JPS61189290A - 新規なシスタノサイド類及びその製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は肉孫蓉の構成成分であシ、文献未記載の新規な
化合物であるシスタフサイド類及びその製法に係る。

本発明によるシスタフサイド類は抗ストレス作用を有す
る低毒性物質であり、従って医薬として有用である。

（従来の技術） 肉菱蓉は中華人民共和国の最古の本草書である「神農本
草経」にも収載されているように、古来から利用されて
来た生薬の１つであり、補養、強壮生薬として肉菱蓉丸
、還少丹、菱蓉潤腸丸等の漢方処方に用りられ、又単独
で或いは他の生薬類と共に薬用酒に用いられておシ、今
日においても貴重な築材とさ、れている。

肉葵蓉とは、ハマウッが科の寄生植物であって中華人民
共和国、七ンゴル人民共和国及びシベリア地方に産する
ホンオニク〔Ｃ１５ｔａｎｃｈｅ　＠ＩＬＩＩＩＩＬ”
（Ｃ，Ａ、ＭＩＬｙ、　）　Ｇ、Ｂｅｅｋ　）の全草を
乾燥したものを本来相称するものであるが、その同属植
物である０１ｇｔａｎｅｈｓ　ｄａｍｓｒｔｉｃｏｌａ
”　Ｙ＠　Ｃ＊　Ｍａ、　”Ｃｌａｔａｎｃｈａａｍｂ
ｉｇｕａ’　（Ｂｇｅ、）　Ｇ、　Ｂｅａｋ及び’Ｃ１
ｓｔａｎｃｈＣ１５ｔａｎｃｈｅ’　Ｇ、　Ｂａｃｋも
肉提蓉の基源植物とされている（″′中中太大辞典及び
馬敏泉、”内蒙古大学学報（自然科学）”、第６９頁、
１９７７年）。

一方ハマウツ？科の寄生植物であるオニク（”Ｂｏｍｅ
ｈｎｌａｋｌａ　ｒｏｇａｌａａ”　Ｆｅｄｔｉｃｈ、
　ａｔ　Ｆｌｅｒｏｖ　）は和産肉薇蓉又は草菱蓉と称
されて肉提蓉と同様の目的で用いられることもある。

肉提蓉の薬理乃至生理学的作用については血圧降下作用
（中国医学科学院″１９５６年輪文報告会論文摘要■”
第７０頁、１９５６年）及び唾液分泌促進作用（“中駒
研究文献摘要”第２５９頁、１９７５年）が知られてお
り、又肉提蓉の構成成分についてはアルカロイドや結晶
性物質の存在が報告されて来ているが、その詳細は未だ
不明の侭であシ、解明されるには至っていない。

一方、本発明によるシスタフサイド類と化学構造的に類
似する既知化合物としては、一般式で示されるフェニル
プロノナノイド配糖体類がある。

上舵式■の化合物において、Ｒ１及びＲ３が共にハイド
ロキシ基であシ　Ｒ２がβ−Ｄ−グルコピラノシル基で
あり　、　Ｒ４が水素原子である化合物はエチナ；サイ
ドと称され、又Ｒ１及びＲｓが共にハイドロキシ基であ
・Ｊ）％Ｒ２がβ−Ｄ−アビオシル基であり、Ｒ４が水
素原子である化合物はフォルシソサイドＢと称されてお
シ、共に抗菌作用を有してぃゐことが報告され（それぞ
れ、　Ａ、　５ｔｏｌ１等、″Ｈ＠ｌｙ、　Ｃｈｉｍ、
　Ａｏｔａ”　　第２３８頁、１９５０年及び遠藤等「
日本生薬学会館２８年会講演要旨集」第２０頁、１９８
１年参照）、Ｒ１及びＲ５が共にハイドロキシ基であり
且つＲ２及びＲ４が共に水素原子である化合物はアクチ
オサイドと称されており抗腫瘍作用を有していることが
報告されている（沼田等「日本薬学会近畿支部第３３回
総会講演要旨集」第７６頁、１９８３年）。またＲ　　
、Ｒ及びＲ４がハイドロキシ基であり、Ｒ２が水素原子
である化合′物はオワバンチ。サイドと称されていて前
記アクチオサイドと共に抗ノ４−キンソニズム作用及び
β−遮断作用を有していることが報告されている（西ド
イツ特許出願公開第２６０９５３３公報、１９７６年）
。

