JPS61176534A - 避妊用剤 - Google Patents
避妊用剤Info
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- JPS61176534A JPS61176534A JP1445085A JP1445085A JPS61176534A JP S61176534 A JPS61176534 A JP S61176534A JP 1445085 A JP1445085 A JP 1445085A JP 1445085 A JP1445085 A JP 1445085A JP S61176534 A JPS61176534 A JP S61176534A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明はヒト又は他の動物の避妊用剤に関する。
詳しくは動物細胞より得られヒマ凝集素（Ｒｉｃｉｎｕ
ｓＣｏａ＋５ｕｎｉｓ Ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ、以下Ｒ
ＣＡという）などのレクチンに対するレセプターとして
精製された糖タンパク質を抗原とし、これに対する抗体
を作成し、この抗体を有効成分として用いることを特徴
とする避妊用剤に関する。
ｓＣｏａ＋５ｕｎｉｓ Ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ、以下Ｒ
ＣＡという）などのレクチンに対するレセプターとして
精製された糖タンパク質を抗原とし、これに対する抗体
を作成し、この抗体を有効成分として用いることを特徴
とする避妊用剤に関する。
従来の技術
従来、避妊の方法として、コンドーム、ペンサリー、Ｉ
ＵＤ（子宮避妊器具）などの器具や、クリーム、ゼリー
などの殺精子剤、経口避妊薬などの薬剤が用いられてい
る。また免疫学的方法もあるが（例えば特開昭５５−１
６７２５号参照）これはまだ実用されていない。
ＵＤ（子宮避妊器具）などの器具や、クリーム、ゼリー
などの殺精子剤、経口避妊薬などの薬剤が用いられてい
る。また免疫学的方法もあるが（例えば特開昭５５−１
６７２５号参照）これはまだ実用されていない。
発明が解決しようとする問題点
前述の避妊方法のうち経口避妊薬が最も失敗率が少ない
とされている。しかしこのものは血液凝固や肝機能障害
などの副作用がある場合もあり、慎重な使用が必要であ
る。ＩＬ）Ｄも失敗率は小さいが帯下、月経量増加、脱
落などの欠点がある。その他の方法は失敗率がかなり太
き（組み合わせて用いることによりその減少がはかられ
ている。
とされている。しかしこのものは血液凝固や肝機能障害
などの副作用がある場合もあり、慎重な使用が必要であ
る。ＩＬ）Ｄも失敗率は小さいが帯下、月経量増加、脱
落などの欠点がある。その他の方法は失敗率がかなり太
き（組み合わせて用いることによりその減少がはかられ
ている。
避妊方法を大別すると受精を防止する方法と受精卵の子
宮内への着床を防止する方法に分かれる。多くの器具や
薬剤は前者の方法によるものであり、後者の方法は少な
く最も代表的なものはＩＵＤである。
宮内への着床を防止する方法に分かれる。多くの器具や
薬剤は前者の方法によるものであり、後者の方法は少な
く最も代表的なものはＩＵＤである。
薬剤で後者の方法によるものはその例に乏しい０本発明
者は後者の方法による薬剤が得られればその作用機序が
通常の薬剤と異なるので極めて有用であるとの着想より
鋭意研究の結果本発明を完成するに到った。
者は後者の方法による薬剤が得られればその作用機序が
通常の薬剤と異なるので極めて有用であるとの着想より
鋭意研究の結果本発明を完成するに到った。
問題点を解決するための手段
発生生物学的研究において、マウスの胚盤胞を１ｎｖｉ
ｔｒｏで培養すると、栄養外胚葉が伸展して基質として
