JPS61293394A - Ｌ−α−アミノ酸の製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明はＬ−α−アミノ酸の製造方法にか＼わる。さら
に詳しくは合成されたＤ，Ｌ−α−アミノ酸アミドから
Ｌ−α−アミノ酸を製造する方法に関する。

Ｌ−α−アミノ酸は各種工業薬品の中間体ならびに医薬
品および食品添加物などとして重要なものである。

〔従来の技術、発明が解決しようとする問題点〕従来、
α−アミノ酸を有機合成的方法により製造する場合に得
られるα−アミノ酸がＤ，Ｌ一体であることから、いか
にしてこのＤ，Ｌ一体を工業的に有利に光学分割を行な
うかが大きな課題であった。

Ｄ、Ｌ−α−アミノ酸の光学分割を行なう方法としては
、物理化学的方法および生化学的方法とがあり、これら
の中で後者は選択性が高いという利点かあシ、後者に関
しては例えば次の方法が実用化されている。すなわち １）Ｄ、Ｌ−α−アミノ酸を原料とし、このり。

Ｌ−α−アミノ酸をアシル化して得られたり。

Ｌ−α−アミノ酸のＮ−アシル体に微生物の有する酵素
アシラーゼを作用させる方法２）Ｄ、Ｌ−α−アミノ酸
のヒダントイン誘導体を原料とし、これに微生物の有す
る酵素ヒダントイナーゼおよびヒドロラーゼを逐次作用
させる方法 しかしながら、前記１）の方法は高価な副原料を必要と
し、かつＬ−α−アミノ酸を分離後のＤ−Ｎ−アシル−
α−アミノ酸のラセミ化工程が複雑であり、また前記２
）の方法は原料のヒダントイン環が比較的安定であるこ
とから加水分解酵素によって分解されにく＼、この方法
による脂肪族Ｌ−α−アミノ酸の工業的な製造は特に難
しいという欠点を有している。

一方、Ｄ、Ｌ−α−アミノ酸アミドは合成によシ工業的
に比較的有利に製造されるが、本発明者らはこのＤ，Ｌ
−α−アミノ酸アミドを生化学的に加水分解してＬ−α
−アミノ酸を製造する方法（ＩＲ開昭５９−１５９７８
９号および特開昭６０−３６４４６号）を開発したが、
この方法を工業化するためにはこの方法を組込んだＤ，
Ｌ−α−アミノ酸アミドからＬ−α−アミノ酸を製造す
る一貫プロセスが確立されなければならない。

〔問題点を解決するための手段、作用〕本発明者らは、
従来の方法における問題点を克服し、工業的に有利にＬ
−α−アミノ酸を製造すべく鋭意研究を行なった結果、
工業的に有利に得られるＤ，Ｌ−α−アミノ酸アミドを
生化学的に加水分解する前記の方法を組込んだＬ−α−
アミノ酸の一貫プロセスである本発明を完成するに至っ
た。

すなわち、本発明はＤ，Ｌ−α−アミノ酸アミドにＬ−
α−アミノ酸アミド加水分解活性を有する微生物の培養
液、生菌体、乾燥菌体もしくは菌体処理物を作用させて
、少くともＬ−α−アミノ酸およびＤ−α−アミノ酸ア
ミドを含有する加水分解反応生成液を得、該加水分解反
て得られたＤ，Ｌ−α−アミノ酸アミドを、前記のＤ，
Ｌ−α−アミノ酸の生化学的加水分解反応における原料
として循環使用することを特徴とするＬ−α−アミノ酸
の製造法である。

本発明のＤ，Ｌ−α−アミノ酸アミドは一般式　　　Ｎ
Ｈ２ ＲＣＨＣＯＮＨ２ （ただし、式中Ｒは水素原子、低級フルキル基、置換低
級フルキル基、フェニル基、置換フェニル基、フリル基
、ピリジル基、チアゾリル基、イミダゾリル基およびイ
ンドリル基を示す）で示される。前記の一般式における
Ｄ，Ｌ−α−アミノ酸アミドのＲの低級フルキル基には
特に制限はないが、たとえばメチル、エチル、プルピル
、イソプロピル、ブチル、イソブチル、および５ｅｃ−
ブチルなどの０１〜Ｃ４の直鎖ならびに分枝した低級フ
ルキル基が好適であり、また置換低級アルキル基、置換
フェニル基のそれぞれに含まれる置換基は、たとえば、
ヒドロキシ、メトキシ、メルカプト、メチルメルカプト
、アミノ、グアニアし、カルポクサミド、ハロゲン、フ
ェニル、ヒドロキシフェニル、イミダゾリル、およびイ
ンドリルなどである。

本発明の一般式で示されるＤ，Ｌ−α−アミノ酸アミド
の代表例として、アラニンアミド（“Ｄ、Ｌ−“を省略
。以下同様）、バリンアミド、ロイシンアミド、インロ
イシンアミド、セリン７ミド、スレオニンアミド、シス
ティンアミド、シスチンアミド、メチオニンアミド、リ
ジン７ミド、フルギニンアミド、アスパラギンアミド、
グルタミン７ミド、フェニルグリシンアミド、フェニル
アラニンアミド、チロシン７ミド、トリプトファンアミ
ドおよび４スチジン７ミドなどがある。

本発明の原料であるＤ，Ｌ−α−アミノ酸アミドはその
製法および品質などには特に制限はない。Ｄ、Ｌ−α−
アミノ酸アミドの製法としては、たとえば合成されたＤ
，Ｌ−α−アミノ酸をエステル化して得られたＤ，Ｌ−
α−アミノ酸エステルを液安を使用してアミド化する方
法およびＤ，Ｌ−α−７ミノニトリルを加水分解する方
法がある。前者は本発明の目的物質であるＬ−α−アミ
ノ酸の類縁化合物であるり。

