JPS6236388A - 微生物の撲滅に使用する複素環式ペンタレン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、微生物の撲滅方法に使用する複素環式ペンタ
レン誘導体およびその方法に関するものである。

次の融合環構造： （式中、Ｙは硫黄でありかつＸは硫黄もしくは酸素であ
る〕 を有する成る種のオキサジチアジアザ−およびジオキサ
チアジアザ−２，５ペンタレンが、ペリエールおよびビ
アーレ、ブレチン・ソシエテ・ヒミカ・フランセ（１９
７９）、第１Ｉ−１９９−２０８頁並びにベールおよび
プール、テトラヘドロン・レタース磁１８（１９７２）
、第１８３５−３６頁から知られている。これらの刊行
物は、この融合環構造を有する化合物をβ−ジケトンの
ジオキシムと一塩化硫黄または二塩化硫黄との反応によ
り製造しうろことを教示しており、この化合物は典型的
には２個の環システムの混合物である。Ｙがセレンもし
くはテルルでありかつＸが酸素であるような成る種のジ
オキサセレンジアザ−およびジオキサテルルジアザ−２
，５−ペンタレンも、ペリエールおよびビアーレ、ブチ
レン・ソシエテ・ヒミカ・フランセ（１９７１）、磁１
２、第４５９１−２頁から知られている。上記刊行物の
いずれも、記載された化合物が有用な生物学的性質を有
することを教示していない。

ヨーロッパ特許出願第６８５５７号公報は１．成る種の
オキサジチアジアザ−、ジオキサセレンジアザ−、ジオ
キサテルルジアザ−およびジオキサチアジアザ−２，５
−ペンタレンが有用な除草特性を有することを開示して
いる。これらの複素環式ペンタレン誘導体は、一般式Ｉ
： 〔式中、Ｙは硫黄、セレンもしくはテルル原子を示し、
Ｒ１およびＲ冨はそれぞれ独立して必要に応じ置換され
たアルキルもしくはアリール基またはアルコキシカルボ
ニル基を示し、またはＲ１およびＲ２は一諸になってア
ルキレン結合または連鎖中に異原子を有するアルキレン
結合を示し、各結合は必要に応じ１個もしくはそれ以上
のアルキル基もしくはフェニル基またはアルコキシ置換
されたフェニル基、ベンジル基、アシル基、ピリジル基
またはフリル基で置換され、ただし異原子が硫黄である
場合はこれは必要に応じ酸化型で存在し、かつＸは酸素
原子を示し、さらにＹが硫黄原子を示す場合はＸは必要
に応じ硫黄原子を示す〕 の化合物または可能ならばその酸付加塩である。

上記刊行物のいずれも、複素環式ペンタレン誘導体が抗
微生物活性を示しうろことを教示も示唆もしていない。

微生物、たとえば細菌、糸状菌、酵母、微小藻類および
原生動物は種々の環境、たとえば工業製品および工程、
公共の水供給源、水泳プール、加湿器および冷却系並び
に調理および病院環境において悪影響を及ぼすことがあ
る。硫酸還元性細菌は、石油生産および貯蔵施設に悪影
響を与ぼすことがある。病害細望は人間および動物に病
気を引き起こす。微生物を撲滅するには、殺生物性また
は生物静止性である薬剤を使用することができる。

実際上、殺生物作用と生物静止作用との差は一般に濃度
の作用であり、同じ薬剤が高濃度では殺生物性となりか
つ低濃度では生物静止性となる。

今回驚ろくことに、除草特性を有する田−ロツバ特許出
願第６８５５７号公報に開示された化合物の全種類では
ないが幾種かを含む特定種類の複素環状ペンタレン誘導
体は、微生物の撲滅にを用な用途を有することが見い出
された。これらの化合物は、人間および／または動物に
おける病原性微生物の撲滅或いは工業環境、たとえば上
記した環境における微生物の撲滅の両者に使用すること
ができる。これらはグラム陽性細菌およびダラム陰性細
菌を包含する広範な種類の微生物に対し活性である。

