JPS62104591A - モノクロ−ナル抗体のスクリ−ニング法 - Google Patents
モノクロ−ナル抗体のスクリ−ニング法Info
- Publication number
- JPS62104591A JPS62104591A JP24384885A JP24384885A JPS62104591A JP S62104591 A JPS62104591 A JP S62104591A JP 24384885 A JP24384885 A JP 24384885A JP 24384885 A JP24384885 A JP 24384885A JP S62104591 A JPS62104591 A JP S62104591A
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- JP
- Japan
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- monoclonal antibody
- antigen
- activity
- enzymic
- antibody
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- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明はモノクローナル抗体のスクリーニング法に関す
るものであるが、更に詳細には、酵素抗原の保有する生
理活性を指標とし、酵素抗原の生理活性に影響を及ぼす
（生理活性を阻害もしくは賦活化する）モノクローナル
抗体と酵素抗原に単に結合するだけで全く生理活性には
影響を及ぼさない抗体とを同時にスクリーニングする方
法に関するものである。
るものであるが、更に詳細には、酵素抗原の保有する生
理活性を指標とし、酵素抗原の生理活性に影響を及ぼす
（生理活性を阻害もしくは賦活化する）モノクローナル
抗体と酵素抗原に単に結合するだけで全く生理活性には
影響を及ぼさない抗体とを同時にスクリーニングする方
法に関するものである。
本漬によれば、融合細胞の中から目的とする抗体産生細
胞株のみを極めて効率的に選択、スクリーニングするこ
とができ、特に酵素反応の解析ないし精製用のモノクロ
ーナル抗体を効率よく得ることができるので、モノクロ
ーナル抗体の生産性、生産効率が大巾に上昇して免疫化
学において重用されるだけでなく、酵素工業においても
重用されるものである。
胞株のみを極めて効率的に選択、スクリーニングするこ
とができ、特に酵素反応の解析ないし精製用のモノクロ
ーナル抗体を効率よく得ることができるので、モノクロ
ーナル抗体の生産性、生産効率が大巾に上昇して免疫化
学において重用されるだけでなく、酵素工業においても
重用されるものである。
精製用、治療用、診断用、研究用等広範な用途が実用化
ないしそれが検討されているモノクローナル抗体は、例
えば、抗原で免疫された牌細胞もしくは末梢血球とミエ
ローマ細胞とをポリエチレングリコール（ＰＥＧ）等の
融合剤で細胞融合してモノクローナル抗体を作製するの
であるが、その場合、得られた融合細胞の中から目的の
抗原に対する抗体を産生分泌している融合細胞クローン
の選択を行う必要がある。そのために、一般には、融合
細胞培養上清を試料とし上清中に含まれるモノクローナ
ル抗体を検出するために、予め抗原をヒツジ赤血球やラ
テックス粒子に固相化した受身凝集反応や、予め抗原を
マイクロタイタープレートやキューブに固相化した酵素
免疫測定法やラジオイムノアッセイ（ＥＩＡ、 ＥＬＩ
ＳＡ、 ＥＭＩＴ、ＲＩＡ等）といった方法が開発され
