JPS6061659A - 白血球保護剤を含む流動式血球計測法溶解試薬 - Google Patents
白血球保護剤を含む流動式血球計測法溶解試薬Info
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は赤血球溶解用試薬、特定的には流動式血＃引数
型装置により標準的３部（３−ｐａｒｔ ）示差式白血
球計数を行うのに有用な白血球保護剤を當む赤血球溶解
用試薬に関する。
型装置により標準的３部（３−ｐａｒｔ ）示差式白血
球計数を行うのに有用な白血球保護剤を當む赤血球溶解
用試薬に関する。
臨床分野に自動化装置を供給する必要性が種々の型の血
球計数を行うことが出来る多種の装置の開発を促がして
来た１、赤血球、血小板または白血球の目動計数ｔ／′
ｉ拙々の方法により行うことが出来る。例えば、ある柚
の装置はｐＩＬ動式血球訂敢の原理に基〈装置を含みそ
して一般に集光光源により照明された部分を単一流解析
のもとて個々に通過する細胞の光散乱特性を分析するこ
とＶＣより操作するものとして説明することが出来ろ１
．必要な照明には典型的にはレーザーが用いられそして
散乱は複数の角度で測定されろ。
球計数を行うことが出来る多種の装置の開発を促がして
来た１、赤血球、血小板または白血球の目動計数ｔ／′
ｉ拙々の方法により行うことが出来る。例えば、ある柚
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して一般に集光光源により照明された部分を単一流解析
のもとて個々に通過する細胞の光散乱特性を分析するこ
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．必要な照明には典型的にはレーザーが用いられそして
散乱は複数の角度で測定されろ。
しばしば、一つの種＠却ｊ胞に関して計数オ＾度を保つ
ために他の棟類の細胞により発生する散乱効果を除去す
ることが必要となる１、これｅよ関与する種類に対して
特異的に作用する溶解試薬を用いろことにより達成する
ことが出来ろ。
ために他の棟類の細胞により発生する散乱効果を除去す
ることが必要となる１、これｅよ関与する種類に対して
特異的に作用する溶解試薬を用いろことにより達成する
ことが出来ろ。
現在、不発明の譲受人は赤血球及び血小板の計数並びに
五つの従来測定されている因子： １１ Ｇ Ｂ 。
五つの従来測定されている因子： １１ Ｇ Ｂ 。
１１ｃＴ、ＭＣＶ、ＭＣｌ１及びＡｉ Ｃノｔ ｔ’の
測定を行うことが出来るＥＬＴ系列の装置を市販してい
る。
測定を行うことが出来るＥＬＴ系列の装置を市販してい
る。
然しなから最近、同譲受人は白血球示差計数、即ち所、
渭３部示差討ｎ （３−Ｐａｒｔ Ｉ）ｉｊ’ｃｏｕｎ
ｔｓ ）に対する臨床医の要求が増加して来たことに遭
遇した。これにｔま、三つの白血球並集団（リンパ球、
顆粒球及び単球）を１１数し得るように更に一つの装置
能力を必要とする。これを達成するために、白血球の敗
乱將性に著しく且つ悪い影響を与えることなく赤血球を
選択的に溶解することが必要となる。
渭３部示差討ｎ （３−Ｐａｒｔ Ｉ）ｉｊ’ｃｏｕｎ
ｔｓ ）に対する臨床医の要求が増加して来たことに遭
遇した。これにｔま、三つの白血球並集団（リンパ球、
顆粒球及び単球）を１１数し得るように更に一つの装置
能力を必要とする。これを達成するために、白血球の敗
乱將性に著しく且つ悪い影響を与えることなく赤血球を
選択的に溶解することが必要となる。
本発明の一つの目的は、白血球に好ましくない影響を与
えることなく赤血球を溶解することが出来、他力白血球
の光散乱測定が可能な試薬を提供することである。
えることなく赤血球を溶解することが出来、他力白血球
