JPH07126184A - プロテインｃもしくは活性化プロテインｃの安定化方法及び安定化組成物 - Google Patents

プロテインｃもしくは活性化プロテインｃの安定化方法及び安定化組成物

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JPH07126184A JP5292500A JP29250093A JPH07126184A JP H07126184 A JPH07126184 A JP H07126184A JP 5292500 A JP5292500 A JP 5292500A JP 29250093 A JP29250093 A JP 29250093A JP H07126184 A JPH07126184 A JP H07126184A
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Abstract

(57)【要約】 【目的】 分離精製、凍結乾燥、加熱処理などの操作を
行なう際、または保存時のプロテインＣもしくは活性化
プロテインＣの安定化法並びに安定化された製剤を提供
する。 【構成】 プロテインＣもしくは活性化プロテインＣの
ナトリウムイオンを含有する塩類緩衝液から構成され、
少なくとも一種のアミノ酸を添加し、さらにアルブミン
もしくは非イオン性界面活性剤を単独でもしくは組み合
わせて添加する。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、血漿から誘導された
か、または遺伝子組み換え技術を用いて製造されたプロ
テインＣ( 以下、ＰＣと略称することがある) もしくは
活性化プロテインＣ( 以下、ＡＰＣと略称することがあ
る) の安定化法に関する。さらに詳細には、保存時、分
離精製、凍結乾燥、加熱処理などの操作を行なう際のプ
ロテインＣもしくは活性化プロテインＣの安定化法並び
に当該方法で安定化された製剤に関する。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】プロ
テインＣ( 以下、ＰＣと略称することがある) は、ビタ
ミンＫ依存性蛋白質すなわちα- カルボキシグルタミン
酸含有蛋白質の一種であり、血管内皮細胞表層のトロン
ボモジュリンの存在下でトロンビンによって活性化され
て活性化プロテインＣとなる。活性化プロテインＣはセ
リンプロテアーゼの一種であり、血液凝固系の補酵素で
ある第Ｖ因子( ＦＶ、ＦＶａ) と第VIII因子( ＦVIII、
ＦVIIIａ) を分解し、強い抗凝固作用を示す。また、血
管壁からプラスミノゲン・アクチベーターを放出させ、
線溶系を促進されることが知られている。さらに、プロ
テインＣ欠損症は重度の血栓症を呈すことも知られてお
り、活性化プロテインＣは血液凝固線溶系の重要な制御
因子であることが明らかにされている。このようにプロ
テインＣもしくは活性化プロテインＣは抗凝固剤、線溶
系剤としての新たな医薬品の開発が期待される。
【０００３】従来から、血漿中に存在するプロテインＣ
あるいは組織培養系中に誘発されるプロテインＣの量
は、非常に微量であることが知られている。プロテイン
Ｃもしくは活性化プロテインＣを抗凝固剤、線溶系剤と
して広く安全に使用するためには、分離精製することが
重要であり、また溶液あるいは凍結状態で長期保存した
り、凍結乾燥、あるいは夾雑ウイルスの不活性化のため