したがって、本発明は一般式： 〔式中、Ｘは酸素原子、硫黄原子または一５Ｏ一部分を
示し、Ｙは硫黄、セレンもしくはテルル原子を示し、た
だしＹがセレンもしくはテルル原子を示す場合はＸは酸
素原子であり、Ｒ１およびＲ１は一緒になって−ＣＨ２
−Ｃ（ＣＨ２）　ｇ−ＣＧＩ　（ＣＯＮＨ２）　−もし
くは−Ｃ１ｈ−Ａ−ＣＨ２結合を示し、ここでＡは−Ｃ
Ｌ−、−Ｃｌｌ（ＣＬ）−もしくは−５（０）ｆｉ一部
分を示し、ｎは０．１または２であり、ただしＸが酸素
原子でありかつＹが硫黄原子である場合はＲ１およびＲ
２が一緒ニナツ７−ＣＨ，−５（０）　ｎ−ｃｕｔ−結
合ヲ示し、Ｘが−ＳＯ一部分でありかつ八が−５（０）
、、−である場合はｎは２である） を有する、活性治療物質として使用するための複素環式
ペンタレン誘導体を提供する。これらの物質は、獣医用
医薬に有利に使用される。

さらに本発明は、上記複素環式ペンタレン誘導体を微生
物またはその環境に作用させることからなる微生物の撲
滅方法をも提供する。

本発明に使用する式ｌの好適化合物は次の特徴の１つも
しくはそれ以上を有する： （ｉ）Ｙは硫黄原子を示しかつＲ１およびＲ１は一緒に
なって−Ｃｕｔ−３（０）−ＣＨｇ−結合を示し、 （ｉｉ）ｎは２であり、かつ （ｉｉｉ）Ｘは硫黄原子または一８〇一部分である。

本発明の方法の特に有用な用途は、硫酸還元性（ｓｕｌ
ｐｈａｔｅ−ｒｅｄｕｃｉｎｇ）　Ｉｆｔ菌の撲滅にあ
る。

さらに本発明は、微生物の撲滅における上記方法に記載
されたような式■の化合物の使用にも関する。

一般に、式Ｉの化合物は上記のような公知化合物である
か、または公知化合物の製造方法、たとえばヨーロッパ
特許出願第６８５５７号公報に記載された方法に類似し
た方法で製造することができる。

式■の成る種の化合物は新規である。したがつて本発明
は、さらにＹが硫黄原子であり、Ｘが硫黄原子であり、
かつＲ１およびＲ２が一緒になって−ＣＨｚ−Ｃ（ＣＨ
３）　ｚ−ＣＣＩ　（ＣＯＮＨり一結合を示すかまたは
Ｘが一３〇一部分であり、好ましくはＲ１およびＲ２が
一緒になって−Ｃ１ｈ−５Ｏ□−ＣＨｔ−結合を示すよ
うな上記式Ｉの化合物をも提供する。

さらに本発明は、Ｘが−Ｓ〇一部分である上記式■の化
合物の製造方法をも提供し、この方法は上記方法に記載
した式Ｉの化合物を酸化剤、好ましくは過酸、たとえば
過安息香酸（たとえばメタ−クロル過安息香酸）で処理
することを特徴とする。反応は便利には、たとえばクロ
ロホルムのような溶剤を用いて室温にて行なうことがで
きる。

さらに本発明によれば、ＸおよびＹの両者が硫黄原子で
ありかつＲ１およびＲ２が一緒になって−ＣＬ−Ｃ（Ｃ
）Ｉｓ）　＊−ＣＣＩ　（ＣＯＮＨｔ）−結合を示す上
記方法に記載した式１の化合物の製造方法も提供され、
この方法は４−シアノ−５，５−ジメチル−１，３−シ
クロヘキサンジオンジオキシムを二塩化二硫黄と反応さ
せることを特徴とする。反応は便利には−６５℃〜室温
の範囲の温度にて、たとえばテトラヒドロフランのよう
なエーテル溶剤中で行なうことができる。

治療目的に使用する場合、式Ｉの化合物は抗生物質と同
様な任意の便利な方法で投与すべく処方することができ
、したがって本発明はその範囲内に人間医薬または獣医
用医薬に使用するのに適した医薬組成物をも包含する。

