JPS6125484A - 抗体を産生する細胞株 - Google Patents
抗体を産生する細胞株Info
- Publication number
- JPS6125484A JPS6125484A JP14735484A JP14735484A JPS6125484A JP S6125484 A JPS6125484 A JP S6125484A JP 14735484 A JP14735484 A JP 14735484A JP 14735484 A JP14735484 A JP 14735484A JP S6125484 A JPS6125484 A JP S6125484A
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- JP
- Japan
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- hepatitis
- antibody
- virus
- cell
- human
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- Pending
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Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は、非Ａ非Ｂ型肝炎抗原に特異的なモノクローナ
ル抗体を産生ずる細胞株に関する。
ル抗体を産生ずる細胞株に関する。
（従来の技術〕
ウィルス性肝炎のうち、Ａ型およびＢ型肝炎については
、そのウィルスの実体が見出され、免疫学的方法による
診断も可能となっている。
、そのウィルスの実体が見出され、免疫学的方法による
診断も可能となっている。
しかしながら、ム型でもなくＢ型でもなく。
非Ａ非Ｂ型といわれる肝炎は輸血後肝炎の２０−以上を
占めるとされているが、その原因ウィルスが同定されて
シらず、ヒトの非Ａ非Ｂ型肝炎がチンパンジーへ感染可
能であることが確認されているにすぎない。
占めるとされているが、その原因ウィルスが同定されて
シらず、ヒトの非Ａ非Ｂ型肝炎がチンパンジーへ感染可
能であることが確認されているにすぎない。
一方、非Ａ非Ｂ型肝炎に関連した抗原抗体系の検索も、
多くの研究者によって患者の血清を中心になされている
が、未だ明確な系は見出されてはおらず、さらに、たと
えばモノクローナル抗体については、期待されているヒ
ト及びチンパンジー型のものは得られていない（たとえ
ば、医学のらゆみ第ｉｉｒ巻、第り号、第Ｖｔ６〜Ｖり
弘頁、昭和５６年）。
多くの研究者によって患者の血清を中心になされている
が、未だ明確な系は見出されてはおらず、さらに、たと
えばモノクローナル抗体については、期待されているヒ
ト及びチンパンジー型のものは得られていない（たとえ
ば、医学のらゆみ第ｉｉｒ巻、第り号、第Ｖｔ６〜Ｖり
弘頁、昭和５６年）。
（発明の目的）
そこで、本発明者らは、上記非Ａ非Ｂ型肝炎に関連した
モノクローナル抗体を見出すべく、非Ａ非Ｂ型肝炎回復
期のチンパンジーおよびヒト末梢血リンパ球のトランス
フォーメーションを中心に種々検討を重ねた結果、本発
明に到達した。
モノクローナル抗体を見出すべく、非Ａ非Ｂ型肝炎回復
期のチンパンジーおよびヒト末梢血リンパ球のトランス
フォーメーションを中心に種々検討を重ねた結果、本発
明に到達した。
すなわち、本発明の要旨は、非Ａ非Ｂ型肝炎発症時の肝
細胞内に出現する抗原に特異的に反応するモノクローナ
ル抗体を産生ずる細胞株にある。
細胞内に出現する抗原に特異的に反応するモノクローナ
ル抗体を産生ずる細胞株にある。
（問題点を解決するための手段）
以下、本発明の詳細な説明する。