て広く用いられている（服部 信編「ウィルス肝炎から
肝細胞癌へＪ（１９８２−７−１０）癌と化学療法社、
ｐ ４３９−４４３）しかしながら、これらの従来法で
は固定化抗原に抗体が結合することを検出原理としてい
るため、抗原が酵素のように生産活性を保持している場
合、検出されたモノクローナル抗体が抗原の生理活性に
影響を及ぼすか否かを判定できず、スクリーニング初期
段階から酵素抗原に対する阻害もしくは賦活化モノクロ
ーナル抗体と結合モノクローナル抗体の両者を同時に簡
便に検出することは困難であった。
ないしそれが検討されているモノクローナル抗体は、例
えば、抗原で免疫された牌細胞もしくは末梢血球とミエ
ローマ細胞とをポリエチレングリコール（ＰＥＧ）等の
融合剤で細胞融合してモノクローナル抗体を作製するの
であるが、その場合、得られた融合細胞の中から目的の
抗原に対する抗体を産生分泌している融合細胞クローン
の選択を行う必要がある。そのために、一般には、融合
細胞培養上清を試料とし上清中に含まれるモノクローナ
ル抗体を検出するために、予め抗原をヒツジ赤血球やラ
テックス粒子に固相化した受身凝集反応や、予め抗原を
マイクロタイタープレートやキューブに固相化した酵素
免疫測定法やラジオイムノアッセイ（ＥＩＡ、 ＥＬＩ
ＳＡ、 ＥＭＩＴ、ＲＩＡ等）といった方法が開発され
て広く用いられている（服部 信編「ウィルス肝炎から
肝細胞癌へＪ（１９８２−７−１０）癌と化学療法社、
ｐ ４３９−４４３）しかしながら、これらの従来法で
は固定化抗原に抗体が結合することを検出原理としてい
るため、抗原が酵素のように生産活性を保持している場
合、検出されたモノクローナル抗体が抗原の生理活性に
影響を及ぼすか否かを判定できず、スクリーニング初期
段階から酵素抗原に対する阻害もしくは賦活化モノクロ
ーナル抗体と結合モノクローナル抗体の両者を同時に簡
便に検出することは困難であった。
また、従来用いられているスクリーニング方法では、直
接抗原を固相化することが多く、高純度の抗原標品を必
要とした。したがって、非常に高価な酵素を多量に使用
する必要があるだけでなく。
接抗原を固相化することが多く、高純度の抗原標品を必
要とした。したがって、非常に高価な酵素を多量に使用
する必要があるだけでなく。
固定化するのにも多大な労力を要し、また完全に固定化
すること自体も困難な作業であった。
すること自体も困難な作業であった。
本発明者は、これらの欠点を解決するために。
酵素化学、免疫化学、生化学といった各種の技術分野か
ら各方面に亘って研究した結果、従来法のように酵素を
単なる標識物質として使用するのではなくて、酵素抗原
の保持する生理活性自体の利用という点に着目し、これ
を基礎にして、抗原の生理活性を指標とする本方法を考
察し、酵素抗原に対するモノクローナル抗体スクリーニ
ング法を発明するに至った。
ら各方面に亘って研究した結果、従来法のように酵素を
単なる標識物質として使用するのではなくて、酵素抗原
の保持する生理活性自体の利用という点に着目し、これ
を基礎にして、抗原の生理活性を指標とする本方法を考
察し、酵素抗原に対するモノクローナル抗体スクリーニ
ング法を発明するに至った。
本発明は、まず酵素抗原に対するモノクローナル抗体産
生細胞を作製しておき、それに対して適用するものであ
る。その作製は常法によって行うことができ、動物に抗
原をアジュバントの存在又は不存在下で腹腔内等に感作
せしめ、必要ある場合には更に追加免疫して動物を該抗
原で免疫し、該動物から牌細胞、リンパ節細胞といった
抗体産生細胞を取出す。これとミエローマ細胞とをポリ
エチレングリコール（ＰＥＧ）等を用いて融合し、これ