のプラスチックシャーレに接着することが知られており
、このｉｎ ｖｉｔｒｏにおける栄養外胚葉の伸展は初
期胚の着床のモデルとされている（たとえばＤｅｖｅｌ
ｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ、６８．４５３〜４
６１ 、１９７９およびＪ。
ｔｒｏで培養すると、栄養外胚葉が伸展して基質として
のプラスチックシャーレに接着することが知られており
、このｉｎ ｖｉｔｒｏにおける栄養外胚葉の伸展は初
期胚の着床のモデルとされている（たとえばＤｅｖｅｌ
ｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ、６８．４５３〜４
６１ 、１９７９およびＪ。
Ｃｅ１ｌ Ｂｉｏｌ、、 ９６．１１０８〜１１１６．
１９８３を参照）。本発明はこの正常胚を用いたモデル
実験系を利用して、栄養外胚葉の基質への伸展を阻害す
る物質について研究を行った成果である。本発明者はこ
の伸展を阻害する物質として各種細胞成分に対する抗体
を種々スクリーニングした結果８、驚くべきことに腫瘍
細胞であるテラトカルシノーマ細胞やＦ９およびＮ４−
１のような胚性癌腫細胞のプラスチックシャーレへの接
着を妨害する抗体が、正常マウスの栄養外胚葉の基質へ
の伸展をも阻害することを見い出し本発明に到達した。
１９８３を参照）。本発明はこの正常胚を用いたモデル
実験系を利用して、栄養外胚葉の基質への伸展を阻害す
る物質について研究を行った成果である。本発明者はこ
の伸展を阻害する物質として各種細胞成分に対する抗体
を種々スクリーニングした結果８、驚くべきことに腫瘍
細胞であるテラトカルシノーマ細胞やＦ９およびＮ４−
１のような胚性癌腫細胞のプラスチックシャーレへの接
着を妨害する抗体が、正常マウスの栄養外胚葉の基質へ
の伸展をも阻害することを見い出し本発明に到達した。
この抗体は動物細胞より得られる糖タンパク質をＲＣＡ
を吸着させたアガロースを用いてアフィニティークロマ
トグラフィーにより分離精製したＲＣＡ レセプター糖
タンパク質を抗原とし動物に免疫して得られる抗体であ
る。本発明はこの抗体を有効成分として含有することを
特徴とする避妊用剤である。以下さらにこれを詳述する
０本杭体の調製については既に報告した方法（第３６回
日本細胞生物学会大会講演要旨集Ｂ−１１参照）を用い
ることができる。すなわち、適当な動物の腫瘍細胞、例
えばマウスのテラトカルシノーマ細胞株０ＴＴ６０５０
の顆粒画分を２％（Ｗ ／Ｖ） Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１
００で可溶化して得た糖タンパク質をＲＣ′Ａを吸着さ
せたアガロースによるアフィニティークロマトグラフィ
ーにより分離精製しレセプターを取得する。このＲＣＡ
レセプター糖タンパク質の分子量は約１２５．０００で
あり、この物質は細胞の基質への接着成分である。この
ものを抗原とし常法によりウサギなどの適当な動物に免
疫して抗血清を取得し精製して目的とする抗体を得るこ
とができる。動物の腫瘍細胞としてこの他にＦ９及びＮ
４−１のような肝癌腫細胞や胚体外内胚葉細胞株（ＰＹ
Ｓ−２，ＳＴＯ） 、さらに他の動物の細胞を用いるこ
とができる。動物の種の違いにより、得られるＲＣＡレ
セプター糖タンパク質の分子量などは異なるがいずれも
細胞の基質への接着成分である。ＲＣＡはレクチンの一
種である。他にも各種のレクチンがあるが本発明におい
てはＲＣＡが最適である。またダイズ豆凝集素（ＳＢＡ
）も好適である。一方ドリコス凝集素（ＤＢＡ ）や
ビーナツツ凝集素（ＰＮＡ ’）などのレクチンは適当
でない。抗体を得るために用いる動物としては例えばウ
サギ、ヤギ、ヒツジ、ウマなどがよい。ヒトの避妊用剤