まず１本発明に係る細胞株は、次のような方法によル得
られる。
られる。
一ムすることによル、非Ａ非Ｂ型肝炎関連抗体陽性の培
養細胞を得、ついでこれをクローン化して目的とする抗
体を産生ずる細胞株を得ることができる。
養細胞を得、ついでこれをクローン化して目的とする抗
体を産生ずる細胞株を得ることができる。
たとえば、非Ａ非Ｂ型肝炎回復期のチンパンる。
一方、］！ｌｔウィルスを産生放出している細胞（たと
えは、Ｂｙｒ−ｒ）を培地中で培養し、その培養上清を
分離し、ウィルス源（ＢＢウィルス液）を得る。
えは、Ｂｙｒ−ｒ）を培地中で培養し、その培養上清を
分離し、ウィルス源（ＢＢウィルス液）を得る。
ついで、このＩｔ！Ｂウィルス液と上記リンパ球を接触
させた後１種々の培養密度で、組織培養用マイクロタイ
タープレートに接種して培養する。
させた後１種々の培養密度で、組織培養用マイクロタイ
タープレートに接種して培養する。
このトランスフォーメーション法は、適宜常法を選ぶこ
とができるが、少ない細胞密度で接種するオリゴクロー
ン法が好適に使用される。
とができるが、少ない細胞密度で接種するオリゴクロー
ン法が好適に使用される。
細胞の増殖がみられる時期に、培養上清を集め、抗体活
性のスクリーニングを行ない、抗体活性陽性のものにつ
いて、クローニングを行なう。
性のスクリーニングを行ない、抗体活性陽性のものにつ
いて、クローニングを行なう。
クローニングに際しては、軟寒天（ｏｏｆｔ ａｇａｒ
）法、限界希釈（ｌｉｍｉｔｉｎｇ ｄｉｌｕｔｉｏｎ
）法又はシングルセルマニピユレーション（ｓｉｎｇｌ
ｅ ｃｅｌｌ ｍａｎｉｐ−ｕｌａｔｉｏｎ ）法の常
法を用いることができるが。
）法、限界希釈（ｌｉｍｉｔｉｎｇ ｄｉｌｕｔｉｏｎ
）法又はシングルセルマニピユレーション（ｓｉｎｇｌ
ｅ ｃｅｌｌ ｍａｎｉｐ−ｕｌａｔｉｏｎ ）法の常
法を用いることができるが。
主として軟寒天法および限界希釈法が用いられる。
軟寒天法の場合、たとえば細胞をろる密度で支持寒天層
上の接種寒天層に植え込み、増殖してきたコロニーを分
離し、再び浮遊培養に移し、抗体陽性のクローン株を取
得する。
上の接種寒天層に植え込み、増殖してきたコロニーを分
離し、再び浮遊培養に移し、抗体陽性のクローン株を取
得する。
また、限界希釈法の場合、たとえばＸｌｌ照射した腫瘍
化Ｂ細胞をフィダー細胞として、細胞をある密度で組織
培養用マイクロタイタープレートに植え込み、抗体陽性
のクローン株を取得する。
化Ｂ細胞をフィダー細胞として、細胞をある密度で組織
培養用マイクロタイタープレートに植え込み、抗体陽性
のクローン株を取得する。
このクローン化された細胞株が産生ずる抗体は常法によ
）取得でき、この抗体は非Ａ非Ｂ型肝炎発症時の肝細胞
内に出現する抗原に特異的に反応する。
）取得でき、この抗体は非Ａ非Ｂ型肝炎発症時の肝細胞
内に出現する抗原に特異的に反応する。
得られる抗体は、常法により、たとえば” ５ｅｐｈａ
ｃｒｙｌ”Ｓ−３００等によるグル（濾過りＯｆトゲラ
フイー等により精製することができ１次のような性質を
有する。
ｃｒｙｌ”Ｓ−３００等によるグル（濾過りＯｆトゲラ
フイー等により精製することができ１次のような性質を
有する。
））蔗糖密度勾配遠心法及びグル濾過法による分子量が
約りｏ ｏ、 ｏ ｏ ｏでＴｏｌｌ、コ） ５Ｄ８
−ボリアクリルアイドゲル電気泳動法による分子量約６
４００００Ｈ鎖と分子量約２３、０００のＬ鎖からなる
チンパンジー又はヒトの工ｇＭ抗体である。
約りｏ ｏ、 ｏ ｏ ｏでＴｏｌｌ、コ） ５Ｄ８
−ボリアクリルアイドゲル電気泳動法による分子量約６
４００００Ｈ鎖と分子量約２３、０００のＬ鎖からなる
チンパンジー又はヒトの工ｇＭ抗体である。
（発明の効果）
