JPS6246826B2 - - Google Patents
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- JPS6246826B2 JPS6246826B2 JP55149389A JP14938980A JPS6246826B2 JP S6246826 B2 JPS6246826 B2 JP S6246826B2 JP 55149389 A JP55149389 A JP 55149389A JP 14938980 A JP14938980 A JP 14938980A JP S6246826 B2 JPS6246826 B2 JP S6246826B2
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、臨床検査等の検査項目の１つとして
行なわれ血液等に含まれるクレアチニンを測定す
るクレアチニンの測定方法および測定装置に関す
るものである。
行なわれ血液等に含まれるクレアチニンを測定す
るクレアチニンの測定方法および測定装置に関す
るものである。
近年、生医学的測定法の発展により体温、胃腸
内の圧力、血圧、呼吸の速度、および生物学的ポ
テンシヤルのような生理学的変数を連続的に遠隔
測定したり、生体内におけるpO2，pCO2、血液
のPHおよび電解質、並びに胃のPHを連続的に測定
したりする測定方法や測定装置等が開発されるよ
うになつた。一方、クレアチニンは分子式
C4H7ON3なる物質であつて、健康な人の尿にも
含まれており１日の排出量25mg／Kg体重ともいわ
れているが、内因性蛋白代謝の終末産物として賢
臓から排出され、特に重症の賢機能障害者では血
清中の含有濃度が増加する。このため、賢機能の
診断方法として血中のクレアチニン濃度を測定す
ることが行なわれているが、従来の測定法として
は、被測定体を有機溶媒で抽出し、アルカリ性の
下でピクリン酸と縮合させてキノイドイオンを生
成させ、比色分析法により橙赤色の該キノイドイ
オンを定量して間接的にクレアチニンの濃度を求
めるアルカリ性ピクリン酸法等が用いられてい
た。
内の圧力、血圧、呼吸の速度、および生物学的ポ
テンシヤルのような生理学的変数を連続的に遠隔
測定したり、生体内におけるpO2，pCO2、血液
のPHおよび電解質、並びに胃のPHを連続的に測定
したりする測定方法や測定装置等が開発されるよ
うになつた。一方、クレアチニンは分子式
C4H7ON3なる物質であつて、健康な人の尿にも
含まれており１日の排出量25mg／Kg体重ともいわ
れているが、内因性蛋白代謝の終末産物として賢
臓から排出され、特に重症の賢機能障害者では血
清中の含有濃度が増加する。このため、賢機能の
診断方法として血中のクレアチニン濃度を測定す
ることが行なわれているが、従来の測定法として
は、被測定体を有機溶媒で抽出し、アルカリ性の
下でピクリン酸と縮合させてキノイドイオンを生
成させ、比色分析法により橙赤色の該キノイドイ
オンを定量して間接的にクレアチニンの濃度を求
めるアルカリ性ピクリン酸法等が用いられてい
た。
然し乍ら、上記従来例のアルカリ性ピクリン酸
法においては、被測定体に含有されている蛋白質
を除去したり、被測定体を有機溶媒で抽出したり
する等の操作を必要とし、測定操作が煩雑である
等の欠点を有していた。
法においては、被測定体に含有されている蛋白質
を除去したり、被測定体を有機溶媒で抽出したり
する等の操作を必要とし、測定操作が煩雑である
等の欠点を有していた。
本発明は、かかる欠点に鑑みてなされたもので
あり、その目的は、臨床検査時のクレアチニン測
定等においても、被測定体中のクレアチニンを容
易に測定できるクレアチニンの測定方法および測
