JPS62185096A - Ａｎｆ活性を有するペプチド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 心房が、細胞外液体積の変化を検出するのに重要なセン
サーとして機能しているということば長い間仮定されて
きた（ガラエル他、フィジオロジカル　レビュー（Ｇａ
ｕｅｒ　ｅｔ　ａｌ、＋ＰｈｙｓｉｏｌＪｅｖ、　）４
３巻：４２３頁、１９６３年）。そのような心房の受容
体機能は、体液の浸透圧濃度を制御するのに重要である
視床下部ホルモン、バゾプレッシンの場合に知られてい
る。

尿中ナトリウム排出を高め、従って細胞外液体積の調節
に関与している物質の仮定された存在が最近明らかにさ
れた。ド　ボルド他（ｄｅ　Ｂｏｌｄ■旦、）、ライフ
　サイエンス（第２１３巻：３９Ｑ、１９８１年）は、
部分的に精製されたラット心房の抽出液を、他の麻酔し
たラットに注射して尿流と尿中ナトリウム排出が大きく
増大することを観察した。この比較的粗な抽出物は、内
在性の尿中ナトリウム排出促進物質（ｎａｔｒｉｕｒｅ
ｔｉｃｓｕｂｓｔａｎｃｅ　）として適切な特性を有し
た。

該物質を体液体積制御にたいし主要な効果をもたらすの
に特に適当なものにしている性質であるその強力な利尿
ならびに尿中ナトリウム排出促進効果に加えて、心房の
これら抽出物が、強力な平滑筋弛緩活性を持つことも発
見された（キュリー他（Ｃｕｒｒｉｅ　ｅｔ　ａｌ、）
　、サイエンス第２２１巻＝７１頁、１９８３年）。そ
のような作用は、細胞外液体積制御における役割ととも
に、血圧制御における強力な直接的役割をも示唆する。

この発見の、体液体積および血圧の制御の理解における
直ちに認められた重要性および、そのような天然物質の
、うっ血性心不全および高血圧の治療における明らかな
治療上の潜在力の故に、多くの研究室が心房抽出液中の
活性物質の単離、特性付けおよび化学的同定に取り掛か
った。心房中の活性物質は、心房性尿中ナトリウム排出
促進因子またはＡＮＦと呼ばれたが、カルヂオナトリン
（ｃａｒｄｉｏｎａｔｒｉｎ）　　（ドボルド他、ライ
フ　サイエンス第３３巻：２９７−３０２頁、１９８３
年）およびアトリオベブチン（キュリー他、サイエンス
第１１１巻：６７頁、１９８４年）としても参照されて
きた。

チボー他（Ｔｈ１ｂａｕｌｔ　ｅｔ　ａｔ、、　ＦＥＢ
Ｓ　Ｌｅｔｔ、）フェブス　レター第１６４巻２号；２
８６−２９０頁１９８３年は、２６．３１および３３ア
ミノ酸の３ペプチドを開示し、それらのアミノ酸組成を
与えたが、アミノ酸配列は与えていない。これらペプチ
ドは、ラット心房から単離されたので、すべての光学活
性アミノ酸はＬ−配位を有する。

フリン他、バイオケミカル　アンド　バイオフィジカル
　リサーチ　コミュニケーションズ（Ｆｌｙｎｎ　ｅｔ
　ａｌ、、Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ、Ｒｅｓ、
Ｃｏｍｍ、）第１１７巻３号：８５９−８６５頁、１９
８３年は、配列 を有する２８−アミノ酸ペプチドを開示した。このペプ
チドは、ラット心房から単離されたので、すべての光学
活性アミノ酸はＬ−配位を有する。

キュリー他、サイエンス第２２３巻：６７−６９頁、１
９８４年は配列１０−３０およびｌｏ−３２（番号は上
と同じ）を有するペプチドを開示した。これらペプチド
はラット心房から単離されたので、すべての光学活性ア
ミノ酸はＬ−配位を有する。

カンガワ他（Ｋａｎｇａｗａ　ｅｔ　ａｌ、）　、バイ
オケミ的１９８４年は、１７−位のイソロイシンの代わ
りにメチオニン残基を含む、配列６−３３　（番号は上
と同じ）を有する２８アミノ酸ペプチドを開示した。こ
のペプチドは心房組織から単離されたので、すべての光
学活性アミノ酸はＬ−配位を有する。

チボー他、フエブス　レター第１６７巻２号：３５２−
３５７頁、１９８４年は、１０３アミノ酸のペプチドの
単離を開示しＣ−末端７３アミノ酸断片の配列を与えた
。チボー他、上記、により開示された３種のペプチドは
、このペプチドのＣ−末端に対応する。これらペプチド
のすべてがラット心房から単離され、合成された１つは
単離された最短のものに従ったので、すべての光学活性
アミノ酸はＬ−配位を有する。

