CS271325B2 - Method of 1-methyl-1, 4-androstadiene-3, 17-dione production - Google Patents
Method of 1-methyl-1, 4-androstadiene-3, 17-dione production Download PDFInfo
- Publication number
- CS271325B2 CS271325B2 CS862408A CS240886A CS271325B2 CS 271325 B2 CS271325 B2 CS 271325B2 CS 862408 A CS862408 A CS 862408A CS 240886 A CS240886 A CS 240886A CS 271325 B2 CS271325 B2 CS 271325B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- methyl
- dione
- androstadiene
- culture
- atcc
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J1/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, androstane
- C07J1/0003—Androstane derivatives
- C07J1/0011—Androstane derivatives substituted in position 17 by a keto group
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P33/00—Preparation of steroids
- C12P33/02—Dehydrogenating; Dehydroxylating
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Předložený vynález se týká způsobu výroby 1-methyl-l, 4-androstadien-3, 17-dionu fermentační cestou. :The present invention relates to a process for the preparation of 1-methyl-1,4-androstadiene-3,17-dione by fermentation. :
Předmětem předloženého vynálezu je způsob výroby 1-methyl-l, 4-adrostadien, 17-dionu, který spočívá v tom, že se l-methyl-546 -androst-l-en-3, 17-dion (Metenolon) fermentuje kulturou mikroorganismu rodu Norcardia, Mycobacterium nebo Fusarium.The present invention provides a process for the preparation of 1-methyl-1,4-adrostadiene, 17-dione, which comprises fermenting 1-methyl-546-androst-1-ene-3,17-dione (Metenolone) with a culture of a microorganism. of the genus Norcardia, Mycobacterium or Fusarium.
Výhodné provedení způsobu výroby 1-methyl-l, 4-androstadien-3., 17-dionu podle vynálezu spočívá v tom, že se l-methyl-5&(-adrost-l-en-3, 17-dion fermentuje kulturou mikroorganismu druhu Norcardia corallina ATCC 14350, Mycobacterium rhodochvous ATCC 4276 nebo Fusarium solani ATCC 12823. .A preferred embodiment of the process for the preparation of 1-methyl-1,4-androstadiene-3,17-dione according to the invention is characterized in that the 1-methyl-5 ' -adrost-1-ene-3, 17-dione is fermented by culture of a microorganism species Norcardia corallina ATCC 14350, Mycobacterium rhodochvous ATCC 4276 or Fusarium solani ATCC 12823.
Postup podle vynálezu se provádí za podmínek, které se obvykle používají při mikrobiologické dehydrogenaci substrátů pomocí kultur mikroorganismů. Tak se obvykle nejdříve pomocí obecně běžných předběžných pokusů zjistí nejpříznivější podmínky fermentace, jako například výběr nejpříznivější Živné půdy, vhodného rozpouštědla pro substrát nebo suspenzního činidla pro substrát, koncentrace substrátu, technické podmínky,jako teplota, provzdušňování, hodnota pH a optimální časové podmínky pro germinaci, přidávání substrátu a kontakt substrátu s enzymem mikroorganismu, a to analyticky, zejména chromatografií na tenké vrstvě.The process according to the invention is carried out under the conditions usually used in the microbiological dehydrogenation of substrates by cultures of microorganisms. Thus, generally, the most favorable fermentation conditions, such as selection of the most favorable nutrient medium, suitable solvent for the substrate or substrate suspending agent, substrate concentration, technical conditions such as temperature, aeration, pH and optimal time conditions for germination , adding the substrate and contacting the substrate with the enzyme of the microorganism, analytically, in particular by thin layer chromatography.
Přitom se ukázalo, Že je účelné používat koncentrací od asi 100 do 2000 mg substrátu na 1 litr živné půdy. Hodnota pH se výhodně upravuje na hodnotu v rozsahu od 5 do 7. Kultivační teplota se pohybuje v rozmezí od 20 do 40°C, výhodně od 25 do 35°C. К provzdušňování se výhodně přivádí 0,5 až 5 litrů vzduchu za minutu na 1 litr kultivační břečky. Přeměna substrátu se účelně sleduje analýzou vzorků extraktu. *It has proven expedient to use concentrations of from about 100 to 2000 mg of substrate per liter of culture medium. The pH is preferably adjusted to a value in the range of from 5 to 7. The culture temperature is in the range of from 20 to 40 ° C, preferably from 25 to 35 ° C. 0.5 to 5 liters of air per minute per liter of culture broth are preferably supplied for aeration. Conversion of the substrate is conveniently monitored by analyzing extract samples. *
Mikroorganismy potřebné pro tuto fermentaci jsou odborníkům к dispozici ve známých sbírkách mikroorganismů. Vhodnými kmeny jsou Norcardia, jako Norcardia corallina ATCC 14350, Mycobacterium, jako Mycobacterium rodochvous ATCC 4276 nebo Fusarium, jako Fusarium solani ATCC 12823.The microorganisms required for this fermentation are available to those skilled in the art in known collections of microorganisms. Suitable strains are Norcardia such as Norcardia corallina ATCC 14350, Mycobacterium such as Mycobacterium rodochvous ATCC 4276 or Fusarium such as Fusarium solani ATCC 12823.