の光散乱測定が可能な試薬を提供することである。
更に一つの目的は、検知装置の性能が悪い影響を受けな
いように溶解試薬が十分な速度で作用するようにするこ
とである。
いように溶解試薬が十分な速度で作用するようにするこ
とである。
本発明のなお更に一つの目的は、高性能ＥＬＴ系列の装
置に用いるだめの、白血球保護作用ｒ有する赤血球溶解
用試薬を提供し、そルＶＣより３部示差計敬を可能にす
ることである。
置に用いるだめの、白血球保護作用ｒ有する赤血球溶解
用試薬を提供し、そルＶＣより３部示差計敬を可能にす
ることである。
本発明の原理及び目的に従えば、第１表に記載されたも
のから選らばれた親水性の浸透性分子、７’ ＲＩ Ｓ
ｔたは２−アミノ−２−メチル−１，３−プロ・ぞン
ジオールのごとき有機窒素ｐ１゛有緩偵１剤及び１１
Ｅ Ｐ Ｅ Ｓまたは７’ Ａ Ｐ Ｓのごときエタン
スルホン酸緩衝剤を含み、全緩衝剤濃度が１０ｍＭ以下
である溶解試薬が提供される１、好捷しくに、緩衝剤は
約ｐ １１８．１乃至８．８の１ｌｆｌ″！囲のｐＨを
有するように調節される。好ましい具体例は災にフェノ
キシエタノール及び／またｔまネオマイ７ン瞳酸塩のご
とき保存剤を含む。
のから選らばれた親水性の浸透性分子、７’ ＲＩ Ｓ
ｔたは２−アミノ−２−メチル−１，３−プロ・ぞン
ジオールのごとき有機窒素ｐ１゛有緩偵１剤及び１１
Ｅ Ｐ Ｅ Ｓまたは７’ Ａ Ｐ Ｓのごときエタン
スルホン酸緩衝剤を含み、全緩衝剤濃度が１０ｍＭ以下
である溶解試薬が提供される１、好捷しくに、緩衝剤は
約ｐ １１８．１乃至８．８の１ｌｆｌ″！囲のｐＨを
有するように調節される。好ましい具体例は災にフェノ
キシエタノール及び／またｔまネオマイ７ン瞳酸塩のご
とき保存剤を含む。
溶解試薬がｒ［用するｐＨの選択は二つの観点から重要
であり、ｐｎが比較的低い場合、溶）すγは著しく遅い
速度で起り、その結果好ましくない遅延を招く。このよ
うな遅延は検出性能に悪い影響を与えるであろう３．他
方、過度に高いｐｌ−１、例えばｐＨ９，０以上の場合
には、白血球の速い劣化を起すことが見出されている。
であり、ｐｎが比較的低い場合、溶）すγは著しく遅い
速度で起り、その結果好ましくない遅延を招く。このよ
うな遅延は検出性能に悪い影響を与えるであろう３．他
方、過度に高いｐｌ−１、例えばｐＨ９，０以上の場合
には、白血球の速い劣化を起すことが見出されている。
白血球の劣化は計数の精度に好ましくない影響を与える
。好ましいｐＨは約８１乃至８８の範囲におり、最適の
ｐＨはｐ ／、／ ８．５の近傍にあることが本発明の
発明者により見出された。
。好ましいｐＨは約８１乃至８８の範囲におり、最適の
ｐＨはｐ ／、／ ８．５の近傍にあることが本発明の
発明者により見出された。
更に１だ、用いられる特定の緩衝剤が溶解試薬の適切な
作用に対して重要であることが見出された。理想的には
、緩衝剤は最適のまたは望ましいｐＨに近いｐＫａを示
すものでなければならない。
作用に対して重要であることが見出された。理想的には
、緩衝剤は最適のまたは望ましいｐＨに近いｐＫａを示
すものでなければならない。
緩衝剤の存在はそれ自体溶質として作用する傾向を示し
、従って浸透作用により溶解過程を遅くするので、理想
的な緩衝剤はその必要濃度が低くそれによりその浸透効
果を抑制する工うに高い緩衝能を示すように選ばれるで
あろう。実際、部１表から選ばれた本発明の親水性の浸
透性分子と組合わせた楊会、本発明者は全緩価剤痰ｊ庄
を１０ｍＡｌ以下に保つことが必須であることを見出し
た。
、従って浸透作用により溶解過程を遅くするので、理想
的な緩衝剤はその必要濃度が低くそれによりその浸透効
果を抑制する工うに高い緩衝能を示すように選ばれるで
