JPS6072829A - ベシクル用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はベシクル用組成物に関し、更に詳細には長期間
に渡って安定なベシクルを調製することのできるベシク
ル用組成物に関する。

生体膜の重要な構成成分であるリン脂質、特にレシチン
が水中においてリボゾームと呼ばれる二重膜中空小胞体
を形成することは既によく知られている。このリボゾー
ムは、中空脂質二重膜球であり、内腔に種々の化学物質
を包含することができる等その構造が赤血球に酷似して
いるため、赤血球のモデルあるいは細胞モデルとして研
究され、生体膜研究に重要な役割りを果たしている。

また、近年、このリボゾームは薬物の生体内運搬体とし
て注目されている。すなわち、内腔に種種の化学物質を
包含することのできるリボゾームは一禰のカプセルと見
なすことができ、薬物をリボゾーム内部に入れて投写す
ると、薬物の生体内代謝が抑制され長期間生体内に留っ
て薬効を持続したり（例えばＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔｅｒｓ
、　３６巻、３号。

２９２頁１９７３年）、薬物の副作用、例えばアレルギ
ー性が抑制されたり（例えばＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔｅｒｓ
４５巻、１号、７１頁、１９７４年）、薬物の各種臓器
への分布が変化したりする（例えばＥｕｒ。

Ｊ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、、　４７巻、１７９頁、１９７
４年）ことが報告されている。

この様にリボゾームは薬物の生体内運搬体として優れた
諸性質を示すのであるが、中でも薬物の臓器分布を変化
させ得る性質は薬物を疾患臓器へ選択的に作用させ得る
可能性を有しており、所絹リボゾームによる標的効果と
して注目を集めている。例えば制癌剤は癌細胞のみなら
ず健康な正常細胞にも作用するため副作用を伴なうこと
が多いが、制癌剤をリボゾームに入れて投与することに
より癌組織に選択的に作用させることができれば極めて
有用であると考えられる。実際、その様な試みが良好な
結果を得ている場合がある（例えば日本癌学会講演要旨
集、８頁、１９７６年）。

また、二重膜部分にアルキルアミン等の適当な伝導性物
質を包埋し、リボゾームの内液に第２銅イオン等の光還
元性物質を、リボゾームの外液にアスコルビン酸等の光
酸化性物質を入れ、これに光を照射することによυ二重
嘆に包埋した伝導性物質の性質に応じて、特定のイオン
を外液から内液に濃縮することが可能であり、たとえば
海水からある特定の元素イオンを泡出して資源化するこ
とができる。この様にリボゾームは薬物投与等に画期的
な新しい手法をもたらすものであるが、リボゾームを形
成し得るリン脂質が生体由来物質のためその化学構造が
極めて制限されており各種機能の付与に不便であること
、また、比較的化学的（９） 安定性に乏しいこと等の欠点があった。

そこで、リン脂質リボゾームのかかる制約を取り除くた
めに、最近合成界面活性剤を原料とするりボゾーム型小
胞体、すなわちベシクルを形成せしめるための研究がな
され、現在までに数種類の界面活性剤にベシクル形成能
があることが確認されている。そしてかかる界面活性剤
のベシクルもリボゾームと同様に二重膜中空小胞体構造
を有しており、上記の薬物運搬体等に適用され得るもの
である。

しかしながら、これら界面活性剤のベシクルは、いずれ
も界面活性剤のみを水中に分散せしめ、これに例えば超
音波を照射することによシ得られるもので、そのベシク
ル構造が不安定であり、長期間の保存に耐えられないの
が現状である。例えば、本発明で用いる長鎖分岐型界面
活性剤について叙上の方法でベシクルを得てもベシクル
構造は数日以内に壊れ、溶液は白濁若しくはゲル状を呈
するようになる。

したがって、界面活性剤ベシクルを薬物運搬体（１０） やその他の目的に利用するだめにはこの安定性を改善す
ることが不可欠であり、そのための技術が強く要望され
ているのが現状であった。