の加熱処理を行なうことは、プロテインＣもしくは活性
化プロテインＣを大量に工業的に製造する際に必須の操
作である。ところが、高純度のプロテインＣもしくは活
性化プロテインＣを保存したり、凍結あるいは凍結乾
燥、加熱処理を行なうと活性が著しく低下する。また、
高純度のプロテインＣもしくは活性化プロテインＣの安
定性について検討した報告も今日までになされていな
い。このような現状では、その抗凝固作用、線溶系作用
にもかかわらず、高純度のプロテインＣもしくは活性化
プロテインＣを効率よく安定的に工業的規模で提供する
ことは不可能である。
【０００４】本発明者らは、これらの現状に鑑み、プロ
テインＣもしくは活性化プロテインＣの安定性について
鋭意研究を行なった結果、ナトリウムイオンを含有する
リン酸塩もしくはクエン酸塩緩衝液等の塩類緩衝液から
構成され、少なくとも一種のアミノ酸を添加し、さらに
アルブミンもしくは非イオン性界面活性剤を単独でもし
くは組み合わせてプロテインＣもしくは活性化プロテイ
ンＣに添加することにより、相当の期間保存しても、ま
たは、分離精製、凍結乾燥、加熱処理などの操作を行な
ってもプロテインＣもしくは活性化プロテインＣの活性
が保持されることを見出し本発明を完成した。
【０００５】本発明はプロテインＣもしくは活性化プロ
テインＣをナトリウムイオンを含有するリン酸塩もしく
はクエン酸塩等の塩類緩衝液中に溶解させ、および蛋白
質構成アミノ酸、例えばグリシン、アラニン、リジン、
アルギニン、アスパラギン酸およびグルタミン酸等の少
なくとも１種のアミノ酸を添加すること、さらに、アル
ブミン、グロブリン等の蛋白質安定化効果を有するポリ
ペプチド、また好適な条件として選択的にＴｗｅｅｎ
８０で代表される非イオン性の界面活性剤の添加を特徴
とするプロテインＣもしくは活性化プロテインＣの安定
化法並びに当該方法で安定化された製剤に関するもので
ある。
【０００６】本発明に用いられるプロテインＣもしくは
活性化プロテインＣは、公知の方法で調製される。その
ようなものとして、例えばヒト血液より分離した、ある
いは遺伝子組換え技術を用いて調製されたプロテインＣ
を活性化する方法、ヒト血液よりＡＰＣを分離する方
法、あるいは遺伝子組換え技術の利用によりＡＰＣを作
製する方法などによって製造することができる。プロテ
インＣからＡＰＣへの活性化の方法には特に制約はな
く、例えばヒトやウシなどの血液より分離したトロンビ
ンにより活性化する方法、あるいは等価なプロテアーゼ
により活性化する方法などにより実施できる。
【０００７】血液由来のＡＰＣの製法としては、以下の
方法が挙げられる。例えば、ヒト血漿から抗プロテイン
Ｃ抗体を用いたアフィニティークロマトグラフィーによ
り精製されたプロテインＣを、ヒトトロンビンで活性化
した後、陽イオンクロマトグラフィーを用いて精製する
方法( ブラッド Blood,63, p.115-121(1984)) 、あるい
はKisielによる、ヒト血漿からクエン酸バリウム吸着・
溶出、硫酸アンモニウム画分化、ＤＥＡＥ- セファデ
ックスカラムクロマトグラフィー、デキストラン硫酸ア
ガロースクロマトグラフィーおよびポリアクリルアミド
ゲル電気泳動等の工程により精製して得られたプロテイ
ンＣを活性化してＡＰＣとする方法( ジャーナル オブ
クリニカル インヴェスティゲーション J.Clin.Inve
st.,64,p.761-769(1979)) 、あるいは市販のプロテイン