ミソノ他（Ｍｉｓｏｎｏ　ｅｔ　ａｌ、）　、バイオケ
ミカルアンド　バイオフィジカル　リサーチ　コミュニ
ケーションズ第１１９巻２号：５２４−５２９頁、１９
８４年は、配列９−３３　（番号は上と同じ）の２５−
アミノ酸ペプチドの単離を開示した。このペプチドはラ
ット心房から単離されたので、すべての光学活性アミノ
酸はＬ−配位を有する。

ニードルマン他（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ　ｅｔ　ａｌ、）
　、米国特許第４，４９６，５４４号は、配列１２−２
９．１２−３０．１２−３２．１２−３３．１１−２９
．１１−３０．１１−３２．１１−３３．１０−２９．
１０−３０．１０−３２および１Ｏ−３３（番号は上と
同じ）の数種のペプチドからの単離を開示した。これら
ペプチドはラット心房から単離されたので、すべての光
学活性アミノ酸はＬ−配位を有する。

本発明の目的は、生物材料から単離されたＡＮＦペプチ
ドのものと同じような活性ををする新規なペプチドを供
給することである。他の目的は、強力な尿中すｌ−ＩＪ
ウム排出促進活性、血管拡張活性および降圧活性を有す
る新規なペプチドを供給することである。更に他の目的
は、代謝安定性の高まった新規ペプチドを供給すること
である。本発明の、これらおよび他の目的は、以下の記
載から明らかとなろう。

以下のアミノ酸配列をもつ、強力な尿中ナトリウム排出
促進活性を有する新規なペプチドが開示されている： ここにＸはＬ−イソロイシン、Ｄ−イソロイシン、Ｄ−
アローイソロイシン、Ｌ−メチオニンまたはＤ−メチオ
ニン、Ｙがグリシン、Ｌ−アラニンまたはＤ−アラニン
、Ａが水素、セリン、セリルーセリン、アルギニル−セ
リル−セリン、アルギニル−アルギニル−セリル−セリ
ン、ロイシル−アルギニル−アルギニル−セリル−セリ
ンまたはセリル−ロイシル−アルギニル−アルギニル−
セリル−セリンおよびＢは水酸基、アスパラギン、アス
パラギニル−セリン、アスパラギニル−セリル−フェニ
ルアラニン、アスパラギニル−セリル−フェニルアラニ
ル−アルギニン、またはアスパラギニル−セリル−フェ
ニルアラニル−アルギニル−チロシン、そしてすべての
光学活性アミノ酸残基はＤまたはＬでもよく、少なくと
も一つのアミノ酸はＤ−配位、およびそのアミド、低級
アルキルエステルおよび生理的に受容可能な金属塩およ
び酸付加塩である。

生物材料から単離されたＡＮＦペプチドと同様な活性即
ち、強力な尿中ナトリウム排出促進、血管拡張および降
圧活性を有するが、高い代謝安定性を伴った新規ペプチ
ドが、少なくとも一つのＤ−アミノ酸をＬ一対応体の代
わりにおくか、少なくとも一つのしアラニン、またはＤ
−アラニンをグリシンの代わりにおくことにより得られ
た。

本発明の新規ペプチドは以下のようである：ここにＸは
Ｌ−イソロイシン、Ｄ−イソロイシン、Ｄ−アローイソ
ロイシン、Ｌ−メチオニンまたはＤ−メチオニン、Ｙは
グリシン、Ｌ−アラニンまたはＤ−アラニン、Ａは水素
、セリン、セリル−セリン、アルギニル−セリル−セリ
ン、アルギニル−アルギニル−セリル−セリン、ロイシ
ル−アルギニル−アルギニル−セリル−セリンまたはセ
リル−ロイシル−アルギニル−アルギニル−セリル−セ
リンそしてＢは水酸基、アスパラギン、アスパラギニル
−セリン、アスパラギニル−セリル−フェニルアラニン
、アスパラギニル−セリル−フェニルアラニル−アルギ
ニン、またはアスパラギニル−セリル−フェニルアラニ
ル−アルギニル−チロシン、そしてすべての光学活性ア
ミノ酸残基がＤまたはしてよく、少なくとも一つのアミ
ノ酸はＤ−配位、およびそのアミド、低級アルキルエス
テルおよび生理的に受容可能な金属塩および酸付加塩で
ある。