本発明に係る細胞株によシ得られるモノクローナル抗体
は、非Ａ非Ｂ型肝炎抗原に特異的でワシ、非Ａ非Ｂ型肝
炎の診断、輸血用血清のスクリーニング、原因ウィルス
の精製等に有用である。さらに本抗体はチンパンジー及
びヒト型でおる特徴を有するので非Ａ非Ｂ型肝炎の治療
にも有効であると期待される。
は、非Ａ非Ｂ型肝炎抗原に特異的でワシ、非Ａ非Ｂ型肝
炎の診断、輸血用血清のスクリーニング、原因ウィルス
の精製等に有用である。さらに本抗体はチンパンジー及
びヒト型でおる特徴を有するので非Ａ非Ｂ型肝炎の治療
にも有効であると期待される。
（実施例）
以下、実施例によシ本発明をさらに詳細に説明する。
実施例１
１ 非Ａ非Ｂ型肝炎回復期のチンパンジー末梢血９７８
球のトランスフォーメーションｌ）培地 ＲＰＭ工１６弘Ｏ培地に、リラシリンｉｏ。
球のトランスフォーメーションｌ）培地 ＲＰＭ工１６弘Ｏ培地に、リラシリンｉｏ。
μｆ／１ｒｔｌ、ストレプトマイシン／ ００ ｐｆ／
ｒｄ、グルタミンλｍＭ４・炭識水素ナトリウム／、６
ｔ７ｉｔを加えた後、二酸化炭素を吹きこみ声７．０〜
７．４Ｃとし、牛胎児血清（Ｆｅｔａｌ Ｃａ１１Ｓθ
ｒｕｍ：ＦｏＳ）をλθチとなるよりに加えＥＢウィル
スを鉱化するＢＦ３−ｆ細、胞（Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇ
ｓ ｏｆ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆＳ
ｃｉｅｎｃｅ、 ７０ （〕）、１９０−／９１（／
り７３））を３ｘノ０５肩の細胞密度でＲＰＭ工／６１
１０＋ＩＯ％ＦｐＳ培地を用いて７日間培養し、０．１
ＩｊｐＦＦ＋ のミリポアフィルタ−で濾過した培養上
清をウィルス液として用いる。ウィルスの力価利足には
、屓帯血のトランス３〕 リンパ球の分離 比重遠心法（ＩＰｉｃｏｌ−Ｏｏｎｒａｙの比重へ０７
７〕で単核球を分取し、末梢ｍリンパ球として用いる。
ｒｄ、グルタミンλｍＭ４・炭識水素ナトリウム／、６
ｔ７ｉｔを加えた後、二酸化炭素を吹きこみ声７．０〜
７．４Ｃとし、牛胎児血清（Ｆｅｔａｌ Ｃａ１１Ｓθ
ｒｕｍ：ＦｏＳ）をλθチとなるよりに加えＥＢウィル
スを鉱化するＢＦ３−ｆ細、胞（Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇ
ｓ ｏｆ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆＳ
ｃｉｅｎｃｅ、 ７０ （〕）、１９０−／９１（／
り７３））を３ｘノ０５肩の細胞密度でＲＰＭ工／６１
１０＋ＩＯ％ＦｐＳ培地を用いて７日間培養し、０．１
ＩｊｐＦＦ＋ のミリポアフィルタ−で濾過した培養上
清をウィルス液として用いる。ウィルスの力価利足には
、屓帯血のトランス３〕 リンパ球の分離 比重遠心法（ＩＰｉｃｏｌ−Ｏｏｎｒａｙの比重へ０７
７〕で単核球を分取し、末梢ｍリンパ球として用いる。
上記の方法で末梢血／ｕｔｌ当り約ｉｏ’個の末梢血リ
ンパ球が分離される。
ンパ球が分離される。
リ ＢＢウィルスの吸着及び培養
ｄ以上）を加え、３７℃で１時間放置する。
その後、遠心によシウイルス液を除き
ＲＰＭＸ／６Ｖ−０＋ Ｊ Ｏ％ｙｅｓ培地を加え細胞
密度を調整し、平底マイクロタイタープレートに０．ｌ
ｄずつ細胞を植えこむ。ｖ８後に培地を０．Ｉｙｔｔ
ｌ加え以後Ｖ〜７日に１度培地の半量交換を行う。植え
こむ細胞数によって異なるが、平底マイクロタイタープ
レートのウェル尚ｔ）ｌｏ”個では、７〜ｉｏ日で細胞
が細胞集塊を形成し活発に増殖してくる。通常、ＢＢウ
ィルスを吸着させた末梢血リンパ球を、平底マイクロタ
イタープレートのウェル当Ｊ）／ｌ１ｌ）”〜１０′１