あろう。実際、部１表から選ばれた本発明の親水性の浸
透性分子と組合わせた楊会、本発明者は全緩価剤痰ｊ庄
を１０ｍＡｌ以下に保つことが必須であることを見出し
た。
なお更に、赤血球膜中のイオン通路Ｖこ対する緩ｉＩ剤
の影響のだめに、燐酸塩のごとき鉱酸性緩衝剤及ヒカル
ボン酸またはカルボキシル基を賞む分子は有効でないこ
とが見出された３、むＥ〜ろ、好捷しい緩衝剤ｔま有機
璧累含有緩衝剤、例えばＴ ＲＩＳまたは２−アミノ−
２−メチル−１，３−プロパンジオ゛−ルである。、こ
れら有機塩基と組合わせる場合、用いるべき最も好まし
い彪成分はエタンスルホン酸「良好緩衝剤」例えばｊｌ
／！； ｌ） Ｅ Ｓまたは７’ Ａ Ｐ Ｓである
。或いはまた、硼酸をそれ自体でまたはより有利にはＴ
Ｒｌ５（史に一つの「良好緩摘剤」）と共に用いること
が出来るが、本発明者はそれが上記の緩衝剤の組合わせ
より効果が小さいことを見出した。最も好ましい緩衝剤
は５ｔｎＭ ＴＲｌ５と２．５ ｍｋｆ ＴＡ ＰＳと
の組合わセテある。
の影響のだめに、燐酸塩のごとき鉱酸性緩衝剤及ヒカル
ボン酸またはカルボキシル基を賞む分子は有効でないこ
とが見出された３、むＥ〜ろ、好捷しい緩衝剤ｔま有機
璧累含有緩衝剤、例えばＴ ＲＩＳまたは２−アミノ−
２−メチル−１，３−プロパンジオ゛−ルである。、こ
れら有機塩基と組合わせる場合、用いるべき最も好まし
い彪成分はエタンスルホン酸「良好緩衝剤」例えばｊｌ
／！； ｌ） Ｅ Ｓまたは７’ Ａ Ｐ Ｓである
。或いはまた、硼酸をそれ自体でまたはより有利にはＴ
Ｒｌ５（史に一つの「良好緩摘剤」）と共に用いること
が出来るが、本発明者はそれが上記の緩衝剤の組合わせ
より効果が小さいことを見出した。最も好ましい緩衝剤
は５ｔｎＭ ＴＲｌ５と２．５ ｍｋｆ ＴＡ ＰＳと
の組合わセテある。
緩衝状態中の水はそれ自体大半の生物試料中の赤血球を
速かに溶解するが、それに伴って白血球の損失が著しく
、特にリン・ぐ球亜類の損失が太きい。勿論、このよう
な損失は計数に悪い影響を与えるので避けることが好ま
しい５、従って、白血球の溶解速度ケ低くめる溶質を加
えろことが必要となる１、本発明の具体例においては、
これらの溶質は付加的に白血球を溶解しないように保護
する作用を示すであろう。実際上如何なる溶質の付加は
浸透作用により溶解を遅ぐすると考えられるが、本発明
者は小さい親水性の脂質複層浸透剤である溶質のみが所
望の白血球保護作用を示すことを見出した。これらの化
合物は白血球及び特にリンパ球を俣護１−１然１−ｅが
らその作用型式を明確にすることは困難である。然（−
ながら、白血球保護剤の適切な選択により、なお開発途
上にある高性能Ｅ Ｌ Ｔ装置により著しくより商〈月
つより安定したリン・七球計数が得られろととｄ明かで
ある。然しなから、保護機構が白血球膜の安定化変質に
よるものか或いはそれが白血球膜）抱内での溶質剤の安
定強化作用に関係しているものなのか明らかではない。
速かに溶解するが、それに伴って白血球の損失が著しく
、特にリン・ぐ球亜類の損失が太きい。勿論、このよう
な損失は計数に悪い影響を与えるので避けることが好ま
しい５、従って、白血球の溶解速度ケ低くめる溶質を加
えろことが必要となる１、本発明の具体例においては、
これらの溶質は付加的に白血球を溶解しないように保護
する作用を示すであろう。実際上如何なる溶質の付加は
浸透作用により溶解を遅ぐすると考えられるが、本発明
者は小さい親水性の脂質複層浸透剤である溶質のみが所
望の白血球保護作用を示すことを見出した。これらの化
合物は白血球及び特にリンパ球を俣護１−１然１−ｅが
らその作用型式を明確にすることは困難である。然（−
ながら、白血球保護剤の適切な選択により、なお開発途