Ｄ−アミノ酸は、通常の蛋白分解酵素がもはや働かない
点を導入する。それらはまた、近傍のアミノ酸のところ
で配位を修飾し固定イヒする。このことは、グリシンが
Ｄ−アラニンで置換されたときにもっとも顕著である。

配位の柔軟性が減少すると、ペプチドの酵素による開裂
にだいする感受性が減ることが知られている。こうして
、グリシンをＬ−アラニンで置換することが、その残基
自身は多くの蛋白分解酵素の天然の基質であるにもかか
わらず、代謝安定性を高めることになる。これら類似物
のいくつかの高められた活性は多分、柔軟性の減少を反
映するものである。

Ｃ−末端基として−ＣＯＯＨまたは一〇〇ＮＨ２のどち
らかを含む本発明の特異的なペプチドが以下の表に挙げ
られている。ここに、Ｌ−配位の既知ペプチドの配列が
上に示され、本発明の新規ペプチドは指示された置換を
行うことにより得られた。ダッシュは、指示された位置
にアミノ酸残基がないことを示している。用語“Ｄａ）
ｌｅ　”はアミノ酸り−アローイソロイシンを表す。他
のアミノ酸については慣用表示が用いられている。

８　　　冥　１１１１１１１１１１１１１１１１刈　　
　ご　１１１１１１１１１１１１１１１１Ｅ　　ａ　ｌ
　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　
　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　１８　講１１
１１１１１１１１１１１＋１１１；Ｑ　　　　：１ｌｌ
ｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌ１８　調１　１　１　１　１
　１　１　１　１　１　１　１　、、ｌ　　ｌ　　ｌ　
　ｌ■　　　？！　１１１１　ｌ　１１１１　Ｉ　１１
１１１　ｌエ　５　＋ＩＩＩＩＩＩＩＩＩＩＩＩＩＩＩ
（−ｊ　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　
ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ
。　よ１１１１１１１１１１１１１１１１８　　　瓢　
１１１１１１１１１１１１１１１１１宮　、ｉ；　ｌ　
　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　
ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　Ｉ　　ｌ　　ｌあ　、
ｐ　１１１．１１１１１１１１１１１１１１８　よ１１
１１１１１１１１１１１１１１１９　　Ｊｌｌｌｌｌｌ
ｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｃｈｊ’　ｌ　　ｌ　　ｌ　
　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　
ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　１００　　Ｅ　Ｉ　　
ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　Ｉ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ
　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　Ｉ　　ｌ　　ｌ　　１、−　Ｊ
ｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌゆ　ぶ１１１１１
１１１１１１＋１１１１１仁芒宍８廓８８お８８好円８
８旦刈８ ８　　具　＋１１１１１１１１１１１１１１１１羽　　
′？！ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ
　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　
　ｌＥ　　Ｊｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌ８　
ぶ１１１１＋、１ｌｌｌｌｌｌｌｌｌ１１８３」−ゝ　
°　　ゝ　ゝ　５　噸　゛　ゝ　（−１１噸　ζ＝　よ
１１１１１１１１１１１１１１１１１貴　ぶ１１１１１
１１１１１１１１１１１１■　　　ピ　１１１１１１１
１１１１１１１１１１閃　　　ピ　１１１１１１１１１
１１１１１１１１、　　　Ｊｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌ
ｌｌｌｌｌロ　よ１１１１１１１１１１１１１１１１１
あ８８柘同８♀；窒♀；り零午雰雰８ ９　　　ｉｉ、ｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌ１ｇ
４　　Ｅ　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　
　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　１１　１　　ｌ　　ｌ　　
１問　１１　１　１　１　１　１　１　１　１　１　１
　１　１　１　１　１　１９　ぶ１１１１１１１１１１
１１１１１１１゜　　、；　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　
ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ
　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ■　　　ピ　ｌ　　ｌ　　ｌ
　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　
　ｌ　　１．１　１　１　１１’＋　　Ｊｌｌｌｌｌｌ
ｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌゆ　よ１１１１１１１１１１１
１１１１１１謬８８スＢ瀘砧瀘Ｓ８ヨ８２３と８ミ ８　　　ミ　１１１１１１１１１１１１１１１１１刈　
　ピ　ｌｌｌ　　１１ｌｌｌｌｉｌｌｌｌｌｌｌ貴　よ
１１１１１１１１１１１１１１１１１■　　　ピ　１１
１１１１１１１１１１１１１１１（１）　　　ご　１１
１１１１１１１１１１１１１１１、　　；１１１１１１
１１１１１１１１１１１゜　講１１１１１１１’１ｌｌ
ｌｌｌｌｌｌｌ困８２；さｇ？ごρβに笛さ８−８８♂
８　　ミ　１１ｌｌｌｌｌｌ　　１１１ｌ１１１１１宮
　　ピ　ｌ　　ｌ　　Ｍｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　
　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　
１０　　　、　丸　　々　　ｋ　　ｋ　　ミ　　モ　　
ζ　　ζ　　祉　　礼　　ζ　　ζ　　モ　　モ　　ミ
　　ｋ　　艷８　よ（ｋ　モ　ζ　・　゛　ζ　’Ｎｋ
ｋｋｋ　　″　ζ　ζ　ζ・８　　毎　日　目　日　ζ
　ζ　日　ｂｂｋｌ＋ｋｋｂ：ｌ：　　よ１１１１１１
１１１１１１１１１１１９　よ１１１１１１１１１１１
１１１１１１ａ、、　　　Ｑｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌ
ｌｌｌｌｌｃ、　　　　ｉ’１ｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌ
ｌｌｌ１１、　　！１１１１１１１１１１１１１１１１
１８　　ミ　１１１１１１１１１１１１１１１　１　に
　よ１１１１１１１１１１１１１１１１１り　　　ピ　
：１ｌｌｌｌｌｌｉｉｌｌｌｌｉｌｌ美　　　ご　１１
１１１１１１１１１１１１１１１＞　　　；１１１１１
１１１１１１１１１１１１ゆ　ぶ１１１１１１１１１１
１１１１１１１ｓｑｘｓｓミロ８貴＝斗♀＝ツ異＝宍 ８　　鼠　１１１１１１１１１１１１１１１１１１羽　
Ｘζ　ｂｂｋｋｂｂｋｂｋｋＴｈｋｂ　　パ゛゛）、（
麹　ｋ　ζ　　ζ　ζ　　々　ζ　ζ　モ　　ミ　−−
ζ　　ｋ　ζ　　々　　（８よ篭　ｋ　（ζ　ζ　ζ　
（（ζ　ζ　ζ　ｋ　−ｋｋ　篭　−ζｇｌ　　　　ｉ
ｉｉ　　Ｉ＋　ｂｂｂｂ　　１１　ｂｂｂｂｂ　　−１
ｋｋｋｋ−召　１１１１１１１１１１１１　　“　１１
１１１−　　メ　１ｌｌ１１１１：ｉｌｌ：ＩＩ：ｌ　
　゛　ｌ■　　　ピ　ｌ　　’ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　
　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　：　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　
ｌ　　’　　：　　ｌ　　　ｌ苫　　　ピ　１ｌｌ１１
：１ｌｌｌｉｌｌｌｌ：：　　　：６；　ｌ　　ｌ　　
ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ
　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　１：。　よ１ｌｌ
ｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌ　　：ｃ！２８お８８お
８８膓円Ｓ８お宮８ざ召８２　　　ミ　Ｉ　Ｉ　１　；
　′＞　ζ　ミ　ζ　ｋ　（−≧　セ　（ｋ　（（ζ←
　　　　　　−← ＠、ＱＯζζ（＋！２ミミ丸ｌ＋−（ｋミモに祉ζζζ
９　　、、＋１１１１１１１１１１１１１１１１１■　
　　ピ　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　
ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　、
、ｌ　　ｌ　　ｌ■　　　ｉ！ｏ　１１１１１１１　）
　１１　Ｉ　Ｉ　１　ｊ　１１１１％　　　；１１１１
１１１１１１１１１１１１１１＝　よ１１１１１１１１
１１１１１１１１１９　謳１１１１１ｔｌｌｌｌｌｌｌ
ｌｌｌｌピ　１１１１１１１１１１１１１１１１１ピ　
１１１１１１１１１１１１１１１１１ｊ’＋　　ｊ、　
ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ
　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｌ　　ｉ　　ｌ　　ｌペ
プチド１−１７１の各々に、指示された位置における以
下のアミノ酸配列を付加することにあり、本発明の追加
のペプチドがそれぞれ得られた：−　　　　Ｌ−Ｓｅｒ −Ｌ−Ｓｅｒ　　　Ｌ−Ｓｅｒ −Ｌ−Ａｒｇ　　Ｌ−５ｅｒ　　Ｌ−Ｓｅｒ−Ｌ−Ａｒ
ｇ　　Ｌ−Ａｒｇ　　Ｌ−Ｓｅｒ　　Ｌ−Ｓｅｒ−Ｌ−
１ｅｕ　　Ｌ−Ａｒｇ　　Ｌ−Ａｒｇ　　Ｌ−Ｓｅｒ　
　Ｌ−ＳｅｒＬ−５ｅｒ　　　Ｌ−Ｌｅｕ　　　Ｌ−Ａ
ｒｇ　　　Ｌ−Ａｒｇ　　　Ｌ−Ｓｅｒ　　　Ｌ−５ｅ
ｒここに規定されているように、配列１２−２８．１２
−２９．１２−３０．１２−３１．１２−３２または１
２−３３の各々に、指示された位置における以下のアミ
ノ酸配列を付加することにより、本発明のさらなるペプ
チドが得られた。ここに、全ての他の光学活性アミノ酸
はＬ−配位を有する： 本発明のＡＮＦペプチドは、その構成アミノ酸から蛋白
合成の標準法により製造され、その開示がここに参考と
して取り入れられている。例えばシュレーダー（５ｃｈ
ｒｏｅｄｅｒ　ａｔ　ａｌ、、　”　Ｔｈｅ　Ｐｅｐｔ
ｉｄｅｓ　”　）他、“ザ　ペプチド”第１巻アカデミ
ツク　プレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ）、１９
６５年、またはボダンスキー他、“ペプチド　シンセシ
ス”インターサイエンス　パプリッシャーズ（Ｂｏｄａ
ｎｓｚｋｙ　ｅｔ　ａｌ、。

