JPS6056981A - １−（２−ヒドロキシエチル）−５−置換−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｂ〕ピラジン誘導体及び該化合物を含有する抗腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発−明は、下記式（１） （但し、Ｒはハロダン原子、水酸基、′アミノ基、−Ｏ
−Ｒ’基又は−Ｎｕ−Ｒ’基（ここで、Ｗはアルキル基
、シクロアルキル基、ペンシル基、フェニル基又は１′
以上の水素原子がハロゲン原子、アルキル基もしくは低
級アルコキシル基で置換されたフェニル基を示す）であ
る） で示される化合物から選ばれる１−（２−ヒドロキシエ
チル）−５−置換−Ｉ　Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｂ）ピ
ラジン誘導体及びこれら化合物を有効成分とする抗腫瘍
剤に関する。

従来よ）、抗腫瘍作用を有する種々の物質が開発され、
提案されているが、現在側われている抗）■瘍剤の多く
は、増殖速度の比較的速い血液癌や小児楠のある種のも
の或いは婦人の繊毛腰痛などには有効でおりても、増殖
速度の遅い固型油に有効なものは少ない。これは、増殖
速度が速い血液癌中人癌のある種のものに対しては抗腫
瘍剤が腫瘍細胞に作用する機会が多く、このため抗腫瘍
剤が比較的良く効くものであるが、乳癌、肺癌、大腸癌
等の固型油はいずれもゆっくフと増殖するため、抗１１
ｆｉ瘍剤が腫瘍細胞に作用する機会が少なく、従ってこ
れら固型油に対しては抗腫瘍剤による化学療法が困縮な
ものとなっている。また、１傾動細胞と正常細胞とは細
胞成分の構成や生化学的な活性が良く似ているため、抗
腫瘍剤が腫瘍細胞のみに選択毒性を発揮することを期待
するのは極めて困難であ）、従って一般に抗腫瘍剤には
毒性が強く副作用が強いものが多い。このため、従来よ
シ代謝が遅く比較的持続性がラシ、固型油に対しても有
効で、かつ低毒性で副作用の弱い抗１」里劫剤の開発が
望まれている。

本発明者は、比較的毒性の低い代−１拮抗性の抗腫瘍剤
を得ることを目的とし、核酸塩基の１つであるプリンと
類似の構造を有する化合物を個々合成してスクリーニン
グテストを行なっているうち、５−クロロ−１−（２−
アセチルオキシ）−１Ｈ−ピラジンをアルコキシド或い
はアミン等と反応させるなどの方法によ′）、前記（１
）式で示される新規化合物１−（２−ヒドロキシエチル
）−５−置換−ＩＨ−ピラゾロ（３，４−ｂ　）ピラジ
ン誘導体が得られると共に、これらの化合物が優れた抗
腫瘍作用を有し、抗腫瘍剤として効果的に使用し得るこ
とを知見し、本発明をなすに至りたものである。

以下、本発明につき更に詳しく説明する。

本発明に係る新規化合物１−（２−ヒドロキシエチル）
−５−ｉｉ１換−ＩＨ−ピラゾロ（３，４−ｂ）ピラジ
ン誘導体は、上述した（１）式、即ち（Ｊ１２　Ｃ■２
０Ｒ （但し、Ｒはハロゲン原子、水酸基、アミノ基、−０−
＊基又は−ＮＨ−Ｒ’基（ここで、Ｒ′はアルキル基、
シクロアルギル基、ベンジル基、フェニル基又は１以上
の水素原子がハロダン原子、アルキル基もしくは低級ア
ルコキシル基で置換されたフェニル基を示す）である） で示される化学構造式を有する化合物である。

なお、ここでハロゲン原子としてはＣＺ　＋　Ｂｒ等が
、アルキル基としてはＣｔＬＨ２ｎ＋１　（但し、ｎ　
＝　１（但し、ｎ＝３〜５）等が、低級アルコキシル基
としては０Ｃｎｕ２ｎ＋１　（但し、ｎ　＝　１〜６　
）等が挙げられる。