（発明が解決しようとする問題点） 上記の肉提蓉に関する薬理乃至生理作用即ち血圧降下作
用及び唾液分泌促進作用や、上記の公知フェニルゾロパ
ノイド配糖体が有している上記の各種薬理作用は、肉提
蓉の伝承的な効能即ち「五労七傷」とはニーアンスを異
にするようである。

即ち、肉提蓉のこの伝承的効能とは各種ストレスによる
生体臓器の機能低下や精神的疲労に起因して生ずる諸症
状を治癒することを相称するものと解釈されるからであ
る。

社会機構が益々複雑化し、技術革新が極めて急速に進行
しつつある現代はストレス過剰時代と称されており、こ
のような状況下に社会生活を健全に営んで行く上で抗ス
トレス作用物質は極めて有用であり、従って本発明はと
のような有用物質を肉提蓉から見出すことを課題として
いる。

（問題点を解決するための手段及び作用）構成成分につ
いて不明な点が多かった肉提蓉に関して、本発明者等は
鋭意研究を行ガった結果、Ｄ−マンニトール、β−シト
ステロール、β−シトステロール−β−Ｄ−グルコサイ
ド、コハク酸、８−エビロガニン酸、２′−アセチルア
クチオサイド、オスマンスサイドＢ、アクチオサイド、
エチナコサイド等の公知化合物の他に８−ハイドロキシ
クラニオ−ルー１−β−Ｄ−グルコサイド、シスタニン
、シスタフロリン等の新規化合物の存在が明らかにされ
ると共に（小林弘美等「薬学雑誌」第ｉｏｓ巻、第５０
８頁、１９８３年、’Ｃｈｅｍ。

Ｐｈａｒｍ、　Ｂｕｌｌ、’第３２巻、第１７２９頁、
１９８４年並びにｌｄｅｍ、　１ｂｉｄ、”第３２巻、
第３００９及び３８８０頁、１９８４年）、本発明によ
る下記の式Ｉにて示されゐ新規彦シスタノサイド類の存
在が判明した（　Ｈ，Ｋｏｂａ７ａｓｈｉ等″Ｃｈｅｍ
、　Ｐｈａｒｍ。

Ｂｕｌｌ、”第３２巻、第３００９及び３８８０頁、１
９８４年）。

（式中、Ｒ４は水素原子又はメチル基を意味し、Ｒ２Ｑ
　− は水素原子又はβ−Ｄ−グルコ♂ラノシル基を意味する
） 式■にて示される、本発明によるシスタフサイド類は次
の４種の化合物である。

（３）　　シスタノサイドＣ：　（Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ）式
Ｉで示されるこれらの本発明によるシスタフサイド類と
式■で示される公知のフェニルプロパノイド配糖体との
差異は、化学構造上では式■の公知配糖体においては置
換基Ｒ５が水素原子又はハイドロキシ基であるのに対し
て、本発明によるシスタフサイド類では和尚する置換基
がメトキシル基である点であり、一方薬埋作用上では式
■の公知配糖体について抗菌、抗腫瘍、抗パーキンソニ
ズム作用又はβ−遮断作用が知られているのに対し本発
明によるシスタフサイド類は肉提蓉の伝承的薬理作用と
も云うべき抗ストレス作用を有する点である。

本発明方法によれば、式ｒにて示されるシスタフサイド
類は肉提蓉を溶媒抽出し、得られた抽出物又はそのｎ−
ブタノール可溶部をスチレン系非極性吸着樹脂処理し、
ポリアミドカラム処理し、得られた粗シスタノサイド類
混合物をカラムクロマトグラフ処理により分画して単離
精製することにより製造することができる。

本発明方法において、溶媒として水、有機溶媒及び含水
有機溶媒を用いることができる。有機溶媒としては高極
性のもの、例えばメタノール、エタノール、プロパノー
ル、アセトンが有利である。

含水有機溶媒の場合には有機溶媒濃度が３θｖ／ｖチ程
度又はそれ以上のものが好ましい。原料の肉菱蓉は細切
した上で或いは常法により脱脂した上で抽出に供され、
この場合４〜１０倍量の上記抽出溶媒を用いることがで
きる。