”　Ｐｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ　”　、　Ｉ
ｎｔｅｒｓｃｉｅｎＣｅ　Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ）１９
６６年、またはマコーミ−（編）“プロテクチブ　グル
ーブス　イン　オルガニック　ケミストリー”　（Ｍｃ
Ｏｍｉｅ（ｅｄ、）、　”　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖ、ｅ　
Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎＯｒｇａｎｉｃ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ　”　）　％プレナム　プレス（Ｐｌｅｎｕｍ　Ｐｒ
ｅｓｓ）　１９７３年、および・ジョーシバラニーとＲ
，Ｂ、メリフィールド（Ｇｅｏｒｇｅ　Ｂａｒａｎｙａ
ｎｄ　Ｒ，Ｂ、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ）による、アカデ
ミツク　プレス、１９８０年、ニューヨーク、“ザ　ペ
プチド：アナリシス、シンセシス、バイオロジー”（Ｔ
ｈｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ　：　Ａｎａｌｙｓｉｓ、５ｙ
ｎｔｈｅｓｉｓ、Ｂｉｏｌｏｇｙ　”　）第２巻第１章
、により調製され得る。

ＡＮＦの一つの治療上の利用は、標準的な治療が強力な
利尿剤を米消血管拡張剤と併用して用いているうっ血性
心不全である。心房性の尿中ナトリウム排出因子は、体
内で天然に産生される一つの分子中にこれら作用の両方
を併合している。

そのうっ血性心不全治療への利用に加えて、ＡＮＦの第
二の主要な治療上の利用は本態性高血圧症である。高血
圧症に対する標準治療法は、利尿剤と宋消血管拡張剤を
用いている。心房性尿中ナトリウム排出因子は、これら
特性の両方を取り込む。特異的な利用は、悪性の高血圧
症のような高血圧による危機に対する応急処置において
も見られよう。そこでは、ＡＮＦの強力な血管拡張効果
が際だったものとなろう。

治療上の利用におけるこれら二つの非常に広い範囲に加
えて、ＡＮＦのり臓血行力学、特に乳頭部血流の高進に
たいする好ましい作用の故に、賀臓機能の減少により特
徴付けられる疾病が利得を受けよう。

本発明のペプチドは、各々または併用で哺乳動物種にお
ける電解質平衡の不調および／または変化した血管抵抗
性にだいし、約１０ピコモル／ｋｇＺ分から約３００ナ
ノモル／ｋｇ／分、好ましくは約１００から約１０００
ピコモル／ｋｇ／分の量で治療するのに有用である。該
ペプチドは、例えば適当な生理的に受容可能な単体、例
えば生理食塩水または燐酸緩衝生理食塩水中で、静脈注
入により投与され得る。