上記一般式（１）で示される化合物のうちで、下記式（
１ａ） （但し、Ｒ′は（１）式で示したと同様のものである）
で示される５−アルコキシ−１−（２−ヒドロキシエチ
ル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ　］ピラジン誘導体
は例えば下記方法によシ合成することができる（下記反
応式Ａ参照）。

即ち、５−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）−ピ
ラゾール−４−カルボン酸（下記式２）を加熱し、脱炭
酸を行なりて５−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル
）−ピラゾール（下記式３）を合成し、これを乾燥した
後、塩酸存在下にメタノール中で亜硝酸イソアミルと反
応させて５−アミノ−４−ニトロン−１−（２−ヒドロ
キシエチル）−ピラゾール塩酸塩（下記式４）を得る。

これをパラジウム−炭素等を用いて接触還元した後、触
媒を除去し、次にこれを水又はメタノール中でグリオキ
シル酸と反応させて５−ヒドロキシ−１−（２−ヒドロ
キシエチル）−１Ｈ−ピラゾロ（３，４−ｂ　）ピラジ
ン（下記式５、本発明化合物）を合成し、これに無水酢
酸を作用させて５−アセチルオキシ−１−（２−アセチ
ルオキシエチル）−ピラゾロ（３，４−ｂ　）ピラジン
（下記式６）を得た後、これを加水分解して４．５−ジ
ヒドロ−１−（２−アセチルオキシエチル）−１Ｈ−ピ
ラゾロ［３，４−ｂ　］−］ピラジンー５−オン下記式
７）を得、これにオキシ塩化リンを作用させて５−クロ
ロ−１−（２−アセチルオキシエチル）−１■−ピラゾ
ロ［３，４−ｂ　）ピラジン（下記式８）′ｆｔ合成す
る。これに、アルコキシ１９（Ｒ’−ＯＮｍ　）を作用
させて５−アルコキシ−１−（２−ヒドロキシエチル）
−１Ｈ−ピラゾロ〔３・４−ｂ〕ピラジン誘導体（弐１
ａ）を得るものである。

（２）　（３） −ＣＨ２ＣＨ２０Ｈ （４） Ｌ：Ｈ２Ｃｌ１２０ＣＯＣＨ５ （６） （７）Ｃ）１２ｃＨ２０ｃｏ°１゜ ＣｋｈＣＨ２０ＣＯＣＨ＆ （８） ＣＨ２ＣＨ２０Ｈ （１ｍ） １７′ｃ１上記一般式（１）で示される化合物のうちで
下記式（１ｂ） ｃｏ２０Ｈ２０Ｈ で示される５−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）
−１Ｈ−ピラゾロ（３，４−ｂ　）ピラジン誘導体は、
上記（８）式の５−クロロ−１−（２−アセチルオキシ
）−１Ｈ−ピラゾロ（３，４−ｂ　）ピラジンにアミン
（Ｒ′−ＮＨ２）を作用させることによって得られる。

前記（０式の化合物は、優れた抗腫瘍作用を有し。

癌化細胞の増殖を抑制するため、抗腫瘍剤として有効に
使用される。

なお、（０式の化合物を抗腫瘍剤として用いる場合、（
１）式においてハ、ロダン原子がＣｔ又はＢｒで、アル
キル基がｃｎＨ２ｎ＋１　（但し、ｎ＝１〜８）”Ｃ’
、シクロアルキル基が［ｋ、Ｈ２１（但し、ｎ＝３〜５
）で、低級アルコキシル基がＱＣｎＨ２ｎ＋１　（但し
、ｎ＝１〜６）であるものが好ましい。

本発明に係る抗腫瘍剤は、（１）式の化合物を有効成分
とするもので、これら（１）式の化合物は単独で又は必
要によシ他の医薬成分と併用して静脈内注射、皮下注射
、筋肉内注射、経口投与、廃剤にょる直腸投与等の方法
で投与される。その投与量は投与経路、投与回数等によ
り異なり、また症状の軽重などに依存して広範囲に変え
ることができるが、一般には治療的有効投与量は一日当
たり体重１ｋＩＩにつき本発明有効成分約１〜５０ダで
ある。