個の細胞密度で植えこむ。
密度を調整し、平底マイクロタイタープレートに０．ｌ
ｄずつ細胞を植えこむ。ｖ８後に培地を０．Ｉｙｔｔ
ｌ加え以後Ｖ〜７日に１度培地の半量交換を行う。植え
こむ細胞数によって異なるが、平底マイクロタイタープ
レートのウェル尚ｔ）ｌｏ”個では、７〜ｉｏ日で細胞
が細胞集塊を形成し活発に増殖してくる。通常、ＢＢウ
ィルスを吸着させた末梢血リンパ球を、平底マイクロタ
イタープレートのウェル当Ｊ）／ｌ１ｌ）”〜１０′１
個の細胞密度で植えこむ。
り培養上溝中の非Ａ非ＢＷ肝炎関連抗体の検出
細胞が増殖してきたら、培養上清を集め、抗体価を測定
する。その時期は、植えこむ細胞数によって異なるが、
３週目からグ週目にかけて抗体活性陽性のウェルが認め
られる。抗体陽性のウェルは、コグ穴マルチウェルプレ
ート、３５簡のシャーレ、６０−のシャーレと培養量を
拡大し、トランスフオームを週目位からクローニングを
行う。
する。その時期は、植えこむ細胞数によって異なるが、
３週目からグ週目にかけて抗体活性陽性のウェルが認め
られる。抗体陽性のウェルは、コグ穴マルチウェルプレ
ート、３５簡のシャーレ、６０−のシャーレと培養量を
拡大し、トランスフオームを週目位からクローニングを
行う。
コ クローニング
限界希釈法によシ行った。
あらかじめ／ＪＯＯＲａｅＬ以上照射したバーキットリ
ンパ腫細胞をマイクロタイタープレートにウェル当シコ
↓０００個植えこむ。
ンパ腫細胞をマイクロタイタープレートにウェル当シコ
↓０００個植えこむ。
次にＲＰＭ工／６１７０ ＋２０％ＦＪＳ培地で１０゜
！、コ、！、ノ個１０．／ｙｄとなるように細胞を希釈
し、これをマイクロタイタープレートにｏ、ｉ−ずつ植
えこみ培養する。ｖ８後に培地を０．／−加え以後４〜
７日に１度培地の半量交換を行う。培養開始後ＩＱ−−
〇日で肉眼で認められるコロニーが形成される。その結
果クローン株を得る。
！、コ、！、ノ個１０．／ｙｄとなるように細胞を希釈
し、これをマイクロタイタープレートにｏ、ｉ−ずつ植
えこみ培養する。ｖ８後に培地を０．／−加え以後４〜
７日に１度培地の半量交換を行う。培養開始後ＩＱ−−
〇日で肉眼で認められるコロニーが形成される。その結
果クローン株を得る。
３ 抗体の取得および精製
上記クローン株を０．ｊ ％牛血清アルブミン（ＴＢＳ
）合焦血清培地（Ｒ工’Ｉ’Ｏｊタータ培地）中で増殖
させ、培養上清を集め抗体を取得する。この上清を限外
濾過（分子量３０万以下の分子を排除する）後、ＩＳθ
ｐｈａ ｃτｙ１”Ｓ −３００によるゲル濾過クロマ
トグラフィー（０，２Ｍホウ酸緩衝液ｆｙ、ｏ）で精製
し抗体を得た。このチンパンジー型の精製抗体は、オフ
タロニー法および免疫電気泳動法で、工ｇＭ抗体に対応
する沈降線を示した。還元条件下のＳＤＢ電気泳動分析
ではＩｇＭのＨｉ１４とＬ鎖に相当する２本のバンドが
認められた。
）合焦血清培地（Ｒ工’Ｉ’Ｏｊタータ培地）中で増殖
させ、培養上清を集め抗体を取得する。この上清を限外
濾過（分子量３０万以下の分子を排除する）後、ＩＳθ
ｐｈａ ｃτｙ１”Ｓ −３００によるゲル濾過クロマ
トグラフィー（０，２Ｍホウ酸緩衝液ｆｙ、ｏ）で精製
し抗体を得た。このチンパンジー型の精製抗体は、オフ
タロニー法および免疫電気泳動法で、工ｇＭ抗体に対応
する沈降線を示した。還元条件下のＳＤＢ電気泳動分析
ではＩｇＭのＨｉ１４とＬ鎖に相当する２本のバンドが
認められた。
実施例コ
実施例１において、ヒト末梢血リンパ球を用いてヒト型
の精製抗体を得た。
の精製抗体を得た。
（軟寒天法）
支持層ｏ、１％、接種層ｏ、３％のアガロースマリーン
コロイズ シー グラーク（Ｍａｒｉｎｅ
０ｏｌｌｏｉｄｓ社製” ８ｅａ Ｐｌａｑｕｅ”ア
ガロース）を含むＲＰＭ工／Ａ弘ｏ＋、２ｏチｗａｓ培
