JPS6023377A - ２−フリルブチロラクトンとその合成方法及びその哺乳動物の免疫システムへの調整剤としての用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、化学化合物及び合成物並びに免疫調整薬とし
てのそれらの用途に関するものである。

米国特許第２，９２７，０５４号は、例えばグルコース
。

マンノース、フルクトース等のアルデヒド若しくはケト
ンを有する成る砂糖の環式アセタールの砂糖を形成する
為の縮合を開示している。このメカニズムは、明らかに
、砂糖の２個の水酸基の各々からの水素とアルデヒドや
ケトンのカルボニル基の酸素との結合による水の除去を
含んでいる。この縮合反応は、酸アセタール化触媒の存
在下で混合物をアルデヒドの沸点まで加熱した砂糖の開
鎖形に好都合な状態で進行する。環式アセタール環の隣
接する２個の炭素原子は砂糖分子の脂肪鎖の隣接する炭
素である。それらの環式アセタール環の幾つかを同一砂
糖分子で形成し、ポリ一環式アセタールを形成すること
が出来る。

免疫システムは、細菌や高等動物に於ける他の外来のタ
ンパク質を伴う病気に対する初歩的な防御である。免疫
反応は特定の抗原と反応する特定の抗体タンパク質の活
動により媒介される。抗原は個々の体に対して外的な、
例えばタンパク質等の相当に分子量の大きい物質である
。それらは細胞の外表面に最も頻繁に位置している。潜
在する抗原は花粉の殻、生体組織片、医療用合成物質。

動物の寄生虫、ビールス及びバクテリアに於いて発見さ
れ得る。

人間に於いては、多くの潜在する抗原が体内の最初の２
本の防御ラインを通過せず、その為その免疫システムを
開始させることはない。これら２本の防御ラインの一方
は皮膚、粘膜、涙及び胃酸からなり、もう一方は特殊な
白面細胞、顆粒球及び単球そして、異質物質を飲みこん
だり破壊したりする食菌作用により病原体や他の潜在抗
原を破壊する大食細菌からなる。これら白面細胞や大食
細菌は食細胞と呼ばれている。病原体や他の外来物質が
体内の最初の防御ラインを通過すると、免疫反応が開始
する。

体液上と細胞上の２通りの主な免疫防砂システムがあり
双方が抗原と反応する。体液の免疫性は血漿たんばく質
のガンマグロブリンフラクションで見出される循環する
抗体に起因する。血漿を高速度で遠心分離機にかけると
、その成分タンパク質はフラクションと呼ばれる幾つか
の部分に自重により分離する。抗体は通常、約１５６，
０００の分子量を有する成分のフラクションに於いて見
られる。

この特別なフラクションはガンマグロブリンフラクショ
ンと名付けられている。体液の免疫性はバクテリア性伝
染病に対して主な防御となる。細胞の免疫性はリンフォ
キンズ（Ｉｙｍｐｈｏｋｉｎｅｓ　）と呼ばれるリンパ
球生成物に起因する。このタイプの免疫性は・アレルギ
ー性反応を遅らせたり、異質組織の移植を拒否したり腫
瘍細胞の発生を防止したリするのに反応する。それはビ
ールスや真菌類及び結核バチルスの様な幾つかのバクテ
リアが原因となる伝染病に対する主な防御となる。

リンパ球と呼ばれる特別の白面細胞は、体液及びｉｌｌ
胞の双方の免疫性に応じることができる。リンパ球の前
駆物質細胞は、大人の骨髄で作られ種々の器官に移動し
たり、又は胎児を成長させる卵黄嚢で作られ胎児や種々
の器官に移動する。人間に於いては、これら前駆物質の
幾つかは胸骨のすぐ後の上部胸に位置する２つに分裂し
た線状の構造をした胸腺に移動し、そこで細胞免疫質に
含まれるＴ−リンパ球に変化せしめられる。人間に於い
ては、前駆物質ＳＵａの残りは、これらが体液免疫質に
含まれるＢ−リンパ球に変化せしめられる牌臓に移動す
る、■＝及びＢ−リンパ球は、機能が異なり種々の化学
的手段により区別され得るが構造的には区別できない。

成熟したリンパ球血液中を循環しており、牌臓や胸腺ど
同様なリンパ腺でも見出され得る。

体液の免ｇ！質は、特殊な抗原に対するレセプターを細
胞表面に有するＢ−リンパ球により媒介されている。そ
れらは極めて特殊であるらしく、Ｂ−リンパ球の各タイ
プはある抗原のみと反応する。

例えばバクテリアやビールスが有機体を侵すと、Ｂ−リ
ンパ球はバクテリアやビールスの表面の抗原と反応して
結合し、リンパ球は刺激されて分裂する。その子細胞は
血漿側Ｉｔ！ｉｌ（ｐｌａｓｍａ　ｃｅｌｌｓ　）と呼
ばれる特殊な細胞に変形する。これらの細胞は大量の抗
体を生産しそして通常に循環させるべく分泌する。これ
ら抗体はそれらの生産を刺激する抗原に対して特異な関
係にありそれら抗原のみと反応する。凝集素として知ら
れる抗体は共に凝集し合う物質を含む抗原を発生させる
。これによって、その物質が組織体に拡散するのが防止
され、食細胞の捕獲作用やリンパ腺の侵入物の濾過作用
が可能となる。他の抗体はバクテリア細胞膜に孔を開け
ることによりバクテリを殺す。これらはりシンとして知
られている。抗毒素と呼ばれる抗体はバクテリアによっ
て生産される毒素と結合し、これによってその毒素をな
くする。

病原体体内に侵入し免疫が応答を開始すると、抗体は数
時間で作られ得る。この初期反応は、第１反応又は第１
免疫作用と呼ばれている。しかし、その間、病原体も分
裂し時折毒素を生産しており、その何れか一方は種々の
病気の徴候を引起こす。

自然消滅するものを除いた全ての病原体を除去するのに
十分な抗体が作られるまでに数日もしくは数週間かかる
かも知れないが、この後は病気の徴候も同様になくなる
。リンパ球、血漿細胞及び抗体は、もし同じ病原体が再
度体内に入ればリンパ球が直ちに反応して抗体の生産を
開始する様に、残留し血液中を循環する。この敏感なリ
ンパ球の応答は第２反応と呼ばれる。第２反応は第１反
応中に生産されたものより高レベルの抗体の生産をもた
らす。そして、多くの抗体が非常に速く生産されるから
、細菌は分裂できず病気を発生させることができない。

体液の免疫性は、枯れ草熱の場合の如く、以前にさらさ
れた有機体が抗原に対し数分以内に応答するという事実
に起因する急性過敏症として知られている。他の急性過
敏症の例としてはアナフィラキシ−性ショックや個人が
自分にとって以前から敏感である抗原に晒されると時々
起こる極度のアレルギー反応がある。やがて、この体液
の抗原に対する反応性は結果的に消滅することが可能で
ある。。

体液の免疫性は自然的及び人為的の双方で誘発され得る
。活発な自然免疫性の場合は、個々のリンパ球は循環を
続け、感染後の抗体の生産を活発化する。この活発な自
然免疫性は多年間又は−生涯でも継続する。嬰児は生後
の最初の２．３日に母から与えられるミルクなどの初乳
から抗体を受取り、生涯の最初の１年の免疫性が与えら
れる。

これは、嬰児が抗体の実際の生産に関与していないので
受身的自然免疫として知られる。能動的な人為性免疫は
個人の体内に死滅又は衰弱した細菌を注入することによ
り誘発される。それらの表面の抗原は依然としてリンパ
球に抗体の生産を開始させるが、これらの細菌はより病
毒性の強い型が引き起こす病気の徴候の原因とならない
。個人がその後その病毒性を有する細菌にざらされると
、その者は既に敏感化されており、直ちに反応して大量
の抗体を生産する。能動的な人為的免疫性は、効能促進
剤により多年間持続するか又は永久的となり得る。又、
約１ケ月間の保護を提供する受身的な人為的免疫性もあ
る。この一時的な免疫性は他人や動物から得られる抗体
を個人の体内に注入することにより引き起こされる。そ
れは通常危篤状態や伝染病に於いて使用されるだけであ
る。リンパ球を介さない為にリンパ球は抗体を作ること
も抗原を゛記憶する″こともせず、これはこの方法の効
果が一時的であることを説明している。

細胞の免疫性に於いては、体液の免疫性とは対照的に、
循環する抗体を捕えることができない。

その型の免疫性を媒介するＴ−リンパ球は、移植組織や
腫瘍又はビールスの場合の様に、もう１つの別個体から
の細胞の抗原と出会った場合に活性化される。Ｂ−リン
パ球と同様に、■−リンパ球も個別的であり、各タイプ
はある抗原とのみ反応する。リンパ球は拡張し、分裂し
、外来タンパク質に対する攻撃に参与するリンフォキン
（ｌｙｉｐｈｏｋｉｎｅｓ　）を生産する。それらは又
、大食細胞の食細胞活動を刺激する。体液の免疫性に関
する場合と同様に免疫学的記憶が存在するが、その反応
は一層遅い。前に敏感化された固体に於ける反応を実行
するのに長くて１０乃至１２時間を要すると思われる。

それ故、細胞の免疫性は緩性過敏症として知られている
。毒性った。オーク及びうるしに対するアレルギー反応
や、陽性ツベルクリン皮膚検査で見られる赤い斑点並び
に移植組織の拒否作用はすべて細胞の免疫性の反応作用
である。

免疫性調整薬はリンパ球の分裂増殖のプロセスを活性化
したり阻止したりする。正常なリンパ球の分裂増殖作用
はある化学薬品と同様な抗原、大食細胞、Ｔ−及びＢ−
リンパ球間の種々の相互作用に起因する。例えば、特別
の抗原の存在は特別なＴ−又はＢ−リンパ球を活性化す
る。加えて、あるＢ−リンパ球は、他がＴ−リンパ球か
ら独立すると共に抗原によってのみ活性化されている間
に活性なＴ−リンパ球により活性化され得る。活性化さ
れたＴ−リンパ球は、大食細胞にＴ−及びＢ−両リンパ
球を活性化するインターロイキン（１ｎｔｅｒｌｅｕｋ
ｉｎ　）　１　（Ｉ　Ｌ　−１）として知られる分子を
生み出させる。活性化されたＴ−リンパ球は、又、更に
Ｔ−リンパ球の活性化を誘発するインターロイキン２（
Ｉｍ−２）として知られる分子を生み出すことができる
。ミトゲンと呼ばれる化学薬品はＤＮＡ合成及びＴ−又
はＢ−リンパ球に於ける活性度の指標となる有糸分裂を
開始させる。幾つかのミトゲンは、他のものが多くの型
のリンパ球に影響を及ぼすのに対して、１つの型のリン
パ球にだけ影響を及ぼす。多種類で且つ種々の量の免疫
調整薬は、免疫システムの成分間の複雑な相互作用に影
響を及ぼす。後述される如く、本発明の化合物や合成物
は、その投薬量に従って、免疫刺激剤又は抑制剤として
働き、そしてＴ−及びＢ−双方のリンパ球に影響を及ぼ
す。

