JPS61277063A - 免疫分析用試薬およびそれを用いる免疫分析方法 - Google Patents
免疫分析用試薬およびそれを用いる免疫分析方法Info
- Publication number
- JPS61277063A JPS61277063A JP11923085A JP11923085A JPS61277063A JP S61277063 A JPS61277063 A JP S61277063A JP 11923085 A JP11923085 A JP 11923085A JP 11923085 A JP11923085 A JP 11923085A JP S61277063 A JPS61277063 A JP S61277063A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- microcapsule
- coenzyme
- reaction
- apoenzyme
- immunoassay
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
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- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の利用分野〕
本発明は免疫分析用試薬および免疫分析方法に係り、特
に抗原抗体反応にともなってマイクロカプセルを損傷す
る現象を利用して抗原又は抗体を測定するための試薬お
よび分析方法に関する。
に抗原抗体反応にともなってマイクロカプセルを損傷す
る現象を利用して抗原又は抗体を測定するための試薬お
よび分析方法に関する。
従来の免疫分析法は、抗体あるいは抗原にラジオアイソ
トープを標識したものと試料中の抗体あるいは抗原との
抗原抗体反応を利用して試料中の抗体あるいは抗原を定
量分析するラジオイノムアツセイ法や、酵素で標識した
抗体または抗原と試料中の抗体あるいは抗原との抗原抗
体反応と標識した酵素による酵素反応を利用して試料中
の抗体あるいは抗原を定量分析するエンザイムイムノア
ツセイ法などがある。
トープを標識したものと試料中の抗体あるいは抗原との
抗原抗体反応を利用して試料中の抗体あるいは抗原を定
量分析するラジオイノムアツセイ法や、酵素で標識した
抗体または抗原と試料中の抗体あるいは抗原との抗原抗
体反応と標識した酵素による酵素反応を利用して試料中
の抗体あるいは抗原を定量分析するエンザイムイムノア
ツセイ法などがある。
しかしながら、前記ラジオイノムアツセイ法は放射性物
質を使用するための特別な設備が必要であり汎用性に問
題がある。また、ラジオイムノアッセイ法およびエンザ
イムイムノアツセイ法のいずれにおいても十分な検出感
度を得るためには。
質を使用するための特別な設備が必要であり汎用性に問
題がある。また、ラジオイムノアッセイ法およびエンザ
イムイムノアツセイ法のいずれにおいても十分な検出感
度を得るためには。
長時間を必要とするという欠点がある。さらに、これら
の従来分析法はいずれも、試料中に含まれる定量を目的
とする抗体または抗原（目的成分）濃度が０であるとき
に、高いバックグラウンドの信号量を有しており、目的
成分と試薬との抗原抗体反応により生ずる信号量の増減
をもとに目的成分を定量する。このため、超微量目的成
分の測定に際して生ずる信号量の増減をもとに目的成分
を定量する。このため、超微量目的成分の測定に際して
生じる信号の微小変化量を増幅して測定感度を高めるこ
とに対して限界がある。
の従来分析法はいずれも、試料中に含まれる定量を目的
とする抗体または抗原（目的成分）濃度が０であるとき
に、高いバックグラウンドの信号量を有しており、目的
成分と試薬との抗原抗体反応により生ずる信号量の増減
をもとに目的成分を定量する。このため、超微量目的成
分の測定に際して生ずる信号量の増減をもとに目的成分
を定量する。このため、超微量目的成分の測定に際して
生じる信号の微小変化量を増幅して測定感度を高めるこ
とに対して限界がある。