上にある高性能Ｅ Ｌ Ｔ装置により著しくより商〈月
つより安定したリン・七球計数が得られろととｄ明かで
ある。然しなから、保護機構が白血球膜の安定化変質に
よるものか或いはそれが白血球膜）抱内での溶質剤の安
定強化作用に関係しているものなのか明らかではない。
更に一つの利点として、好ましい白血球保護剤がその存
在により細胞残層と白血球との間の優れた分割作用を示
すことが見出された７、この場合も、この効果のもとと
なる機構は十分明かではないが、赤血球俗解に対する直
接的効果捷たは浴屓後の残層に対する光年的効果による
ことが考えられ得ろ。
在により細胞残層と白血球との間の優れた分割作用を示
すことが見出された７、この場合も、この効果のもとと
なる機構は十分明かではないが、赤血球俗解に対する直
接的効果捷たは浴屓後の残層に対する光年的効果による
ことが考えられ得ろ。
然しなから、本発明者は、このような考え力に固執する
ことなく、第１表に記載された好捷しい白血球保護剤の
各群中の白血球保護剤の効果は分予備の長さに関係して
いると信じている。例えば、最も好ましい白血球保護剤
であるブトキシェタノールはメトキシエタノールより効
果のあるエトキシエタノールより更に効果が大きいこと
が見出された。より長い、より脂溶性の分子と効果との
この関係は脂溶性化合物が入り込むことより起る膜の部
分的構造の変質がここに観察される残層の減少効果に係
る機構であることを暗示Ｅ〜でいると考えられる。
ことなく、第１表に記載された好捷しい白血球保護剤の
各群中の白血球保護剤の効果は分予備の長さに関係して
いると信じている。例えば、最も好ましい白血球保護剤
であるブトキシェタノールはメトキシエタノールより効
果のあるエトキシエタノールより更に効果が大きいこと
が見出された。より長い、より脂溶性の分子と効果との
この関係は脂溶性化合物が入り込むことより起る膜の部
分的構造の変質がここに観察される残層の減少効果に係
る機構であることを暗示Ｅ〜でいると考えられる。
然しなから、すべての場合において、白血球保護、残層
変質剤の作用は濃度に強く依存している。
変質剤の作用は濃度に強く依存している。
極めて低濃度では、９７７９球の一部は溶解されそして
残層が顕著になり得る。最適濃度では、リンパ球が保護
されそして残層は最小となり、他方極めて高い濃度では
、白血球の光散乱が好ましくない状態に変化しそして赤
血球が溶解しなくなる。
残層が顕著になり得る。最適濃度では、リンパ球が保護
されそして残層は最小となり、他方極めて高い濃度では
、白血球の光散乱が好ましくない状態に変化しそして赤
血球が溶解しなくなる。
赤血球が溶解しなくなることは溶液の滲透性の変化、甘
たは白血球において起る安定化と同様の様式で試薬によ
る赤血球膜の安定化に関係していると渚えられ得ろ。従
って、本発明者は最も好ましい具体例は白血球保護剤ブ
トキシェタノールを約６０ｍＭの濃度ヤ用いろことであ
ることを見出（〜だ。
たは白血球において起る安定化と同様の様式で試薬によ
る赤血球膜の安定化に関係していると渚えられ得ろ。従
って、本発明者は最も好ましい具体例は白血球保護剤ブ
トキシェタノールを約６０ｍＭの濃度ヤ用いろことであ
ることを見出（〜だ。
最も好ましい具体例は付加的にＩＩａ菌及び菌の成長を
避けるために保存剤を営む。多くの医薬保存剤は過度の
溶解を起すかまたは滲透的に溶解を抑制するので、それ
らに使用に適さない。それに対し、理想的な保存剤は非
イオン性でありそ１．て極めて低濃度で効果を示し、そ
れにより滲透効果を減じるであろう。本発明の俗解用試
薬は作用に対しては保存剤を必要としないが、好ましい
具体例では、４ｍＭフェノキシエタノール及びｔ ｏ
ｍｙ ／ｌネオマイシン硫酸塩が配合され、それにより
