JPS61500565A - 化学分析装置とその使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の名称 化学分析装置とその使用 技術分野 本発明は、化学分析の分野、よシ詳細には化学分析を行う几めの装置およびその 使用に係る。本発明の適用できる分析とは、被試験材料が該試料と反応する試薬 と接触して検出可能な物質を形成し、その物質の定性的おるいは定型的測定を行 うようなものである。本発明は特に医学分野、例えば免役化学分析の分野に弱係 するが、それに限定されるものではなく、発明の基本的思想は上に挙げ之様な多 様な分析に応用し得るものである。

発明の背景 酵素免＆夕・ｊ定法（ＢＩＡ）、螢光免疫測定法（ＦＩＡ）々どの免疫化学分析 においては、殆んどの場付、標識抗原抗体複合体から遊離標識抗原またに遊離標 識抗体を分離しなければならない。

このことは通常、例えば粒子や表面などの形態で存在しくＡる固体相ｖコより達 成され、遊離標識抗原または″ｅ会体の何れかが分子の大きさ、吸着−１′たけ 化学的結合（免疫化学的結合を含む）のタイプの相違に基いて固体相によって維 持されることになる。

今日行われているこのような分析の標本的なものでに、一連の反応を行う友めに いくつ〃・の液体処理段階を喪する。そのため、現在４り用されている技術を用 −る限シ、はとんどの免役化学分析は訓練された職員のいる研究所によるものに 限定されている。

本発明による装置りを用いると、上述のような分析の処理段階および操作段階が 相当容易になり単純化できるため、例えば診療所や病院の医師、看護婦など特に ν１１練を受けていない者でも前記分析を行えるということが証明され友。本発 明装置は多くの場合患者本人ですら取扱い可能である程に単純化されている。

これに関連して重要なことは、本発明装置はその非常に単純な荷造ゆえに、非常 に安価に製造できる、つまシ市販して広範囲の使用に供することができ、少なく とも定性的および準定葉的テストについては医者の診察を受ける前に患者自身で も病気の状態をある程度把握できるということでるる。

しかし、先にも述べたように、不発明装置は因して免役化学的分析関連の使用に 限定されるものではない。分かり易く説明するため、このことに関連して後に詳 細に述べることにする。

、この点でさらに付言できることは、上述の分析およびその中で使用される試薬 は周知であり、多くの文献に開示されているということである。従って、邑該技 術分野にかいて適当な文献が存在することから、ここではそれらについて枦返し 詳述する必要はないと考える。免役化学的分析の分野で用いられている技術の列 として、スエーデン特許員Ｍ第８２０５７５１−４号に記載された技術を挙げる ことができる。但しこれをもって、この分野での文献が尽きるものではない。

本発明をより明らかにするために、それが関連する技術的分野の他にも、文献の 中に開示されている数多くの簡単な拡散装置、すなわち試料を受動的にあるいは 毛管力によって１つまたはそれ以上の化学的活性層を通して拡散させる装置とは 、本発明装置は何ら関係がないことも付させねばならない。この種の袋縫ビ開示 している例として米国特許３，５１１，６０８号、英国特許２，０３１，５８３ 号、欧州特許６４，３９２号、米国特許４、０６６．４０３号、欧州特許５１， １８３号がある。これらの特許ｌ（関する限り、米国特許３，５１１，６０８号 に開示されている虜なり合うセグメント、あるいは英国特許２．０３１，５８３ 号および欧州特許６４．３９２号に開示されている折畳み式シートなどは拡散用 装置の製造方法に関するものであり、分析を遂行するというｉ’ｅｑ的（伎持っ ておらず、分析中前記セグメントやシー　）　ｉｔ相互に恒久的に連結されて単 独片になっているという点を指摘しなければならないＣ，英国特許２，０３１， ５３８号、欧州４計６４．３９２号などにはユーザにとって折畳み可能なフラッ プが存在しているが、こねものフラップは［ｉ用のふたまたはカバーとして用い られているだけでら９、化学的あるいは分析上の工程に役立つものではない。

本発明装置が上記の装置と本質的に異なるのは、拡散原理に基いていないという 事実である。その代シ、実験室における様に段階毎に分析を行う。発明概念の新 規な点は、ピペット操作ｆｂ返すことによって液体試料と試薬を試験管とビーカ ーとの間で移動させる必要がないということでるる。その代り、装置の表面上に 試料、試薬、また洗浄機能さえも備え付けられている。該表面上での試料ま友は 試薬の移動は、簡単な折り曲げ動作で達成できる。このことは、米国特許ｆ！、 ４．ｏ　６　ｅ、４０３号と欧州特許第５１．１８３号などに開示された型式の 多層式拡散素子以上に相当の利点を提供するものである。本発明装置ではユーザ ーはいろいろな反応段階のタイミングを完全に調節できるのに対し、多層式の拡 散装置では製造業者による層の材料の選択によってのみしかそのタイミングが変 更できない上、それも限られた限度でしかない。その上、本発明による装置はそ の基本的構造や設計に大きな変更を加えることなく、はとんどの物質の分析に利 用することができる。免役化学的分析においては、分子ｉｓ　ｏ　ｏ’を超えな い薬品からそれよりも１０億倍も大きい全細胞およびバクテリアまで、大きさが 極端に異なる物質を扱う。大きさの共なる物質は拡散率も異なるため、拡散装置 では分析の徳類毎に層の型式も調整する必要があるという点でさらに不利となる 。最後に付させねばならないのは、本発明による装置の製造方法および貯蔵特性 は確立された技術にのっとったものであるが、多層式の免疫化学的拡散装置では これらの要素を達成することが難かしいことが証明されている。

発明の開示 本発明によるｉｌ１手短かに説明すると、分析を行う上で必要な全ての化学的作 用部品が装置内に組込まれている、すなわち装置以外で分析を行う段階を全く必 要としない、上述のような分析を行うための完全な試肢キットであると言える。

これらの化学的に作用する部品は、単純な折シ曲げシステムによシ、試料および 相互に接触するように配置または装着されている。

さらに、前記折り曲はシステムは完全に自己教示方式とすることができ、すなわ ち分析を行う上での指示も折り曲げシステムの中に含壕せることもできるし、ま た多数の番号付きあるいは色分けしたタブを折シ曲げシステムの中に含ませて、 このタブに操作順序の指示を段階的に与えさせるようにすることも可能である。

