JPS61223558A - 血液抗凝固剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明に血液抗凝固剤に関する。

近年、臨床医学の発達により予防医学又は治療の状況判
断として血液検査のはたす役割に極めて大きいものとな
っている。このような状況にともなって血液検査用に採
血した血液の凝固上防止する血液抗凝固剤の開発が盛ん
に進めらｎている。本発明に、特にこのような目的に適
した血液抗凝固剤に関する。

〔従来の技術〕

血液抗凝固剤としてはヘパリンナトｖウム系のものが最
も知られており、人工透析、人工肺の治療等の時の血液
の添加、血液に接触する表面の処理が行わｎている。

又、ある椙の血液形態検査にはエチレンジアミン四酢酸
の金属塩系のものが抗血液凝固剤として使用さｎている
。

〔発明が解決すべき問題点〕

しかし、ヘパリンは動物の臓器からの抽出によってのみ
得らｎるので、合成品に較べると量的に充分でなく、製
造コストも格段に大きくなる。また抽出原料臓器が異な
ると同一構造、同一性能のヘパリンを得る事が困難であ
り、かつ輸入に依存している几め安定な価格で供給さｎ
難いという欠点含有している。

またエチレンジアミン四酢酸の金属塩系のものに血液形
態検査用の血液抗凝固剤としては使用できるものの、こ
の種の抗凝血剤全添加し几血液の取扱いに慎重に行わな
けｎば赤血球の溶血現象を引き起こし、血液形態検査に
悪影響を与える。従って、採血後の抗凝血剤との混和、
血液形態測定時の取扱いなどで繁雑な取扱いを余儀なく
さｎており、血液形態検査時の溶血による再検査という
事例もしばしばある。

そこで安価で血液抗凝固性を有し、しかも多種にわたる
血液検査に対して悪影響上寿えない血液抗凝固剤の開発
が要望されているが、この工うな要望全満足する血液抗
凝固剤は未だ開発さ扛ていない。

かかる現状に鑑み鋭意検討を行った結果、徨々の血液検
査に使用し得る血液抗凝固剤に関する本発明に到達した
ものである。

〔問題点を解決するための手段〕

即ち本発明に、１乃至５個のカルボン酸基を有する炭素
数１乃至２０の脂肪族又は芳香族の不飽和カルボン酸の
重合体のアルカリ金属又はアルカリ土類金属塩を主成分
とする血液抗凝固剤に関する。

本発明で使用する不飽和カルボン酸としては、アクリル
酸、メタクリル酸、イタコン酸、クロトン酸、２−クロ
ロアクリル酸、ｐ−ビニル安息香酸、フマル酸、マレイ
ン酸、α−メチルケイ皮酸、β−メチルケイ皮酸又にこ
ｎらの２種以上の混合物が用いらｎｌこｎらのうち、ア
クリル酸、メタクリル酸、イタコン酸、クロトン酸、２
−クロロアクリル酸が好ましく用いらｎ１アクリル酸、
メタクリル酸がより好ましく用いらｎる。不飽和カルボ
ン酸の重合体としては・上記カルボン酸を６０モルチ以
上含んでいｎば他の重合可能なモノマーとの共重合体で
あってもよい。また、アルカリ金属としてはナトリウム
、カリウム、リチウム等が用いらｎ５アルカリ土類金属
としてはマグネシウム、バリウム等が用いらｎ１上記カ
ルボン酸又はその重合体と塩を形成するにあたっては、
こ扛らの金属の水酸化物が用いらｎｌより好ましくは水
酸化ナトリウム、水酸化カリウムが用いらｎる＠本発明
においては、必ずしもすべてのカルボン酸とアルカリ金
属とが塩を形成している必要にないが、反応に用いたア
ルカリ金属を過剰に使用し、アルカリ性とするのは好ま
しくない。

したがって本発明の血液抗凝固剤におけるカルボン酸基
とアルカリ金属との比は１価のアルカリ金属の場合は１
．０／α５〜１．１、好ましくは、１．０／α７〜１．
０５、より好ましくは１．ｏ／α９〜１．０５であり、
２価のアルカリ金属の場合はｔＯ／α２５〜α５５、好
ましくは１．０／α３５〜α５０３、より好ましくは１
．０／α４５〜α５０５であることが好ましい。