斯る現状に鑑み、本発明者らは長期間に渡って安定なベ
シクルを得べく鋭意研究をおこなった結果、ベシクル形
成能を有する特定の長鎖分岐型界面活性剤とこれとは別
異のある種の界面活性剤及び水を配合した系よ９得たベ
シクルは長期間に渡って安定に存在し得ることを見出し
、本発明を完成した。

すなわち、本発明は次の２成分（Ａ）及び（Ｂ）を含有
し、（Ａ）成分と（Ｂ）成分の重着比が１００＋１〜１
００．１００であるベシクル用組成物を提供するもので
ある。

（Ａ）　一般式 式中、各記号は次のものを示す。

八及び＆Ｉ　炭素数６〜２４の炭化水素基Ｒ１ｓ　炭素
数１〜４の炭化水素鎖 Ａ：　炭素数２〜４のアルキレン基 Ｚ：　水素原子又は中和された陰イオン性親水基 ｎ＋　Ｚが水素原子のときは１〜２０の整数、２が中和
された陰イオン性親水基の場合は、０又は１〜２０の整
数 で表わされる長鎖分岐型界面活性剤 （Ｂ）　−ｍ又は二種以上の、次の式師）〜（ｙ）Ｒ，
Ｃ００Ｍ　（ａ） Ｒ４０（ＡＯ）ｎ’５０５Ｍ　（ｄ） Ｒ７０（ＡＯ）ｎ　’Ｈ（ｈ） ＨＯ（ＡＯ）Ｉ）”（ＣｓＨａＯ）ｑ、（ＡＯ）ｒＨ（
Ｊ）Ｒ４’０　（ＡＯ）　ｎ’Ｈ（□） Ｒ４ＣＯＯ（ＡＯ）ｎ　’　Ｒｖ　ｍ）ＣＨ２００ＣＲ
。

Ｃ）（、ＯＲ４ （１３） ■ ＣＨ，０（ＡＯ）ｎ’ｆ（ ＣＨ２０ＣＯＲ。

ＨＯＩ（、Ｃ−Ｃ−ＣＨ２０ｆ（（Ｑ）Ｈ２０Ｈ Ｉ３ Ｒ，、−Ｎ−０（ｔ） Ｉ４ （１４） Ｒ１４ Ｒ，ＮＥ（−（ＣＨｚｉ二Ｃ００Ｍ　（ｘ）１４ 式中、各記号は次のものを示す。

Ｒ４：　炭素数６〜３６の炭化水素基 Ｒ４’ｉ　ｎ’がＯの場合は炭素数６〜３６の炭化水素
基、ｎ′が１〜１５０の整数の場合は、炭素数６〜３６
の直鎖炭化水素基 Ｒ５及びＲ，＋　炭素数５〜２３の炭化水素基Ｒ７，ｌ
’ｌａ及びＲ，ｉ　水素原子又は炭素数６〜２４のアシ
ル基（ただし、−分子中にＲ６とＲ９をを両方含む場合
、そのうち少なくとも一方は水素原子である） Ｒｌｏ及びＲＩＩ＋　水素原子又は炭素数６〜２４の炭
化水素基（ただし、そのうち少なくとも一方は水素原子
である） Ｒ，、、Ｒ，、及びＲ，４＋　炭素数１〜２４の炭化水
素基 Ｒ１，及び代１．；　炭素数１〜４の炭化水素基若しく
はヒドロキシ炭化水素基又はベンジル基Ｒ＋ｔ　：　炭
素数９〜２３の炭化水素基Ｒ１ｇ　＋　炭素数１〜２４
の炭化水素基若しくはヒドロキシ炭化水素基又はベンジ
ル基 Ｍ：　アルカリ金属、アルカノールアンモニウム、テト
ラアルキルアンモニウム、リジン、アルギニン、ヒスチ
ジン又ハモルホリンのいずれか Ｘθ：　４級アンモニウムイオンの対イオンとなるアニ
オン ［’、ｍ’及びｎ′：０又は１〜１５０の整数ｐ、ｑ及
びｒ；　１〜１５０の整数 １１　１〜４の整数 Ａ１　前記と同じ で表わされる化合物群から選ばれた界面活性剤。

