JPS62191042A - 血液凝固第8因子吸着体およびそれを用いた血液凝固第8因子の精製法 - Google Patents
血液凝固第8因子吸着体およびそれを用いた血液凝固第8因子の精製法Info
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
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- Chemical & Material Sciences (AREA)
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- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
[産業上の利用分野]
本発明は血液凝固第■因子吸菅体および該吸着体を用い
た血液凝固第■因子の精製法に関する。
た血液凝固第■因子の精製法に関する。
[従来の技術および発明が解決しようとする問題点〕
血液凝固第■因子は抗血友病A因子とも呼ばれ、従来よ
り血友病A患者の出血の治療には欠乏している血液凝固
第■因子を投与する方法が一般に行なわれている。
り血友病A患者の出血の治療には欠乏している血液凝固
第■因子を投与する方法が一般に行なわれている。
しかしながら血液凝固第VIII因子は血漿中に微量し
か存在せずまた不安定であることがらヒト血漿からの血
液凝固第VIII因子の回収精製は容品でない。
か存在せずまた不安定であることがらヒト血漿からの血
液凝固第VIII因子の回収精製は容品でない。
現在のところ血友病A患者への血液凝固第■因子の補充
にはクリオプレシピテートおよび第■因子濃縮製剤が用
いられている。
にはクリオプレシピテートおよび第■因子濃縮製剤が用
いられている。
クリオプレシピテートは血漿の粗分画を用いるため第■
因子の回収率が高いという利点はあるが、アレルギー反
応が出やすくまた大量のフィブリノーゲンを含んでいる
ため血漿中のフィブリノーゲンの濃度が増加する、第V
III因子の濃度が低いため大量の製剤を注入しなけれ
ばならないなどの欠点がある。
因子の回収率が高いという利点はあるが、アレルギー反
応が出やすくまた大量のフィブリノーゲンを含んでいる
ため血漿中のフィブリノーゲンの濃度が増加する、第V
III因子の濃度が低いため大量の製剤を注入しなけれ
ばならないなどの欠点がある。
第■因子濃縮製剤はこれらの欠点がないため血友病A患
者への補充用として優れているが、通常第■因子濃縮製
剤は米国特許第3.!1,018号明細書などに示され
ているようにコーン分画11あるいはクリオプレシピテ
ートなどの第■因子粗製画分から、ポリエチレングリコ
ール沈殿分画法、グリシン沈殿分画法などを組合わせた
複雑な方法により製造されるため濃縮時の第VIII因
子の回収率か約20%と非常に低いという問題点がある
。
者への補充用として優れているが、通常第■因子濃縮製
剤は米国特許第3.!1,018号明細書などに示され
ているようにコーン分画11あるいはクリオプレシピテ
ートなどの第■因子粗製画分から、ポリエチレングリコ
ール沈殿分画法、グリシン沈殿分画法などを組合わせた
複雑な方法により製造されるため濃縮時の第VIII因
子の回収率か約20%と非常に低いという問題点がある
。
[問題点を解決するための手段〕
本発明者らが鋭意研究を重ねた結果、排除限界分子量が
80万〜1億の水不溶性多孔質ゲルであって少なくとも
その表面の一部に硫酸エステル基を有する吸着体を用い