これに加えて本発明装置は一体的部品として結果表示装置も含むことができるが 、これは例えば色または螢光の形態で正か負ｌたは任意に定址的な応答を与える ものとすることができる。言い換えると、必要な試薬と反応段階の全てを非常に 単純かつ小型で安価な構造の中に組入れることができ、それによってこれまで実 現されていなかった機会、特に医学の分野における機会を提供するものである。

よシ詳細に言うと、本発明による装置は、２つまたそれ以上のセグメントを有す る連続シートラ含んで成９、第１のセグメントには試料と試薬との接触が行われ るサイトが含まれ、第２のセグメントには所望の検出可能物質の有無が示される サイトが含まれており、これらのセグメントは必要に応じて相互に重なシ合うよ うに折シ畳まれて所定の反応を達成することができるようになっている。蕗１セ グメント上のサイトには最初から指定の試薬が含まれていることが望ましい。す なわち前記試薬がｇｔｔ中に存在するか含まれていると、問題の分析を開始する 前に該試薬を準備する必要がなくなる。このことは第２セグメント上の検出用試 薬にも適用することができ、この試薬についても最初から装置中に存在させてお くことができる。

過剰試薬すなわち例えば試料と試薬との接触中に反応しなかった試薬を分離する ための手段（ａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔ　）が少なくとも１つ装置に含まれておυ 、前記手段は検出可能物質の存在が表示される削にその機能ヲ行えるように配置 されていることも、本発明の特徴である。

換言すると、本発明の基本的思想は、試薬を組み込んだ多数のセグメントが相互 に連結されて１つの連続した構造になっており、またそれらが折り曲げられるこ とによって所望の試薬を相互に接触させることができるようになっているという ことである。最も単純で、従って最も安価な構造と言うと、前記シートを例えば 折り線を付けた祇シートやプラスチックシートなど形態にある単一片としたよう なものであって、その折り線に沿って一定のセグメント全相互に折９畳まれるよ うにしたものとなろう０　「連続的シート」という言葉は、別々のセグメント全 相互に連結したすべての構造を意図したものである。本発明はもちろんセグメン ト全相互に製造する方法によっても応用でき、この場合セグメントはヒンジ等の 連結＠構を用いて相互に連結される。このようなより洗練された装置は原則とし て、例えば容易に交換可能な化学的試薬を含むサイトなどを用いて何度か使用す るための装置に応用され得るが、はとんどの場合、装置は使い捨てとされｂｏこ の場合経済的理由から簡単な折り畳み式材料が好ましい。

ここに挙げた型式の分析には、検出を開始する前に、１つまたはそれ以上の成分 または反応体をその他の成分または反応体から分離する段階を含むものが多い。

例えば同体相（固体相試薬または反応により形成された一体相）から液体相を分 離することなどがこれに当てはまる。本発明装置では、この分離操作も非常に小 型で操作の簡単な装置の中に組込まれているため、このような種類の分析に対し て特に有利でちることが判っている。外部から追加する必要のあ夛得る試薬ある いは付属品があるとすれば洗浄液ぐらいである。洗浄液は％に化学的に安定して いる上普通の水から成っている場合も多いため、実用上別個に取り扱う方が望ま しい。また、洗浄液の使用については試料の場合と違って余り正確さを要しない ということもある。

分離用手段は例えば公報用素子（５ｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｅｌｅｍｅｎｔ　）ま たは媒体ヲ備えた第３のセグメントとなり得、このセグメントはそれぞれ第１セ グメントと第２セグメントの間に折り込んで所望の分離を達成するように配置ま たは装着される。このような分離用手段についても、使用された他の試薬の場合 と同様、先行技術に完全に従って選択されていることに注目すべきである。

多くの場合、濾紙を用いるだけで所望の機能を得ることができ、これは勿論コス トダウンにもつながる。

本発明の別の好適実施態様によれば、試薬の分雑手段は第１セグメント上のサイ トに隣接して配置した１つまたはそれ以上の分離または吸収媒体である。言い換 えると、この場合セグメント１＝貸に使用することなく、前記手段は試料と試薬 の接触が行われるセグメントに含まれるのである。前記媒体が第１セグメントの 前記サイトに隣接して配置されるということは、原則的に、液体すなわち一般的 には洗浄液を試料の使用量以上の址で適用するだけで作動できるということを意 味するものであられるのである。このことは、第１セグメントに少なくとも１つ のウェルまたは容器内に吸収材を配置して、該ウェルまたは容器に第１セグメン ト上のサイトから液体が流れ込む開口を設けることによって達成される。

場合に工）、分析には検出を遂行する前に何段階かの反応が含まれることがある 。本発明装置はその単純さにもかかわらず、このような場合にも有用なものであ る。すなわち、その中に所望の試薬を含む別のセグメントを設け、試料または先 の段階で形成された反応生成物と反応できるように何れか適当な項序で折υ畳め るように装着するだけで良い。

本発明による別の実施態様は、補助的セグメントを含む装置であり、これにより 試料が別のセグメント上の試薬と接触すべく折シ曲げられる前に、該仮枳試′Ｐ ｒを適用するため或いＬ該試料ｔ−希釈するだけのために設けられる。

本発明による装置のさらに別の実施態様は、検出用試薬が発色試薬であシ、セグ メントの１つが１つまたはそれ以上の基準色をつけた１つまたはそれ以上の窓を 含んでおり、形成された色をこの基準色と直接比較して分析評価できるようにし た装置である。換言すると、この装置には予め１つまたはそれ以上の色が与えら れており、これによって検出物質の定性的または定量的測定が直接与えられると 共に、分析で形成された色をこれと比較できるようになっている。望ましくは、 前記１つまたは　。

それ以上の窓を分析で形成され次色が顕色化するのと同一のセグメント内に設け て比較すべき色または濃淡が互いに隣接し合うようにする。

最後に述べた実施態様は視覚的な読取りを直接可能にするものであるが、このよ うな視覚的読取シを高精度に行える場合であっても、光学的に色を検出したいこ ともある。本発明の装置はもちろんこの様な目的のために構放し得、発色した色 を光学的に読取るための装置の中または上に直接挿入できるようにすることも可 能でるる。発色する試薬以外の検出用試薬も使用することができるが、この場合 は先行技術に準じる。従ってここで詳述する必要はないと考える。但しそのνり として、螢光とルミネセンスヲ挙げることができる。