本発明に係る抗腫瘍剤は、一般式（１）で表わされる化
合物の有効量に適当量の無毒性担体を配合し、任意慣用
の製剤方法を用いて投与用に調製することができる。即
ち、経口投与用に調製する場合は、軟カプセル、硬カシ
セル、錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、有効成分持続的解
放剤、液剤、懸濁剤等に調製され、非経口投与する場合
をよ、注射剤、点滴剤、座薬等に調製される。この場合
、製剤化するに際しては、無毒性担体、例えばアルコー
ル、エステル類、Ｉリエチレングリコール誘導体、ソル
ビタン脂肪酸エステル類、硫酸化脂肪アルコール類等の
界面活性剤、アラビヤガム、ゼラチン、ツルヒツト、ト
ラガカント〃ム　、Ｈ？リビニルビロリドン等の結合剤
、蔗糖、乳糖、デンプン、結晶セルロース、マンニット
、軽質無水ケイ酸、アルミン酸マグネクウム、メタケイ
酸アルミン酸マグネシウム、合成ケイ酸アルミニウム、
炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、リン酸水素カル
シウム、カルボキンメチルセルロースカルシウム等の賦
形剤、ステアリン酸マグネシウム、タルク、硬化油等の
滑沢剤、食塩、サッカリン、オレ・ンジ油、カンソウエ
キス、クエン酸、ブドウ糖、メントール、ユーカリ油、
リンゴ酸等の矯味剤、矯臭剤、ココナツツ油、オリーブ
油、ゴマ油、落花生油、乳酸カルシウム、ベニバナ油、
大豆リン脂質等の懸濁剤、湿潤剤、酢酸フタル酸セルロ
ース（ＣＡＰ　）などのセルロース、糖類等の炭水化物
誘導体、アクリル酸メチル・メタアクリル酸共重合体、
メタアクリル酸メチル・メタアクリル酸共重合体などの
アクリル酸系共重合体、二塩基酸モノエステル類等のポ
リビニル誘導体等の皮膜形成剤、コーティング助剤など
の成分を用いて慣用の方法で調製され、使用に供される
。なお、粘膜適用の製剤、特に廃剤を調製する場合には
、基剤としてカカオ脂、ラウリン脂、ポリエチレングリ
コール、グリセロゼラチン、ステアリン酸ナトリウム、
又はそれらの混合物が用いられる。更に、注射剤も慣用
の方法によって調製されるが、注射用蒸留水に懸濁或い
は乳化させる方法を採用する場合は、懸濁化剤として、
ンルピ、トシロッゾ、メチルセルロース、ゼラチン、ヒ
ドロキシエチルセルロース、ステアリン酸アルミニウム
ダル等が使用でき、また乳化剤としてモノオレイン酸ソ
ルビタン、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、レシチン
等を使用できる。

次に、本発明化合物（１）の製造例を具体的に示す。

〔製造例１〜１７〕 ５−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）−ピラゾー
ル−４−カルボン酸（前記（２）式の化合物）１７１．
０Ｆをナス型フラスコに入れ、これを還流冷却器により
発泡が終るまで１６０℃で加熱する。

その後、反応混合物を熱クロロホルム１０（Ｍｌ／に溶
解し、冷却後析出した結晶を戸数して無色プリズム状結
晶の５−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）−ピラ
ゾール（前記式（３）の化合物、ｍ−ｐ・１１０〜１１
１℃）１１５．７Ｆ（収率９１．７％）を得る。

３６．５．９の塩化水素ガスを含むエタノール１００ａ
を０〜５℃に冷却し、これに反応温度を５℃以下に保ち
ながら攪拌下に上記５−アミノ−１−（２−ヒドロキシ
エチル）−ピラゾール１２７．５．９を滴下した後、析
出した結晶を炉取してこれを少址の冷エタノール、次い
でアセトンで洗浄し、更に乾燥して無色粉状結晶の５−
アミノ−４−ニトロソ−・１−（２−ヒドロキシエチル
）−ヒラゾール塩酸塩（前記式（４）の化合物、分解温
度１５２〜１５４℃）１２５．２．９（収率６５チ）を
得る。