ることによって斜上の問題点が解消され、体液中の血液
凝固第■因子を複雑な操作を用いることなく効率的、選
択的かつ高収率で吸着分離しうろことが見出された。
80万〜1億の水不溶性多孔質ゲルであって少なくとも
その表面の一部に硫酸エステル基を有する吸着体を用い
ることによって斜上の問題点が解消され、体液中の血液
凝固第■因子を複雑な操作を用いることなく効率的、選
択的かつ高収率で吸着分離しうろことが見出された。
[実施例コ
本明細書でいう体液とは血液、血漿およびこれらからえ
られた分画成分その他の生体由来の液性成分で血液凝固
第■因子を含有するものであれぽいかなるものであって
もよい。
られた分画成分その他の生体由来の液性成分で血液凝固
第■因子を含有するものであれぽいかなるものであって
もよい。
本発明に用いる水不溶性多孔質ゲルは、大きな径の連続
した細孔を有するものが好ましい。
した細孔を有するものが好ましい。
すなわち血液凝固第■因子は分子量が少なくとも 10
0万以上の巨大分子であり、これを吸着するためには第
■因子が容易にゲル内に侵入できることが必要である。
0万以上の巨大分子であり、これを吸着するためには第
■因子が容易にゲル内に侵入できることが必要である。
細孔径の測定方法には種々あり、水銀圧入法が最もよく
用いられているが、親水性ゲルのばあいには適用が難し
い。親水性ゲルの細孔径の目安として排除限界分子量が
よく用いられる。
用いられているが、親水性ゲルのばあいには適用が難し
い。親水性ゲルの細孔径の目安として排除限界分子量が
よく用いられる。
排除限界分子量とは底置(たとえば波多野ト、ワ行、花
卉俊彦著、実験高速液体クロマトグラフィ、化学同人な
ど)に述べられているごとく、ゲル浸透クロマトグラフ
ィにおいて細孔内に侵入できない(排除される)分子の
うち最も小さい分子量を有する分子の分子量をいう。排
除限界分子量は対象とする化合物により異なることが知
られており、一般に球状蛋白質、デキストラン、ポリエ
チレングリコールなどについてよく調べられており、最
も類似している球状蛋白質(ビールスを含む)を用いて
えられた値を用いるのが適当である。
卉俊彦著、実験高速液体クロマトグラフィ、化学同人な
ど)に述べられているごとく、ゲル浸透クロマトグラフ
ィにおいて細孔内に侵入できない(排除される)分子の
うち最も小さい分子量を有する分子の分子量をいう。排
除限界分子量は対象とする化合物により異なることが知
られており、一般に球状蛋白質、デキストラン、ポリエ
チレングリコールなどについてよく調べられており、最
も類似している球状蛋白質(ビールスを含む)を用いて
えられた値を用いるのが適当である。
排除限界分子量の異なる種々の水不溶性多孔質ゲルを用
いて検討した結果、予想に反し排除限界分子量が第■因
子の分子mより小さい80万程度のものでもある程度の
吸着能を示し、また細孔径の大きいものほど吸着能力が
大きいわけでなく、むしろ能力が低下したり第■因子以
外の蛋白が吸着されること、すなわち最適な細孔径の範
囲が存在することが明らかになった。すなわち80万未
満の排除限界分子量を有する水不溶性多孔質ゲルを用い
たばあいは第■因子の吸着量は小さく実用に耐えないが
、排除限界分子量が80万ないし200万と第■因子の
分子量に近い水不溶性多孔質ゲルを用いてもある程度実
用に供しうる吸着体かえられた。一方、排除限界分子量
が大きくなるにつれて第VIII因子の吸112は増加
するがやがて頭打ちとなり、排除限界分子量が1億以上
になると表面積が少なすぎ吸z1量は目立って低下する
