JPS62289190A - リパ−ゼを用いる脂肪酸エステルの製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ３、発明の詳細な説明 にλ１立１ｊ 糖類および糖アルコールの高級脂肪酸エステルは、脂肪
酸エステルと糖または糖アルコールとのエステル交換反
応によって化学的に合成し得ることは公知であり、特に
ショ糖脂肪酸エステルはこの方法によって大量に生産さ
れている。

これら化学的合成法はいずれも加熱工程を含むため、加
熱により生成物が着色したり、複雑な混合物となるなど
の欠点がある。

これらの欠点を避けるため、最近１Ｍ脂肪酸と糖または
糖アルコールとを基質とし、リパーゼの存在下インキュ
ベートすることによる脂肪酸エステルの生化学的合成法
が提案され、本出願人らにより特許出願中である。イン
キュベーションは水または緩衝液のような水性媒体中で
、かつ攪−１下に行われるので、基質濃度をあまり高く
することができない、このため反応終了後生成物を回収
するためにエネルギーコストがかかるほか、周知のよう
に酸と、アルコールの間のエステル化反応は可逆反応で
あるので、低い基質濃度はエステル化率にとって不利で
ある。

本発明者は、この点を改良するため、糖もしくは糖アル
コールを基質とし、リパーゼの存在下インキュベートす
ることによって、脂肪酸エステルを合成する方法におい
て、基質およびリパーゼを、糖もしくは糖アルコールが
実質上完全に溶解し得る量の水性媒体中、減圧下栓々に
水分を除去しな゛がらインキュベートし、最終水分が５
ｚ以下となった後、常圧で静置してインキュベートを継
続することを特徴とする脂肪酸エステルの製法を提案し
、特許出願中である。

ところで、この酵素反応において、今までは基質が溶解
するのに必要な水がいるとか、酵素は蛋白でその作用発
現に必要な水がいるとか言われていた。また、脂肪酸に
よる酵素の阻害のため、脂肪酸濃度を余り上げられない
ことが言われていた。従って、酵素を水なしで基質特に
脂肪酸と直接混ぜるということは考えも及ばなかったこ
とである。

木」臼１１」ｌｊ 本発明は、糖もしくは糖アルコールを一方の基質とし、
もう一方の基質として脂肪酸を用い。

リパーゼの存在下インキュベートすることによって、脂
肪酸エステルを合成する方法において、基質およびリパ
ーゼをよく混合しつつ反応に必要な水を要すれば添加も
しくは加湿にょって水を付与することによってインキュ
ベートを継続することを特徴とする脂肪酸エステルの製
法に関する。

木発明者は、従来の常識に反し、酵素を糖もしくは糖ア
ルコールおよび脂肪酸と直接混合し。

分散状態とし攪イしながら恒温槽の中で要すれば少量ず
つ水を加えるか、高湿度下による加湿で水分を付与する
ことによって、脂肪酸エステルの合成を行わしめたとこ
ろ、驚くべきことにエステル合成が高収率で進行するこ
とを確認し、本発明を完成した。この場合の反応系の水
分は５％より低い状態、好ましくは４％以下である。

この反応の特徴は、水を極小にした状態で反応が進むの
で、エステル化収率が高いうえ、反応抜脱水する必要が
ないことである。

反応系の水分とは、基質、酵素などの反応系全体中の水
分を指し、必要によって添加した水分、場合によって雰
囲気から吸収した水分、場合によって反応により生じた
水分なども含む。

本発明に使用しｔする拍としては、グルコース、フルク
トース、リポース、アラビノース、マンノース、ガラク
トース、キジロール等の単糖類、シー！糖、マルトース
、ラクトース、セロビ十−ス、トレハロース、パラチノ
ース等の三糖類、マルｌ−トリオース、ラフィノース、
セロトリオース、マンノトリオース等の三糖類、七ロテ
トロース、スタキオース等の四糖類、デキストリン、シ
クロデキストリン、マンナン、フルクタン、ガラクタン
、キシラン、アラパン、セルロース、セルロース誘導体
（ＣＭＣ、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセル
ロース）等がある。

糖アルコールとしては、ソルビトール、ソルビタン、ア
ラビトール、ギシリトール、マンこトール、ズルシトー
ル、マルチトール、ラクチトール、パラチノ−スなどが
ある。