この場合、化合物は医薬上純粋な形態で存在させる。

医薬組成物は、特に活性成分が経口吸収を示す場合には
胃腸管によって吸収させるのに適した形態で提供するこ
とができる。経口投与のための錠剤およびカプセルは単
位投与形態とすることができ、たとえば結合剤（たとえ
ばシロップ、アカシャ、ゼラチン、ソルビトール、トラ
ガカントまたはポリビニルピロリドン）；増量剤（たと
えば乳糖、砂糖、トウモロコシ澱粉、燐酸カルシウム、
ソルビトールまたはグリシン）；錠剤化用滑剤（たとえ
ばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレング
リコール、シリカ）；崩壊剤（たとえば馬鈴薯澱粉）ま
たは許容しうる湿潤剤（たとえばラウリル硫酸ナトリウ
ム）などの慣用の賦形薬をも含有することができる０錠
剤は当業界で周知された方法により被覆することができ
る。経口用液体製剤は、水性もしくは油性の懸濁液、溶
液、乳液、シロップまたはエリキシルの形態とすること
ができ、或いは水や他の適するベヒクルにより使用前に
再編成するための乾燥製品として提供することもできる
。この種の液体製剤は、たとえば懸濁剤（たとえばソル
ビトールシロップ、メチルセルロース、グルコース／砂
糖シロップ、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、
カルボキシメチルセルロース、スメアリン酸アルミニウ
ムゲルまたは水素化食用脂肪）；乳化剤（たとえばレシ
チン、ソルビタンモノ−オレエートまたはアカシア）；
食用油を包含しうる非液性ヘヒクル（たとえばアーモン
ド油、分留椰子油、油性エステル、プロピレングリコー
ルまたはエチルアルコール）；保存料（たとえばメチル
もしくはプロピルｐ−ヒドロキシ安息香酸またはソルビ
ン酸）などの慣用の添加剤を含有することもできる。座
薬は慣用の座薬基材、たとえばココア脂またはその他の
グリセライドを含有する。

本発明による化合物は、さらに注射用に処方することも
でき、単位投与形態としてアンプル中にまたは複数投与
容器に、必要に応じて保存料を添加して提供することが
できる。さらに、これら組成物は油性ベヒクルもしくは
水性ベヒクルにおける懸濁液、溶液もしくは乳液のよう
な形態とすることもでき、たとえば懸濁剤、安定化剤お
よび／または分散剤のような配合剤を含有することもで
きる。或いは、活性成分は使用前に適当なベヒクル（た
とえば発熱物質を含有しない無菌水）で再編成するため
の粉末状とすることもできる。

獣医用医薬のための組成物は、たとえば長時間作用する
基材または急速放出性基材のいずれかに乳腺内装剤とし
て処方することもできる。

他の工業環境で使用する場合、式Ｉの化合物はたとえば
製品（たとば水性塗料または接着剤のような液体製品）
または水性環境（たとえば冷却系、貯蔵タンクまたは石
油生産施設）へ直接にまたは濃厚組成物として混入する
ことができ、或いはたとえば表面を処理するために液体
組成物で使用することもできる。液体環境の場合、式Ｉ
の化合物は典型的には５〜１０００■／１（５〜１００
０ｐｐ−）の範囲の濃度で使用することができる。

しかしながら、式！の化合物を含有する抗微生物用組成
物は固体もしくは液体とすることができ、不活性な固体
もしくは液体キャリヤを含有することができる。

適する不活性固体キャリヤはタルク、アルミナ、トウモ
ロコシ澱粉、珪藻土および粘度を包含することができる
。

適する液体キャリヤは水、アルコール類（たとえばメタ
ノール、イソプロピルアルコール、イソブチルアルコー
ル）、グリコール類（たとえばエチレングリコール）、
ケトン類（たとえばアセトン）、倍数エチル、ジメチル
ホルムアミド、ジメチルアセタミド、液体炭化水素Ｍ（
たとえばケロシン）、有機酸類（たとえば酢酸）を包含
する。

種々異なる液体の混合物がしばしば適している。

抗微生物用組成物はしばしば濃縮形態で処方しかつ輸送
して、その後に使用者が使用前に希釈する。少量の表面
活性剤であるキャリヤを存在させれば、この希釈過程を
促進する。したがって、好ましくはこの種の組成物にお
ける少なくとも１種のキャリヤは表面活性剤である。た
とえば組成物は少なくとも２種のキャリヤを含有するこ
とができ、その少なくとも１種は表面活性剤である。