。
いて検討した結果、予想に反し排除限界分子量が第■因
子の分子mより小さい80万程度のものでもある程度の
吸着能を示し、また細孔径の大きいものほど吸着能力が
大きいわけでなく、むしろ能力が低下したり第■因子以
外の蛋白が吸着されること、すなわち最適な細孔径の範
囲が存在することが明らかになった。すなわち80万未
満の排除限界分子量を有する水不溶性多孔質ゲルを用い
たばあいは第■因子の吸着量は小さく実用に耐えないが
、排除限界分子量が80万ないし200万と第■因子の
分子量に近い水不溶性多孔質ゲルを用いてもある程度実
用に供しうる吸着体かえられた。一方、排除限界分子量
が大きくなるにつれて第VIII因子の吸112は増加
するがやがて頭打ちとなり、排除限界分子量が1億以上
になると表面積が少なすぎ吸z1量は目立って低下する
。
したがって本発明に用いる水不溶性多孔質ゲルの好まし
い排除限界分子量は80万〜1億てあり、さらに好まし
くは 200万〜5000万である。
い排除限界分子量は80万〜1億てあり、さらに好まし
くは 200万〜5000万である。
つぎに水不溶性多孔質ゲルの多孔構造については表面多
孔性よりも全多孔性が好ましく、空孔容積が20%以上
であることが好ましい。水不溶性多孔質ゲルの形状は、
粒状、繊維状、膜状、ホローファイバー状など任意の形
状を選ぶことができる。粒子状の水不溶性多孔質ゲルを
用いるばあい、その粒子径は1〜5000J!mである
のが望ましい。
孔性よりも全多孔性が好ましく、空孔容積が20%以上
であることが好ましい。水不溶性多孔質ゲルの形状は、
粒状、繊維状、膜状、ホローファイバー状など任意の形
状を選ぶことができる。粒子状の水不溶性多孔質ゲルを
用いるばあい、その粒子径は1〜5000J!mである
のが望ましい。
本発明に使用する水不溶性多孔質ゲルは有機、無機いず
れであってもよいが、目的とする第■因子以外の血液成
分の吸着(いわゆる非特異吸6゛)が少ないものが望ま
しい。
れであってもよいが、目的とする第■因子以外の血液成
分の吸着(いわゆる非特異吸6゛)が少ないものが望ま
しい。
本発明に使用する水不溶性多孔質ゲルの代表例としては
、アガロース、デキストラン、ポリアクリルアミドなど
の軟質ゲル、多孔質ガラス、多孔質シリカゲルなどの無
機多孔体、ポリメチルメタクリレ−1・、ポリビニルア
ルコール、スチレン−ジビニルベンゼン共重合体などの
合成高分子、セルロースなどの天然高分子を原料とする
多孔質ポリマーハードゲルなどがあげられるがこれらに
限定されるわけではない。
、アガロース、デキストラン、ポリアクリルアミドなど
の軟質ゲル、多孔質ガラス、多孔質シリカゲルなどの無
機多孔体、ポリメチルメタクリレ−1・、ポリビニルア
ルコール、スチレン−ジビニルベンゼン共重合体などの
合成高分子、セルロースなどの天然高分子を原料とする
多孔質ポリマーハードゲルなどがあげられるがこれらに
限定されるわけではない。
水不溶性多孔質ゲルに硫酸エステル基を導入する方法は
種々あるが、硫酸エステル基含有化合物を水不溶性多孔
質ゲルに固定する方法、水不溶性多孔質ゲルが水酸基を
含有するばあいにクロルスルホン酸、濃硫酸などの試薬
を用いて直接硫酸エステル基を導入する方法などが代表
的な方法である。
種々あるが、硫酸エステル基含有化合物を水不溶性多孔
質ゲルに固定する方法、水不溶性多孔質ゲルが水酸基を
含有するばあいにクロルスルホン酸、濃硫酸などの試薬
を用いて直接硫酸エステル基を導入する方法などが代表
的な方法である。