本発明のベプチ下またはそのアミド、または低級アルキ
ルエステルまたは金属塩または製薬上受容可能な酸との
酸付加塩は、哺乳動物種例えばラットまたはマウスに、
静脈内、皮下、または筋肉内注射のどれか、または舌下
または鼻腔内投与により、製薬上受容可能な担体との共
用組成で全身的に投与される。注射または経鼻投与する
ためには、該ペプチドを、溶液を等張にするために十分
な量の製薬上受容可能な塩またはグルコースとともにバ
ッファーまたは保存剤のような他の溶質も含み得る滅菌
水性担体中の溶液として用いるのが好ましい。加えて、
上述の組成が鼻腔内投与のための噴霧剤として意図され
るなら、各々のペプチドが鼻粘膜により素早く吸収され
るのを確かなものにするために、少量の製薬上受容可能
な界面活性剤も含み得る。そのような界面活性剤の例に
は、ポリソルベート８０　（Ｔｗｅｅｎ　８０）　、塩
化ベンズアルコニウム、グリココール酸ナトリウムのよ
うな胆汁酸塩、ジオクチル　スルフォ琥珀酸ナトリウム
（Ａｅｒｏｓｏｌ　ＯＴ）等がある。舌下投与のために
は、本発明のペプチドをラクトースのような固形賦形剤
または担体とともに素早く溶解する錠剤に賦形するのが
好ましい。その様な賦形剤または担体の例は、標準的な
薬学の教科書、例えばレミントンのファーマスーチカル
　サイエンセズ、マツグ　パブリッシング　カンパニー
、イーストン（Ｒｅｍｉ＄ｎ’ｓ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕ
ｔｉｃａｌ　５ｃｉｅｎｃｅｓ、ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓ
ｈｉｎｇ　Ｃｏ１ＩＩｐａｎｙ、ｔ！ａｓｔｏｎ＋）　
、ペンシルバニア１９７０年中に見いだされる。鼻腔内
または舌下投与は静脈投与はど正確ではないが、より簡
便な治療法である。

本発明のペプチドの投与が、利尿、尿中ナトリウム排出
、血管弛緩、降圧、または抗高血圧効果、例えば高血圧
、とくに腎臓血管高血圧の治療における効果を得るため
に望まれるなら、投与量は、種、年齢、体重、性、およ
び患者の状態および選ばれた投与法に依存するであろう
。一般に、治療は、各ペプチドの最適量より実質的に少
ない量で開始される。その後、投与量は与えられた環境
下で最適効果が得られるまで少しづつ増加される。

一般に、本発明のペプチドは、有害な副作用をもたらさ
ないで患者血液中の各ペプチドの有効濃度を与えるよう
な量、そして前述のような変動は生じようが、好ましく
はキログラム体重当り約０．０２ｍｃｇから約２００ｍ
ｃｇの範囲の程度、で投与されるのが最も望ましい。し
かしながら、注入のためには、効果的な結果を達成する
ために、約０．１　ｍｃｇから約１００１００Ｏ／分／
ｋｇの範囲の投与程度が最もよく用いられる。−回投与
量は約０．０１から約１０■の投与程度で１またはより
分割した量で投与され得る。

本発明のペプチドを長期間作用、緩慢遊離、または貯留
形態にして長期間継続的に投与することが好ましいこと
がしばしばある。その様な投与形態は、体液中で低い溶
解性を有する、各ペプチドの製薬上受容可能な塩、例え
ば上述の塩の一つを含むか、水溶性塩の形のペプチドが
速やかな遊離を防ぐ防護担体とともに含む。後者の場合
では、例えば、該ペプチドは、粘ちょうな液体の形であ
る非−抗原性の部分的に加水分解したゼラチンとともに
組み立てられ得る；または、該ペプチドは製薬上受容可
能な固形担体、例えば水酸化亜鉛、の上に吸着され、製
薬上受容可能な液体担体中の懸濁液として投与され得る
；または、該ペプチドは保護非−抗原性ハイドロコロイ
ド、例えばナトリウム、カルボキシメチルセルロース、
ポリビニルピロリドン、アルギン酸ナトリウム、ゼラチ
ン、ポリガラクチュロン酸、例えばペクチン、またはあ
る種のムコ多糖中で、水性または非水性の製薬上受容可
能な液体担体、保存料、または表面活性剤とともにゲル
又は懸濁液として組み立てられ得る。そのような組み立
ての例は、標準的な教科書、例えば上で参照したレミン
トンのファーマスーナカルサイエンス（Ｒｅｎ＋ｉｎｇ
ｔｏｎ’ｓ　ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎ
ｃｅｓ　）中に見いだされる。本発明のペプチドの、長
期間作用する、緩慢遊離試料は製薬上受容可能な被覆剤
、例えばゼラチン、ポリヴイニルアルコールまたはエチ
ル　セルロース中へのマイクロカプセル化によっても得
られよう。被覆剤のさらなる例およびマイクロカプセル
化に用いられた行程は、Ｊ、Ａ、バービック（Ｈｅｒｂ
ｉｇ）によりエンサイクロ　ペヂア　オブ　ケミカルテ
クノロジ（Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ　ｏｆ　Ｃｈｅｍ
ｉｃａｌ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　）第１３巻、２訂版
、ウィリー（Ｗｉｌｅｙ　）ニエーヨーク１９６７年、
４３６−４５６頁中に記載されている。そのような組み
立ては、体液にほんの僅かしか溶けないペプチドの塩の
懸濁液とともに、キログラム体重−日当り約０．０２ｍ
ｃｇから約２０ＩＩＩｃｇ遊離するように設計されてお
り、筋肉内注射されるのが好ましい。さもなければ、上
に挙げられた固形投与形のあるもの、例えばある種の殆
ど水に溶けない塩またはペプチドの塩の固形担体中の分
散体またはその上の吸着体、例えばエチレン　グリコー
ル　メタクリレートまたは同様なモノマーが米国特許第
３．５５１．５５６号中に記載されているような架橋さ
れたポリマーの中性ヒドロゲル中の分散体もまたベレッ
トの形で組み立てられ、上に示されたとほぼ同じ量を遊
離しそして皮下または筋肉内に移植されよう。