表面活性剤は乳化剤、分散剤または湿潤剤とすることが
でき、非イオン性であってもイオン性であってもよい０
表面活性剤の例はポリアクリル酸のナトリウム塩および
リグニンスルホン酸；分子中に少なくとも１２個の炭素
原子を有する脂肪酸または脂肪族アミンもしくはアミド
と酸化エチレンおよび／または酸化プロピレンとの縮合
生成物；グリセリン、ソルビトール、蔗糖もしくはペン
タエリスリトールの脂肪酸エステル；これらと酸化エチ
レンおよび／または酸化プロピレンとの縮合物；脂肪族
アルコールもしくはアルキルフェノール、たとえばｐ−
オクチルフェノールもしくはρ−オクチルクレゾールと
酸化エチレンおよび／または酸化プロピレンとの縮合生
成物；これら縮合生成物の硫酸化合物もしくはスルホン
酸化合物：分子中に少なくとも１０個の炭素原子を有す
る硫酸もしくはスルホン酸エステルのアルカリ金属もし
くはアルカリ土類金属塩、好ましくはナトリウム塩、た
とえばラウリル硫酸ナトリウム、第二アルキル硫酸ナト
リウム、スルホン化ヒマシ油のナトリウム塩およびアル
キルアリールスルホン酸ナトリウム、たとえばドデシル
ベンゼンスルホン酸ナトリウム；並びに酸化エチレンの
重合体および酸化エチレンと酸化プロビレ′ンとの共重
合体を包含する。

抗微生物用組成物はたとえば溶液、乳化性濃厚物、乳液
、懸濁濃厚物、使用前に適当な希釈剤に溶解される粉末
、或いは処方物の遅延放出を行なう固体として処方する
ことができる。一般に、この種の組成物は５〜９５％の
活性成分、好ましくは１０〜５０％の活性成分を含有す
ることができ、残部はこの種の組成物に一般に使用され
るアジュバント、すなわち不活性キャリヤ、添加剤、た
とえば安定化剤（たとえば塩化マグネシウム、硝酸マグ
ネシウムおよび硝酸第二銅）および／または表面活性剤
である。

さらに式Ｉの化合物を含有する組成物は他の成分（たと
えば殺生物特性を有する他の化合物）およびたとえば酸
素掃除剤、腐食抑制剤およびスケーリング抑制剤のよう
な相容性化合物を含有することもできる。

以下、実施例により本発明をさらに説明し、実施例１お
よび２は式ｌの成る種の化合物の合成に関し、実施例３
は微生物のｔｗ滅における式！の化合物の活性を示して
いる。

ヨーロッパ特許出願第６８５５７号の実施例１４の化合
物、すなわち５）１，７Ｈ−２−オキサ−２ａ、３．ロ
ートリチア（２８−Ｓ”）−１，４−ジアザシクロベン
ト（ｃｄ）インデン（４，１ｇ、２．０ミリモル）をク
ロロホルム（１５０ｍｊ）中に溶解させた。得られた溶
液に攪拌しながらクロロホルム（１５＋ｊ＋）　中（Ｄ
／タークロル過安息香酸（１），９ｇ、６９ミリモル）
の溶液を添加し、混合物を室温（２０℃）にて１８時間
攪拌した。クロロホルム（２５１０における追加量のメ
タークロル過安患香酸（１，８ｇ、１）ミリモル）を加
え、そして攪拌を室温にてさらに１８時間続けた。クロ
ロホルムを減圧下で蒸発除去し、残留物を酢酸エチル中
に溶解させ、得られた溶液を飽和重炭酸ナトリウム水溶
液で洗浄し、ＮａよＳＯ９で脱水しかつ４０℃以下で蒸
発させて残留物を得、これを溶出剤として酢酸エチルを
用いることによりシリカカラム上でのクロマトグラフに
かけた。溶出した最初のハンドを集めかつ再結晶化させ
た後、標記化合物（式ｔ　；ｙ−ｓ、　ｘ−ＳＯｌＲｌ
およびＲ８は一緒になって−ＣＨｔ−３ｏｗ−Ｃ）Ｉｔ
−である）を金属様黄金色の葉状結晶として得た。（２
，３ｇ、４６％）、融点１９８℃（分解）。