硫酸エステル基含有化合物を固定する方法としては共有
結合を介する方法が安定性が高く、好ましい。
結合を介する方法が安定性が高く、好ましい。
本発明に用いる硫酸エステル基含有化合物の代表例とし
ては、アルコール、糖、多価アルコール、炭水化物など
の水酸基含有化合物の硫酸エステルがあげられ、これら
の化合物のうち硫酸エステル基のほかに水不溶性多孔質
ゲルへの固定に利用できる官能基を有する化合物が好ま
しい。なかでも多価アルコールの部分硫酸エステル化物
、とりわけ糖類の硫酸エステル化物が硫酸エステル基と
固定に必要な官能基の双方を含んでいるうえに、生体適
合性、活性ともに高く好ましい。さらに硫酸エステル化
多糖類は容易に水不溶性多孔質ゲルに固定できることか
ら一層好ましい。
ては、アルコール、糖、多価アルコール、炭水化物など
の水酸基含有化合物の硫酸エステルがあげられ、これら
の化合物のうち硫酸エステル基のほかに水不溶性多孔質
ゲルへの固定に利用できる官能基を有する化合物が好ま
しい。なかでも多価アルコールの部分硫酸エステル化物
、とりわけ糖類の硫酸エステル化物が硫酸エステル基と
固定に必要な官能基の双方を含んでいるうえに、生体適
合性、活性ともに高く好ましい。さらに硫酸エステル化
多糖類は容易に水不溶性多孔質ゲルに固定できることか
ら一層好ましい。
硫酸エステル基含有化合物の代表例として、エタノール
アミン、エチレングリコール、グリセリン、アニソール
、ペンタエリスリトール、ソルビトール、ポリビニルア
ルコール、ポリヒドロキシエチルメタクリレートなどの
アルコール、多価アルコールの硫酸エステル化物、グル
コース、キシロース、トレオース、ガラクトース、フコ
ース、ガラクトサミン、ウロン酸、グルクロン酸、アス
コルビン酸などの糖、炭水化物の硫酸エステル化物、ヘ
パリン、デキストラン酸、コンドロイチン硫酸、コンド
ロイチンポリ硫酸、ヘパラン硫酸、ケラタン硫酸、キシ
ラン硫酸、カロニン硫酸、セルロース硫酸、キチン硫酸
、キトサン硫酸、ペクチン硫酸、イヌリン硫酸、アルギ
ニン硫酸、グリコーゲン硫酸、ポリラクトース硫酸、カ
ラギーナン硫酸、硫酸化デンプン、ポリグルコース硫酸
、ラミナリン硫酸、ガラクタン硫酸、レバン硫酸、メベ
サルフェートなどの硫酸エステル化多糖類などがあげら
れるが之れらに限定されるわけではない。
アミン、エチレングリコール、グリセリン、アニソール
、ペンタエリスリトール、ソルビトール、ポリビニルア
ルコール、ポリヒドロキシエチルメタクリレートなどの
アルコール、多価アルコールの硫酸エステル化物、グル
コース、キシロース、トレオース、ガラクトース、フコ
ース、ガラクトサミン、ウロン酸、グルクロン酸、アス
コルビン酸などの糖、炭水化物の硫酸エステル化物、ヘ
パリン、デキストラン酸、コンドロイチン硫酸、コンド
ロイチンポリ硫酸、ヘパラン硫酸、ケラタン硫酸、キシ
ラン硫酸、カロニン硫酸、セルロース硫酸、キチン硫酸
、キトサン硫酸、ペクチン硫酸、イヌリン硫酸、アルギ
ニン硫酸、グリコーゲン硫酸、ポリラクトース硫酸、カ
ラギーナン硫酸、硫酸化デンプン、ポリグルコース硫酸
、ラミナリン硫酸、ガラクタン硫酸、レバン硫酸、メベ
サルフェートなどの硫酸エステル化多糖類などがあげら
れるが之れらに限定されるわけではない。
導入される硫酸イオンの量は、1mlあたり0.01
μs+ol 〜10suaolが望ましい。 0.1.
cz+ol以下では吸着能力が充分でなく 、10mm
o1以上では非特異吸着が多すぎ実用に供することが困
難になる。
μs+ol 〜10suaolが望ましい。 0.1.