地を用いる。細胞はプレート当シ１００−１０，０００
個植えこむ。培養開始後１０−２０日で肉眼で認められ
るコロニーが形成される。この時点で、パスツールピペ
ットを用いてコロニーを吸い上げ、あらかじめ０．１
ｄのＲＰＭ工１６≠Ｏ十λＯチＦＯＩ３培地を入れたマ
イクロタイタープレートに細胞を移して培養し、クロー
ン株を得る。
コロイズ シー グラーク（Ｍａｒｉｎｅ
０ｏｌｌｏｉｄｓ社製” ８ｅａ Ｐｌａｑｕｅ”ア
ガロース）を含むＲＰＭ工／Ａ弘ｏ＋、２ｏチｗａｓ培
地を用いる。細胞はプレート当シ１００−１０，０００
個植えこむ。培養開始後１０−２０日で肉眼で認められ
るコロニーが形成される。この時点で、パスツールピペ
ットを用いてコロニーを吸い上げ、あらかじめ０．１
ｄのＲＰＭ工１６≠Ｏ十λＯチＦＯＩ３培地を入れたマ
イクロタイタープレートに細胞を移して培養し、クロー
ン株を得る。
なお、上記の精製抗体も、オクタロ＝−法および免疫電
気泳動法で、工ｇＭ抗体に対応する沈降線を示した。ま
た、還元条件下の８ＤＢ電気泳動分析ではＩｇＭのＨ鎖
とＬ鎖に相当する２本のバンドが認められた。
気泳動法で、工ｇＭ抗体に対応する沈降線を示した。ま
た、還元条件下の８ＤＢ電気泳動分析ではＩｇＭのＨ鎖
とＬ鎖に相当する２本のバンドが認められた。
参考例１
（１）非Ａ非Ｂ型肝炎陽性肝組織との反応性実施例１及
びコで得られた抗体を用いて、非ム非Ｂ型肝炎発症時の
肝組織を櫨光抗体法によ〕反応させ反応性の有無を調べ
た。
びコで得られた抗体を用いて、非ム非Ｂ型肝炎発症時の
肝組織を櫨光抗体法によ〕反応させ反応性の有無を調べ
た。
すなワチ、クリオスタットで薄切した肝組織切片をア七
トンで室温でｉｏ分間処置する。
トンで室温でｉｏ分間処置する。
乾燥後、上記の非Ａ非Ｂ型肝炎関連抗体（−次抗体）を
切片の上にのせ、湿潤箱に入れて３７℃で６０分間反応
させる。このときに用いる抗体液は、あらかじめ濃度を
適当に希釈したものを用いる。
切片の上にのせ、湿潤箱に入れて３７℃で６０分間反応
させる。このときに用いる抗体液は、あらかじめ濃度を
適当に希釈したものを用いる。
ＰＢ８で一次抗体を洗い流し、振盪しながらＰＢＢ中で
洗浄する。次にＦ工Ｔｏラベルした抗ヒトエｇＭ抗体（
２次抗体〕を上記と同様に３７℃で６０分間反応させる
。ＦＢＩ３で標識抗体を洗い流し、振盪しながらＰＢＳ
中で洗浄する。風乾後、封入剤〔グリセリン二０ 、３
Ｍ Ｎ＆２００Ｂ −ＮａＨＯＯ１緩衝液（り：ｌ）
−を滴下し、カバーグラスで封入する。水銀ランプを光
源とした螢光顕微鏡を用いて観察する。
洗浄する。次にＦ工Ｔｏラベルした抗ヒトエｇＭ抗体（
２次抗体〕を上記と同様に３７℃で６０分間反応させる
。ＦＢＩ３で標識抗体を洗い流し、振盪しながらＰＢＳ
中で洗浄する。風乾後、封入剤〔グリセリン二０ 、３
Ｍ Ｎ＆２００Ｂ −ＮａＨＯＯ１緩衝液（り：ｌ）
−を滴下し、カバーグラスで封入する。水銀ランプを光
源とした螢光顕微鏡を用いて観察する。
その結果、本抗体は、非Ａ非Ｂｆｆｉ肝炎の発症時に出
現した抗原に対して反応する抗体であることが判明した
。
現した抗原に対して反応する抗体であることが判明した
。
（２）非Ａ非Ｂ型肝炎陰性肝組織との反応性上記（１）
におけると同様の方法で、実施例１及び２で得られた抗
体を用いて、非Ａ非Ｂ型肝炎陰性肝組織を螢光抗体法に
よシ反応させ反応性の有無を調べた。
におけると同様の方法で、実施例１及び２で得られた抗
体を用いて、非Ａ非Ｂ型肝炎陰性肝組織を螢光抗体法に
よシ反応させ反応性の有無を調べた。
その結果１本杭体は、ム型肝炎もしくはＢ型肝炎の肝組
織切片と反応せず、非ウィルス性肝炎の肝組織切片とも
反応せず、また、正常肝組織切片とも反応しないことが
判明した。