（Ａ）成分である長鎖分岐型界面活性剤（１１がベシク
ルを形成能を有することは未だ知られていない。

したがって、（Ａ）成分に（Ｂ）成分を配合することに
よりベシクルが長期間安定に保たれることも全く知られ
ておらず、本発明者らの研究によって初めて明らかにさ
れたものである。

本発明の（Ａ）成分としては、■ゲルベアルコール（β
−分岐第１級アルコール）に炭素数２〜４のアルキレン
オキサイドを付加せしめた化合物、■ゲルベアルコール
又は■の化合物を硫酸又はリン酸でエステル化し、更に
塩基性化合物で中和して得た化合物、■ゲルベアルコー
ル又は■ノ化合物をモノクロール酢酸等でカルボキシメ
チル化シ、更に塩基性化合物で中和して得た化合物等を
例示（Ｍは前記した意味を有する）であるものが好まし
い。また、中和に用いる塩基性化合物としては、モノエ
タノールアンモニウム、ジェタノールアンモニウム、ト
リエタノールアンモニウム、モノイ（１７） ツブロバノールアンモニウム、ジイソプロパツールアン
モニウム、トリイソプロパツールアンモニウム等のアル
カノールアンモニウム；テトラメチルアンモニウム、テ
トラエチルアンモニウム、テトラプロピルアンモニウム
、テトラブチルアンモニウム、テトラペンチルアンモニ
ウム等のテトラアルキルアンモニウムちりジン、アルギ
ニン及ヒモルホリンが好ましい。こ、れら（Ａ）成分の
具体例としては、例えば、２−へキシルデカノール、２
−オクチルドデカノール、２−デシルテトラデカノール
、２−ドデシルヘキサデカノール、２−テトラデシルオ
クタデカノール、又は２−ヘキサデシルエイコサノール
のエチレンオキサイド付加物；２−へキシルデシル硫酸
エステル塩、２−オクチ。

ルドデシル硫酸エステル塩、２−デシルテトラデシＡｌ
ｆｆｆ［エステル塩、２−ドデシルヘキサデシル硫酸エ
ステル塩、２−テトラデシルオクタデシル硫酸エステル
塩、２−ヘキサデシルエイコシル硫酸エステル塩、２−
へキシルデシルリン酸エステル塩、２−オクチルドデシ
ルリン酸エステル塩、（１８） ２−デシルテトラデシルリン酸エステル４．２−ドデシ
ルヘキサデシルリン酸エステル塩、２−テトラデシルオ
クタデシルリン酸エステル塩、２−ヘキサデシルエイコ
ンルリン酸エステル［４１６けることができる。

また、本発明の（Ｂ）成分の界面活性剤は、ベシクルを
安定に保つ作用を有するものと考えられており、このう
ち（ａ）〜（ｇ）は陰イオン性界面活性剤に、（ｈ）〜
（１）は非イオン性界面活性剤に、ｆｕ）は陽イオン性
界面活性剤に、（Ｖ）〜（ｙ）は両性界面活性剤にそれ
ぞれ属するものである。上記（Ｂ）成分のうち、（ｕ）
の四級アンモニウム塩において、その対イオン（Ｘ）は
特に制限されないが、その好ましいものとしては、ハロ
ゲンイオン、メチル硫酸イオン、エチル硫酸イオン等が
挙げられる。また、（ｈ）〜（１）の非イオン性界面活
性剤に付加するアルキレンオキサイドとしては、エチレ
ンオキサイドが好ましい。