cz+ol以下では吸着能力が充分でなく 、10mm
o1以上では非特異吸着が多すぎ実用に供することが困
難になる。
第■因子を含む溶液から本発明による吸着体を用いて第
■因子を分離するには、第■因子を含む溶液と吸着体と
を接触させて第■因子を吸着させたのち、未吸若成分を
洗浄してから第■因子を溶出させればよい。
■因子を分離するには、第■因子を含む溶液と吸着体と
を接触させて第■因子を吸着させたのち、未吸若成分を
洗浄してから第■因子を溶出させればよい。
吸着した第■因子を溶出する方法としては温度を高める
方法、pl+を変化させる方法など種々あるがイオン強
度の高い水溶液により脱離する方法が後処理も簡便で好
ましい。吸着体の種類により第■因子以外の成分が吸着
するばあいには、イオン強度、pIIなどを連続的ある
いは段階的に変化させるいわゆるグラディエンド法によ
り第■因子を分離することもできる。
方法、pl+を変化させる方法など種々あるがイオン強
度の高い水溶液により脱離する方法が後処理も簡便で好
ましい。吸着体の種類により第■因子以外の成分が吸着
するばあいには、イオン強度、pIIなどを連続的ある
いは段階的に変化させるいわゆるグラディエンド法によ
り第■因子を分離することもできる。
つぎに実施例を用いて本発明をさらに詳しく説明するが
、本発明はもとよりこれらに限られるものではない。
、本発明はもとよりこれらに限られるものではない。
実施例1
多孔質セルロースゲルであるCKゲルA−8(チッソ■
製、球状蛋白質の排除限界分子量5X107、粒径45
〜i05μl1l) lomlを取り、エタノール中で
臨界点乾燥により乾燥させた。乾燥ゲルをそれぞれlo
mlのよく脱水したピリジン中に懸濁させ氷冷した。こ
れにクロルスルホン酸2 mlを攪拌下部下し、滴下終
了後10分間攪拌をつづけた。
製、球状蛋白質の排除限界分子量5X107、粒径45
〜i05μl1l) lomlを取り、エタノール中で
臨界点乾燥により乾燥させた。乾燥ゲルをそれぞれlo
mlのよく脱水したピリジン中に懸濁させ氷冷した。こ
れにクロルスルホン酸2 mlを攪拌下部下し、滴下終
了後10分間攪拌をつづけた。
反応終了後ゲルを濾別し、ピリジン、水で洗浄して、表
面に硫酸イオンが導入されたセルロースゲルをえた。
面に硫酸イオンが導入されたセルロースゲルをえた。
実施例2
多孔質セルロースゲルであるセルロファインGCL−2
000(チッソ■製、球状蛋白質の排除限界分子Q 3
X 106) 10m1を水洗液吸引濾過し、これに
ジメチルスルホキサイド6 ml 、2N Na0II
2.6ml、エピクロルヒドリン 1.5mlを加え、
40℃で2時間攪拌した。反応後ゲルを濾別、水洗して
エポキシ基の導入されたセルロースゲルをえた。
000(チッソ■製、球状蛋白質の排除限界分子Q 3
X 106) 10m1を水洗液吸引濾過し、これに
ジメチルスルホキサイド6 ml 、2N Na0II
2.6ml、エピクロルヒドリン 1.5mlを加え、
40℃で2時間攪拌した。反応後ゲルを濾別、水洗して
エポキシ基の導入されたセルロースゲルをえた。
これに濃アンモニア水6 mlを加え、40℃で2時間
反応させてアミノ化セルロースゲルをえた。
反応させてアミノ化セルロースゲルをえた。
えられたゲル2gに、分子量約5000のデキストラン
硫酸ナトリウム4gを0.1Mリン酸バッファ(pH8
,0) 8 mlに溶解した液を加え室温でIc時間振
盪した。反応後NaCNB[l320mgを加え室温で
30分間攪拌後、40℃で4時間加熱したのちゲルを濾
別水洗してデキストラン硫酸の固定されたセルロースゲ
ルをえた。
硫酸ナトリウム4gを0.1Mリン酸バッファ(pH8
,0) 8 mlに溶解した液を加え室温でIc時間振
盪した。反応後NaCNB[l320mgを加え室温で
30分間攪拌後、40℃で4時間加熱したのちゲルを濾
別水洗してデキストラン硫酸の固定されたセルロースゲ
ルをえた。
参考例
セルロースゲルをセルロファインGC700(チッソ■
製、球状蛋白質の排除限界分子量4 X 105、粒径
45〜105μm)にかえたほかは実施例1と同様にし
て表面に硫酸イオンが導入されたセルロースゲルをえた
。
製、球状蛋白質の排除限界分子量4 X 105、粒径
45〜105μm)にかえたほかは実施例1と同様にし
て表面に硫酸イオンが導入されたセルロースゲルをえた
。
実施例3
実施例1.2および参考例で合成した各ゲル1mlを試
験管にとり、これにクエン酸添加ヒト血漿6mlを加え
攪拌しながら37℃で1時間インキュベートした。
験管にとり、これにクエン酸添加ヒト血漿6mlを加え
攪拌しながら37℃で1時間インキュベートした。
吸着後の血漿中の第■因子、IIDLコレステロール、
フィブリノーゲンの濃度を第1表に示す。
フィブリノーゲンの濃度を第1表に示す。
第 1 表
第1表に示された結果から明らかなように、本発明によ
る吸着体(実施例1および2)か排除限界分子量が40
万のセルロースゲルを用いたもの(参考例)に比べて第
■因子に対してすぐれた吸若能を示すことがわかる。
る吸着体(実施例1および2)か排除限界分子量が40
万のセルロースゲルを用いたもの(参考例)に比べて第
■因子に対してすぐれた吸若能を示すことがわかる。
実施例4
実施例1でえられた吸着体1mlをポリプロピレン製カ
ラムに充填し、これにヒト血漿3 mlを流した。つぎ
に生理食塩液10m1を流して未吸着成分を洗浄したの
ち、食塩濃度を0.15Mから2Hまで連続的に変化さ
せた液を流してカラムから流出(グラディエンド溶出)
した液をフラクションコレクターで分取した。
ラムに充填し、これにヒト血漿3 mlを流した。つぎ
に生理食塩液10m1を流して未吸着成分を洗浄したの
ち、食塩濃度を0.15Mから2Hまで連続的に変化さ
