JPS62502935A - １−メチル−１，４−アンドロスタジェン−３，１７‐ジオンの製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 １−メチル−１，４−アンドロスタジエン−３，１７−シオンの製法 本発明による方法は通常微生物−培地を用いる基質の微生物的脱水素化の際適用 される、条件下に実施する。そこで最初に、一般に常用の予備試験で、たとえば 最も有利な栄養媒体、好適な基質溶剤または懸濁剤、基質濃度、温度、脱気、Ｐ Ｈ−価のような技術的条件および発芽、基質酢加および微生物の酵素での基質接 触のための最適の時間、の選択のような最も有利な１発酵条件を分析的に、殊に 薄層クロマトグラフィーで確定その際栄養媒体を当り、基質約１００〜２０００ ｍ９の濃度を使用するのが有利であると示されたｅ　ＰＨ−価は有利に５〜７の 値に調節する。培養温度は２０〜４０℃、有利に２５〜３５℃である。脱気のた めに培養液を当り、１分間に空気を有利に０．５〜５を導入する。基質の変換を 有利に試料抽出の分析により追跡する。

この発酵のために必要とされる微生物は尋問分野で認められた微生物−集合を自 由に使用する。好適な種はノルカルブイア　コラリナ（Ｎｏｒｃａｒｄｉａ　ｃ ｏｒａｌｌｉｎａ）ＡＴＣＣ１４３５０のようなノルカルシア（Ｎｏｒｃａｒｄ ｉａ）、ミコバクテリウムｃｔドクボース（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｏ ｄｏｃｈｖｏｕｓ　）　ＡＴＣＣ４２７６のようなミコバクテリウム（Ｍｙｃｏ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ　）またはフサリウム　ソラニ（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　５ｏｌ ａｎｉ　）　ＡＴＣＣ１２Ｂ　２ろのようなフサリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　） である。

行われた発酵後、発酵生成物を自体公知の方法で単離する。単離はたとえは、発 酵バッチを酢酸エチル、酢酸ブチルまたはメチルイソブチルケトンのような水と 混合できない有機溶剤で抽出し、抽出物を濃縮し、このようにして得られた粗生 成物を場合によりクロマトグラフィーおよび／または結晶によりＮ製するという 方法で行う。

次の実施例で本発明による方法を詳述する。

例　１ ２ｔエルレンマイヤーフラスコ中０．５％デキストロース−水和物、０．５％酵 母抽出物、０，２％コーンスチーノリカーおよび０．１％ペプトンから成る、ｐ Ｈ７−５の１２０℃で６０分間オートクレーブ中で滅菌された栄養溶液５００ｔ ｒｔｌｋ種ノルカルディア　コラリナＡＴＣＣ１４３５０の斜面寒天培地に接種 し、回転振とり装置で６０°Ｃで４８時時間表うする。

この培養培地２５０ｄに、１２１℃および１．１バールの過圧で６０分間滅菌さ れた、培養培地と同じ組成の栄養媒体１５Ｌが装入されている、予備発酵物を接 種する。消泡剤としてのシリコーンＳＨの添加下に２９°ＣおよびＯ０７バール の過圧で、脱気（１５ｔ／分）および攪拌（２２０Ｕ／分）下に２４時間発芽す る。

その後この予備発酵物培地０．９１　ｋ滅菌条件下に除去し、これに予備発酵物 培地と同じ組成の滅菌栄養溶液１４ｔ？！−含有する、主発酵？！＋２０ｔｋ接 種する。予備発酵物条件下に６時間の発芽相後、ジメチルホルムアミドｂＤｒｎ ｅ中のメテノロン４．５ｇの滅菌濾過された溶液を添加し、さらに攪拌および脱 気する。

５６時間の接肛時間後、反応が終了する。培養液全１回培地容量の半分、その後 ２回培地容量の各々音のメチルイソブチルケトンで抽出し、抽出物を１つにし、 真空中で蒸発乾個する。残渣を消泡剤の除去のためにメタノールにとり、二重に された折りたたみフィルターにより不溶の消泡剤’ｔｓ別し、溶液ｉＡ−炭で処 理し、新たに蒸発乾個する。残渣ゲ酢酸エステルから再結晶し、真空乾燥棚中で 乾燥する。融点１６４〜１６ダＣの１−メチル−アンドロスタジエン−ジオン２ ．４２　ｇ（理論値の５４．６％）が得られる。さらに結晶母液のカラムクロマ トグラフィー精製により１−メチル−アンドロスタジエンジオン０．４５　Ｎ　 （理論１亘の１０％）が得られる。

例　２ 例１の条件下にメチノール全種ミコバクテリウムロドクボース　ＡＴＣＣ４２７ ６の使用により１−メチル−アンドロスタジエンジオンに反応させる。

例　６ 例１の条件下に、しかし６％グルコース、１チコーンスチープリカー、０．２％ ＮａＮ０３．０−１　％　ＫＨ２ＰＯ，，０，２％に２）（ＰＯ，，０，０５％ Ｍｇ５Ｏ，・７Ｈ２０、０，００２％ＦｅＳＯ２・７Ｈ２０および０．０５％Ｈ Ｃｔから成る栄養培体の使用下に、メテノロンの種フサリウム　ソラニ　ＡＴＣ Ｃ１２８２３ｔ−用いて１−メチル−アンドロスタジエンジオンに反応させる。

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Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. １．１−メチル−５α−アンドロスト−１−エン−３，１７−ジオン（メテノロ ン）が種ノルカルジア、ミコバクテリウムまたはフサリウムの微生物培地で発酵 されることを特徴とする、１−メチル−１，４−アンドロスタジエン−３，１７ −ジオンの製法。
2. ２．１−メチル−５α−アンドロスト−１−エン−３，１７−ジオンが種ノルカ ルデイアコラリナＡＴＣＣ１４３５０、ミコバクテリウムロドクボースＡＴＣＣ ４２７６またはフサリウムソラニＡＴＣＣ１２８２３の微生物培地で発酵される 、請求の範囲第１項記載の１−メチル−１，４−アンドロスタジエン−３，１７ −ジオンの製法。