Ｌ−α−アミノ酸を原料とすることに欠点がある。その
反面、後者は工業原料として広く使用されているアルデ
ヒド類、胃酸およびアンモニアから容易に製造されるＤ
，Ｌ−α−アミノニトリルを使用することに利点がある
ので、後者が好ましい。後者において、塩基性物質およ
びケトン類の存在下で水性媒体中でＤ，Ｌ−α−７ミノ
二トリルを加水分解する方法、たとえば、特公昭５８−
１７７４ｆ号公報記載の方法が好ましい。この方法は、
たとえば、水酸化ナトリウムおよび水酸化カリウムなど
の無機塩基ならびにたとえば水酸化テトラメチルアンモ
ニウムのような有機第４級アンモニウム化合物などの有
機塩基のような塩基性物質の使用量をり、　Ｌ−α−７
ミノニトリル１モルに対シて０．０１モル以下の割合と
し、反応液のｐＨが１４を越えるようにこの反応系に７
七トン、メチルエチルケトン、ジエチルケトンおよびメ
チルイソプルピルケトンならびにシクロヘキサノンなど
のケトン類を添加し、かつ、反応温度を４０℃以下に保
ち、該反応液のｐＨな１４を越えたｐＨに維持しながら
加水分解反応を行なうことを特徴とする方法である。

この反応液のｐＨの測定法には特に制限はないが、通常
ガラス電極を使用したｐＨメーターを使用して行なわれ
る。この反応液の「１４を越えるＪ　ｐＨは、反応液を
反応液中の水／ケトンと同一組成比の水とケトンとの混
合液で稀釈してｐＨメーターでｐＨの測定を行ない、こ
の測定値に１０ｇ１０　”稀釈率“を加えることによっ
てｐＨ値を間接的に求めることができる。たとえば、１
０倍および１００倍のそれぞれに稀釈したときには、ｐ
Ｈメーターから直読した測定値に１および２をそれぞれ
加えればよい。

このＤ，Ｌ−α−７ミノ二トリル加水分解反応生成液を
濃縮してアセトンを除去して得られた粗Ｄ，Ｌ−α−ア
ミノ酸アミド含有液をそのまま、または必要に応じて蒸
留もしくは再結晶等の手段によって精製を行ったのち原
料のり。

Ｌ−α−アミノ酸アミドとして使用することができる。

Ｄ、Ｌ−α−アミノ酸７ミドの生化学的加水分解に使用
される微生物は、下記の属に属するものである。なお以
下に各属の代表例を挙げたが、本発明の微生物はこれら
の代表例に限定されるものではない。