場合によっては、例えば所定時間が過ぎた後などに、分析に用いる検出反応を止 めて、形成された色と基準色と全正雁に比較したい場合もある。このような場合 、使用する検出反応に対する抑制剤金倉むサイ）ｆ取付けた余分のセグメント１ ＝貸に設けることができる。このセグメントは、伍出反応の行わＩＬるセグメン トと接触するように折り曲げて検出反応を抑制または停止させることができるよ うに配置される。

本発明による装置の有利な利用法は、分析に通常は液相である流体相を固体相か ら分なすることと及び流体相中の物質の検出を行うことが含まれる場合に見ら扛 る。このような場合の好コ４な装置は、４１セグメント上のサイトが容器から成 り、その甲に試料を入れて容器中に存在する圓体層の試薬と反応させるか、ある い（ｄまたＩ体層が形成されるように反工６させるようになっていることと、第 ２セグメント上のサイトが所望の流体相の′！′！Ｊ質用の検出用試薬を含んで いることと、流体相（１通過させるが同体層は通過させないようにできる分離用 手段を含む第３セグメントが第１セグメント上の８’ＪＳと男２セグメ／ト上の 検出サイトとの間に折り込めるように配置されていることと金脣徴とする。従っ てこの場合、装置を逆転すると、叡坏相とそれによって被検出物質とが、検出反 応によるｎ体層からの阻害を受けることなく検出用試薬と接触することになる。

試料を適用するまで外的影響から採得した状態で第１セグメントの容器中に試薬 全貯蔵するために、容器の開口部は例えば箔など何らかの形の保護層で被覆して おき、これによって試料の適用まで試薬を定位置に保つことが望ましい。

本発明装置のこの他に有利な用途は抗原抗体反応に基く酵素免疫測定法における 使用であり、この場合の装置の特徴は、第１セグメントが試料全適用するための 透明グラスチック製のサイトと、望ましくは対照試料用の第２のサイトとを有し ており、該プラスチックは抗体または抗原の形態にある試薬を固定して形成され ていることにちる。このようにプラスチック面に抗原または抗体を固定すること は周知でおシ、「免役酵素技術」（Ｓ、アブラメアス、Ｐ、ドリュウ、几、マツ サイエフ、αフェルト７７編）エルセビエ―サイエンスーパプリツシャーズ発行 、アムステルダム／ニューヨーク／オツクス７オー）’、１９８３＆す、第３セ グメントが可溶性で選択的に僚結乾燥されｆｃ醇素標識仇体まｆｃは抗原をもつ 吸収パッド付きのサイトを備えており、前記第３セグメントは、第２セグメント が前記第１セグメントに重な９合うように折られる前に第１セグメントに重なり 会うように折られるべく構成されていることを特徴とする。さらに、装置は第１ セグメント上の少なくとも１つのウェルの中に配置された吸収材の形態で分離用 手段を含んでおり、洗浄液を第１セグメントの透明プラスチックにかけて、第２ セグメントヲ折シ畳んで第１セグメントに重な９合わせる前に反応しなかった試 薬を洗い流す場合、前記洗浄液が自動的に前記吸収材に吸収されるようになって いる、 先にも述べたように、本発明による装置に（ｄ多くの機能を組み入れることがで きる。従って、以上に述べた化学的作用部品とは別の種類のセグメントを１つま たはそれ以上設けることもできる。本発明によるこのように有利な装置の例とし ては、装置の操作方法に関する指示および／または患者のデータなどを付けた１ つまたはそれ以上のセグメントを含み、このセグメントもまた所望の順序で相互 に重なり会うように折り畳み可能となっている装置、あるいはセグメントがパッ ケージを密封するべく折畳むことのできる閉塞機構を提供していることを特徴と する装置などがある。

自己教示型折畳み方式をさらに構成、義良して誤操作による危険性をできるだけ 無くすために、本発明による別の有利な装置は、番号つきまたは色分けしたタブ がセグメントの開放順序を段階的に指示することを特徴とする。装置はまた、あ る種のセグメントが使用後装置から除去するべく引きちぎれるように構成されて いることを特徴とするべく設計することもできる。

例えば、分析結果を読み取るセグメント、ま友例えば患者の同定、試験の種類、 時間、連番など、関連データが存在するものあるいは記されたものだけを残すの に適当である。

セグメントの折り曲げ及びいろいろなセグメントの重なり合いに関しては、本発 明の装置ではセグメントが本質的に相互に夏なシ会うように折れるよう設計する のが望ましい。つまり、セグメントは全て最初すなわち装置の使用態勢ができた 時点から、適当な順序で互いの上に１つの積重ねとなるように折られているので ある。こうすると、最終的なパッケージは非常に小型化さｎた形状、つま９折り 畳み可能なカバーをかけたマツチ箱状となる。

さらに、不発明は一般的な化学分析、特に医学及び農学分野における化学分析に 用いる上述の装置の使用法（でもｉ関係する。

この関係で好適な使用法は免疫化学分析、例えば酵素免投測定矢、螢光免役測定 法、ルミネセンス免役測定法および核酸間のハイブリダイゼイション反応を用い る分析などにおけるものである。

図面の簡単な説明 次に本発明による装置について、本発明の好適実施態様の２例を示す添付図面に 関連してより詳細に説明することにする。

第１ａ図は６つのセグメントヲ含み、分離手段が特別セグメントとなっている装 置の平面図である。

第１ｂ図は第１ａ図からの４つのセグメントを示す側面図である。

第２図は折シ畳んだ状態のｉｌａ図の装置をそれぞれ上と下から見た図である、 舅３〜４図＋ｒｉ第１ａ図の装置をげ索免役分析に用いた場合の分析手ｌ１ｊ１ を示す。

第５ａ図は３つのセグメントヲ含み、分離手段が第１セグメント上にある第２の 装置の平面図である。

第５ｂ図は第５ａ図の装置の底面図である。

第５ｃ図は第５ａ図の装置を断面線Ｘ−Ｘに沿って取っｆｃ断示している。

第６ｂ図は、折畳んだ状態の第５ａ図の装置を断面線Ｘ−Ｘに沿って取った断面 図で２倍に拡大したものである。

第６Ｃ図は、折畳んだ状態の第５ａ図の装Ｗを断面線Ｘ１−Ｘ１に沿って取った 断面図で２倍に拡大したものである。

第７図は、第５ａ図の装置全ｔ＃素免疫分析に用いた場合の分析手順を示す。

第１図に示した装置は６つのセグメント６〜１１を有する連れシートから成）、 そのうちセグメント６〜９Ｆｉ化学的に作用するサイ）ｆ示し、セグメン）１０ と１１は化学的操作の補助的セグメントとなっている。さらに、セグメントのい くつがは装置の開は万ノ唄序を示すべく１かも５の番号を付けたタブを備えてい る。さらに図面では、装置をシールするための小型の折り畳み式セグメント１２ が示されている。