をＨＡＴ培地（ヒポキサンチン／アミノプテリン／チミ
ジンからなる選択用培地）で培養し、ハイブリドーマを
選択する。
生細胞を作製しておき、それに対して適用するものであ
る。その作製は常法によって行うことができ、動物に抗
原をアジュバントの存在又は不存在下で腹腔内等に感作
せしめ、必要ある場合には更に追加免疫して動物を該抗
原で免疫し、該動物から牌細胞、リンパ節細胞といった
抗体産生細胞を取出す。これとミエローマ細胞とをポリ
エチレングリコール（ＰＥＧ）等を用いて融合し、これ
をＨＡＴ培地（ヒポキサンチン／アミノプテリン／チミ
ジンからなる選択用培地）で培養し、ハイブリドーマを
選択する。
こうして得たハイブリドーマの中から、目的とする抗原
産生細胞株のみを、換言すれば目的とするモノクローナ
ル抗体のみを水沫によって極めて正確に且つ効率的にス
クリーニングするのである。
産生細胞株のみを、換言すれば目的とするモノクローナ
ル抗体のみを水沫によって極めて正確に且つ効率的にス
クリーニングするのである。
本発明に係るモノクローナル抗体の検出原理を。
第１図を参照しながら説明する。
１、先ず、抗免疫グロブリン抗体を固定化担体に固定化
する。
する。
抗免疫グロブリン抗体は、マウス由来ハイブリドーマ細
胞の場合は抗ヒト免疫グロブリン抗体を用い、免疫動物
種としてはヤギ、ウサギ、ヒツジ等がある。固定化担体
としては、セファロースゲル、セファデクスゲル、アガ
ロースゲル、ラテックス粒子、ポリアクリルアミド粒子
、ポリスチレン粒子及びチューブ等を用い、また抗免疫
グロブリン抗体の固定化法としては、物理化学的作用や
共有結合による固定化があるが、固定化抗免疫グロブリ
ン抗体とハイブリドーマ細胞培養上清中に含有される血
清蛋白及びモノクローナル抗体との間での置換反応を起
こさないために好ましくはＣＮ［１ｒ法等の共有結合法
により抗免疫グロブリン抗体を不溶性担体に固定化する
。
胞の場合は抗ヒト免疫グロブリン抗体を用い、免疫動物
種としてはヤギ、ウサギ、ヒツジ等がある。固定化担体
としては、セファロースゲル、セファデクスゲル、アガ
ロースゲル、ラテックス粒子、ポリアクリルアミド粒子
、ポリスチレン粒子及びチューブ等を用い、また抗免疫
グロブリン抗体の固定化法としては、物理化学的作用や
共有結合による固定化があるが、固定化抗免疫グロブリ
ン抗体とハイブリドーマ細胞培養上清中に含有される血
清蛋白及びモノクローナル抗体との間での置換反応を起
こさないために好ましくはＣＮ［１ｒ法等の共有結合法
により抗免疫グロブリン抗体を不溶性担体に固定化する
。
そして、上記した細胞融合処理によって得たハイブリド
ーマ細胞培養上清中に含まれるモノクローナル抗体を抗
免疫グロブリン抗体固定化担体に混合・懸濁し、免疫反
応によりモノクローナル抗体を固定化抗免疫グロブリン
抗体に免疫吸着させる。
ーマ細胞培養上清中に含まれるモノクローナル抗体を抗
免疫グロブリン抗体固定化担体に混合・懸濁し、免疫反
応によりモノクローナル抗体を固定化抗免疫グロブリン
抗体に免疫吸着させる。
２．１で調製したモノクローナル抗体吸着抗免疫グロブ
リン抗体固定化不溶性担体に、一定量の酵素抗原を添加
・混合する。室温もしくは３７℃で遊離状態の酵素抗原
と固相状態にあるモノクローナル抗体間の免疫反応を行
い、一定時間接遠心分離により上清と不溶性担体とを分
離し、先の酵素抗原とモノクローナル抗体間の免疫反応
を停止させる。目的の酵素抗原と類似の生理活性を示す
酵素が培養上清中の血清蛋白に含まれる場合でも。
リン抗体固定化不溶性担体に、一定量の酵素抗原を添加
・混合する。室温もしくは３７℃で遊離状態の酵素抗原