棚寿命が長くなる。
避けるために保存剤を営む。多くの医薬保存剤は過度の
溶解を起すかまたは滲透的に溶解を抑制するので、それ
らに使用に適さない。それに対し、理想的な保存剤は非
イオン性でありそ１．て極めて低濃度で効果を示し、そ
れにより滲透効果を減じるであろう。本発明の俗解用試
薬は作用に対しては保存剤を必要としないが、好ましい
具体例では、４ｍＭフェノキシエタノール及びｔ ｏ
ｍｙ ／ｌネオマイシン硫酸塩が配合され、それにより
棚寿命が長くなる。
第１表は本発明の好ましい白血球保護剤を示し、最も好
ましい試薬は／Ｊ群中に示されている。米発明者により
考えられる最良の型はリンパ球保獲剤としてブトキシェ
タノールを用いろであろう。
ましい試薬は／Ｊ群中に示されている。米発明者により
考えられる最良の型はリンパ球保獲剤としてブトキシェ
タノールを用いろであろう。
第 １ 表
３群
メタノール５００ｍＭ ３００〜？ ００ｍＭエタノー
ル ４００ ２００〜６００ プロパツール １５０ ５０〜５００ ブタノール ７０ ２０〜５００ ペンタノール ３５ １０〜２５０ Ｂ群 メトキシエタノール２５０ｍＡｌ 、１００〜７００ｍ
Ｍエトキシエタノール １２０ ５０〜５００ブトキシ
エタノール ６０ １０〜３００メトキシエトキシエ
１５０ ５０〜４００タノール エトキシエタノール １００ １０〜３００タノール プトキシエトキシエ ５０ １ （１〜３００タノール ６群 エチレングリコ）ｕ ３２５ｍＡｆ １！ｉ０−ＧＯＯ
ｍｋｌプロピレングリコール ２５０ １５０〜５００
Ｄ群 エチルエーテル ２５０ｍＭ １００〜５００ｎ＋Ｊエ
チレングリコール １００ ２５〜４００ジメチルエー
テル エチレングリコール ７５ ２５〜２５０ジエチルエー
テル ２−メトキシエチル ７５ ２５〜２５０エーテル テトラヒドロフラン ２７５ １１） ０〜５００Ｌ”
群 アセト７ ２５０ｍＭ ５０〜５００ｍＭメチルエチル
ケトン ２７５ ｓｏ〜５００アセトニトリル ４００
５０〜６００ニトロメタン ３００ ５０〜５００ エチルアセテ−） １２０ ２５〜３００２−メトキシ
メチルア ８０ ２０〜２５０セテート Ｆ群 ジオキサン ４５０脩Ｍ ２００〜６００惧Ｍピリジン
３５０ ３００〜７００ イεダゾール ２２５ １００〜４０ＯＮ−メチルピロ
リドン ２５０ １５０〜４５０ジメチルアセドア好ド
４５０ ２００〜６００ジメチルホルムアミド ４０
０ ２００〜６００ホルムアミド ４５０ ２００〜６
００ジメチルスルホキシド ２００ ５０〜４００−メ
ーン
ル ４００ ２００〜６００ プロパツール １５０ ５０〜５００ ブタノール ７０ ２０〜５００ ペンタノール ３５ １０〜２５０ Ｂ群 メトキシエタノール２５０ｍＡｌ 、１００〜７００ｍ
Ｍエトキシエタノール １２０ ５０〜５００ブトキシ
エタノール ６０ １０〜３００メトキシエトキシエ
１５０ ５０〜４００タノール エトキシエタノール １００ １０〜３００タノール プトキシエトキシエ ５０ １ （１〜３００タノール ６群 エチレングリコ）ｕ ３２５ｍＡｆ １！ｉ０−ＧＯＯ
ｍｋｌプロピレングリコール ２５０ １５０〜５００
Ｄ群 エチルエーテル ２５０ｍＭ １００〜５００ｎ＋Ｊエ
チレングリコール １００ ２５〜４００ジメチルエー
テル エチレングリコール ７５ ２５〜２５０ジエチルエー
テル ２−メトキシエチル ７５ ２５〜２５０エーテル テトラヒドロフラン ２７５ １１） ０〜５００Ｌ”
群 アセト７ ２５０ｍＭ ５０〜５００ｍＭメチルエチル
ケトン ２７５ ｓｏ〜５００アセトニトリル ４００
５０〜６００ニトロメタン ３００ ５０〜５００ エチルアセテ−） １２０ ２５〜３００２−メトキシ
