JPS61296070A - クチナシ青色系色素組成物の製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明け、例えば、飲食品類、保健医薬品類、香粧品類
などにおける天然源色素として有用な公知のクチナシ青
色系色素含有材料から、容易な操作で工業的に有利Ｖｒ
該材料中の黄色系色素を選択的に除去し、冴えた鮮明な
青色色調を有する安定なりチナシ青色系色素組成物を製
造する方法に関する。

更に詳しくは、本発明はクチナシ抽出物の酵素処理物、
クチナシ抽出物の微生物による培養処理物及びクチナシ
抽出物の第１級アミノ義含有物質との反応生成物よりな
る群からえらばれたクチナシ青色系色素含有材料を、水
混和性有機溶媒で処理し、この際、該溶媒処理系の水含
量が、該水混和性有機溶媒の含水率として表わして、約
６０重量％以下、好ましくは約５〜約６０重量％と々る
条件で処理し且つ処理した系から固形分層を採取するこ
とを特徴とするクチナシ青色系色素組成物の製法に関す
る。

従来、あかね科りチナシ属に属する植物の例えば果実本
しくけその抽出物（本発明において、これらを包含して
クチナシ抽出物と総称する）Ｋ１例えばβ−グルコシダ
ーゼなどの如き酵素を作用させて得られるクチナシ抽出
物の酵素処理物、クチナシ抽出物を含有する培地に例え
ばバチルス属或いけハンゼヌラ属に属する微生物を接種
培養して得られるクチナシ抽出物の微生物による培養処
理物、更には、クチナシ抽出物に例えばアミノ酸、ペプ
タイド及び蛋白質などの如き第１級アミノ基含有物質を
作用させて得られるクチナシ抽出物の第１級アミノ基含
有物質との反応生成物が、該クチナシ抽出物中に含有さ
れるイリドイド配糖体か牧変換されたクチナシ青色系色
素を含有するクチナシ青色系色素含有材料として有用で
あることが知られている。

そして、従来、工業的に生産されているクチナシ青色系
色素糾成物は、上述のようなりチナシ青色系色素含有材
料をそのまま乾燥して粉末状としたり、或いは該クチナ
シ青色系色素含有材料から不溶物（固形分）を除去し濃
縮したペースト状の色素濃縮物として供給されるのが普
通である。勿論、このようなりチナシ青色系色素含有材
料の色素組成物の純度を上げる目的で精製手段を施すこ
難である。

例えば、特公昭５２−１３９７１号（特開昭５１−６２
３０号）Ｋ打１、バチルス属に属する微生物を、あかね
科りチナシ属に属する植物の抽出物の添加培地に培養し
、培地中にもとの色調と異る色調の色素組成物を生成蓄
積せしめ、これを採取することを特徴とする色素組成物
の製造法が提案されている。

この提案には、製造された緑色ないし青色の水溶性色素
組成物の回収に際しては使用目的に応じ地磨砕物または
溶媒抽出物等を適宜に使い分けて色素組成物を回収する
ことができると記載され、更に、たとえば液体培養にお
いては菌体を涙別するのみで清澄な緑色ないし青色の色
素溶液が得られ、尚、色素組成物の純度を上げることを
必要とする場合には更に溶媒抽出法、各種吸着剤による
吸着溶出法等の公知の精製法を利用して高純度の色素組
成物を得ることも可能であると記載されている。

そして、この提案の実施例６には、乾燥したクチナシ果
実を粉砕機にかけて粗砕した粗砕物を配合したクチナシ
抽出物含有固体培地を用いた培養処理物を、滅菌冷却後
に、８０チエタノール溶液で抽出して培地中に蓄積した
緑色色素組成物を抽出し、得られた抽出液をメンプラン
・フィルターで濾過して液層の緑色色素組成物含有エタ
ノール水溶液を採取し、これを減圧濃縮して水溶性緑色
色素組成物含有水溶液を得たことが記載されている。