定装置を提供することにある。
あり、その目的は、臨床検査時のクレアチニン測
定等においても、被測定体中のクレアチニンを容
易に測定できるクレアチニンの測定方法および測
定装置を提供することにある。
本発明の特徴は、クレアチニンの測定方法およ
び測定装置において、Br-とPHが8.5付近のPH緩衝
液とを含む電解液を電解酸化させてBrO-を生成
させると共に、クレアチニンを含む被測定体にク
レアチニンデイミナーゼ酵素を作用させ酵素反応
によつてNH3を生成させ、前記被測定体が流れる
流通路から前記NH3を隔膜透過させ前記電解液が
流れる流通路に至らしめて該NH3と前記BrO-と
を接触反応せしめ、前記電解液が流れる流通路に
おいて前記接触反応がおこなわれる前後の濃度変
化をポーラログラフイツクに検出し、該検出BrO
―の濃度変化から演算により前記被測定体中のク
レアチニン濃度を算出することにある。
び測定装置において、Br-とPHが8.5付近のPH緩衝
液とを含む電解液を電解酸化させてBrO-を生成
させると共に、クレアチニンを含む被測定体にク
レアチニンデイミナーゼ酵素を作用させ酵素反応
によつてNH3を生成させ、前記被測定体が流れる
流通路から前記NH3を隔膜透過させ前記電解液が
流れる流通路に至らしめて該NH3と前記BrO-と
を接触反応せしめ、前記電解液が流れる流通路に
おいて前記接触反応がおこなわれる前後の濃度変
化をポーラログラフイツクに検出し、該検出BrO
―の濃度変化から演算により前記被測定体中のク
レアチニン濃度を算出することにある。
以下、本発明について図を用いて詳細に説明す
る。第１図は、本発明の原理説明図であり、図
中、１は試料採取弁、１ａはキヤリア流体流入
口、１ｂは被測定体流入口、１ｃは被測定体流出
口、２はクレアチニンの分解酵素であるクレアチ
ニンデイミナーゼが固定化された固定化酵素、３
はNaOH等の試薬流入口、４はフローセル、４，
４ｂはフローセル内の第１室および第２室、４ｃ
は高分子膜、４ｄ，４ｅ，４ｆは夫々参照電極、
対極電極、指示極電極、４ｑ，４ｉは第１室４ａ
の流入口と流出口、４ｈ，４ｊは第２室４ｂの流
入口と流出口、５はポテンシオスタツト、６は表
示器、７はBrO-の試薬発生装置、８は電解液用
容器である。同図において、被測定体は流入口１
ｂから導入され通常流出口１ｃから流出されてい
るが、試料採取弁１の駆動に伴ない流入口１ａか
ら導入されているキヤリア流体によつて被測定体
の所定量が固定化酵素２へ運ばれる。而して、被
測定体中のクレアチニンは固定化酵素２を通過す
る間にクレアチニンデイミナーゼ酵素の作用によ
つて下式(1)のような加水分解をうける。
る。第１図は、本発明の原理説明図であり、図
中、１は試料採取弁、１ａはキヤリア流体流入
口、１ｂは被測定体流入口、１ｃは被測定体流出
口、２はクレアチニンの分解酵素であるクレアチ
ニンデイミナーゼが固定化された固定化酵素、３
はNaOH等の試薬流入口、４はフローセル、４，
４ｂはフローセル内の第１室および第２室、４ｃ
は高分子膜、４ｄ，４ｅ，４ｆは夫々参照電極、
対極電極、指示極電極、４ｑ，４ｉは第１室４ａ
の流入口と流出口、４ｈ，４ｊは第２室４ｂの流
入口と流出口、５はポテンシオスタツト、６は表
示器、７はBrO-の試薬発生装置、８は電解液用
容器である。同図において、被測定体は流入口１
ｂから導入され通常流出口１ｃから流出されてい
るが、試料採取弁１の駆動に伴ない流入口１ａか
ら導入されているキヤリア流体によつて被測定体
の所定量が固定化酵素２へ運ばれる。而して、被
測定体中のクレアチニンは固定化酵素２を通過す
る間にクレアチニンデイミナーゼ酵素の作用によ
つて下式(1)のような加水分解をうける。
上式(1)の加水分解反応は、PHが６〜９のとき安
