JPS6050439B2 - アイからの天然色素製造法 - Google Patents
アイからの天然色素製造法Info
- Publication number
- JPS6050439B2 JPS6050439B2 JP51157145A JP15714576A JPS6050439B2 JP S6050439 B2 JPS6050439 B2 JP S6050439B2 JP 51157145 A JP51157145 A JP 51157145A JP 15714576 A JP15714576 A JP 15714576A JP S6050439 B2 JPS6050439 B2 JP S6050439B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- callus
- eye
- culture
- pigments
- medium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
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Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は天然色素の製造方法に関する。
アントンアン系の色素は各種草花の色素として天然に存
在しているが、本発明者等は、このアントンアン色素を
工業的に製造する方法について研究を重ねた結果、アイ
植物組織から誘導したカルスを好気的な液内培養法によ
り大量に増殖し、この増殖細胞を酸で加熱還流してアン
トンアン系色素を抽出するという新しい天然色素の製造
法を発明することができた。
在しているが、本発明者等は、このアントンアン色素を
工業的に製造する方法について研究を重ねた結果、アイ
植物組織から誘導したカルスを好気的な液内培養法によ
り大量に増殖し、この増殖細胞を酸で加熱還流してアン
トンアン系色素を抽出するという新しい天然色素の製造
法を発明することができた。
即ち本発明はアイ植物の組織を切断し、これをカイネチ
ン、２・４−Ｄ及びミヨイノシトールを含有するカルス
培養用培地に置床し、カルスを誘導・増殖せさめ、次に
これを同組成の液体培地で好気的条件下で培養し、カル
スを増殖せしめ、この培養細胞を分離・採取後塩酸で加
熱還流することによりアントンアン系色素を抽出する天
然色素の工業的製造方法てある。カルス誘導用に供され
るアイ植物の組織としては、天然アイ生産用のアイ植物
（紅花種、学名Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍｔｉｎｃｔｏｒｉｕ
ｍ）の無菌組織が供せられ、特に幼苗の組織が望ましい
。このアイ植物の幼苗は該植物の種子から、常法に従い
、無菌的に発芽育成したものが良く、数０に育成した幼
苗は９５％エタノール、アンチホルミン等で夫々殺菌処
理をほどこした後、根、胚軸及び子葉に切断してカルス
誘導用のアイ植物組織として供せられる。カルスの誘導
・増殖法は、切断した幼苗をカイネチン、２ ・ ４−
Ｄ）サイアミン及びミヨイノシトールを含むカルス培養
用培地上に置床し、暗所で培養することにより、カルス
の誘導が始まる。この誘導カルスを同組成の固体培地上
でさらに育成し、一次カルスとする。このカルス培養用
の培地は、糖・無機塩類及び酵母エキスからなる通常の
組織培養に用いられる基本培地に、カイネチン、２・
４−Ｄ（ＮＡＡで代替可）、サイアミン及びミヨイノシ
トールを適当量添加た培地であるが、基本培地のみでは
カルスの誘導、増殖は著しく遅れる。
ン、２・４−Ｄ及びミヨイノシトールを含有するカルス
培養用培地に置床し、カルスを誘導・増殖せさめ、次に
これを同組成の液体培地で好気的条件下で培養し、カル
スを増殖せしめ、この培養細胞を分離・採取後塩酸で加
熱還流することによりアントンアン系色素を抽出する天
然色素の工業的製造方法てある。カルス誘導用に供され
るアイ植物の組織としては、天然アイ生産用のアイ植物
（紅花種、学名Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍｔｉｎｃｔｏｒｉｕ
ｍ）の無菌組織が供せられ、特に幼苗の組織が望ましい