抽出時間は用いられる抽出溶媒の種類や温度条件等によ
って異なるが、細切した肉提蓉に対して４倍量のメタノ
ールを用い加熱還流下で抽出処理を行なう場合には約２
時間宛でこれを２〜３回繰り返すのが適箔である。各抽
出終了後に常法により濾過して得た抽出液を合併し、抽
出溶媒を除去すれば粗抽出物が得られる。抽出溶媒を除
去するには慣用の濃縮方法、例えば減圧濃縮法、噴霧乾
燥法等を用いることができる。得られた粗抽出物中には
糖質、脂質、着色物質等が含まれているので、粗抽出物
を水に懸濁させ、低極性有機溶媒で処理して先ず脂質を
除去する。この場合の低極性有ｉ溶ａとしてはヘキサン
、ベンゼン、エーテル、酢酸エチルエステル等を例示す
ることができるが、酢酸エチルエステルを用いるのが好
ましい。次いで水層をその侭、又はｎ−ブタノールで処
理したその可溶部を非極性吸着樹脂で処理して主に糖質
及び着色物質を除去する。この非極性吸着樹脂としては
、スチレン系のもの例えばスチレン−ジビニルベンゼン
共重合体からなる多孔質体が好ましく、具体的な市販品
としてはダイヤイオンＨＰ−シリーズ（三菱化成工業株
丈会社製）、アン・々−ライト　ＸＡＤ　−２（ローム
・アンド・ハース社製）等を例示することができる。乙
の処理は吸着樹脂を充填し九カラムに通液して行なわれ
るが、ｎ−ブタノールで処理した場合にはｎ−ブタノー
ルを留去した後に水に溶解させた液が上記カラムに通さ
れる。この処理において目的とするシスタフサイド類は
樹脂に吸着され、一方糖質、着色物質などは吸着されず
に流過され、カラムの水洗により除去することができる
。樹脂に吸着されたシスタフサイド類は低級アルコール
又は含水低級アルコ１Ｑ− 一ルを用いて溶出させることができる。この場合の溶出
溶媒としては、５０　ｖ／ｖ％以上のメタノールが好ま
しｂｏ シスタフサイド類のようなフェノール基含有化合物は選
択的に効率よくポリアミドに吸着されるので、上記溶出
液の溶媒を常法により除去した後にポリアミド充填カラ
ムで処理する（この場合のポリアミドとしては例えば和
光純薬工業株式会社製のＣ−２００を挙げることができ
る）。次いで水洗により不要物を流過させた後に、低級
アルコールまたは含水低級アルコール（例えば２０　ｖ
／ｖ％以上のメタノール）にて吸着物を溶出させる。と
の溶出液の溶媒を常法により除去すれば、白色粉末状の
粗シスタノサイド類混合物が得られる。

この粗シスタノサイド類混合物に関して下記条件で薄層
クロマトグラフ（ＴＬＣ）分析を行なった結果は添附図
面に示される通りであった。

薄層板　　：　シリカグル　６ｏｌ−、ｒ＋（メルク社
製）発色法：　２θｖ／ｖ　％硫酸水溶液の噴霧後に１
０５℃に加熱添附図面に示されるＴＬＣダラムから明ら
かなようＫ、粗シスタノサイド類混合物には本発明によ
るシスタノサイドＡ、Ｂ、Ｃ及びＤ（図中の２゜４．５
及び８）の他にエチナコサイド（１）、アクチオサイド
（３）、２′−アセチルアクチオサイド（６）及びオス
マンスサイドＢ（７）が含有されている。

前記ポリアミドカラムからの溶出液をシリカダルカラム
クロマトグラフ処理し、図面に示されるＴＬＣクラムヲ
指標としクロロホルムと低級アルコールと水との混合溶
媒、好ましくはクロロホルム・メタノール・水（６：４
二１）混合物を用いて各シスタノサイドを溶出させて下
記フラクション１゜２．３及び４を得る。

フラクション１：シスタノサイドＤ フラクシヨン２：シスタノサイドＣ フラクシ、ン３：シスタノサイドＢ フラクション４：シスタノサイドＡ 各フラクシ、ンを再度シリカゲルカラムクロマトグラフ
処理し、上記と同様の混合溶媒を用いて溶出させること
により精製する。但し、この場合にフラクション１及び
２用の溶出溶媒としてはクロロホルム・メタノール・水
（ｖｏ：２ｏ：ｘ）が好捷しく、フラクション３及び４
用の溶出溶媒としてはクロロホルム・メタノール・水（
１４：６：１）が好ましい。