Po provedení fermentace se produkty fermentace izolují o sobě známým způsobem. Izolace se může provádět například tak, že se fermentační směs extrahuje organickým rozpouštědlem* které není mísitelné s vodou, jako ethylacetátem, butylacetátem nebo methyllsobutylketonem, extrakty se zahustí a takto získané surové produkty se popřípadě čistí chromatografií nebo/a krystalizací.After fermentation, the fermentation products are isolated in a manner known per se. Isolation can be carried out, for example, by extracting the fermentation broth with an organic solvent which is not miscible with water, such as ethyl acetate, butyl acetate or methyl isobutyl ketone, concentrating the extracts, and optionally obtaining the crude products thus obtained by chromatography and / or crystallization.
Následující příklady provedení slouží к objasnění postupu podle vynálezu. Tyto příklady však rozsah vynálezu v žádném směru neomezují.The following examples serve to illustrate the process according to the invention. However, these examples do not limit the scope of the invention in any way.
Příklad 1Example 1
Erlenmeyerova baňka o obsahu 2 litrů, která obsahuje 500 ml živného roztoku sestávajícího z 0,5 4 monohydrátu dextrosy, 0,5 4 kvasničného extrátu, 0,2 % kukuřičného výluhu a 0,1 4 peptonu, hodnota pH 7,5, který byl sterilizován po dobu 30 minut při teplotě 120 °C v autoklávu, se naočkuje kulturou šikmého agaru kmene Norcardia corallina ATTC 14350 a protřepává se 48 hodin na rotační třepačce při teplotě 30 °C.2 liter Erlenmeyer flask containing 500 ml of nutrient solution consisting of 0,5 4 dextrose monohydrate, 0,5 4 yeast extract, 0,2% corn steep liquor and 0,1 4 peptone, pH 7,5 sterilized for 30 minutes at 120 ° C in an autoclave, inoculated with Norcardia corallina ATTC 14350 slant agar culture and shaken for 48 hours on a rotary shaker at 30 ° C.
Pomocí 250 ml takto vypěstované kultury se naočkuje primární fermentátor o obsahu 20 litrů obsahující 15 litrů živné půdy stejného složení, jako ve shora uvedeném odstavci kterážto živná půda byla sterilizována po dobu 30 minut při teplotě 121°C a při 0,11 MPa přetlaku v autoklávu. Germinace se provádí za přídavku silikonu SH jako prostředku proti pěnění při teplotě 29°C a při přetlaku 0,07 MPa za provzdušňování (15 litrů/min) a míchání (220 ot/mln) po dobu 24 hodin.Using a 250 ml culture culture, a 20-liter primary fermenter containing 15 liters of broth of the same composition as above was inoculated and the broth was sterilized for 30 minutes at 121 ° C and 0.11 MPa overpressure in an autoclave. . Germination is carried out with the addition of silicone SH as anti-foaming agent at 29 ° C and at an overpressure of 0.07 MPa with aeration (15 liters / min) and stirring (220 rpm) for 24 hours.
Potom se 0,9 litru této kultury z primárního fermentátoru odebere za sterilních podmínek a tímto množstvím se naočkuje hlavní fermentáror o obsahu 20 litrů, který obsahuje 14 litrů sterilizované živné půdy stejného složení, jako půda v primárním fermentátoru. Po růstové fázi 6 hodin za podmínek primární fermentace se přidá roztok 4,5 g l-methyl-5\čThen 0.9 liters of this culture are removed from the primary fermenter under sterile conditions and inoculated with a 20 liter main fermenter containing 14 liters of sterilized broth of the same composition as the primary fermenter. After a growth phase of 6 hours under primary fermentation conditions, a solution of 4.5 g of 1-methyl-5
CS 271 325 B2CS 271 325 B2
- androst-l-en-3, 17-dionu v 60 ml dimethylformamidu zfiltrovaný za sterilních podmínek a směs se dále míchá a fermentuje za provzdušňování.androst-1-ene-3,17-dione in 60 ml of dimethylformamide filtered under sterile conditions and the mixture is further stirred and fermented under aeration.