には細胞融合法や遺伝子操作法により得られるヒト抗体
が好ましい。本発明においては前記の抗ＲＣＡレセプタ
ー糖タンパク質抗体を避妊用剤の有効成分として使用す
る。避妊用剤の剤型としては一般に用時溶解の注射剤が
適当であるが、膣錠剤、膣坐剤、液剤、ゼリー、軟膏、
クリーム、なども用い得る。
を吸着させたアガロースを用いてアフィニティークロマ
トグラフィーにより分離精製したＲＣＡ レセプター糖
タンパク質を抗原とし動物に免疫して得られる抗体であ
る。本発明はこの抗体を有効成分として含有することを
特徴とする避妊用剤である。以下さらにこれを詳述する
０本杭体の調製については既に報告した方法（第３６回
日本細胞生物学会大会講演要旨集Ｂ−１１参照）を用い
ることができる。すなわち、適当な動物の腫瘍細胞、例
えばマウスのテラトカルシノーマ細胞株０ＴＴ６０５０
の顆粒画分を２％（Ｗ ／Ｖ） Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１
００で可溶化して得た糖タンパク質をＲＣ′Ａを吸着さ
せたアガロースによるアフィニティークロマトグラフィ
ーにより分離精製しレセプターを取得する。このＲＣＡ
レセプター糖タンパク質の分子量は約１２５．０００で
あり、この物質は細胞の基質への接着成分である。この
ものを抗原とし常法によりウサギなどの適当な動物に免
疫して抗血清を取得し精製して目的とする抗体を得るこ
とができる。動物の腫瘍細胞としてこの他にＦ９及びＮ
４−１のような肝癌腫細胞や胚体外内胚葉細胞株（ＰＹ
Ｓ−２，ＳＴＯ） 、さらに他の動物の細胞を用いるこ
とができる。動物の種の違いにより、得られるＲＣＡレ
セプター糖タンパク質の分子量などは異なるがいずれも
細胞の基質への接着成分である。ＲＣＡはレクチンの一
種である。他にも各種のレクチンがあるが本発明におい
てはＲＣＡが最適である。またダイズ豆凝集素（ＳＢＡ
）も好適である。一方ドリコス凝集素（ＤＢＡ ）や
ビーナツツ凝集素（ＰＮＡ ’）などのレクチンは適当
でない。抗体を得るために用いる動物としては例えばウ
サギ、ヤギ、ヒツジ、ウマなどがよい。ヒトの避妊用剤
には細胞融合法や遺伝子操作法により得られるヒト抗体
が好ましい。本発明においては前記の抗ＲＣＡレセプタ
ー糖タンパク質抗体を避妊用剤の有効成分として使用す
る。避妊用剤の剤型としては一般に用時溶解の注射剤が
適当であるが、膣錠剤、膣坐剤、液剤、ゼリー、軟膏、
クリーム、なども用い得る。
薬剤の投与量は注射剤の場合、１回の投与量としては、
本発明の抗体量として０．０１〜３００ ｍｇが適当で
ある。薬剤は子宮内へのカニユーレによる注入が好適で
あるが、場合により局所注射、静注、筋注なども考慮さ
れる。投与回数としては１日１〜６回が好ましい。外用
剤の場合も抗体量として、注射剤と同程度の用量が１回
当たり投与されうる。薬剤の用量及び用法については必
要に応じ、適宜選択されるべきである。本発明の避妊用
剤は安全に使用しうる。
本発明の抗体量として０．０１〜３００ ｍｇが適当で
ある。薬剤は子宮内へのカニユーレによる注入が好適で
あるが、場合により局所注射、静注、筋注なども考慮さ
れる。投与回数としては１日１〜６回が好ましい。外用
剤の場合も抗体量として、注射剤と同程度の用量が１回
当たり投与されうる。薬剤の用量及び用法については必
要に応じ、適宜選択されるべきである。本発明の避妊用
剤は安全に使用しうる。
以下本発明において用いる抗ＲＣＡレセプター糖タンパ
ク質抗体の調製について参考例１により、また各種製剤
について実施例工ないし６によりさらに詳述するが、本
発明はこれらに限定されるものではない。
ク質抗体の調製について参考例１により、また各種製剤
について実施例工ないし６によりさらに詳述するが、本
発明はこれらに限定されるものではない。
参考例１ 抗ＲＣＡレセプター糖タンパク質抗体の調製