この比は反応における不飽和カルボン酸とアルカリ金属
の仕込み比率で調整することができ、未反応物をメタノ
ール洗浄等で洗浄することによってもある程度調節でき
る。

本発明の血液抗凝固剤は単独で用いることもできるが、
微量のヘパリン塩、蓚酸塩、蓚酸複合塩、クエン散塩等
を含んでいてもよい。

次に本発明の血液凝固剤に上記不飽和カルボン酸の水溶
液にアルカリ金属水溶液を添加して塩の形成上行わせた
のちラジカル重合法により重合せしめたのち反応生成物
を取り出すか、あるいは、あらかじめ重合触媒等を用い
て不飽和カルボン酸重合体を得た後、該重合体又はその
水溶液にアルカリ金属水浴液全添加反応させることによ
り得らｎる。また上記カルボン酸のエステルの加水分解
物又は部分加水分解物を用いてもよい。

不飽和カルボン酸水溶液にアルカリ金属を添加して塩の
形成を行ったのち重合せしめる場合の不飽和カルボン酸
塩水溶液の濃度に５〜９゜ｗｔ％、好ましくは２０〜５
０　ｗｔチ、より好ましくは２５〜４０　ｗｔ％である
。また反応開始時の系の温度ｒｌｃＯ〜８０℃、好まし
くは４０〜８０℃、より好ましくは５０〜７Ｑ’Ｃであ
る。ラジカル開始剤としては用いた溶媒に可溶であｎば
ｚく、過硫酸カリウム、過硫酸アンモニウムなどが好適
に用いらｎる。重合にあたってチオグリコール酸、β−
メルカプトプロピオン酸、メルカプトエタノール等の連
鎖移動剤全適宜用いてもよい。

なお、重合体の平均分子量はポリエチレンオキサイドに
換算した分子量として１０００以上であることが好まし
い。

不飽和カルボン酸重せ体を得たのち、該重合体又はその
水溶液にアルカリ金属水溶液を添加反応させる場合の不
飽和カルボン酸水溶液濃度は５〜９０　ｗｔチ、好まし
くは２０〜５０　ｗｔチ、より好ましくは２５〜４０　
ｗｔ％である。反応温度、ラジカル開始剤、連鎖移動剤
、平均分子量についても不飽和カルボン酸塩重合体を得
る場合と同様の条件、反応物上使用することができるが
、重合速度は一般的に速くなる為、ラジカル開始剤量、
反応温度を若干温和な重合条件となるよう設定する必要
がある。又重合終了後、重合を水溶液で行った場合は、
アルカリ金属水溶液を添加して塩全形成させる。

こ扛らの方法で得らｎる組成物に、重合開始剤、未反応
モノマー等が含有さｎており血液抗凝固性に好ましくな
い影響を及ぼす為、得らｎた重合体上精製しなければな
らない。

精製法としては、メタノール等の該重合体の非溶媒へ、
該重合体水溶液を徐々に滴下して重合体を析出させて分
取し、好ましくはさらに非溶媒で洗浄後乾燥する方法を
とることができる・乾燥後の重合体中の残存非溶媒は１
．　Ｏｗｔ％以下であることが好ましい。

〔実施例〕

以下、実施例を用いて本発明をさらに説明する。

実施例において抗凝固性能についてｆｌ、（１）血液抗
凝固剤の１０　ｗｔ％水溶液αＱ５ｍＡｋ試験管に入社
、こｎに鮮血ｔ−１，０ｍＡ加え数回振ってよく混和し
た後装置する。（２）５分間隔で３０分まで凝固の有無
全目視する。（３）凝固しなかった血液についてに光学
顕微鏡により血球、血小板の形態の変形の７に無につい
て調べる。という方法をとった。

