JPS61126032A - 粘質多糖を含んで成る抗癌剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） この発明は、藻類であるスピルリナ・サブサルサ（５ｐ
ｉｒｕｌｌｎａ　５ｕｂｓａｌｓａ　）が生産する新規
な粘質多糖を有効成分として含んで成る抗癌剤に関する
。この明ａ書において前記有効成分をスピルリナン（５
ｐｉｒｕｌｉｎａｎ　）と称する。

（従来の技術） 多糖類が抗癌作用金有することはすでに知られている。

しかしながらこの発明の有効成分であるスピルリナンは
、昭和５９年度日本農芸化学会大会におりてはじめて発
表されたものであシ、このスピルリナンが抗癌効果を有
することは全く知られていない。

（発明が解決しようとする問題点） 従来の多糖類を有効成分とする抗癌剤は、他のタイプの
抗癌剤に比べて副作用が少ないと言う利点を有するが、
他方において抗癌剤としての薬効は必ずしも満足すべき
ものではなかった。この発明は、副作用が少なく、且つ
強い抗癌作用金有する多糖類タイプの抗癌剤全提供しよ
うとするものである。

（問題点を解決するための手段） 前記の問題点は、構成成分として少なくともラムノース
、フコース、キシロース、ガラクトース、グルコース、
マンノース、ウロン酸及ヒＮ　−７セチル糖を含んで成
シ、スピルリナ（Ｓｐｉｒｕ目ｎａ）によシ生産される
粘質多糖をなんで成る抗癌剤により解決される。

■、有効成分（スピルリナン〕 有効成分であるスピルリナンは、塩化カリウム水溶液に
可溶性のλ−型スピルリナンと塩化カリウム水溶液に不
溶性のに一型スピルリナンから成る。スピルリナンの製
造方法及びλ−型スピルリナンとに一型スピルリナンの
分離方法は特願昭５９−１５２１４７号明細書に詳細に
記載されておシ、その具体例を本明細書の実施例１に記
載する。

スピルリナンは次の理化学的性質を有する。

■　元素分析及び灰分含量 元素分析及び灰分含量の測定結果は次の第１表の通りで
ある。

第１表 ■　検出反応 各種の検出反応の結果は次の第２表の通りである。

以下全白 第２表から明らかな通シ、Ｙａｐｈｅ　　のＶゾルシノ
ール反応は明白な陽性金示さず、この発明のスピルリナ
ンは３，６−アンヒト９０ガラクトースを含有しないか
、又は含有するとしてもその量はきわめてわずかであり
、カラダナンと明らかに異る。

このことは、ス♂ルリナン−１１Ｎの塩酸で２時間加水
分解し、４−・平−クロマトグラフィーによシ構成成分
を調べた結果と一致する。

また、ウロン酸の定性試験であるカルバゾール−硫酸反
応、及びＮ−アセチルへキソサミンの定性試験であるモ
ルゴンーエルソン（Ｍｏｒｇａｎ　−Ｅｌｓｏｎ）反応
がいずれも陽性であり、スピルリナンがウロン酸、及び
Ｎ−アセチルへキソサミンを含有することが推定される
。

さらに、ドッグソン（［１ｏｄｇｓｏｎ　）反応が陽性
であることから、スピルリナンが硫酸基金含有すること
がＷ認された。

■　ＩＲスペクトル ＩＲ−スにクトルｔ［１図に示す。この図において、１
７２５儒−１付近にアルデヒド基又はカルデン酸のＣ＝
０基に由来する吸収が見られる。

カルゼン酸のＣ＝０基の存在はカリウム塩の形のに一ス
ビルリナン及びλ−スビルリナンにおける１　６１０ｃ
ｍ　　付近の吸収の出現によっても推定されるａ１６６
０儒　及び１５３０ｃｍ　　付近にアセトアミドの吸収
、１４５０ｃｒｎ　　及び１４００ｃｒｒｔ−１付近に
メチル基を由来する吸収が見られる。

１２４０ｃｍ　　に硫酸エステル（Ｓ＝Ｏ）基に由来す
る吸収、８２０工　及び８４０ｃｍ　　にＣ−０−８基
に由来する吸収が見られ、硫酸エステルの存在が示され
る。８２０ｃｒ／Ｌ　の吸収は赤道結合した６−サルフ
ェートの存在金示し、セして８４０α−１の吸収は軸結
合した４−サルフェートの存在を示す。３．６−アンヒ
ドロガラクトースの存在を示す９４０ｃｎＬ　の吸収は
わずかであった。