と固相状態にあるモノクローナル抗体間の免疫反応を行
い、一定時間接遠心分離により上清と不溶性担体とを分
離し、先の酵素抗原とモノクローナル抗体間の免疫反応
を停止させる。目的の酵素抗原と類似の生理活性を示す
酵素が培養上清中の血清蛋白に含まれる場合でも。
１で調製したモノクローナル抗体吸着抗免疫グロブリン
抗体固定化担体を、生理的緩衝液（ＰＢＳ）等で、好ま
しくは０．１％ＢＳＡを含むＰＢＳ（ｐＨ７，２）で数
回洗浄することにより血清中に含まれる類似の生理活性
を消去できる。
抗体固定化担体を、生理的緩衝液（ＰＢＳ）等で、好ま
しくは０．１％ＢＳＡを含むＰＢＳ（ｐＨ７，２）で数
回洗浄することにより血清中に含まれる類似の生理活性
を消去できる。
３．２で分離された遠心上清中に残存する酵素抗原の生
理活性及びモノクローナル抗体との免疫反応により不溶
性担体に吸着した酵素抗原の生理活性を分光学的や電極
法等の方法で測定する。モノクローナル抗体は２で分離
された遠心上清に含まれる酵素抗原活性の著しい低下に
より検出され、また同時に、不溶性担体に吸着した酵素
抗原活性を測定し、 ａ、吸着酵素抗原活性が確認されたモノクローナル抗体
は酵素抗原に対する結合モノクローナル抗体と判定され
る。
理活性及びモノクローナル抗体との免疫反応により不溶
性担体に吸着した酵素抗原の生理活性を分光学的や電極
法等の方法で測定する。モノクローナル抗体は２で分離
された遠心上清に含まれる酵素抗原活性の著しい低下に
より検出され、また同時に、不溶性担体に吸着した酵素
抗原活性を測定し、 ａ、吸着酵素抗原活性が確認されたモノクローナル抗体
は酵素抗原に対する結合モノクローナル抗体と判定され
る。
ｂ、吸着酵素抗原活性がａの場合に比べ著しく低下する
場合は、酵素抗原に対する阻害モノクローナル抗体と判
定される。
場合は、酵素抗原に対する阻害モノクローナル抗体と判
定される。
Ｃ１また吸着酵素抗原活性がａの場合に比べ著しく上昇
する場合は、酵素抗原に対する賦活性モノクローナル抗
体と判定される。
する場合は、酵素抗原に対する賦活性モノクローナル抗
体と判定される。
本スクリーニング操作は先の１．２，３の３ステツプよ
り成るが、血清蛋白中に含まれず血清蛋白による生理活
性測定の妨害を受けない酵素抗原については、１と２の
ステップを同時に行う、即ちモノクローナル抗体を含む
培養上清と一定量の酵素抗原とを同時に抗免疫グロブリ
ン抗体固定化担体に添加、混合することも可能である。
り成るが、血清蛋白中に含まれず血清蛋白による生理活
性測定の妨害を受けない酵素抗原については、１と２の
ステップを同時に行う、即ちモノクローナル抗体を含む
培養上清と一定量の酵素抗原とを同時に抗免疫グロブリ
ン抗体固定化担体に添加、混合することも可能である。
また、モノクローナル抗体を不溶性担体に特異的に吸着
される方法として、プロティンＡ固定化担体を用いるこ
とも可能である。
される方法として、プロティンＡ固定化担体を用いるこ
とも可能である。
本スクリーニング法によりモノクローナル抗体を検出で
きる酵素抗原としては、例えば１Ｍａｌａｔｅｄｅｈｙ
ｄｒｏｇｅｎａｓｅ、β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａ
ｓｅ、 ＧｌｕｃｏｓｅｏｘｉｄａｓｅやＨｏｒｓｅ
ｒａｄｉｓｈ Ｐｅｒｏｘｉｄａｓａ等があるがこれら
の酵素抗原に限定されない。また、抗血清中に含まれる
ポリクローナルな抗体も本スクリーニング操作−１によ
り抗免疫グロブリン抗体固定化担体に吸着させることが
可能であるため、本スクリーニング法を酵素抗原に対す
る抗血清の評価法として利用することも可能である。