免疫システムは病気の原因となる物質に対する主要な防
御となるが、有益及び有害外来物質間の区別をつけるこ
とかできず双方を共に破壊する。

固体を害することのない免疫システムを規則化する方法
をもてば多くめ場合に役立つであろう。本発明の化合物
及び合成物は、その様な調整又は規則化効果を呈すると
共に種々の免疫性不調の治療に於いて利用され得る。

免疫システムは、老化の幾つかの徴候と深く関係してい
ると共に癌に対する防護に於いて重要となると推測され
る。このシステムは、消耗した赤血球細胞の様な細胞の
老化又は変換及び続いて起こる破壊を認識する為に必要
であり、この理由から正常な体の機能に不可欠である。

癌の場合に於けるあるセオリーは、悪性状態への細胞の
変化がかなり頻繁に起こるがこれらの変化した細胞はｎ
ｏｔ　ｓｅＨ”としてＫｉｆｉＪされて破壊されるとい
うことである。幾つかの発癌物質は細胞自体を悪性状態
に変化させるよりもむしろ免疫反応性を低下させるのに
働く。これは体がもはや自然に変化する細胞を破壊せず
癌が成長する結果となることを意味するかも知れない。

免疫刺激作用はこのタイプの癌の治療に役立つかも知れ
ない。本発明の化合物及び合成物が、化学的又は化学免
疫的療法に於ける付属的治療薬として使用されれば、腫
瘍の成長に影響を及ぼすことができる。

癌治療方法の幾つか、例えば外斜的療法、化学療法及び
放射線療法は、免疫システムの正常な機能の抑制や思い
切った変化に帰結し得る。本発明の化合物及び合成物の
如き免疫刺激薬は、免疫システムの低下が原因する種々
の感染を防止　及び／又は　攻撃するのに極めて有効と
なり得る。これらの条件に於ける用途として目下研究さ
れている免疫調整薬の幾つかに、ｃｙｃｌｓｏｐｏｒｉ
ｎ　−Ａ、　ｌｅｖａｍｉｓｏｌｅ、及び１ｓｏｐｒｉ
ｎｏｓｉｎｅ　（１ｎｏｓｉｐｌｅｘ　）がある。本発
明の化合物及び合成物は、この及び他の条件に於ける用
途の為の免疫システムを含んだ新規な治療薬となるであ
ろう。

アレルギー反応の場合のように侵入する細菌や外来物質
よりも個人の免疫学的反応の方がより多くのダメージや
不快感の原因となる場合がある。

これらの場合には、免疫反応を抑制することが好ましい
。

時々、免疫学的メカニズムは個人の体自体のある部分に
敏感となり、その部分に対する妨害はおろか破壊さえの
原因となる。”５ｅｌｆ”とｎｏｔ　ｓｅＮ’“を識別
する能力が損われ、体はそれ自体を破壊し始める。これ
ら人間の自動免疫的病気の幾つかとしては、リューマチ
関節炎、溶血性貧血、リューマチ熱、甲状腺炎、潰瘍性
大腸炎、メッセニア　グラビス（ｍｙｅｓｔｈｅｎｉａ
　（ｌｒａＶｉｓ）　、糸球体腎炎−小児病、アレルギ
ー性脳を髄炎１時々ウィルス性肝炎につながる神経や肝
臓の破壊の継続及び多くの硬化症がある。自動免疫性の
幾つかの形態は、目のレンズや神経組織の様なリンパ球
に通常は晒されない領域に対する外傷の結果として発生
する。これらの領域の組織体がリンパ球に晒されるとそ
れらの表面タンパク質は抗原として活動し、抗体の生産
及びそれらの組織体を破壊し始める細胞の免疫反応を開
始する。他の自動免疫性の病気は、個人自体の組織体と
抗原的に類似する、即ち交互反応し合う抗原に個人をさ
らした後に進行する。リューマチ熱は、リューマチ熱の
原因となる連鎖球菌状のバクテリアの抗原が人間の心臓
部と交互に反応し合う病気の型の１例である。抗体はバ
クテリア抗原と心臓筋の抗原とを区別できずこれらの抗
原の一方を有するｌｌＩ胞が破壊される。これらの自動
免疫性の病気に於ける免疫システムの抑制は病気の効力
を除去し又は縮小するのに役立つであろう。

循環する抗体及び細胞の免疫反応は、移植組織及び有機
体の拒否作用で成る役割を演じる。提供者が受入者と全
く同一対でなければ、受入者のリンパ球が移植組織を’
ｎｏｔ　５ｅｌｆ”として認識し、直ちに反応してそれ
を破壊する。この状態の例外としては、目の角膜の様な
、リンパ球が純化せず、従って敏感でなく免疫反応が迅
速でない非血管性領域〈特別区域）に対する移植がある
。現在では、他の面で患者にある程度のダメージを与え
ることなく移植に対する拒絶作用を防止する為に免疫反
応を抑制することが困難である。本発明の化合物及び合
成物は、免疫システムのコントロールされた調整作用を
通して移植に対する耐薬力を確立するのに価値があるで
あろう。

病気に対する防御や正常な生体機能に於いては免疫シス
テムが不可欠な役割を果す為、その役割を高めたり減ら
したりすることができる本発明で開示される様な化合物
や合成物が重要となる。それらは正常なそのシステムの
活動が妨害されたり無害な外来物質を破壊したりした場
合に特に有益である。それらは又、有害な抗原に対する
そのシステムの反応を刺激することにより役立ち、種々
の病のクールを短縮することができる。

本発明の目的の１つは、免疫調整効能を有する化合物を
提供することである。

本発明のもう１つの目的は、免疫不調の治療に有効な新
規な合成物とその適用方法を提供することである。

本発明の他の目的の１つは本願で検討される新規な化合
物を準備する為のプロセスを提供することである。

本発明の更に他の目的の１つは、本発明の２゜５−ジア
ルコキシ−２，５−ジどドロフランと２゜３−ジヒドロ
キジブティノドとの水を媒体とした反応を実施すること
である。

本発明の更に他の目的の１つは、免疫調整的且つサイト
スタティック（ｃｙｔｏｓｔａｔｉｃ）な活動を備える
新規な化合物を提供することである。

本発明の更に他の目的の１つは、免疫不調及び癌の処置
に有効な新規な合成物とその適用方法を提供することで
ある。

以下、本発明の構成について詳細に説明する。

本発明の新規な化合物は、次の一般式で表わされる化合
物 Ｌ　閲 ここで、Ｒ＋　とＲ２は、少な（とも一方は水素という
条件で、水素及び低級アルキルよりなる部類中から選択
され、 Ｒ３とＲ４は、同一でも異なっても良く、低級アルキル
及びアリールよりなる部類から選択され、 Ｒ５とＲ６は水素及び低級アルキルよりなる部類から選
択され、これらは同一でも異なっても良い。

と、次の一般式で表わされる化合物 ここで、ＸはＯｌＳ及びＮＨよりなる部類から選択され
、 Ｒ７及びＲ８は水素及び低級アルキルよりなる部類から
選択され、これらは同一でも異なっても良く、 Ｒ７は、 ＲＩＧＯ−ＣＨ ９ でも良い。

ここでＲ９は、 曇 よりなる部類から選択され、 Ｒ＋ｏ及びＲｕは水素、低級アルキル、低級アルキルの
フェニル基及び水酸基の置換体よりなる部類から選択さ
れ、これらは同一でも異なっても良い。

とを、約等量ずつ反応させることにより生成され、この
生成物を酸無水物又は酸イミドで処理し、新規な物質を
還流及び晶析することにより得られる。

純粋生成物の回収は、例えば、活性炭濾過、イオン交換
又はゲル・クロマトグラフィ等の当業者にとって公知な
技術の何れかによる中間物の精製や処理により促進され
得る。

上述したプロセスにより生成される新規な化合物は ここで、Ｒ２は水素及び低級アルキルよりなる部類から
選ばれ、Ｒ５及びＲ６は水素及び低級アルキルよりなる
部類から選ばれてこれらは同一でも異なっても良く、Ｒ
７及びＲ８は水素及び低級アルキルよりなる部類から選
ばれてこれらは同−又は異なっても良く、Ｒ７は Ｒ１０Ｏ−Ｃ−Ｈ ９ でもよく、ここでＲ９は よりなる部類から選ばれ、ＲＩＧ及びＲｕは水素、低級
アルキル、フェニル及び低級アルキルのヒドロキシル置
換体よりなる部類から選ばれてこれらは同−又は異なっ
ていても良く、Ｒ７がα、β又はγ位に水酸基を含む場
合はブチロラクトンの第３炭素に同一の炭素上のカルボ
ニル基のプロトン化によりヘミケタル（ｈｅｍｉｋｅｔ
ａｌ　）閉鎖環を形成でき、０は１゜２及び３よりなる
部類から選ばれ、そして、ＸはＯｌＳ及びＨよりなる部
類から選ばれる。

ラクトン環の構造は １ であり、ここでＲ２，Ｒ５，Ｒ６，ＲＩＧ、Ｘ及びｎは
上述の通りである。

を含んでいる。これらの環は、通常、水又は高極性媒体
中で部分的に再整列し、次の如き互変平衡生成物を与え
る。　− １″ＩＬ ここでＲ２、Ｒｓ　、Ｒｅ　、Ｒ７、Ｒｇ　、Ｒ＋ε。

Ｒｕ、Ｘ及びｎは上述の通りである。

本発明の化合物は、一般的に知られている調剤用キャリ
アを人間や動物に投与することができる合成物に混ぜる
ことにより公式化され得る。これら合成物は、免疫調整
的であって極めて低く且つ鋭敏な毒性値で細胞に有毒な
活性を示す。