実施例１ 蒸留水２〇−中にアクリル酸７．２ｆｒ（０１０モル）
七加え、チオグリコール酸をα２２ｆｒ添加した。この
水溶液へ窒素雰囲気下に於て過硫酸カリウム［ＬＯＯ７
２ｆｒｉ添加し、５０℃に昇温する事により重合を開始
せしめた。６０分間、５０℃の反応温度を維持し友のち
冷却した。この重合体水溶液に苛性ソーダ４．４ｆｒ（
（１１１モル）を蒸留水２０ｍ１Ｋ溶解した水溶液を水
冷下添加し中和・変性した。この重合体水溶液１０ｄｉ
メタノール２０〇−中に徐々に滴下し含有さｎている苛
性ソーダ変性ポリマーを析出させ、分離したのち５０℃
で減圧乾燥し残存メタノールを除去した。

この電合体の分子墓ｔゲルパーミエイションクロマトグ
ラフイーにより測定したところ、ポリエチレンオキサイ
ド換算分子量で４，８万であった。又・乾燥重合体中の
残存メタノール量をガスクロマトグラフィーにより測定
し九とζろα０８　ｗｔ％であった。

この重合体に蒸留水を加え均一に溶解・混合し１０　ｗ
ｔ％濃度の水溶液を得た。この水浴液α０５，１１Ｇ、
（Ｌ２Ｃ１ｄｇそｎぞｎ試験管に採取し、鮮血約１．５
ｄ′ｔ−加え、混和後装置し、５分間隔で３０分間観察
したところ、いずｎの場合も凝固しなかった。まｔ、光
学顕微鏡により形態観察上行ったところ赤血球・白血球
・血小板などに変化は認めら牲なかった。

実施例２ 蒸留水２０＋ｄ中にメタクリル酸ａ　６　ｆｒ（１１０
モル）ｔ−加え、メルカプトエタノール（ＬＯ１６ｆｒ
添加した。ここへ苛性ソーダ４、Ｑ　ｆｒ（（１１０モ
ル）全蒸留水１０−に溶解した水溶液を添加し中和しｔ
ｏこの水溶液へ、窒素雰囲気下に於′Ｃ過硫　　　　□
酸カリウムｌ１ｏ１０ｆｒ　を添加し、５０℃に昇温す
る事により重曾七開始せしめた。６０分間、５０℃の反
応温度を維持したのち冷却した。

この重合体水溶液１０ｄｉメタノール２００−中に徐々
に滴下し、含有さｎているポリメタクリル酸の苛性ソー
ダ変性ポリマーを析出させ分離したのち、５０℃で減圧
乾燥し残存メタノール會除去した〇 この重合体の分子量全ゲルパーミエイションクロマトグ
ラフィーにより測定したところ、ポリエチレンオキサイ
ド換算分子量で５３万であつた。又、乾燥重合体中の残
存モノマーに、ガスクロマトグラフによる測定でα０１
　ｗｔ％であり、残存メタノール量はα０６ｗｔチであ
った。

この重合体に蒸留水を加え均一に溶解・混合し、１０　
ｗｔ％濃度の水溶液を得た。この水溶液α０５．ＣＬｌ
ｏ、１２０ｄｌ−そｎぞれ試験管に採取し、鮮血約１．
５ｄｉ加え混和後装置し５分間隔で観察したところ、１
時間経過しても凝固は認めらｎなかった。又、光学顕微
鋺により形態観察を行ったところ赤血球・白血球・血小
板などに変化は認めらｎなかった。

重合体水溶液α０５−添加した場合について、自動血球
測定機にかけ、赤血球・白血球・血小板・ヘマトクリッ
ト値を求め第１表の結果を得た。、得られ比重合体水溶
液は市販の血液抗凝固剤と同様に血液に対し優ｎた抗凝
固性を示すことが判った。

第　　１　　表 実施例５ 実施例１と同様にして、ただし不飽和カルボン酸、アル
カリ金属の種類と量ｔかえて行つ几結果を表２にまとめ
友。

第　　２　　表 表２において、○は凝固、血球形態変形、ローリング混
和１５分間行った場合の溶血がない事を示す。抗凝血剤
便用量に血液１ｗｔに対し４ｍＷ　　とした口 ＡＡニアクリル酸 ＭＡＡ：メタクリル酸 工ＴＡ：イタコン酸 Ｃ！ＲＡ：クロトン酸 比較例１ 市販のポリアクリル酸ナトリウム（重合度２７００〜７
５００）＠蒸留水で稀釈し、ポリアクリル酸の１ｏ　ｗ
ｔ％水溶液を作成した。この水浴液（１０５−會試験管
にと９、鮮血１．０ｓＱ−加え静置した。１０分後に凝
固した。