定となるが、NH3はPHが８以下になると殆んど
NH4 +イオンとなる。このため、試薬流入口３か
らNaOHが供給され、被測定体をアルカリ性にし
てガス状NH3の生成効率を高めている。而して、
流入口４ｑから上記第１室４ａに達した被測定体
は、その中に含まれるNH3ガスが高分子膜４ｃを
透過して上記第２室４ｂに至り他の成分やイオン
は流出口４ｉからフローセル４の外部へ流出され
る。一方、電解液用容器８から供給されBr-とPH
8.5付近のPH緩衝液とを含む電解液は、試薬発生
装置７においてBrO-を発生し、流入口４ｈから
フローセル４内の第２室４ｂに達し、その後流出
口４ｊからフローセル４の外部へ流出する。
定となるが、NH3はPHが８以下になると殆んど
NH4 +イオンとなる。このため、試薬流入口３か
らNaOHが供給され、被測定体をアルカリ性にし
てガス状NH3の生成効率を高めている。而して、
流入口４ｑから上記第１室４ａに達した被測定体
は、その中に含まれるNH3ガスが高分子膜４ｃを
透過して上記第２室４ｂに至り他の成分やイオン
は流出口４ｉからフローセル４の外部へ流出され
る。一方、電解液用容器８から供給されBr-とPH
8.5付近のPH緩衝液とを含む電解液は、試薬発生
装置７においてBrO-を発生し、流入口４ｈから
フローセル４内の第２室４ｂに達し、その後流出
口４ｊからフローセル４の外部へ流出する。
また、第２室４ｂにおいては、上記PH緩衝液に
よつてNH3とBrO-とが反応する最適のPHである
PH≒8.5にされるとともに高分子膜４ｃを透過し
て第１室４ａから到達したNH3と流入口４ｈから
流入した電解液中のBrO-とが下式(3)のように反
応してBrO-の濃度を変化させる。而して、ポテ
ンシオスタツト５から定電圧が供給されている電
極４ｄ，４ｅ，４ｆによりポーラログラフイツク
にBrO-濃度が検出され、該BrO-濃度の変化量か
ら所定の信号処理を経て被測定体中のクレアチニ
ン濃度が表示器６に表示される。
よつてNH3とBrO-とが反応する最適のPHである
PH≒8.5にされるとともに高分子膜４ｃを透過し
て第１室４ａから到達したNH3と流入口４ｈから
流入した電解液中のBrO-とが下式(3)のように反
応してBrO-の濃度を変化させる。而して、ポテ
ンシオスタツト５から定電圧が供給されている電
極４ｄ，４ｅ，４ｆによりポーラログラフイツク
にBrO-濃度が検出され、該BrO-濃度の変化量か
ら所定の信号処理を経て被測定体中のクレアチニ
ン濃度が表示器６に表示される。
2NH3＋3BrO-→3Br-＋N2＋3H2O …(3)
尚、上記固定化酵素２は上記一実施例に限定さ
れるものではなく、酵素を被測定体に供給し被測
定体中のクレアチニンに酵素反応を生ぜしめる構
成の範囲内で種々の変形は可能であり、例えば酵
素を担体に固定化しクロマトグラフ用カラムに充
填したもの若しくは酵素を化学的に毛管型カラム
の管壁に結合したもの、又は酵素を固定させた酵
素固定膜を前記高分子膜と貼合わせた構成のもの
であつてもよい。また、前記流出口４ｊからフロ
ーセル４の外部へ流出される電解液を活性炭層等
に通し電解液中のBrO-をBr-に還元したのち電解
液用容器８に戻し、Br-とPH緩衝液とを含む電解
液を循環使用することも可能である。更に試料採
取弁１も上記一実施例に限定されるものではな
く、試料流体を間欠的に所定量採取できる構成の
範囲内で種々の変形は可能であり、ロータリバル
ブやマイクロシリンジで代用させてもよい。
れるものではなく、酵素を被測定体に供給し被測
定体中のクレアチニンに酵素反応を生ぜしめる構
成の範囲内で種々の変形は可能であり、例えば酵
素を担体に固定化しクロマトグラフ用カラムに充