より詳細に言うと、セグメント６は固体相試薬１４を内蔵し、箔１５によって被 覆されている反応容器１３を含む。セグメント７には篩板である領域１６が備え られており、セグメント８は酵素基質の形態の化学的活性表面１７と保護剤の透 明プラスチック粕１８とを含む。セグメント９の方は、酵素抑制剤の形で化学的 活性表面１９全有している。

上述しんように、第２図は折り畳んだ状態の装＃をそれぞれ上と下から見几とこ ろを示しており、参照符号は第１図と同じである０ただし、第２図は２つの色試 薬用窓２ｏを示しておシ、分析で形成され友表面１７の色をこれと比較すること ができる。

ここに示した装置の操作については第３〜４図を参照する。

同図には１から■までの番号を付けた順序が示されており、その順序については 次のように説明することができる。

１、キットまたはパッケージをタブ１により開く。ペン２１で示されている個所 に患者の名前その他データなども記入することができる。

Ｌ　タブ２を開く。試験棒２２を使って箔１５に穴をあけて、反応容器１３の中 に試験棒で試料を入れる。試料を試験棒を用いて混ぜ、反応混合物１４とする。

次に適当な時間、試料をインキュベートする。必要に応じて次に、フラップ７で 再び封をする。

１、（ンキュベーション後、タブ２が封されている場合は再びそれを開ける。

■、タブ３を開き、それによって蒔１紙の表面１６が露出する。

前記表面の下には酵素基質面１７がろる。濾紙１６付きのセグメンｌｔ−折って 、反応容器１３の上にかぶせる。

■、装填を一時的に逆転する。

■　タブ４を開くことにより、酵素基質の表面１７と酵素抑制剤の表面１９が露 出する。

■、タブ５を用いて表面１９を表面１７にかぶさるように折ることによシ、任意 的酵素反応を停止させる。折シ曲けた後、これらの表面は図示のものでは開閉自 在の粘着剤を備えているために互いに接着した状態となっている。

１０次にその他のセグメントは引きちぎつｌ）はぎ取ったシすることができる。

２互いに接着した状態で残った２つのセグメントの上には、患者の名前とデータ が見られる。

■、残ったセグメントの反対側にある窓を通じて、得られた発色反応を窓２０の 基準色と比較して読取る。

例示した反応に関する限り、発色反応は反応容器１３中の固体相１４に吸収され なかつｆｃ＃素の量に依存している。従って反応容器１３の反応システムは、固 体相１４によシ吸収された酵素の盆が試料中に存在する抗原または抗体にそれぞ れ直接依存するような組成となっている一第３図の段階■の逆転で、固体相１４ が酵素基質表面１７に達しないようになっている濾紙１６に試料は吸収さｎる。

Ｍ５図と第６図に示された装置は３つのセグメント３０〜３２を有しており、こ ｎらは全て分析過程で積極的役割を果友すものである。さらに、セグメント３１ と３２には装置を開く順序を示す色分けしたタブ３３と３４が設けられている。

セグメント３０は透明のプラスチック表面３５を含み、これに抗体（または抗原 ）が化学的または物理的に固定されている。

プラスチック表面３５上には試料用に印をつけたスポット３６と対照標準または 標準用に印をつけたスポット３７とがめるっプラスチック表面３５のＭ［Ｋは、 底板５１上のウェルの中におる吸収媒質４８の形態で内蔵式分離手段が存在する 。

る。これと対応するように、セグメント３２の上側の凸側４゜にも盛り上りがら り、こ扛には酵素標識した仇体（まｆｃは抗原）を含む吸収パッド４１が取付け られている。パッド３９と４１に関しては、セグメント３１または３２をそれぞ れ適当に折シ曲げることにより、これらのバンドがそれぞれプラスチック表面３ ５と重なり合うように構成されている。作動していないパッドは、他方のパッド の反対１ＭＩＩに形成された凹所（それぞれ４９まｆｃは５０）の中に結する。

セグメントの折り曲げは、折り嵯４２により量率になっている。第６図に示され る折畳ま１した開始位置におい１は、セグメント３１がセグメント３２の底側に 対して折られており、スナップ式同定具４３によシ固定されている。セグメント ３２の方はセグメント３０に対して折ｐ畳まれてお９、セグメント３０のウェル ４５内に可逆的に：紀定された２つの固定ビン４４により固定されている。セグ メント３２のヒみ４６はセグメント３１を開く除にタブ３４′に把めるようにし ているが、舗み４７もセグメント３２をセグメント３０に対して折シ曲げて固定 ピン４４で固定する可能性を残したままでセグメント３１をセグメント３２の上 側に折シ曲げられるようにしている。

第５〜６図に示した装置の操作について、第７図を参照すると、葦からＸＸＶＩ までの番号で手順が示されてお沙、その手職については次のようｅζ説明できる 。

ハ、タブ３３に工９パッケージを開く。所望によシ、患者の氏名とデータをパッ ケージの娯側に記入することかできるつん■、試料を表面３５のスポット３６に ｉｊ用する。試料が液体の堝付、例えば表面の上に試料を滴下するなどして達成 できる。

これに相当する方法で比較標ふまたｌ−ｔ、標準をスポット３７に適用する。被 試収吻質が試料、比較襟：γまたは像準中に存在する陽会、それはプラスチック 表面３５に回定された抗体（ま九は抗原）と反応してこれと結合する。

ＸＸ１．　パッケージを再び封止する。それによって菓２の分析段階が開始され る。被試験物質の存在する場合、それは吸収バッド４１の中にある溶解性酵素標 識抗体（または抗原）と反応してこれに結合される。それにょシ酵素標識抗体も 、ＸＸＩ段階から続いている反応によってプラスチック表面３５に間接的に結合 されることになる。

■、適当な反応時間の経過後、パッケージをタブ３３により再び開ける。次に洗 浄液が表面３５上に落とされることによって、被試験物質と反応しなかった可溶 性酵素標識抗体を洗い流す。