（１）　　シゾサツカロミセス属 シゾサツカ四ミセス・ジャボニカス（Ｓｃｈｉｚｏ−ｓ
ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ）ＡＴ
ＣＣ１０６６０シゾサツカロミセス・ポンベ（Ｓｃｈｆ
ｚｏｓａｃｃｈａ−ｒｏｍｙｃｅｓ　ｐｏｍｂｅ　）　
　　　　　ＡＴＣＣ１６９７９ｐｏｒｉｄｉｕｍ　ｔｏ
ｒｕｌｏｉｄｅｓ　）　　　ＩＦｏ　０８７１０ドスボ
リジウム・ジオボパタム（Ｒｈｏｄｏｓ−ｐｏｒｉｄｉ
ｕｍ　ｄｉｏｂｏｖａｔｕｍ　）　　　ＩＦＯ１８２８
（３）キャンデイダ属 キャンデイダ・フミコラ（Ｃａｎｄｉｄａ　ｈｕｍｉｃ
ｏ−１ａ　）　　　　　　　　　　’　　ＡＴＣＣ１４
４３Ｂキヤンデイダ・アルビカンス（Ｃａｎｄ　１ｄａ
ａｌｂｉｃａｎｓ　）　　　　　　　　ＡＴＣＣ１０２
５９（４）　　クリプトコツカス属 クリプトコツカス・ラウレンテイ（Ｃｒｙｐｔｏ’−ｃ
ｏｃｃｕｓ　Ｉａｕｒｅｎｔｉｆ　）　　　　ＡＴＣＣ
１８８０５クリプトフツカス・ネオホルマンス（Ｃｒｙ
ｐｔｏ−ｃｏｃｃｕｓ　ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ　）　　
　ＡＴＣＣ３２０４５（５）　　ピチロスポラム属 ピチロスポラム・バチデルマチス（Ｐｉｔｙｒｏ−ｓｐ
ｏｒｕｍ　ｐａｃｈｙｄｅｒｍａｔｉｓ　）　　ＩＦＯ
０９９５ピチースポラム・オバル（Ｐｉｔｙｒｏｓｐｏ
ｒｕｍｏｖａｌｅ　）　　　　　　　　　　　ＩＦＯ０
６５６（６）　　ロドトルラ属 ロドト／ｌ／ラーグルチニス（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ
ｇｌｕｔｉｎｉｓ　）　　　　　　　　　　　ＩＦＯ０
３８９０ドトルラ・ルブラ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ　
ｒｕｂｌａ　）ＩＦＯ０９１４ （７）トルロプシス属 トルロプシスーキャンデイダ（Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓｃ
ａｎｄｉｄａ　）　　　　　　　　　　ＩＦＯ０３８０
トルロプシス・マグノリ７　（Ｔｏｒｕｌｏｐｕｓｉｓ
ｍａｇｎｏｌｉａｅ　）　　　　　　　　　ＩＦＯ０７
０５（８）トリコスポロン属 トリコスポロン・クタネウム（Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｏ
ｎｃｕｔａｎｅｕｍ　）　　　　　　　　　ＡＴＣＣ２
８５９２トリコスポロン・フェルメンタンス（Ｔｒｉｃ
ｈｏｓ−ｐｏｒｏｎ　ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ　）　　　
　ＡＴＣＣ１０＋５７５（９）トレメラ属 トレメラ・フシホルミス（Ｔｒｅｍｅｌｌａ　ｆｕｃｉ
　−ｆｏｒｍｉｓ　）　　　　　　　　　　ＩＦＯ９５
１６トレメラ・オーランティア（Ｔｒｅｍｅｌｌａａｕ
ｒａｎｔｉａ　）　　　　　　　　　ＩＦｏ　９２８Ｂ
員　ロドスピリラム属 ロドスピリラム・ルブラム（Ｒｈｏｄｏｓｐｉｒｉ　−
１１ｕｍ　ｒｕｂｒｕｍ　）　　　　　　ＡＴＣＣ１７
０３１αＤ　ロドシュードモナス属 ロドシュードモナス・パルストリス（Ｒｈｏｄｏ−ｐｓ
ｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｐａｌｕｓｔｒｉｓ　）ＡＴＣＣ
１７００１ａ３　　スビリラム属 アクアスピリラム・アクアチカム（Ａｑｕａ−ｓｐｉｒ
ｉｌｌｕｍ　ａｑｕａｔｉｃｕｍ　）　ＡＴＣＣ１１３
５００ミクロシフラス属 ミクロシフラス・エプルネウス（Ｍｙｃｒｏ−ｃｙｃｌ
ｕｓ　ｅｂｕｒｎｅｕｓ　）　　　　ＡＴＣＣ２１３７
５Ｉ　シュードモナス属 シュードモナス・ロゼ７　（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｒ
ｏｓｅａ　）　　　　　　　　　　ＮＣＩＢ　１０６０
５αＳ　グルフッバクター属 グルフッバクター・セリナス（Ｇｌｕｃｏｎｏ−ｂａｃ
ｔｅｒ　ｃｅｒｉｎｕｓ　）　　　　　ＩＦＯ３２６２
（Ｉｌｌ　　アグロバクテリウム属 ７グロバクテリウム・ラジオバクター（Ａｇｒｏ−ｂａ
ｃｔｅｒｉｕｍ　ｒａｄｉｏｂａｃｔｅｒ　）　　ＩＦ
Ｏ１２６６４αＤ　アルカリ土類金属 アルカリゲネス・オドランス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ
ｏｄｏｒａｎｓ　）　　　　　　　　　　ＡＴＣＣ１５
５５４（湧　アクロモバクタ−属 アクロモバクタ−・メタノロフイラ（Ａｃｈｒｏ＝ｍｏ
ｂａｃｔｅｒ　ｍｅｔｈａｎｏｌｏｐｈｉｌａ　）ＡＴ
ＣＣ２１４５２（１ｇ４　　アセトバクター属 アセトバクター・ランセンス（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ
ｒａｎｃｅｎｓ　）　　　　　　　　　　ＩＦＯ３１９
１（勾　エシェリヒア属 エシェリヒア・コリー（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏ
ｌｉ　）ＩＦＯ３５４３ （２１）エンテロバクタ−属 エンチルバクター・クロアツセー（Ｅｎｔｅｒｏ−ｂａ
ｃｔｅｒ　ｃｌｏａｃａｅ　）　　　　　　ＩＡＭ　１
２３４９（勾　セラチア属 セラチアｏｆｆルセツセ７ス（Ｓｅｒｒａｔｉａｍａｒ
ｃｅｓｃｅｎｓ　　）　　　　　　　　　　　　　ＩＡ
Ｍ　　１１０＋５（２１アニルモナス属 アエロモナス・ヒドロフイラ（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙ
ｄｒｏｐｈｉｌａ　）　　　　　　　　ＩＡＭ　１２３
３５（２４）　　フラボバクテリウム属 フラボバクテリウム・デポランス（Ｆｌａｖｏ−ｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ　ｄｅｖｏｒａｎｓ　）　　　ＡＴＣＣ１
０８２９（２５）バラフッカス属 パラコツカス−デニトリフィカンス（Ｐａｒａ−ｃｏｃ