填したもの若しくは酵素を化学的に毛管型カラム
の管壁に結合したもの、又は酵素を固定させた酵
素固定膜を前記高分子膜と貼合わせた構成のもの
であつてもよい。また、前記流出口４ｊからフロ
ーセル４の外部へ流出される電解液を活性炭層等
に通し電解液中のBrO-をBr-に還元したのち電解
液用容器８に戻し、Br-とPH緩衝液とを含む電解
液を循環使用することも可能である。更に試料採
取弁１も上記一実施例に限定されるものではな
く、試料流体を間欠的に所定量採取できる構成の
範囲内で種々の変形は可能であり、ロータリバル
ブやマイクロシリンジで代用させてもよい。
第２図は、本発明に係るフローセルの分解構成
図であり、図中、１１はブロツクであつて１１
ａ，１１ｂはフローセル内の第１室の流入口と流
出口、１２はガスケツトであつて１３は第１室を
形成する空洞部、１４はNH3ガスを透過させイオ
ンを透過させない高分子膜、１５はガスケツトで
あつて１６は第２室を形成する空洞部、１７はブ
ロツクであつて１７ａ，１７ｂはフローセル内の
第２室の流入口と流出口、１８ａ，１８ｂは白金
等でなる指定極電極と対極電極、１８ｃは銀―臭
化銀等でなる参照電極である。また、第３図は、
第２図のフローセルを組立てたときの構成斜視図
であり、図中、第２図と同一記号は同一意味をも
たせて使用している。
図であり、図中、１１はブロツクであつて１１
ａ，１１ｂはフローセル内の第１室の流入口と流
出口、１２はガスケツトであつて１３は第１室を
形成する空洞部、１４はNH3ガスを透過させイオ
ンを透過させない高分子膜、１５はガスケツトで
あつて１６は第２室を形成する空洞部、１７はブ
ロツクであつて１７ａ，１７ｂはフローセル内の
第２室の流入口と流出口、１８ａ，１８ｂは白金
等でなる指定極電極と対極電極、１８ｃは銀―臭
化銀等でなる参照電極である。また、第３図は、
第２図のフローセルを組立てたときの構成斜視図
であり、図中、第２図と同一記号は同一意味をも
たせて使用している。
第２図および第３図において、キヤリヤ流体に
運ばれながら酵素反応によりNH3を発生した被測
定体は、流入口１１ａからフローセル内へ導入さ
れフローセル内の第１室を形成する空洞部１３を
通り流出口１１ｂからフローセル外へ流出され
る。この間、空洞部１３を流れる被測定体のうち
NH3は高分子膜１４を隔膜透過して、フローセル
内の第２室を形成する空洞部１６に至る。一方、
試薬発生装置における電解酸化によりBrO-を発
生した電解液は、流入口１７ａからフローセル内
へ導入され、フローセル内の第２室を形成する空
洞部１６を通り流出口１７ｂから流出される。而
して、上記空洞部１６を電解液が流れる間に電極
１８ａ，１８ｂ，１８ｃによつて電解液中の
BrO-の濃度がポーラログラフイツクに検出され
る。
運ばれながら酵素反応によりNH3を発生した被測
定体は、流入口１１ａからフローセル内へ導入さ
れフローセル内の第１室を形成する空洞部１３を
通り流出口１１ｂからフローセル外へ流出され
る。この間、空洞部１３を流れる被測定体のうち
NH3は高分子膜１４を隔膜透過して、フローセル
内の第２室を形成する空洞部１６に至る。一方、
試薬発生装置における電解酸化によりBrO-を発
生した電解液は、流入口１７ａからフローセル内
へ導入され、フローセル内の第２室を形成する空
洞部１６を通り流出口１７ｂから流出される。而
して、上記空洞部１６を電解液が流れる間に電極
１８ａ，１８ｂ，１８ｃによつて電解液中の
BrO-の濃度がポーラログラフイツクに検出され
る。
尚、上記電極は指示極電極１８ａ、対極電極１
８ｂ、および参照電極１８ｃからなる三電極構成
をとつているが、本発明はこれに限定されるもの
ではなく指示極電極と対極電極からなる二電極構