これら合成物の細胞に有毒な活性は、それら化合物によ
る免疫システムの刺激や化合物それ自体の細胞毒性又は
両効果の組合せが原因しているかもしれない。

それらのｌ１ｌｌ胞に有毒な活性により、これらの合成
物を広範に亘る癌の病療法に使用することができる。こ
の合成物は、ＡＩＤＳ（後天的免疫性不良症候群）に於
ける場合と同様に、抑圧された免疫性システムに於ける
免疫性の治療に使用され得る。

本合成物は、哺乳類のリンパ球に投与された場合にＤＮ
Ａ合成能力によって測られるその再生成能力に於いて十
分な効果を有する。この効果には２つのモードがある。

本合成物は、高濃度に於いては免疫抑制剤として働くが
、低濃度に於いては免疫刺激剤として働く。

この免疫調整効果は人間の血液のリンパ球のインビトロ
（ｉｎ　ｖｉｔｒｏ）及びマウスの＊ｍリンパ球のイン
ビボ（ｉｎ　ｖｉｖｏ　）及びインごトロで見られる。

種々の免疫調整に係る研究がこれら合成物を使用して実
施されてきた。これらの研究に於いては、Ｔ−及びＢ−
リンノ°り球は人間の血液及びマウスの稗臓から単離さ
れている。マウスの５ストレイン（系統）、ＢＡＬＢ／
Ｃ，Ｃ５７ＢＬ／６．ＢＤＦ＋、ＳＪＩ／Ｊ及びＤＢＡ
／２、がリンパ球提供体として使用される。これらのリ
ンパ球は、ミトゲンとして働くレクチン（＋ｅｃｔｔｎ
ｓ　）と呼ばれる植物性タンパク質で処理される。

ミトゲンはＤＮＡ合成及び有糸分裂を刺激する物質であ
る。これらの研究で使用されるミトゲンは赤いいんげん
豆から単離されるフィトヘムアグルチニン（Ｐ）−ＩＡ
＞となた豆（ｊａｃｋ　ｂｅａｎ）から単離されるコン
カナバリン（Ｃｏｎ−Ａ）であった。

Ｃｏｎ−Ａはマンノース又はグルコース部分を含む特殊
なレセプター（糖タンパク質）と結合し、全てのネズミ
科の動物のＤＮＡを合成するＴ−細胞を刺激し、分裂し
及びリンフォキン（ｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅＳ）を放出す
る。溶解性Ｃ０Ｄ−ＡはマウスのＴ−とＢ−細胞の区別
を可能とする。何故なら、Ｔ−及びＢ−細胞の双方が単
位細胞当り１０６分子のＣｏｎ−Ａを結び付けることが
できるが、■−細胞だけがこのレクチンが溶解可能な状
態で与えられた時に刺激されるからである。ＰＨＡはＴ
−又はＢ−細胞の一区分（Ｔ２細胞）のみを刺激する。

マウスに於いては、ＰＨＡはＴ−細胞の１区分を活性化
しＢ−細胞を刺激しない。人間に於いては、■−及びＢ
−双方の細胞が多分刺激される。Ｂ−細胞の活性化は間
接的でＰＨＡ活性化Ｔ−細胞から溶解性媒介物を放出す
ることにより媒介され得る。

本発明の化合物は、０，００１μＱ乃至１００μｇ範囲
の投与量で、人間のリンパ球に対してインビトロで直接
的にテストされた場合にリンパ球の有糸分裂に於いて十
分な効果を奏する。ｏ、ｏｏｉ〜１μＱの少ない投与量
では、ＰＨＡ又はＣｏｎ−Ａによって媒介された有糸分
裂をコントロールレベル以上に刺激する。１０〜１００
μｇの多い投与量では、有糸分裂を導＜ＰＨＡ及び（：
、ｏｎ−Ａで処理されるリンパ球の有糸分裂の活性度が
十分に抑制される。

４〜１２日間の本化合物の種々の投与量の腹膜を通した
（ｉ、ｐ、）投与とＰ）（Ａ及びＣｏｎ−Ａによる牌臓
リンパ球の主要なテストとを伴う０５７ＢＬ／６マウス
のインビボ処理が、５０〜２００ｍｏ　／ｋ（ｌに対す
る４００及び８００ｍｇ／　ｋａの本化合物の投与量に
於けるインごトロ状態のシステムのそれと類似パターン
を示す。高投与量での抑制作用又は低投与量での刺激作
用を観察すれば、ｐ＜０．０５で、統計学的に有意義な
差異が示される。ウシ科動物の血清アルブミンやキーホ
ール科の笠貝のヘモシアニンの特殊な抗原に反応する抗
体に対する本化合物の効果をテストする為、他の実験が
なされている。本化合物の高投与量は抗原に対する第２
免疫反応を禁止しないでその代りこの反応を有効に強め
るということが分る。インビボ及びインビトロでの細胞
に媒介されるミトゲンに対する反応を定型的に抑制する
その様な投与量は、体液の免疫性を有効に抑１１Ｊ　Ｌ
ない。これらのデータは免疫刺激作用を介する特殊な抗
体の生産の規制化が可能であることを示している。

以下に説明する実験に於いては、本化合物の高又は低投
与鰻下で観察された傾向が上聞の一般的パターンに従う
。しかしながら、リンパ球を刺激するＣ０ｎ−ＡとＰＨ
Ａの対の本化合物に対する実際の反応に於いては差異が
認められる。これはＣｏｎ−ＡとＰＨＡが同一種類のリ
ンパ球を刺激しないという事実に起因するのかも知れな
い。種々のストレインのマウスの反応に於いても差異が
見出される。これらはリンパ球のミトゲンに対する反応
に関する遺伝学的多様性をもたらし得る。インビボとイ
ンビトロの対をなす反応で観察される差異は、インビボ
とインビトロの新陳代謝に於ける差異及び人間とネズミ
科動物のリンパ球間の違いが原因であるとすることがで
きる。

これら全ての実験に於いては、ミトゲンや特殊な抗原に
よって刺激されず、それ故体止している細胞と考えられ
得るコントロール培養菌は、本化合物によって影響され
ないということに注意すべきである。めざましい刺激的
又は禁止的効果は、活発なりＮＡ合成を伴う細胞、即ち
細胞分裂を受ける細胞でのみ示される。

テストは、又、腫瘍が休止状態にあるＤＢＡ／２マウス
から得られる敏感なリンパ球の細胞に有毒なリンパ球活
動に対する本化合物の免疫調整効果を決定する為にもな
された。実験モデルは、ＤＢＡ／２マウスに於ける休止
状態の確立と、腫瘍の休止状態に対する本発明で開示さ
れている化合物の効果を評価する為の研究の遂行を含ノ
υでいた。

上述の動物モデルは、人間の再発する胸部腫瘍及び初期
腫瘍のうわべの）ｈ療から多年が経過した黒色腫の臨床
観察によって提示される疑似腫瘍休止状態を真似ている
。

Ａ、リンパ球の刺激作用の評価観察記録（プロトコール
） この評価の目的は、７２時間以内の刺激で有基分裂を誘
発する濃度の１又はそれ以上のポリクロナル（ｐｏｌｙ
ｃｌｏｎａｌ　）ミトゲンを有する極微有機体培養に於
けるリンパ球に挑戦することである。

マウスのモデルに於いては、異なるストレインのマウス
から牌臓が除去され、その牌臓細胞を細片化し１通常は
ｌＸ１０’　ＩＩＩρの濃度のＲＰＭＩ−１６４０組織
培養媒体中につるしておく。これらの細胞は、９６ウエ
ル（源）の平坦底と９６ウエルの組織培養板の有機体培
養ウェル当り５．０×１０５細胞の濃度となる様に分配
される。本発明の化合物又はミトゲンに対する全てのテ
ストは、１０回の反復実験で行なわれる。それから、細
胞はＰＨＡ、Ｃｏｎ−Ａ、特定抗原又は緩衝剤だけで処
理される。もしインビトロでテストをするならば、濃度
が可変な本発明の化合物又は緩衝剤のみをＳａに加える
方が良い。ミトゲン　及び／又は　本発明の化合物に対
する処理の後、細胞は７２時間培養される。これらの細
胞のミトゲン　及び／又は本発明の化合物に対する反応
は１４Ｇ−チミジンを用い０．０１μＣ１／ウエルの濃
度で４日日にラベルで分類して評価される。分類された
細胞はリンパ球収穫剤を用いて収穫され繊維質の紙板上
に載置される。シンチレーションカクテルがその板を含
む水薬ビン（バイアル）に加えられ、そしてＬＫＢ−液
シンチレーシフンカウンター（１２１６／ラツクベータ
ＩＩ型）を使用して結果が得られる。

データは、コントロール（非ミ１−ゲン）処理された部
類に対するミトゲンに刺激された部類のｃｐｉの割合で
あるリンパ球刺激作用指標（ＬＳ　Ｉ　＞として表現さ
れる。

リンパ球の刺激作用評価は、本発明の化合物で処理され
ない種々のストレインのマウスから得られる牌臓細胞か
又は人間の血漿から得られるリンパ球に対して直接施し
得る。この様な実験では、本発明の化合物はインビトロ
でのＮｉＩリンパ球に対して直接加えられ、そしてその
評価が完了し解釈される。もう一方は、マウスを腹膜を
通して多量に投与するスケジュールにより本発明の化合
物でインビボ処理し、続いてそれらを犠牲にして牌臓リ
ンパ球を採取する。それから、これらの細胞は、マウス
を免疫化するのに使用される特定の抗原や又はポリクロ
ナル（ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ　）ミトゲンに対する反応
性についてテストされる。しかしながら、このシステム
に於いては、何の付加的化合物もインごトロのリンパ球
の刺激作用の評価方法に対し加えられない。

Ｂ、第２反応の研究 本発明の化合物の特定の抗原に対する免疫反応での効果
は、ウシ科動物の血清アルブミン（ＢＳＡ）又はキーホ
ールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）の様な特定の抗
原を備えたマウスの免疫作用を含んでいる。免疫作用に
ついては、以下に示す種々の方法によってこれら抗原に
対する細胞媒介又は体液（抗体）の免疫反応を評価する
ことが可能である。

