JPS62283932A - 組織プラスミノ−ゲンアクチベ−タの乾燥製剤 - Google Patents
組織プラスミノ−ゲンアクチベ−タの乾燥製剤Info
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- JPS62283932A JPS62283932A JP61125306A JP12530686A JPS62283932A JP S62283932 A JPS62283932 A JP S62283932A JP 61125306 A JP61125306 A JP 61125306A JP 12530686 A JP12530686 A JP 12530686A JP S62283932 A JPS62283932 A JP S62283932A
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Landscapes
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
３、発明の詳細な説明
〔産業上の利用分野〕
本発明は組織プラスミノーゲンアクチベータ（以下ＴＰ
Ａと略称する）の乾燥製剤に関する。
Ａと略称する）の乾燥製剤に関する。
従来プラスミノーゲンアクチベータとしては、人尿また
は腎細胞の組織培養液より抽出されるウロキナーゼ（Ｕ
Ｋ）に代表され、血栓熔解などの目的で医薬品として使
用されている。
は腎細胞の組織培養液より抽出されるウロキナーゼ（Ｕ
Ｋ）に代表され、血栓熔解などの目的で医薬品として使
用されている。
一方、このＵＫと分子量および抗原性を異にするＴＰＡ
が、様々なｍｍ細胞またはそれらの培養液中に存在する
ことが分かっている。
が、様々なｍｍ細胞またはそれらの培養液中に存在する
ことが分かっている。
ＵＫとの比較では、ＴＰＡの特徴は、
■ ’ Ｋｒｉｎｇｌｅ ″と呼ばれるフィブリン親和
性のある部分がＵＫでは１個であるのに対し、ＴＰＡで
は２個存在している。その差ゆえ、ＵＫの分子量が約５
万なのに対し、ＴＰＡでは約７万と、ＴＰＡＯ方が大き
い。
性のある部分がＵＫでは１個であるのに対し、ＴＰＡで
は２個存在している。その差ゆえ、ＵＫの分子量が約５
万なのに対し、ＴＰＡでは約７万と、ＴＰＡＯ方が大き
い。
■ ■と同様の理由で、ＴＰＡはＵＫとは分子構造が異
なり、結果としてＵＫとは抗原性が異なる。
なり、結果としてＵＫとは抗原性が異なる。
さらに、ＴＰＡはＵＫよりフィブリンとの親和性に優れ
ており、ＵＫよりＴＰＡＯ方が医薬品としての価値が高
いと考えられていた。
ており、ＵＫよりＴＰＡＯ方が医薬品としての価値が高
いと考えられていた。
ところが、ＴＰＡは細胞からの産生量が少ないので、工
業的規模での生産は行われていなかった。
業的規模での生産は行われていなかった。
しかし、近年、組織培養法や遺伝子工学的手法の発達、
さらにモノクローナル抗体を使用した効率の良い精製法
の開発により、ＴＰＡを容易に得ることが可能となり、
その医薬品としての開発が行われるようになった。
さらにモノクローナル抗体を使用した効率の良い精製法
の開発により、ＴＰＡを容易に得ることが可能となり、
その医薬品としての開発が行われるようになった。
本発明者らはＴＰＡについて種々研究を重ねてきたとこ
ろ、ＴＰＡが精！！課程に使用される溶媒（特に中性溶
媒）中、（凍結）乾燥時、（凍結）乾燥した製剤のいず
れの状態においても極めて不安定であることが分かった
。
ろ、ＴＰＡが精！！課程に使用される溶媒（特に中性溶
媒）中、（凍結）乾燥時、（凍結）乾燥した製剤のいず
れの状態においても極めて不安定であることが分かった
。
従って、本発明の目的は安定なＴＰＡの乾燥製剤を提供
することである。
することである。
当該目的を達成するために、本発明者らは鋭意研究を重
ねてきた結果、アルギニン及びその塩から選ばれる少な
くとも一種並びにアルブミンを併用してＴＰＡ乾燥製剤
中に添加することによって乾燥ＴＰＡが相乗的に安定化
されるという新知見を得、本発明を完成した。
ねてきた結果、アルギニン及びその塩から選ばれる少な
くとも一種並びにアルブミンを併用してＴＰＡ乾燥製剤
中に添加することによって乾燥ＴＰＡが相乗的に安定化
されるという新知見を得、本発明を完成した。
即ち、本発明は乾燥組織プラスミノーゲンアクチベータ
を主成分とし、安定化剤としてアルギニン及びその塩か
ら選ばれる少なくとも一種並びにアルブミンを配合して
なる組織プラスミノーゲンアクチベータの乾燥製剤であ
る。
を主成分とし、安定化剤としてアルギニン及びその塩か
ら選ばれる少なくとも一種並びにアルブミンを配合して
なる組織プラスミノーゲンアクチベータの乾燥製剤であ
る。
ＣＩＩＴＰＡの説明
本発明製剤の主成分であるＴＰＡには、特に制限はない
、即ち、その精製法についても、特に限定はなく、従来
提案されている精製法を使用すればよく、またそのＴＰ