成の電極であつてもよい。
８ｂ、および参照電極１８ｃからなる三電極構成
をとつているが、本発明はこれに限定されるもの
ではなく指示極電極と対極電極からなる二電極構
成の電極であつてもよい。
第４図は、クレアチニンと共存するNH3を含む
被測定体を測定する場合に用いて好適な本発明の
他の実施例を示す原理説明図であり、図中、９は
フローセル、９ａ，９ｂはフローセル内の第１室
および第２室、９ｃは高分子膜、９ｄ，９ｅ，９
ｆは夫々参照電極、対極電極、指示極電極、９
ｑ，９ｉは第１室９ａの流入口と流出口、９ｈ，
９ｊは第２室９ｂの流入口と流出口、１０はポテ
ンシオスタツト、１１は演算器、１２はNaOH等
の試薬流入口、１３ａ，１３ｂは流路開閉弁であ
る。尚、第４図において、第１図と同一記号は同
一意味をもたせて使用し、ここでの説明は省略す
る。ところで、尿中のクレアチニンを測定する場
合等においては、被測定体中にクレアチニンと
NH3が共存することが多いが、このような被測定
体を測定する場合について、以下第４図を用いて
説明する。第４図において、通常、被測定体は流
入口１ｂから試料採取弁１内に導入され流出口１
ｃから外部へ流出されているが、試料採取弁１の
駆動に伴ない被測定体の所定量が流入口１ａから
導入されているキヤリア流体に運ばれる。而し
て、初め、流路開閉弁１３ａが閉で流路開閉弁１
３ｂが開のとき、前記キヤリア流体に運ばれた被
測定体は流入口９ｑからフローセル９内の第１室
９ａに至る。また、フローセル９に至る間に、試
薬流入口１２からNaOH等が供給され、被測定体
をアルカリ性にしてガス状NH3の生成効率を高め
ている。更に、第１室９ａにおいては、被測定体
中のNH3が高分子膜９ｃを隔膜透過して第２室９
ｂに至り、他の成分やイオンは流出口９ｉからフ
ローセル９の外部へ流出される。次に、流路開閉
弁１３ａが開き流路開閉弁１３ｂが閉となるとと
もに試料採取弁１によつて再度被測定体が採取さ
れると、前記キヤリア流体に運ばれた被測定体は
固定化酵素２を経由して流入口４ｑからフローセ
ル４に至る。このとき、被測定体中のクレアチニ
ンは、固定化酵素２を通過する間に被測定体と接
触するクレアチニンデイミナーゼ酵素によつて前
記(1)式のような加水分解をうけてNH3を生成す
る。また、試薬流入口３からはNaOH等が供給さ
れ、被測定体をアルカリ性にしてガス状NH3の生
成効率を高めている。而して、流入口４ｑからフ
ローセル４内の第１室４ａに達した被測定体は、
その中に含まれているNH3ガスのみが高分子膜４
ｃを隔膜透過して第２室４ｂに至り、他の成分や
イオンは流出口４ｉからフローセル４の外部へ流
出される。一方、電解液用容器８から供給され
Br-とPH緩衝液とを含む電解液は、試薬発生装置
７において前記(2)式のように電解酸化されて
BrO-を発生し、該電解液の一部は流入口９ｈか
らフローセル９内の第２室９ｂに達し、その後流
出口９ｊからフローセル９の外部へ流出し、前記
電解液の残りは流入口４ｈからフローセル４内の
第２室４ｂに達して流出口４ｊからフローセル４
の外部へ流出する。また、上記第２室４ｂ，９ｂ
において、高分子膜４ｃ，９ｃを隔膜透過して第
１室４ａ，９ａから到達したNH3と流入口４ｈ，
９ｈから導入された電解液中のBrO-とが前記(3)
式のように反応してBrO-の濃度が変化する。而
して、ポテンシオスタツト５，１０から定電圧が
供給されている電極４ｄ，４ｅ，４ｆ並びに電極
９ｄ，９ｅ，９ｆによりポーラログラフイツクに
BrO-濃度が検出され、演算器１１によつて減算
等の所定の演算がなされ被測定体中に共存する
NH3に相当する値がとり除かれてから表示器６で
被測定体中のクレアチニン濃度として表示され
る。尚、流路開閉弁１３ａ，１３ｂは上記実施例