本発明の目的は、マイクロカプセル利用分析の応用範囲
を拡張し得る免疫分析用試薬および免疫分析方法を提供
することにある。
を拡張し得る免疫分析用試薬および免疫分析方法を提供
することにある。
〔発明の概要〕
第１の発明は、アポ酵素およびその対応する補酵素の内
のいずれか一方を、抗原抗体反応により溶解作用を受け
るマイクロカプセル内部に有し、マイクロカプセルの外
に他方を含んでなる免疫用試薬である。
のいずれか一方を、抗原抗体反応により溶解作用を受け
るマイクロカプセル内部に有し、マイクロカプセルの外
に他方を含んでなる免疫用試薬である。
第２の発明は、第１の発明の試薬を用いて行う免疫分析
方法である。
方法である。
本発明を実行するには、次のようなステップが組合わさ
れる。すなわち１反応容器に被検試料および免疫分析用
試薬を加えること、抗原抗体反応により反応容器内でマ
イクロカプセル内からアポ酵素又は補酵素を流出せしめ
てホロ酵素を生成させること、ホロ酵素と基質を反買さ
せて検出可能物質を生成させること、反応液を光学的に
測定すること等のステップが行われる。
れる。すなわち１反応容器に被検試料および免疫分析用
試薬を加えること、抗原抗体反応により反応容器内でマ
イクロカプセル内からアポ酵素又は補酵素を流出せしめ
てホロ酵素を生成させること、ホロ酵素と基質を反買さ
せて検出可能物質を生成させること、反応液を光学的に
測定すること等のステップが行われる。
従来のマイクロカプセルを用いた分析法では、表面に抗
原あるいは抗体を結合したマイクロカプセルと、試料中
の抗体あるいは抗原を混合し、生じた抗原抗体反応によ
り活性化された補体の膜溶解作用によるマイクロカプセ
ルの破壊により流出した検出可能な物質をそのまま測定
することにより試料中の抗体あるいは抗原量を定量して
いた。
原あるいは抗体を結合したマイクロカプセルと、試料中
の抗体あるいは抗原を混合し、生じた抗原抗体反応によ
り活性化された補体の膜溶解作用によるマイクロカプセ
ルの破壊により流出した検出可能な物質をそのまま測定
することにより試料中の抗体あるいは抗原量を定量して
いた。
本発明の実施例では、マイクロカプセル内外にアポ酵素
と補酵素を別々に分けて収容させ、アポ酵素が補酵素の
作用によりホロ酵素になる。このホロ酵素によりマイク
ロカプセル外部に含まれていた基質に作用して、検出可
能な物質に変わるか、あるいはホロ酵素が作用した基質
の変換物質は、マイクロカプセル外部に含まれていた物
質が、変換された基質と反応して検出可能な物質に変換
しても良い、検出可能な物質が生成されるのは、何段階
の反応を経ても良い、マイクロカプセル内外に補酵素と
アポ酵素を分けて収容し、補酵素とアポ酵素が反応した
ときのみ酵素の活性を有するホロ酵素となる。このホロ
酵素の作用により従来より高感度に分析できる６ 本発明の実施例を示す。本実施例によれば、マイクロカ
プセル内外に別々に含まれたアポ酵素と補酵素の反応に
より、生成されたホロ酵素活性により高感度に目的物質
を定量することができ効果がある。
と補酵素を別々に分けて収容させ、アポ酵素が補酵素の
作用によりホロ酵素になる。このホロ酵素によりマイク
ロカプセル外部に含まれていた基質に作用して、検出可
能な物質に変わるか、あるいはホロ酵素が作用した基質
の変換物質は、マイクロカプセル外部に含まれていた物
質が、変換された基質と反応して検出可能な物質に変換
しても良い、検出可能な物質が生成されるのは、何段階
の反応を経ても良い、マイクロカプセル内外に補酵素と
アポ酵素を分けて収容し、補酵素とアポ酵素が反応した
ときのみ酵素の活性を有するホロ酵素となる。このホロ
酵素の作用により従来より高感度に分析できる６ 本発明の実施例を示す。本実施例によれば、マイクロカ
プセル内外に別々に含まれたアポ酵素と補酵素の反応に
より、生成されたホロ酵素活性により高感度に目的物質
を定量することができ効果がある。
ホロ
ＡｐｏＧＯＤ＋ Ｆ Ａ Ｄ Ｈｏ１ｏＧＯＤ
ＯＤ ｇｌａｃｏｓａ −ｍ−−Ｉ（、ｏ。
ＯＤ ｇｌａｃｏｓａ −ｍ−−Ｉ（、ｏ。