Po 56 hodinách vzájemného styku je reakce ukončena. Kultivační břečka se extrahuje jedenkrát jednou polovinou, potom dvakrát vždy jednou třetinou objemu kultivační břečky * pomocí methylisobutylketonu, extrakty se spojí a zahustí se ve vakuu к suchu. Zbytek se za účelem odstranění prostředku proti pěnění vyjme methanolem, nerozpustné podíly prostředku proti pěnění se odfiltrují přes dvojitý skládaný filtr, к filtrátu se přidá aktivní uhlí, směs se zfiltruje a filtrát se znovu zahustí к suchu. Zbytek se nyní překrystaluje z ethylacetátu a vysuší se ve vakuové sušárně. Získá se 2,42 g (54,6 4 teorie) 1-methylandrostadien-dionu o teplotě tání 164 až 166°C. Oalších 0,45 g (10 4 teorie) 1-methylan• drostadien-dionu se získá čištěním matečných louhů po krystalizaci sloupcovou chromatograf ií .After 56 hours of contact, the reaction is complete. The culture broth is extracted once with half, then twice with one third of the volume of the culture broth * using methyl isobutyl ketone, the extracts are combined and concentrated to dryness in vacuo. The residue is taken up in methanol to remove the antifoam, the insoluble fractions of the antifoam are filtered through a double pleated filter, activated carbon is added to the filtrate, the mixture is filtered and the filtrate is again concentrated to dryness. The residue was recrystallized from ethyl acetate and dried in a vacuum oven. 2.42 g (54.6% of theory) of 1-methylandrostadiene dione of melting point 164 DEG-166 DEG C. are obtained. An additional 0.45 g (10% of theory) of 1-methylan-drostadiene dione was obtained by purification of the mother liquors after crystallization by column chromatography.
Příklad 2Example 2
Za podmínek popsaných v příkladu 1 se nechá reagovat l-methyl-5od-androst-l-en-3, 17-dion (Metenolon) za použití kmene Mycobacterium rhodochvous ATCC 4276 za vzniku 1-methylandrostadien-dionu.Under the conditions described in Example 1, 1-methyl-5od-androst-1-ene-3,17-dione (Metenolone) was reacted using a strain of Mycobacterium rhodochvous ATCC 4276 to give 1-methylandrostadiene dione.
Příklad 3 'Example 3 '
Za podmínek uvedených v příkladu 1, avšak za použití živné půdy sestávající z 3 ¾ glukosy, 1 % kukuřičného výluhu, 0,2 % NaNOp 0,1 \ ΚΗ2₽04, 0,2 4 K2HP04, 0,05 4 MgS04 . 7 H20, 0,002 FeSO^'. 7 H20 a 0,05 Ч KC1 se nechá reagovat Metenolon za použití kmene Fusarium solani ATCC 12823 za vzniku 1-methylandrostadien-dionu.Under the conditions of Example 1, but using a culture medium consisting of 3 ¾ glucose, 1% corn steep liquor, 0.2% NaNOp 0.1 \ ΚΗ 2 4 4 , 0.2 4 K 2 HP0 4 , 0.05 4 MgSO 4 . 7H 2 O, 0.002 FeSO 4 -. 7 H 2 O and 0.05 Ч KCl were reacted with Metenolone using the Fusarium solani strain ATCC 12823 to give 1-methylandrostadiene dione.