可、　タブ３４を用いてセグメント３１を開き、これをでグメント３２の上面に 折り畳む。

Ｗｌ、パッケージを再び封止する。それによって検出反応が開始する。最初の反 応段階で反応し定酵素標腋抗体は、吸収バッド３９の発色性酵素基質を色付き物 質に変換する。

ｘＸ′ｖ１．適宜な反応時間をおいた後、透明プラスチックの窓３５上通してパ ッケージの裏側で結果が読み取られる。試偵スポット３６上に形成された色をス ポット３７上の比較係準反応の、活果または基準色と比較する一 例示した分析順序に関しては１発色反応はＸＸＩの洗浄段階の後表面３５に存在 する＃累の量に直接依存するということがさらに付言できる。この量は酵素標識 抗体（あるいは抗原）に結合することができ且つ同時に表面３５に固定された抗 体（抗原）に結合する試料中の被試験物質の存在に直接依存する。

実施例 次に挙げる実施例は、本発明による装置をより詳細に説明することを意図したも のである。これらの例は、小分子量および非常に大分子量の蛋白質とウィルスの 測定に装置を応用した場合について説明している。

全ての応用例に関し、第５〜６図の装置を１：１の尺度で用いた。セグメント３ ０〜３２はポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）から製造した。透明プラスチック表面３５ は免疫グレードのポリスチレン（ヌンクＡ／　Ｓ　、デンマーク、ロスキルド（ Ｎｕｎｃ　Ａ／　Ｓ　。

Ｒｏｓｋｉｌｄａ、　Ｄｅｎｍａｒｋ　）　）製の長方形スライドで構成し、表 面上に円形スポット３６と３８を配した。各々のタイプの応用に於いて後述する ように抗体をこれらのスポットに固定した。

分離手段の吸収材料３８をセルローススポンジ（ウニラテックス■、セロシラス トＡＢ、スウェーデン、ノルコピング（Ｗｅ−した。吸収・リド３９と４１につ いては、ワットマン■３ＭＭ濾紙（ワットマン・リミテッド、英国、ケント、メ イドストン（Ｗｈａｔｍａｎ　Ｌｔｄ、　、　Ｍａｉｄｓｔｏｎｅ　、　Ｋｅｎ ｔ、　Ｌ／、　Ｋ、　）　）を用いた。これらの濾紙ノ♀ツドに後述するように 各タイプの応用のだめの試料を浸漬した。

テログロブリンのアッセイのため、装置には表面３５を被覆して試料の蒸発を防 ぐことのみを目的とする別のセグメントをヒト絨毛性ゴナドトロピン（ｈＣＧ） は分子量４６０００程度の小さな蛋白質である。このアッセイは婚壁診断に役立 つ。

装置の迦備 ｈＣＧのアルファサブユニットに対するモノクローナルな抗体（クローン５５０ ３　、オイ・メディックスＡＢ、フィンランド、カウニアイネン（Ｏｙ　Ｍｅｄ ｉｘ　Ａｂ＋　Ｋａｕｎｉａｉｎｅｎ、　Ｆ　１ｎｌａｎｄ　）　）を１０μ！ ！／−に希釈したものを７５μノ、それぞれのスポット３６゜３７に塗布するこ とにより、プラスチックスライド３５にその抗体を固定した。希釈剤（略してＰ ＢＳ）は０．０５　ｍｏｌ　／ノの燐酸ナトリウム、０．１５　ｍｏｌ　／　ｊ のＮａｃノ、ｐＨ７，２であった。スライドを湿度室（ｈｕｍｉｄｉｔｙ　Ｃｈ ａｍｂｅｒ　）の中に４Ｃで１８時間インキュベートした。次にＰＢＳ中にｏ、 ｏｓ％のトウイン■（Ｔｗｅｅｎ　）−２０（メルク、ドイツ、ホーヘンブルン （Ｍｅｒｋ、　Ｈｏｈｅｎｂｒｕｎｎ。

Ｇｅｒｍａｎｙ　）　）で成る洗浄溶液（略してＰＢＳ−）ウィン）約１０−を 用いてこれらを洗浄した。その後、ＰＢＳ中に１％ｗ／ｖの牛血清アルブミン（ シグマ・ケばカル・カンノ髪ニー、米国ξズリー州セントルイア−（Ｓｉｇｍａ 　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、　ｅ　Ｓｔ、　Ｌｏｕｉｓ。

Ｍｉｓｓｏｕｒｉ、ｌＪ、５−Ａ−）　）を含む浴液（略してＰＢＳ−ＢＳＡ） を含む皿の中にスライドを浸して、室温で９０分間インキュベーを用いて洗浄し た後１ｏ−の蒸留水で洗浄し転線させた。

吸収、ｅラド４１にはｈＣＧのベータサブユニットに対するペルオキシダーゼ共 役モノクローナル抗体（センタ・クロム７Ｍ共役試薬（Ｓｅｎｇｉ　−Ｃｈｒｏ ｍｅ”’　Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ　Ｒｅａｇｅｎｔ　）ホフマン・テロシュ・イン コーホレイテッド、木−ニュージャージー州ナトリー（Ｈｏｆｆｍａｎ　−Ｌａ 　−Ｒｏｃｈｅ　Ｉｎｒ、　ｅ　Ｎｕｔｌｅｙ、　Ｎｅｗ　Ｊｅｒｓｅｙ、　Ｕ 。

Ｓ、Ａ、　）　）の非希釈溶液を浸漬させた。吸収／Ｑラッド９には、メチルベ ンジジン（マイルズ・ラボラトリーズ・インコーホレイテッド、米国インジアナ 州、エルクハート（Ｍｉｌｅｓ　Ｌ＠ｂｏｒａ−ｔｏｒｉｅｓ、　Ｉｎｃ、　ａ 　Ｅｌｋｈａｒｔ、　Ｉｎｄｉａｎａ＋　Ｕ、　Ｓ−Ａ−）　）、　ｐＨ６，０ ゜０．１ｍｏｌ／ノの酢酸ナトリウム／クエン酸緩衝剤中の１．４　ｍｍｏｌ／ ノの過酸化尿素の発色基質溶液を浸漬させた。

アッセイの実施 アッセイは本質的に第７図に示されたように、ＸＸ　−ＸＸＶＩの手順で行った 。ただし、次のように試料、量、時間、その他条件などについての詳細を付は加 えることができる。