そのＩ ＲＣＡレセプター〇ａｉｉ１２９ ／Ｓｖ
マウス腹腔内で増殖させたテラトカルシノーマＯＴＴ
６０５０２４ ｇを１００ｍ１のＤｕｌｂｅｃｃｏ食塩
含有リン酸緩衝液（ＰＢＳ）中でホモジナイズし、１１
０．０００×ｇ１時間遠心した。沈澱を８０ｍ１の２％
（−／Ｖ） Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００，５０ｕｇ／ｍ
ｌフェニルメチルスルフォニルフルオライドを含有する
ｐＨ７，６の食塩加トリス緩衝液（ＴＢＳ、０．１５Ｍ
ＮａＣ１＋１Ｏｎ＋Ｍ ）リス−塩酸緩衝液）に懸濁
し、３０分水冷下で抽出した。１１０．０００ Ｘｇ１
時間遠心後上清を得、これを０．１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ
−１００を含むＴＢＳ緩衝液で平衡化したＤＢＡ−アガ
ロースカラム（１，４Ｘ５．２ ａｍ）およびＰＮＡ−
アガロースカラム（１，４Ｘ５．２ ｃｍ）を素通りさ
せた。次にこの素通り溶液を、同じ緩衝液で平衡化した
ＲＣＡ−Ｉ−アガロースカラム（１，４Ｘ５．２ｃｍ
）に添着し、２００ ｍｌの同緩衝液でカラムを洗った
後に０．１月のラクトースを含有する２０ ｍｌの同緩
衝液でカラムから抗原を溶出した。
マウス腹腔内で増殖させたテラトカルシノーマＯＴＴ
６０５０２４ ｇを１００ｍ１のＤｕｌｂｅｃｃｏ食塩
含有リン酸緩衝液（ＰＢＳ）中でホモジナイズし、１１
０．０００×ｇ１時間遠心した。沈澱を８０ｍ１の２％
（−／Ｖ） Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００，５０ｕｇ／ｍ
ｌフェニルメチルスルフォニルフルオライドを含有する
ｐＨ７，６の食塩加トリス緩衝液（ＴＢＳ、０．１５Ｍ
ＮａＣ１＋１Ｏｎ＋Ｍ ）リス−塩酸緩衝液）に懸濁
し、３０分水冷下で抽出した。１１０．０００ Ｘｇ１
時間遠心後上清を得、これを０．１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ
−１００を含むＴＢＳ緩衝液で平衡化したＤＢＡ−アガ
ロースカラム（１，４Ｘ５．２ ａｍ）およびＰＮＡ−
アガロースカラム（１，４Ｘ５．２ ｃｍ）を素通りさ
せた。次にこの素通り溶液を、同じ緩衝液で平衡化した
ＲＣＡ−Ｉ−アガロースカラム（１，４Ｘ５．２ｃｍ
）に添着し、２００ ｍｌの同緩衝液でカラムを洗った
後に０．１月のラクトースを含有する２０ ｍｌの同緩
衝液でカラムから抗原を溶出した。
これら操作により１ ｍｇのＲＣＡレセプター抗原が得
られた。そのうち０．２ ｍｇを１ｍｌ程度の溶出液中
に溶解、５ｐｅｃｔｒａ ｐｏｒ Ｎｏ、２透析チユー
ブ（Ｓｐｅｃｔｒａ社製）に入れ、４℃で４８時間、あ
らかじめ１０ ｇのＢｉｏ−ＢｅａｄｓＳＭ−２（Ｂｉ
ｏ−Ｒａｄ社製）を懸濁しておいたＰＢＳ ２１に対し
て透析した。
られた。そのうち０．２ ｍｇを１ｍｌ程度の溶出液中
に溶解、５ｐｅｃｔｒａ ｐｏｒ Ｎｏ、２透析チユー
ブ（Ｓｐｅｃｔｒａ社製）に入れ、４℃で４８時間、あ
らかじめ１０ ｇのＢｉｏ−ＢｅａｄｓＳＭ−２（Ｂｉ
ｏ−Ｒａｄ社製）を懸濁しておいたＰＢＳ ２１に対し
て透析した。
その２ 抗ＲＣＡレセプター抗血清の調製その１で得た
透析後のＲＣＡレセプター抗原０．２ ｍｇをフロイン
トの完全アジュバントとともにニューシーラント白ウサ
ギの足随に注射して免疫した。３週間後に同量の抗原を
、そして更に２週間後に、同量の抗原を注射した。その
２週間後に採血して抗ＲＣＡレセプター抗血清を得た。
透析後のＲＣＡレセプター抗原０．２ ｍｇをフロイン
トの完全アジュバントとともにニューシーラント白ウサ
ギの足随に注射して免疫した。３週間後に同量の抗原を
、そして更に２週間後に、同量の抗原を注射した。その