に限定されるものではなく、２つの流路を交互に
開閉できる構成の範囲内で種々の変形は可能であ
り、例えば、ロータリー方式の流路切換バルブで
あつてもよい。
被測定体を測定する場合に用いて好適な本発明の
他の実施例を示す原理説明図であり、図中、９は
フローセル、９ａ，９ｂはフローセル内の第１室
および第２室、９ｃは高分子膜、９ｄ，９ｅ，９
ｆは夫々参照電極、対極電極、指示極電極、９
ｑ，９ｉは第１室９ａの流入口と流出口、９ｈ，
９ｊは第２室９ｂの流入口と流出口、１０はポテ
ンシオスタツト、１１は演算器、１２はNaOH等
の試薬流入口、１３ａ，１３ｂは流路開閉弁であ
る。尚、第４図において、第１図と同一記号は同
一意味をもたせて使用し、ここでの説明は省略す
る。ところで、尿中のクレアチニンを測定する場
合等においては、被測定体中にクレアチニンと
NH3が共存することが多いが、このような被測定
体を測定する場合について、以下第４図を用いて
説明する。第４図において、通常、被測定体は流
入口１ｂから試料採取弁１内に導入され流出口１
ｃから外部へ流出されているが、試料採取弁１の
駆動に伴ない被測定体の所定量が流入口１ａから
導入されているキヤリア流体に運ばれる。而し
て、初め、流路開閉弁１３ａが閉で流路開閉弁１
３ｂが開のとき、前記キヤリア流体に運ばれた被
測定体は流入口９ｑからフローセル９内の第１室
９ａに至る。また、フローセル９に至る間に、試
薬流入口１２からNaOH等が供給され、被測定体
をアルカリ性にしてガス状NH3の生成効率を高め
ている。更に、第１室９ａにおいては、被測定体
中のNH3が高分子膜９ｃを隔膜透過して第２室９
ｂに至り、他の成分やイオンは流出口９ｉからフ
ローセル９の外部へ流出される。次に、流路開閉
弁１３ａが開き流路開閉弁１３ｂが閉となるとと
もに試料採取弁１によつて再度被測定体が採取さ
れると、前記キヤリア流体に運ばれた被測定体は
固定化酵素２を経由して流入口４ｑからフローセ
ル４に至る。このとき、被測定体中のクレアチニ
ンは、固定化酵素２を通過する間に被測定体と接
触するクレアチニンデイミナーゼ酵素によつて前
記(1)式のような加水分解をうけてNH3を生成す
る。また、試薬流入口３からはNaOH等が供給さ
れ、被測定体をアルカリ性にしてガス状NH3の生
成効率を高めている。而して、流入口４ｑからフ
ローセル４内の第１室４ａに達した被測定体は、
その中に含まれているNH3ガスのみが高分子膜４
ｃを隔膜透過して第２室４ｂに至り、他の成分や
イオンは流出口４ｉからフローセル４の外部へ流
出される。一方、電解液用容器８から供給され
Br-とPH緩衝液とを含む電解液は、試薬発生装置
７において前記(2)式のように電解酸化されて
BrO-を発生し、該電解液の一部は流入口９ｈか
らフローセル９内の第２室９ｂに達し、その後流
出口９ｊからフローセル９の外部へ流出し、前記
電解液の残りは流入口４ｈからフローセル４内の
第２室４ｂに達して流出口４ｊからフローセル４
の外部へ流出する。また、上記第２室４ｂ，９ｂ
において、高分子膜４ｃ，９ｃを隔膜透過して第
１室４ａ，９ａから到達したNH3と流入口４ｈ，
９ｈから導入された電解液中のBrO-とが前記(3)
式のように反応してBrO-の濃度が変化する。而
して、ポテンシオスタツト５，１０から定電圧が
供給されている電極４ｄ，４ｅ，４ｆ並びに電極
９ｄ，９ｅ，９ｆによりポーラログラフイツクに
BrO-濃度が検出され、演算器１１によつて減算
等の所定の演算がなされ被測定体中に共存する
NH3に相当する値がとり除かれてから表示器６で
被測定体中のクレアチニン濃度として表示され
る。尚、流路開閉弁１３ａ，１３ｂは上記実施例
に限定されるものではなく、２つの流路を交互に