本発明のベシクル用組成物においては、（Ａ）成分と（
Ｂ）成分の配合重量比が重要であり、（Ａ）成分と（Ｂ
）成分の比が１００１１〜１００：１００の範囲である
ことが必要である。配合重量比がこの範囲を外れた場合
、ベシクルが生成しないか又はベシクルが生成しても不
安定となる。

本発明のベシクル用組成物を製造するには公知の方法に
従い、（Ａ）成分及び（Ｂ）成分を、これら両方を溶解
し得る溶媒に溶解し、攪拌して均一とし、次いで溶媒を
除去すれば良い。

斯くして得られた本発明のベシクル用組成物からベシク
ルを得るには、ベシクル組成物を水に懸濁させ、これに
超音波を照射すれば良い。しかしながら、この方法のみ
に限らず、例えば水に可溶なエタノールの様な溶媒にベ
シクル用組成物を溶解させ、この水溶液を水中に強く射
出する方法や水溶性の界面活性剤で可溶化し、次いで透
析でその界面活性剤を除去しながら作成する方法等も利
用し、ベシクル溶液を得ることができる。

本発明のベシクル用組成物によシ調製されるベシクル溶
液は、その濃度が１〜５０重量％（以下単にチで示す）
が好ましく、より好ましくは５〜３０チである。溶液の
ベシクル濃度が５０係を越えると粘度が高くなり過ぎ、
ベシクルの調製工程及びベシクルの使用時において不都
合の生じることがある。また、濃度が１チ未満の場合、
調製及び使用には何ら支障はないが、ベシクル溶液の輸
送費や容器の面でコストが上昇し、経済的ではない。

このようにして調製されたベシクル溶液中のベシクルを
確認するための現在知られている最も確かな方法はネガ
テイヴ染色法による電子顕微鏡観察である。ネガテイヴ
染色法とはリンタングステン酸や酢酸ウラニールによっ
てベシクルを形成し得る界面活性剤等の親水基部分の電
子密度を高くし、その部分を黒く染色する方法である。

本発明においては、この方法によってベシクル生成を観
察した。ベアクルを含有するベシクル溶液は透明であり
かつ流動性も良い。一方、前記化合物がベシクルとはな
らず多層状構造となった場合の溶液はゲル状で白濁しか
つ流動性も極めて不良である。

従って、ベシクルの安定性試験（後述）においては、た
とえば超音波法でベシル溶液を作り、線溶（２１） 液の透明度と流動性を経時的に観察することによシベシ
クル用組成物の安定性を判定することができる。また、
ベシクルを確認するための補助的な簡便法として、核磁
気共鳴（ＮＭＲ）法が知られている。すなわち、１Ｈ−
又は”Ｃ−ＮＭＲの緩和時間もしくは吸収線幅は、ベシ
クルの場合とそうでない場合とでは大きく異なる。つま
り、ベシクルの場合は緩和時間が長くなり、吸収線幅は
狭く鋭くなる、一方、ベシクルでない場合は、緩和時間
が短く吸収線幅は広くなる。しかしながらＮＭＲ法では
、ベシクルの特徴である二重膜構造の存在を直接確認す
ることができず、ベシクルの存在の厳密な確認のために
は上記の電子顕微鏡による観察を行うべきである。

次に実施例により本発明を更に詳しく説明するが、本発
明はかかる実施例に限定されるものではない。

実施例１ 表−１に示す長鎖分岐型界面活性剤と各種界面活性剤と
からベシクル用組成物を調製し、ベシク（２２） ルの生成及びその安定性を調べた。この結果を表−１に
示す。

〔ベシクル用組成物の調製〕

クロロホルムに溶解した長鎖分岐型界面活性剤１０ｔと
界面活性剤１ｆを混合し、均一になるまで攪拌した。次
いでエバポレーターを用いてクロロホルムを除去し、ベ
シクル用組成物の粉末を得た。

