JPS6054624B2 - 試料中の講成成分測定用試験具 - Google Patents
試料中の講成成分測定用試験具Info
- Publication number
- JPS6054624B2 JPS6054624B2 JP56193035A JP19303581A JPS6054624B2 JP S6054624 B2 JPS6054624 B2 JP S6054624B2 JP 56193035 A JP56193035 A JP 56193035A JP 19303581 A JP19303581 A JP 19303581A JP S6054624 B2 JPS6054624 B2 JP S6054624B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- acid
- test device
- test
- hydrazone
- prepared
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/62—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving uric acid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
- C12Q1/28—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving peroxidase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/54—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving glucose or galactose
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2326/00—Chromogens for determinations of oxidoreductase enzymes
- C12Q2326/32—3-Methyl-2-benzothiazolinone hydrazone hydrochloride hydrate, i.e. MBTH
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/805—Test papers
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
- Y10T436/142222—Hetero-O [e.g., ascorbic acid, etc.]
- Y10T436/143333—Saccharide [e.g., DNA, etc.]
- Y10T436/144444—Glucose
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は一般的に診断用試験の分野に関する。
さらに詳しくは、グルコースおよび尿酸等の生物学的成
分の定性法、定量的測定に有用な試験に関するが、この
試験においては、このような成分は過酸化物等の酸化性
物質に変化する。 グルコース酸化酵素はグルコースを
酵素的にグルコン酸と過酸化水素に変化させる。
分の定性法、定量的測定に有用な試験に関するが、この
試験においては、このような成分は過酸化物等の酸化性
物質に変化する。 グルコース酸化酵素はグルコースを
酵素的にグルコン酸と過酸化水素に変化させる。
このようにして生成した過酸化水素は酸化されて色の変
化等の応答を発する指示薬系の存在下て過酸化性活性物
質によりＨ。Ｏに還元することができる。発色性指示薬
、０−トリジンはグルコースの試験系にしばしば用いら
れているが、アスコルビン酸等の干渉物質によつて酸化
された指示薬が還元されてしまう。さらに０−トリジン
は安全性に問題がある。 同様にウリカーゼは尿酸を酵
素的にアラントインと過酸化水素に変化する。生成した
過酸化水素は指示薬系、古くは０−ジアニシジンの存在
下、・過酸化性活性物質によりＨ。Ｏに還元することが
できる。 極く最近では、ゴツホマン（Ｇｏｃｈｍａｎ
）およびシユミツト（Ｓｃｈｍｉｔｚ）は、３−メチル
ー２一ベンゾチアゾリノンーヒドラゾン塩酸塩とＮ，Ｎ
−ジメチルアニリンを用い、尿酸ｒ臨床化学ョ（Ｃｌｌ
ｎ．Ｃｈｅｍ．）第１７巻、１１５４頁（１９７１年）
およびグルコース１臨床化学ョ第１８巻、９４３頁（１
９７２年）の測定においてアゾ色素指示薬を生成させる
ことを報告している。
化等の応答を発する指示薬系の存在下て過酸化性活性物
質によりＨ。Ｏに還元することができる。発色性指示薬
、０−トリジンはグルコースの試験系にしばしば用いら
れているが、アスコルビン酸等の干渉物質によつて酸化
された指示薬が還元されてしまう。さらに０−トリジン
は安全性に問題がある。 同様にウリカーゼは尿酸を酵
素的にアラントインと過酸化水素に変化する。生成した
過酸化水素は指示薬系、古くは０−ジアニシジンの存在
下、・過酸化性活性物質によりＨ。Ｏに還元することが
できる。 極く最近では、ゴツホマン（Ｇｏｃｈｍａｎ
）およびシユミツト（Ｓｃｈｍｉｔｚ）は、３−メチル
ー２一ベンゾチアゾリノンーヒドラゾン塩酸塩とＮ，Ｎ
−ジメチルアニリンを用い、尿酸ｒ臨床化学ョ（Ｃｌｌ
ｎ．Ｃｈｅｍ．）第１７巻、１１５４頁（１９７１年）
およびグルコース１臨床化学ョ第１８巻、９４３頁（１
９７２年）の測定においてアゾ色素指示薬を生成させる
ことを報告している。
Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリンとの混合物がｏ−トリジンよ
り抵抗性があると主張されたけれども、アスコルビン酸
による干渉に対する感受性が、尿酸とグルコースの報告
された濃度について重大な誤差を生じた。
り抵抗性があると主張されたけれども、アスコルビン酸
による干渉に対する感受性が、尿酸とグルコースの報告
された濃度について重大な誤差を生じた。
複素環ヒドラゾン類と、フェノール類、芳香族アミン類
および古典的なアゾカップリング反応に与ることができ
る他の化合物との酸化的カップリング反応の機構がゾリ
ンガー（か１１１ｎｇｅｒ）著、１アゾおよびジアゾ化
学Ｊ（ＡｚＯａｎｄＤｉａｚＯＣｈ一Ｅｍｉｓｔｒｙ）
、インターサイエンス（Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ）、
ニューヨーク（ＮｅｗＹＯｒｋ）、２１５〜２１頂（１
９６１年）に簡単に述べられている。
および古典的なアゾカップリング反応に与ることができ
る他の化合物との酸化的カップリング反応の機構がゾリ
ンガー（か１１１ｎｇｅｒ）著、１アゾおよびジアゾ化
学Ｊ（ＡｚＯａｎｄＤｉａｚＯＣｈ一Ｅｍｉｓｔｒｙ）
、インターサイエンス（Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ）、
ニューヨーク（ＮｅｗＹＯｒｋ）、２１５〜２１頂（１
９６１年）に簡単に述べられている。
酸化的カップリングによるアゾ染料の生成に向けられた
西ドイツのヒユーニツヒ（ＨＵｎｉｇ）および共同研究
者らによる基礎的研究の要約が、バエル著“゜合成繊維
のカオチン性染料゛ベンカタラマン編０合成染料の化学
ョ第４巻１８８〜１９３頁、アカデツク●ブレス ニュ
ーヨーク（１９７１年）〔Ｂａｅｒ，Ｃａ−ＴｉＯｎｊ
ｃＡｙｅｓｆＯｒＳｙｎｔｈｅｔｉｃＦｉｂｅｒｓ，Ｖ
ｅｎｋａｔａｒａ−Ｍａｎ（Ｅｄ．），ＴｈｅＣｈｅｍ
ｉｓｔｒｙＯｆＳｙｎｔｈｅｔｉｃＤｙｅｓ，■０１．
４，ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ，ｐｇｓ．１
８８〜１９３（１９７１）〕．に記載されている。ハン
ジカー（Ｈｕｒｌｚｉｋｅｒ）の米国特許第３９７９２
６２号には、クエン酸またはマレイン酸の緩衝液を上記
のゴツホマンの混合物にさらに加え、Ｎ，Ｎ−ジメチル
アニリン、他の芳香族アミンがオルトお．−よびバラの
両方の位置で置換されない限り、それらを一緒に用いう
ることが開示されている。
西ドイツのヒユーニツヒ（ＨＵｎｉｇ）および共同研究
者らによる基礎的研究の要約が、バエル著“゜合成繊維
のカオチン性染料゛ベンカタラマン編０合成染料の化学
ョ第４巻１８８〜１９３頁、アカデツク●ブレス ニュ
ーヨーク（１９７１年）〔Ｂａｅｒ，Ｃａ−ＴｉＯｎｊ
ｃＡｙｅｓｆＯｒＳｙｎｔｈｅｔｉｃＦｉｂｅｒｓ，Ｖ
ｅｎｋａｔａｒａ−Ｍａｎ（Ｅｄ．），ＴｈｅＣｈｅｍ
ｉｓｔｒｙＯｆＳｙｎｔｈｅｔｉｃＤｙｅｓ，■０１．
４，ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ，ｐｇｓ．１
８８〜１９３（１９７１）〕．に記載されている。ハン
ジカー（Ｈｕｒｌｚｉｋｅｒ）の米国特許第３９７９２
６２号には、クエン酸またはマレイン酸の緩衝液を上記
のゴツホマンの混合物にさらに加え、Ｎ，Ｎ−ジメチル
アニリン、他の芳香族アミンがオルトお．−よびバラの
両方の位置で置換されない限り、それらを一緒に用いう
ることが開示されている。
この緩衝液もまた制限を有し、尿酸測定の場合には３．
２〜４．７、グルコースまたはコレステロール測定の場
合には４．７〜５．５の所定のＰＨ範囲を維持する。過
酸化水素分析にヒドラゾン指示薬を用いることを教唆す
る限りにおいて、この従来技術では３一メチルベンゾチ
アゾリノンーヒドラゾン（ＭＢＴＨ）とジメチルアニリ
ンが試料中の還元性物質の作用に対して抵抗性があるこ
とが示唆されている。このことはｏ−トリジン等の指示
薬に関して真実であるかもしれないがヒドラゾン指示薬
を用いると、アスコルビン酸塩の存在下では指示が非常
に乏しい。それゆえ、これらの従来の研究者による研究
は、干渉物質の作用に対してほとんど感受性がないかま