２週間後に採血して抗ＲＣＡレセプター抗血清を得た。
その３ 抗ＲＣＡレセプターＩｇＧ抗体の調製その２で
得た抗ＲＣＡレセプター抗血清をｐＨ７，０の４０％飽
和硫酸アンモニウムで塩析した。得られた沈澱をｐＨ８
，０，５０ｍＭのトリス−塩酸緩衝液に溶解し、同緩衝
液で平衡化したＤＨ−５２セルロースカラムに添着し不
純物を吸着せしめ、ついで同緩衝液で溶出し、抗ＲＣＡ
レセプターＩｇＧ抗体を得た。
得た抗ＲＣＡレセプター抗血清をｐＨ７，０の４０％飽
和硫酸アンモニウムで塩析した。得られた沈澱をｐＨ８
，０，５０ｍＭのトリス−塩酸緩衝液に溶解し、同緩衝
液で平衡化したＤＨ−５２セルロースカラムに添着し不
純物を吸着せしめ、ついで同緩衝液で溶出し、抗ＲＣＡ
レセプターＩｇＧ抗体を得た。
その４ 抗ＲＣＡレセプターＦａｂ抗体の調製Ｐｏｒｔ
ｅｒの方法（Ｂｉｏｃｈｅ＋ｓ、Ｊ、、７３＋１１９〜
．１９５９ ）に従って行った。その３で得たＩｇＧ抗
体を２１１ＩＭのＥＤＴＡおよび１０ ｍＭのシスティ
ンの存在下ｍｅｒｃｕｒｉ−ｐａｐａｉｎ（Ｓｉｇｍａ
社製）を１００ ｍｇのＩｇＧあたり１ｍｇ用いて３７
℃、１６時間消化した。未消化ＩｇＧはセファデックス
Ｇ−１００でのゲル口過により除いた。Ｆｃフラグメン
トは高速遠心で結晶として除いた。未消化ＩｇＧ分子を
含まないことを確認した３ｎ＋ｌのＦａｂ調製物（１０
ｍｇ／ｍｌ ＰＢＳ）を０．３ ｎ＋１のプロティンＡ
−アガロース（Ｚｙｍｓ−ｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅ
ｓ製）と混ぜ４℃で２時間保温した。
ｅｒの方法（Ｂｉｏｃｈｅ＋ｓ、Ｊ、、７３＋１１９〜
．１９５９ ）に従って行った。その３で得たＩｇＧ抗
体を２１１ＩＭのＥＤＴＡおよび１０ ｍＭのシスティ
ンの存在下ｍｅｒｃｕｒｉ−ｐａｐａｉｎ（Ｓｉｇｍａ
社製）を１００ ｍｇのＩｇＧあたり１ｍｇ用いて３７
℃、１６時間消化した。未消化ＩｇＧはセファデックス
Ｇ−１００でのゲル口過により除いた。Ｆｃフラグメン
トは高速遠心で結晶として除いた。未消化ＩｇＧ分子を
含まないことを確認した３ｎ＋ｌのＦａｂ調製物（１０
ｍｇ／ｍｌ ＰＢＳ）を０．３ ｎ＋１のプロティンＡ
−アガロース（Ｚｙｍｓ−ｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅ
ｓ製）と混ぜ４℃で２時間保温した。
この溶液を遠心して、その上清を集め、抗ＲＣＡレセプ
ターＦａｂ抗体とした。
ターＦａｂ抗体とした。
実施例工 注射剤
抗ＲＣＡレセプターＩｇＧ抗体を１％−／Ｖの生理食塩
水溶液とし、これにソルビトールを１：４となるように
混合して３７℃に、４８時間静置した後、ミリポアフィ
ルタ−で除菌口過し゛、１バイアル３ｍｌずつ充填し注
射剤を得た。
水溶液とし、これにソルビトールを１：４となるように
混合して３７℃に、４８時間静置した後、ミリポアフィ
ルタ−で除菌口過し゛、１バイアル３ｍｌずつ充填し注
射剤を得た。
実施例２ 注射剤
実施例１の注射剤のＩｇＧ抗体の濃度を８％として、１
ｍｌずつバイアルに充填して凍結乾燥し、用時溶解型注
射剤を得た。
ｍｌずつバイアルに充填して凍結乾燥し、用時溶解型注
射剤を得た。
実施例３ 注射剤
実施例１におけるＩｇＧ抗体を５％Ｗ／Ｖの生理食塩水
とし、これにソルビトールのかわりにマンニトールを１
：４となるように混合して、２５℃で９６時間静置した
後、ミリポアフィルタ−で除菌口過し、２ｍｌずつバイ
アルに先議して凍結乾燥し、用時溶解型注射剤を得た。
とし、これにソルビトールのかわりにマンニトールを１
：４となるように混合して、２５℃で９６時間静置した
後、ミリポアフィルタ−で除菌口過し、２ｍｌずつバイ
アルに先議して凍結乾燥し、用時溶解型注射剤を得た。
実施例４ 膣錠剤