Ａは前記特徴■および■を有するものであれば、その由
来にも特に制限はない、即ち、たとえば組繊細胞、それ
らの培養、あるいは遺伝子操作等に由来するＴＰＡが使
用され°る。更に、酵素学的にいう前駆体型であるか、
活性化型であるかも制限はなく、両者とも本発明におけ
るＴＰＡに包含される。
、即ち、その精製法についても、特に限定はなく、従来
提案されている精製法を使用すればよく、またそのＴＰ
Ａは前記特徴■および■を有するものであれば、その由
来にも特に制限はない、即ち、たとえば組繊細胞、それ
らの培養、あるいは遺伝子操作等に由来するＴＰＡが使
用され°る。更に、酵素学的にいう前駆体型であるか、
活性化型であるかも制限はなく、両者とも本発明におけ
るＴＰＡに包含される。
（２） 安定化剤
本発明で使用されるアルブミンとしては、抗原性等の問
題よりヒト由来のものが好ましく、医療用として精製さ
れたものである限り、特に限定されない。その純度は、
電気泳動法で分析した場合８０％以上であることが好ま
しい。
題よりヒト由来のものが好ましく、医療用として精製さ
れたものである限り、特に限定されない。その純度は、
電気泳動法で分析した場合８０％以上であることが好ま
しい。
本発明で使用されるアルギニン塩としては、製剤学的に
許容されるものであれば特に制限はなく、たとえば塩酸
塩、硫酸塩などの鉱酸塩が好ましいものとして例示され
る。
許容されるものであれば特に制限はなく、たとえば塩酸
塩、硫酸塩などの鉱酸塩が好ましいものとして例示され
る。
（３） 安定化剤の配合量
これら安定化剤は、（凍結）乾燥するＴＰＡ溶液溶液２
ｍ対して、アルブミンは２０〜５０■に相当する割合で
、またアルギニンおよびその塩は、１０〜１００■に相
当する割合で配合される。
ｍ対して、アルブミンは２０〜５０■に相当する割合で
、またアルギニンおよびその塩は、１０〜１００■に相
当する割合で配合される。
本発明のＴＰＡ乾燥製剤の製造に当たっては、ＴＰＡの
精製工程中あるいはＴＰＡを（凍結）乾燥する前に安定
化剤を加えて（凍結）乾燥してもよく、また各々の成分
を乾燥後に安定化剤を配合して製剤化してもよい。
精製工程中あるいはＴＰＡを（凍結）乾燥する前に安定
化剤を加えて（凍結）乾燥してもよく、また各々の成分
を乾燥後に安定化剤を配合して製剤化してもよい。
本発明で使用される安定化剤であるアルギニン及びその
塩から選ばれる少なくとも一種並びにアルブミンは、Ｔ
ＰＡの精製工程の溶媒（特に、中性溶媒）中、（凍結）
乾燥時、（凍結）乾燥した製剤の状態でのＴＰＡに対す
る優れた安定化作用を有するものである。
塩から選ばれる少なくとも一種並びにアルブミンは、Ｔ
ＰＡの精製工程の溶媒（特に、中性溶媒）中、（凍結）
乾燥時、（凍結）乾燥した製剤の状態でのＴＰＡに対す
る優れた安定化作用を有するものである。
従って、本発明のＴＰＡの乾燥製剤はその保存安定性が
極めてよく、また乾燥工程中ないしは精製工程中におけ
るＴＰＡの分解が極めて少ないので医薬品として優れた
ＴＰＡの乾燥製剤である。
極めてよく、また乾燥工程中ないしは精製工程中におけ
るＴＰＡの分解が極めて少ないので医薬品として優れた
ＴＰＡの乾燥製剤である。
以下の実施例にて本発明をより明確に説明する。
なお、ＴＰＡの活性はＵＫ国際単位（１，Ｕ、）で表示
し、フィブリン溶解決により測定した。
し、フィブリン溶解決により測定した。
実施例１
ヒトメランーマ由来の細胞を培養し、その培養液から精
製したＴＰＡ （ＳＤＳポリアクリルアミド電気泳動で
分子量が７２．ＱＯＯ１比活性８６，０００（、υ。
製したＴＰＡ （ＳＤＳポリアクリルアミド電気泳動で
分子量が７２．ＱＯＯ１比活性８６，０００（、υ。
／［、抗ＵＫ抗体添加により失活しない）溶液を０．１
０Ｍリン酸緩衝液で透析後、大血清アルブミンを加えて
、人血清アルブミン２０■／２ｍｌを含むＴＰＡ溶液１
５０１．Ｕ、／ ２ｍｌを調製した。コノ溶液にアルギ
ニン塩酸塩をそれぞれＯ＋ｗ、１０■／ ２ ｍｌ、
２０ ＊／ ２ ｍｌおよび４０ｗ／２ｍｌ添加した後
、凍結乾燥し、５０℃で３ケ月保存してＴＰＡ力価を測
定した。その結果を表１に示す。
０Ｍリン酸緩衝液で透析後、大血清アルブミンを加えて
、人血清アルブミン２０■／２ｍｌを含むＴＰＡ溶液１
５０１．Ｕ、／ ２ｍｌを調製した。コノ溶液にアルギ
ニン塩酸塩をそれぞれＯ＋ｗ、１０■／ ２ ｍｌ、
２０ ＊／ ２ ｍｌおよび４０ｗ／２ｍｌ添加した後
、凍結乾燥し、５０℃で３ケ月保存してＴＰＡ力価を測
定した。その結果を表１に示す。
（以下余白）
表１
実施例２
遺伝子操作により、大腸菌体内で産生したＴＰ” Ａ
（ＳＤＳポリアクリルアミド電気泳動で分子量７３．０
００、比活性５１，０００＋、１１．／■、ヒトウロキ
ナーゼを兎に感作させて作成した抗ＵＫ抗体をカンプリ
ングさせた５ｅｐｈａｒｏｓｅに中性付近のｐＨ条件で