以下の実施例は本発明を説明するが、それだけに限定す
るものではない。

実施例１ 以下の表は、基本的にウィンキスト（Ｗｉｎｑｕｉｓｔ
ｅｔ　ａｌ、）他、ヨーロピアン　ジャーナル　オブフ
ァーマコロジー（Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　
ｏｆＰｈａｒ＋＋＋ａｃｏ１ｏｇｙ）第１０２巻：１６
９−１７３頁、１９８４年の方法により試験された際の
〜本発明における代表的なペプチドのウサギ大静脈弛緩
活性を、配列６−３３および８−３３の既知Ｃ−カルボ
キシル末端ペプチドと比較したものである。

丘１±工配剋　旦二末殖因　ヱまム段回換　ル皿独６−
３３　　−ＣＯＯＨ１ ８−３３−ＣＯＯＨ１ １１−３１−ＣＯＮＨ２０，３２ １１−３１−ＣＯＮＨ２Ｄ−３ｅｒ”　　　０．１２１
１　３１　　　　Ｃ０ＮＨｚ　　　Ｄ　　Ｃｙｓ”　　
　０．０９１１−３１−ＣＯＮＨ２Ｄ−Ｐｈｅ”　　　
０．００８ご１ヨ≦白峠舛　亙二Ｍ恭　１」ソ」躬【盪
　ル盾性１１　　３Ｉ　　　　　　ＣＯＮＨ２Ｄ−＾１
ａ”　　　　０．０６１１−３１　　　−ＣＯＮＨ２Ｄ
−Ｇｉｎ”　　　　０．２８１　１−３１　　　−ＣＯ
ＮＨ，Ｄ−５ｅｔ”　　　　０．０４１０　　３１　　
　　　　Ｃ０ＮＨｚ　　　　　　　　　　　　Ｏ，２５
１０３１Ｃ０ＮＨｚ　　　　Ｄ　　Ａｌａ”　　　　０
．２２１　０　　３　１　　　　　　Ｃ０ＮＨｚ　　　
　Ｌ−Ａｌａ”　　　　０．０５１　０−３　１　　　
　−ＣＯＮＨ２ローＡｌａ”　　　　０．０３１　０−
３　１　　　　　　Ｃ０ＮＨｚ　　　　Ｌ　　Ａｌａ”
　　　　０．２６１．０−３１　　　−ＣＯＮＨ，ロー
Ｔｉｅ”　　　　０．００５１０−３１　　　−ＣＯＮ
Ｈｚ　　　　Ｄ−Ａｓｐ”　　　　０．００３１０−３
１　　　−ＣＯＮＨｚ　　　　Ｄ−Ａｒｇ１９　　０．
００５１０　　３Ｉ　　　　　　Ｃ０ＮＨ！　　　　Ｄ
　　Ａｌａ”　　　　０．３６１　０−３　１　　　−
ＣＯＮＨｚ　　　　Ｄ−Ｌｅｕ”　　　　０．０２１０
　　３１　　　　　　Ｃ０ＮＨｚ　　　　ローＡｌａ”
　　　　０．２５８　　３０　　　　　　Ｃ０ＮＨｚ　
　　　　　　　　　　　　０．１５８−３１　　　−Ｃ
ＯＮＨ２０，３３ ８−３３−ＣＯＮｒ（ｚ　　　　　　　　　　　　１Ｂ
−３３−ＣＯＯＨＤ−Ａｒｇ”　　　　０．２５８−３
　３　　　−ＣＯＯＨＤ−１ｉｅｚＯＯ，１３ご１）２
口［舛　逅二」す１基　ヱ」ソ」躬【盪　北造箪８−３
３　　　−ＣＯＯＨＤ−Ａｌａ”　　　　０．６４８−
３３　　　　−ＣＯＯＨＬ−Ａｌａ”　　　　２．１８
−３３　　　−ＣＯＯＨＬ−Ａｌａ”　　　　０．７４
８−３３　　　−ＣＯＯＨＬ−Ａｌａ”　　　　０．７
７８　　３３　　　−ＣＯＯＨＤ−Ｃｙｓ２８　　０．
２Ｂ−３３−ＣＯＯＨＤ−八ｓｎ”　　　　　０．３３
８−３３　　　−ＣＯＯＨＤ−５ｅｔ”　　　　０．８
４８−３３　　　−ＣＯＯＨＤ−Ｐｈｅ”　　　　０．
４１出願　　人　　メルク　エンド　カムバニーインコ
ーポレーテッド ＩＬ、」