たは安全性を認められた指示薬を用いるかのいずれかで
ある指示薬系を提供することに失敗フした。
２〜４．７、グルコースまたはコレステロール測定の場
合には４．７〜５．５の所定のＰＨ範囲を維持する。過
酸化水素分析にヒドラゾン指示薬を用いることを教唆す
る限りにおいて、この従来技術では３一メチルベンゾチ
アゾリノンーヒドラゾン（ＭＢＴＨ）とジメチルアニリ
ンが試料中の還元性物質の作用に対して抵抗性があるこ
とが示唆されている。このことはｏ−トリジン等の指示
薬に関して真実であるかもしれないがヒドラゾン指示薬
を用いると、アスコルビン酸塩の存在下では指示が非常
に乏しい。それゆえ、これらの従来の研究者による研究
は、干渉物質の作用に対してほとんど感受性がないかま
たは安全性を認められた指示薬を用いるかのいずれかで
ある指示薬系を提供することに失敗フした。
ゆえに、本発明の第１の目的は、体液中の過酸化物検出
のための改良された試験具を提供することである。
のための改良された試験具を提供することである。
本発明の第２の目的は他の臨床的に重要な体液門成分か
ら酵素的に変化するこれらの過酸化物のための改良され
た試験具を提供することである。
ら酵素的に変化するこれらの過酸化物のための改良され
た試験具を提供することである。
本発明の第３の目的は安全性を認められた物質を用いて
このような体液成分のための改良された試験具を提供す
ることである。本発明の第４の目的は還元性干渉物質に
対して非常に抵抗性がある体液中の過酸化物を検出する
ための改良された試験具を提供することである。
このような体液成分のための改良された試験具を提供す
ることである。本発明の第４の目的は還元性干渉物質に
対して非常に抵抗性がある体液中の過酸化物を検出する
ための改良された試験具を提供することである。
本発明の第５の目的は、上述の利点がヒドラゾンおよび
、４，５ージヒドロキシー２，７ーナフタレンジスルホ
ン酸（クロモトロープ酸）と１−ヒドロキシー２−ナフ
タレンスルホン酸とからなる群より選ばれるヒドロキシ
ナフタレンスルホン酸もしくはその塩とからなる新規な
指示薬系により達成される過酸化物の検出のための改良
された試験具を提供することである。本発明の他の目的
およびより充分な理解は、添付図面に関係した好ましい
実施態様によつて導き出される以下の記載および特許請
求の範囲を参照することによつて得られるであろう。
、４，５ージヒドロキシー２，７ーナフタレンジスルホ
ン酸（クロモトロープ酸）と１−ヒドロキシー２−ナフ
タレンスルホン酸とからなる群より選ばれるヒドロキシ
ナフタレンスルホン酸もしくはその塩とからなる新規な
指示薬系により達成される過酸化物の検出のための改良
された試験具を提供することである。本発明の他の目的
およびより充分な理解は、添付図面に関係した好ましい
実施態様によつて導き出される以下の記載および特許請
求の範囲を参照することによつて得られるであろう。
本発明に従えば、組成物および用具等の試験手段、試験
用具の製造方法および過酸化物等の少なくとも１つの過
酸化物の測定方法が提供される。
用具の製造方法および過酸化物等の少なくとも１つの過
酸化物の測定方法が提供される。
さらに詳しくは、この意図された試験手段はヒドラゾン
および、４，５ージヒドロキシー２，７ーナフタレンジ
スルホン酸（クロモトロープ酸）および１−ヒドロキシ
ー２−ナフタレンスルホン酸からなる群より選ばれるヒ
ドロキシナフタレンスルホン酸もしくはその塩とよりな
る。さらには試料中の構成成分の測定用試験具が提供さ
れ、この試験系は、試料中の前記構成成分の存在に応答
して少なくとも１つの過酸化物を生成する手段および前
記少なくとも１つの過酸化物を測定する組成物を有する
ものであつて、前記組成物が３−メチルー２−ベンゾチ
アゾリノンーヒドラゾンおよび、４，５ージヒドロキシ
ー２，７ーナフタレンジスルホン酸および１−ヒドロキ
シー２−ナフタレンスルホン酸からなる群より選ばれる
ヒドロキシナフタレンスルホン酸もしくはその塩よりな
るという改良点を有する。この試験具は好ましくは生成
物学的液体中の構成成分の酵素的変換により形成された
過酸化物を測定するタイプのものである。組成物の形態
の場合には、試験手段は、試験用具を提供するために、
錠剤またはマトリックス等の担体に任意に包含させるこ
とができる。この指示薬系は検出されるべき体液構成成
分が微量のままで非常に感度が良く、一方体液にしばし
ば存在するアスコルビン酸等の還元性干渉物に対して大
きな抵抗性を有する。この試験具においては、試料中に
存在する構成成分に応答して少なくとも１つの過酸化物
を生成する手段としてグルコース測定用にはグルコース
酸化酵素または尿酸測定用にはウリカーゼおよび過酸化
性活性物質を包含することができる。かかる過酸化性活
性物質の代表的なものはベルオキシダーゼまたはヘモグ
ロビンであるが、これらは過酸化水素が過酸化物である
場合に使用される。図式Ａに示された機構は過酸化性活
性物質が必ずしも基礎を置かねばならない理論ではない
が、図式Ａの３−メチルー２−ベンゾチアゾリノンーヒ
ドラゾン（ＭＢＴＨ）とクロモトロープ酸（ＣＴＡ）に
ついて示された機構と同様の機構によつてカップリング
が起るものと考えられる。従来技術の試験具と対比して
本発明にかかる試験具は検出されるべき体液構成成分が
微量であつても非常に感度が良く、一方、尿中の競合す
る還元性物質特にアスコルビン酸の影響に対して非常に
抵抗性がある。特徴的な色調反応が検出される過酸化物
の濃度に依存して生ずるので、グルコースおよび尿酸等
の体液構成成分の定量的検出が可能である。本発明にか
かる試験具を用いることによつて少量ではあるが検出可
能な量のアスコルビン酸塩の存在下でさえ少なくとも１
．０ｍ９／ｄｌ程度のグルコースを干渉なく検出するこ
とができ、また、少なくとも１０００ｍ９／ｄｌのアス
コルビン酸の存在下、非常に高濃度（５００ｍｇ／ｄｌ
以上）で存在するグルコースを検出することが可能であ
る。
および、４，５ージヒドロキシー２，７ーナフタレンジ
スルホン酸（クロモトロープ酸）および１−ヒドロキシ
ー２−ナフタレンスルホン酸からなる群より選ばれるヒ
ドロキシナフタレンスルホン酸もしくはその塩とよりな
る。さらには試料中の構成成分の測定用試験具が提供さ
れ、この試験系は、試料中の前記構成成分の存在に応答
して少なくとも１つの過酸化物を生成する手段および前
記少なくとも１つの過酸化物を測定する組成物を有する
ものであつて、前記組成物が３−メチルー２−ベンゾチ
アゾリノンーヒドラゾンおよび、４，５ージヒドロキシ
ー２，７ーナフタレンジスルホン酸および１−ヒドロキ
シー２−ナフタレンスルホン酸からなる群より選ばれる
ヒドロキシナフタレンスルホン酸もしくはその塩よりな
るという改良点を有する。この試験具は好ましくは生成
物学的液体中の構成成分の酵素的変換により形成された
過酸化物を測定するタイプのものである。組成物の形態
の場合には、試験手段は、試験用具を提供するために、
錠剤またはマトリックス等の担体に任意に包含させるこ
とができる。この指示薬系は検出されるべき体液構成成
分が微量のままで非常に感度が良く、一方体液にしばし
ば存在するアスコルビン酸等の還元性干渉物に対して大
きな抵抗性を有する。この試験具においては、試料中に
存在する構成成分に応答して少なくとも１つの過酸化物
を生成する手段としてグルコース測定用にはグルコース
酸化酵素または尿酸測定用にはウリカーゼおよび過酸化
性活性物質を包含することができる。かかる過酸化性活
性物質の代表的なものはベルオキシダーゼまたはヘモグ
ロビンであるが、これらは過酸化水素が過酸化物である
場合に使用される。図式Ａに示された機構は過酸化性活
性物質が必ずしも基礎を置かねばならない理論ではない
が、図式Ａの３−メチルー２−ベンゾチアゾリノンーヒ
ドラゾン（ＭＢＴＨ）とクロモトロープ酸（ＣＴＡ）に
ついて示された機構と同様の機構によつてカップリング
が起るものと考えられる。従来技術の試験具と対比して
本発明にかかる試験具は検出されるべき体液構成成分が
微量であつても非常に感度が良く、一方、尿中の競合す
る還元性物質特にアスコルビン酸の影響に対して非常に
抵抗性がある。特徴的な色調反応が検出される過酸化物
の濃度に依存して生ずるので、グルコースおよび尿酸等
の体液構成成分の定量的検出が可能である。本発明にか
かる試験具を用いることによつて少量ではあるが検出可
能な量のアスコルビン酸塩の存在下でさえ少なくとも１
．０ｍ９／ｄｌ程度のグルコースを干渉なく検出するこ
とができ、また、少なくとも１０００ｍ９／ｄｌのアス
コルビン酸の存在下、非常に高濃度（５００ｍｇ／ｄｌ
以上）で存在するグルコースを検出することが可能であ
る。
特定の用語が、以下の記載で、明確にするために用いら
れているが、これらの用語は代表的な説明のために選ば
れた発明の特別の実施態様を言及することを意図してお
り、本発明の範囲を限定または制限することを意図する
ものではない。
れているが、これらの用語は代表的な説明のために選ば
れた発明の特別の実施態様を言及することを意図してお
り、本発明の範囲を限定または制限することを意図する
ものではない。
本発明にかかる試験具は多くの物理的形態をとることが
でき、とられる形態に関係なく意図されたヒドロキシナ
フタレンスルホン酸もしくはその塩とカップリングする
多くの特定ヒドラゾンを含むことができる。所望により
さらに加えられる安定剤等の試薬類とともにこれらにつ
いても言及する。この試験具は、液状および以下に記載
される方法および実施態様により例示されるような試験
具を包含している固体状でも用いることができる。本発
明にかかる試験具のヒドロキシナフタレンスルホン酸も
しくはその塩のカップリング剤はクロモトロープ酸もし
くはその塩であることが好ましい。
でき、とられる形態に関係なく意図されたヒドロキシナ