開閉できる構成の範囲内で種々の変形は可能であ
り、例えば、ロータリー方式の流路切換バルブで
あつてもよい。
以上、詳しく説明したような本発明の実施例に
よれば、臨床検査時のクレアチニン測定等におい
ても被測定体中のクレアチニン濃度を、前記従来
例に比して短時間により正確に測定することがで
きるという利点を有している。また、本発明の他
の実施例によれば、尿中のクレアチニン測定等に
見られるようにクレアチニンとNH3が共存する場
合でも、クレアチニンとNH3を別々に検出するこ
とがだきるため、共存するNH3の干渉を受けるこ
となく被測定体中のクレアチニンを正確に測定で
きるという利点を有している。
よれば、臨床検査時のクレアチニン測定等におい
ても被測定体中のクレアチニン濃度を、前記従来
例に比して短時間により正確に測定することがで
きるという利点を有している。また、本発明の他
の実施例によれば、尿中のクレアチニン測定等に
見られるようにクレアチニンとNH3が共存する場
合でも、クレアチニンとNH3を別々に検出するこ
とがだきるため、共存するNH3の干渉を受けるこ
となく被測定体中のクレアチニンを正確に測定で
きるという利点を有している。
第１図は、本発明の原理説明図、第２図は、フ
ローセルの分解構成図、第３図は、第２図の組立
構成斜視図、第４図は、本発明の他の実施例を示
す原理説明図である。 １……試料採取弁、２……固定化酵素、３，１
２……試薬流入口、４，９……フローセル、４
ａ，９ａ……第１室、４ｂ，９ｂ……第２室、４
ｃ，９ｃ……高分子膜、４ｄ，４ｅ，４ｆ，９
ｄ，９ｅ，９ｆ……電極、１ａ，１ｂ，４ｑ，４
ｈ，９ｑ，９ｈ……流入口、１ｃ，４ｉ，４ｊ，
９ｉ，４ｊ……流出口、５，１０……ポテンシオ
スタツト、６……表示器、７……試薬発生装置、
８……電解液用容器、１１……演算器、１３ａ，
１３ｂ……流路開閉弁。
ローセルの分解構成図、第３図は、第２図の組立
構成斜視図、第４図は、本発明の他の実施例を示
す原理説明図である。 １……試料採取弁、２……固定化酵素、３，１
２……試薬流入口、４，９……フローセル、４
ａ，９ａ……第１室、４ｂ，９ｂ……第２室、４
ｃ，９ｃ……高分子膜、４ｄ，４ｅ，４ｆ，９
ｄ，９ｅ，９ｆ……電極、１ａ，１ｂ，４ｑ，４
ｈ，９ｑ，９ｈ……流入口、１ｃ，４ｉ，４ｊ，
９ｉ，４ｊ……流出口、５，１０……ポテンシオ
スタツト、６……表示器、７……試薬発生装置、
８……電解液用容器、１１……演算器、１３ａ，
１３ｂ……流路開閉弁。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ Br-とPHが8.5付近のPH緩衝液とを含む電解液
を電解酸化させてBrO-を生成させると共に、ク
レアチニンを含む被測定体にクレアチニンデイミ
ナーゼ酵素を作用させ酵素反応によつてNH3を生
成させ、前記被測定体が流れる流通路から前記
NH3を隔膜透過させ前記電解液が流れる流通路に
至らしめて該NH3と前記BrO-とを接触反応せし
め、前記電解液が流れる流通路において前記接触
反応がおこなわれる前後のBrO-濃度変化をポー
ラログラフイツクに検出し、該検出BrO-の濃度
変化から演算により前記被測定体中のクレアチニ
ン濃度を算出することを特徴とするクレアチニン
の測定方法。 ２ 被測定体を間欠的に一定量採取する試料採取
弁と、被測定体に作用して酵素反応を生ぜしめる
クレアチニンデイミナーゼ酵素が固定化された固
定化酵素と、該固定化酵素を経由した流体に試薬
を添加する流入口と、Br-とPH緩衝液とを含む電
解液に所定の電流を通じて電解酸化させることに
よりBrO-を生成させる試薬発生装置と、前記試
料採取弁と前記固定化酵素とを経由した後に前記
試薬が添加された流体が導入されるフローセルの