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ＸがＬ−イソロイシン、Ｄ−イソロイシン、Ｄ−ア
   ローイソロイシン、Ｌ−メチオニンまたはＤ−メチオニ
   ン、Ｙがグリシン、Ｌ−アラニンまたはＤ−アラニン、
   Ａが水素、セリン、セリル−セリン、アルギニル−セリ
   ル−セリン、アルギニル−アルギニル−セリル−セリン
   、ロイシル−アルギニル−アルギニル−セリル−セリン
   またはセリル−ロイシル−アルギニル−アルギニル−セ
   リル−セリンおよびＢが水酸基、アスパラギン、アスパ
   ラギニル−セリン、アスパラギニル−セリル−フェニル
   アラニン、アスパラギニル−セリル−フェニルアラニル
   −アルギニンまたはアスパラギニル−セリル−フェニル
   アラニル−アルギニル−チロシン、そして全ての光学活
   性のアミノ酸がＤまたはＬであり少なくとも一つのアミ
   ノ酸はＤ−配位、そしてそのアミド、低級アルキルエス
   テルおよび生理的に受容され得る金属塩および酸付加塩
   である、以下のアミノ酸配列のペプチド。 【アミノ酸配列があります】 ２、Ｃ−末端基が−ＣＯＯＨである特許請求の範囲第１
   項記載のペプチド。 ３、Ｃ−末端基が−ＣＯＮＨ＿２である特許請求の範囲
   第１項記載のペプチド。 ４、ＢがＣ−末端カルボキシル基である特許請求の範囲
   第１項記載のペプチド。 ５、Ｂがアスパラギンである特許請求の範囲第１項記載
   のペプチド。 ６、Ｂがアスパラギニル−セリンである特許請求の範囲
   第１項記載のペプチド。 ７、Ｂがアスパラギニル−セリル−フェニルアラニンで
   ある特許請求の範囲第１項記載のペプチド。 ８、Ｂがアスパラギニル−セリル−フェニルアラニル−
   アルギニンである特許請求の範囲第１項記載のペプチド
   。 ９、Ｂがアスパラギニル−セリル−フェニルアラニル−
   アルギニル−チロシンである特許請求の範囲第１項記載
   のペプチド。 １０、ＡがＮ−末端アミノ基である特許請求の範囲第１
   項記載のペプチド。 １１、Ａがセリンである特許請求の範囲第１項記載のペ
   プチド。 １２、Ａがセリル−セリンである特許請求の範囲第１項
   記載のペプチド。 １３、Ａがアルギニル−セリル−セリンである特許請求
   の範囲第１項記載のペプチド。 １４、Ａがアルギニル−アルギニル−セリル−セリンで
   ある特許請求の範囲第１項記載のペプチド。 １５、Ａがロイシル−アルギニル−アルギニル−セリル
   −セリンである特許請求の範囲第１項記載のペプチド。 １６、Ａがセリル−ロイシル−アルギニル−アルギニル
   −セリル−セリンである特許請求の範囲第１項記載のペ
   プチド。 １７、製薬上受容し得る担体と配合した特許請求の範囲
   第１項記載のペプチド。 １８、治療上活性な量の特許請求の範囲第１項のペプチ
   ドを哺乳動物種に投与することからなる、電解質バラン
   ス不調の治療法。 １９、治療上活性な量の特許請求の範囲第１項のペプチ
   ドを哺乳動物種に投与することからなる、変化した血管
   抵抗性の不調の治療法。 ２０、治療上活性な量の特許請求の範囲第１項のペプチ
   ドを哺乳動物種に投与することからなる、本態性高血圧
   症の治療法。 ２１、治療上活性な量の特許請求の範囲第１項のペプチ
   ドを哺乳動物種に投与することからなる、うっ血性心不
   全の治療法。