きる酵素抗原としては、例えば１Ｍａｌａｔｅｄｅｈｙ
ｄｒｏｇｅｎａｓｅ、β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａ
ｓｅ、 ＧｌｕｃｏｓｅｏｘｉｄａｓｅやＨｏｒｓｅ
ｒａｄｉｓｈ Ｐｅｒｏｘｉｄａｓａ等があるがこれら
の酵素抗原に限定されない。また、抗血清中に含まれる
ポリクローナルな抗体も本スクリーニング操作−１によ
り抗免疫グロブリン抗体固定化担体に吸着させることが
可能であるため、本スクリーニング法を酵素抗原に対す
る抗血清の評価法として利用することも可能である。
本スクリーニング法により今まで複数のスクリーニング
法の組み合わせにより検出されていた阻害、もしくは賦
活化モノクローナル抗体と結合モノクローナル抗体を同
時に検出することが可能となり、酵素抗原に対するモノ
クローナル抗体の作製が格段に効率化されるという著効
が得られ、酵素工業、免疫化学の分野で各種巾広く利用
されることが更に期待できる。
法の組み合わせにより検出されていた阻害、もしくは賦
活化モノクローナル抗体と結合モノクローナル抗体を同
時に検出することが可能となり、酵素抗原に対するモノ
クローナル抗体の作製が格段に効率化されるという著効
が得られ、酵素工業、免疫化学の分野で各種巾広く利用
されることが更に期待できる。
実施例
１、抗マウス免疫グロブリンウサギＩｇＧ固定化セファ
ロース４Ｂの調製 日本在来種家兎に１００μ乙のマウス免疫グロブリンを
フロイントの完全アジュバントとともに皮下注射し、マ
ウス免疫グロブリンに対する抗血清を調製した。採血後
、血清を分離し、硫安塩析及びＤＥＡＥ−セルロースに
て抗マウス免疫グロブリンウサギＩ［Ｇを精製した。
ロース４Ｂの調製 日本在来種家兎に１００μ乙のマウス免疫グロブリンを
フロイントの完全アジュバントとともに皮下注射し、マ
ウス免疫グロブリンに対する抗血清を調製した。採血後
、血清を分離し、硫安塩析及びＤＥＡＥ−セルロースに
て抗マウス免疫グロブリンウサギＩ［Ｇを精製した。
精製抗マウス免疫グロブリンウサギＩｇＧを０．１ＭＮ
ａＨＣＯ３（ｐＨ８，０）に溶解し、ＣＮＢｒ活性セフ
ァロース４Ｂと混合・懸濁し、セファロース４ＢＩＩＩ
ＩＱに抗マウス免疫グロブリンウサギＩｇＧを４ｍｇ共
有結合した。
ａＨＣＯ３（ｐＨ８，０）に溶解し、ＣＮＢｒ活性セフ
ァロース４Ｂと混合・懸濁し、セファロース４ＢＩＩＩ
ＩＱに抗マウス免疫グロブリンウサギＩｇＧを４ｍｇ共
有結合した。
反応後、残存活性基は０．１Ｍエタノールアミン（ｐ１
１８．０）でブロッキングした（第２図）。
１８．０）でブロッキングした（第２図）。
２、 酵母リンゴ酸脱水素酵素に対するマウスモノクロ
ーナル抗体のスクリーニング 酵母由来のリンゴ酸脱水素酵素（ＭＤＨ） ５０μ＆を
フロイン１−の完全アジュバントとともに腹腔的感作し
更に追加免疫を行ったＢＡＬＢ／ｃマウス牌細胞とマウ
スミエローマ細胞（Ｘ Ａｇ８・６・５・３）とをＰＥ
Ｇ （ＭＷ １５００）を用いて細胞融合を行い、同系
マウス牌細胞をフィーダー細胞として２４穴のマルチウ
ェルに播き（２Ｘ１０’／ｗｅｌｌ） 、 ＨＡＴ培地
を用いて培養し約ｌＯクローン／ｗｅｌｌの効率でハイ
ブリドーマを作製した。
ーナル抗体のスクリーニング 酵母由来のリンゴ酸脱水素酵素（ＭＤＨ） ５０μ＆を
フロイン１−の完全アジュバントとともに腹腔的感作し
更に追加免疫を行ったＢＡＬＢ／ｃマウス牌細胞とマウ
スミエローマ細胞（Ｘ Ａｇ８・６・５・３）とをＰＥ
Ｇ （ＭＷ １５００）を用いて細胞融合を行い、同系
マウス牌細胞をフィーダー細胞として２４穴のマルチウ