は吸着されない）を精製し、そのＴＰＡ溶液を０．１Ｍ
リン酸緩衝液で透析後、人血清アルブミンとアルギニン
塩酸塩を表２に示したように添加量に変化を待たせて添
加し、３００１．Ｕ、／ ２ｍｌに１Ｎ製した。それを
凍結乾燥し、５０℃で２ケ月保存し、ＴＰＡ力価を測定
した。その結果を表２に示す。
（ＳＤＳポリアクリルアミド電気泳動で分子量７３．０
００、比活性５１，０００＋、１１．／■、ヒトウロキ
ナーゼを兎に感作させて作成した抗ＵＫ抗体をカンプリ
ングさせた５ｅｐｈａｒｏｓｅに中性付近のｐＨ条件で
は吸着されない）を精製し、そのＴＰＡ溶液を０．１Ｍ
リン酸緩衝液で透析後、人血清アルブミンとアルギニン
塩酸塩を表２に示したように添加量に変化を待たせて添
加し、３００１．Ｕ、／ ２ｍｌに１Ｎ製した。それを
凍結乾燥し、５０℃で２ケ月保存し、ＴＰＡ力価を測定
した。その結果を表２に示す。
表２
特許出願人 株式会社 ミドリ十字
、’ｌ（、；
１；、、 ７．４１
手続主甫正書帽発）
Claims (1)
- 乾燥組織プラスミノーゲンアクチベータを主成分とし、
安定化剤としてアルギニン及びその塩から選ばれる少な
くとも一種並びにアルブミンを配合してなることを特徴
とする組織プラスミノーゲンアクチベータの乾燥製剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61125306A JPS62283932A (ja) | 1986-05-29 | 1986-05-29 | 組織プラスミノ−ゲンアクチベ−タの乾燥製剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61125306A JPS62283932A (ja) | 1986-05-29 | 1986-05-29 | 組織プラスミノ−ゲンアクチベ−タの乾燥製剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62283932A true JPS62283932A (ja) | 1987-12-09 |
Family
ID=14906829
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61125306A Pending JPS62283932A (ja) | 1986-05-29 | 1986-05-29 | 組織プラスミノ−ゲンアクチベ−タの乾燥製剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS62283932A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2184354B (en) * | 1985-12-17 | 1990-04-11 | Genentech Inc | Stabilized human tissue plasminogen activator compositions |
| JP2009108040A (ja) * | 2001-11-13 | 2009-05-21 | Genentech Inc | Ａｐｏ−２リガンド／ＴＲＡＩＬ製剤 |
| US7842668B1 (en) | 2001-11-13 | 2010-11-30 | Genentech, Inc. | Apo-2 ligand/trail formulations |
-
1986
- 1986-05-29 JP JP61125306A patent/JPS62283932A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2184354B (en) * | 1985-12-17 | 1990-04-11 | Genentech Inc | Stabilized human tissue plasminogen activator compositions |
| JP2009108040A (ja) * | 2001-11-13 | 2009-05-21 | Genentech Inc | Ａｐｏ−２リガンド／ＴＲＡＩＬ製剤 |
| US7741282B2 (en) | 2001-11-13 | 2010-06-22 | Genentech, Inc. | ApO2 ligand/TRAIL formulations |
| US7842668B1 (en) | 2001-11-13 | 2010-11-30 | Genentech, Inc. | Apo-2 ligand/trail formulations |
| US8470969B2 (en) | 2001-11-13 | 2013-06-25 | Genentech, Inc. | Apo-2 ligand/trail formulations |
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