更に得られた各溶出画分につき非極性吸着樹脂（例えば
ファルマシア・ファインケミカルオ社製のセファデック
スＬＨ−，？１７）を用い九カラムクロマトグラフ処理
による精製を行々って、低級アルコールと水との混合溶
媒、好ましくはメタノール・水（１：１）により分画溶
出させ、次いで溶媒を除去すれば所望の各シスタノサイ
ドが白色粉末として得られる。

（実施例等） 次に実施例に関連して本発明方法を具体的に説明するが
、実施例により得られた本発明によるシスタフサイド類
の物理化学的諸性質は下記表１〜表４に示される通りで
あった。

実施例１ 肉提蓉（中国産市場品）１０ｋｇを細切し、メタノール
３６１を添加し、加熱還流下で２時間ずつ２回抽出し、
抽出液を合併して減圧濃縮し、粗抽出物４．５に９を得
た。粗抽出物を水１．５１に懸濁し、酢酸エチルエステ
ル３１ずつで２回洗浄し、次いで水層部をｎ−ブタノー
ル３１ずつで２回抽出し、ｎ−ブタノール層を合併して
減圧濃縮し、ｎ−ブタノール可溶部３θ０１を得た。こ
れを水５１に溶解してダイヤイオンＨＰ−２０を２１充
填したカラムに通導し、水２０１で洗浄したのち、吸着
部をメタノール１０！で溶出し、ダイヤイオン吸着部７
５１７を得だ。次いでダイヤイオン吸着部を水ｓ　ｏ　
ｏｒｎｌに溶解し、ボリアずドＣ−２００を１ゆ充填し
九カラムに通導し、水３１で洗浄したのちメタノール５
ノで溶出し、籾シスタノサイド類混合物４０１１を得た
。次に粗シスタノサイド類混合物をワコーダルＣ−３０
０を５ｏｏｉ充填し九カラムクロマトグラフィーに付し
、ＴＬＣを指標としてクロロホルム・メタノール・水（
６：４：１）で溶出し、フラクション１〜４０４分画を
得た。

フラクション１および２につきそれぞれワコーグルｃ−
ｓｏｏを２００１１充填したカラムクロマトグラフィー
に付し、クロロホルム・メタノール・水（７０：２０：
１）で分画溶出し、次いで、セファデックスＬＨ−２０
を１００９充填し九カラムクロマトグラフィーに付し、
水・メタノール（１：１）で分画溶出して精製し、フラ
クション１からシスタノサイドＤ（ｐｓｏｍｐ）、フラ
クション２からシスタノサイドＣ（３，５ｇ）を得た。

さらに、フラクション３および４については、それぞれ
ワコーグルｃ−ｓｏｏを５ｏｏｉ充填しだカラムクロマ
トグラフィーに付し、クロロホルム−メタノール−水（
１４：６二１）で分画溶出し、次いでセファデックスＬ
Ｈ−２０を１００ｇ充填したカラムクロブトグラフィー
に付し、水・メタノール（Ｚ：Ｊ）で分画溶出して精製
し、フラクション３からシスタノサイドＢ（２００〜）
、フラクション４からシスタノサイドＡ（８，５１１）
を得た。　　゛ 実施例２ 肉荏蓉（中国産市場品）　Ｊ　ｏｋｇを細切し、５０ｖ
／ｖ％エタノールで２時間ずつ２回湛浸（７０〜８０℃
）し、浸出液を合併して減圧濃縮し、粗抽出物４．２に
９を得た。粗抽出物を水１．５１に懸濁し、酢酸エチル
エステル３１ずつで２回洗浄した。次いで水層部をｎ−
ブタノール３１ずつで２回抽出し、ｎ−ブタノール層を
合併して減圧ａ縮し、ｎ−ブタノール可溶部２８５ｇを
得た。これを水５１に溶解してダイヤイオン■Ｐ−２０
を２ノ充填し九カラムに通導し、水２０７３で洗浄した
のち、吸着部をエタノール１０１で溶出し、ダイヤイオ
ン吸着部６３ｇを得た。次いでダイヤイオン吸着部を水
５００ｍ１に溶解し、ポリアミドＣ−２００を１に＋７
充填したカラムに通導し、水３１で洗浄したのちエタノ
ール５１Ｉで溶出し、籾シスタノサイド類混合物ｓｓｇ
を得た。以下実施例１と同様な方法で処理することによ
りシスタノサイドＡ８．３１１、シスタノサイドＢ２１
０■、シスタノサイドＣＢ、２１１、シスタノサイドＤ
２００ｍ９が得られた。