一側の流路を構成する第１の室と、前記試薬発生
装置を経由した電解液が導入されフローセル内の
他側の流路を構成する共に電極が装着された第２
の室と、該第２室と前記第１室の共通する壁を構
成すると共にNH3を透過しイオンを透過させない
高分子膜と、前記フローセルに電気的に接続され
前記電極へ定電圧を供給すると共に前記電極で検
出された信号を処理するポテンシオスタツトと、
該ポテンシオスタツトからの信号により被測定体
中のクレアチニン濃度を表示する表示器とを具備
し、被測定体中のクレアチニンを測定することを
特徴とするクレアチニン測定装置。 ３ 試料採取弁と固定化酵素との間の流通路に流
路開閉弁を介し分岐して設けられ被測定体中に共
存するNH3が隔膜透過しBrO-と接触反応して変
化するBrO-の濃度を検出する第１のフローセル
と、固定化酵素の下流の流通路に設けられ被測定
体中のクレアチニンから酵素反応により生じた
NH3が隔膜透過してBrO-と接触反応して変化す
るBrO-濃度を検出する第２のフローセルと、前
記第１及び第２のフローセルにそれぞれ電気的に
接続されフローセル内の電極で検出された信号を
処理する第１及び第２のポテンシオスタツトと、
該第１及び第２のポテンシオスタツトからの出力
を演算処理する演算器とを具備することを特徴と
する特許請求範囲第２項記載のクレアチニン測定
装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP55149389A JPS5773666A (en) | 1980-10-27 | 1980-10-27 | Method and apparatus for measuring creatinine |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP55149389A JPS5773666A (en) | 1980-10-27 | 1980-10-27 | Method and apparatus for measuring creatinine |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5773666A JPS5773666A (en) | 1982-05-08 |
| JPS6246826B2 true JPS6246826B2 (ja) | 1987-10-05 |
Family
ID=15474051
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP55149389A Granted JPS5773666A (en) | 1980-10-27 | 1980-10-27 | Method and apparatus for measuring creatinine |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5773666A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP7246128B2 (ja) | 2017-01-23 | 2023-03-27 | 三菱重工機械システム株式会社 | シート積重装置、カウンタエゼクタ、製函機 |
-
1980
- 1980-10-27 JP JP55149389A patent/JPS5773666A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5773666A (en) | 1982-05-08 |
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