。このアイ植物の幼苗は該植物の種子から、常法に従い
、無菌的に発芽育成したものが良く、数０に育成した幼
苗は９５％エタノール、アンチホルミン等で夫々殺菌処
理をほどこした後、根、胚軸及び子葉に切断してカルス
誘導用のアイ植物組織として供せられる。カルスの誘導
・増殖法は、切断した幼苗をカイネチン、２ ・ ４−
Ｄ）サイアミン及びミヨイノシトールを含むカルス培養
用培地上に置床し、暗所で培養することにより、カルス
の誘導が始まる。この誘導カルスを同組成の固体培地上
でさらに育成し、一次カルスとする。このカルス培養用
の培地は、糖・無機塩類及び酵母エキスからなる通常の
組織培養に用いられる基本培地に、カイネチン、２・
４−Ｄ（ＮＡＡで代替可）、サイアミン及びミヨイノシ
トールを適当量添加た培地であるが、基本培地のみでは
カルスの誘導、増殖は著しく遅れる。
この基本培地に”使われる糖はシュークローズ、グルコ
ース等であり、無機塩類としては次に示すものが使用さ
れる。基本培地の無機塩類：ＮＨ、ＮＯ。
ース等であり、無機塩類としては次に示すものが使用さ
れる。基本培地の無機塩類：ＮＨ、ＮＯ。
、ＫＮＯ。、ＫＨ２ＰＯ４、ＫＩ） ＣａＣｌ２、Ｈａ
Ｂ０４、ＭｇＳＯ４、ＣＵＳ０４、Ｚｎｓｏ４、ＦｅＳ
０４、Ｎａ２ＭｏＯ。、ＣｏＣ１２次にカルスの液体培
養法について述べると、上記の方法で得られる一次カル
スを、カルス培養用培地と同じ組成の殺菌した液体培地
に適当量接種し、好気的条件下て液内培養することによ
り、カルスを増殖せしめることにより大量の培養細胞が
得られる。この際の培養ＰＨは中性附近、望ましくはＰ
Ｈ６．Ｏてあり、培養温度は１５〜３５℃で行われ、好
気的条件の下て増殖が促進される。このようにして液内
培養法によつて大量の増殖細胞を得ることができるが、
この増殖細胞からアントシアン系色素を製造するには、
増殖細胞を培養液から分離後、これを希塩酸で加熱還流
することにより、赤色のアントシアン系色素が抽出され
る。これを５％塩酸酸性メタノールに転溶して吸収極大
（λＭａｘ）を測定したところ λＭａｘ＝
５３５ｎ７７７．であつた。
Ｂ０４、ＭｇＳＯ４、ＣＵＳ０４、Ｚｎｓｏ４、ＦｅＳ
０４、Ｎａ２ＭｏＯ。、ＣｏＣ１２次にカルスの液体培
養法について述べると、上記の方法で得られる一次カル
スを、カルス培養用培地と同じ組成の殺菌した液体培地
に適当量接種し、好気的条件下て液内培養することによ
り、カルスを増殖せしめることにより大量の培養細胞が
得られる。この際の培養ＰＨは中性附近、望ましくはＰ
Ｈ６．Ｏてあり、培養温度は１５〜３５℃で行われ、好
気的条件の下て増殖が促進される。このようにして液内
培養法によつて大量の増殖細胞を得ることができるが、
この増殖細胞からアントシアン系色素を製造するには、
増殖細胞を培養液から分離後、これを希塩酸で加熱還流
することにより、赤色のアントシアン系色素が抽出され
る。これを５％塩酸酸性メタノールに転溶して吸収極大
（λＭａｘ）を測定したところ λＭａｘ＝
５３５ｎ７７７．であつた。
又加熱還流で抽出されたものは淡赤色を呈しているが、
溶液のＰＨを中性塩基性にして放置すれは退色する。即
ちＰＨ７．部付近から消失し始め、淡緑色を呈し、ＰＨ
８．Ｏでは完全に消失する。これらのことよりアイ植物
の培養細胞から抽出される色素はアントシアン系の色素
と同定される。なお本色素の生産はカルス培養時に光照
射を行うことにより促進される。以下実施例にて詳細に
説明する。
溶液のＰＨを中性塩基性にして放置すれは退色する。即
ちＰＨ７．部付近から消失し始め、淡緑色を呈し、ＰＨ
８．Ｏでは完全に消失する。これらのことよりアイ植物
の培養細胞から抽出される色素はアントシアン系の色素
と同定される。なお本色素の生産はカルス培養時に光照
射を行うことにより促進される。以下実施例にて詳細に
説明する。
実施例１
ペトリ皿に濾紙をしき水で湿らせる。
その上に市販紅花種のアイ（ＰＯｌｙｇＯｎｕｍｔｉｎ
ｃｔＯｒｉｕｍＬＯｕｒ．）の種子２０粒を播種し暗所
に置き時々湿気を与えた。５日後に全ての種子が発芽し
た。
ｃｔＯｒｉｕｍＬＯｕｒ．）の種子２０粒を播種し暗所
に置き時々湿気を与えた。５日後に全ての種子が発芽し
た。
この内成育のよいものを１株選んで湿つた濾紙をしいた