〔ベシクルの生成及びその確認〕

得られたベシクル用組成物の粉末ｌＯｔに対し、水９０
１を加えて攪拌すると粘稠で白濁したゲル状組成物と々
つだ。このゲル状組成物を６０℃に保ち、ｌ　Ｑ　ＯＷ
、　２５　Ｋｆ（ｚの超音波を約１時間照射した。得ら
れた溶液について、電子顕微鏡観察をおこない、ベシク
ルの生成を確認した。なお、ベシクルの生成しているも
のは、はぼ透明で流動性の良い溶液となっていた。

〔ベシクルの安定性試験〕

上記の如くして得られたベシクル溶液を３力月間２０℃
の恒温槽で保存し、３力月経過後の状態を透明度及び流
動性の面から製造直後の状態と比較して安定性を評価し
た。なお、ベシクルの生成及びその安定性についての評
価基準は次の通りである。

Ａ；　保存後の状態が製造直後と全く変わらず、ベシク
ル構造が完全に保持されている。

Ｂ＋　製造直後に比べわずかに増粘している程度であシ
、ベシクル構造がほぼ完全に保持されている。

Ｃ＋　製造直後の溶液の増粘と白濁が著しく、ベシクル
構造がほとんど存在しない。

Ｄ＋　製造１育後の溶液が完全にゲル化白濁し、ベシク
ル構造の存在が全く認められない。

＊；　超音波照射を行ってもベシクルとはならない。

以下余白 表　−１ （２５） ＊　界面活性剤 界面活性剤１゜ Ｃ＋ｔｆ（２ｓＯ８Ｏ３Ｎａ （ドデシル硫酸ナトリウム） 界面活性剤２゜ （２６） 界面活性剤３゜ （トリメチルステアリルアンモニウムクロライド）界面
活性剤４゜ 比較例１ 表−１に示した長鎖分岐型界面活性剤１０ｇ−を水９０
ｙ−に溶解し、実施例１の方法に準じてベシクルを生成
させた。これを３力月間２０℃の恒温槽で保存し、保存
後の状態を調べだ。１８種の長鎖分岐型界面活性剤すべ
ての場合においてベシクルは生成するが、３力月の保存
の後は溶液がゲル状で白濁し、ベシクル構造が失なわれ
ていた。

実施例２ ボリオギシエチレン１０モル付加　２−オクチルドデシ
ルエーテルと表−２に示された界面活性剤を用い、実施
例１の方法に従ってベシクル用組成物を調製し、該組成
物から得られるベシクルの安定性を調べた。この結果を
表−２に示す。

表　−２ 以下余白 （２９） 実施例３ 表−３に示す合計４種類の長鎖分岐型界面活性剤と実施
例１で用いた４種類の界面活性剤をそれぞれ組み合わせ
て、実施例１の方法に準じて合計１６種類のベシクル用
組成物を調製し、該組成物から得られるベシクルの安定
性を調べた。この結果を表−３に示す。

表　−３ 実施例４ ポリオキシエチレン−２−オフチルドデク・ル工（３０
） −チル（ｎ’−１０）と実施例１で用いた界面活性剤と
を、表−４に示す配合比率で混合ｌ〜、実施例１の方法
に従って合計６０種のベシクル用組成物を調製した。こ
の組成物について、実施例１と同様にしてベシクル生成
及びその安定性を調べた。