抗ＲＣＡレセプターＩｇＧ抗体を１０％Ｗ／Ｖの生理食
塩水溶液とし、これにマンニトールを４倍量加え溶解し
た。これを凍結乾燥して安定で均質なＩｇＧ抗体とマン
ニトールの混合粉末を得た。この混合粉末を用い、乾式
製錠法により下記組成の錠剤を製した。
塩水溶液とし、これにマンニトールを４倍量加え溶解し
た。これを凍結乾燥して安定で均質なＩｇＧ抗体とマン
ニトールの混合粉末を得た。この混合粉末を用い、乾式
製錠法により下記組成の錠剤を製した。
ＩｇＧ混合粉末 ５０ ｍｇ
乳糖 ５０ ｍｇ微
結晶セルロース ７８ ｍｇカル
ボキシメチルセルロースカルシウム ２０１１１ｇ実施
例５ 膣坐剤 稠１ｔｅｐｓｏｌ−３−５８（商品名、ダイナマイト・
ノーペル社！！りの１９．５ ｇを容器にとり、４２−
４３℃に加温した後、実施例４で調製したＩｇＧ抗体と
糖の混合粉末０．５ｇを加え充分混和した後、ピペット
でコンテナーに注入し冷却成形して１０坐剤を得た。
乳糖 ５０ ｍｇ微
結晶セルロース ７８ ｍｇカル
ボキシメチルセルロースカルシウム ２０１１１ｇ実施
例５ 膣坐剤 稠１ｔｅｐｓｏｌ−３−５８（商品名、ダイナマイト・
ノーペル社！！りの１９．５ ｇを容器にとり、４２−
４３℃に加温した後、実施例４で調製したＩｇＧ抗体と
糖の混合粉末０．５ｇを加え充分混和した後、ピペット
でコンテナーに注入し冷却成形して１０坐剤を得た。
実施例６ ゼリー剤
実施例３で調製した５％Ｗ／ＶのＩｇＧ抗体溶液２０ｇ
１ヒドロキシプロピルセルロース１．５ ｇ 、カルボ
キシビニルポリマー１ｇ及び精製水７０ ｇを攪拌溶解
した。攪拌下にｐＨが中性になるまでトリエタノールア
ミンを加えると透明なゲルができた。更に最終的に全体
が１００ｇになるよう精製水を加えてゼリー剤を得、こ
れを５ｇずつチューブに先議した。
１ヒドロキシプロピルセルロース１．５ ｇ 、カルボ
キシビニルポリマー１ｇ及び精製水７０ ｇを攪拌溶解
した。攪拌下にｐＨが中性になるまでトリエタノールア
ミンを加えると透明なゲルができた。更に最終的に全体
が１００ｇになるよう精製水を加えてゼリー剤を得、こ
れを５ｇずつチューブに先議した。
作用
本発明の抗ＲＣＡレセプター抗体を有効成分とする避妊
用剤は受精卵の着床を阻止することにより妊娠を阻害す
る。
用剤は受精卵の着床を阻止することにより妊娠を阻害す
る。
本発明の避妊用剤の作用についてマウスの胚盤胞を培養
しこれに対する薬剤の効果を試験した。妊娠３．５日の
マウス子宮より胚盤胞を採取しプラスチックシャーレ中
で培養すると栄養外胚葉が伸展しシャーレ面へ接着する
。本発明の薬剤を培養開始１〜３日後に加えると、胚盤
胞は球状となり浮き上がり接着しなかった。これは本発
明の薬剤が、栄養外胚葉が−たんシャーレに接着しても
これを剥離する作用を有することを示すものである。Ｒ
ＣＡ以外のレクチンであるＤＢＡやＰＮＡをＲＣＡの代
わりに用いて同様にして調製した、抗しクチン糖タンパ
ク質抗体はこれらの試験では接着阻害作用がなかった。
しこれに対する薬剤の効果を試験した。妊娠３．５日の
マウス子宮より胚盤胞を採取しプラスチックシャーレ中
で培養すると栄養外胚葉が伸展しシャーレ面へ接着する
。本発明の薬剤を培養開始１〜３日後に加えると、胚盤
胞は球状となり浮き上がり接着しなかった。これは本発
明の薬剤が、栄養外胚葉が−たんシャーレに接着しても
これを剥離する作用を有することを示すものである。Ｒ
ＣＡ以外のレクチンであるＤＢＡやＰＮＡをＲＣＡの代
わりに用いて同様にして調製した、抗しクチン糖タンパ
ク質抗体はこれらの試験では接着阻害作用がなかった。
一方本発明の抗ＲＣＡレセプター抗体はマウス腹腔浸出
マクロファージや繊維芽細胞のような、他の種類の細胞
の基質への接着に対しては、全くあるいはわずかにしか
阻害効果がないことが本発明の研究で示され、本杭ＲＣ
Ａレセプター抗体は栄養外胚葉などの細胞と基質との接