Ｃを含有する血液凝固製剤をTaylor等の方法( ジャーナ
ル オブ クリニカル インヴェスティゲーション J.C
lin.Invest.,79,p.918-925(1987)) で活性化してＡＰＣ
とする方法等がある。
【０００８】また、遺伝子組換え技術を用いてＡＰＣを
調製する方法としては、例えば特開昭６１- ２０５４８
７号、特開平１- ２３３８号あるいは特開平１- ８５０
８４号等に記載された方法等がある。本発明に用いられ
るプロテインＣもしくは活性化プロテインＣ原料の生産
方法は上記に限られるものではない。
【０００９】このようにして生産されたプロテインＣも
しくは活性化プロテインＣ原料は通常の生化学的分離精
製法を組み合わせて分離精製される。そのようなものと
しては、例えば、硫酸アンモニウムによる塩析法、イオ
ン交換樹脂によるイオン交換クロマトグラフィー、ゲル
濾過法、電気泳動法などが挙げられる。
【００１０】このような方法によって精製度を上げてゆ
くと、プロテインＣもしくは活性化プロテインＣは次第
に不安定となる。また、純度がそれほど高くない試料
も、保存、凍結、凍結乾燥、加熱処理などの操作によっ
て、その活性が低下する。本発明の対象となるのは、主
としてこのように精製度が上昇し不安定となったプロテ
インＣもしくは活性化プロテインＣであり、溶液と粉末
のいずれにも限定されない。
【００１１】本発明で用いられるプロテインＣもしくは
活性化プロテインＣの安定化方法においては、１００〜
２５００Ｕ／ｍｌのプロテインＣもしくは活性化プロテ
インＣ緩衝液中に、安定化剤として好ましくは５０ｍＭ
〜２００ｍＭの濃度のナトリウムイオンを含有する塩類
と少なくとも１種のアミノ酸および安定化効果を有する
ポリペプチドを添加する。塩類およびアミノ酸は単独
で、あるいは２種以上を適宜組合わせて使用することが
できる。アミノ酸の添加濃度は最終濃度が０. ００５Ｍ
〜０. １Ｍ、より好ましくは０. ０１Ｍ〜０. ０５Ｍで
ある。また、アルブミン、グロブリン等の安定化効果を
有するポリペプチドの添加濃度は常識的経済的観点から
決定され、好適には０. ５％( Ｗ／Ｖ) 〜１０％( Ｗ／
Ｖ) の濃度で使用される。なお、本明細書中の％( Ｗ／
Ｖ) は１リットルの溶液中に溶解している溶質の濃度を
示し、１リットルの溶液中に溶解している溶質が１０ｇ
である場合を１％( Ｗ／Ｖ) とする。また、本発明の好
適な実施態様として、さらに選択的に０. ０００５％(
Ｗ／Ｖ) 〜０. １％( Ｗ／Ｖ) のＴｗｅｅｎ ８０等の
非イオン性界面活性剤が添加されると安定化効果が助長
される。
【００１２】かくして本発明の代表的態様として、プロ
テインＣ及び／または活性化プロテインＣを１００〜２
５００Ｕ／ｍｌ、ナトリウムイオンを５０〜２００ｍ
Ｍ、アミノ酸を５〜１００ｍＭ含有し、さらにアルブミ
ン０．５〜１０％（Ｗ／Ｖ）もしくは非イオン性界面活
性剤０．０００５〜０．１％（Ｗ／Ｖ）を単独でもしく
は組み合わせて含有するプロテインＣ及び／または活性
化プロテインＣ含有水溶液が得られる。
【００１３】なお、プロテインＣもしくは活性化プロテ
インＣを含有する粉末に添加する場合の本発明の安定化
剤の添加量は、該当粉末を溶解した際に、上記の溶液濃
度になるように選ばれる。
【００１４】かくして本発明の別の代表的態様として、
プロテインＣ及び／または活性化プロテインＣを１×１
０5 〜２．５×１０6 単位、ナトリウムを５０〜２００
