答を示し、他の半分は示さなかった。さらに低 い施用量においては、効果がなかった。１匹の動物には１．０ｎａＡ／で溢流し 、実験眼において３５５％の増加を示し、これに比べ、対照標準においては１８ ％の増加であった。

角膜または結晶性レンズの外観上の変化は存在しなかった。％足的にいえば１、 悪性の角膜水旌、にごりまたは白内障の形成は存在しなかった。０．２５ｍＭ） ｌこえる施用においては、動物のいくらかはエタクリン酸処理の眼において片ご 孔の膨張を示した。小数の動物は実験と対照標準の両方の眼において虹彩が周縁 角膜への接着を示したが、これは混注技法自体からのものであって、薬物施用の 結果でないと考えられた。

眼圧は池注実験恢二、三日までは信頼度高く取ることができず（注射針挿入点ン 通る角膜内の洩れの恐れのため）、その時点では眼圧は両方の眼において対称的 で正常であった。

うさぎの実験においては、体重１．５から２４の両方の性のダツチーベルテツド （Ｄｕｔｃｈ−ｈａｌｔｅｄ）ラビットを局所的研究に使った。各動物では無作 為に一方の眼を実験用に、他方の眼を対照標準に当てた。眼圧はディジラブ・ニ ューモトツメ−ター（Ｄｉｇｉｌａｂ　Ｐｖｃａｓｔｎｏｔｏ舊ｏｍｇ　−１ｇ ｒ）を使って測定した。２Ｂより大きい眼圧との非対称性を示す動物はすべてこ の研究から除外した。

原案は次のとおりであった。基底線の眼圧は各々の眼において局所麻酔用に０． ０５％プロパラカイン塩酸塩を使って取った。次に、３％のメチルセルロースに 溶カシた対照標準浴ｇまたはエタクリン酸のどちらかの１００マイクロリットル 滴な二つの眼の片方へ滴らした。半時間でこれを繰返した。２時間後眼圧を各々 の眼において測定した。いくらかの動物においては眼圧は５時間後に測定し、全 動物について眼圧を翌日測定した。

エタクリン酸粉禾を３％のメチルセルロース中でとかして所望濃度を生じさせた 。溶液は室温で１時間混合され、２４時間安定であった。類似の滲透圧的釣合い の対照標準溶液をつくった。３％のメチルセルロースは次のとおりにしてつくっ た：メチルセルロース粉末（４０００センチボイズ）ｙ！１′ダウ・カンパニー から入手した（ロット番号１４７２８）。３％溶液は数時間の低加熱を使って蒸 溜水中で浴かした粉宋からつくった。この溶液’＆　−晩冷凍して透明の粘稠流 体が生じた。この溶液のｐＨＦｉ対煕標準溶液またけ実験浴液の１部を５部の蒸 溜水と混合することによって測定した。ｐＨは対照標準および実験用の両溶液に ついて６．２と６．５の間の範囲にあった。

この３％メチルセルロース溶液は使用しないときには冷凍した。

眼圧データーは次のとおりであった＝８匹の動物における３％メチルセルロース 中の５ｎａｊ／のエタクリン酸については、点眼後２時間で、エタクリン醒処理 の眼の中の眼圧は２２．４から１９．６１ｔｓ　Ｈｙへ低下しく０．０１より小 さいｐ）、一方、対照標準の眼は２１．５から２３．１ＨＨｙへわずかな増加を 示した。翌日は、眼圧は二つの眼において等しく、エタクリン酸処理の眼におい て２２．４であり、対照標準の眼において２２．７であった。

１０ｙ＋ａＭのエタクリン酸と３％のメチルセルロースで以て処理した１４匹の うさぎにおいて、点眼後２４時間で、エタクリン酸処理の眼の眼圧は２３．０か ら２０．ＯＮＭＨｆへ変化し、一方、対照標準の眼においては２２．９から２４ ．２　ｗｍ　Ｈｆへ変化した。ｐは０．００１より小さかった。

５惟ｙ濃度における研究については、施用に続いてわずかに結膜注射を行なった 。他の副効果は認められなかった。１０ｍＭエタクリン酸の中程度（ｔｎｏｄｍ ｒａｔａ）の結膜注射の後では、刺戟の徴候は明瞭であった。

より高い濃度においては、角膜毒性（角膜水ａ）および前部室炎症の徴候は数日 間明らかであった。しかし、これらは明瞭な続発症なしで消滅した。

切取った哺乳動物の眼による試験管実験においては、次のエタクリン酸類似物が 眼の眼房水流出を増加することが示された。

および その他の具体化は次の請求の範囲内にある。

手続補正書 １．事件の表示 ＰＣＴ／ＵＳ８６１０１２９１ 、発明の名称 眼房水流出の増加 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 住所 名　称　マサチューセッツ・アイ・アンド・イア・インファーマリ− ４、代理人 住　所　東京都千代田区大手町二丁目２番１号新大手町ビル　２０６号室 ６、補正の内容 国際調受報告 １ｍ７１ａｅａｌ　Ａｅｏｌ＝ｍ°””　ＰＣＴ／Ｉ＋（＋１６１０１２Ｑ１” ’−”−’　””””　”’　ＰＣＴ／ＵＳ８６１０１２９１ｋ１ｍ４−ｍ−１ ＾帥”””　Ｄｒ〒ＩＮＱＱ（ｓｌｎ１７１）１

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. １．眼の柱のメツシユワーク中のスルフヒドリル基と反応できる１個以上の基を 含み、少なくとも２．０の安全率をもつことを特徴とする化合物の流出増加量を 眼へ局所的に加えることからなる、患者の眼の中において眼房水流出を増加させ る方法。
2. ２．上記の化合物が、少くとも０．００５のオクタノール：水の分配係数をもつ ことをさらに特徴とする、請求の範囲第１項に記載の方法。
3. ３．患者の眼の中において眼房水流出を増加させる方法であつて、 柱のメツシユワーク中のスルフヒドリル基と反応できる１個以上の基を含み、か つ、少くとも２．０の安全率をもつ、ことを特徴とする化合物の流出増加量を、 上記の眼の柱のメツシユワークへ顕微注射によつて加えることから成る、方法。
4. ４．上記の流出増加性化合物がエタクリン酸またはその類似物、あるいは、それ らの医薬的に許容できる塩であつて、上記エタクリン酸類似物が ▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、 化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼および▲数式、化 学式、表等があります▼から選ばれる、請求の範囲第１項または第３項に記載の 方法。
5. ５．上記の流出増加性化合物がエタクリン酸またはそれの医薬的に許容できる塩 である、請求の範囲第４項に記載の方法。