更に、この提案の第１図には、バチルス・ズブチリスを
用いた振盪培養物の培養Ｆ＊について吸光度−波長曲線
が示され、培養開始後１２０時間における培養炉液（色
素液）には約６００ｍμ（５９０ｍμ）付近に吸光度ピ
ークが出現し、更に、培養開始時からの約４２０ｍμ付
近の吸光度ピークが、若干のピーク高さの減少を伴うも
のの、実質的にそのまま存在していることが示されてい
る。又更に、この提案の全実施例において吸光度データ
が記載されており、いずれの色素組成物についても、５
９０ｍ＃及び４２０ｍ＃における吸光度ピークの存在が
示されている。これら全実施例の吸光度ピークを例えば
青色系色素に由来する約５９０ｎｍにおける吸光度を（
，４）及び黄色系色素に由来する約４２０ｒＬｍにおけ
る吸光度を（Ｂ＞とじ、その比（Ａ）／（Ｂ）を算出し
てみると、例えば下記の如く表すことができる。

この結果からも明らかな如く、上記提案によって色であ
ることを示している。

本発明者等の検討によれば、上記提案において青色色素
組成物含有水溶液もしくは粉末と記載さ緑色乃至緑色が
かった煤んだ青色であって、冴えた鮮明な青色色調の望
まれる用途への利用に制約がある難点がある。

本発明者等はこのような難点を克服した鮮明な青色色調
を呈するクチナシ青色系色素組成物を提供できる製法を
提供すべく研究を行ってきた。

その結果、クチナシ抽出物はイリドイド配糖体のほかに
、例えばクロシンなどの黄色系色素を著量に含有１．て
おり、この黄色系色素は前述のような酵素処理、微生物
による培養処理、史には第１級アミノ基含有物質との反
応などの該イリドイド配糖体の青色系色素への変換処理
によっても、その変換作用を殆んど受けずに残留するた
めと考えられるが、該変換処理後のクチナシ青色系色素
含有材料は、青色系色素のほかに黄色系色素及び未変換
イリドリド配糖体（黄色系）を混有し、斯くて、その混
有比率によって差異はあるにせよ、緑色ハモ緑色がかっ
た煤んだ青色しか本質的に呈し得す、冴えた鮮明な青色
色調のクチナシ青色系色素組成物は提供できないことを
知った。

前記特公昭５２−１３９７１号には、培地中に生成蓄積
されたもとの色調と異る色調の色素組成物を採取して得
られた組成物の溶解性について、水に対する溶解性が非
常に良く水存在下においてはアセトン、アルコール等の
親水性有機溶媒に可溶であると記載され、その実施例６
について前述したとおり、８０％エタノール溶液による
緑色色素含有抽出液層を採取している。

本発明者等は、冴えた鮮明な青色色調のクチナシ青色系
色素組成物を容易に取得できる製法を開発すべく研究を
進めてきた。

その結果、クチナシ抽出物の酵素処理、微生物による培
養処理或は第１級アミノ基含有物質との反応などの該抽
出物中に含有されるイリドリド配糖体の青色系色素への
変換処理によって形成されるクチナシ青色系色素含有材
料に於て、該材料中に含有される青色系色素変換物と、
ｈ変換処理によって青色系色素に変更されなかったクロ
シンの如き黄色系色素及び未変換イリドリド配糖体との
間にはそれらの水混和性有機溶媒に対する溶解性に、こ
れらを分離可能な程度の可成り大きな差があることを発
見した。