１）リンパ球刺激作用の評価は、上述したリンパ球刺激
作用の極微有機培養システムに於けるミトゲンとしての
特定の抗原の濃度を変えることを利用して実施され得る
。唯一の相違点は打化周期がポリクロナル（ｐｏｌｙｃ
ｌｏｎａｌ　）ミトゲンに関しては３日であったが５日
に延長されるという点である。

２）ＢＳＡ又はＫＬＨの様な溶解性抗原に対する抗体反
応はマイクロ−ＥＬＩＳＡ固相不均質免疫性評価を利用
して定量することができる。その評価は、特定のクラス
の免疫性グロブリン（例えばＩｏＧ又はＩｏＭ）を定量
する様に計画することができる。

ＢＳＡに対づる体液（抗体）反応の結果は、９６ウエル
・イミュロン・マイクロタイタープレートに於ける固相
不均質サンドウィッチＥＬＩＳＡ測徴法を使用して得ら
れる。規定濃度のカットオフはＭ［−６００ダイナチツ
ク（［）　ｙｎａｔｅｃｈ　）　？イクローＥ　ｌ−Ｉ
　Ｓ　Ａリーダーで読んで０．Ｄ、＜０．１を得るマウ
スの血清の最高希釈点であった。

Ｃ９細胞毒性リンパ球活動の測定方法 細胞毒性リンパ球活動を決定するのに使用される混合リ
ンパ球腫瘍培養（ＭＬＴＣ）免疫性評価では、腫瘍休止
状態（ＴＤＳ）の種々のステージに於けるＤＢＡ／２腫
瘍休止状態動物か又は免疫化（敏感化）されたマウスの
何れか一方からリンパ球を採取する。その評価には、５
１コロミウムにラベル分けされた１　５１７８Ｙターゲ
ツト細胞及び上述したソースから得られるエフェクタ細
胞（敏感化されたリンパ球）を採用する。エフェクタ対
ターゲットの細胞割合は実験条件の違いに応じて変わる
であろうし、照射を受けた刺激剤Ｌ５１７８Ｙ細胞を用
いても用いなくても良い。結果は、（最大）のｃｐｍに
対するテストグループのｃｐｍの割合のり−シス％で表
わされる。その評価は８又は１８時間の放出による評価
として実施することができる。

腫瘍の休止状態（ＴＤＳ＞を誘う為に、大グループのＤ
ＢＡ／２マウスに、中腹の皮下に１×１０６の生存した
ｌ　５１７８Ｙ白血病細胞を皮下注射する。１０日後、
約１０Ｉｎの大きさの小さな腫瘍が合わさったものが、
外科的に切除される。もしその切除が成功すれば、どの
皮下腫瘍も移植性転移状態に発達しない。切除後７日で
、マウスは５０．０００個の生きたＬ　５１７８Ｙ白血
病細胞に挑まれるが、それは１４日以内に正常なりＢＡ
／２マウスの１００％を腹水腫瘍が原因で死亡させるの
につながる投与量である。免疫を有するマウスはＬ　５
１７８Ｙ投与試験による急激な自発成長に抵抗し、臨床
的に何週間も正常なままであった。これらのマウスは腫
瘍休止状態にあると考えられる。

Ｄ、抗癌研究一方法 ＢＤＦ＋ストレインのマウスに、０日の１０６１−１２
１０白血病細胞のｉ、ｐ、接種が施される。２４時間後
、７グループのマウスに対して夫々本発明の化合物の種
々の投与量の９日摂生処置が開始される。実験はナショ
ナル・キャンサー・インスティチュートの抗癌剤審査の
為のプロトコールで示されているガイドラインに沿って
継続され、Ｔ／Ｃ比（処理されたグループの生存時間の
メジアンか又は平均値のコントロールの生存時間のメジ
アン又は平均値に対する比）が計碑される。ＴＺＣ値の
１．２５　（１２５％）以上が意味のある抗癌能と考え
られる。

例　１ ９３０の２−メチル−２，５−ジメトキシ−ジヒドロフ
ラン（Ｎ　、　Ｃ１ａｕｓｏｎ　Ｋ　ａａｓ及びＦ。

Ｌｉｎｄｂｏｒｏ　（１９４７）　Ａｃｔａ　Ｃｈｅｔ
ａ、５ｃａｎｄ、　１　：６１９、　）を、激しく機械
的に攪拌しながら室温下で７５０１の水に７５ｏのＬ−
アスコルビン酸を溶かした溶液に加えた。フランは５０
％余分に使用された。溶液は１５〜２０分以内で均一と
なった。

この反応は紫外線検出器（ＵＶディテクター）を備えた
高圧液呈色試験によりモニターされた。２０％メタノー
ル水溶液に於ける２５４％ｍでのＬ−アスコルビン酸の
Ｒｆｌ、６の最初のピークが消える一方で、新しいピー
クが６４気圧下でＲｆ、５．９〜６．０に現われた。そ
の溶液がし一アスコルビン酸の総消失量を指示するヨー
ドをこれ以上消費しないことが同時に観察された。

２０℃で一晩待った後、水溶液を凍結乾燥すると青黄色
の泡が発生した。後者は十分に明らかなＢ 赤外線（ＩＲ）の、ＣＮＭＲ及び　ＨＮＭＲスペクトル
を示した。

次に、６４．Ｏｏ　（０，２５Ｍ　）の粗生成物（融点
５５℃）及び２５．０ｇ　（０，２５Ｍ　）の琥珀酸無
水物を還流コンデンサと窒素流入管を備えた１ｊ２の丸
底フラスコ中にいれた。２００Ｉ１１ｇのＨＰＬＣ１級
の酢酸エチル塩を加えた後、その反応混合物を４時間還
流した。均一な溶液を室温まで冷却した後氷水浴中に置
いた。白い沈澱物が形成されそれを吸引濾過し、そして
冷たい数ｗｌβの酢酸エチル塩で洗浄して２９．９ａの
粗生成物を得たく収率４６．６％）。

濾液を半分の体積に濃縮し氷水浴中で冷やした。

２番目の生成物の沈澱物を再び濾過し幾らかの未反応琥
珀酸無水物を含む１３．５（］の固体を得た。

生成物を溶剤混合物（酢酸エチル塩／クロロホルム：２
０／８０）で再晶出し、２２．５（］　（収率３５．２
％）の純粋生成物（白い艮釦状−融点１３４〜１３４．
５℃）を得た。

分　析　：　ＣＯＧ　）（ＩＪ　ＯＩＱ　’口内シーｑ
　ａ　ｉ＜間ｆ−イト　Ｃ２左Ｏ，’ｉ’？　；　日、
４．６１ｉｏ、＜佳、４１゜ ％　シー）イＡ　：　Ｃ，ｓｏ、　６’ｔ　；　１−１
＜、Ｓｚ；０、４４．５）？。

添付図面のＸＩｍ結晶構造図で、本化合物の構造が確認
でき、２−フリルブチロラクトン：琥珀酸無水物が２：
１で単位セルに於いて分子錯体で存在することが示され
た。

囚−じし １８６Ｑの２−メチル−２，５−ジメトキシージヒドｏ
７ラン（Ｎ　、（：、　１ａｕｓｏｎ　−Ｋ　ａｓｓ及
びｌ”、ｌｌ−１ｎｄｂｏｒ　（１９４７）　Ａｃｔａ
　Ｃｈｅｍ、５ｃａｎｄ、　１　：　６１９、）を、室
温で１．５Ｌの水に１５０ｇのＬ−アスコルビン酸を溶
かした水溶液に激しく攪拌しながら加えた。フランは５
０％余分に使用された。溶液は１５〜２０分以内に均一
となった。反応は紫外線検出器を備えた高圧液呈色試験
によりモニターされた。２０％メタノール水溶液に於け
る２５４ｎｎ＋でのＬ−アスコルビン酸のＲｆ　１．６
の最初のビークが消失する一方で、新しいピークが６４
気圧下でＲｆ５．９〜６．０に現われた。その溶液がし
一アスコルビン酸の総消失量を指示するヨードをこれ以
上消費しないことが同時に観察された。

２０℃で一晩装置した後、水溶液を凍結乾燥すると青黄
色の泡が発生した。後者は十分に明らかな赤外線（ＴＲ
）の　ＣＮＭＲ及び　ＨＮＭＲスペクトルを示した。

次に、１１９．５（１（０゜４ロアモルー　１００％の
純度と仮定して）の粗生成物（融点５５℃）を２１６　
ｇｌβの１−（ＰＬＣ級酢酸エチル塩に溶かした。、２
３．３（＋のサクシンイミド（０，２３５モル）を加え
その混合物を窒素の正圧下で攪拌した。２．３分の攪拌
後、白い固体が沈澱した。それから反応混合物をその固
体が再溶解するまで油浴で熱した。加熱を停止し溶液を
攪拌しながら室温まで冷やし、それから２時間氷水浴中
で冷やした。沈澱物が形成され、これを吸引濾過し、１
５０ｉＩｌの冷たいクロロホルムで洗浄し吸引乾燥して
６７．４０の粗生成物（収率５６．３％）が得られた。

この生成物を混合溶剤（酢酸エチル塩／クロロホルム：
６０／４０）で再晶出し、純生成物（白い長針状−融点
１３２〜１３３℃）を総収苗で５２．２（１（収率４３
．６％）得た。

分析：　Ｃｍｔ（’Ｌ’ｔ　ｔＪＯ＋ｂ　１ｓ−７１１
ｔ）ｊ４１＆　’　ａ、　５１−　ｏ７１　Ｈ，４，７
Ｆ？　；ｏ、４−＋、ｉｃ；　ＮＴ　ス、２９゜Ｘ線結
晶構造図で本化合物の構造が確認でき、単一セルで２−
フリルブチロラクトン：サクシンイミドを２＝１で有す
る分子錯体が存在することが示された。

目 例　３ ９３ｏの２−メチル−２，５−ラメ１〜キシージヒドロ
フラン（Ｎ　、ＣＩａｕｓｏｎ　Ｋ　ａａｓ及びＦ。

Ｌｉｎｄｂｏｒｇ（１９４７）　Ａｃｔａ　ＣｈｅＩｉ
ｌ、５ｃａｎｄ、　１　：６１９、　）を、激しく機械
的に攪拌しながら至温下で７５０１ρの水に７５ｇのＬ
−アスコルビン酸を溶かした溶液に加えた。フランは５
０％余分に使用された。溶液は１５〜２０分以内均一と
なった。