着を特異的に阻害する薬剤であることが明らかになった
。以上のように本発明の薬剤は強力な受精卵着床防止作
用を有しており、着床開始後においてもなお有効である
ことが示唆され、事後の避妊剤として極めて有用である
。以下試験例１によりその作用効果について詳述する。
マクロファージや繊維芽細胞のような、他の種類の細胞
の基質への接着に対しては、全くあるいはわずかにしか
阻害効果がないことが本発明の研究で示され、本杭ＲＣ
Ａレセプター抗体は栄養外胚葉などの細胞と基質との接
着を特異的に阻害する薬剤であることが明らかになった
。以上のように本発明の薬剤は強力な受精卵着床防止作
用を有しており、着床開始後においてもなお有効である
ことが示唆され、事後の避妊剤として極めて有用である
。以下試験例１によりその作用効果について詳述する。
試験例１ マウス栄養外胚葉の基質への接着の阻害
自然交配したＩＣＲマウスの胚を用いた。マウスの膣栓
が認められる日を妊娠０日とし、妊＠３．５日程度の１
０匹のマウス子宮から胚盤胞を洗い出し採取し、Ｄｕｌ
ｂｅｃｃｏ修飾最少必要培地に１０％ウシ胎児血清を加
えたものを培地として、１つのウェルの容量が５０ｕｌ
のＴｅｒａｓａｋｉプレート（Ｎｕｎｃ社！！ｌ）中で
液体パラフィンでおおって、３７℃炭酸ガス（１２％）
培養器内で１ないし３日間培養した。しかるのち薬剤で
ある各種抗血清を１ ｕｌ加えて２４時間以上培養して
その効果を調べた。薬剤の効果は栄養外胚葉の伸展、プ
レートへの接着の状態を顕微鏡下で観察することより判
定した。抗ＲＣＡレセプター抗血清はそれの添加前１日
の細胞培養においては、栄養外胚葉のプレートへの伸展
を完全に阻害（ａｎｔｉ−ｓｐｒｅａｄｉｎｇ作用）し
、１２０倍に希釈しても完全な阻害が見られた。一方薬
剤投与前３日間、細胞培養した場合には、プレートに接
着している栄養外胚葉は、抗血清を添加し２４時間培養
している間に、プレートに伸び広がった接着した状態か
ら丸まった状態になったり（ｒｏａｎｄｉｎｇ作用）、
プレートから引きはがされたり （ｄｅｔａｃｈｓ＋ｅ
ｎｔ作用）した。この場合、抗ＲＣＡレセプター抗血清
は６０倍に希釈しても完全な阻害効果を有した。一方抗
ＤＢ＾レセプター抗体や抗ＰＮＡレセプター抗体では栄
養外胚葉のプレートへの接着を阻害しなかった。
が認められる日を妊娠０日とし、妊＠３．５日程度の１
０匹のマウス子宮から胚盤胞を洗い出し採取し、Ｄｕｌ
ｂｅｃｃｏ修飾最少必要培地に１０％ウシ胎児血清を加
えたものを培地として、１つのウェルの容量が５０ｕｌ
のＴｅｒａｓａｋｉプレート（Ｎｕｎｃ社！！ｌ）中で
液体パラフィンでおおって、３７℃炭酸ガス（１２％）
培養器内で１ないし３日間培養した。しかるのち薬剤で
ある各種抗血清を１ ｕｌ加えて２４時間以上培養して
その効果を調べた。薬剤の効果は栄養外胚葉の伸展、プ
レートへの接着の状態を顕微鏡下で観察することより判
定した。抗ＲＣＡレセプター抗血清はそれの添加前１日
の細胞培養においては、栄養外胚葉のプレートへの伸展
を完全に阻害（ａｎｔｉ−ｓｐｒｅａｄｉｎｇ作用）し
、１２０倍に希釈しても完全な阻害が見られた。一方薬
剤投与前３日間、細胞培養した場合には、プレートに接
着している栄養外胚葉は、抗血清を添加し２４時間培養
している間に、プレートに伸び広がった接着した状態か
ら丸まった状態になったり（ｒｏａｎｄｉｎｇ作用）、
プレートから引きはがされたり （ｄｅｔａｃｈｓ＋ｅ
ｎｔ作用）した。この場合、抗ＲＣＡレセプター抗血清
は６０倍に希釈しても完全な阻害効果を有した。一方抗
ＤＢ＾レセプター抗体や抗ＰＮＡレセプター抗体では栄
養外胚葉のプレートへの接着を阻害しなかった。
即ち抗ＲＣＡレセプター抗体は特異的なｉｎ ｖｉｔｒ
ｏにおける栄養外胚葉の伸展の阻害剤であり、初期胚の