上記５−アミノ−４−二トロン−１−（２−ヒドロキシ
エチル）−ピラゾール塩酸塩１９２．６　Ｎをメタノー
ルに溶解し、これにパラジウム−炭素５１１を加えて接
触還元を行なった後、触媒を除去し、その後新たにメタ
ノール１００ｄを加え、これに水冷下において５０チグ
リオキシル酸水溶液１５０Ｉを攪拌しながら徐々に滴下
し、滴下後室温で１時間攪拌する。次に、仁れを沸騰水
浴上で１時間加熱した後冷却し、析出した結晶を沖取し
、これをメタノールで再結晶して淡黄色針状結晶の５−
ヒドロキシ−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピ
ラゾロ［３，４−ｂ　）ピラジン（前記（５）式の化合
物、ｍ、ｐ−，２５９〜２６０℃）１０８．ＯＦ（収率
６０．０チ〕を得る（製造例１）。

上記５−ヒドロキシ−１−（２−ヒドロキシエチル）−
１Ｈ−ピラゾロ（３，４−ｂ〕ピラジンｉ　ｓ　ｏ、ｏ
　ｙに無水酢酸５０９ａｌを加えて２時間還流した後、
過剰の無水酢酸を留去し、残渣をクロロホルムに溶かし
、これを５チ炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄する。次
いで、これからクロロホルムを留去し、析出した結晶を
戸数し、これをペンゼｙで再結晶して無色針状結晶の５
−アセチルオキシ−１−（２−アセチルオキ７エチル）
−１Ｈ−ピラゾロ（３，４−ｂ）ピラジン（前記（６）
式の化合物、ｍ−ｐ・８５〜８６　Ｃ）　２６（１，０
１１（収率９Ｂ、０％）を得る・ 上記５−アセチルオキシ−１−（２−アセチルオキシエ
チル）−１Ｈ−ピラゾロ（３，４−ｂ）ピラノン２６４
．ＯＪＦをエーテル５００ゴに溶解し、これにヘキシル
アミン１２０．０．９を加え、室温にて２時間放置後、
析出した結晶を枦取し、これをクロロホルムで再結晶し
て無色針状結晶の４，５−ジヒドロ−１−（２−アセチ
ルオキシエチル）−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｂ）ピラ
ゾン−５−オン（前記（７）式の化合物、ｍ、ｐ、１７
３〜１７４℃）’２１１．ＯＮ（収率９５．０％）を得
る。

上記４．５−ジヒドロ−１−（２−７セーｆｌｋオキシ
エチル）　−１ＩＩ−ピラゾロ（３，４−ｂ）ピラノン
−５−オン２２２．ＯＡ’及びオキシ塩化リン５ｏｏＩ
ＩＬｌをナス型フラスコに入れて６時間還流した後、過
剰のオキシ塩化リンを減圧留去し、残渣をベンゼンに溶
かし、これを５％炭酸水素ナトリウム水溶液で冷却下に
洗浄する。次いで、これからベンゼンを留去し、残渣を
ベンゼン−ヘキサン水溶液で再結晶して無色針状結晶の
５−クロロ−１−（２−７セテルオキシエテル）−１）
１−ピラゾロ〔３゜４−ｂ〕ピラジン（前記（８）式の
化合物、ｍ−ｐ、　５２〜５３℃）１９０．０ＪＦ（収
率７９，０チ）を得る。

次に、上記５−クロロ−１−（２−アセチルオキシ）　
−ｉ　■Ｉ−ビラゾ胃（３，４−ｂ）ピラ゛ジン１ｇを
５％水酸化ナトリウム５ゴ及びエタノール１０ｍ１Ｋ溶
解し、室温で１時間攪拌して製造例２の目的化合物を得
た。また、５−クロロ−１−（２−アセチルオキシエチ
ル）−１Ｈ−ピラゾロ（３，４−ｂ〕ピラジンに第１表
に示す化合物をそれぞれ反応させ、製造例３〜１７の目
的化合物ｆ：得た。