分　析　　理論値：　２３．８　Ｃ，１，６Ｈ，１），
Ｉ　ＮＣｓ１）４ＮｚＯａＳｓ　　計算値：　２３．７
　Ｃ，１，５）１．１）．６　Ｎ＋ａ＋　　金属ナトリ
ウム（１），５ｇ、０．５モル）を乾燥エタノール（２
２５ｍ１）中に室温（２０℃）で溶解させた。シアノ酢
酸エチル（６０ｇ。

０．５３モル）を攪拌しながら室温で滴加した。得られ
た溶液へ攪拌しながら酸化メシチルを滴加し、そして混
合物を還流下に４時間加熱した。冷却後、混合物をジエ
チルエーテルで抽出して全ての未反応出発物質を除去し
、かつ２Ｍ塩酸水溶液で酸性化した。分離した褐色油状
物をジエチルエーテル中に抽出し、ＮａｚＳＯ，で脱水
し、蒸発させかつ４０〜６０℃の石油エーテルでトリチ
ル化して淡黄色の固体を得、これをジエチルエーテルか
ら再結晶化させて４−シアノ−５，５−ジメチル−１，
３−シクロヘキサンジオンを白色結晶固体として得た（
４８．６　ｇ、　５８．９％）、融点１３０−１３２℃
。

分　析　　理論値：　６５．’４５　Ｃ，６，７Ｈ，８
，５ＮＣ，Ｈ，、ＮＯ，実測値：　６５．８　Ｃ，７，
ＯＩＩ、　８．６　Ｎ（ｂ）４−シアノ−５，５−ジメ
チル−１，３−シクロヘキサンジオン（１，６５ｇ、１
０ミリモル）とヒドロキシルアミン塩酸塩、（１，４ｇ
、２０ミリモル）と酢酸ナトリウム（１，６５ｇ、２０
ミリモル）とを−緒に水（５０ＩＩｌｌ）中に溶解させ
、還流下で３０分間加熱した。この溶液を０℃まで冷却
し、得られた沈澱物をヂ別しかつ風乾して黄色粉末を得
、これを水から再結晶化させて４−シアノ−５，５−ジ
メチル−１，３−シクロヘキサンジオンジオキシムを淡
黄色針状結晶として得た（１．５ｇ、７７％）、融点１
３９〜１４０℃；軟化点１０５℃。

分　析　　理論値：　５５．４　Ｃ，６，７Ｈ，２１，
５ＮＣＪ＋ｏＮｚＯｚＳｔ実測値：　５４．８　Ｃ，？
、ＯＨ，２１，４Ｎ（Ｃ）４−シアノ−５，５−ジメチ
ル−１，３−シクロヘキサンジオンジオキシム（１３，
７ｇ、７０．２５ミリモル）を乾燥テトラヒドロフラン
（３００ｍ　ｌ　）中に一６５℃にて溶解させた。二塩
化二硫黄（２０，３ｇ、１５０ミリモル）を攪拌しなが
ら一６５℃にて滴加し、得られた黄褐色混合物を１６時
間撹拌した後、室温（２０℃）まで加温した。この混合
物を水中に注ぎ入れ、クロロホルム／メタノール（９：
　ｌｖ／ｖ）で抽出しかつＮａ１ＳＯ４で脱水した。シ
リカカラム上でのクロマトグラフにかけ、クロロホルム
／エタノール（９：　ｌｖ／ｖ）で溶出させた後、溶出
した濃橙色バンドを蒸発させて標記化合物（式１　；ｙ
＝ｓ、Ｘ−３，Ｒ’およびＲ″は一緒になって−ＣＨｇ
−Ｃ（Ｃｌｂ）　！−ＣＣＩ　（ＣＯＮｌｌｚ）　−で
ある）を淡橙色粉末として得た（３．０ｇ、１４．６％
）、融点２２８℃（分解）。

分　析　　理論値：　３７．ＯＣ，３，４１＋、　１４
．４　ＮＣＪ＋。Ｎ３０オＳヨ　　　　１２．２　ＣＩ
実測値：　３６．９　Ｃ，３，Ｉ　Ｈ，１４，２Ｎ１２
．１　ＣＩ 叉見桝主 微生物を撲滅する際の式Ｉの化合物の活性を次の微生物
に対する試験によって示した。