この反応は紫外線検出器（ＵＶディテクター）を備えた
高圧液呈色試験によりモニターされた。２０％メタノー
ル水溶液に於ける２５４ｎｍでのし一アスコルビン酸の
Ｒｆｌ、６の最初のピークが消える一方で、新しいピー
クが６４気圧下でＲｆ、５．９〜６．０に現われた。そ
の溶液がＬ−アスコルビン酸の総消失量を指示するヨー
ドをこれ以上消費しないことが同時に観察された。

２０℃で一晩放置した後、水溶液を凍結乾燥すると青黄
色の泡が発生した。後者は十分に明らか）３１ な赤外線（ＩＲ）の　ＣＮＭＲ及び　ＨＮＭＲスペクト
ルを示した。

次に、１０．２４（＋　（０，０４Ｍ　）の粗生成物（
融点５５℃）及び２．５（＋　（０，０２２Ｍ）のＮ−
メチルサクシンイミドを還流コンデンサと窒素流入管を
備えた１ρ丸底フラスコにいれた。２０ＩｌρのＨＰＬ
Ｃ級酢酸エチル塩を加えた後、その反応混合物を４時間
還流した。均一な溶液を室温まで冷却してから氷水浴中
に置いた。白い沈澱物が形成されそれを吸引濾過しそし
て冷たい数ＩＩ、１２の酢酸エチル塩で洗浄して５．２
０Ｑの粗生成物（収率５０．８％）を得た。濾液を半分
の体積に濃縮し氷水浴中で冷やした。

その生成物を混合溶剤（酢酸エチル塩／クロロホルム＋
１／１）で再晶出し総収量３，２１９　（収率３１．３
％）の純生成物（白い長針状−融点１０５〜１０６．５
℃）を得た。

図面のＸ１！結晶構造図で本化合物の構造がＮ訂でき、
１単位セルで２−フリルブチロラクトン二Ｎ−メチルサ
クシンイミドを２：１で有する分子錯体が存在すること
が示された。

例　４ 例１の化合物は２．３８ｍ１ｙｌの重炭酸塩の緩衝塩類
（０，８５％）中に完全に溶け、 ５８− 匠−」と 例２の化学物は２〜３８１１１Ｍの硝炭酸鳩の縁部塩類
（０，８９％）甲に元金に溶け、とサクシンイミドを形
成する。

例　６ 例３の化合物は２，３８１１１Ｍの重炭酸塩の縁衝塩類
（０，８５％）中に完全に溶け、 医−二し ＣＩ）ｄ、１に関する０５７ＢＬ／６マウスへの単一投
与量Ｌ　Ｄ　５０は、１９７９年の’　Ｂ　ａｓｉｃ　
Ｅ　ｘｅｒｃｉｓｅ　ｉｎ　Ｊ　ＩＩ１ｍｕｎｏｃｈｅ
ｍ＋５ｔｒｙ’中に記載されているＳ　ｐｅａｒｍａｎ
とＫａｒｂｅｒとの方法に従って決定される。簡単に言
えば、１０匹のマウスの各々に０．５　ｍβずつ投与さ
れる。３日後に生存数を数え、ＬＤ５ｏを次式を用いて
計算する。

ＬＯＯＬＤｓｏ＝ＡＯＯ（最高試験投与り＋（Ｊ２００
Ｄ）（１／２−（ΣＲ）／Ｎ）ここでＤは投与量間のフ
ォールド差 Ｒは死亡総数 Ｎは試験動物総数 である。

表　１ ２”Ｔ　ｌ　ｎｎｇ　／　ｌｑ）　”Ｚ’７　’Ｘ（ｌ
ｂ、ｏｏｏｍｌ／ｋｌ）　１０１３６叫／円）７つ７．
　（＊、Ｏｏ□ツん１）１０６＆Ｗ１１／ｌｖ？３７ウ
ス（４、ｏｏｏ　ｍｌ／ｌｌ）　（７３４ｍｙ／Ｉｎ）
　７つ７．　（ｘ、ｏｏｏｍ３ＪＩｃ３＞　Ｏ口重／１
１１シ又（（、ｏｏｏｇんｙ）　ＯＣ鱒、１Ｌｌ）、。

・せ９．２鴫ハワネマウム；３．４詑１／に２精製され
たＣｐｄ、１をＣ５７ＢＬ／６マウスにシングル１．ｐ
、注射してテストし、３（１／ｋｇ過度な状態でＬ　Ｄ
　５Ｑを得る。

例　８ Ｃｐｄ、１に関する’Ｃｈａｒｌｅｓ　Ｒｉｖｅｒ　Ｕ
、　Ｋ。

ｌｔｄ、”から得られたＣＤ−１マウス及びＣＤラット
に対するシングル経口投与Ｉ　Ｌ　Ｄ　ｓｏが決定され
る。簡単に言えば、不化合物をＰＨ６，’８で０．８５
％の食塩を含む０．０２３８　Ｍの重炭酸塩の緩衝ｌニ
！Ｍ／ｋ（ＩＴ−溶かし、ｉｏｍ＊／′ｈｏの一定投与
体積で経口投与する。１４日後、動物は犠牲となり毒性
の全体的な証拠をチェックする為、検死が実施される。

この研究山何の毒性の徴候も死も観察されなければ、そ
れはＣｐｄ、１に関する５（１／ｋｑだけ過度なシング
ル経口投与Ｉ　Ｌ　Ｄ　ｓｏを指示している。

例　９ Ｃ５７ＢＬ／６及びＢＤＦ＋の２ストレインのマウスが
、７日間に亘って、Ｃｏｄ、１の２５，５Ｑ、１００．
　２００若しくは４００ｍ（］　／ｋｇ又は緩衝剤だけ
の何れか一方の１．ｐ、投薬で処理される。この結果は
リンパ球刺激作用評価により８日目にわかる。

表　２−Ａ ２２□斗でイ〉°≦１１（申１！銖で←！翳−蝉？監雫
（−ゝｂｏｈ、６／に含　ｌＩ７．’ｌ　４ｏ、ｏ　＋
、３表　２−８ ｉ２２≧！ト°軍キｊｔすｑ都（イリ千１１声ＩＣｐｔ
、　Ｉ　Ｓｆｌ　＠−Ｐ±セ＼　５へシｌｘ　）＞ト１
１−１し舛＋ｏｏｇ／ｒ＞　＋１０．（１１ｏ、’１２
００−ＩＭ　Ｔ、ｇ　２９　。８ ｔｏｏｒｙ、ＩＡ３　４９！；、＋７　胃、９　０７’
ＳＯｇ／Ｖ−３　！５２−１　ス１ら　０９２ぢ叫／に
ｇ　＋３．ｓ　＋、已　鑓 ０−ｇ／ｇｌ　５．５　１．６ 叢？１−（宕○い橿衡」１ ４００１１Ｇ　／ｋ（］の高投与量は、ＢＤＦ＋マウス
と同様な０５７ＢＬ／６マウスでのＰＨＡ反応に対する
強い抑制作用と、ＢＤＦ＋マウスでのＣｏｎ−Ａ反応に
対する弱い抑制作用及び２００ＩＤｏ　／ｋｇ投与時と
比較してのＣ５７ＢＬ／６ｖウスでのＣ０ｎ−Ａ反応に
対する抑制作用を示している。しかし、■−リンパ球増
殖の刺激作用は、ＢＤＦ＋マウスの５０ｕ／　ｋΩと１
００ｍ０　／ｋｇ投与時及びＣ５７８Ｌ／６マウスの２
００ｍｏ　／にΩ投与時のＰ）−ＩＡについて明らかに
示されている。ＢＤＦストレインでのＣｏｎ−Ａ反応は
Ｃｐｄ、１の５０及びｉｏｏｍｇ／ｋ（］間の投与量で
有意に増加し、Ｃ５７ＢＬ／６ストレインでのそれは５
０．　１００及び２００ｍ！＋　／ｋ（］の投与ｍで増
加している。

例　１０ Ｃｐｄ、１の５０　、１００，２００，４００．若しく
はａｏｏｍ。

／にΩ、アスコルビン酸（ＡＡ）の５０，１００，２０
０，４００若しくは８００ｍ（］　／ｋ（Ｊ又は緩衝剤
だけの何れかのｉ。

ｐ、投薬によって４日間処理されたＣ５７ＢＬ／６マウ
スのリンパ球反応を比較する。この結果はリンパ球刺激
作用評価によって５日目にわかる。

表　３−Ａ ８ｏｏ、、＞ｆｉ３　１２．　ｌ　２”５、’ｌ　、ｔ
；。

４００ｍ５１ｙ！１１４３１ｑ、　Ｂ　１−３２００す
／硲　１０．０　２１．＋　１・３１００−３／ｋｌ　
ｌｒ？、　ｌ　ｌ’１．Ｑ　１．　Ｓ＆Ｃ）ＯｙＶ１１
／唱　、４ｏ宕　、Ｇ１２　、Ｂ１４ｏ　Ｏｌ−１／緋
　Ａ、Ｆ！、　４ｏ、ｏ　＋、。

ｚｏｏｖｈｔｌ／ｙ４　４２ＪＦ：　６’？、４　１　
、ら１ｏｏ□）／ド３　３４８　きｏ、ｏ　１．６Ｔ５
Ｑｌ？ｌＮ／に３　＊　Ｅ２．ｆ！：　＋λＯ−）／唱
　’Ｅ３Ｂ、０　Ｂ２．６　−一一＋ｅ匍覧喀し 統計的に有意に測定可能なＡＡの効果はＰＨＡでは何等
呈示されなかったが、増殖の単一刺激作用が、Ｃｏｎ−
Ａで刺激されたグループにおいて５０　ｍｇ／　ｋΩの
投与量で起こった。