Claims (2)
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE19853512328 DE3512328A1 (en) | 1985-04-03 | 1985-04-03 | METHOD FOR PRODUCING 1-METHYL-1,4-ANDROSTADIEN-3,17-DION |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CS240886A2 CS240886A2 (en) | 1990-02-12 |
CS271325B2 true CS271325B2 (en) | 1990-09-12 |
Family
ID=6267294
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CS862408A CS271325B2 (en) | 1985-04-03 | 1986-04-03 | Method of 1-methyl-1, 4-androstadiene-3, 17-dione production |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0217840B1 (en) |
JP (1) | JPH0665319B2 (en) |
CS (1) | CS271325B2 (en) |
DD (1) | DD244566A5 (en) |
DE (2) | DE3512328A1 (en) |
FI (1) | FI86203C (en) |
HU (1) | HU204575B (en) |
WO (1) | WO1986005813A1 (en) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2001004342A1 (en) * | 1999-07-07 | 2001-01-18 | Pharmacia & Upjohn Company | Process to prepare exemestane |
MXPA04007401A (en) * | 2002-02-01 | 2005-06-17 | Akzo Nobel Nv | Process for fermentation of phytosterols to androstadienedione. |
GB2407227B (en) * | 2003-09-08 | 2006-11-08 | Deluxe Lab Inc | Program encoding and counterfeit tracking system and method |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3322285A1 (en) * | 1983-06-18 | 1984-12-20 | Schering AG, 1000 Berlin und 4709 Bergkamen | 1-ALKYL-ANDROSTA-1,4-DIEN-3,17-DIONE, METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF AND PHARMACEUTICAL PREPARATIONS CONTAINING THEM |
-
1985
- 1985-04-03 DE DE19853512328 patent/DE3512328A1/en not_active Withdrawn
-
1986
- 1986-03-26 DE DE8686901819T patent/DE3667491D1/en not_active Expired - Lifetime
- 1986-03-26 HU HU864337A patent/HU204575B/en not_active IP Right Cessation
- 1986-03-26 EP EP86901819A patent/EP0217840B1/en not_active Expired
- 1986-03-26 WO PCT/DE1986/000130 patent/WO1986005813A1/en active IP Right Grant
- 1986-03-26 JP JP61501965A patent/JPH0665319B2/en not_active Expired - Lifetime
- 1986-04-01 DD DD86288631A patent/DD244566A5/en unknown
- 1986-04-03 CS CS862408A patent/CS271325B2/en unknown
- 1986-12-01 FI FI864887A patent/FI86203C/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP0217840B1 (en) | 1989-12-13 |
FI864887A (en) | 1986-12-01 |
CS240886A2 (en) | 1990-02-12 |
WO1986005813A1 (en) | 1986-10-09 |
FI864887A0 (en) | 1986-12-01 |
JPH0665319B2 (en) | 1994-08-24 |
DE3667491D1 (en) | 1990-01-18 |
DD244566A5 (en) | 1987-04-08 |
FI86203C (en) | 1992-07-27 |
HU204575B (en) | 1992-01-28 |
JPS62502935A (en) | 1987-11-26 |
FI86203B (en) | 1992-04-15 |
DE3512328A1 (en) | 1987-03-19 |
EP0217840A1 (en) | 1987-04-15 |
HUT47645A (en) | 1989-03-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0322081B1 (en) | Microbiological preparation of 9-alpha-hydroxy-17-keto steroids | |
CS271325B2 (en) | Method of 1-methyl-1, 4-androstadiene-3, 17-dione production | |
EP0425001B1 (en) | Natural delta-lactones and process of the production thereof | |
EP0043280B1 (en) | Process for preparing a macrolide | |
US4379842A (en) | Process for the manufacture of 1α-hydroxydehydroepiandrosterone | |
US5275936A (en) | Process for the preparation of 1-methyl-1,4-androstadiene-3,17-dione | |
US3243355A (en) | Method of hydroxylating 19-nor-androstenedione | |
EP0786011B1 (en) | Microbiological process for the preparation of 1-unsaturated 17-beta-carboxysubstituted 3-oxo-4-azaandrostan-3-ones | |
US4335108A (en) | Paulomycin A and B and preparation thereof | |
US3031445A (en) | New 16-oxygenated steroids | |
RU2213777C2 (en) | Method for microbiological oxidation of 2-methyl- quinoxaline (variants) | |
US4452897A (en) | Method of preparing optically active β-(S)-aminoglutaric acid monoalkyl esters | |
USRE29163E (en) | 1,2,3,4,10,19-Hexanor-9-oxo-5,9-seco-25D-spirostan-5-oic acid | |
US3329579A (en) | Method of preparing 16-oxygenated derivatives of estr-4-en-3-one | |
US3564019A (en) | Tetracyclic lactone antifungal agents | |
US5298398A (en) | Preparation of 9-α-hydroxy-17-keto steroids using Mycobacterium species CBS 482.86 | |
NO863077L (en) | PROCEDURE FOR MICROBIAL HYDROXYLATION OF PRECOLINE AND ITS DERIVATIVES BY NEUROSPORA CRASSA. | |
US2830937A (en) | 11-hydroxylation of 17-alpha-hydroxy steroids by the genus stachylidium | |
US3060101A (en) | Process for the 6beta-hydroxylation of steroids with mortierella | |
EP0518661A1 (en) | Microbial conversion of bile acids | |
JPS6221509B2 (en) | ||
JPS63154695A (en) | Novel antibiotic substance sf2446 and production thereof | |
EP0216636A2 (en) | Process for producing oganomycin E | |
JPS6219599A (en) | Novel macrolide antibiotic m119 | |
CZ20014283A3 (en) | Process for the preparation of desglucodesrhamnoruscin |