ｃｕｓ　ｄｅｎｉｔｒｉｆｉｃａｎｓ　）　　ＩＦＯ１
２４４２に）チオバチルス属 チオバチルス・Ｓ　Ｐ、　　（Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕ
ｓ　ｓｐ、）ＡＴＣＣ２５３６４ （２７）　　ストレプトコツカス属 ストレプトコッカス・フエーカリス（Ｓｔｒｅ−ｐｔｏ
ｃｏｃｃｕｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ　）　　　　ＩＡＭ　
ｌＮ９（（へ）　コリネバクテリウム属 コリネバクテリウム−７アスシ７ンス（Ｃｏｒｙｎｅ−
ｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｆａｓｃｉａｎｓ　）　　　　Ｉ
ＦＯ１２０７７に））フルスロバクター属 フルスロバクター・バラマイカム（Ａｒｔｈｒｏ−ｂａ
ｃｔｅｒ　ｐａｒｒａｔｉｃｕｍ　）　　　ＮＲＲＬ　
Ｂ−５４５３（均　　ミクロバクテリウム属 ミクｐバクテリウム・フラバム（Ｍｉｃｒｏｂａｃｔｅ
−ｒｉｕｍ　ｆｌａｖｕｍ　）　　　　　　　ＮＣＩＢ
　１００７１（３１）　　ノカルジア属 ノカルジア・シュードスポランギフエラ（Ｎｏｃａｒ−
ｄｉａ　ｐｓｅｕｄｏｓｐｏｒａｎｇｉｆｅｒａ　）　
　ＩＡＭ　０５０１（財）ムフール属 ムコール拳ジャバニカス（Ｍｕｃｏｒ　ｊａｖａｎｉｃ
ｕｓ）ＩＦＯ４５６９ （３４リゾプス属 リゾプス・オリゼー（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ　ｏｒｙｚａｅ
　）ＩＦＯ４７０６ （３４）アスペルギラス属 ７スペルギラス・オリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉ　Ｉ　Ｉｕ
ｓｏｒｙｚａｅ　）　　　　　　　　　　　ＩＦＯ４０
７５（３５）ペニシリウム属 ペニシリウＡ−ビナセウＡ　（Ｐｅｎ１ｃｉｌ　ｌｉｕ
ｍ、＆ ｖｘｎ−ｅ−ｃｅｕｍ　）　　　　　　　　　　ＩＦＯ
５７９４（増　フザリウム属 フザリウム拳ソラニ−（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　５ｏｌａｎ
ｉ　）ＩＦＯ５２５２ （ロ）ナドソニ７属 ナドソニ７・フルペスセンス（Ｎａｄｓｏｎｉａｆｕｌ
ｖｅｓｃｅｎｓ　）　　　　　　　　ＩＦＯ０６６６（
３１ハンセニ７スボラ属 ハンセニ７スボラ・パルトビエンシス（Ｈａｎ−ｓｅｎ
ｉａｓｐｏｒａ　ｖａｌｂｙｅｎｓｉｓ　）　　ＩＦＯ
０６８５■　ウイツケルハミア属 ウイツケルハミ７・フルオレスセンス（Ｗｉ−ｃｋｅｒ
ｈａｍｉａ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ　）　　ＩＦＯＮ
１６（ロ）サッカーマイセス属 サツカロマイセス・ジアスタチカス（Ｓａｃｃｈａ−ｒ
ｏｍｙｃｅｓ　ｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓ　）　　　ＩＦ
Ｏ１０４（Ｓ（４］）　　−ツデロマイセス属 ｐツデロマイセス・エロギスボラス（Ｌｏｄｄｅ−ｒｏ
ｍｙｃｅｓ　ｅｌｏｇｉｓｐｏｒｕｓ　）　　　ＩＦＯ
１６７６（ロ）　ピチ７属 ピチア・ファリノーザ（Ｐｉｃｈｉａ　ｆａｒｉｎｏｓ
ａ）ＩＦＯ０５７４ （＋３）へンセヌラ属 ハンセヌラーポリモｋ　７７　（Ｈａｎｓｅｎｕｌ　ａ
　　　　　ｔｐｏｌｙｍｏｒｐｈａ　）　　　　　　　
　ＩＦＯ０７９９（４４バチソレン属 バチンレン・タンノフイラス（Ｐａｃｈｙｓｏｌｅｎ　
　　　（ｔａｎｎｏｐｈｉｌｕｓ　）　　　　　　　Ｉ
ＦＯ１００７（４５）　　シテロマイセス属 シテロマイセス・マトリテンシス（Ｃｉｔｅｒｏ−１ｍ
ｙｃｅｓ　ｍａｔｒｉｔｅｎｓｉｓ　）　　　ＩＦＯ０
６５１θゆ　デバリオマイセス属 テハリオマイセス・クロエツジエリ（Ｄｅｂａ−＋ｒｙ
ｏｍｙｃｅｓ　ｋｌｏｅｃｈｅｒｉ　）　　　ＩＦＯ０
０３＋５Ｈデツケラ属 デツケラ・インターメディア（Ｄｅｋｋｅｒａｉｎｔｅ
ｒｍｅｄｉａ）ＩＦＯ１５９１１（４０サツカロマイコ
ブシス属 サツカロマイコブシス・リポリチカ（Ｓａｃｃｈａ−ｒ
ｏｍｙｃｏｐｓｉｓ　１ｙｐｏｌｙｔｉｃａ　）　ＩＦ
Ｏ１５４９＋（９）リボマイセス属 リボマイセス◆スターキー（Ｌｉｐｏｍｙｃｅｓｓｔａ
ｒｋｅｙｉ　）　　　　　　　　　ＩＦＯ１２８９５０
ロイコスボリジウム属 ロイフスポリジウム・フリギダム（Ｌｅｕｃｏ−ｓｐｏ
ｒｉｄｉｕｍ　ｆｒｉｇｉｄｕｍ　）　　　ＩＦＯ１８
５１Ｓ１）　　スポロポロマイセス属 スポロボロマイセス・ロゼウス（Ｓｐｏｒｏ−ｂｏｌｏ
ｍｙｃｅｓ　ｒｏｓｅｕｓ　）　　　　ＩＦＯ１０５７
５カ　スボリジオポラス属 呻オオスボリジウム属 オオスボリジウム・マルガリチフエラム（Ｏｏｓｐｏｒ
ｉｄｉｕｍ　ｍａｒｇａｒｉｔｉｆｅｒｕｍ　）ＩＦＯ
１２０８ ｓ４　　ステリグマドマイセス属 スポロボロマイセス・インデカス（Ｓｔｅｒｉ−ｇｍａ
ｔｏｍｙｃｅｓ　１ｎｄｉｃｕｓ　）　　　ＩＦｏ　１
８４４呻　トリゴノプシス属 トリゴノプシス・パリアビリス（Ｔｒｉｇｏｎｏ−ｐｓ
ｉｓ　ｖａｌｉａｂｉｌｉｓ　）　　　　　　　ＩＦＯ
０７５５前記の代表例として挙げられた微生物はいずれ
も公知のものであり、財団法人発酵研究所（ＩＦＯ）、
東京大学応用微生物研究所ＣＩＡＭ）、Ａｍｅｒｉｃａ
ｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ
　（ＡＴＣＣ）（米国）　、Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏ１
１ｅｃｔｉｏｎ　ｏｆＩｎｄｕｓｔｒｉａｌ　Ｂａｃｔ
ｅｒｉａ　　（ＮＣＩＢ　）　（英国）、Ｎｏｒｔｈｅ
ｒｎ　Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　ａ
ｎｄ　Ｄｅｖｅ　−１ｏｐｍｅｎｔ　Ｄｉｖｉｓｉｏｎ
　（ＮＲＲＬ）　（米国）等の保存機関を通じて容易に
入手することができる。