ＰＨＡで処理された牌臓細胞では１、Ｃｐｄ、１の１０
０及び２００Ｉｎ（１／ｋｏの投与量が、リンパ球のＤ
ＮＡ合成を刺激する傾向がある。４００乃至８００１Ｄ
Ｃ１／ｋｌＪの範囲の投与量は牌臓リンパ球のＤＮＡ合
成を抑制する。Ｃｏｎ−Ａで処理された牌臓細胞では、
５０乃至２００ｍ（］　／ｋＱの範囲の投与量は有意な
刺激効果を有し、４００乃至８００ｒＡｇ／ｋａの範囲
の投与量は有意な反増殖的効果を有し、特に８００１（
１／ｋＱ投与量では顕著である。これらのデータは低度
から中央濃度に於けるＣｐｄ、１の免疫刺激効果及びよ
り高濃度に於けるＣｐｄ、１の免疫抑制効果を呈示して
いる。又、アスコルビン酸自体がＣｐｄ、１と類似の効
果を発揮できる可能性はこれらの実験により立証されて
いない。

例　１１ Ｃ５７ＢＬ／６及びＢＡＬＢ／Ｃの２ストレインのマウ
スが５０　、１００，２００．若しくは４００ｍ！Ｊ　
／ｋｇのＣｐｄ、１又は緩衝剤のみの何れかのｉ、ｐ、
投薬で４日間処理される。この結果は、リンパ球刺激作
用評価によって５８目に出る。

表　１−Ａ 今００ｍｇ／ＫＪ　＋４−、’ｉｋ　’ＥＳＯ，’ｌ　
、　６１ｚｏｏｒ、＞／に３　ｚ’ｓ、ｘ　４１　Ｓ　
、　’（３Ｉ　ｏｏ　ｍ＞匈１”？、ｏ　ス２３　１．
Ｂジｅｌ−）Ａｇｌ″Ｓら　シ０６　欧 ○、＝＞／に３　ワε５１１．八　−一−〆〆／ 一一−／〜 １　−−−−−、（ 一〜−−−く　・１ −−−−　リ、−１ 表　４−Ｂ ＢＡＬＢ／Ｃ；ｌ　）−レイ＞ｔｒ　２ウスｌ＝　フ」
１Ｂ　’ｌ　＞／ｖ　’ｌｒｌ会’ｌ；＠。

イ十称ａＳにＥ−ｒ　７累１免ｚ＋ｅイ〉ピ′ホｊ’２
−ｆｉ　ＣＰ＝Ｌ、’３−ｒ　ｆｌＬＡ、ｏｏ呵／に＞
　６．’７１　１＆、’ｔ　、’ｌ。

２０Ｑ　ｗ＞／Ｋ＞　ｆ？　ビ　２０．５　．７ら１ｏ
ｏｍＢ／鴫　５．２４　２１汚　１．０ダＱ叫／にさ　
６，４４　２ｏ、ｇ　１．４０う／にさ　１．ワ６　’
１．Ｑ’（−−−ＰＨＡ及びＣ０ｎ−Ａで処理された牌
臓では、５ｏ、ｉｏｏ及び２００ｍｇ　／　ｋｇの投与
量が双方のストレインのマウスに於いてリンパ球のＤＮ
Ａ合成を刺激する傾向がある。４００１１１（１／ｋ（
］の投与量は、２００ｍΩ／ｋｇの投与量時の活動に比
べると、牌臓細胞リンパ球のＤＮＡ合成を抑制している
。

６７− 匠−」二と インビトロのリンパ球刺激作用評価は、０．００１、　
０．０１．　０．１．　１．０若しくは１０μＱテスト
ウエル（５Ｘ１０５１１１１胞／ウエル）のｃｐ６．１
１１度又は緩衝剤のみを使用し、正常な５匹のＣ５７Ｂ
Ｌ／６マウスから除去された正常な稗臓リンパ球に対し
て直接実施される。その後引続き３日間１化させて評価
が完了する。

表　５−Ａ ＋ｏ、ｕ３／つｚル　、Ｑ”　２．１５　＋、Ｃｉ１矛
１／ウェ１１／　５３．８　１ワ言　２．ら・１ノ幡／
ウエル　８ジ、１　１’ｑ＆　３．２、Ｏしμ）／ウニ
ｌし　督マ、Ｅ　１ｑ３　Ｂ、２．００１刀／ウエｌ／
　秒０，４　１ぜ　３，８ρノリ、／−７エル　ス１　
ヘ　−スら　−一−６８− この結果は、ｏ、ｏｏｉ乃至１．０μＱ／ウエルの投与
量範囲に亘る有意な有形分裂刺激作用と、１０μｇ／ウ
ェルの投与量に於けるＰＨＡ及びＣｏｎ−Ａの双方のミ
トゲンに対する有意な抑制作用を示している。インビト
ロでの有効濃度範囲は薬の代謝作用に対する装体新陳代
謝の影響を排除した結果かも知れない。

１−１工 ５人のボランティアから単離されたリンパ球を、ＰＨＡ
やＣ０ｎ−Ａ及び０．１．１，１０．５０・若しくは１
００μｇ／ウェルのＣｐｄ、１．０．１゜１．１０．５
０若しくはｉｏｏμｇ／ウェルのＡＡ又は緩衝剤の何れ
かによりインビトロで処理する。

、／ 、／＝’　−一一− 表　６−Ａ 人間？−小イー＋：／トロ１１ユノ（孫子１胤イヤＭｔ
）飢１ｚ脅↑ηへＡ−交乃橡土状慢１Ｖ（す声曵 Ａ酊ＩＪＬ　”　Ａ　烏工人 １ｏｏ、ｇ３／ウニＩし　′Ｂ斗、２５　２に、　ｌ＆
’５Ｏ）ｔ＃／ウェｌし　３ぢ’１３　２３．３１１０
ノ１１ウエｔｖ　３５．ＩＯ式３５％式％ ０．１，７を夛／ウニｌし　３汚、ス’ｊ　２４３ゴＱ
スか／ウェＩＩ／’Ｓｌ　、ス５　ステ、会６表　６−
Ｂ 人Ｉ′ｌ！Ｉ？咄イ〉巳゛トロリｚｌ＼°工虻中１３数
イを用耕乍な対イＢＣＰ江１＾うη表＋ｏｏ、ｕｅｙ／
つｚｌし　Ｏ，Ｅ４４　０，４４ち。／ｌＬｌ／つ、ル
　０．４０　１　、３３、ｏ、ｕ＞／ｖ７エ、し　Ｍ３
’ｌ　２Ｂ、汐２１、。オ）／つ、工、し　Ａ５！；、
　ｂｏ　’、２　ら３ｏ、ｌ、ｂｚ／つ１１し　虻６．
らｒ１’ＲＦｓ、ｏらＯ，Ｑ／’ｙｘ　／Ｌ−”Ａ、宕
１　２６．ｂＺＡＡだけに示される有意な増殖又は反増
殖効果はない。然るにＣｐｄ、　１に関しては、１００
及び５０μｇ／ＩＩｌβの投与量に於ける高投与反増殖
効果が、極めて低い１及び０．１μＱ／ｒｎｌβの投与
量に於いて顕著に増加するリンパ球応答によって分るる
。ＰＨＡ及びＣｏｎ−Ａの双方のミｉ−ゲンに対して同
一の概容結果が呈示されている。

例　１４ Ｃ５７ＢＬ／６ｖウスが、５０　、　１００．　２００
若しくは４００ｍ（］／　ｋｇのＣｐｄ、　１又は緩衝
剤のみの何れかの４回の日毎１．ｐ、投与で処理された
。５日月にリンパ球刺ｙＩ！作用評価が実施された。

表　７ ４ｏｏＩＩＩＢ／１４　Ｉ’＃ｆ？　＝ｚＡ、４　、Ｒ
＋：ｚｏｏＩＩＩ＞／Ｖ−ｇ　２１２　２６．Ｂ　、：
２２１０畑）／緋　：ｚ”ｓ、９　２Ｓ、４　．４０ｔ
ｏｌｌ−ＩＳ／ｋｙ　＋ｒ？、ｏ　２：１０　１．１ｎ
ｍｙ／に３　＋４．’ｌ　Ｋ’ｌ　−−−ＰＨＡ及びＣ
ｏｎ−Ａの双方のテストミトゲンについて１００〜２０
０　ｍ＋＋／ｋ（］の投与量間で得られる最大反応を伴
う５０〜４００　＋＋＋ｇ／ｋＯのＣｐｄ、１の投与量
に於けるポリクロナル（＋）ＯＩＶＣＩＯｎａｌ＞ミト
ゲンに対する反応刺激作用が観察された。４００Ｉｌｌ
（１／　ｋ（１の投与量に於いてＰＨＡに対する反応が
２００１１（１／ｋＯの投与量に於ける反応と比べ減少
したということもわかる。これは高投与量に於ける免疫
抑制的傾向につながるように思われる。

九−１５ Ｃ５７ＢＬ／６マウスに対するＣｐｄ、　１のインビボ
免疫調整効果が研究された。

０５７ＢＬ／６ストレインのマウスが、１００゜２００
、　４００若しくは６００Ｂ／　ｋ（ｌのｃｐＬ　１又
は緩衝剤のみの何れかのｉ、ｐ、投薬によりテストされ
た。

この結果は、牌臓を除去しその中のリンパ球のＰＨＡ及
びＣｏｎ　−Ａのミトゲンで処理すれば出る。

４□っ一二−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−
−尤−−−−−−−−−−−−−表　８ ±パ葉來鬼作ｌｌＩ尭磯 ぷｉル４」溝Ｊ１　ＰＨＡ　Ｃｏｈ−Ａ　′：１″−ト
Ｄ−／しらｏｏｍ？ｒＡｔｙ　ｌワ　ら　スら、５　１
．’１４ｏｏｙｓ＞／に：％　４４’ｌ　４２．４　、
＋’１：２００Ｗｌ＞ｈ％　４Ｆｋ、２　”Ｓもら　、
ら２ＸｏｏｍＬ＃Ａ７　Ｔ５＋　、　＋　４３．’＋　
冴○０７牙Ａ？　１″５，１　スら、Ｔ　−一−Ｃｐｄ
、　１の１００乃至４００ｍ（］／　ｋ（＋の範囲の投
与量は、リンパ球処理されたＣ０ｎ−Ａ及びＰＨＡに対
する有意な刺激作用の原因となる。６００ｆｆｌ＋１／
　ｋＱの高投与量は１００乃至４００ｍ１１１／　ｋｇ
投与量の場合より少ない刺激作用をもたらし、コントロ
ールと同程度の作用を及ぼした。６００ＩＩｌａ／　ｋ
Ｑの投与量で５日間のＣｐｄ、　１の投薬が成された動
物に於いて何の毒性の証拠もなかった。