ｍｇ単位有するナトリウム塩、アミノ酸を５〜１００ｍ
ｍｏｌ含有し、さらにアルブミン５〜１００ｇもしくは
非イオン性界面活性剤０．００５〜１ｇを単独でもしく
は組み合わせて含有するプロテインＣ及び／または活性
化プロテインＣ含有組成物が得られる。
【００１５】添加方法は特に限定されないが、例えば、
本発明の物質の粉末を直接、プロテインＣもしくは活性
化プロテインＣ含有溶液に添加する方法、あらかじめ同
粉末を水あるいは適当な緩衝液に溶解して添加する方
法、または同粉末をプロテインＣもしくは活性化プロテ
インＣ含有粉末と混合して添加する方法が挙げられる。
添加時期は、分離精製過程であっても、製剤化工程であ
っても良い。
【００１６】本発明の安定化剤を添加したプロテインＣ
もしくは活性化プロテインＣを含有する溶液は、溶液状
態のままでは０〜３０℃、より好ましくは０〜１０℃で
保存あるいは分離精製、製剤化操作をすることが好まし
い。また、同溶液を凍結状態で保存する場合は、凍結点
以下、より好ましくは−２０℃以下、凍結乾燥状態で保
存する場合は室温以下とすることが望ましい。本発明の
安定化剤を添加したプロテインＣもしくは活性化プロテ
インＣを含有する溶液では、溶液状態、凍結状態または
凍結乾燥状態での保存中あるいは分離精製、製剤化操作
中においてもプロテインＣもしくは活性化プロテインＣ
の活性は保持される。
【００１７】本発明において、活性化プロテインＣの活
性測定は、以下の方法により実施した。ＡＰＣ活性１単
位は正常ヒト血漿の活性化トロンボプラスチン時間( Ａ
ＰＴＴ( 秒))を２倍に延長する量と定義する。従って、
ＡＰＣ活性測定法は、希釈した試料を正常ヒト血漿に加
えてＡＰＴＴ( 秒) を測り、その値が対照( 緩衝液) の
値の２倍となるときの希釈倍率を試料のＡＰＣ活性値と
する。
【００１８】( 操作法)試料を１％ＨＳＡ加ベロナール
緩衝液で、例えば４００、５００、８００、１０００倍
になるように希釈する。３７℃で、対照( 緩衝液) また
は試料の各希釈液の各々１００μｌに、正常ヒト血漿(
例えば、サイトロール: 国際試薬) １００μｌ、ＡＰＴ
Ｔ試薬( 例えば、アクチン：国際試薬) １００μｌを１
５秒間隔で加えて混和し、２分後、０. ０２５ＭＣａＣ
ｌ2 １００μｌを加え凝固時間を測定する。
【００１９】( 活性の計算)対照および試料の各希釈倍
率( Ｘ) でのＡＰＴＴの値( Ｙ) から、１０3 ／ＸとＹ
の直線回帰式と相関係数を求める。 Ｙ＝Ａ（１０3 ／Ｘ）＋ Ｂ 対照のＡＰＴＴ( 秒) の２倍の値をＹ1 として、 Ｘ1 ＝１０3 ｛（Ｙ1 −Ｂ）／Ａ｝ から求めたＸ1 の値を、試料のＡＰＣ活性( 単位／ｍ
ｌ) とする。
【００２０】なお、プロテインＣの活性は”スタクロッ
トプロテインＣ”（ベーリンガーマンハイム社）を用い
て測定した。
【００２１】
【実施例】以下、本発明をより詳細に説明するため、実
施例を挙げるが、本発明はこれらの実施例になんら限定
されるものではない。
【００２２】［実施例１］ ( ＡＰＣの安定性に対する種々の対イオンの影響)５０
０Ｕ／ｍｌの活性を有するヒト活性化プロテインＣ溶液
にヒト血清アルブミン( 以下ＨＳＡと略することがあ
る) ２. ５％を加え、０. ７％ＮａＣｌおよび０. ０６
７Ｍグリシンを含有する、クエン酸Ｎａ、リン酸Ｎａ、
および硫酸Ｎａ溶液( 各２０ｍＭ) で透析し、透析後、
各溶液を３７℃で２４時間静置し、活性の測定を行なっ