腰高シヤーレに移し幼苗の室温下で育てた。２、週間後
には幼苗は５〜６ｃｍの大きさに成育した。
腰高シヤーレに移し幼苗の室温下で育てた。２、週間後
には幼苗は５〜６ｃｍの大きさに成育した。
次にこれらを９５％エタノールで洗浄し０．６％アンチ
ホルミン溶液に２０分間浸漬して殺菌処理を行い、滅菌
水にて３回洗浄した後、根、胚軸、子葉の各部分に切断
し角型培養びん中で表１の組成の！寒天培地に置床し、
これを３０゜Ｃの暗所で２力月間静置培養したところ、
胚軸部分からカルスが誘導された。この誘導されたカル
スを同条件の下に、さらに１力月培養してカルスを増殖
させた。
ホルミン溶液に２０分間浸漬して殺菌処理を行い、滅菌
水にて３回洗浄した後、根、胚軸、子葉の各部分に切断
し角型培養びん中で表１の組成の！寒天培地に置床し、
これを３０゜Ｃの暗所で２力月間静置培養したところ、
胚軸部分からカルスが誘導された。この誘導されたカル
スを同条件の下に、さらに１力月培養してカルスを増殖
させた。
このカルス（約１０ＴＷＬ片）を５本の角型培養ピン中
の、前述の組成の固体培地に植継ぎ２力月間培養し、植
継一代目のカルスを得た。
の、前述の組成の固体培地に植継ぎ２力月間培養し、植
継一代目のカルスを得た。
この内湿重量１０ｙを０．１ＮＨＣ１１００ｍ１で１０
分間加熱還流を行い、濾過して淡赤色の色素溶液９０ｍ
１を得た。この溶液のＰＨを中性にすると淡緑色になり
、ＰＨ８．Ｏで消失した。この色素の５％塩酸酸性メタ
ノール溶液に於けるλＭａｘを測定したところλＭａｘ
＝５３５ｎｍであつた。一方植継一代目のカルス０．５
ｙを表−１の組成の液体培地５０ｍ１に接種し、２８℃
の暗所でフラスコ培養（５００ｍ１容フラスコ使用、振
幅７Ｃｒｆｔ１１０５０ＳＣｉ１．１ｍｉｎ．）した。
分間加熱還流を行い、濾過して淡赤色の色素溶液９０ｍ
１を得た。この溶液のＰＨを中性にすると淡緑色になり
、ＰＨ８．Ｏで消失した。この色素の５％塩酸酸性メタ
ノール溶液に於けるλＭａｘを測定したところλＭａｘ
＝５３５ｎｍであつた。一方植継一代目のカルス０．５
ｙを表−１の組成の液体培地５０ｍ１に接種し、２８℃
の暗所でフラスコ培養（５００ｍ１容フラスコ使用、振
幅７Ｃｒｆｔ１１０５０ＳＣｉ１．１ｍｉｎ．）した。
２力月間振盪培養し、培養液よ）リカルスを分離したと
ころ湿重量１５ｙであつた。
ころ湿重量１５ｙであつた。
これを０．１Ｎの塩酸１００ｍ１で１紛間加熱還流し、
濾別して淡赤色々素溶液が得られた。この溶液のＰＨを
ＮａＯＨでＰＨ７．Ｏに調整すると退色し淡緑色になり
ＰＨ８．Ｏで完全に消失した。 （表−１） カル
ス培養用培地組成シユークロース
３０ｙＩｅＮ１１４Ｎ０３１．６５〃ＫＮＯ３ｌ．９Ｏ
〃 ＣａＣｌ２・２Ｈ２００．４４〃 ・ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００．３７〃 ＫＨ２ＰＯ，Ｏ．ｌ７〃 Ｈ３ＢＯ３６．２ｍ９ｌｅＫＩＯ．８３ 〃 Ｎａ２ＭＯＯ４◆２Ｈ２００．２５〃 ＣＯＣｌ２●６ＦＩ２００．０２５〃 ＭｎｓＯ４●４Ｈ２０２２．３〃 ＣＵＳＯ４弓鴇００．０２５〃 ＺｎｓＯ４◆４Ｈ２０８．６〃 Ｎａ２上ＤＴＡ３７．３〃 ＦｅＳＯ４Ｉ７Ｈ２Ｏ２７．８〃 酵母工キズ（ＤｌｆｃＯ社製） ３．０ｙ１
ｅＫｊｎｅｔｉｎ０．２ｍ９１ｅ２◆４−Ｄｌ．Ｏ〃 Ｔｌｌｌａｍｉｎｅ●Ｈｃｌｌ．Ｏ〃 ＭｙＯ−１ｎ０ｓｉｔ０Ｉ１００．０〃 ＰＨ６．ｌ （殺菌：１２０℃、１紛間） 実施例２ アイ幼苗の胚軸を表−１の組成の固体培地（但し表−１
の２・４−Ｄの代りにＮＡＡｌＯＯｐｐｍを用いた）で
実施例１と同様の方法に従つて培養し２ｆのカルスを得
た。
濾別して淡赤色々素溶液が得られた。この溶液のＰＨを
ＮａＯＨでＰＨ７．Ｏに調整すると退色し淡緑色になり
ＰＨ８．Ｏで完全に消失した。 （表−１） カル
ス培養用培地組成シユークロース
３０ｙＩｅＮ１１４Ｎ０３１．６５〃ＫＮＯ３ｌ．９Ｏ
〃 ＣａＣｌ２・２Ｈ２００．４４〃 ・ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００．３７〃 ＫＨ２ＰＯ，Ｏ．ｌ７〃 Ｈ３ＢＯ３６．２ｍ９ｌｅＫＩＯ．８３ 〃 Ｎａ２ＭＯＯ４◆２Ｈ２００．２５〃 ＣＯＣｌ２●６ＦＩ２００．０２５〃 ＭｎｓＯ４●４Ｈ２０２２．３〃 ＣＵＳＯ４弓鴇００．０２５〃 ＺｎｓＯ４◆４Ｈ２０８．６〃 Ｎａ２上ＤＴＡ３７．３〃 ＦｅＳＯ４Ｉ７Ｈ２Ｏ２７．８〃 酵母工キズ（ＤｌｆｃＯ社製） ３．０ｙ１