ェルに播き（２Ｘ１０’／ｗｅｌｌ） 、 ＨＡＴ培地
を用いて培養し約ｌＯクローン／ｗｅｌｌの効率でハイ
ブリドーマを作製した。
前記１で調製した抗マウス免疫グロブリンウサギ丁ｇＧ
固定化セファロース４Ｂ５０μＱを用い、上記によって
作製したハイブリドーマ細胞培養土清（１，（ｂｎ Ｑ
）をこのセファロース４Ｂゲルに添加し、室温で１時
間懸濁した。反応後０．０１％ＢＳＡを含むＰＢＳ（ｐ
Ｈ７，２）にて２回ゲルを洗浄し、０．０１％ＢＳＡを
含むＰＢＳ（ｐｉｆ ７．２）に溶解した酵母リンゴ酸
脱水素酵素０．１ ｕｎｉｔｓを添加した。ｌ！！濁し
ながら、室温で１時間反応させた後、遠心分１ｉ （５
，０００ｒｐｍ Ｘ ５ｍ１ｎ）により上清とゲルに分
離した。２００μＭ ＮａＤＨ及び５００μＨオギザロ
酢酸を含む０．１Ｍリン酸カリウム（ｐＨ７，５）をリ
ンゴ酸脱水素酵素の基質反応液とし、２、ＯｍＱに先の
遠心上清０．２ｍＱを添加し、２５℃で酸素反応を開始
した。４分後、３４０ｎｍにおける吸光度の減少を測定
し、酵素活性を求めた。同時に先の遠心分離後のゲルを
さらに０．０１％ＢＳＡを含むＰＢＳ（ｐＨ７，２）で
２回洗浄後、ゲルに酵素反応基質液、１、ＯｍＱを添加
し、１０分間２５℃で酵素反応を行った。
固定化セファロース４Ｂ５０μＱを用い、上記によって
作製したハイブリドーマ細胞培養土清（１，（ｂｎ Ｑ
）をこのセファロース４Ｂゲルに添加し、室温で１時
間懸濁した。反応後０．０１％ＢＳＡを含むＰＢＳ（ｐ
Ｈ７，２）にて２回ゲルを洗浄し、０．０１％ＢＳＡを
含むＰＢＳ（ｐｉｆ ７．２）に溶解した酵母リンゴ酸
脱水素酵素０．１ ｕｎｉｔｓを添加した。ｌ！！濁し
ながら、室温で１時間反応させた後、遠心分１ｉ （５
，０００ｒｐｍ Ｘ ５ｍ１ｎ）により上清とゲルに分
離した。２００μＭ ＮａＤＨ及び５００μＨオギザロ
酢酸を含む０．１Ｍリン酸カリウム（ｐＨ７，５）をリ
ンゴ酸脱水素酵素の基質反応液とし、２、ＯｍＱに先の
遠心上清０．２ｍＱを添加し、２５℃で酸素反応を開始
した。４分後、３４０ｎｍにおける吸光度の減少を測定
し、酵素活性を求めた。同時に先の遠心分離後のゲルを
さらに０．０１％ＢＳＡを含むＰＢＳ（ｐＨ７，２）で
２回洗浄後、ゲルに酵素反応基質液、１、ＯｍＱを添加
し、１０分間２５℃で酵素反応を行った。
反応後、遠心分離により反応を停止させ、上清中の吸光
度変化を測定した。その結果を第３図にまとめた。
度変化を測定した。その結果を第３図にまとめた。
スクリーニングに供したハイブリドーマ細胞のうち、Ｍ
１８Ａ２． Ａ３． Ａ４． Ａ７． Ａｌｌ及び８２
８いずれのクローンの培養上清中にも酵素活性は阻害し
ない結合モノクローナル抗体が含まれることが判定され
、 Ｍ１８Ａ１０クローンのみ酵素活性を阻害するモノ
クローナル抗体が含まれることが判定された。
１８Ａ２． Ａ３． Ａ４． Ａ７． Ａｌｌ及び８２
８いずれのクローンの培養上清中にも酵素活性は阻害し
ない結合モノクローナル抗体が含まれることが判定され
、 Ｍ１８Ａ１０クローンのみ酵素活性を阻害するモノ
クローナル抗体が含まれることが判定された。
第１図は、本発明に係るモノクローナル抗体スクリーニ
ング法の原理を模式的に図示したものであり、第２図は
、抗マウス免疫グロブリンウサギＩｇＧセファロース４
Ｂのマウス免疫グロブリン吸着性を示したものであり、
第３図は、酵母ＭＤＨに対するマウスモノクローナル抗
体のスクリーニング結果を図示したものである。 代理人 弁理士 戸 １）親 男 第 １ 図 結合姓名４生 第 ２ 図 机マウスＩ９ウサキ゛抗体セファロ−スケ゛ル第 ３ Ｎ存ＭＤＨ活様 １Ｎ金性ＭＤＨ活柱