更に研究を進めた結果、該クチナシ青色系色素は、水も
しくは水過剰の比較的水分割合の大きい水−水混和性有
機溶媒混合系には良く溶解するが、水分割合の小さい水
−水混和性有機溶媒混合系に対しては、該クチナシ青色
系色素の溶解性は顕著に低下し、一方黄色系色素はなお
該混合系に溶存すること、とくに、水分量が約６０重量
％以下、好ましくけ約５〜約６０重ｔ％の水−水混和性
有機溶媒系においては、該青色系色素の大部分は固形分
層（不溶物層）に移行し月一つ該黄色系色素の大部分は
液層に移行し、斯くて、固形分層を採取するととによっ
て、顕著に改善された冴えた鮮明な青色色調のクチナシ
青色系組成物を、極めて容易な手段で工業的に有利に取
得できることを発見した。

本発明者等の研究によれば、たとえば、後記実施例１に
おけるクチナシ青色系色素含有材料（粗製青色色素濃縮
液）について第１図に示すように、従来のクチナシ青色
系色素組成物は、約４４０ｎｍ付近に黄色系色素に由来
する吸光度ピーク及び約６００３ｒＩＬ付近に青色系色
素に由来する吸光度ピークを有し、この約４４０ｒＬｍ
付近における吸光度（Ｂ）と約６ｏｏＦＬｍ付近におけ
る吸光度（Ａ）との比率（Ａ）／（Ｂ）は１．６３と小
さく、得られた色素組成物は緑色ないし緑がかった煤ん
だ青色を呈するのに対して、後記実施例１において第２
図に示すように１上述の新しい知見に基づいた本発明方
法によって得られたクチナシ青色系色素組成物において
は、上記約４４０ルｍ付近の吸光度ピークが実質的に消
失し目、つ約６ｏｏｒｂｍ付近の吸光度ピークが増大し
て、比率（Ａ）／（Ｂ）は６．１０と約２倍に増加して
いて、冴えた鮮明な青色色調を有するクチナシ青色系色
素組成物が得られることがわかった。

従って、本発明の目的は顕著に改善された鮮明な青色色
調を有する安定なりチナシ青色系色素組成物の製法を提
供するにある。

本発明の上記目的及び更に多くの他の目的ならびに利点
け、以下の記載から一層明らかとなゐであろう。

本発明方法によれば、クチナシ抽出物の酵素処理物、ク
チナシ抽出物の微生物による培養処理物及びクチナシ抽
出物の第１級アミノ基含有物質の反応生成物よりなる群
から選らばれたそれ自体公知のクチナシ青色系色素含有
材料を、水混和性有機溶媒で処理する。

この際、本発明方法によれば、該水混和性有機溶媒処理
系の水分量が、該水混和性有機溶媒の含水率として表わ
して、すなわち、処理されるクチナシ青色系色素含有材
料が水分を含有する場合には、その水分量も含めた該水
混和性有機溶媒の含水率として、該水混和性有機溶媒の
含水率が約６０重量％以下、好ましくＶｔ約５〜約６０
重量％、一層好ましくけ約１０〜約３０重量％となる条
件で処理し、月、つ処理した系から固形分層を採取する
ことによって、クチナシ青色系色素含有材料中の黄色系
色素及び未変換イリドイド配糖体を主とする挟雑成分を
液層中に溶存させた状態で、主としてクチナシ青色系色
素からなる目的成分を固形分層に移行させて、所望の冴
えた鮮明な青色色調を有するクチナシ青色系色素成分を
分離採取することができる。

本発明で利用するクチナシ青色系色素含有材料及びその
製法は知られており、本発明において利用できる。例え
ば、クチナシ抽出物の酵素処理物であるクチナシ青色系
色素含有材料は、たとえば、特開昭５６−９２７９２号
、特公昭５４−１３４５１号などに記載されて公知であ
るように、あかね科りチナシ属に属する植物の果実もし
くは該果実の抽出物に、例えばβ−グルコシダーゼ、な
どの如き酵素を作用させることによって製造することが
できる。父、例えば、クチナシ抽出物の微生物による培
養処理物であるクチナシ青色系色素含有材料は、例えば
、前記特公昭５２−１３９＝１６− ７１号、特公昭５９−１６７５１号、特開昭５４−９６
５３２号、特開昭５４−１５２０２６号、特開昭５９−
２０３５７号などに記載されて公知であるように、該植
物の果実もしくは該果実抽出ゾープス属等に属する微生
物を接種培養することによって製造することができる。