以上のＩＲス４クトルの結果は前記の検出の結果とよく
一致する。

■　構成糖 ヌビルリナンをトリメチルシレート （ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｓｉｌａｔｅ　）化し、その加水
分解物をガスクロマトグラフィーにより分析したところ
次の第３表に示す結果が得られた。

以下余白 第３表から明らかな通り、スピルリナンは少なくトモラ
ムノース、フコース、キシロース、ガラクトース、グル
コース及ヒマンノースに含有し、さら・にこれ以外の糖
も含有することが予想される。

なお、ガラクトース、及びグルコースの存在は、それぞ
れのオキシターゼを用いる試験によっても確認された。

■　ダル形成性 この発明のスピルリナンは、Ｋ、ＮＨ４，又はＣＡ　　
の存在下でダルを形成する。

以上の性質を有する粘質多糖はスピルリナ・プラテンシ
ス（５ｐｉｒｕｌｉｎａ　ｐｌａｔｅｎｓｉａ　）にお
いても、又他の藍藻類においても存在が確認されておら
ず、新規な粘質多糖である。

■、薬理学的性質 生後６週間の雌マツスＩＣＲｆｆｉ１９匹用いて抗腫瘍
性を試験した。すべてのマウスに１×１０　個のサルコ
ーマ８１８０の細胞全腹腔内に接種し、その後の生存日
数及び９日目の体重を測定した。被、倹試料は生理的食
塩水に溶解して、１日目〜５日目及び７日目〜１１日目
に毎日１回ずつ、１１回投与した。対照群においては生
理的食塩水のみを投与した。試験群の１回投与号は２０
０　ｍ９Ａ９　　。

２０Ｉｎ９Ａｇ及び２ηｑＡ＜ｑとした。

その結果金欠の箪４表に示す。

Ｂｔ下余白 注（１）延命効果は として算出したものである。

（２）対照群は腹水がたまったため体重が増加した。

第４表から明らかな通り、この発明の抗癌剤はマウスに
おいて、サルコーマ疋対して１日投与量２０　′Ｉｎ９
Ａｇの腹腔内投与において著しい延命効果を示した。ま
た、９日目に対照群のマウスに腹水蓄積し体重が増加し
た。

この発明の抗癌剤は、各種のサルコーマ等に対して有効
であ−リ、非経口投与、例えば腹腔内投与、静脈内投与
、筋肉的投与、又は経腸投与、例えば直腸投与により投
与するのが好ましい。ヒトヲ含む哺乳動物における有効
投与量は、癌の種類、患者の症状等によシ異るが、概ね
１日当り２０ｍｑ／Ｉｃｇ　〜０．０１　ｍ９／に９、
好マシくは２　ｒｎｔｉＡｙ　〜０．１ｍｑ／ｋｇであ
る。この医薬は１日〜５日ごとに長期間にわたって投与
することができる。

■、爬剤 この発明の抗癌剤は、非経口投与剤として一般に用いら
れる製剤、例えば静脈注入剤、静脈注射剤、腹腔注射剤
等の形にすることができ、具体的には例えば有効成分で
あるスビルリナンの永住溶液又は水性懸濁液とすること
ができる。この製剤のための基剤としては、等張液、例
えば生理的食塩水が好ましい。この医薬にはさらに、注
射用として許容される緩衝剤、容解剤、界面活性剤、防
腐剤等を添加することができる。また、これらの溶液又
は懸濁液を凍結乾燥して粉末製剤とすることができる。