フタレンスルホン酸もしくはその塩とカップリングする
多くの特定ヒドラゾンを含むことができる。所望により
さらに加えられる安定剤等の試薬類とともにこれらにつ
いても言及する。この試験具は、液状および以下に記載
される方法および実施態様により例示されるような試験
具を包含している固体状でも用いることができる。本発
明にかかる試験具のヒドロキシナフタレンスルホン酸も
しくはその塩のカップリング剤はクロモトロープ酸もし
くはその塩であることが好ましい。
他のヒドロキシナフタレンスルホン酸もしくはその塩と
しては１−ヒドロキシー２−ナフタレンスルホン酸もし
くはその塩を用いることが有利てある。本発明にかかる
試験具に有用なヒドラゾン類はヒドラゾンとアルデヒド
またはケトンとの縮合物であり、〉Ｃ＝ＮＮＨ２基を含
んでいる。
しては１−ヒドロキシー２−ナフタレンスルホン酸もし
くはその塩を用いることが有利てある。本発明にかかる
試験具に有用なヒドラゾン類はヒドラゾンとアルデヒド
またはケトンとの縮合物であり、〉Ｃ＝ＮＮＨ２基を含
んでいる。
多くのヒドラゾン類はヒドロキシナフタレンスルホン酸
もしくはその塩と酸化的にカップリングすることができ
固有の色素を形成する。ヒドラゾンとしては、特に３−
メチルー２−ベンゾチアゾリノンーヒドラゾン、１−メ
チルー２−キノリノンーヒドラゾン、Ｎ−メチルーピリ
ドンー４−ヒドラゾン、Ｎ−メチルーピリドンー２−ヒ
ドラゾン、Ｎ−メチルーキノリノンー２−ヒドラゾン、
１−メチルーキノリノンー４−ヒドラゾン、Ｎ−メチル
ー２−ベンゾチアゾリノンーヒドラゾン、Ｎ−メチルー
チアゾリノンー２−ヒドラゾン、Ｎ−メチルー４−フエ
ニルチアゾリノンー２−ヒドラゾン、Ｎ−メチルーオキ
サゾリノンー２−ヒドラゾン、Ｎ−メチルーベンズオキ
サゾリノンー２−ヒドラゾンおよび１，３−ジメチルー
ベンズイミダゾリノンー２−ヒドラゾンが挙げられる。
組成物の好ましい実施態様においては、３−メチルー２
ーベンゾチアゾリノンーヒドラゾン（ＭＢＴＨ）一等の
３−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）−２−ベンゾチアゾリノン
ーヒドラゾン、クロモゲンが用いられる。このようなヒ
ドラゾン類は強力な還元剤である。本発明にかかるＭＢ
ＴＨの酸付加塩もまた用い．ることができる。
もしくはその塩と酸化的にカップリングすることができ
固有の色素を形成する。ヒドラゾンとしては、特に３−
メチルー２−ベンゾチアゾリノンーヒドラゾン、１−メ
チルー２−キノリノンーヒドラゾン、Ｎ−メチルーピリ
ドンー４−ヒドラゾン、Ｎ−メチルーピリドンー２−ヒ
ドラゾン、Ｎ−メチルーキノリノンー２−ヒドラゾン、
１−メチルーキノリノンー４−ヒドラゾン、Ｎ−メチル
ー２−ベンゾチアゾリノンーヒドラゾン、Ｎ−メチルー
チアゾリノンー２−ヒドラゾン、Ｎ−メチルー４−フエ
ニルチアゾリノンー２−ヒドラゾン、Ｎ−メチルーオキ
サゾリノンー２−ヒドラゾン、Ｎ−メチルーベンズオキ
サゾリノンー２−ヒドラゾンおよび１，３−ジメチルー
ベンズイミダゾリノンー２−ヒドラゾンが挙げられる。
組成物の好ましい実施態様においては、３−メチルー２
ーベンゾチアゾリノンーヒドラゾン（ＭＢＴＨ）一等の
３−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）−２−ベンゾチアゾリノン
ーヒドラゾン、クロモゲンが用いられる。このようなヒ
ドラゾン類は強力な還元剤である。本発明にかかるＭＢ
ＴＨの酸付加塩もまた用い．ることができる。
塩酸、臭素酸、硫酸、硝酸等から形成される酸付加塩の
ごとき従来の酸付加塩を用いることができる。これらの
酸付加塩は単独または対応するヒドラゾンと組合わせる
か、いずれかの方法で用いることができる。ヒドラゾン
とカプラー（発色剤）のモル比は約１７：１から約１：
１７の範囲にあり、検出感度と干渉抵抗性の最適の組合
わせのためにはほとんど等しいモル比であることが好ま
しい。この組成物はさらに安定剤を包含することができ
、カルボキシメチルセルロースおよび脂肪族アルコール
のポリオキシエチレンエーテル（ＢＲＩＪ：アイ．シー
．アイ．ユナイテツド．スティン●インコーポレーテツ
ド登録商標、ウイルミングトン、デラウエア１９８９７
〔ＢＲＩＪ９ｍａｄｅｂｙＩＣＩＵｎｉｔｅｄＳｔａｔ
ｅｓＩｎｃ．，ＷｉＩｍｉｎｇｔＯｎ，Ｄｅｌａｗａｒ
ｅｌ９８９７））を選ぶと有利である。
ごとき従来の酸付加塩を用いることができる。これらの
酸付加塩は単独または対応するヒドラゾンと組合わせる
か、いずれかの方法で用いることができる。ヒドラゾン
とカプラー（発色剤）のモル比は約１７：１から約１：
１７の範囲にあり、検出感度と干渉抵抗性の最適の組合
わせのためにはほとんど等しいモル比であることが好ま
しい。この組成物はさらに安定剤を包含することができ
、カルボキシメチルセルロースおよび脂肪族アルコール
のポリオキシエチレンエーテル（ＢＲＩＪ：アイ．シー
．アイ．ユナイテツド．スティン●インコーポレーテツ
ド登録商標、ウイルミングトン、デラウエア１９８９７
〔ＢＲＩＪ９ｍａｄｅｂｙＩＣＩＵｎｉｔｅｄＳｔａｔ
ｅｓＩｎｃ．，ＷｉＩｍｉｎｇｔＯｎ，Ｄｅｌａｗａｒ
ｅｌ９８９７））を選ぶと有利である。
本発明の試験具はやや低いＰＨにおいてもなお作フ用す
るが一般に中性またはややアルカリ性のＰＨ範囲で用い
ることが好ましい。一般に中性またはアルカリ性にＰＨ
を維持すれば、従来技術に比べて、反応速度と干渉する
抵抗性が改良される。この試験具は本発明にかかる組成
物と、試料中ｊに存在する測定されるべき構成成分に応
答してその組成物によつて測定される過酸化物を生成す
る手段とよりなる。
るが一般に中性またはややアルカリ性のＰＨ範囲で用い
ることが好ましい。一般に中性またはアルカリ性にＰＨ
を維持すれば、従来技術に比べて、反応速度と干渉する
抵抗性が改良される。この試験具は本発明にかかる組成
物と、試料中ｊに存在する測定されるべき構成成分に応
答してその組成物によつて測定される過酸化物を生成す
る手段とよりなる。
このような手段は好ましくは酵素的な性質を有すること
である。例えばグルコースを測定する場合、グルコース
酸化酵素とペルオノキシダーゼが、それらから過酸化水
素を形成させるために用いられる。同様に尿酸を測定す
る場合、ウリカーゼとベルオキシダーゼは構成成分の応
答手段を構成する。構成成分の応答手段に有用な試薬類
の濃度と種類が公知技術のそれらを包含するよう意図さ
れる。試験組成物を試料中の過酸化物の測定用溶液とし
て用いることができる。
である。例えばグルコースを測定する場合、グルコース
酸化酵素とペルオノキシダーゼが、それらから過酸化水
素を形成させるために用いられる。同様に尿酸を測定す
る場合、ウリカーゼとベルオキシダーゼは構成成分の応
答手段を構成する。構成成分の応答手段に有用な試薬類
の濃度と種類が公知技術のそれらを包含するよう意図さ
れる。試験組成物を試料中の過酸化物の測定用溶液とし
て用いることができる。
組成物の形態で試験手段を含んでいるこのような過酸化
物に変化される構成成分の測定用試験系を溶液として用
いることができる。この試験系は、尿、血清、脳を髄液
、組織培養上澄液等の試料に体液等の生物学的構成成分
を加えることによつてその生物的構成成分を検出するた
めに用いることが好ましい。本発明の液状の試験系を用
いて分析するためには、ペルオキシターゼを使用準備が
できるまて他の試薬と分離しておかねばならない。ペル
オキシターゼ等の分離された試薬を導入することにより
測定を行なうことができる。溶液で用いる場合、試験系
の組成物のいずれかにおいて、本発明にかかるヒドロキ
シナフタレンスルホン酸塩は、約１０−５〜約１０−３
モルの）農度で用いることが好ましい。同様にヒドラゾ
ンは約１０−５〜約１０−３モルで用いることが好まし
い。１またはそれ以上の安定剤が含まれる場合、それら
は全濃度約０．５ｍ９／ｄｌ〜約５．０ｍｇ／ｄｌで存
在することが好ましい。
物に変化される構成成分の測定用試験系を溶液として用
いることができる。この試験系は、尿、血清、脳を髄液
、組織培養上澄液等の試料に体液等の生物学的構成成分
を加えることによつてその生物的構成成分を検出するた
めに用いることが好ましい。本発明の液状の試験系を用
いて分析するためには、ペルオキシターゼを使用準備が
できるまて他の試薬と分離しておかねばならない。ペル
オキシターゼ等の分離された試薬を導入することにより
測定を行なうことができる。溶液で用いる場合、試験系
の組成物のいずれかにおいて、本発明にかかるヒドロキ
シナフタレンスルホン酸塩は、約１０−５〜約１０−３
モルの）農度で用いることが好ましい。同様にヒドラゾ
ンは約１０−５〜約１０−３モルで用いることが好まし
い。１またはそれ以上の安定剤が含まれる場合、それら
は全濃度約０．５ｍ９／ｄｌ〜約５．０ｍｇ／ｄｌで存
在することが好ましい。
ペルオキシターゼが試験系の構成成分の応答手段よりな
る少なくとも１つの試薬である場合、その濃度は約１０
μｇ／Ｉ〜約２００μｇ／１であることが好ましい。そ
の溶液の調製に用いられる溶媒としては、水、生理溶液
、メタノール等の有機溶媒またはそれらの合物を用いる
ことができる。本発明にかかる試験組成物または試験薬
を包含する試験用具および、その試験組成物または試験
系をマトリックスまたは錠剤等の担体に包含させること
によりなるこのような試験用具を製造する方法も提供さ
れる。
る少なくとも１つの試薬である場合、その濃度は約１０
μｇ／Ｉ〜約２００μｇ／１であることが好ましい。そ
の溶液の調製に用いられる溶媒としては、水、生理溶液
、メタノール等の有機溶媒またはそれらの合物を用いる
ことができる。本発明にかかる試験組成物または試験薬
を包含する試験用具および、その試験組成物または試験
系をマトリックスまたは錠剤等の担体に包含させること