実施例３ 肉提蓉（中国産市場品）ｚｏｋｇを細切し、メタノール
３６ノを添加し、加熱還流下で２時間ずつ２回抽出し、
抽出液を合併して減圧濃縮し、粗抽出物４．６に９を得
た。粗抽出物を水１．５１に懸濁し、酢酸エチルエステ
ル３ノずつで２回洗浄した。次に水層部に水４１を加え
、ダイヤイオンＨＰ−２０を２ノ充填したカラムに通導
し、水３０１１で洗浄したのち吸着部をメタノニル１０
１で溶出し、ダイヤイオン吸着部８２１１を得た。以下
、実施例１と同様な方法で処理することによりシスタノ
サイドＡ９．２１１．シスタノサイドＢ２４０■、シス
タノサイドＣ３，６１１、シスタノサイドＤ２４５■が
得られた。

【図面の簡単な説明】

図面は本発明方法の実施途次で得られる粗シスタノサイ
ド類混合物の薄層クロマトグラムである。 １：エチナコサイド ２：シスタノサイＰＡ ３：アクテオサイド ４：シスタノザイドＢ ５：シスタノザイドＣ ６：２′−アセチルアクチオサイド ７：オスマンスサイドＢ ８：シスタノサイドＤ 特許出願人　　養命酒製造株式会社 手続補正書 昭和６０年７月１５日 特許庁長官　宇　賀　　道　部　殿 １、事件の表示 昭和６０年特許願第２９３３５号 ２、発明の名称 新規なシスツノサイド類及びその製法 ３、補正をする者 代表者　　塩　澤　護 ４、代理人〒１０５ 明細書の発明の詳細な説明の欄 ６、補正の内容 （１）明細書節７亘第７−１−０行に「またＲ１−−−
アクチオサイドと共に」とあるをｒまた前記アクチオサ
イドは」と補正する。

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. （１）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒ＿１は水素原子又はメチル基を意味し、Ｒ＿
   ２は水素原子又はβ−Ｄ−グルコピラノシル基を意味す
   る） にて示される新規なシスタノサイド類。
2. （２）Ｒ＿１が水素原子であり、Ｒ＿２がβ−Ｄ−グル
   コピラノシル基である、特許請求の範囲第１項に記載の
   シスタノサイド。
3. （３）Ｒ＿１がメチル基であり、Ｒ＿２がβ−Ｄ−グル
   コピラノシル基である、特許請求の範囲第１項に記載の
   シスタノサイド。
4. （４）Ｒ＿１及びＲ＿２が共に水素原子である、特許請
   求の範囲第１項に記載のシスタノサイド。
5. （５）Ｒ＿１がメチル基であり、Ｒ＿２が水素原子であ
   る、特許請求の範囲第１項に記載のシスタノサイド。
6. （６）肉■蓉を溶媒抽出し、得られた抽出物又はそのｎ
   −ブタノール可溶部をスチレン系非極性吸着樹脂処理し
   、ポリアミドカラム処理し、得られた粗シスタノサイド
   類混合物をカラムクロマトグラフ処理により分画して単
   離精製することを特徴とする、式 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒ＿１は水素原子又はメチル基を意味し、Ｒ＿
   ２は水素原子又はβ−Ｄ−グルコピラノシル基を意味す
   る） にて示される新規なシスタノサイド類の製法。
7. （７）抽出溶媒が水、極性有機溶媒及び含水極性有機溶
   媒から選ばれることを特徴とする、特許請求の範囲第６
   項に記載の製法。
8. （８）極性有機溶媒が高極性のものであり、メタノール
   、エタノール、プロパノール及びアセトンから選ばれる
   ことを特徴とする、特許請求の範囲第６又は７項に記載
   の製法。