この場合は使用前に無菌水を加えて溶液又は懸濁液とし
て使用される。

これらの医薬は、常用の製薬法に従ってＭ造することが
できる。

（実施例） 次に、この発明をさらに具体的に説明するため有効成分
であるスピルリナンの製造方法、及び與剤方法について
実施例を記載する。

実施例１　スピルリナンの製造 次の組成を有する培地を調梨した。

（＊） ＮａＨＣＯ３１６，ＯＪｉ’　：　　Ｍｇ５Ｏａ　Ｏ−
２１１：　　ｋ！５ｒ８液　１．ｏｒｎ／：に２ＨＰＯ
４０，５；　ＣａＣｌ２０．０４　　：　Ｈ２Ｏ１，Ｏ
Ａ：ＮａＮＯ３２，５：　ＦｅＳＯ４０，０１；ＮａＣ
Ｌ　　　１．０　　；　ＥＤＴＡ　　Ｏ，０８：（＊）
　Ａ　５溶液 １（、ＢＯ３２，８６、’７：　　ＭｎＣｌ２・４に２
０　１．８１！！：Ｚｎ５Ｏ”７ＨＯＯ，２２：　　Ｃ
ｕＳＯ４’５ＨｚＯ０１０８：Ｎａ２Ｍｏ４　　　０．
０２１　　：　　Ｃｏｎｃ−）（２Ｓｏ４１　ｄｒｏｐ
：Ｈ２Ｏ１，０７： この培地１００Ｍにスピルリナ・サプサルサを接種し、
４０００ルクスの螢光灯照射のもと、二酸化炭素無通気
下で３７℃〜４０℃にて培養した。

培養の過程で粘質多糖ヲ藻体外に分泌することが確認さ
れた。この条件下で、この株は糸状の藻体を伸長させて
増殖し、液面に浮上した。スピルリナ・プラテンシスに
比較してよりコンパクトな螺旋状の糸状体を形成した。

　　　１．−藻体を水洗し、８０優メタノール、８０憾
アセトン、１００％エタノール及びエーテルと共に沸騰
せしめることにより色５Ｌｒ除去した。藻体を集め、そ
して０．２１の塩化ナトリウム及び０．１４の炭酸水素
ナトリウムを含有する水溶液中で９０℃にて１時間加熱
することによシスピルリナンを抽出し、そして濾過した
。

このスピルリナン抽出液に２悌になるようにセチルトリ
メチルアンモニウムプロミド（セタブロン）を添加する
ことによシスピルリナンを沈澱せしめた。この沈澱を８
０チエタノール、１００チエタノール、及びエーテルで
洗浄し乾燥することによシ白色のスピルリナン４４ｍｑ
’を得た。

の分離 謔 実施例１に記載した方法に従って製造したスビルリナン
０．１　ｆ！ｔ、９０℃の加熱下で徹しく芥゛乏拌しな
からｏ、　ｉ　ｎの濃度に蒸留水に溶解し、そして濾過
した。ｐ液に０．１容量の３Ｍ塩化カリウム溶液を加え
、この溶液を混合し、そして砕氷浴中で１時間冷却した
。５０℃にて１時間にわたり１０、００　Ｏｒｐｍにて
遠心分離し、不溶性画分と可溶性画分に分けた。

不溶性画分を０．３Ｍ塩化す）　ＩＪウム溶液に再懸濁
し、遠心分離し、不溶物を８０％の温エタノールで洗浄
することにより塩素を除去し、そして１００％エタノー
ル、アセトン及びエーテルで洗浄し、乾燥してに一スピ
ルリナ０．０３，９を得た。

他方、可溶性画分に２．５容量の１００チエタノールを
加えて沈殿を生じさせ、８０％エタノール、１００％エ
タノール、アセトン、及びエーテルで洗浄して乾燥し、
λ−スピルリナン０．０６９ｇを得た。

λ−スビルリナンとに一スピルリナンとの比率は約６９
．１　：　３０．９であった。

実施例３．製剤 （１）注入溶液 スビルリナン　　　　　　　５Ｉ 塩化ナトリウム　　　　　４．５１１ シユクロース　　　　　　２５Ｉ 全成分を５θ０ＷＬｌの蒸留水に溶解し、無菌テ過し、
バイアルに充填する。

（２）　　注射用Ｗ！Ａ濁液 スピルリナン　　　　　　　２１ 塩化ナトリウム　　　　０．１５．！ｉ＋グリセリン　
　　　　　　２ｇ 全成分を２０１ｄの蒸留水に溶解し、無菌濾過し、アン
プルに充填する。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １、構成成分として少なくともラムノース、フコース、
   キシロース、ガラクトース、グルコース、マンノース、
   ウロン酸及びＮ−アセチル糖を含んで成り、スピルリナ
   ・サブサルサ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａｓｕｂｓａｌｓａ）
   により生産される粘質多糖を含んで成る抗癌剤。