例えば、製造例３においては、メタノール２０Ｍに金属
ナトリウムＩＩを溶解したものに５−りａｏ−１−（２
−アセチルオキシエチル）−１１（−ピラゾロ（３，４
−ｂ）ピラジン２．４ｇを加えて１時間還流した後、メ
タノールを留去し−Ｃ残渣をクロロホルムに溶解し、こ
れを水洗後、クロロホルムを留去し、析出した結晶をベ
ンゼンで再結晶して無色針状結晶の５−メトキシ−１−
（２−ヒドロキシエチル）−ＬＨニビラゾロ（３，４−
ｂ）ピラジン１．７２ｇ（収率８９．０チ）を得た。

製造例８においては、メタノール５　ｍｌに金属ツート
リウムＩＮを溶解したものにフェノール３Ｉ！及びジメ
チルスルフォキサイドｌＱｍを加え、次いで５−クロロ
−１−（２−アセチルオキシエチル）−ＩＨ−ピラゾロ
（３，４−ｂ）ピラジン２．４１を加えて１時間沸騰水
浴上で加熱した後、反応混合物をクロロポルムに溶解し
、これを１０チ水酸化ナトリウム水溶液で洗浄後、クロ
ロホルムを留去し、析出した結晶をベンゼンで再結晶し
て無色鱗片状結晶の５−７エノキシー１−（２−ヒドロ
キシエチル）　−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｂ）ピラジ
ン２．３３ｇ（収・率９０，０チ）を得た。

製造例１３においては、５−クロロ−１−（２−７セテ
ルオキシエチル）−１Ｈ−ピラゾロ〔３゜４−ｂ：］ピ
ラノン２．４１及びヘキシルアミン１０−ｉ＆ンペンロ
ールに入れ、これを封管中で１６０℃において３時間加
熱した後、過剰のアミンを減圧留去して残渣をクロロホ
ルムに溶解し、これを希塩酸水溶液次いで水で洗浄後、
クロロホルムを留去し、残渣をベンゼンで再結晶して黄
色ノリズム状結晶の５−シクロヘキシルアミノ−１−（
２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ
］ピラノン１．４３Ｉｉ（収率５８．０チ）を得た。

製造例１７においては、５−クロロ−１−（２−アセチ
ルオキシエチル）−１Ｈ−ピラゾロ〔３゜４−ｂ）ピラ
ジン２．４９及びノやラクロロアニ１ノン５．１＃ｔｙ
ｊ？ンペンロールに入れ、これを封管中で１６０℃にお
いて３時間加熱した後、反応混合物をクロロホルムに溶
解し、これを希塩酸水溶液次いで水で洗浄後、溶液を濃
縮し、こｔＬを７１ツカダルカラムクロマトグラフで目
的化合物を分１反し、これをクロロホルムで再結晶して
黄色剣状結晶の５−（４−クロロフェニルアミノ）−１
−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピラゾロ（３，４
−ｂ　）ピラジン２．６３．ＶＣ収率９１．０％）を得
た。

なお、第１表に製造例１〜１７で得られた目的化合物の
形状及び融点を併記し、第２表にこ１Ｌら化合物のＩＲ
及びＮＭＲによる分析結果を示す。

次に、実験例によシ本発明化合物の抗腫瘍作用及びＬＤ
ｓ　ｏを示す。

〔実験例〕

１、　ＯＸ　１０　個／ｄのＬ５１７８Ｙ癌細胞を含む
培養液中にサングル（前ｉｃ！製造例１−１７の化合物
）を１００μ９７ｍ１になるように加え、５チ炭酸ガス
を含む空気中で４８時間培養した後、Ｌ５１７８Ｙ　ａ
細胞藪を自動血球！１数装置で測定し、コントロールと
比較して下記式によυ癌細胞抑制率を調べた。

結呆を第３表に示す。また、ラットにおけるＬＤ５゜に
ついても併記する。

癌細胞抑制率（イ）＝（Ａ−Ｂ）／ＡＸ１００Ａ：コン
トロールのＬ５１７８Ｙ細胞数Ｂ：試験群のＬ５１７８
Ｙ細胞数 なお、培養液としては１０％の牛の胎児血清と５０μｍ
／／ｍｌのカナマイシンを含むＲＰＭＩ　−１６４０を
用いた。