着床の特異的な阻害剤となることが明らかとなり、妊娠
の着床の段階における、避妊用剤として有用な物質であ
ることが示された。
ｏにおける栄養外胚葉の伸展の阻害剤であり、初期胚の
着床の特異的な阻害剤となることが明らかとなり、妊娠
の着床の段階における、避妊用剤として有用な物質であ
ることが示された。
Claims (1)
- 動物細胞より得られレクチンに対するレセプターとして
精製された糖タンパク質を抗原としこれに対する抗体を
作成し、この抗体を有効成分として用いることを特徴と
する避妊用剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1445085A JPS61176534A (ja) | 1985-01-30 | 1985-01-30 | 避妊用剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1445085A JPS61176534A (ja) | 1985-01-30 | 1985-01-30 | 避妊用剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61176534A true JPS61176534A (ja) | 1986-08-08 |
Family
ID=11861367
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1445085A Pending JPS61176534A (ja) | 1985-01-30 | 1985-01-30 | 避妊用剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61176534A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2009530271A (ja) * | 2006-03-13 | 2009-08-27 | オレグ イリッチ エプシュテイン | 固体の経口投与形態の医薬組成物、及びその製造方法 |
| JP2009539827A (ja) * | 2006-06-06 | 2009-11-19 | オレグ イリッチ エプシュテイン | 肥満、真性糖尿病及び耐糖能異常を伴う疾患の治療用薬剤 |
| CN109430302A (zh) * | 2018-12-11 | 2019-03-08 | 绵阳机场蓝天环保科技有限公司 | 灭鼠追踪膏及其制备方法 |
-
1985
- 1985-01-30 JP JP1445085A patent/JPS61176534A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2009530271A (ja) * | 2006-03-13 | 2009-08-27 | オレグ イリッチ エプシュテイン | 固体の経口投与形態の医薬組成物、及びその製造方法 |
| US9522116B2 (en) | 2006-03-13 | 2016-12-20 | Oleg Iliich Epshtein | Solid oral form of a medicinal preparation and a method for the production thereof |
| JP2009539827A (ja) * | 2006-06-06 | 2009-11-19 | オレグ イリッチ エプシュテイン | 肥満、真性糖尿病及び耐糖能異常を伴う疾患の治療用薬剤 |
| CN109430302A (zh) * | 2018-12-11 | 2019-03-08 | 绵阳机场蓝天环保科技有限公司 | 灭鼠追踪膏及其制备方法 |
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