グラム陽性細菌：スタフイロコツカス・アウレウスμｌ
上肢お五匹シ＋ｓ　ａｕｒｌ徂）　（Ｓａ）（ＮＧＴＢ
　６５７１）、バチルス・ズブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕ
ｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）（Ｂｓ）、 ダラム陰性ａ＋ｗ　、エツジエルシア・コリ（Ｅｓｃｈ
ｅｒｉｃｈｉｓ　ｃｏｌｉ）　（Ｅｃ）　（ＮＣＩＢ９
５１７）　、デスルホビブリオ・ス ペシース（Ｄｅｓｕｌｆｏｖｉｂｒｉｏ　ｓｐ、）（Ｄ
ｓｐ）、ブレンド、北海からの 硫酸還元性細菌の混合培養物、 デスルホビブリオ・サレクシゲ ンス」獲特月獲魁上ｌ免ユ鮭！σ駐μα（Ｄｓ）（ＮＣ
ＩＢ　８３６４）　　、酵　　母　　　：サツカロミセ
ス・セレビシェ（Ｓａｃｃｈａｒａｍ　ｃｅｓ　ｃｅｒ
ｅｖｉｓｉａｅ）（Ｓｃ）　（ＡＴＣＣ９７６３）、 糸状ｍ　　　　　、アスペルギルス・ニガー（Ａｓ　ｅ
ｒ　１ｌｌｕｓ　ｎｉ　ｅｒ）（Ａｎ）（Ｃ旧１７４５
４）　、クラドスポリウム・レジナエ リｌ垣狂犯１叩ｙｅｓ　ｉユ岨（Ｃ「）。

（ＮＣＩＢ＝スコツトランド　Ａ８９　８０Ｇ。

アバディーン、１３５アベイ・ロード、私書箱３１所在
のナショナル・コレクション・オブ・インダストリアル
・バクテリヤ、トリー・リサーチ・ステーション）」 （ＡＴＣＣ＝アメリカ合衆国、メーランド２０８５２、
ロックビル、１２３０１パークローン・ドライブ所在の
アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション）」 （ＣＭＩ−英国、サレー州、キュー、フェリーレーン所
在のコモンウエルス・マイコロジカル・インステイチュ
ート）。

上記微生物の接種物は次のように作成した。

病原性細菌Ｓ、アウレウス、Ｂ、ズブチリスおよびイー
・コリに関しては、これら微生物を２５　Ｑｍｚ三角フ
ラスコ中のトリプトン大豆プロス５０ＩＩ１）中で２０
Ｏｒｐｍの回転振とう器にて３０℃で２４時間培養した
。トリプトン大豆ブロスは、カゼインのパンクレアチン
消化物１７ｇと大豆粉のパパイン消化物３ｇと塩化ナト
リウム５ｇと硫酸二カリウム２．５ｇとデキストロース
２．５ｇとを蒸留水ｌＩ！に添加し、混合しかつ１２１
’Ｃにて１５分間オートクレーブ処理して殺菌すること
により作成した。得られた培養液１−１を９９−ｌの新
鮮なトリプトン大豆ブロスと混合し、試験用の接種物と
して使用した。

硫酸還元性細菌デスルホビプリオｓｐ、およびり、サレ
クシゲンスは、改変ポストゲート培地Ｂにおいて３０℃
で２４時間培養し、接種物として直接使用した。改変ポ
ストゲート培地Ｂは、燐酸二カリウム０．５ｇと塩化ア
ンモニウム１ｇと硫Ｆｉ！ナトリウム１ｇと乳酸ナトリ
ウム５ｇと酵母抽出物１ｇとチオグリコール酸０．１ｓ
Ｉｌとアスコルビン酸０．１ｍ！と硫酸第一鉄７水塩０
．５ｇと熟成海水７５０ｍｆｆ１と蒸留水２５０■ｌと
よりなり、ρ■を７．８に調整し、幾つかに分割しかつ
１２１℃にて１５分間オートクレーブ処理することによ
り殺菌した。