前記の微生物のうち、シュードモナス属、クリプトコツ
カス属、ロツデロマイセス属、ロドスポリジウム属およ
びパチソレン属のそれぞれの属に属する微生物が好まし
い。

これらの微生物の培養は、使用微生物が通常資化し得る
炭素源、窒素源、各微生物に必須の無機塩、栄養等を含
有させた培地を用いて行なわれるが、高い酵素活性を得
るために培地へ予めＤ，Ｌ−α−アミノ酸アミドを添加
することも効果的である。この際に添加されるＤ，Ｌ−
α−アミノ酸７ミドは、目的とするＬ−α−アミ／　酸
１ｔｃ対応するＤ，Ｌ−α−アミノ酸７ミドを用いるこ
とが好ましい。

培養時のｐＨは４〜１０の範囲であシ、温度は２０〜５
０℃である。培養は１日〜１週間好気的に行なわれる。

このようにして培養した微生物は、培養液、分離菌体、
乾燥菌体、菌体破砕物さらには精製した酵素などの菌体
処理物として反応に使用される。勿論、常法に従って菌
体または酵素を固定化して使用することもできる。

Ｄ、Ｌ−α−アミノ酸アミドの生化学的加水分解反応の
条件は、Ｄ、Ｌ−α−アミノ酸アミドの反応液中の濃度
１〜４０　ｗｔ９６、Ｄ、　　Ｌ−Ｃｌ−アミノ酸アミ
ドに対する微生物の使用量は特に制限はないが、通常は
乾燥菌体基準で重量比ｏ、ｏｏｓ〜１０、反応温度２０
〜７０℃およびｐＨ５〜１３の範囲である。

Ｄ、Ｌ−α−アミノ酸７ミドの生化学的加水分解反応で
生成したＬ−α−アミノ酸は、反応生成液からたとえば
遠心分離あるいは濾過膜などの通常の固液分離手段によ
シ微生物菌体を除いたのち、イオン交換電気透析にょシ
分離後、晶出あるいは減圧濃縮後エタノールを加えてＬ
−α−アミノ酸を析出させ、析出したＬ−α−アミノ酸
を炉取し、またはＤ−α−アミノ酸アミドを溶媒抽出後
の残液から晶出などの方法により容易に分離することが
できる。

また、Ｄ−α−アミノ酸アミドは、前記のり。

Ｌ−α−アミノ酸７ミドの生化学的加水分解反応生成液
からＬ−’α−アミノ酸を分離した後の液の濃縮、ある
いは菌体分離後の前記の加水分解反応生成液からの溶媒
抽出などの方法により容易に回収される。

Ｄ−α−アミノ酸７ミドのラセミ化で使用されるＤ−α
−アミノ酸７ミドは、前記のり、　Ｌ−α−アミノ酸７
ミドの生化学的加水分解反応生成液から回収されたＤ−
α−アミノ酸アミドをそのまま、または必要に応じて蒸
留あるいは再結晶等の操作によって精製を行ったのち用
いることかできる。

Ｄ−α−アミノ酸７ミドのラセミ化で使用される強塩基
性物質とは、有機または無機の強塩基性物質であればよ
く、代表例として水酸化テトラメチルアンモニウム、水
酸化テトラエチルアンモニウムおよび水酸化テトラ−ｎ
−プロピル７ンそニウムなどの有機第四級アンモニウム
化合物ならびに水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水
酸化リチウム、水酸化セシウム、水酸化ルビジウム、ナ
トリウムメチラート、ナトリウムエチラート、ナトリウ
ム７ミド、ナトリウムハイドライド、ナトリウムシフナ
イドおよびカリウムシアナイドなどのアルカリ金属化合
物、および水酸化バリウムなどのアルカリ土類金属化合
物があげられる。

なお、反応液内において上記の強塩基性物質に変化しう
る物質、たとえばリチウム、ナトリウムおよびカリウム
などのアルカリ金ａ単体、ならびにバリウムなどのアル
カリ土類金属単体をそれぞれ添加することも可能である
。

これら強塩基性物質の使用量はＤ−α−アミノ酸７ミド
１モルに対して０．００１〜０．５モルの割合であり、
好適には０．０１〜０．１モルの割合である。

Ｄ−α−アミノ酸アミドのラセミ化は溶媒を使用しない
で行なうこともできるが、溶媒を使用した場合には反応
温度を低くすることができ、そのため副生成物が生成さ
れる危険性を防止しうるのでよし好適である。この際に
使用される溶媒としてはＤ−α−アミノ酸アミドおよび
強塩基性物質のそれぞれに対して不活性であればよく、
たとえば、ガソリン、灯油、ヘキサン、ヘプタン、シク
ロヘキサン、ベンゼン、トルエン、キシレン、メシチレ
ンおよびシメン等の炭化水素類、ｎ−ブタノール、ｉ−
ブタノール、ｎ−７ミルアルコールおよびｉ−７ミルア
ルコール等のアルコール類ならびにインブチロニトリル
などがある。

溶媒の使用量には特に制限はないが、実用上、Ｄ−α−
アミノ酸７ミドの重量に対して１００倍より多くする必
要はなく、１〜２０倍程度が好ましい。

ラセミ化反応液中の水分は少いほど好ましいが、１重量
％程度以下ならば殆んど支障はなく、０．１重量％以下
であれば実質的に支障はない。

ラセミ化反応の温度は２０〜２００℃、好適には５０〜
１５０℃である。ラセミ化反応は、通常、常圧下で行な
われるが、減圧下または加圧下で行なうことを妨げない
。

反応時間は、Ｄ−α−アミノ酸アミドの種類、強塩基性
物質の種類および量、溶媒の種類および量ならびに反応
温度などによって異り、−概に特定しえないが、通常は
１分〜３時間程度とされる。

ラセミ化反応終了後の反応生成液中に存在するＤ，Ｌ−
α−アミノ酸アミドは、たとえば、析出させ、析出させ
たＤ，Ｌ−α−アミノ酸アミドの結晶をヂ取および遠心
分離などの通常の固液分離操作により分離、回収したの
ちり、　Ｌ−α−アミノ酸７ミドの生化学的加水分解反
応へ循環される。

なお、このようにして得られたＤ，Ｌ−α−アミノ酸７
ミドには微量の強塩基性物質および溶媒などの不純物が
混入することもあるが、そのｔままたは、これらの不純
物を除去したのちＤ，Ｌ−α−アミノ酸アミドの生化学
的加水分解反応での原料として使用することができる。

〔実施例〕

以下の実施例により本発明をさらに具体的に説明するが
、本発明はこれのみに限定されるも　（のではない。

実施例　１ 囚　攪拌機および温度計を付した５１三ツロフラスコに
、１−イソプロピルアミノアセトニトリル　９Ｂ１．５
９、水　９０１９１アセトン５８１ｇおよび２ｏｗｔ９
６　Ｗ性ソーダ水溶液２０１！を加え、２０℃で８時間
攪拌した。反応液のｐＨは、反応開始時には１５．３で
あったが徐々に低下し、反応終了時には１４．４であっ
た。

反応終了後、反応生成液から減圧蒸留により７セトンを
除去し、１ｓ１２．５ｇのＤ，Ｌ−バリンアミド含有水
溶液を得た。このＤ，Ｌ−バリンアミド含有水溶液中の
Ｄ，Ｌ−バリンアミド含量を液体クロマトグラフィーで
分析したと、ころ６ｊ８ｗｔ％　であり、仕込１−イン
プロピル７ミノアセトニトリル バリン７ミド収率は９９．５モル％であった。