によりなるこのような試験用具を製造する方法も提供さ
れる。
本発明にかかる組成物の溶液を含浸することにより包含
される場合、このように含浸された担体を次いで乾燥す
る。本発明にかかる用具は、含浸させる以外に組成物を
基質またはマトリックス上に印刷または噴霧等の他の好
適な技術により製造することができる。この用具は多浸
漬法により調製することが好ましい。
される場合、このように含浸された担体を次いで乾燥す
る。本発明にかかる用具は、含浸させる以外に組成物を
基質またはマトリックス上に印刷または噴霧等の他の好
適な技術により製造することができる。この用具は多浸
漬法により調製することが好ましい。
浸漬するために用いられる試薬の温度は約１０−３Ｎ４
から飽和溶液の範囲にある。ヒドラゾンおよびカプラー
のために最も一般的に有用な濃度は各々約０．０２Ｍで
ある。ベルオキシターゼの浸漬溶液の濃度は約０．０１
５ｍｇ／ＭＬ〜約２ｍ９／ＭＬである。固体調製物を担
体マトリックスに細片状に包含することが好ましい。担
体マトリックスという用語は不溶性の吸収性および非吸
収性のマトリックスを言及することを想定しており、そ
れらが水または生理溶液と接触する場合、その構造を完
全に維持する。用いることができる好適な吸収性マトリ
ックスとしては、ベーパー、セルロース、木、合成樹脂
製布、ガラス繊維、織布および不織布等が挙げられる。
非吸収性マトリックスとしては、ポリプロピレン等の有
機プラスチック材料が挙げられる。吸収性マトリックス
が用いられる場合、そのマトリックスは使い易くするた
めに、有機プラスチック片、すなわちポリプロピレン等
の不溶性支持部材に両面接着テープ等の好適な手段を用
いて固定することが有利である。他の方法として、本発
明の試験具は、通常の担体材料を含んでいる圧縮成形ま
たは鋳造された錠剤の形をとる担体に包含することがで
きる。
から飽和溶液の範囲にある。ヒドラゾンおよびカプラー
のために最も一般的に有用な濃度は各々約０．０２Ｍで
ある。ベルオキシターゼの浸漬溶液の濃度は約０．０１
５ｍｇ／ＭＬ〜約２ｍ９／ＭＬである。固体調製物を担
体マトリックスに細片状に包含することが好ましい。担
体マトリックスという用語は不溶性の吸収性および非吸
収性のマトリックスを言及することを想定しており、そ
れらが水または生理溶液と接触する場合、その構造を完
全に維持する。用いることができる好適な吸収性マトリ
ックスとしては、ベーパー、セルロース、木、合成樹脂
製布、ガラス繊維、織布および不織布等が挙げられる。
非吸収性マトリックスとしては、ポリプロピレン等の有
機プラスチック材料が挙げられる。吸収性マトリックス
が用いられる場合、そのマトリックスは使い易くするた
めに、有機プラスチック片、すなわちポリプロピレン等
の不溶性支持部材に両面接着テープ等の好適な手段を用
いて固定することが有利である。他の方法として、本発
明の試験具は、通常の担体材料を含んでいる圧縮成形ま
たは鋳造された錠剤の形をとる担体に包含することがで
きる。
この試験用具は、試料中にそれを瞬間的に浸漬するかま
たは他の方法で担体マトリックス中に試験試料を導入す
ることによつて用いることが有利であり、これによつて
酸化性成分が存在する時、検出可能な色調変化を生ずる
。この試験用具は、血漿、血清または体液試料を試験す
る場合同様の方法で用いることができる。いくつかの実
施例で報告されたＫ（試料の吸収係数）と吸収種（尿酸
またはグルコース等）の濃度との関係が、コルツミ・ジ
ー著１反射分光学ぁシユプリンゲルーフエアラーク●イ
ンコーポレーテツド、ニューヨーク、１９６９（ＫＯｒ
ｔｕｍｉ，Ｇ．，ＲｅｆｌｅｃｔａｎｃｅＳｐｅｃｔｒ
ＯｓｃＯｐｙ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ一ＶｅｒｌａｇＩｎｃ
．，ＮｅｗＹＯｒｋ，ｌ９６９）の反射分光光度法の詳
細な議論とともに記載されているクベルカーモンクの式
（Ｋｕｂｅｌｋａ−ＭＯｎｋｅｑＬｋｌｔｉＯｎ）によ
つて与えられる。
たは他の方法で担体マトリックス中に試験試料を導入す
ることによつて用いることが有利であり、これによつて
酸化性成分が存在する時、検出可能な色調変化を生ずる
。この試験用具は、血漿、血清または体液試料を試験す
る場合同様の方法で用いることができる。いくつかの実
施例で報告されたＫ（試料の吸収係数）と吸収種（尿酸
またはグルコース等）の濃度との関係が、コルツミ・ジ
ー著１反射分光学ぁシユプリンゲルーフエアラーク●イ
ンコーポレーテツド、ニューヨーク、１９６９（ＫＯｒ
ｔｕｍｉ，Ｇ．，ＲｅｆｌｅｃｔａｎｃｅＳｐｅｃｔｒ
ＯｓｃＯｐｙ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ一ＶｅｒｌａｇＩｎｃ
．，ＮｅｗＹＯｒｋ，ｌ９６９）の反射分光光度法の詳
細な議論とともに記載されているクベルカーモンクの式
（Ｋｕｂｅｌｋａ−ＭＯｎｋｅｑＬｋｌｔｉＯｎ）によ
つて与えられる。
Ｋは透過法における吸光度／単位光路長の２倍（２Ａ／
ｂ）と定義される。この研究では、それは生成する色調
指示分子の濃度に比例すると仮定した。クベルカーモン
クの式によつて定義された関係では、反射百分率（％Ｒ
）の値は、検出される過酸化物の濃度が増加するにつれ
て減少し、逆に過酸化物の濃度が減少するにつれて増加
する。このように、この式に従えば得られた読みは、検
出される吸収種の濃度と反比例する。読みは波長で示さ
れる。反射率の測定はベツクマンＤＫ−２、スペクトロ
ホトメーター、ベツクマン、インストルメンツ●インコ
ーポレーテツド フユラートン、カリホルニア９２６３
４（ＢｅｃｋｍａｎＤＫ−２Ｓｐｅｃｔｒ０ｐｈ０ｔ０
ｍｅｔｅｒ，ＢｅｋｍａｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｉ
ｎｃ．，Ｆｕ１１ｅ１０ｎ，Ｃａ１１ｆ０−Ｒｎｉａ９
２６３４）またはス゜ベクトロカロリメーターＳＣＦ−
１、イスラエル・エレクトロ−オプティカル・インダス
トリー●リミテッド（ＳｐｅｃｔｒＯｃＯｌＯ−Ｒｉｍ
ｅｔｅｒＳＣＦ一１，Ｉｓｒａｅ１Ｅ１ｅｃｔｒ０−０
ｐｔｉｃａＩＩｎｄｕｓｔｒｙＬｔｄ．）（ブルーマー
●リサーチ●コーポレーション、プレインウェル、ロン
グアイランド●ニューヨーク１１８０３（ＢｒＯＯｍｅ
ｒＲｅｓｅａｃｈＣＯｒｐＯｒａｔｉＯｎ，ＰｌａＩｎ
ｗｅｌｌ，ＬＯｎｇＩｓｌａｎｄ，Ｎ．Ｙ．ｌｌ８Ｏ３
）により米国て販売）等の商業的に入手可能な分光光度
計を用いて行なわれる。
ｂ）と定義される。この研究では、それは生成する色調
指示分子の濃度に比例すると仮定した。クベルカーモン
クの式によつて定義された関係では、反射百分率（％Ｒ
）の値は、検出される過酸化物の濃度が増加するにつれ
て減少し、逆に過酸化物の濃度が減少するにつれて増加
する。このように、この式に従えば得られた読みは、検
出される吸収種の濃度と反比例する。読みは波長で示さ
れる。反射率の測定はベツクマンＤＫ−２、スペクトロ
ホトメーター、ベツクマン、インストルメンツ●インコ
ーポレーテツド フユラートン、カリホルニア９２６３
４（ＢｅｃｋｍａｎＤＫ−２Ｓｐｅｃｔｒ０ｐｈ０ｔ０
ｍｅｔｅｒ，ＢｅｋｍａｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｉ
ｎｃ．，Ｆｕ１１ｅ１０ｎ，Ｃａ１１ｆ０−Ｒｎｉａ９
２６３４）またはス゜ベクトロカロリメーターＳＣＦ−
１、イスラエル・エレクトロ−オプティカル・インダス
トリー●リミテッド（ＳｐｅｃｔｒＯｃＯｌＯ−Ｒｉｍ
ｅｔｅｒＳＣＦ一１，Ｉｓｒａｅ１Ｅ１ｅｃｔｒ０−０
ｐｔｉｃａＩＩｎｄｕｓｔｒｙＬｔｄ．）（ブルーマー
●リサーチ●コーポレーション、プレインウェル、ロン
グアイランド●ニューヨーク１１８０３（ＢｒＯＯｍｅ
ｒＲｅｓｅａｃｈＣＯｒｐＯｒａｔｉＯｎ，ＰｌａＩｎ
ｗｅｌｌ，ＬＯｎｇＩｓｌａｎｄ，Ｎ．Ｙ．ｌｌ８Ｏ３
）により米国て販売）等の商業的に入手可能な分光光度
計を用いて行なわれる。
西洋ワサビ（ＨＯｒｓｅｒａｄｊｓｈ）ペルオキシター
ゼおよびグルコース酸化酵素はマイルス・リサーチ・プ
ロダクツ、マイルス・ラボラトリーズ、エルクハート、
インヂアナ４６５１５（ＭｉｌｅｓＲｅｓｅａ−Ｒｃｈ
ＰｒＯｄｕｃｔｓ，ＭｉｌｅｓＬｉｂＯｒａｔＯｒｉｅ
ｓＥｌｋｈａｒｔ，Ｉｎｄｉａｎａ４６５ｌ５）より入
手できる。
ゼおよびグルコース酸化酵素はマイルス・リサーチ・プ
ロダクツ、マイルス・ラボラトリーズ、エルクハート、
インヂアナ４６５１５（ＭｉｌｅｓＲｅｓｅａ−Ｒｃｈ
ＰｒＯｄｕｃｔｓ，ＭｉｌｅｓＬｉｂＯｒａｔＯｒｉｅ
ｓＥｌｋｈａｒｔ，Ｉｎｄｉａｎａ４６５ｌ５）より入
手できる。
メチルビニルエーテルとマレイン酸無水物との共重々体
（ガントレツツＡＮ−１３９（ＧａｎｔｒｅｚＡＮ−１
３９）およびポリビニルピロリジン（ＰＶＰ）はジー・
エイ・エフ●コーポレーション、ケミカルプロダクツ、
ニューヨーク、ニューヨーク１００２０（ＧＡＦＣｒＯ
ｐ．，ＣｈｅｍｉｃａｌＰｒＯｄｕｃｔｓ，Ｎ．Ｙ．，
Ｎ．Ｙ．ｌＯＯ２Ｏ）より入手可能である。３−メチル
ー２−ベンゾチアゾリノンーヒドラゾン塩酸・１水和物
（ＭＢＴＨ）、他のヒドラゾン、クロモトロープ酸、４
，５ージヒドロキシー２，７ーナフタレンジスルホン酸
ジナトリウム・２水和物、１−ヒドロキシー２−ナフタ
レンスルホン酸、１−ヒドロキシー５−ナフタレンスル
ホン酸、３−ジメチルアミノ安息香酸およびバイオレッ
ト酸（１−ナフトールー３，６ージスルホン酸）がアル
ドリツヒ・ケミカル・カンパニー、インコーポレーテツ
ド、ミルオーキー ウイスコンシン５３２３３（Ａｌｄ
ｅｒｉｃｈＣｈｅｍｉｃａｌＣＯ．，Ｉｎｃ．，Ｍｉｌ
ｕａｕｋｅｅ，ＷｉｓｃＯｎｓｉｎ５３２３３）より入
手可能である。標準試薬等級の溶媒および試薬が用いら
れる。示された実施例は単に説明のためだけであり、本