た。その結果を表１に示す。対イオンがクエン酸Ｎａ、
リン酸Ｎａ、硫酸Ｎａの場合は、満足できる同様な安定
性を示した。
【００２３】
【表１】 対イオンのＡＰＣ安定性への影響 ――――――――――――――――――――――――― 活性残存率( ％) 対イオン ( ３７℃、２４Ｈｒ.) ――――――――――――――――――――――――― クエン酸Na 20mM ９７. ４ リン酸Na ９４. ８ 硫酸Na ９２. ２ ―――――――――――――――――――――――――
【００２４】［実施例２］ ( ＡＰＣの安定性に及ぼすアミノ酸の影響)５００Ｕ／
ｍｌの活性を有する活性化プロテインＣ溶液にＨＳＡを
２. ５％加え、０. ７％ＮａＣｌを含有し、グリシン、
アラニン、リジン、 アルギニン、アスパラギン酸、グ
ルタミン酸を各々０. ０５Ｍ含むクエン酸ナトリウム緩
衝溶液で透析し、透析後、各溶液を３７℃で２４時間静
置し、活性の測定を行なった。その結果を表２に示す。
今回検討した６種類のアミノ酸は、ＡＰＣの安定性を損
なうことなく、いずれも高い安定性を保持した。
【００２５】
【表２】 各種アミノ酸のＡＰＣ安定性への影響 ――――――――――――――――――――――――――― アミノ酸 活性残存率( ％) ( ０. ５％) （３７℃、２４Ｈｒ.) ――――――――――――――――――――――――――― 無添加 ８６. １ Ｇｌｙ ９７. ４ Ａｌａ ９７. ７ Ｌｙｓ １０７ Ａｒｇ １０２ Ａｓｐ １０８ Ｇｌｕ １０６ ―――――――――――――――――――――――――――
【００２６】［実施例３］ ( ＨＳＡの添加効果)ヒト活性化プロテインＣ溶液( １
７００Ｕ／ｍｌ、２０ｍＭクエン酸塩、０.７％ＮａＣ
ｌ、０. ０６７Ｍグリシン) にＨＳＡを２. ５％添加し
た溶液、およびＨＳＡ未添加の溶液を調製し、３７℃お
よび４℃に静置した。経時的に、活性を本明細書中に記
載した方法で測定し、活性保持率を求めた。その結果を
表３に示す。
【００２７】
【表３】 各条件下での活性保持率( ％) ３７℃ ―――――――――――――――――――――――――――――――――― 保存時間( ｈｒ.) ０ １ ３ ６ ８ 24 ―――――――――――――――――――――――――――――――――― ＨＳＡ( ＋) 100 − 99.2 − 101 97.4 ＨＳＡ( −) 100 88.8 92.0 86.2 90.9 79.3 ―――――――――――――――――――――――――――――――――― ４℃ ―――――――――――――――――――――――――――――――――― 保存期間( ｄａｙ) ０ １ ３ ５ ７ 14 ―――――――――――――――――――――――――――――――――― ＨＳＡ( ＋) 100 − 105 − − 98.1 ＨＳＡ( −) 100 112 99.1 104 98.9 85.2 ――――――――――――――――――――――――――――――――――
【００２８】表３から理解されるように、ＨＳＡを含有
していない系においては、ＡＰＣ活性の経時的な低下を
阻止することができない。これらの結果より、２. ５％
ＨＳＡがＡＰＣを著しく安定化することを示すことが結
論される。
【００２９】［実施例４］ ( ＡＰＣの安定性に及ぼすＨＳＡの影響)ＡＰＣの活性
が、ＨＳＡの濃度に依存するデータを表４に示す。活性
化プロテインＣ溶液( ５００Ｕ／ｍｌ) にＨＳＡを０.