更に、例えば、クチナシ抽出物の第１級アミノ基含有物
質との反応生成物であるクチナシ青色系色素含有材料は
、例えば、特開昭５２−５３９３２号、特公昭５４−１
３４５１号、などに記載されて公知であるように、クチ
ナシ抽出物に例えばゼラチン、カゼイン、アルブミン、
酵素蛋白などの如き蛋白質類；ペプトン、蛋白加水分解
物などの如きペグタイド類ニゲリシン、ロイシン、アラ
ニン、バリン蔦アスパラギン酸、グルタミン酸などの如
きアミノ酸類などの如き第１級アミノ基含有物質を作用
させる処理によって製造することができる。

これらの処理は併用することもでき、本発明において、
クチナシ抽出物の酵素処理物、クチナシ抽出物の微生物
による培養処理物及びクチナシ抽出物の第１級アミノ基
含有物質との反応生成物よりなる群からえらばれたクチ
ナシ青色系色素含有材料とけ、上記の如き処理物のほか
に併用処理物を包含する呼称である。

本発明方法においては、上述の如きそれ自体公知のクチ
ナシ青色系色素含有材料を、水混和性有機溶媒で処理し
、この際、前述のように、該水混和性有機溶媒処理系の
水分量が、使用する水混和性有機溶媒の含水率として表
わして、約６０重量％以下となる条件で処理する。処理
系の水分量が、使用する水混和性有機溶媒の含水率とし
て表わして約６０％以下を超えて多量すぎると、クチナ
シ青色系色素の処理系液層中への溶解性が急増して本発
明の目的が達成できなくなる。

利用する水混和性有機溶媒の例としては、たとえば、メ
タノール、エタノール、ｎ−プロピルアルコール、イソ
−プロピルアルコール、エチレンクリコール、プロピレ
ングリコールなどの如き１何本しくけ多価アルコール類
、アセトンの如きケトン類などを例示することができる
。これらは複数種併用することができる。これら水混和
性有機溶媒の中でもエタノール及びアセトンの利用がよ
り好ましい。

本発明方法の実施Ｋｌ際しては、クチナシ青色系色素含
有材料を上記例示の如き水混合性有機溶媒で処理する際
の該有機溶媒処理系の水分量が、該有機溶媒の含水率と
して表わして約６０重量％以下の条件を充足するかぎり
、該有機溶媒は含水有機溶媒の形でも実質的に水分を含
有しない有機溶媒の形でも利用することができる。上記
含水率条件を充足するかぎり、水混和性有機溶媒の使用
量は適宜に選択変更できるが、クチナシ青色系色素含有
材料１重量部に対して、例えば、約０．５〜約１０重量
部、好ましくけ約２〜約５重量部の使用量を例示するこ
とができる。

本発明方法の実施に際して、クチナシ青色系色素含有材
料を水混和性有機溶媒で処理する条件は、任意に選択す
ることができる。例えば、クチナシ青色系色素含有材料
に水混和性有機溶媒を前記含水率条件を充足するように
加え、例えば室温〜使用溶媒の沸点温度で、約１０分〜
約５時間攪拌後、たとえば静置して、二層に分離するの
を待って、デカンテーション等により溶媒層を除去し、
沈降した下層の固形分層を採取することにより実施でき
る。所望により、上記処理を繰り返し行っても良い。得
られた固形分層は黄色系色素を含有せず、高純度で鮮明
な青色を呈する。該固形分層は所望により水を加えて稀
釈し、更に濾過などを行っても良い。