発明を制限するものてはない。
（ガントレツツＡＮ−１３９（ＧａｎｔｒｅｚＡＮ−１
３９）およびポリビニルピロリジン（ＰＶＰ）はジー・
エイ・エフ●コーポレーション、ケミカルプロダクツ、
ニューヨーク、ニューヨーク１００２０（ＧＡＦＣｒＯ
ｐ．，ＣｈｅｍｉｃａｌＰｒＯｄｕｃｔｓ，Ｎ．Ｙ．，
Ｎ．Ｙ．ｌＯＯ２Ｏ）より入手可能である。３−メチル
ー２−ベンゾチアゾリノンーヒドラゾン塩酸・１水和物
（ＭＢＴＨ）、他のヒドラゾン、クロモトロープ酸、４
，５ージヒドロキシー２，７ーナフタレンジスルホン酸
ジナトリウム・２水和物、１−ヒドロキシー２−ナフタ
レンスルホン酸、１−ヒドロキシー５−ナフタレンスル
ホン酸、３−ジメチルアミノ安息香酸およびバイオレッ
ト酸（１−ナフトールー３，６ージスルホン酸）がアル
ドリツヒ・ケミカル・カンパニー、インコーポレーテツ
ド、ミルオーキー ウイスコンシン５３２３３（Ａｌｄ
ｅｒｉｃｈＣｈｅｍｉｃａｌＣＯ．，Ｉｎｃ．，Ｍｉｌ
ｕａｕｋｅｅ，ＷｉｓｃＯｎｓｉｎ５３２３３）より入
手可能である。標準試薬等級の溶媒および試薬が用いら
れる。示された実施例は単に説明のためだけであり、本
発明を制限するものてはない。
当業者は所望により成分およびパラメーターを変化し、
置換えることができる。実施例１ 本発明の試験系を包含している試験用具を調製し、従来
技術の指示薬を用いた商業的に入手可能な用具とグルコ
ース検出感度を比較した。
置換えることができる。実施例１ 本発明の試験系を包含している試験用具を調製し、従来
技術の指示薬を用いた商業的に入手可能な用具とグルコ
ース検出感度を比較した。
４２．５ｍｔの蒸留水に下記のものを攪拌しながら添．
加して第一の含浸溶液を調製した。
加して第一の含浸溶液を調製した。
クエン酸 ７１４ｍ９クエン
酸ナトリユム ３１３６ｍ９Ｎａ４ＥＤＴ
Ａ（エチレンジアミン●四酢酸のナトリウム塩）
２４００ｍ９．グルコース酸化酵素（５０００
国際単位／ｍｌ） １５ｍ１ベルオキシター
ゼ゛（１００国際単位／Ｍ９） ３２４ｍ
９ポリビニルピロリジン（ＰＶＰ）
３６０ｍ９／３．６ｍ１Ｈ２０ガントレツツＭ
Ｊ−１３９７２０ｍｇ／１４．４ｍ１Ｈ２０酵素活性の
１国際単位（１．Ｕ）とはＰＨと温度の特定条件下での
毎分当りの基質１μＭＯｌの変換を接触するに有効な量
である。
酸ナトリユム ３１３６ｍ９Ｎａ４ＥＤＴ
Ａ（エチレンジアミン●四酢酸のナトリウム塩）
２４００ｍ９．グルコース酸化酵素（５０００
国際単位／ｍｌ） １５ｍ１ベルオキシター
ゼ゛（１００国際単位／Ｍ９） ３２４ｍ
９ポリビニルピロリジン（ＰＶＰ）
３６０ｍ９／３．６ｍ１Ｈ２０ガントレツツＭ
Ｊ−１３９７２０ｍｇ／１４．４ｍ１Ｈ２０酵素活性の
１国際単位（１．Ｕ）とはＰＨと温度の特定条件下での
毎分当りの基質１μＭＯｌの変換を接触するに有効な量
である。
ワットマン３ＭＭ淵紙シート（ワットマン、インコーポ
レーテツド、クリプトン、エヌ ジエイ０７０１４（Ｗ
ｈａｔｍａｎ，Ｉｎｃ．，ＣｌｌｆｔＯｎ，Ｎ．Ｊ．Ｏ
７Ｏｌ４））上記調製液で飽和含浸し、８７℃で乾燥し
た。
レーテツド、クリプトン、エヌ ジエイ０７０１４（Ｗ
ｈａｔｍａｎ，Ｉｎｃ．，ＣｌｌｆｔＯｎ，Ｎ．Ｊ．Ｏ
７Ｏｌ４））上記調製液で飽和含浸し、８７℃で乾燥し
た。
４：１のメタノール／水溶媒５０ｍ１に下記のものを攪
拌しながら加えて第二の含浸溶液を調製した。
拌しながら加えて第二の含浸溶液を調製した。
ＭＢＴＨＯ．２Ｏｇｈ
クロモトロープ酸 ０．０５ｇラウリル硫
酸ナトリウム ０．２０ｇ第一の含浸溶液の乾燥残
渣を含んでいる上記調製されたベーパーに第二の含浸溶
液を飽和含浸し、６０℃で乾燥した。
酸ナトリウム ０．２０ｇ第一の含浸溶液の乾燥残
渣を含んでいる上記調製されたベーパーに第二の含浸溶
液を飽和含浸し、６０℃で乾燥した。
このように調製されたベーパーを２．５×２．５７７Ｉ
７７！に切断してこの実施例においてＭＢＴＨ／ＣＴＡ
として示される本発明の用具を作成した。この用具を両
面接着テープで裏当てし、これにより有機プラスチック
支持部材に固定した。本発明に従つて調製された用具を
ＣＬＩＮＩＳＴＩＸ（クリニステイクス（登録商標））
試薬細片（０−トリジン）、ＤＩＡＳＴＩＸ（ダイアス
テイクス（登録商標））試薬細片（ヨウ化カリウム）お
よびＳ一ＧＬＵＫＯＴＥＳＴ（エスーグルコテスト（登
録商標））（０−トリジン）と比較した。
７７！に切断してこの実施例においてＭＢＴＨ／ＣＴＡ
として示される本発明の用具を作成した。この用具を両
面接着テープで裏当てし、これにより有機プラスチック
支持部材に固定した。本発明に従つて調製された用具を
ＣＬＩＮＩＳＴＩＸ（クリニステイクス（登録商標））
試薬細片（０−トリジン）、ＤＩＡＳＴＩＸ（ダイアス
テイクス（登録商標））試薬細片（ヨウ化カリウム）お
よびＳ一ＧＬＵＫＯＴＥＳＴ（エスーグルコテスト（登
録商標））（０−トリジン）と比較した。
ＣＬＩＮＩＳＴＩＸおよびＤＩＡＳＴＩＸはエイムス●
カンパニー、デイビジヨン●オブ●マイルス●ラボラト
リーズ、インコーポレーテツド、エルクハート、インヂ
アナ４６５１５（ＡｍｅｓＣＯｍｐａｎｙ，Ｄｉｖｉｓ
ｉＯｎＯｆＭｉＩｅｓＬｌｂＯｒａｔＯｒｉｅｓ，Ｉｎ
ｃ．，Ｅｌｋｈａｒｔ，Ｉｎｄｊａｎａ４６５１５）の
製品の登録商標であり、Ｓ−ＧＬＵＫＯＴＥＳＴはバイ
オダイナミクス／ビー・エム・シー、インヂアナポリス
、インヂアナ（ＢｉＯｄｙＴｌａｍｉｃｓ／ＢＭＣ，Ｉ
ｎｄｊａｎａｐＯｌｉｓ，Ｉｎｄｉａｎａ）より入手可
能である。すべての用具を既知の濃度のグルコースを含
んでいる尿溶液に瞬間的に浸漬することにより試験した
。それぞれの発色により０，１，２，５，１０，２０，
３０，５０および１００ｍ９／ｄｌの間て識別された。
報告された表示゜゜０゛は検出可能な応答がないことを
示し、一方゜“５０゛は試料中の少なくとも５０ｍ９／
ｄｌの量が検出されたことを示す。中間の番号は観察さ
れた視覚的に識別可能な相対的な、色調強度を示す。結
果を第１表に示す。上記の結果から本発明の試験系で調
製された用具が従来の用具によつて検出可能なグルコー
スより少ない量のグルコースに対して感度が良いことが
示される。実施例２ この実施例に記載された実験では、種々のＭＢＴＨ−カ
プラーの相対的なアスコルビン酸塩抵抗性を互いにおよ
びｏ−トリジンと比較した。
カンパニー、デイビジヨン●オブ●マイルス●ラボラト
リーズ、インコーポレーテツド、エルクハート、インヂ
アナ４６５１５（ＡｍｅｓＣＯｍｐａｎｙ，Ｄｉｖｉｓ
ｉＯｎＯｆＭｉＩｅｓＬｌｂＯｒａｔＯｒｉｅｓ，Ｉｎ
ｃ．，Ｅｌｋｈａｒｔ，Ｉｎｄｊａｎａ４６５１５）の
製品の登録商標であり、Ｓ−ＧＬＵＫＯＴＥＳＴはバイ
オダイナミクス／ビー・エム・シー、インヂアナポリス
、インヂアナ（ＢｉＯｄｙＴｌａｍｉｃｓ／ＢＭＣ，Ｉ
ｎｄｊａｎａｐＯｌｉｓ，Ｉｎｄｉａｎａ）より入手可
能である。すべての用具を既知の濃度のグルコースを含
んでいる尿溶液に瞬間的に浸漬することにより試験した
。それぞれの発色により０，１，２，５，１０，２０，
３０，５０および１００ｍ９／ｄｌの間て識別された。
報告された表示゜゜０゛は検出可能な応答がないことを
示し、一方゜“５０゛は試料中の少なくとも５０ｍ９／
ｄｌの量が検出されたことを示す。中間の番号は観察さ
れた視覚的に識別可能な相対的な、色調強度を示す。結
果を第１表に示す。上記の結果から本発明の試験系で調
製された用具が従来の用具によつて検出可能なグルコー
スより少ない量のグルコースに対して感度が良いことが
示される。実施例２ この実施例に記載された実験では、種々のＭＢＴＨ−カ
プラーの相対的なアスコルビン酸塩抵抗性を互いにおよ
びｏ−トリジンと比較した。
第一の含浸溶液を下記のものにより調製した。蒸留水
４０ｍｔエタノール
４０ｍ１ガントレッッハー１３
９〔蒸留水中５％重量／容量（ｗ／ｖ）〕 ５２ｍｔト
リスマロン酸塩緩衝液〔２．８Ｍトリス（ヒドロキシメ
チル）アミノメタン、 １．４Ｍマロン酸、１．４Ｍマロン酸ナトリウム
３２ｍ
１ポリビニルピロリジン〔蒸留水中１０％ｗ／ｖ〕
２８ｍ１グルコースオキシター
ゼ（１０００ｖ／ｍｌ）４．３ｍＬおよび蒸留水１９．
３ｍ１に溶解したペルオキシターゼ
２００Ｔｎ９イートンダイクマン（Ｅａｔ（１）ｎ−
Ｄｉｋｅｍａｎ）２０４沖紙（イーアンドデイー）（Ｅ
＆Ｄ）に上記調製溶液を飽和含浸し、６０℃で乾燥した
。
４０ｍｔエタノール
４０ｍ１ガントレッッハー１３
９〔蒸留水中５％重量／容量（ｗ／ｖ）〕 ５２ｍｔト
リスマロン酸塩緩衝液〔２．８Ｍトリス（ヒドロキシメ
チル）アミノメタン、 １．４Ｍマロン酸、１．４Ｍマロン酸ナトリウム
３２ｍ
１ポリビニルピロリジン〔蒸留水中１０％ｗ／ｖ〕
２８ｍ１グルコースオキシター
ゼ（１０００ｖ／ｍｌ）４．３ｍＬおよび蒸留水１９．
３ｍ１に溶解したペルオキシターゼ
２００Ｔｎ９イートンダイクマン（Ｅａｔ（１）ｎ−
Ｄｉｋｅｍａｎ）２０４沖紙（イーアンドデイー）（Ｅ
＆Ｄ）に上記調製溶液を飽和含浸し、６０℃で乾燥した
。
これらの乾燥した戸紙の一部（第一の部分）をクロロホ
ルムに溶かした０．０２Ｍ０−トリジンで飽和し、５０
℃で乾燥した。
ルムに溶かした０．０２Ｍ０−トリジンで飽和し、５０
℃で乾燥した。
−トリジン用具を調製した。上記のように調製乾燥した
沖紙の残り（第２の部分）を２３４ｍｇＭＢＴＨ塩酸・
１水和物を溶解した５０ｍ１のメタノール溶液で飽和含
浸し、６０℃で乾燥した。第３の含浸では、第２の部分
の炉紙シートを下記の潜在性カプラーの１つの指示溶液
で含浸した。
沖紙の残り（第２の部分）を２３４ｍｇＭＢＴＨ塩酸・
１水和物を溶解した５０ｍ１のメタノール溶液で飽和含
浸し、６０℃で乾燥した。第３の含浸では、第２の部分
の炉紙シートを下記の潜在性カプラーの１つの指示溶液
で含浸した。
クロモトロープ酸 ４００ｍｇ（メタノール４０Ｔ