メチルア ８０ ２０〜２５０セテート Ｆ群 ジオキサン ４５０脩Ｍ ２００〜６００惧Ｍピリジン
３５０ ３００〜７００ イεダゾール ２２５ １００〜４０ＯＮ−メチルピロ
リドン ２５０ １５０〜４５０ジメチルアセドア好ド
４５０ ２００〜６００ジメチルホルムアミド ４０
０ ２００〜６００ホルムアミド ４５０ ２００〜６
００ジメチルスルホキシド ２００ ５０〜４００−メ
ーン
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、メタノール、エタノール、プロＡ／−ル、ブタノー
ルおよびペンタノールから成る７群；メトキシエタノー
ル、エトキシェタノーノリ、ブトキシェタノール、メト
キシエトキシエタノール、エトキシエトキシエタノール
およびブトキシエトキシエタノールから成る８群；エチ
レングリコールおよびフ０ロビレングリコールから成る
６群；エチルエーテル、エチレングリコールジメチルエ
ーテル、エチレングリコールジエチルエーテル、２−メ
トギシエチルエーテルおよびテトラヒドロフランから成
Ｌ １３群１アセトン、メチルエチルケトン、アセトニ
トリル、ニトロメタン、エチルアセテートおよび２−メ
トキシエチルアセテートから成ろＬ“群；並びにジオキ
サン、ピリジン、イばダゾール、Ｎ−メチルピロリドン
、ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムアミド、ホル
ムアミド、ジメチルスルホキシドお裏び１−ドデシル−
アザ−シクロへブタン−２−オンから成るｌ・群によっ
て構成される白血球保護剤群から選ばれる白血球保護剤
、並びに 良好緩衝剤類（Ｇｏｏｄ ＢＪ９ｅｒｓ ）から成る群
から選ばれたエタンスルホン酸緩衝剤と有機望累會有緩
衝剤の組合せ捷たは硼酸塩緩衝剤を含みそ１〜て該緩衝
剤の組合せ甘たけ硼酸塩ｕ１ｍｉ剤が１（３ｍＭ以下の
濃度を形成することを特徴とする、流動式血球装置に用
いるだめの溶解用試薬１．２、 非イオン性でありそし
て赤血球の俗解を実質的に誘発または阻止しない濃度に
て存在する、細菌（バクテリア）及び菌（ファンジ）の
成長抑土用抗微生物性保存剤に更に含む特許請求の範囲
第１項記載の試薬９． ３、緩衝剤がそれぞれＴ ＲＩ Ｓ及びＴＡＰＳであり
、そして保存剤がフェノキシエタノール及びネオマイシ
ン硫酸塩を含有して成る特許請求の範囲第２項記載の試
薬。 ４、Ｔ ＲＩ Ｒが約５ｎＬ／Ｉ／の濃度・にて存在し
、ＴＡＰＳが約２．５ ｍ、Ｍの濃度にて存在し、フェ
ノキシエタノールが約４ ｍ Ｍの濃度にて存在しそし
てネオマイシン硫酸塩が約１．０ ｔｎｙ ／リットル
の濃度にて存在する特許請求の範囲第３項記載の試薬。 ５、 有機窒素含有緩衝剤が７” ＲＩ Ｓ及び２−ア
ミノ−２−メチル−１，３−プロパンジオールより成る
群から選らばれそしてエタンスルホン酸緩衝剤が１１
Ｅ Ｐ Ｅ Ｓ及びＴＡＰＳより成る群から選らばれる
ものである特許請求の範囲第１項記載の試薬。 ６ 白血球保護剤が特許請求の範囲第１項記載に記載の
濃度にて存在する特許請求の範囲第５項記載の試薬。 に記載の濃度にて存在する特許請求の範囲第５項記載の
試薬。 に記載の濃度にて存在する％計請求の範囲第５項記載の
試薬。 ９、 白血球保護剤が特許請求の範囲第１項記載のＤ群
の物質群から選らばれ、そしてそれぞれが第１表に記載
の濃度にて存在する特許請求の範囲第５項記載の試薬。 １０、白血球保護剤が特許請求の範囲第１項記載のＥ群
の物質群から選らばれ、そしてそれぞれが第１表に記載
の濃度にて存在する特許請求の範囲第５項記載の試薬、
。 １１、白血球保護剤が特許請求の範囲第１項記載のＦ群
の物質群から選らばれ、そしてそれぞれが第１表に記載