脂肪酸としては、炭素数８ないし２２の飽和または不飽
和脂肪酸が好ましい。七の例としては、カプリル酸、カ
プリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸５パルミチン酸、
ステアリン酸、アラキン酸、ベヘニン酸等の飽和脂肪酸
、カプロレイ二／酸、リンデル酸、ミリストレイン酸、
パルミトレイン酸、オレイン酸、カドレイン酸、エルカ
酸、デカジエン酸、リノール酸、ヒラゴ酸、リルン酸、
エイコサトリエン酸、ドコサトリエン酸、ヘキサデカテ
トラエン酸、ステアリドン酪、アラキドン酸、ドコサテ
トラエン酸、エイコサペンタエン酸、イワシ酸等の不飽
和脂肪酸、およびサビニン酸、イブロール酸、ヤラピノ
ール酸、リシノール酸、フェロン酸などのヒドロキシ脂
肪酸がある。

リパーゼには周知のように微生物由来のものと動物起源
のものとあるが、いずれも使用することができる。

微生物由来のものとしては、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　
ｎｉｇｅｒ　（天守製薬製、リパーゼＡＰ−８）、Ｎｕ
ｃｏｒ属（天守製薬製、リパーゼＭＡＲ−１０）　、　
Ｎｕｃｏｒ　ｍ１ｅｈｅｉ（ノボインダストリー社製、
リパーゼ５Ｐ−２２５）　、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　
　（天守製薬製、リパーゼＰ）、Ｐｈ１ｚｏｐｕｓ　ｊ
ａｐｏｎｉｃｕｓ　（大阪細研社製、リパーゼサイケ７
　ｒ　１００　Ｊ　）　、　Ｐｈ１ｚｏｐｕｓ　ｄｅｌ
ｅ＋ｗｏｒ　（田辺製薬製、タリパーゼ）　、　Ｃａｎ
ｄｉｄａ　ｅｙｌｉｎｄｒａｃｅａ（名糖産業製、リパ
ーゼＭＹ）等がある。動物起源のものとしては、ブタす
い臓由来のバンクレアチンなどがある。

出発反応混合液中の勘もしくは糖アルコールと脂肪酸の
比は１モル比で　１対３ないし３対　１の範囲が好適で
ある。添加する酵素の量は力価によるが、例示した市阪
品の場合、一般に基質の合計重量の０．１〜ｌＯ％であ
る。

インキュベーションの温度は酵素の耐熱性にもよるが、
一般に３０℃〜５０℃の範囲であり、至適温度は３７℃
前後である。ただし、耐熱性酵素の場合は４０℃以上の
場合もあり得る。　　　゛基質と酵素を混ぜよく攪杵し
ながらインキュベーションし、要すれば水またはバッフ
ァーを水分が５％より低く、好ましくは１％以下となる
ように添加もしくは恒温室を湿度８０〜１００％とし、
加湿によって水分を付与する０反応は酵素の添加量にも
よるが、大体２〜４１」間で終了する。

反応終了後は、例えば反応混合物より油溶性成分（脂肪
酸、脂肪酸エステル）をクロロホルム、テトラヒドロフ
ラン等の溶媒によって抽出し、常法によって目的とする
脂肪酸エステルを単離することができる。

以下に本発明の実施例を示す。

実施例１ １００　　ビーカーにソルビトール９６１ｇ、オレイン
酸１４．１ｇを加え、この中にＣａｎｄｉｄａ　ｃｙｌ
ｉｎｄｆａｃｅ＆由来のリパーゼ（名糖産業製、リパー
ゼＭＹ）　０．５ｇを加え分散させる。マグネチックイ
ンキュベーションさせると７２時間後、エステル化率は
対脂肪酸８６％であった。反応系の水分平均値は、３．
５％であった。

実施例２ １００　　ビーカーにショ糖１９ｇ、カプリル酸８ｇを
加え、この中にＰｈ１ｚｏｐｕｓ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ
由来のリパーゼ（大阪細研社製、リパーゼサイケンｒｌ
ｏＯＪ　）　１．Ｏｇを加え分散させる。

マグネチックスターラーにてｆｆ１ｆ−１−し、純水０
．０８ｇを加え４０℃でインキュベーションさせると７
２時間後、エステル化率は対脂肪酸８７％であった０反
応系の水分平均値は、０．５％であった。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 糖もしくは糖アルコールを一方の基質とし、もう一方の
   基質として脂肪酸を用い、リパーゼの存在下インキュベ
   ートすることによつて、脂肪酸エステルを合成する方法
   において、反応系の水分が５％より低い状態でインキュ
   ベートを継続することを特徴とする脂肪酸エステルの製
   法。