Ｓ、セレビシーの接種物はＳ２アウレウス、Ｂ、ズブチ
リスおよびイー・コリの場合と同様に作成したが、ただ
しトリプトン大豆ブロスの代りに酵母麦芽プロスを使用
した。酵母麦芽ブロスは、酵母抽出物３ｇと麦芽抽出物
３ｇとペプトン５ｇとデキストロースＬｏｇとを１７１
の蒸留水に懸濁甘さ、加温して溶液となしかつ１２１℃
にて１５分間オートクレーブ処理して殺菌することによ
り作成した。

糸状菌アスペルギルス・ニガーおよびタラトスボリウム
・レジエナの接種物は、馬鈴薯デキストロースブロス中
に５Ｘ１０’胞子／ＩＩＩＬを含有するよう作成した。

馬鈴薯デキストロースプロスは、馬鈴薯抽出物４ｇとデ
キストロース２０ｇとを１２の蒸留水中に懸濁させ、加
温して溶液となし、幾つかに分割しかつ１２１℃にて１
５分間オートクレーブ処理して殺菌することにより作成
した。

各種の試験化合物の保存溶液を、蒸留水中に１０．００
０　ｐｐｍ（１重量％）の化合物を含有するよう作成し
た（化合物が溶解しない場合には４容量％までのアセト
ンを保存溶液に含ませた）、試験が示すところでは、こ
のレベルのアセトンは上記微生物の増殖に対し観察しう
る悪影響を示さなかった。試験手順は、試験が硫酸還元
性細菌（デスルホビブリオｓｐ、またはり、サレクシゲ
ンス）であるかないかに応じて次のようにした。

（ｉ）　　°−の゛　　　シ！−ズ 各化合物の保存溶液からの希釈シリーズにおける二連試
料（９，９ｍｊりを、上記改変ポストゲート培地Ｂにて
作成した。これらは２５ｐｐｍおよび５０ｐｐｍの化合
物を含有した０次いで、これらに上記硫酸還元性細菌の
１種の接触物０．１ｉ＋ｊ！を接種した。３０℃にて培
養した後、増殖の存在または不存在（硫化第一鉄の生成
による培地の黒色化によって示される）を２日、５日お
よび１０日で記録した。２５ｐｐｍにて活性な化合物を
さらに５ｐｐｍ、１０ｐｐａ＋および１５ｐｐｍの低濃
度で試験した。

（ｉｉ）他の吠　　　、　　および２、°　に、すｍゲ
Ｌ：λ 各化合物の保存溶液からの二連希釈シリーズを無菌蒸留
水で作成した。これらは５０ｐｐｍ、１）００ｐｐ、５
００ｐｐｍ、　　１０００ｐｐ−および５０００ｐｐｍ
の化合物を含有した。正方形のペトリ皿における５個の
分室のシリーズへ各濃度の試験化合物０．３ｓｆｆｉを
、２．７　ｍ　ｌの上記微生物の接種物の１種と共に加
えた。これは１０ｐｐｍ、　５０ｐｐｍ、　　ｌ　００
ｐｐ−および５００ｐｐｍの試験化合物の最終濃度を与
えた。

暗所にて３０℃で培養した後、ペトリ皿を増殖の存在ま
たは不存在につき検査した。細菌および酵母の培養物は
２４時間および７２時間の培養後に検査し、糸状菌の培
養物は３日、７日および１０日後に専負査した。

細菌および酵母の培養物は次のように評価した： ＋＋十−良好な増殖（比較と同じ） ＋十　−増殖 十　　−貧弱な増殖 ＝増殖なし。

糸状菌の培養物は次のように評価した：＋＋十−良好な
菌糸成長および胞子形成＋十　−菌糸成長かつ胞子形成
の低下 子　　−貧弱な菌糸成長かつ胞子形成なし−−生長なし
。