Ｂ）イ　グルツース　１．０ｗｔ％、ペプトン　１．０
ｗｔ％および酵母エキス　１，０ｗｔ９６を含有する種
培地を調製し、この種培地１００−三角フラスコに入れ
、滅菌後、種菌としてシュードモナス・ロゼ７　（ＮＣ
ＩＢ　　１０６０５）を接種し、３０℃で４８時間振と
り培養を行ない種培養液を得た。

この種培養液を次の組成の本培地２１に移植し、３０℃
で４８時間通気攪拌培養を行なつた。

グルツース　　　　　　　　１，０ｗｔ％ペプトン　　
　　　　　　０．５　〃 酵母エキス　　　　　　　０．５　〃 ＫＨ２ＰＯ４０，１５ Ｍｇ５Ｏ＜・７Ｈ２００，０４〃 ＦｅＳＯ４−７Ｈ２００、００１ｄ ＭｎＣＡ！ｚ−４Ｈ２００，００１〃 Ｄ、　　Ｌ−バリンアミド　　　　　　　０．５　　〃
ｐ）（７ 次いで培養液から遠心分離によし生菌体９０．９を得た
。この生菌の水分含量は８２　ｗｔ％であった。

口　前記囚で得られたＤ，Ｌ−バリン７ミド含有水溶液
　１８１．５ｇおよび水　３９０ｇを１１！三角７ラス
フに秤取し、さらに前記イで得られた生菌体　６．４ｇ
を加え、４０℃で２２時間攪拌し反応を行なった。

反応終了後、この反応生成液から遠心分離によって除菌
し、減圧にて水を除去したのち、トルエン　２００ｄを
加えＤ−バリンアミドを加熱溶解し、不溶物を戸数し、
この不溶物を少量の熱トルエンにて洗浄してＬ−バリン
の白色結晶を得た。得られた結晶の乾燥後の重量は５８
．３９で旋光度〔α〕＋２８．．５（６Ｎ−ＭＣＩ、Ｃ
＝８）であった。出発原料である１−インプロピル７ミ
ノ７セトニトリル対するＬ−バリンの収率は４９．７モ
ル％である。

結晶分離後のＦ液は２２０ｇで、液体クロマトグラフィ
ーによる分析の結果Ｄ−バリン７ミド　５７，６．９を
含有していた。

（Ｃ）　　攪拌機、温度計および還流冷却器を付した５
００ｄ三ツロフラスコに１前記（Ｂ）口で回収されたＤ
−バリン７ミド含有トルエン溶液（Ｐ液）の全量および
水酸化ナトリウム　０．５０ｇを加え、１１０℃で０．
５時間攪拌を行なった。

反応終了後、この反応生成液を冷却してり。

Ｌ−バリンアミドの結晶を析出させ、析出した結晶を戸
数した。得られた結晶の乾燥後の重量は５７．３，ｊ９
であった。この結晶を液体りｐマドグラフィーで分析し
たところ、Ｄ，Ｌ−バリンアミド残存率　９７９６，Ｄ
−バリンアミドラセミ化率　９６９６であった。

なお、前記のバリンアミド残存率およびＤ−バリンアミ
ドラセミ化率はそれぞれつぎのようにして算出される（
以下の実施例でも同様）。

Ｄ−バリンアミド残存率イｔＪ（％）＝−一ｊすＭ生成
液中のＬ−パリンアミドラセミイｄ幻芯生成液中のＬ−
バリンアミド＋ＤーバリンアミドＸ　　２　　Ｘ　　１
００ なお、ラセミ化率１００９６とはラセミ化反応生成液中
のＬ−α−アミノ酸７ミドとＤ−α−アミノ酸７ミドと
が互いに等量であることを示す。

■）　１ぶ三角フラスコに前記に）で得られたり，Ｌ−
バリンアミドの全量および水　４２３．３５’を加え、
さらにあらたに前記囚で得られたり。

Ｌ−バリンアミド含有水溶液　９０．７ｆおよび前記（
Ｂ）イ、で得られた生菌体　６．４１を加え、前記（Ｂ
）口、と同様にして反応および後処理を行なった。

得られたＬ−バリン結晶の乾燥後の重量は５５、６ｆで
、旋光度（ａ）ｐ＋２　８．　２　（　６Ｎ　−ＨＣ８
、Ｃ＝８）であった。あらたに加えたり。

Ｌ−バリンアミドに対応する出発原料である１−イソプ
ロピルアミノアセトニトリルに対するＬ−バリンの収率
は９４．９モル％である。

結晶分離後のｐ液は２２２ｔで、液体クロマトグラフィ
ーによる分析の結果Ｄーバリンアミド　５７．７ｔを含
有していた。

前記で回収したＤ−バリンアミド含有トルエン溶液を使
用し、（Ｃ）および（Ｄ）の操作を３回繰り返したとこ
ろ、あらたに加えたり，Ｌ−バリンアミドに対応する出
発原料である１−インプロピル７ミノアセトニトリルに
対するＬ−バリンの収率は９５．２〜９４．８モル％、
〔α〕　＋２８．２〜＋２８．１であった。

実施例　２ 囚　攪拌機および温度計を付した３１三ツロフラスコに
、１−メチル７ミノアセトニトリル　７０１ｇ、水　５
４１ｇ、メチルエチルケト７７２１ｇおよび２０　ｗｔ
９６苛性ソーダ水溶液　１０ｇを加え、２０℃で２時間
攪拌した。反応液のｐＨは、反応開始時には１５．２、
反応終了時にＦｉ１４．９であった。

反応終了後、反応生成液から減圧蒸留によりメチルエチ
ルケトンを除去し、９９８ｇのり。

Ｌ−７ラニンアミド含有水溶液を得た。このり。

Ｌ−７ラニンアミド含有水溶液中のＤ，Ｌ−７ラニンア
ミド含量を液体クロマトグラフィーで分析したところ８
８．３Ｗｔ９６であり、仕込１−メチルアミノ７セトニ
トリル ７ラニンアミド収率は１００モル％であった。