せた液を流してカラムから流出(グラディエンド溶出)
した液をフラクションコレクターで分取した。
各フラクションにつき総蛋白、第■因子、フィブリノー
ゲンの濃度を測定した。第■囚子、フィブリノーゲンは
酵素免疫法てhlす定した。結果を第1図に示す。
ゲンの濃度を測定した。第■囚子、フィブリノーゲンは
酵素免疫法てhlす定した。結果を第1図に示す。
第1図の結果から、血液凝固箱■因子は高塩濃度で溶出
され、他の成層蛋白、とくにフィブリノーゲンと分離し
て溶出されることかわかる。
され、他の成層蛋白、とくにフィブリノーゲンと分離し
て溶出されることかわかる。
第1図は、実施例1でえられた本発明の吸jS体を充填
したカラムにヒト血漿を流したのち0.15Mから2M
の食塩濃度でグラディエンド溶出したばあいの各フラク
ションにおける食塩濃度、総蛋白、第VIII因子およ
びフィブリノーゲンの濃度をあられすグラフである。 第1 図
したカラムにヒト血漿を流したのち0.15Mから2M
の食塩濃度でグラディエンド溶出したばあいの各フラク
ションにおける食塩濃度、総蛋白、第VIII因子およ
びフィブリノーゲンの濃度をあられすグラフである。 第1 図
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 排除限界分子量が80万〜1億の水不溶性多孔質ゲ
ルであって少なくともその表面の一部に硫酸エステル基
を有することを特徴とする血液凝固第VIII因子吸着体。 2 水不溶性多孔質ゲルが水酸基含有化合物より構成さ
れてなる特許請求の範囲第1項記載の吸着体。 3 硫酸エステル基が、水酸基含有水不溶性多孔質ゲル
の水酸基を硫酸エステル化することにより導入された特
許請求の範囲第2項記載の吸着体。 4 硫酸エステル基含有化合物が共有結合により水不溶
性多孔質ゲルに固定されてなる特許請求の範囲第1項記
載の吸着体。 5 硫酸エステル基含有化合物が硫酸化多糖である特許
請求の範囲第4項記載の吸着体。 6 血液凝固第VIII因子を含む溶液を、排除限界分子量
が80万〜1億の水不溶性多孔質ゲルであって少なくと
もその表面の一部に硫酸エステル基を有することを特徴
とする血液凝固第VIII因子吸着体で処理して血液凝固第
VIII因子を吸着したのち、血液凝固第VIII因子を溶出し
て回収することを特徴とする血液凝固第VIII因子の精製
法。
Priority Applications (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP61032168A JPS62191042A (ja) | 1986-02-17 | 1986-02-17 | 血液凝固第8因子吸着体およびそれを用いた血液凝固第8因子の精製法 |
CA000529729A CA1283073C (en) | 1986-02-17 | 1987-02-13 | Adsorbent for purification of blood coagulation factor viii and process for purification of blood coagulation factor viii using the same |
DE8787102126T DE3764972D1 (de) | 1986-02-17 | 1987-02-14 | Verwendung eines absorptionsmittels zur reinigung des blutgewinnungsfaktors viii. |
AT87102126T ATE56633T1 (de) | 1986-02-17 | 1987-02-14 | Verwendung eines absorptionsmittels zur reinigung des blutgewinnungsfaktors viii. |
EP87102126A EP0233620B1 (en) | 1986-02-17 | 1987-02-14 | Use of an adsorbent for purification of blood coagulation factor viii |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP61032168A JPS62191042A (ja) | 1986-02-17 | 1986-02-17 | 血液凝固第8因子吸着体およびそれを用いた血液凝固第8因子の精製法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS62191042A true JPS62191042A (ja) | 1987-08-21 |
Family
ID=12351407
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP61032168A Pending JPS62191042A (ja) | 1986-02-17 | 1986-02-17 | 血液凝固第8因子吸着体およびそれを用いた血液凝固第8因子の精製法 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0233620B1 (ja) |
JP (1) | JPS62191042A (ja) |
AT (1) | ATE56633T1 (ja) |
CA (1) | CA1283073C (ja) |