の濃度にて存在する特許請求の範囲第５項記載の試薬。 １２ 白血球保護剤がブトキシェタノールである特許請
求の範囲第７項記載の試薬。 １３、．４群から選らばれる白血球保護剤が第１表に記
載のはｌぽ最適濃度にて存在する特許請求の範囲第６項
記載の試薬。 １４、 Ｂ群から選らばれる白血球保護剤が第１０表に
記載のほぼ最適濃度にて存在する特許請求の範囲第７項
記載の試薬。 Ｘ５．Ｃ群から選らばれる白血球保護剤が第１表に記載
のほぼ最適濃度にて存在する特許請求の範囲第８項記載
の試薬。 １６、Ｄ群から選らばれる白血球保護剤が第１表に記載
のほぼ最適濃度にて存在する特許請求の範囲第９項記載
の試薬。 ｌｒ、Ｅ群から選らばれる白血球保護剤が第１表に記載
のほぼ最適濃度にて存在する特許請求の範囲第１０項記
載の試薬。 １Ｂ、Ｆ群から選らばれる白血球保護剤が第１素に記載
のほぼ最適濃度にて存在する特許請求の範囲第１１項記
載の試薬。 １９、第１表に記載されたＢ群から成る群より選らばれ
そ［〜で第１表に記載されたそれぞれの好に用いる赤血
球溶解用試薬。 ２０、第１表のＢ群から選らばれる化合物が約１０〜３
００ｍＭの範囲の濃度にて存在するグトキシエタノール
であり、１“ノｔｌｓ緩衝剤が約５ ｍＭの濃度にて存
在し、ＴＡＰＳ緩衝剤が約Ｚ５ｍＭの濃度にて存在し、
そして更に約４ｍ＆の濃度にて存在するフェノキシエタ
ノールと約１．（Ｈ９／リットルの濃度にて存在するネ
オマイシン硫酸塩を含む特許請求の範囲第１９項記載の
試薬。 ２１、約６０ ｍＪＩの濃度にて存在するブトキシェタ
ノール、約５ｍ７１ｆの濃度にて存在する７” ＲＩＳ
緩衝剤及び約２．５ ｍｌＫの濃度にて存在するＴＡｌ
） Ｓ緩衝剤を営む溶解用試薬。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/525,575 US4637986A (en) | 1983-08-22 | 1983-08-22 | Flow cytometry lysing reagent with leukoprotective agent for producing a 3-part WBC count |
| US525575 | 1983-08-22 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6061659A true JPS6061659A (ja) | 1985-04-09 |
| JPH0623754B2 JPH0623754B2 (ja) | 1994-03-30 |
Family
ID=24093805
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59171700A Expired - Lifetime JPH0623754B2 (ja) | 1983-08-22 | 1984-08-20 | 白血球保護剤を含む流動式血球計測法溶解試薬 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4637986A (ja) |
| EP (1) | EP0136058B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0623754B2 (ja) |
| AU (1) | AU571562B2 (ja) |
| CA (1) | CA1227407A (ja) |
| DE (1) | DE3483635D1 (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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