５〜１０. ０％添加した。この溶液を保存容器に充填
し、３７℃で静置した。２４時間後、試料を採取し活性
を測定した。ＨＳＡを添加していない場合は、活性が約
２０％低下するが、ＨＳＡを０. ５〜１０. ０％の濃度
範囲で添加した場合には活性は殆ど低下せず安定であっ
た。
【００３０】
【表４】 ＨＳＡのＡＰＣ活性安定性に及ぼす影響 ―――――――――――――――――――――――― ＨＳＡ( ％) 活性残存率( ％) (３７℃、２４Ｈｒ.) ―――――――――――――――――――――――― ０. ０ ７９. ０ ０. ５ ９６. ０ ２. ５ ９７. ４ ５. ０ ９８. ０ １０. ０ １０２ ――――――――――――――――――――――――
【００３１】［実施例５］ ( ＡＰＣの安定性に及ぼすTween80 の影響)ヒト活性化
プロテインＣ溶液( ５００Ｕ／ｍｌ、２０ｍＭクエン酸
塩、０. ７％ＮａＣｌ、０. ０６７Ｍグリシン) に非イ
オン性の界面活性剤であるＴｗｅｅｎ ８０( 商品名)
を０. ０００５％〜０. １％添加した。この溶液を保存
容器に充填し、３７℃で静置した。２４時間後、試料を
採取し、活性を測定した。結果を表５に示す。Ｔｗｅｅ
ｎ ８０を添加しない場合は、活性が約２０％低下し、
安定性が損なわれるが、Ｔｗｅｅｎ ８０を０. ０００
５％〜０. １％の濃度範囲で添加すると、活性に変化は
認められず、高い安定性が保持された。
【００３２】
【表５】 ――――――――――――――――――――――― Tween 80 活性残存率( ％) ( ％) ３７℃、２４Ｈｒ. ――――――――――――――――――――――― 無添加 ７９ 0.0005 １０１ 0.025 １０４ 0.1 １０３ ―――――――――――――――――――――――
【００３３】［実施例６］ ( 凍結乾燥したクエン酸塩固形物の品質に対するＮａＣ
ｌの影響)塩化ナトリウムを濃度１ｍＭ〜５００ｍＭの
範囲まで包合するように、２. ５％ＨＳＡを含むＡＰＣ
凍結乾燥製剤を調製した。各凍結乾燥製剤を６０℃で１
カ月保存した時の固形物の外観上の品質を表６に示す。
【００３４】
【表６】 選択された濃度のＮａＣｌを有する凍結乾燥製剤の品質 ―――――――――――――――――――――――――――――――― 塩化ナトリウム 固形物の品質 (mM) 保存前 60℃で１カ月保存後 ―――――――――――――――――――――――――――――――― １ 白色固型で縮んでいる 極めて縮んでいる １０ 白色固型で僅かに縮んでいる 保存前と同じ ５０ 白色多孔質の塊 保存前と同じ １００ 白色多孔質の塊 保存前と同じ ５００ ガラス状で縮んだ塊 保存前と同じ ――――――――――――――――――――――――――――――――
【００３５】表６の結果より、塩化ナトリウムを高濃度
に含有した場合、ならびに低濃度に含有した場合には、
ＡＰＣの固形物としての製剤を形成しにくいことが明ら
かとなり、５０ｍＭ〜１００ｍＭの塩化ナトリウムの存
在が凍結乾燥製剤の安定化に寄与しているものと考えら
れる。
【００３６】［実施例７］ ( 凍結乾燥製剤中でのＡＰＣ活性)本発明の安定化剤を
添加し( ０. ７％ＮａＣｌ、０. ０６７Ｍグリシンおよ
び２. ５％ＨＳＡ) 、ＡＰＣ活性を各々１００〜２５０
０Ｕ／バイアル含有するように調製したクエン酸緩衝溶
液をバイアルに無菌的に小分けして充填し、凍結乾燥し
て密閉した。各バイアルを１０℃、１５℃および６０℃
に静置し、活性の低下を観た。結果を表７に示す。この
データは、本発明のＡＰＣの安定化方法において、凍結
乾燥の形で安定であることを示すものである。
【００３７】
【表７】 活性残存率( ％) ―――――――――――――――――――――――――――― ＡＰＣ 時間 １０℃ １５℃ ６０℃ ( Ｕ／ハ゛イアル ) ―――――――――――――――――――――――――――― １００ 30カ月 １００ １０１ − ５００ 30カ月 ９７ ９９ − １１日 ９９ １０００ 30カ月 ９９ ９７ − ２５００ 30カ月 ９８ ９５ − １１日 １０５ ――――――――――――――――――――――――――――