DE (1) | DE3764972D1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS63209750A (ja) * | 1987-02-25 | 1988-08-31 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | 血液凝固第8因子精製用吸着体およびそれを用いた血液凝固第8因子の精製法 |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5177191A (en) * | 1987-12-21 | 1993-01-05 | Miles, Inc. | Gel filtration of factor VIII |
US5110907A (en) * | 1989-08-01 | 1992-05-05 | Alpha Therapeutic Corporation | Factor viii complex purification using heparin affinity chromatography |
JPH0427865A (ja) * | 1989-12-21 | 1992-01-30 | Kurita Water Ind Ltd | 血液凝固因子用分離剤およびその製造方法 |
DD296005A5 (de) * | 1989-12-29 | 1991-11-21 | ���@��������@���������@ ������@������� k�� | Verfahren zur herstellung perlfoermiger celluloseprodukte zur verwendung als trenn- und traegermaterialien |
US5527902A (en) * | 1989-12-29 | 1996-06-18 | Fraunhofer-Gesellschaft Zur Foerderung Der Angewandten Forschung E.V. | Bead-shaped cellulose products for separating and carrier materials and their manufacture |
DE4337573C1 (de) * | 1993-11-04 | 1995-05-18 | Octapharma Ag | Verfahren zur Herstellung einer virusinaktivierten Faktor VIII enthaltenden Fraktion mittels chromatographischer Methoden |
AU3752195A (en) * | 1994-10-07 | 1996-05-02 | Flinders Technologies Pty Ltd | Apparatus and method for storage, purification or reaction and processing of a biopolymer |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4397841A (en) * | 1982-06-28 | 1983-08-09 | Monsanto Company | Production of blood coagulation factor VIII:C |
CA1221307A (en) * | 1982-12-02 | 1987-05-05 | Nobutaka Tani | Adsorbent and process for preparing the same |
GB8403473D0 (en) * | 1984-02-09 | 1984-03-14 | Special Trustees For St Thomas | Purification of factor viii |
-
1986
- 1986-02-17 JP JP61032168A patent/JPS62191042A/ja active Pending
-
1987
- 1987-02-13 CA CA000529729A patent/CA1283073C/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-02-14 AT AT87102126T patent/ATE56633T1/de not_active IP Right Cessation
- 1987-02-14 EP EP87102126A patent/EP0233620B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-02-14 DE DE8787102126T patent/DE3764972D1/de not_active Expired - Fee Related
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS63209750A (ja) * | 1987-02-25 | 1988-08-31 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | 血液凝固第8因子精製用吸着体およびそれを用いた血液凝固第8因子の精製法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE3764972D1 (de) | 1990-10-25 |
EP0233620A2 (en) | 1987-08-26 |
ATE56633T1 (de) | 1990-10-15 |
CA1283073C (en) | 1991-04-16 |
EP0233620B1 (en) | 1990-09-19 |
EP0233620A3 (en) | 1988-02-03 |
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