アッセイ用の試料として、それぞれリットルあたり３９００と５５０国際単位の 所定ｈｃＧ濃度のりフォチェック■Ｌｙｐｈｏｃｈｅｋ■ＩとＵのヒト対照尿（ バイオ・ランド・ラボラトリーズ・インコーホレイテッド、米国カリフォルニア 州アナヘイム（Ｂｉｏ−Ｒａｄ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、　Ｉｎｃ、　＃　 Ａｎａｈｅｉｍ＊　Ｃａ１ｉｆｏｒｎｉａ、　Ｕ、　Ｓ、　Ａ、　）　）を用す た。これらの試料をさらに周知の陰性尿試料を用いて。

１：２．１：４．１：８，１：１６に希釈した。周知の陰性尿試料をブランクと して用いた。

装置を開けて、各試料を約５０μノの１滴１つスポット３６に塗布し、同じ量の ブランクをスポット３７に塗布した。次にセグメント３２をセグメント３ｏ上に 折って装置を閉じ、吸収パッド４１中の共役抗体をプラスチック表面３５に移し た。装置を閉じたままで１５分間室温でインキュベートした。

次に装置を再び開けて表面３５を露出し、これを約１−のＰＢＳ−トウインで洗 浄した。セグメント３０上に折って、吸収・９ツド３９中の発色基質をプラスチ ック表面３５上に移した。

装置を再び閉じて、室温で５分間インキュベートした。その後直ちに透明プラス チックのスポット３６と３７を通して色の反応を装置裏側で読み取った。薄い青 を°＋”、はっきりした宵を“＋＋”、強い青を”＋＋＋”で表示した。アッセ イの結果を市販の姶娠テストであるセン７・クロム　（ホフマン・チロシュ・イ ンコーホレイテッド、米尻ニューシャーシー州ナトリー）を試験管内で同時に行 って、これと比較した。

結果 試　料　本発明装置　セン７・クロム　方法周知の陰性尿試料　−− リフオチェック■Ｉ１１：１６　＋　−リフオチェック■Ｉｉｌ：８　＋　＋ リフオチェック■ＩＩＩ：４　＋＋　＋＋リフオチェック■Ｉｌｌ：２　＋＋＋ 　＋＋＋す７オチエツク■ｌ　＋＋＋　＋＋＋ す７オチエツク■ｌ　＋＋＋　＋＋＋ ここから分かるように、２つの方法の間には良好な相ｂｂ係が認められた。

ヒトチログロブリンのアッセイ ヒトチログロブリンは分子量約６６０．０００と比較的大きな蛋白長である。こ の検定は甲状腺癌の検査に有用なものである。

装置の準備 抗ヒトチログロブリンモノクローナル抗体（クローンＴＦ−３３、ノボ・インド ウストリＡ／Ｓ、デンマーク、バグスベルド（Ｎｏｖｏ　ＩｎｄｕｓｔＰｉ　Ａ ／　Ｓ、Ｂａｇｓｖａｅｒｄ、　Ｄｅｎｒｎａｒｋ　）　）を１０　ｔｔｌ／− 希釈したものを７５μノ、スポット３６と３７のそれぞれに塗布して、プラスチ ックスライド３５に抗体を固定した。希釈剤（略してＰＢＳ　）は０．０５　ｍ ｏｌ　／　Ｊｌの燐酸ナトリウム、０．１５ｍｏｌ／ノのＮａＣノ、ｐＨ７，２ であった。スライドを４ｃの湿度室中で１８時間インキュベートした。次にＰＢ Ｓ中に０．０５％のトウイン■−２０（メルク、ドイツ、ホーヘンブルン）を含 む約２５−の洗浄液（略してＰＢＳ−１−ウィン）を用いてスライドを洗浄した 。その後、ＰＢＳ−１−ウィン中に１％Ｗ／Ｖの牛血清アルブミン（シグマ・ケ ミカル・カンパニー、米国ミズリー州セントルイス）で成る溶液（略してＰＢＳ −ＢＳＡ）を含む皿の中にスライドを浸して、室温で４５分間インキュベートし た。

研いてスライドを再び約２５１ｎｔのＰＢＳ−）ウィンで洗浄した後、さらに２ ５−の蒸留水で洗浄して、最後に圧縮空気流の下で乾燥させた。

吸収ノ？ツド４１には、ペルオキシダーゼ共役のラビット抗ヒトテログロブリン （り゛コノリツＡ／Ｓ、デンマーク、グロストラプ（Ｄａｋｏｐａｔｔｓ　Ａ／ 　Ｓｖ　Ｇｌｏｓｔｒｕｐ、　Ｄｅｎｒｎａｒｋ　）　）をＰＢＳ−ＢＳＡ中に １　：　５００に希釈した溶液を浸漬させた。吸収、ｅラド３９には０．０５％ Ｗ／Ｖのオルト・フェニリン・ジアミン（シグマ・ケミカル・カンパニー、米国 ミズリー州セントルイス）％　０．０１％Ｖ／ＶのＢｙ　Ｏｘを０．０６　ｍｏ ｌ　／ノ燐酸ナトリウム、０．０３　ｍｏｌ　／ツクエン酸ナトリウムに溶解し たｐ）１５．０の発色基質溶液を浸漬させた。

アッセイの実施 アッセイは本質的に第７図に示されたように、ｘｘ　−ｘｘｖｔの手順で行った 。ただし、試料、量、時間、その他の条件の詳細九ついては次のように付言でき る。

このアッセイの試料としては、ＰＢＳ−ＢＳＡ中にもそれぞれ５００　ｎ、！ｉ ’　／　ｍｌ、１００ｎ、Ｖ／ｍ／、１０ｎ、９／＋ｄの精製ヒトテログロブリ ン標準（ノボインドウストリＡ／Ｓ％デンマーク、バグスベルド）の溶液を用い た。テログロブリンを加えないＰＢＳ−ＢＳＡをブランクとして用いた。

装置を開けてスポット３６に各試料を２５μノずつ塗布し、同量のブランクをス ポット３７に塗布した。蒸発を防ぐために余分に設けられている蓋を閉じて、装 置を室温で３０分間インキュベートした。次に表面３５を約１−のＰＢＳ−）ウ ィンを用いて洗浄した。

洗浄後、セグメント３２をセグメント３０上に折って装置を閉じ、吸収、ｅラド ４１の共役抗体をプラスチック表面３５に移ＰＢＳ−）ウィンで洗浄した。セグ メント３１壬セグメント３０上に折って、吸収パッド３９０発色基質をプラスチ ック表面３５±に移した。装置を再び閉じたまま、室温で１０分間インキュベー トした。その後直ちに透明プラスチックのスポット３６と３７を通じて色の反応 を装置裏側で読み取った６薄い黄色を”＋”、はっきりした黄色を”＋＋”、強 い黄色を９千＋＋”で表示した。