−ＬＬ インビトロのリンパ球刺激作用評価は、１富なＣ５７Ｂ
Ｌ、／６マウスからの胛臓リンパ球を使用して実施され
た。リンパ球は、１，５．ｉｏ。

５０若しくは　ｉｏｏμＱ／ウェルのＣｔｌｄ、’ｌ又
（ｊ緩衝剤の何れかで処理された。

表　９ 」Ｍ乍」１東イ旨廃パ、− １００、＋５　／　ｂｔ　ｔｔｙ　、　ｙｌｚ　、　ｊ
ｏｇ　、　２０、！；０／４Ｊ／　１仇ル　バ１　３Δ
ｉ　２０１０７す／うグｌし　１２６　１’１４　’に
乙り）　／　？７ｓｒし　Ｉｒ’７　１λ　１・２１戸
、、／　ウ喋ＩＬ／　’ｊＯ，４Ｊｉ３　１．２０７−
＋３　／　ｖｐｘｔＬ／Ｘり、ｒ　１２；ｊ５及び１０
μＱ／ウエルの投与量はＰ　ＨＡ及びＣｏｎ−Ａに対す
る反応の有意な増加を引き起こし、一方、５０及び１０
０μＱ／ウエルの投与量はミトゲンに対するリンパ球の
反応の減少を引き起こした。

例　１７ 例２における化合物、即ちＣｐｄ、　２がＣ５７ＢＬ／
６マウスを用いてインビボでテストされ、引続いて４日
間１．ρ、ルートによりＣｐｄ、３か又は緩衝剤のみで
それらを処理した。５日目に、リンパ球刺激作用評価を
実施した。

表　１０ 一−プ＝Ｐ１ヨＩＫヨ碑（ｔ　−−Ｐ±ｔ８　Ｃｏｒ−
Ａ　３Ａ−、、、ｏ−Ｈ−／ｖ−６ｏｏｍ２　／　ｖｘ
ｔｖ　Ｉｒ、ｉ　’ｆ１４０Ｈ、ｇ４０ｏ四／Ｖ＞工ｌ
し　１２．　’ｌ　ｌｏ　’ｌ　Ｉ・３２°ａｍ５　／
　Ｙ’ｈｌＬ／　Ｉ　１．３’ｆ’ｌ、３ドア（００ｍ
３　／→工Ｉし　１ダ、４　ＩＯ！；　ｌ、５ダ０□３
／→−１ｒＶ　Ｉｒ１．ｇ　’？ｌｌ；、１　、買０１
／→１１し　１１．Ｏｑ丁　（ Ｃｐｄ、２はＣ０ｎ−Ａの有糸分裂作用に対して最低の
刺激効果のみしか与えず、ＰＨＡ有糸分裂作用に対して
は何の効果も奏しなかった。

例　１８ Ｃｐｄ、　２はＣ５７ＢＬ／６マウスから得た通常の牌
臓リンパ球を用いてテストされた。リンパ球刺激作用評
価は、１．５．１０．５０若しくは１００μＱ／ウエル
のＣＩａｄ、　２又は緩衝剤のみの何れか一方を使用し
て行なわれた。

表　１１ Ｃ，！；’／ＢＬ／〆ヌトしインつぐウスにめ１づ３Ｉ
ノンハ０賛葎１１ニ蚊作ｎ餠倫−Ｉソ砺り定ぐ八番イン
ビトρつＣｐｄ　λのケカ東（Ｑ　Ｏハ／つ、＋ｖ　：
ｊ、Ｆｊ３　＋４４　．４’？ｎ、、　／　”／７ｚｌ
し　４５、Ｓ　ユ＋３　、、Ｂ。

１ＯＮ／”＠＋１７　：３ｇ・？１６牛　１１υす／　
？７ｚ／Ｉ／　シ’Ｉｌｌ’　１４）？　１．２１β３
／焔し　２９．生　１４”７　、　’１２０／’ｉ／”
りｆｒｖ　２３．、！；　１１７ｒＰＨＡで処理された
婢臓細胞では、Ｃｐｄ、２の５０及び１００μｇ／ウェ
ルの投与量がリンパ球のＤＮＡ合成を刺激する傾向があ
った。１００μｇ／ウェルの投与量は牌臓リンパ球のＤ
ＮＡ合成を抑制した。Ｃｏｎ−Ａで処理された牌臓細胞
では、２００μｇ／ウェルの投与量で刺激的効果が秦さ
れ且つ４００μｇ／ウェルの投与量で反増殖的効果が奏
された。

匠−」」シ ０５７ＢＬ／６マウスから得られた牌臓細胞も琥珀酸及
びサクシンイミドの結晶化剤によりインビトロで処理し
た。これらの化合物は結晶状試薬の単位モルに対して２
モルのＣｐｄ、１．２若しくは３のモル比の溶液中にお
いて分子錯体から自然に離れるので、これらの試薬はリ
ンパ球刺激作用評価に於いて適切なモル濃度で処理され
た。

表　１２−Ａ ｌ６．６戸δ／Ｉ九ｌし　１１．ダ　３２．ダ　１・Ｉ
Ｐ、ぺ、イク／　１ンスＪＬ／　（２，４−和乙　、　
９（４、／む、２／ウエレ　１４．０　４２．′３．”
Ｉｆ２、ｏ夢）／つｔｔｖ　Ｈｊ　ｒｌ、ｌ　Ｌ　０１
−　ｏ４７ｇ　／　’ｙｘｔｒｙ　Ｈｒ、　ｑ　６４．
６　、７？、＋Ｏμフ／うｒＬＶ　ｌｙ、′Ｉ　８れ５
表　１２−Ｂ ｃ、ｒ７ｓｃ／ｇｚトレイ７Ｇ々→スｌ；め゛１ブ了り
７ハイ朴１り槽免Ｘ乍１冶言行岳１コＩす５腰１ヴぐれ
３イ）ビ企パのセクシン々イト′のオρ幕−９丘Ｊ）冗
・下１；ｉ杉（イ・箸田１逐セＬゴゲ什勾４４　Ｐ！−
ｌバー　ｋ二人ｐ±叶−ヤ（１３，９２％７　７　、シ
ｌｔＶ　ｌワ、＋　７７２．’？　１．４６・γ’Ｍｌ
　／ウニ／Ｌ／　Ｉ’７．２　’Ｊ１．ゴ　１．＋３屓
）４７　ｈｘｒ７Ｈ’、　Ｉ　紡、　１　、　ｑｇ／、
ワ’／”：９／　）ウェル’　ｌｒ７．、Ｓ−’ｒｊ３
４−　ｔ、１０・２クレ、、／−ン１１し’　Ｉ’１．
左　ｑ（、、ｏ　、ｃｌ（ｏ　兄７　ｈｚｌＶＩ’ｌｉ
　ＩＱ。

琥珀酸でリンパ球を処理する場合は、琥珀酸の調剤量が
増加するに従いＰＨＡ及びＣｏｎ−Ａの有光分裂が減少
することが示された。サクシンイミドの場合は、何れか
一方のミトゲンに対するリンパ球の反応に何等有意な抑
制的又は助長的効果が呈示されなかった。

例　２０ 例３の化合物、即ちＣ１１ｄ、３はＣ５７／Ｂ１−６牌
臓リンパ球をインビトロで処理するのに使用された。リ
ンパ球は１．５．１０．５０若しくは１００ｔｌｏ　／
ウェルのＣｐｄ、３又は緩衝剤のみの何れかで処理され
、リンパ球刺激作用評価が実施された。

表　１３ １ｏｏ　、ａ３／　カニ１し　ｏ、ｚＧ３　２・宕８　
．２Ｖ”５ｏ　Ａ３／　％ｌし　４．０９　ｏＩ’１．
２　．１’）１０　、ｃｔ％／　％ｌし　）４．０　ｔ
’１．Ｇ　、４’１甘　、リ　ウニ１し　ｌＬ’５　９
０．負　、６仔１　μ５／　り工１し　１２．′５　ワ
３゜２　．６００　ンシ５７〜１し　１フ、２　９ｑ・
６　−一−１０μＱ／つｘ　／Ｌ／のＣｌ１ｄ、３投与
量ｒ　Ｐ　ＨＡ　ニ対する反応が刺激され、一方５ｏ及
び１ｏｏμｇ／ウェルの投与量でその反応が抑制された
。５０μｇ／ウェルの投与量で僅かにＣｏｎ−Ａに対す
る反応が刺激され、１００μＱ／ウエルの投与量でその
反応が抑制された。

例　２１ Ｔ−細胞が欠失したＳＪＬ／Ｊストレインの生後３ケ月
のマウスを１００．　２００若しくは４００＋１１（１
／ｋａのＣ１）（１，１又は緩衝剤だけの何れかのｉ、
ｐ、投薬で４日間処理する。この結果はリンパ球刺激作
用評価によってわかる。

表　１４ ４ｏｏ　ｘｚ／　ｋ＞　’２．３１　３．３０　０．６
’１３２００η％／１４＞　１．’ｌ’ｌ　仙ダ’ｌ　
ｏ、　ａ３λｔｏｏ　ｈ）／ｋｃＪ＋、８５　ｙ、。ｌ
　ｏ、ｒ＊３ｏ　ｓ１３／’ｇ　１．１１　ｘ、／＋−
−−例　２２ ＳＪＬ／Ｊマウスは成長するに従って免疫規正機能が失
われて行き、後半は異質抗原に対する過敏反応性並びに
２重にストランドされた合成ＲＮＡ及びポリＩ／Ｃと同
様な中性物質に対する循環する抗体の生成によって立証
される。ＳＪＬ、／Ｊマウスで免疫能が連続して侵食さ
れることは、生からＴ−細胞小区分（抑制　及び／又は
　拡大可能な細胞）の規正に於ける欠点を示す死にわた
って観察されている。Ｔ−リンパ球区分の活動力が歳と
共に変化する為、歳がＳＪＬ／Ｊ？ウスをＣｌ１ｄ、　
１で処理した場合に得られる結果に影響を及ぼす役割を
演じると憶測される。

インビボのリンパ球刺激作用評価が２，５若しくは１０
ケ月の何れかの異なった歳のＳＪＬ／Ｊマウスに対して
実施された。マウスはＣｐｄ、１の１００　ｍｏ／ｋａ
又は緩衝液のみの何れかのｉ、ｐ、注射を受けた。