従来公知方法によって得られたクチナシ青色系色素組成
物中には青色系色素のほかに、クロシンなどの黄色系色
素及び未変換のイリドリド配糖体などが混在しているが
、本発明方法によれば、青色変換物は水も１．＜は希ア
ルコール類には溶解するが、含水率約６０％以下の水混
和性有機溶媒に対しては極端に溶解度が低下して析出す
るという新しい知見を利用してクチナシ青色系色素含有
材料を該溶媒処理系の水分量が該溶媒の含水率として表
わして約６０重量％以下、好ましくけ約５〜約６０重量
多となる条件で水混和性有機溶媒で処理することにより
、該溶媒相に黄色系色素などの不純物を移行させて除去
し、不溶部を採取することにより、高純度で鮮明な色調
を示すクチナシ青色系色素組成物を得ることができる。

実施例 実施例　１ 乾燥クチナシ果実の粗粉砕物１　ｋｇに水８ｋｇを加え
、５０℃で８時間攪拌抽出した後、不溶物を炉別して抽
出液を得た。

次いでこの抽出液を減圧濃縮し、固形分７０チのクチナ
シ果実抽出濃縮物５００ノを得た。

この濃縮物５ＣＪ９，１．−グルタミン酸ナトリウム５
２及び水５００ｖを２１容フラスコに入れて溶解し、ｉ
　Ｎ　−Ｎａ　０１１水溶液を用イーｒ：　ｐＨ’　６
．５　Ｋ調整した。次いで酵素モルシン（盛進製薬製品
）５ｆを添加し、約４５℃にて２０時間攪拌して青色変
換反応を行った後９０℃にて１５分間加熱して酵素を失
活させ、粗製青色系色素溶液５１５２を得た。この色素
溶液の５９５ｎｍＫおける吸光度（Ａ＞は６８２、また
け４４０ｆＬｍにおける吸光度（Ｂ）け２３４であった
。

この色素溶液を減圧濃縮し、濃縮液１７０ｖを得た。次
いでこの濃縮液に９２重量％エタノール５００Ｆを加え
、（エタノール含水率として表わして処理系の水分子２
５重量％）、攪拌して均一に混合した後、２４時間靜静
上て上層のエタノール相をデカンテーションにより除去
し、得られた沈殿物に水５００ｖを加えて溶解し、目的
とする精製クチナシ青色系色素液５５０ｖを得た。

この精製色素液の５９５４ｍにおける吸光度（Ａ＞け４
６０また４４０ｔＬｍにおける吸光度（Ｂ）け１５６で
あった。これらの結果を第１表及び第１図、第２図に示
した。

第　　１　　表 第１表の結果からも明らかな如く、本発明方法によって
得られた青色系色素は顕著に明色化された鮮明なＷ色で
あった。

実施例　２ 実施例１で使用したクチナシ来実抽出濃縮物（固形分７
０係）１０２及び水５９０１を２１容フラスコに入れて
溶解し、Ｉ　Ｎ　−Ｎａ０ｆｌを用いてＰＩＩ５．０に
調整した。次いで酵素アシラーゼ（大野製薬製品）１２
を添加し攪拌溶解後、１５時間靜静上た。その後攪拌を
再開し、５００ｒｐｍＶＣで４０時間攪拌を継続した。

得られた青色系色素変換物溶液を９０℃１５分間加熱処
理して酵素を失活させ、次いで減圧濃縮を行って、濃縮
液３６ｆを得た。この濃縮液の５９５ｒＬｒｎＶｃおけ
る吸光度（Ａ）け６００及び４４０ルｍＫおける吸光度
＜ＩＩ）は４７６であった。

得られた濃縮液に９２重量饅のエタノール１３０ｖを加
え（エタノールの含水率として表わして、処理系の水分
量約２５重ｔ％）１層分間攪拌後、室温にて１時間静置
した。２層に分離した上層の含水エタノール層は黄緑色
に着色した。このエタノール層をデカンテーションより
除き、飴状の沈殿物として得られた下層の固形分層に水
を加えて溶解し、精製クチナシ青色系色素液１８ｔを得
た。この精製クチナシ青色系色素液の５９５ｒＬ７７１
における吸光度（Ａ）は１１００、及び４４０ｒＬｍに
おける吸光度（ｌけ３８０従ってその比（４／（的は２
．８９であり、冴えた鮮明な青色を呈した。結果を第２
表に示した。