【００３８】［実施例８］ ( ＡＰＣの安定性に及ぼす繰り返し凍結融解の影響)５
００Ｕ／ｍｌの活性を有する活性化プロテインＣクエン
酸緩衝溶液に本発明の安定化剤( ０. ７％ＮａＣｌ、
０. ０６７Ｍグリシンおよび２. ５％ＨＳＡ)を添加
し、これを凍結( −８０℃) と融解を繰り返し( ５、１
０、１５、２０回) 、その活性を測定した。その結果を
表８に示す。凍結融解を２０回繰り返したが、ＡＰＣ活
性に大きな変化は観られず、安定であった。
【００３９】
【表８】 ＡＰＣの凍結融解に対する安定性 ―――――――――――――――――――――――― 繰り返し回数 活性保持率（％） ―――――――――――――――――――――――― ５ １０２ １０ ９５. １ １５ １０６ ２０ ９９. ２ ――――――――――――――――――――――――
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 緒方 洋一 熊本県熊本市清水町大窪668番地 財団法 人化学及血清療法研究所内 (72)発明者 中垣 智弘 熊本県熊本市清水町大窪668番地 財団法 人化学及血清療法研究所内

Claims (8)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 ナトリウムイオンを含有する塩類緩衝液
    から構成され、少なくとも一種のアミノ酸を添加し、さ
    らにアルブミンもしくは非イオン性界面活性剤を単独で
    もしくは組み合わせて添加することを特徴とするプロテ
    インＣもしくは活性化プロテインＣの安定化方法。
  2. 【請求項２】 最終濃度が、０. ００５Ｍ〜０. １Ｍと
    なる量でアミノ酸を含有させる請求項１記載のプロテイ
    ンＣもしくは活性化プロテインＣの安定化方法。
  3. 【請求項３】 アミノ酸が蛋白質構成アミノ酸から選択
    される請求項１もしくは請求項２に記載のプロテインＣ
    もしくは活性化プロテインＣの安定化方法。
  4. 【請求項４】 上記蛋白質構成アミノ酸がグリシン、ア
    ラニン、リジン、アルギニン、アスパラギン酸およびグ
    ルタミン酸から選択される請求項３に記載のプロテイン
    Ｃもしくは活性化プロテインＣの安定化方法。
  5. 【請求項５】 最終濃度が、０. ５％( Ｗ／Ｖ) 〜１０
    ％( Ｗ／Ｖ) となる量でアルブミンを含有させる請求項
    １記載のプロテインＣもしくは活性化プロテインＣの安
    定化方法。
  6. 【請求項６】 最終濃度が、０. ０００５％( Ｗ／Ｖ)
    〜０. １％( Ｗ／Ｖとなる量で非イオン性界面活性剤を
    添加することを特徴とする請求項１記載のプロテインＣ
    もしくは活性化プロテインＣの安定化方法。
  7. 【請求項７】 プロテインＣ及び／または活性化プロテ
    インＣを１００〜２５００Ｕ／ｍｌ、ナトリウムイオン
    を５０〜２００ｍＭ、アミノ酸を５〜１００ｍＭ含有
    し、さらにアルブミン０．５〜１０％（Ｗ／Ｖ）もしく
    は非イオン性界面活性剤０．０００５〜０．１％（Ｗ／
    Ｖ）を単独でもしくは組み合わせて含有するプロテイン
    Ｃ及び／または活性化プロテインＣ含有水溶液。
  8. 【請求項８】 プロテインＣ及び／または活性化プロテ
    インＣを１×１０5〜２．５×１０6 単位、ナトリウム
    を５０〜２００ｍｇ単位有するナトリウム塩、アミノ酸
    を５〜１００ｍｍｏｌ含有し、さらにアルブミン５〜１
    ００ｇもしくは非イオン性界面活性剤０．００５〜１ｇ
    を単独でもしくは組み合わせて含有するプロテインＣ及
    び／または活性化プロテインＣ含有組成物。
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