（Ｂ）イ　種菌としてクリプトコツカス・ラウレンテイ
（ＡＴＣＣ　　１８８０３）を使用した以外は実施例１
と同様にして菌の培養を行い、次いで培養液から遠心分
離により生菌体　７６ｇを得た。この生菌の水分含量は
７　６　ｗｔ５％であった。

口　前記（４）で得られたり，Ｌ−７ラニン７ミド含有
水溶液　９９．８９および水　３２２１をｓ　ｏ　ａｍ
！三角フラスコに秤取し、さらに前記イで得られた生菌
体　１８．３！！を加え、４０℃で１０時間攪拌し反応
を行なった。

反応終了後、遠心分離により除菌し、減圧にて水を除去
したのち、ベンゼン　２００ｄを加えＤ−７ラニンアミ
ドを加熱溶解し、不溶物を戸数し、この不溶物を少量の
熱ベンゼンにて洗浄してＬ−７ラニンの白色結晶を得た
。得られた結晶の乾燥後の重量は４４．５Ｉで旋光度〔
α）　　＋　１　４．　７　（６Ｎ−Ｈ（Ｊ，　Ｃ　−
１０）であった。出発原料である１−メチルアミノ７セ
トニトリルに対スるＬ−７ラニンの収率は４９．９モル
％である。

結晶分離後のν液は２１５ｇで、液体クロマトグラフィ
ーによる分析の結果、Ｄ−７ラニン７ミド　４３．７ｐ
を含有していた。

（Ｃ）　　攪拌機、温度計および還流冷却器を付した５
ｏｏｒｎｌ三ツロフラスコに、前記（Ｂ）　ｌ−で回収
されたＤ−７ラニンアミド含有ベンゼン溶ｉ　（Ｆ液）
の全量および水酸化セシウム　３．７ｇを加え、８０℃
で２．０時間攪拌を行なった。

反応終了後、この反応生成液から熱時濾過により触媒を
除去したのち、減圧蒸留によりベンゼンを除去し、冷却
によってり，Ｌ−７ラニンアミドの結晶を析出させ、析
出した結晶を炉取した。得られた結晶の乾燥後の重量は
４２．９ｇであった。この結晶を液体り四マドグラフィ
ーで分析したところアラニン７ミド残？１９４％、Ｄ−
７ラニンアミドラセミ化率９２９６であった。

（Ｄ）５００ｆｆｔＪ三角フラスコに、前・記（Ｃ）で
得られたアラニンアミドの全量および水　３２９Ｉを加
え、さらにあらたに前記（Ａ）で得られたり，Ｌ−７ラ
ニンアミド含有水溶液　４９．９ｇおよび前記（Ｂ）イ
で得られた生菌体　１８，３ｇを加え、前記（Ｂ）口と
同様にして反応および後処理を行なった。

得られたＬ−アラニン結晶の乾燥後の重量は４０、８，
ｐで、旋光度〔α）　　　＋　　１４．　７　Ｃ６Ｎ−
ＨＣＬＣ＝１０）であった。あらたに加えたり。

Ｌ−７ラニンアミドに対応する出発原料である１−メチ
ルアミノ７セトニトリル アラニンの収率は９１．６モル％である。

結晶分離後のろ液は２１８Ｉで、液体クロマトグラフィ
ーによる分析の結果Ｄ−７ラニンアミド　４４．２ｐを
含有していた。

前記で回収したＤ−７ラニンアミド含有ベンゼン溶液を
使用し、（Ｃ）および（Ｄ）の操作を２回繰り返したと
ころ、あらたに加えたり，Ｌ−７ラニンアミドに対応す
る出発原料である１−メチルアミノアセトニトリル 結晶の収率は９２．１〜９１．７モル％、〔α〕２０Ｄ ＋１４．５〜＋１４．３であった。

実施例　３ （Ａｌイ　攪拌機および温度計を付した５００ｍＡ！三
ツロフラスコに、１−ベンジルアミノ７セトニトリル　
１４６．２，９．水　１４６．２ｇ、７セト７ｊ４６．
２１７および２　Ｄ　ｗｔ９６苛性ソーダ水溶液　２．
Ｏｇを加え２０℃で１時間攪拌した。反応液のｐＨは反
応開始時には１５．２、反応終了時には１５．０であっ
た。

反応終了後、反応生成液を５℃に冷却し、析出したＤ，
Ｌ−フェニルアラニンアミドを戸数し、この結晶を少量
の水−ア七トン（重量比　１／１）で洗浄した。得られ
た結晶の乾燥後の重量は１ａｑ、２ｇであり、出発原料
である１−ペンジルアミノアセトニトリルニ対スるＤ，
Ｌ−フェニルアラニンアミドの収率１は９０．９モル％
であった。

ロ　前記イで回収されたＤ，Ｌ−フェニルアラニン７ミ
ド分離Ｆ液へ、あらたに１−ベンジルアミノアセトニト
リル　１４６−２９および２　Ｑ　ｗｔ９６苛性ンーダ
水溶液　０．５９を加え、前記イと同様にして反応およ
び後処理を行なってＤ，Ｌ−７エニルアラニンアミドを
製造したところ、あらたに加えた１−ベンジルアミノ７
セトニトリルに対するＤ，Ｌ−フェニル７ラニンアミド
の収率ａ１００．２モル％であった。ここで回収された
Ｄ，Ｌ−フェニルアラニンアミド分離Ｆ液を使用して同
様な操作を３回繰り返したところ、あらたにカロえた１
−ベンジ／レアミノアセトニトリルに対スるＤ，Ｌ−７
二二ルアラニンアミドの収率は平均９９．７モル％であ
った。

（Ｂ）イ　種菌としてロッデロマイ喫ス・エロギスボラ
ス（ＩＦＯ１６７６）を使用し、本培地へ添加スるα−
アミノ酸アミドをＤ，Ｌ−フェニルアラニンアミドとし
た以外は実施例１と同様にして菌の培養を行ない、次い
で遠心分離により生菌体　８２ｇを得た。この生菌の水
分含量は７９　ｗｔ９６　　であった。

−前記（Ａ）で得うれたＤ，Ｌ−フェニルアラニンアミ
ド　８１．９Ｊおよび水　９０３ｇを２Ａ！三角フラス
コに秤取し、さらに前記但）イで得られた生菌体　５９
９を加え、５０℃で５時間攪拌反応を行なった。