ｎＬおよび水１０７７！ｔ中）バイオレット酸 ３
５０ｍｇ（メタノール４０ｍ１および水１０ｍ１中）ジ
メチルアミノ安息香酸１６５ｍｇ（５０ｍｔのメタノ
ール中）ジエチルアニリン
１８６ｍｇ（５０ｍ１のメタノ
ール中）このように含浸された戸紙を６０℃で乾燥して
用具を形成した。
ｎＬおよび水１０７７！ｔ中）バイオレット酸 ３
５０ｍｇ（メタノール４０ｍ１および水１０ｍ１中）ジ
メチルアミノ安息香酸１６５ｍｇ（５０ｍｔのメタノ
ール中）ジエチルアニリン
１８６ｍｇ（５０ｍ１のメタノ
ール中）このように含浸された戸紙を６０℃で乾燥して
用具を形成した。
これらの用具をＯまたは５０ｍ９／Ｄｔのアスコルビン
酸塩を含んでいる１００ｍ９／Ｄｔの尿グルコース溶液
で試験し記録式反射分光光度計を用いてすべての色の変
化を読みとつた。特定の波長での反射率の値を前述した
クベルカーモンクの式により等しい吸収値Ｋに変換し、
時間の関数としてプロットした。相対的アスコルビン酸
塩抵抗性の評価に当つては、時間に対して一般的にＫが
直線の応答を示す最初の３囲２間のデータを用いた。
酸塩を含んでいる１００ｍ９／Ｄｔの尿グルコース溶液
で試験し記録式反射分光光度計を用いてすべての色の変
化を読みとつた。特定の波長での反射率の値を前述した
クベルカーモンクの式により等しい吸収値Ｋに変換し、
時間の関数としてプロットした。相対的アスコルビン酸
塩抵抗性の評価に当つては、時間に対して一般的にＫが
直線の応答を示す最初の３囲２間のデータを用いた。
これは第１図〜第３図に示した試料プロットによつてグ
ラフで説明する。傾きは５０ｍ９／ｄｌのアスコルビン
酸塩の存在下で得られたデータのＫ対時間の傾きをアス
コルビン酸塩の不存在下で得られたデータのＫ対時間の
傾きで割つた比率を用いた。１の値はアスコルビン酸塩
の干渉がないことを意味し、０の値は完全にアスコルビ
ン酸塩の干渉があることを意味する。
ラフで説明する。傾きは５０ｍ９／ｄｌのアスコルビン
酸塩の存在下で得られたデータのＫ対時間の傾きをアス
コルビン酸塩の不存在下で得られたデータのＫ対時間の
傾きで割つた比率を用いた。１の値はアスコルビン酸塩
の干渉がないことを意味し、０の値は完全にアスコルビ
ン酸塩の干渉があることを意味する。
結果を第２表に示す。種々の時間および各々のＫ値で得
られた結果を、ｏ−トリジンでは第１図、ＭＢＴＨ／Ｄ
ＥＡでは第２図、本発明に従つて調製されたＭＢＴＨ／
ＣＴＡ用具では第３図にグラフで示す。
られた結果を、ｏ−トリジンでは第１図、ＭＢＴＨ／Ｄ
ＥＡでは第２図、本発明に従つて調製されたＭＢＴＨ／
ＣＴＡ用具では第３図にグラフで示す。
これらのデータより、ＭＢＴＨ／クロモトロープ酸はｏ
−トリジンよりアスコルビン酸塩抵抗性ではるかに優れ
ており、ＭＢＴＨ／ジエチルアニリンに基づく従来技術
の組成物より実際に非常に（６倍）アスコルビン酸塩抵
抗性が大きいことが明らかに示される。
−トリジンよりアスコルビン酸塩抵抗性ではるかに優れ
ており、ＭＢＴＨ／ジエチルアニリンに基づく従来技術
の組成物より実際に非常に（６倍）アスコルビン酸塩抵
抗性が大きいことが明らかに示される。
実施例３
本発明にかかる組成物を有する下に示されたように調製
された溶液と従来の溶液とを、アスコルビン酸塩を含む
溶液および含まない溶液のＰＨおよび種々の緩衝液の効
果について比較した。
された溶液と従来の溶液とを、アスコルビン酸塩を含む
溶液および含まない溶液のＰＨおよび種々の緩衝液の効
果について比較した。
ＰＨ５．Ｏの最初の試験溶液を０．３１１Ｍクエン酸塩
緩衝液中て調製した。
緩衝液中て調製した。
ＰＨ７．Ｏの最初の試験溶液を０．０９３Ｍ（７）Ｔｒ
ｉｓ〔トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン〕と組
合わせた０．０９３Ｍのマロン酸塩中で調製した。各々
の緩衝液系では、試験溶液をＭＢＴＨｌＯＯｐＭｌカプ
ラー１００ｐＭ１過酸化水素３３３μＭ１アスコルビン
酸５６．８μＭ（１ｍ９／ｄｌ）の濃度に調製した。上
記溶液を標準の３ｍ１ガラス製または石英製キユベツト
内で分析した。
ｉｓ〔トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン〕と組
合わせた０．０９３Ｍのマロン酸塩中で調製した。各々
の緩衝液系では、試験溶液をＭＢＴＨｌＯＯｐＭｌカプ
ラー１００ｐＭ１過酸化水素３３３μＭ１アスコルビン
酸５６．８μＭ（１ｍ９／ｄｌ）の濃度に調製した。上
記溶液を標準の３ｍ１ガラス製または石英製キユベツト
内で分析した。
各々の場合において、１２５ｎｇ／ｍｌの濃度でペルオ
キシターゼを導入して反応を促進させた。光学密度の変
化（Δ０Ｄ）を標準記録式吸収分光光度計により示した
。結果を第３表および第４表に示す。本兄明の各々のカ
プラーに対してＰＨ７のＴｒｉｓマロン酸塩緩衝液系で
観察された結果はジメチルアニリンよりずつと優れてい
る。それはアスコルビン酸塩が存在してもしなくても反
応性が高かつた。毎分当りの発色（Δ０Ｄ）て表わした
約ＰＨ７．Ｏでの活性はアスコルビン酸が存在しないＰ
Ｈ５．Ｏのクエン酸中でのそれに比べて約３〜４倍高く
、アスコルビン酸が存在する時はさらに大きな差が認め
られた。種々の時間および各々の吸収（光学密度）値で
得られた結果が、Ｔｒｉｓマロン酸塩系（ＰＨ７）およ
びクエン酸系（ＰＨ５）のＭＢＴＨ／クロモトロープ酸
について第４図にグラフで示されている。種々のカプラ
ーを用いて得られた結果の比較を、１つの注意すべき例
外を除いてＴｒｉｓ−マロン酸塩系（ＰＨ７）について
第５図にグラフで示す。従来技術のカプラー、ジメチル
アニリンはこれらのパラメーターのもとでさえ反応しな
いが、その曲線はクエン酸（ＰＨ５）のデータから得ら
れる。すなわち、従来のカプラー系と違つて、本発明の
カプラー系は、生物学的に好ましいＰＨ範囲、特に酵素
分析において重要なＰＨ範囲て最適に機能する。
キシターゼを導入して反応を促進させた。光学密度の変
化（Δ０Ｄ）を標準記録式吸収分光光度計により示した
。結果を第３表および第４表に示す。本兄明の各々のカ
プラーに対してＰＨ７のＴｒｉｓマロン酸塩緩衝液系で
観察された結果はジメチルアニリンよりずつと優れてい
る。それはアスコルビン酸塩が存在してもしなくても反
応性が高かつた。毎分当りの発色（Δ０Ｄ）て表わした
約ＰＨ７．Ｏでの活性はアスコルビン酸が存在しないＰ
Ｈ５．Ｏのクエン酸中でのそれに比べて約３〜４倍高く
、アスコルビン酸が存在する時はさらに大きな差が認め
られた。種々の時間および各々の吸収（光学密度）値で
得られた結果が、Ｔｒｉｓマロン酸塩系（ＰＨ７）およ
びクエン酸系（ＰＨ５）のＭＢＴＨ／クロモトロープ酸
について第４図にグラフで示されている。種々のカプラ
ーを用いて得られた結果の比較を、１つの注意すべき例
外を除いてＴｒｉｓ−マロン酸塩系（ＰＨ７）について
第５図にグラフで示す。従来技術のカプラー、ジメチル
アニリンはこれらのパラメーターのもとでさえ反応しな
いが、その曲線はクエン酸（ＰＨ５）のデータから得ら
れる。すなわち、従来のカプラー系と違つて、本発明の
カプラー系は、生物学的に好ましいＰＨ範囲、特に酵素
分析において重要なＰＨ範囲て最適に機能する。
実施例４
本発明の試験系を包含するように下に記載された方法て
調製した用具を、本実施例ではある範囲の温度に−ヒ昇
させてその安定性を試験した。
調製した用具を、本実施例ではある範囲の温度に−ヒ昇
させてその安定性を試験した。
第一の含浸溶液の緩衝液を、クエン酸１９．８ｇ１クエ
ン酸ナトリウム８７．２ｇ１エチレンジアミン四酢酸〔
■Ｅｒｓｅｎｅ（ベルセンニダウ●ケミカル●カンパニ
ー（ＤＯｗＮＣｈｅｍｊｃａＩＣＯ．）登録商標）を攪
拌下９３５ｍ１の水に加えることにより調製した。それ
ぞれ上記調製緩衝液５０ＴｒＬ１、１０％メチルビニル
エーテルーマレイン酸無水物共重合体（ガントレツツ）
１３ｍ１１５％ＰＶＰｌＯｍｌおよびペルオキシターゼ
０．１５ｇを組合わせ、第５表に示すようにグルコース
酸化酵素および水をそれぞれ加えることによつて４つに
分けた第一の含浸溶液を調製した。４枚のイーアンドデ
イー（Ｅ＆Ｄ）枦紙を上記のように調製された組成物の
１つでそれぞれ飽和含浸し、９０℃で乾燥した。
ン酸ナトリウム８７．２ｇ１エチレンジアミン四酢酸〔
■Ｅｒｓｅｎｅ（ベルセンニダウ●ケミカル●カンパニ
ー（ＤＯｗＮＣｈｅｍｊｃａＩＣＯ．）登録商標）を攪
拌下９３５ｍ１の水に加えることにより調製した。それ
ぞれ上記調製緩衝液５０ＴｒＬ１、１０％メチルビニル
エーテルーマレイン酸無水物共重合体（ガントレツツ）
１３ｍ１１５％ＰＶＰｌＯｍｌおよびペルオキシターゼ
０．１５ｇを組合わせ、第５表に示すようにグルコース
酸化酵素および水をそれぞれ加えることによつて４つに
分けた第一の含浸溶液を調製した。４枚のイーアンドデ
イー（Ｅ＆Ｄ）枦紙を上記のように調製された組成物の
１つでそれぞれ飽和含浸し、９０℃で乾燥した。
第２の含浸溶液を０．３２ｇのクロモトロープ酸、０．
８ｇのラウリル硫酸ナトリウムおよび２．４ｇの１１！
４ＢＴＨをメタノール１６０ｍ１および水４０ｍ１の溶
媒に溶解させることにより調製した。
８ｇのラウリル硫酸ナトリウムおよび２．４ｇの１１！
４ＢＴＨをメタノール１６０ｍ１および水４０ｍ１の溶
媒に溶解させることにより調製した。
上記のように調製した沖紙にこの第２の溶液を飽和含浸
し５０℃で乾燥し、２．５×２．５Ｔｗｔに切断して本
発明の用具を形成した。このように調製した用具を使い
易くするために両面接着テープを用いて有機プラスチッ
ク製ハンドルに固定した。これらの用具の半分を標準実
験室オープン中で３日間乾燥加熱し、一方他の半分を対
照とするために室温に維持した。
し５０℃で乾燥し、２．５×２．５Ｔｗｔに切断して本
発明の用具を形成した。このように調製した用具を使い
易くするために両面接着テープを用いて有機プラスチッ