結果 ヒトテログロブリン標準（ＰＢＳ−ＢＳＡ中）濃　度　反応 ５００ｎｐ／ノ　７６０　ｐｍｏｌ／ノ　＋＋＋１００ｎＪ／ノ　１５０　ｐｍ ｏｌ／、／　＋＋１０ｎｊ／ノ　１５ｐｍｏｌ／ノ　＋ 以上から分かるように、本発明装置は分析物の濃度ｔマ非常に低い場合に半定量 的な情報を提供することができた。

ネコ白血病ウィルスのアッセイ ネコ白血病ウィルスのアッセイは、獣医学的に猫の白血病を診断する上で１要で ある。

装置の準備 ５０μｔの抗猫白血病ウィルスモノクロナール抗体（クローン１、ケンブリッジ ・バイオサイエンス・コーポレイション、米国マサチューセッツ州ホゾキントン （Ｃａｍｂｒ　ｉ改ｅ　ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、　Ｈｏ ｐｋｉｎｔｏｎ、　＆Ｉａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ、　Ｕ、Ｓ　＋Ａ　）　）を １０ｐ？／ｌｎｔ希釈の濃度で、スポット３６と３７にそれぞれ塗布することに よって、抗体をプラスチックスライド３５に固定した。希釈剤（略してＰＢＳ　 ）は０．０５　ｍｏｌ／　Ｌ　燐酸す）　リウム、−０，１５ｍｏｌ／　Ｌ　Ｎ ａ０２％ｐＨ７，２であった。スライドを３７℃の湿度室中で３時間インキュベ ートした。次にＰＢＳ中に０．０５％のトウイン■−２０（シグマ・ケミカル・ カンフｅニー、米国ミズリー州セントルイス）で成る洗浄溶液（略してＰＢＳ　 −）ウィン）を約１０ｒＡｔ用いて、これらのスライドを洗浄した。その後、Ｐ ＢＳ中に１チｗ／　ｖの牛血清アルブミン（シグマ・ケミカル・カンパニー、米 国ミズリー州セントルイス）で成る溶液（略してＰＢＳ−ＢＳＡ）を含む皿の中 にスライドを浸して、３７℃で６０分間インキュベートした。続いてスライドを 再びほぼｌＱｄのＰＢＳ　−）ウィンで洗浄した後、ｌＱｍｊの蒸留水でさらに 洗浄し、乾燥させた。

吸収、ｅラド４１にはペルオキシダーゼ共役の抗ネコ白血病ウィルスモノクロー ナル抗体（クローン２、ケンブリッジ・バイオサイエンス・コーポレイション、 米国マサチューセッツ州ホブキントン）を１＝５に希釈した溶液を浸漬させた。

吸収パッド３９は、０．０５−ｙｎ　ｍｏｌ／　Ｌ燐酸ナトリウム緩衝剤中に０ ．１％Ｗ、／Ｖ　２　、２’−アジノージ−３−エチルベンズチアジンン・スル ホ、＊−ト（ベーリンガー・マンハイムＧｒｎｂＨ１）’イン、マンハイム（Ｂ ｏｅｒｉｎｇｅｒΔ（ａｎｎｈｅｉｍ　ＧｒｎｂＨ、Ｍａｎｎｈｅｉｍ　ｅ　Ｇ ｅｒｍａｌ　））、０．１５％　Ｈ２Ｏ１の発色基質溶液、ｐＨ６，０を授潰さ せた。

アッセイは本質的に第７図に示した通υ、ＸＸ　−ＸＸＶＩ　の手順で遂行した 。ただし、試料、量、時間、その他の条件の詳細については、次のように付言で きる。

このアッセイでは、疑いのある猫から採取した実際の血清試料を１０種用いた。

ＰＢＳ　−ＢＳＡをブランクとして使用した。

装置を開けて、各試料を１滴約５０μｔずつスポット３６に塗布し、同量のブラ ンクをスポット３７に塗布した。次にセグメント３２をセグメント３０上に折り 曲げて装置を閉じて、吸収パッド４１の共役抗体をプラスチック表面３５上に移 した。

装置を閉じたまま、室温で１５分間インキュベートした。

次に装置を再び開けて表面３５を露出し、これをほぼ５ｒｎｌのＰＢＳ　−）ウ ィンで洗浄した。セグメント３１をセグメント３０に折シ曲げて、吸収パッド３ ９内の発色基質をプラスチック表面３５上に移した。装置を再び閉じたまま、室 温で２分間インキュベートした。その後直ちに透明プラスチックのスポット３６ と３７を通して色の反応を装置の裏側で読み取った。薄い緑色を”十”、はっき りした緑色を−１−＋”、濃い緑色を”＋２で表示した。アッセイの結果を、市 販のネコ白血病ウィルス用テスト（ピットマン・ムーブ・インコーホレイテッド 、米国ペンシルバニア州フィラデルフィア（Ｐｉｔｍａｎ　−Ｍｏｏｒｅ　、　 Ｉｎｃ、。

ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、　Ｐｅｎｎ５ｙｌｖａｎｉａ、　Ｕ　、Ｓ、Ａ、） 　）をマイクロタイトレージョン　カップ内で同時に行った結果と比較した。

結果 両方法は１０試料中８つの結果について一致した。結果の異なる試料４と６につ いては、操作上の要因か、試料の臨床状態に原因したものと考えられる。

浄書（丙容に変更なし） ツーーーー二＝トーー 立 １、事件の表示　ＰＣＴ／ＳＥ　８４１００４０９２１発明の名称　化学分析装 置とその使用３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 名　称　ヴエルトリク・バイオテクニク・アー・べ−４、代　理　人　東京都新 宿区新宿１丁目１番１４＠　山田ビル６、補正により増加する発明の数 ７、補正の対象　図面の翻、Ｊ＜文 ８、補正の内容 （１）鮮明な図面の翻訳文を別紙の通り補充する。