反応終了後、遠心分離によって除菌し、減圧にて水を除
去したのち、ｉ−ブタノール２０　ｏｙヲ１０え、Ｄ−
フェニルアラニン７ミ、　ドを加熱溶解し、不溶物を戸
数し、この不溶物を少量の熱ｉ−ブタノールにて洗浄し
てＬ−フェニルアラニン白色結晶を得た。得られた結晶
の乾燥後の重量は４０．９ｇで旋光度（ａ）　　−３４
，５（Ｈ２Ｏ−Ｃ＝２）　テあった。出り 発原料で６る１−ベンジル７ミノアセトニトリルに対す
るＬ−フェニルアラニンの収率ハ４９．５モル％である
。

結晶分離後のｐ液は２３０ｇで、液体クロマトグラフィ
ーによる分析の結果、Ｄ−フェニル７ラニンアミド　４
０．５９ｆｔ含有り、−Ｃいた。

（Ｃ）　　攪拌機、温度計および還流冷却器を付した５
００ｄ三ツロフラスコに、前記（Ｂ）−で回収されたＤ
−フェニルアラニンアミド含有ｉ−ブタノール溶液（Ｆ
液）の全量およびナトリウムアミド　０，２５ｇを加え
、１０８℃で１０分間攪拌を行なった。

反応終了後、反応生成液から減圧蒸留によりインブタノ
ールを除去し、Ｄ、Ｌ−フェニルアラニンアミドの結晶
を析出させ、析出した結晶を戸取した。得られた結晶の
乾燥後の重量は４０．４ｇであった。この結晶を液体ク
ロマトグラフィーで分析したところ、Ｄ、Ｌ−７二二ル
アラニンアミド残存率９７９６、Ｄ−フェニルアラニン
アミドラセミ化率９４９６であった。

■）　　２Ｊ三ツロフラスコに、前記（Ｃ）で得られた
り。

Ｌ−フェニル７ラニンアミドの全１に、　前記（Ｂ）’
で回収された１回あたりの使用菌の全量および水　８９
０ｇを加え、さらにあらたに前記囚でＩられたＤ，Ｌ−
フェニルアラニン７ミド４１．０ｇおよび前記（Ｂ）イ
で得られた生菌体１３ｇを加え、前記（ＢＩ　Ｒと同様
にして反応および後処理を行なった。

得られたＬ−フェニルアラニン結晶の乾燥後の重量は３
８．８ｇで、旋光度〔α）　　−３ａ、３（Ｈ２０１Ｃ
＝２）であった。あらたに加えたり。

Ｌ−フェニルアラニンアミドに対応ｆる出発原料である
１−ベンジル７ミノアセトニトリルに対ｆるＬ−フェニ
ルアラニンの収率は９３．９モル％である。

結晶分離後のＦ液は２６６９で、液体クロマトグラフィ
ーによる分析の結果Ｄ−フェニルアラニンアミド　４１
．２．９を含有していた。

前記で回収したＤ−フェニルアラニンアミド含有ミーブ
タノール溶液を使用し、（Ｃ）およびの）の操作を２回
繰り返したところ、あらたに加えたＤ，Ｌ−７ラニンア
ミドに対応する出発原料である１−ベンジル７ミノアセ
トニトリルニするＬ−フェニルアラニンの収率は９４．
３〜９３、７モル％、〔α）　　　−３４．２〜−３４
．１であった。

実施例　４〜６ 出発原料のα−７ミノアセトニトリルの種類お！びり，
Ｌ−α−アミノ酸７ミドの生化学的は実施例１と同様に
して反応を行ないＬ−α−７ミノ酸を得た。結果を第１
表に示す。

実施例　７ 出発原料のα−アミノアセトニトリルを１−インドリル
メチルアミノアセトニトリルとし、かつＤ，Ｌ−α−ア
ミノ酸アミドの生化学的加水分解で使用する微生物をパ
チソレン・タンノフイラス（ＩＦＯ　　１００７）−一
−１とし、本培地へ添加するα−アミノ酸アミドをり，
　Ｌ−トリプトファンアミドとした以外は実施例３と同
様にして反応を行なった。

Ｄ，Ｌ−トリプトファンアミドに対応する出発原料であ
る１−インドリルメチルアミノアセトニトリルに対する
Ｌ−１−リプトファンの収率は９３．８〜９２．７モル
％であシ、結晶の旋光度は（口）２０−３１．３〜−３
０．　９　（Ｈ２Ｏ，　　Ｃ＝１）であった。

〔発明の効果〕

本発．明の方法によって、安価でかつ工業的に容易に得
られるり，Ｌ−α−アミノ酸アミドから、たとえば、Ｌ
−アラニン、Ｌ−バリン、Ｌ−ロイシン、Ｌ−イソロイ
シン、Ｌ−セリン、Ｌ−スレオニン、Ｌ−システィン、
Ｌ−シスチン、Ｌ−メチオニン、Ｌ−リジン、Ｌ−アル
ギニン、Ｌ−アスパラギン、Ｌ−グルタミン、Ｌ−フェ
ニルグリシン、Ｌ−フェニルアラニン、Ｌ−チロシン、
Ｌ−）リプトファンおよびＬ−ヒスチジンなどの重要な
Ｌ−α−アミノ酸を容易に且つ高収率で製造することが
可能となった。

特許出願人　三菱瓦斯化学株式会社 代表者　長野和書

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. Ｄ，Ｌ−α−アミノ酸アミドにＬ−α−アミノ酸アミド
   加水分解活性を有する微生物の培養液、生菌体、乾燥菌
   体もしくは菌体処理物を作用させて、少くともＬ−α−
   アミノ酸およびＤ−α−アミノ酸アミドを含有する加水
   分解反応生成液を得、該加水分解反応生成液から回収さ
   れたＤ−α−アミノ酸アミドを強塩基性物質の存在下で
   加熱してラセミ化して得られたＤ，Ｌ−α−アミノ酸ア
   ミドを、前記のＤ，Ｌ−α−アミノ酸の生化学的加水分
   解反応における原料として循環使用することを特徴とす
   るＬ−α−アミノ酸の製造法