ｅＫｊｎｅｔｉｎ０．２ｍ９１ｅ２◆４−Ｄｌ．Ｏ〃 Ｔｌｌｌａｍｉｎｅ●Ｈｃｌｌ．Ｏ〃 ＭｙＯ−１ｎ０ｓｉｔ０Ｉ１００．０〃 ＰＨ６．ｌ （殺菌：１２０℃、１紛間） 実施例２ アイ幼苗の胚軸を表−１の組成の固体培地（但し表−１
の２・４−Ｄの代りにＮＡＡｌＯＯｐｐｍを用いた）で
実施例１と同様の方法に従つて培養し２ｆのカルスを得
た。
この内湿重量０．５ｙのカルスを表−１の組成の５本の
試験管液体培地（液量各１５ｍ１）に接種し、２６℃の
暗所で試験管内振盪培養（振幅２．０ｃｍ１１９００ｓ
ｃｊ１１ｍｉｎ．）を行つた。１週間振盪培養によりカ
ルスの培養細胞の増殖が始まり、さらに１力月培養を行
い細胞培養液６０ｍ１を得た。
試験管液体培地（液量各１５ｍ１）に接種し、２６℃の
暗所で試験管内振盪培養（振幅２．０ｃｍ１１９００ｓ
ｃｊ１１ｍｉｎ．）を行つた。１週間振盪培養によりカ
ルスの培養細胞の増殖が始まり、さらに１力月培養を行
い細胞培養液６０ｍ１を得た。
Claims (1)
- １ ポリゴナム（Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ）に属するアイ植
物の組織を、カイネチシ、２・４−Ｄ、ミヨ・イノシト
ールを含有するカルス培養用培地で培養してカルスを誘
導し、該カルスを好気的に液体培養してカルスを増殖せ
しめ、これを分離・採取後酸で加熱還流し、アントンア
ン系色素を抽出することを特徴とするアントンアン系色
素の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP51157145A JPS6050439B2 (ja) | 1976-12-25 | 1976-12-25 | アイからの天然色素製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP51157145A JPS6050439B2 (ja) | 1976-12-25 | 1976-12-25 | アイからの天然色素製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5384026A JPS5384026A (en) | 1978-07-25 |
| JPS6050439B2 true JPS6050439B2 (ja) | 1985-11-08 |
Family
ID=15643155
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP51157145A Expired JPS6050439B2 (ja) | 1976-12-25 | 1976-12-25 | アイからの天然色素製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6050439B2 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100352455B1 (ko) * | 2000-08-07 | 2002-09-11 | 최석철 | 혼합용매를 이용한 천연 생 쪽 잎 추출액의 염색장치 및그 방법 |
| CN102690529B (zh) * | 2012-04-28 | 2014-01-22 | 贵州丹寨宁航蜡染有限公司 | 蓝靛膏的工业制备方法 |
| CN102690531B (zh) * | 2012-04-28 | 2014-04-02 | 贵州丹寨宁航蜡染有限公司 | 以蓝靛膏制备高上染率防脱色靛蓝染水的方法 |
-
1976
- 1976-12-25 JP JP51157145A patent/JPS6050439B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5384026A (en) | 1978-07-25 |
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