（内容に変更なし） 国際調査報告

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．被試験試料を該試料と反応して検出可能な物質を形成する少なくとも１つの 試薬と接触させた後にその物質を検出して定性的または定量的測定を行う、特に 例えば免疫化学分析などの医学的分野における化学的分析用装置であつて、該装 置が少なくとも２つのセグメント（６．８または３０，３１）の連続シートから 成つており、そのうち第１セグメント（６または３０）は前記試薬の少なくとも １つが最初から存在してその上で前記試料と試薬の接触が行われるサイト（１３ または３５）を含んでおり、第２セグメント（８または３１）は望ましくは最初 から所望の検出用試薬が存在してその上で検出可能な物質の有無が示されるサイ ト（１７または３９）を含んでおり、該第１および第２セグメント（それぞれ６ と８、またはそれそれ３０と３１）は、試薬を有するサイト（１３または３５） が検出用のサイト（１７または３９）と重なり合うように折り曲げ可能であり、 また該装置は試料と試案の接触中に反応しなかつた試薬を分離するための少なく とも１つの手段（７または４８）を含み、前記手段は検出可能物質の有無が示さ れる前に作動されるように配置されており、存在するセグメントは所望のセグメ ントが相互に重なり合つて所定の分析段階を遂行てきるように折り曲げ可能であ ることを特徴とする装置。 ２．試薬分離用手段が分離素子または媒体（１６）を含む第３セグメント（７） であり、前記第３セグメントは前記第１セグメント（６）と前記第２セグメント （８）との間に折り込まれるように配置されていることを特徴とする、請求の範 囲第１項に記載の装置。 ３．試薬分離用手段が第１セグメント（３０）のサイト（３５）に隣接して配置 された１つまたはそれ以上の分離または吸収用媒質（４８）であることを特徴と する請求の範囲第１項に記載の装置。 ４．前記分離または吸収用媒質が前記第１セグメントの１つまたはそれ以上のウ エルまたは容器（５１）の中に配置されており、反応しなかつた試薬を洗浄除去 するために領域（３５）に洗浄溶液を適用する際、前記洗浄溶液が自動的にウエ ル内に分離または吸収されるように構成されていることを特徴とする、請求の範 囲第３項に記載の装置。 ５．該装置が、使用される検出反応の抑制剤を含むサイト（１９）を有する追加 セグメント（９）を含んで成り、該セグメント（９）は折り曲げられて第２セグ メント（８）と接触し、検出反応を抑制すべく配置されていることを特徴とする 、前記何れか１つの請求の範囲に記載の装置。 ６．該装置が試薬（４１）を含む１つまたはそれ以上の追加セグメント（３２） を含んで成り、該セグメントは何れか所要の順序で折り曲げられて試料または先 の何れかの段階で形成された反応生成物と反応すべく配置されていることを特徴 とする、前記何れか１つの請求の範囲に記載の装置。 ７．該装置が試料の適用または希釈用のセグメントを含んで成り、該セグメント は別のセグメント上にある何れか所望の試薬と試料を接触させるべく折り曲げら れるように配置されていることを特徴とする、前記何れか１つの請求の範囲に記 載の装置。 ８．検出用試薬が発色試薬であり、セグメントの１つが基準色を付けた１つまた はそれ以上の窓（２０）を含んでいて、その基準色と発色された色とを直接比較 して分析評価が行えるように構成されていることを特徴とする、前記何れか１つ の請求の範囲に記載の装置。 ９．該装置が使用準備の整つたパツケージ形態となつている時セグメントは本質 的に相互に重なり合うように折り曲げ可能であることを特徴とする、前記何れか １つの請求の範囲に記載の装置。 １０．折り曲げ可能なセグメントを有する連続シートがボール紙、プラスチツク 又はその他の容易に折り曲げ可能な材料の単片から構成されていることを特徴と する、前記何れか１つの請求の範囲に記載の装置。 １１．固体相から流体相を分離することと流体相中の物質を検出することとを含 む分析に使用するための前記何れか１つの請求の範囲に記載の装置であつて、第 １セグメント（６）上のサイトが容器（１３）を含み、該容器の中に試料を加え て該容器内に存する固体相試薬（１４）と反応せしめるかあるいはまた反応させ て固体相を形成するべく構成されており、容器開口部は望ましくは試料が加えら れるまでの間試薬を保持する例えば箔などの保護層（１５）により被覆されてか り、また第２セグメント（８）上のサイト（１６）は流体相の所望の物質を検出 する試薬を含んでおり、さらに流体相は通過させるが固体相は通過させない例え ば濾紙などの分離素子または媒体（１６）を含む第３セグメントは第１セグメン ト（８）の容器（１３）の間に折り込まれるように配置されており、装置の反転 時流体相が検出用試薬と接触され得らよう構成されていることを特徴とする前記 装置。 １２．抗原抗体反応に基く酵素免疫測定法に使用される前記何れか１つの請求の 範囲に記載の装置であつて、第１セグメント上のサイトが試料中の抗原または抗 体の有無に関連して酵素が吸収されることになる固体層を含んでおり、第２セグ メントは、前記第１セグメント上のサイトの固体相により吸収されなかつた酵素 又は洗浄後第１セグメントの前記サイトの固体相上に残存している酵素と反応す る酵素基質を含んでいることを特徴とする装置。 １３．抗原抗体反応に基く酵素免疫測定法に使用するための請求の範囲第１，３ 〜４，６〜１０および１２項の何れかに記載の装置であつて、試料添加用の透明 プラスチツク製のサイトと量ましくは対照試料用のサイトも有しており、該プラ スチツクがそれに固定された抗体または抗原の形態で試薬を備えている第１セグ メントと、発色性酵素基質の形態で検出用試薬を備えたサイトを有する第２セグ メントと、可溶性で任意に凍結乾燥した酵素標識抗体または抗原を有する吸収パ ツドを備えたサイトを含んでおり、第２セグメントを折つて第１セグメントと重 ね合わせる前に前記第１セグメントと重なり合うべく折り曲げられるように配置 されている第３セグメントと、第１セグメントの少なくとも１つのウエルの中に 吸収材料の形態で配置されており、他のセグメントを折つて第１セグメントに重 ね合う前に第１セグメント上の透明プラスチツクに洗浄液を加えて反応しなかつ た試薬を洗い流す際前記洗浄溶液が自動的に前記吸収材料に吸収されるように構 成されている分離手段とを特徴とする装置。 １４．化学的分析、特に例えば酵素免疫測定法、螢光免疫測定法、ルミネセンス 免疫測定法などの免疫化学分析や、核酸間のハイブリダイゼイシヨン反応に基く 分析などの医学および農業分野における化学的分析における、前記何れか１つの 請求の範囲に記載の装置の使用。