ク製ハンドルに固定した。これらの用具の半分を標準実
験室オープン中で３日間乾燥加熱し、一方他の半分を対
照とするために室温に維持した。
加熱した用具および対照の用具を両方とも第６表に示さ
れた濃度のグルコースを有する尿試料中に瞬間的に浸漬
することにより試験した。観察された結果を対照の用具
および加熱された用具と比較して示す。強度が増加した
色調ブロックは種々の濃度のグルコースを示し、下記の
ように任意の数値（０〜７０）を割り当てられる。加熱
された用具の結果は対応する結果と比較して示される。
れた濃度のグルコースを有する尿試料中に瞬間的に浸漬
することにより試験した。観察された結果を対照の用具
および加熱された用具と比較して示す。強度が増加した
色調ブロックは種々の濃度のグルコースを示し、下記の
ように任意の数値（０〜７０）を割り当てられる。加熱
された用具の結果は対応する結果と比較して示される。
加熱された細片と比較して組成物４は影響が一番少ない
ことがわかつた。
ことがわかつた。
最も影響が大きい組成物１でさえ、加熱された用具およ
び加熱されなかつた用具によつて生じた色調の強度にお
いてその差はほとんどなかつた。このようにすべての組
成物で感度の真の低下は観察されなかつた。本発明はあ
る程度特定して記載されたけれども、この記載は実施例
によつてのみなされており、本発明の精神から逸脱する
ことなく詳細に多くの変化が与えられることは理解され
よう。
び加熱されなかつた用具によつて生じた色調の強度にお
いてその差はほとんどなかつた。このようにすべての組
成物で感度の真の低下は観察されなかつた。本発明はあ
る程度特定して記載されたけれども、この記載は実施例
によつてのみなされており、本発明の精神から逸脱する
ことなく詳細に多くの変化が与えられることは理解され
よう。
第１図は指示薬としてｏ−トリジンを用いたグルコース
酸化酵素−ペルオキシターゼ試薬試験に対して実施例２
で得られたデータのグラフであり、試料の吸収係数Ｋ対
時間をプロットして得られたグラフである。 第２図は指示薬としてＭＢＴＨ／ジエチルアニリンを用
いたグルコース酸化酵素−ペルオキシターゼ試薬試験に
対して実施例２で得られたデータのグラフであり、Ｋ対
時間をプロットして得られたグラフである。
酸化酵素−ペルオキシターゼ試薬試験に対して実施例２
で得られたデータのグラフであり、試料の吸収係数Ｋ対
時間をプロットして得られたグラフである。 第２図は指示薬としてＭＢＴＨ／ジエチルアニリンを用
いたグルコース酸化酵素−ペルオキシターゼ試薬試験に
対して実施例２で得られたデータのグラフであり、Ｋ対
時間をプロットして得られたグラフである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 試料中に存在する構成成分に応答して少なくとも１
つの過酸化物を生成する手段及び前記少なくとも１つの
過酸化物を測定するための組成物を有する前記試料中の
構成成分測定用試験系において、前記組成物が４，５−
ジヒドロキシ−２，７−ナフタレンジスルホン酸および
１−ヒドロキシ−２−ナフタレンスルホン酸からなる群
より選ばれるヒドロキシナフタレンスルホン酸もしくは
その塩および３−メチル−２−ベンゾチアゾリノン−ヒ
ドラゾンよりなることを特徴とする試料中の構成分測定
用試験具。 ２ 前記ヒドロキシナフタレンスルホン酸もしくはその
塩が４，５−ジヒドロキシ−２，７−ナフタレンジスル
ホン酸もしくはその塩である特許請求の範囲第１項記載
の試験具。 ３ 担体マトリックスに包含されて成る特許請求の範囲
第１項記載の試験具。 ４ 前記担体マトリックスが吸収性である特許請求の範
囲第３項記載の試験具。 ５ 錠剤の形をした特許請求の範囲第１項記載の試験具
。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US05/877,499 US4119405A (en) | 1978-02-13 | 1978-02-13 | Test means and method for interference resistant determination of oxidizing substances |
| US877499 | 1978-02-13 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS57168162A JPS57168162A (en) | 1982-10-16 |
| JPS6054624B2 true JPS6054624B2 (ja) | 1985-11-30 |
Family
ID=25370105
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP53123679A Expired JPS5819989B2 (ja) | 1978-02-13 | 1978-10-09 | 過酸化物測定用試験組成物 |
| JP56193035A Expired JPS6054624B2 (ja) | 1978-02-13 | 1981-12-02 | 試料中の講成成分測定用試験具 |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP53123679A Expired JPS5819989B2 (ja) | 1978-02-13 | 1978-10-09 | 過酸化物測定用試験組成物 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4119405A (ja) |
| JP (2) | JPS5819989B2 (ja) |
| AU (1) | AU512401B2 (ja) |
| CA (1) | CA1100021A (ja) |
| DE (1) | DE2843539C3 (ja) |
| FR (1) | FR2421938A1 (ja) |
| GB (1) | GB2014306B (ja) |
| IT (1) | IT1109214B (ja) |
Families Citing this family (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2856487A1 (de) * | 1977-12-29 | 1979-07-12 | Wako Pure Chem Ind Ltd | Verfahren zur bestimmung von peroxidischen substanzen und hierfuer brauchbare verbindungen |
| US4230798A (en) * | 1978-02-13 | 1980-10-28 | Miles Laboratories, Inc. | Unitized uric acid test composition and device |
| JPS5520471A (en) * | 1978-08-01 | 1980-02-13 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | Hydrogen peroxide quantifying method |
| US4247297A (en) * | 1979-02-23 | 1981-01-27 | Miles Laboratories, Inc. | Test means and method for interference resistant determination of oxidizing substances |
| US4307188A (en) * | 1979-09-06 | 1981-12-22 | Miles Laboratories, Inc. | Precursor indicator compositions |
| CA1141637A (en) * | 1979-10-10 | 1983-02-22 | Erma C. Cameron | Cofactor indicator compositions |
| US4273556A (en) * | 1979-12-19 | 1981-06-16 | Sherwood Medical Industries Inc. | Determination of urea |
| JPS57174099A (en) * | 1981-04-17 | 1982-10-26 | Fuji Photo Film Co Ltd | Color indicator composition for detecting hydrogen peroxide and quantitative analytical film having reagent layer containing the same |
| DE3124590A1 (de) * | 1981-06-23 | 1983-01-27 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Stabilisiertes reagenz zum nachweis von h(pfeil abwaerts)2(pfeil abwaerts)o(pfeil abwaerts)2(pfeil abwaerts) |
| US4394444A (en) * | 1982-06-21 | 1983-07-19 | Miles Laboratories, Inc. | Cofactor indicator compositions |
| US4460684A (en) * | 1982-08-02 | 1984-07-17 | Miles Laboratories, Inc. | Ascorbate-resistant broad range glucose test composition, test device and method |