第２表 実施例　３ コーンスターチ２０？、硝酸アンモ＝ウム１．５ｖ１　
コーンステイープリカー１．Ｏｆ、　　リン酸−カリウ
ム０．６ｆ、　　リン酸二ナトリウム４．Ｏｆ、硫酸−
２１＝ マグネシウム０，５ｖを純水１１に溶解し、これに４４
０ｆＬｍにおける１　ｍｌあたりの吸光度が１，４００
であるクチナシ抽出液を１００耐添加する。

この培地のｐＨを６．０とし５００　ｒａｔ肩付き振盪
フラスコに５０ｔｎｌづつ入れ、１２０°１ｃ１５分間
殺菌を行なった。

麹スラントで８日間培養したハンゼヌラアノマーラ（Ｈ
ａｎｚａｎＬａ　ａｎｏｍａＬａ　）　ＯＩＩ　Ｔ　６
３１６をフラスコ１本あたり２白金耳接種し、３０℃８
日間振盪培養を行った。

得られた緑色の培養液１１を採り、８５℃で３０分間殺
菌した後、珪藻土を助剤として濾過し、ν液９００−を
得た。この色素液の１ｔｎｔあたりの吸光度は４４Ｇｒ
Ｌｍ（Ｂ）で１０６．５９５ｎｍ（Ａ）において７５で
あった。

この色素液９００　ｍｌをロータリーエバポレーターを
用いて減圧濃縮し、濃縮液３００−を得、次いでこの濃
縮液を攪拌しながら、９０重量％エタノール１．０００
−を添加しくエタノール含水率として表わして処理系の
約２７％）−夜放置後、エタノール層をデカンテーショ
ンにより除き、沈殿部に水１００ｆを加えて均一に溶解
して、精製青色系色素液１５５ｖを得た。この色素液の
５９５ｒＬｍにおける吸光度（Ａ）け４２８及び４４０
ル専における吸光度（Ｂ）は１８５であり、（Ａ）／（
Ｂ）は２．５で冴えた鮮やかな青色を呈していた。

その結果を第６表に示した。

第　　６　表 本発明によって得られる精製クチナシ青色系色素組成物
は黄色系色素の含有量が顕著に削減されており従来のク
チナシ青色系色素組成物に比較し、鮮明か青色を示し、
捷た未変換の不安定なイリドイド配糖体も含有しないの
で変色などのトラブルを回避でき、各種飲食品、保健医
薬品などに好適に利用することができる。

【図面の簡単な説明】

一第１図に実施例１において用いたクチナシ抽出物を酵
素処理によって青色に変換させて得られた粗製青色系色
素濃縮液及び第２図に本発明方法実施例１によって得ら
れた精製クチナシ青色系色素の可視部吸収曲線を示した
（１−→ｓ　ｏ　ｏｉ）。 杯を質 ゴ製郵

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、クチナシ抽出物の酵素処理物、クチナシ抽出物の微
   生物による培養処理物及びクチナシ抽出物の第１級アミ
   ノ基含有物質との反応生成物よりなる群からえらばれた
   クチナシ青色系色素含有材料を、水混和性有機溶媒で処
   理し、この際、該溶媒処理系の水分量が、該水混和性有
   機溶媒の含水率として表わして、約６０重量％以下とな
   る条件で処理し且つ処理した系から固形分層を採取する
   ことを特徴とするクチナシ青色系色素組成物の製法。 ２、該水分量が、該水混和性有機溶媒の含水率として表
   わして、約５〜約６０重量％である特許請求の範囲第１
   項記載の製法。