Ｔ−Ｉ、Ｏ□＋チアミノアンチピリン＋ジエ青紫色色素
マイクロカプセルとして半血球を用い、マイクロカプセ
ル内包物として、アポグルコースオキシダーゼを用い、
反応液を波長６００ｎｍで吸収を測定した。あらかじめ
マイクロカプセル表面に抗Ｔ４抗体を結合させたマイク
ロカプセル１０μ悲と、補体と補酵素とグルコースを含
んだ液１０μ息と、濃度既知のＴ４を含んだ液１０μΩ
を混合し、２０分間反応させる。２０分後渡−オキシダ
ーゼ、４−アミノアンチピリンジェルアニリンを含んだ
液２０μΩと５０ ｍＭＫＨ２ＰＯ４緩衝液９５０μΩ
を混合し、２０分間反応させたのち、測定を行った。こ
の結果を第１図に示した。これによりＴ４の増加ととも
に吸光度が増加し、Ｔ４の検量線が作成できた。
ル内包物として、アポグルコースオキシダーゼを用い、
反応液を波長６００ｎｍで吸収を測定した。あらかじめ
マイクロカプセル表面に抗Ｔ４抗体を結合させたマイク
ロカプセル１０μ悲と、補体と補酵素とグルコースを含
んだ液１０μ息と、濃度既知のＴ４を含んだ液１０μΩ
を混合し、２０分間反応させる。２０分後渡−オキシダ
ーゼ、４−アミノアンチピリンジェルアニリンを含んだ
液２０μΩと５０ ｍＭＫＨ２ＰＯ４緩衝液９５０μΩ
を混合し、２０分間反応させたのち、測定を行った。こ
の結果を第１図に示した。これによりＴ４の増加ととも
に吸光度が増加し、Ｔ４の検量線が作成できた。
本発明によれば、マイクロカプセル内外に補酵素とアポ
酵素を別々に分けて含ませることにより、る効果がある
。
酵素を別々に分けて含ませることにより、る効果がある
。
第１図はＴ４の検量線例を示す図である。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、アポ酵素およびその対応する補酵素の内のいずれか
一方を、抗原抗体反応により溶解作用を受けるマイクロ
カプセル内部に有し、上記マイクロカプセルの外に上記
アポ酵素と上記補酵素の内の他方を含んでなる免疫分析
用試薬。 ２、反応容器に被検試料および免疫分析用試薬を加える
こと、この免疫分析用試薬は、アポ酵素および補酵素の
内の一方をマイクロカプセル内に有し、他方を上記マイ
クロカプセル外に有するものであること、抗原抗体反応
により上記反応容器内で上記マイクロカプセル内からア
ポ酵素又は補酵素を流出せしめてホロ酵素を生成するこ
と、および上記ホロ酵素と基質を反応させ検出可能物質
が生成された反応液を光学物に測定することを含む免疫
分析方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11923085A JPS61277063A (ja) | 1985-05-31 | 1985-05-31 | 免疫分析用試薬およびそれを用いる免疫分析方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11923085A JPS61277063A (ja) | 1985-05-31 | 1985-05-31 | 免疫分析用試薬およびそれを用いる免疫分析方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61277063A true JPS61277063A (ja) | 1986-12-08 |
Family
ID=14756176
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP11923085A Pending JPS61277063A (ja) | 1985-05-31 | 1985-05-31 | 免疫分析用試薬およびそれを用いる免疫分析方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61277063A (ja) |
-
1985
- 1985-05-31 JP JP11923085A patent/JPS61277063A/ja active Pending
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