比較例２ 市販の抗血液凝固剤’ｊ（２ｍ？　　試験言に採取し、
鮮血１．Ｑｄｉ加えた。この試料について実施例３で行
ったローリング混和Ｑ１５分間行ったところ溶血した◎ 実施例４ アクリル酸メチル４３　ｆｒ（（１５モル）にチオグリ
コール酸２．１５ｆｒ添加し、６０℃攪拌下でかつ窒素
雰囲気下に於てアゾビスイソブチロニトリルα４３　？
ｒｆ添加して重合を開始せしめ次。

この反応液９．０３１Ｆｒｉ採取し、苛性ソーダ＆０ｆ
ｒ（（１１２５モル）を水２０−に溶解させたものを添
加反応させて、均一な水浴液を得た。この水溶液全メタ
ノール２０ロー中に徐々に滴下し、アルカリ加水分解さ
ＴＬ几ポリアクリル酸ソーダを析出させ分離したのち５
０℃で減圧乾燥し残存メタノール全除去した〇 この重合体の分子量會ゲルパーミエイションクロマトグ
ラフイーにより測定し九ところ、ポリエチレンオキサイ
ド換算分子量で４，６００”ｔ’あった。又、乾燥重合
体中の残存メタノール量をガスクロマトグラフィーによ
り測定すると、α０６　ｗｔ％であった。

この重合物に蒸留水を加え、均一に溶解・混合し、１０
　ｗｔ％濃度の水浴液を得た。この水浴液α０４−を試
験管に採取し、鮮血約ｔｏ１１ｔ１ｉ−加え混和後装置
し、５分間隔で３Ｄ分間観察し次ところ・凝固灯認めら
ｎなかった。ま危元学顕微鏡により形態を観察し友とこ
ろ赤血球・白血球・血小板などに変化に認めら牡なかっ
た。

実施例５ 蒸留水２ｎｄ中にメタクリル酸＆６ｆｒ（１１０モル＞
′ｔ−加え、メルカプトエタノールα０１２ｆ　ｒｓ苛
性ソーダ４．０ｆｒ（１１０モル）全添加し中和した。

ここへメタクリル酸メチルＡＯｆｒ（αＯｓモル）を加
え窒素雰囲気下に於て過硫酸カリウム（ＬＯ１０ｆｒＱ
添加する事により重合を開始せしめ友。反応温度は５０
℃で５時間維持した。

この重せ体水溶液１０−をメタノール２０ロー中に徐々
に滴下し含有されているポリメタクリル酸の苛性ソーダ
変性ポリマーとポリメタクリル酸メチルとの共重会物全
析出せしめた。析出したポリマーｔ５０℃で減圧乾燥し
、残存メタノールを除去した・ この重合体の分子量にポリエチレンオキサイド換算で１
．２万であり乾燥重合体中の残存メタノールはα０７　
ｗｔ％であった。この重合体に蒸留水を加え５　ｗｔ％
濃度の水溶液を得比。この水溶液α１０−を試験管に採
取し、鮮血約１．　ＯＷｌｔｔ加え混和後静置して５分
間隔で観察し、１時間経過しても凝固は認めらｎなかっ
た。又、光学顕微鏡にＪ：９血液の形態観察を行ったと
ころ赤血球・白血球・血小板の変化に認めらｎなかった
Ｏ 〔発明の効果〕 不発明の抗血液凝固剤は化学工業製品である重分性有機
酸とアルカリ金属とを用いて簡単に合成することができ
、従来の抗血液凝固剤に較べ安価であり、かつ充分な血
液凝固性を示し、血球形態変形をおこさず、しかも混和
に対して安定であるという特徴を有する。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １乃至３個のカルボン酸基を有する炭素数１〜２０の脂
   肪族又は芳香族の不飽和カルボン酸の重合体のアルカリ
   金属又はアルカリ土類金属塩を主成分とする血液抗凝固
   剤。