この結果を表−４に示す。

表　−４ 出願人　花王石鹸株式会社

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、次の２成分（Ａ）及び（Ｂ）を含有し、（Ａ）成分
   と（Ｂ）、成分の重量比が１００　＋　１〜１００　ｉ
   　１００であるベシクル用組成物。 （Ａ）　一般式（１） 式中、各記号は次のものを示す。 Ｒ１及びＲ２＋　炭素数６〜２４の炭化水素基Ｒ３＋　
   炭素数１〜４の炭化水素鎖 Ａ：　炭素数２〜４のアルキレン基 Ｚｌ　水素原子又は中和された陰イオン性親水基 ｎｓ　Ｚが水素原子のときは１〜２０の整数、２が中和
   された陰イオン性親水基の場合は、０又は１〜２０の整
   数 で表わされる長鎖分岐型界面活性剤 （Ｂ）　一種又は二種以上の、次の式（ａ）〜（ｙ）８
   ４０００Ｍ　＋８） Ｒ４＠Ｓ０Ｍ（ｂ） ｏｏ（ＡＯ）ｎ− Ｒ４（Ｃ） Ｒ４（）（ＡＯ）ｎ’８０５Ｍ　Ｃｄ）Ｒ７０−Ｐ−（
   ＯＭ）、　（ｇ） Ｒ７０（ＡＯ）ｎ’Ｈ（ｈ） ａ４％ｏ（Ａｏ）ｎ’ｕ　（ｉ） ＨＯ（ＡＯ）、・（Ｃ晶Ｏ）ｑ・（ＡＯ）ｒＨ（ｊ）Ｒ
   ，’０（ＡＯ）ｎ　’Ｈ４６Ｊ Ｒ，ＣＯＯ（ＡＯ）　ｎ　’Ｒ，１） （３） １３ Ｒ１□−Ｎ→０（ｔ） ） Ｉ４ バＵ Ｒ４ＮＨ−（ＣＬ斤Ｃ００Ｍ　（Ｘ） （４） 式中、各記号は次のものを示す。 Ｒ４＋　炭素数６〜３６の炭化水素基 Ｒ，’；　ｎ’がＯの場合は炭素数６〜３６の炭化水素
   基、ｎ′が１〜１５０の整数の場合は、炭素数６〜３６
   の直鎖炭化水素基 Ｒ１及びＲ６Ｉ　炭素数５〜２３の炭化水素基Ｒ，，Ｒ
   ，及びＲＱ　Ｉ　水素原子又は炭素数６〜２４のアシル
   基（ただし、−分子中にＲ８と鳥を両方含む場合、その
   うち少なくとも一方は水素原子である） Ｒ＋０及びＲ２，；　水素原子又は炭素数６〜２４の炭
   化水素基（ただし、そのうち少くとも一方は水素原子で
   ある） Ｒ１２＋　Ｒｌｇ及びＲ，、、炭素数１〜２４の炭化水
   素基 Ｒ１５及びＲ１６１炭素数１〜４の炭化水素基若しくは
   ヒドロキシ炭化水素基若化水素基ル基 Ｒ３７；　炭素数９〜２３の炭化水素基Ｒ４：　炭素数
   １〜２４の炭化水素基若しくは（５） ヒドロキシ炭化水素基又はベンジル基 Ｍ：　アルカリ金属、アルカノールアンモニウム、テト
   ラアルキルアンモニウム、リジン、アルギニン、ヒスチ
   ジン又はモルホリンのいずれか Ｘｅ１４級アンモニウムイオンの対イオンとなるアニオ
   ン １’、ｍ’及びｎ′：０又は１〜１５０の整数ｐ、ｑ及
   びｒＩ　１〜１５０の整数 ｔｓ　１〜４の整数 Ａ：　前記と同じ で表わされる化合物群から選ばれた界面活性剤。 ２、（Ａ）成分中、基２における中和された陰イオ意味
   を有する）である特許請求の範囲第１項記載のベシクル
   用組成物。 ３、（Ｂ）成分中、基Ｍにおけるアルカノールアンモニ
   ウムがモノエタノールアンモニウム、ジェ（６） タノールアンモニウム、トリエタノールアンモニウム、
   モノイソプロパツールアンモニウム、ジイソプロパツー
   ルアンモニウム又はトリイソブｏパノールアンモニウム
   のいずれかでアリ、テトラアルキルアンモニウムがテト
   ラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、テ
   トラプロピルアンモニウム、テトラブチルアンモニウム
   、又ハチトラペンチルアンモニウムのいずれかである特
   許請求の範囲第１項又は第２項記載のベシクル用組成物
   。