ング法の原理を模式的に図示したものであり、第２図は
、抗マウス免疫グロブリンウサギＩｇＧセファロース４
Ｂのマウス免疫グロブリン吸着性を示したものであり、
第３図は、酵母ＭＤＨに対するマウスモノクローナル抗
体のスクリーニング結果を図示したものである。 代理人 弁理士 戸 １）親 男 第 １ 図 結合姓名４生 第 ２ 図 机マウスＩ９ウサキ゛抗体セファロ−スケ゛ル第 ３ Ｎ存ＭＤＨ活様 １Ｎ金性ＭＤＨ活柱
Claims (1)
- 酵素抗原の有する生理活性を指標とし、酵素抗原に対す
る阻害モノクローナル抗体、賦活化モノクローナル抗体
、又は生理活性には影響を及ぼすことのない単なる結合
モノクローナル抗体を検出することを特徴とするモノク
ローナル抗体のスクリーニング法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60243848A JPH0712319B2 (ja) | 1985-11-01 | 1985-11-01 | モノクロ−ナル抗体のスクリ−ニング法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60243848A JPH0712319B2 (ja) | 1985-11-01 | 1985-11-01 | モノクロ−ナル抗体のスクリ−ニング法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62104591A true JPS62104591A (ja) | 1987-05-15 |
| JPH0712319B2 JPH0712319B2 (ja) | 1995-02-15 |
Family
ID=17109850
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60243848A Expired - Lifetime JPH0712319B2 (ja) | 1985-11-01 | 1985-11-01 | モノクロ−ナル抗体のスクリ−ニング法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0712319B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH02181654A (ja) * | 1989-01-06 | 1990-07-16 | Green Cross Corp:The | 抗酵素抗体価の測定方法 |
-
1985
- 1985-11-01 JP JP60243848A patent/JPH0712319B2/ja not_active Expired - Lifetime
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| BIOCHEM.BIOPHYS.RES.COMMUN=1983 * |
| J.IMMUNOL.METHODS=1983 * |
| PROC.NATL.ACAD.SCI.USA=1982 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH02181654A (ja) * | 1989-01-06 | 1990-07-16 | Green Cross Corp:The | 抗酵素抗体価の測定方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0712319B2 (ja) | 1995-02-15 |
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