織切片と反応せず、非ウィルス性肝炎の肝組織切片とも
反応せず、また、正常肝組織切片とも反応しないことが
判明した。
Claims (1)
- （１）非Ａ非Ｂ型肝炎発症時の肝細胞内に出現する抗原
に特異的に反応するモノクローナル抗体を産生するヒト
及びチンパンジー由来の細胞株。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14735484A JPS6125484A (ja) | 1984-07-16 | 1984-07-16 | 抗体を産生する細胞株 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14735484A JPS6125484A (ja) | 1984-07-16 | 1984-07-16 | 抗体を産生する細胞株 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6125484A true JPS6125484A (ja) | 1986-02-04 |
Family
ID=15428291
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP14735484A Pending JPS6125484A (ja) | 1984-07-16 | 1984-07-16 | 抗体を産生する細胞株 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6125484A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62249999A (ja) * | 1986-04-16 | 1987-10-30 | インステイテイ パスツ−ル | 非ａ非ｂ型ウイルス性肝炎検出用試薬および免疫酵素法による前記肝炎の診断法 |
| US5191064A (en) * | 1988-09-30 | 1993-03-02 | The Research Foundation For Microbial Diseases (Osaka University) | Non-a, non-b hepatitis virus antigen peptide |
| US5350671A (en) * | 1987-11-18 | 1994-09-27 | Chiron Corporation | HCV immunoassays employing C domain antigens |
-
1984
- 1984-07-16 JP JP14735484A patent/JPS6125484A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62249999A (ja) * | 1986-04-16 | 1987-10-30 | インステイテイ パスツ−ル | 非ａ非ｂ型ウイルス性肝炎検出用試薬および免疫酵素法による前記肝炎の診断法 |
| US5350671A (en) * | 1987-11-18 | 1994-09-27 | Chiron Corporation | HCV immunoassays employing C domain antigens |
| US5191064A (en) * | 1988-09-30 | 1993-03-02 | The Research Foundation For Microbial Diseases (Osaka University) | Non-a, non-b hepatitis virus antigen peptide |
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