各試験の終了時に、増殖を示さない分室を適当な寒天培
地に対しペトリ皿内容物を塗抹して化合物の微生物静止
活性または殺微生物活性につき試験した。３０℃にて２
４時間培養した後、これらプレートを増殖の存在または
不存在につき検査した。上記試験により最小阻止濃度（
すなわち増殖が起らない最小濃度）を各試験化合物につ
き測定した。比較の目的で、標準の市販化合物を用いて
上記試験を行なった。硫酸還元性細菌に関し使用した標
準はｒＸＣ−１０２Ｊ　　（登録商標）（ペトロライト
社）であり、これは水中の２５重量％グルタルアルデヒ
ド溶液であり、また他の微生物に関して使用した標準は
幅広いスペクトルの抗微生物剤ｒカトン８９３Ｊ　　（
登録商標）　（ローム・アンド・ハース社）であり、こ
れはＺ−ｎ−オクチル−４−イソチアゾリン−３−オン
からなっている。

各試験の結果を下記第１表に示す０表中、たとえばＥＵ
Ｉのにような化合物の記載は、ヨーロッパ特許出願第６
８　５５７号の実施例１における化合物を意味する。

ム ロ０のＯψ口ψψロロ

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. （１）一般式 I ： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） 〔式中、Ｘは酸素原子、硫黄原子または−ＳＯ−部分を
   示し、Ｙは硫黄、セレンもしくはテルル原子を示し、た
   だしＹがセレンもしくはテルル原子を示す場合はＸは酸
   素原子であり、Ｒ＾１およびＲ＾２は一緒になつて−Ｃ
   Ｈ＿２−Ｃ（ＣＨ＿３）＿２−ＣＣｌ（ＣＯＮＨ＿２）
   −もしくは−ＣＨ＿２−Ａ−ＣＨ＿２結合を示し、ここ
   でＡは−ＣＨ＿２−、−ＣＨ（ＣＨ＿３）−もしくは−
   Ｓ（Ｏ）＿ｎ−部分を示し、ｎは０、１または２であり
   、ただしＸが酸素原子でありかつＹが硫黄原子である場
   合はＲ＾１およびＲ＾２は一緒になつて−ＣＨ＿２Ｓ（
   Ｏ）＿ｎ−ＣＨ＿２−結合を示し、Ｘが−ＳＯ−部分で
   ありかつＡが−Ｓ（Ｏ）＿ｎ−である場合はｎは２であ
   る〕 を有する、活性治療物質として使用するための複素環式
   ペンタレン誘導体。
2. （２）Ｙが硫黄原子を示しかつＲ＾１およびＲ＾２が一
   緒になつて−ＣＨ＿２−Ｓ（Ｏ）＿ｎ−ＣＨ＿２−結合
   を示す特許請求の範囲第１項記載のペンタレン誘導体。
3. （３）ｎが２である特許請求の範囲第２項記載のペンタ
   レン誘導体。
4. （４）Ｘが硫黄原子または−ＳＯ−部分である特許請求
   の範囲第１〜第３項のいずれか一項に記載のペンタレン
   誘導体。
5. （５）特許請求の範囲第１項〜第４項のいずれか一項に
   記載の複素環式ペンタレン誘導体を微生物またはその環
   境に作用させることを特徴とする微生物の撲滅方法。
6. （６）微生物が硫黄還元性細菌である特許請求の範囲第
   １項〜第４項のいずれか一項に記載の方法。
7. （７）Ｙが硫黄原子であり、Ｘが硫黄原子でありかつＲ
   ＾１およびＲ＾２が一緒になつて −ＣＨ＿２−Ｃ（ＣＨ＿３）＿２−ＣＣｌ（ＣＯＮＨ＿
   ２）−結合であるか、またはＸが−ＳＯ−部分である特
   許請求の範囲第１項記載の式 I の化合物。
8. （８）Ｘが−ＳＯ−部分である特許請求の範囲第１項〜
   第４項のいずれか一項に記載の式 I の化合物を製造す
   るに際し、Ｘが硫黄原子である特許請求の範囲第１項記
   載の式 I の化合物を酸化剤で処理することを特徴とす
   る製造方法。
9. （９）ＸおよびＹの両者が硫黄原子でありかつＲ＾１お
   よびＲ＾２が一緒になつて−ＣＨ＿２−Ｃ（ＣＨ＿３）
   ＿２−ＣＣｌ（ＣＯＮＨ＿２）−結合を示す特許請求の
   範囲第１項記載の式 I の化合物を製造するに際し、４
   −シアノ−５，５−ジメチル−１，３−シクロヘキサジ
   オンジオキシムを二塩化二硫黄と反応させることを特徴
   とする製造方法。