| US4615972A (en) * | 1983-11-04 | 1986-10-07 | Immuno Concepts, Inc. | Stabilization of indicators for detecting enzyme activity |
| US4737457A (en) * | 1986-02-26 | 1988-04-12 | Eastman Kodak Company | Analytical composition, element and method for the determination of hydrogen peroxide |
| DE3618752A1 (de) * | 1986-06-04 | 1987-12-10 | Bayer Ag | 4,6-dinitrobenzthiazolonhydrazone(2) |
| US4885240A (en) * | 1986-09-04 | 1989-12-05 | Eastman Kodak Company | Use of organic buffers to reduce dehydroascorbic acid interference in analytical methods |
| JP3342077B2 (ja) * | 1992-02-03 | 2002-11-05 | ライフスキヤン・インコーポレーテツド | 分析物の分光光度定量分析のための改良酸化カツプリング染料 |
| US5518891A (en) * | 1993-03-25 | 1996-05-21 | Actimed Laboratories, Inc. | Dye forming composition and detection of hydrogen peroxide therewith |
| US5563031A (en) * | 1994-09-08 | 1996-10-08 | Lifescan, Inc. | Highly stable oxidative coupling dye for spectrophotometric determination of analytes |
| ATE420367T1 (de) * | 2002-06-07 | 2009-01-15 | Arkray Inc | Testverfahren mit einer oxidations- /reduktionsreaktion mit formazan |
| DE60329679D1 (de) * | 2002-06-14 | 2009-11-26 | Arkray Inc | Testverfahren mit einer sulfonsäure- und einer nitroverbindung |
| EP1522593A4 (en) * | 2002-07-17 | 2008-07-23 | Arkray Inc | PROCESS FOR DECOMPOSING PROTEIN WITH SULFONIC ACID COMPOUND |
| JP5778701B2 (ja) * | 2010-03-01 | 2015-09-16 | システム バイオロジー アーゲー | エクオールの検出のための試験細片 |
| AR099935A1 (es) * | 2014-04-15 | 2016-08-31 | Dow Global Technologies Llc | Reactivo de prueba estabilizado |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL137003C (ja) * | 1967-10-14 | |||
| US3784358A (en) * | 1971-09-24 | 1974-01-08 | Cities Service Oil Co | Support for chromogenic glycol test reagent |
| DK678474A (ja) * | 1974-02-15 | 1975-10-13 | Hoffmann La Roche |
-
1978
- 1978-02-13 US US05/877,499 patent/US4119405A/en not_active Expired - Lifetime
- 1978-09-29 GB GB7838773A patent/GB2014306B/en not_active Expired
- 1978-10-03 AU AU40356/78A patent/AU512401B2/en not_active Expired
- 1978-10-04 CA CA312,667A patent/CA1100021A/en not_active Expired
- 1978-10-05 DE DE2843539A patent/DE2843539C3/de not_active Expired
- 1978-10-06 IT IT51408/78A patent/IT1109214B/it active
- 1978-10-09 JP JP53123679A patent/JPS5819989B2/ja not_active Expired
- 1978-10-09 FR FR7828771A patent/FR2421938A1/fr active Granted
-
1981
- 1981-12-02 JP JP56193035A patent/JPS6054624B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS54123096A (en) | 1979-09-25 |
| IT1109214B (it) | 1985-12-16 |
| FR2421938B1 (ja) | 1983-02-25 |
| DE2843539A1 (de) | 1979-08-16 |
| FR2421938A1 (fr) | 1979-11-02 |
| GB2014306B (en) | 1982-09-08 |
| DE2843539C3 (de) | 1981-05-07 |
| IT7851408A0 (it) | 1978-10-06 |
| JPS5819989B2 (ja) | 1983-04-21 |
| AU512401B2 (en) | 1980-10-09 |
| DE2843539B2 (de) | 1980-09-18 |
| CA1100021A (en) | 1981-04-28 |
| AU4035678A (en) | 1980-04-17 |
| GB2014306A (en) | 1979-08-22 |
| US4119405A (en) | 1978-10-10 |
| JPS57168162A (en) | 1982-10-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4247297A (en) | Test means and method for interference resistant determination of oxidizing substances | |
| JPS6054624B2 (ja) | 試料中の講成成分測定用試験具 | |
| US4460684A (en) | Ascorbate-resistant broad range glucose test composition, test device and method | |
| US4273868A (en) | Color stable glucose test | |
| US3298789A (en) | Test article for the detection of glucose | |
| US5326697A (en) | Composition and method of assaying for D-β-hydroxybutyrate | |
| US4361648A (en) | Color fixed chromogenic analytical element | |
| US4211845A (en) | Glucose indicator and method | |
| EP0029155B1 (en) | Stabilized composition and test device for detecting the presence of a sugar in a test sample | |
| JPH0334920B2 (ja) | ||
| US5510245A (en) | Composition and method of assaying for ketone bodies | |
| Tyhach et al. | Adaptation of Prostatic-Group-Label Homogeneous Immunoassay to reagent-strip format. | |
| US4291121A (en) | Bilirubin-resistant determination of uric acid and cholesterol | |
| AU754237B2 (en) | Uric acid assay device with stabilized uricase reagent composition | |
| US4855228A (en) | Multiple oxidative indicator system for visual determination of hydrogen peroxide | |
| CA1134247A (en) | Bilirubin-resistant determination of uric acid |