第３表 以下、実施例によυ本発明抗腫瘍剤の製剤例を示す。

〔実施例１〕　カプセル剤 製造例５の化合物　２００．９ トウモロコシデンプン　１５０ｇ タルク　“８０９ ステアリン酸マグネシウム　３０ｇ 以上を充分混和し、６０メツシユの金網を通過せしめて
粒度を調整した後、１０００個のゼラチンカプセルに充
填する。（１日当＃）１〜３カプセルを経口的に投与す
る。） 〔実施例２〕　カプセル剤 製造例８の化合物　１８０ｇ 無水ケイ酸　６０Ｊ９ ステアリン酸マグネシウム　５ｇ をアセトンに溶解し、無水ケイ酸を加えて分散した後、
アセトンを留去し、粒状化する。この粒子を６０メツシ
ユの金網を通過せしめ、粒度全調整した後、ステアリン
酸マグネシウムを加えて混合してなめらかにし、これを
１０００個のゼラチンカシセルに充填する。

〔実施例３〕　錠剤 製造例１０の化合物　２００！；’ 乳糖　５０９ トウモロコシデンプン　３Ｊ？ ステアリン酸マグネシウム　５ｙ 上記各成分を混和し、６０メツシユの金網を通過せしめ
、粒度を調整した後、ｎ錠機を用いて１ｏｏｏ個の錠剤
を製造する。（１日当り１〜３錠を経口的に投与する。

） 〔実施例４〕　湿剤 カカオ舅旨　１２００Ｊ 製造例１７の化合物　１４０ｇ カカオ脂に５０℃に加熱して溶解し、これに製造例１４
の化合物を加えて均一にし、次いでコンテナーの中に流
し込み、′冷却固化ａせて吐剤１０００個を製造する。

〔実施例５〕　注射剤 製造例１６の化合物　４００ｙ ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油　５００ｇ注射用蒸留
水　全量１０１ 上記の処方に従い、常法によシ注射剤を調製し、１アン
プル２ｄずつ充填する。

〔実施例６〕　注射剤 製造例６の化合物　５０ｍ９ Ｎ′−エトキシメチル−５−フルオロウラシル　２００
１１１９トリスアミノメタン　ｓｏｏｍｒ 注射用蒸留水　適量 上記の処方に従い、常法によシ注射剤を調製し、１アン
プル５　Ｉｎｔずつ充填する。

出願人　ラ　イ　オ　ン株式会社 代理人　弁理士　小島隆司

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下記式（１） ％式％ （但し、Ｒはハロダン原子、水酸基、アミノ基、−０−
   Ｒ’基又は−ＮＨ−Ｒ’基（ここで、Ｒ′はアルキル基
   、シクロアルキル基、ベンジル基、フェニル基又は１以
   上の水素原子がハロダン原子、アルキル基もしくは低級
   アルコキシル基で置換されたフェニル基を示す）である
   ） で示される化合物から選ばれる１−（２−ヒドロキシエ
   チル）−５−置換−ＩＨ−ピラゾロＣ３，４−ｂ〕ピラ
   ジン誘導体。 ２、下記式（す ＣＨ２ｃｌ（２０Ｈ （但し、Ｒはへロダン原子、水酸基、アミン基、−０−
   Ｒ’基又は−Ｎｕ−Ｒ’基（ここで、Ｒ′はアルキル基
   シクロアルキル基、ペンツル基、フェニル基又は１以上
   の水素原子がへロｒン原子、アルキル基もしくは低級ア
   ルコキシル基で置換されたフェニル基を示す）である） で示される化合物から選ばれる１−（２−ヒ）４　。 キシエチル）−５−置換−ＩＨ−ピラゾロ〔３，４−ｂ
   ）ピラノン誘導体ｆ有効成分とすることを特徴とする抗
   ｌ１ＩＪ！劫剤。