表、１５ Ｓ’ＪＬ／３　ス←し４ンの　−２’ｙ−７，１；わ・
１１コ　′Ｊンハ・■膚（６’ｌ’ＬＬ４１Ｍ”−右上
ｌ＝　Ｊ１１撞＋１ｆシ？Ｍ’＋　イリｃ”ａ’　？　
−１ｆ’１ｃ、ｙ・１の初東 ２０’ｍｋ／ｌ”ｈ　４ＣＩ−１？　１０３　−−一１
ｏｏ　實１／トコ　３ｘ、６　１６ワ　２，３１５　０
叫／にさ　］・ｏ’＋　＋′１．ワ１ｏｏ　ｍ％／に３
　１．ｌＧ　Ｉ’２−’ｌ　ｌ　−っ１ｏ　ｏｙ５／に
プ　３・’Ｉ７ｘ＋、’ｌ　−−−１ｏａ　〒＾＞／Ｉ
−＞　ｑ、＋ｇ　＋　午・５　ス・　１未処便のコント
ロールから得られた結果から、歳がＰ）−ＩＡ及びＣｏ
ｎ−Ａのリンパ球増殖反応の多用性に関係することが呈
示された。又、２ケ月の歳に於いて１１００Ｉｌ１／ｋ
ｇの投与口で投薬されたＣ　ｐｄ。

１はＣｏｎ−Ａの増加との対をなすＰＨＡの減少反応を
引き起こす。対照的に、５ケ月の歳でＣｐｄ。

１の投与を受けたＳＪＬ／Ｊマウスは、ＰＨＡ及びＣｏ
ｎ−Ａの双方に対する衰えた有基分裂反応を示した。１
０ケ月のＳＪＬ／Ｊマウスは、完全に逆となり、同一投
与量でのマウスの処理においてＰＨＡ及びＣｏｎ−Ａの
双方の有基分裂反応の有意な刺激作用を示した。

−１１ ０５７ＢＬ／６ストレインのマウスに、５０゜１００、
　２００若しくは４００１１１＜１／　ｋａのＣｐｄ、
１又は緩衝剤の何れかの１．ｐ、注射を１２日間（８１
〜１２）行なう。抗原としてのウシ科の動物の血清アル
ブミン（ＢＳＡ）が、１．７及び１４日にＦ　ｒｅｕｎ
ｄ　’ｓ　（：、　ｏＩｌｌｐｌｅｔｅ　Ａ　ｄＪｕｖ
ａｎｔ　（Ｆ　ＣＡ　）と共に腹膜を通して投与される
。血液のサンプルが０，５゜１３及び１９日に抗体反応
を評価する為に採取される。又、１３及び１０日に、リ
ンパ球増殖作用評価が、０．０１　、　０，１．　０．
５若しくは１．０μＯ／ウ工ル濃度の特定のリコール抗
原（ミトゲン）としてのＢＳＡ又はｌ１ｌｉ剤のみの何
れかを使用してこれらの同一マウスから得られたＮ臓す
ンパ球に対して行なわれる。

表　１６−Ａ くイフローＥしぴＡ　Ｐｑ−Ｉｓ　Ｊ−又５吠′１１じ
す久シＣ戸ｊ、１１＝Ｊ）ＢＳＡＩＪ”ｉｉ１’Ａ２？
Ｌ貞粛・”ｌ　の４　仰Ａｏｏ７ｖＩ６／１ｃ５Ｎ／Ｒ
”　Ｎ／ｇ　ｌｌｏ　１−ｑｘ。

Ｚｏｏ　＃）／−り　ｒ′Ｊ／ｇ　Ｎ／へ　Ｉ？ｏ　１
　：　＋ｘｓ。

＋ｏｏ　ｍＳＡ＞　ｉ＜／ｐ　Ｎ／邑　ド４０　１冒ｘ
？ＩＯ’ｙｏ　ｍｘ／ト２　１−Ｊ／Ｒｒ−Ｊ／Ｒド　
ｌ＋ｏ　ｌ　：　Ｇ４゜Ｑ　ｍ２／ｌ＝３　ｔ−１／ｘ
　ＮＩＰ、　ｌ　：ｌｏ　１：　３ｚ。

＊　Ｎｂ２．：　ノ゛：　：：；１１１’Ｊ　Ｌ表　７
６−Ｂ ｌ３日の、　Ｃｋ３”ＪＢム／にストレ４し１＝　１．
−＋１３１Ｊ　ｐｔＸａｚ４．′１ｓＫＬＷ１１ｔＬｅ
ｌ＝Ｊ’ｂｌｌ’１ｆｆｉ：？）　Ｂｊハ＋５ｔｔｉ３
’Ｊ２ｔ４ｉ液・へｆＮ４ンじ°°付、°でのごｙ４１
　ｃｎ　？ｎ莱４００ｙ）７ｇ）　、ｏ、Ｃ１１３，’
Ｉ　Ｉ）、ｈ　Ｉ＞−３（３，９１ｏｏ　−９Ａ’Ｊ　
ｌｏ、（、１４，１１５Ｊ　１３Ｊ　ｌ’＋、。

Ｉｅｕ−ｍ＞７＠　３．２２　′１．９　１１．’１　
１２．３　ｔｏ、１に；ｏ、シカ’１　Ｈ；、ｔ　ｌ’
１．’ｌ　ｘ３．ｌ　ｘｚ、’ｉ　＋ｓ、ｚｏｙ＞Ａ５
−−−　＋ｔ＋・ｏ　ｐ＋、Ｇ　＋ｚ、ｓ　１３．０１
　刊〕、Ｃ’ｙ　’ｌ　ＢＬ　／Ｇ　’７−　トしＡ　
−／　Ｉｓ　ｈ’ｔｔ　３　’）　”ｉへｖ宮ｊ　’ａ
’Ｂ％Ｌ作出撃（泡１τΔ゛月υ′１忙１＼）Ｂ３八１
４１−’ｑる篇２虫−棉Ｆ島、。のＡ〕じ°寸、′１の
こ、、１．１　の始果ユ法１佳μロ堕け１Ｌ− Ｉ３Ｓハ（Ａ→／り工１し） 工緘上ム」と　Ｌ虹　互ユ　旦　二 １４ｏｏ″Ｊ勺！５．０　３．１＋；　２．９′１＋、
ｑｑ　＋、ｏｔ４λＯｏｍｂ／に％　ｏ、４１　１−ｎ
　”Ｌ’ｇｌ　”６２１ス＋ｂｏｍ２／Ｉ’ｌＳ　ｑ、
ｌ　３．’ｌ’ｌ　１．Ｃ９ｚ、ｏ３　．２らシＯ？１
１内　、λＧ　）、Ｒ３’１．’２’ｌ　’ｌ・３１２
・いｏ　′３／ｋＪ　−＋＋　１．５ｅ　＋３Ｇ　２．
ｏ’ｌ　（、ｏｚ１３日まで何の抗体反応も観察されな
い。その日に、ｃＩ）ｄ、　１ノ２００及ヒ４００１１
１（］／　ｋｇ（７）投与量ｋｍ。

いて有意な（４倍）刺激作用が観察され、５ｏ及び１０
（ｌ１ｇ／　ｋ（ｌのＣｐｄ、１投与量では僅かな程度
の刺激作用のみが観察される。１９日に一層より興味あ
る反応が観察される。その時には、ＢＳＡに対する抗体
反応がＣｐｄ、１のＯＩｌ１ｇ／′ｋｇ及び４００ＩＩ
Ｑ／ｋｌｌ投与量で等しく、１３日の場合よりより高度
である。５０ｍ（］／ｋＯのＣ１１ｄ、１ではコントロ
ールに対する抗体タイツ（ｔｉｔｅｒ　）の僅かな増加
が観察されるが、一方ではＣ１］ｄ、１の１００及び２
００＋ｎｇ／Ｊｌ投与量が極端に刺激的となりコントロ
ールに対して１６倍の増加を呈示している。

例２３の２番目のコンポネントは、免疫性抗原（ＢＳＡ
）に対するｖｉｔｔａｍ胞のリンパ球増殖へのｃｐｃｌ
、　１の効果を示している。５０ｍｇ／ｋｇ投与日にだ
け、１３日でのＤＮＡ合成のコントロールに比較して有
為な刺激作用が示されている。この効果は１９日までに
弱まるが、これは免疫反応の媒介細胞（Ｔ−細胞）成分
を刺激する為の処理を維持することが重要であることを
示唆している。上述した抗体反応は、インビボでのＩ（
ｌ　Ｇ　（抗体）の生命は約５〜７日間であるから、）
ｈ療の停止後も維持されやすい。

叢−」」− ０５７ＢＬ／６ストレインのマウスに１０日間（１〜１
０ＢｆｉｌＷ）　にｍり若り、　＜　ハ４００ＩＱ／＃
Ｕ（１）Ｃｐｃｌ、１又は緩衝剤の何れかの１．０．注
射を施す。

抗原のｋｅｙｈｏｌｅ　ｌｉｍｐｅｔ　ｈｅｍｏｃｙａ
ｎｉｍ　（ＫＬＨ）を１．７及び１３日にＦｒｅｕｎｄ
　’　Ｓ　ＱＯ１ｌ＋ｐＬｅｔｆｉＡｄｊｕｖａｎｔ　
（ＦＣＡ）と共に腹膜を通して投与する。血液サンプル
を０．５．１２及び１７日に抗体反応の評価の為に採取
する。牌臓を除去し、リンパ球を単離して、本実験での
１７日にミトゲンとしてのＰＨＡ、Ｃｏｎ−Ａ又はＫＬ
）−ＩＫ原によるリンパ球刺激作用評価を実施する。

表　１７−Ａ −ＩＫ’？ローＥＬＴｒＡ’フイクリＺ　Ｊ　１’ｌ　
５＃’ｌ支址５　こｐＪ、ｌノにし出：封１３蕩２免Ａ
斤九の力η０ ４ｅｉ２／＃ｔ）　＋＊／ｐ、’　ＭＡ　＋：ｙ＋ｚｏ
　＋：＋ｏ、ｚ＋。

λＯｏｗ＞Ａ３　ｌｙ／ｇ　ｔＪ／Ｒｌ：！１ｌ）ＯＨ
ｏ＋２４゜ａ　ｍ）／ｓ３　１，１／Ｆ、　Ｎ／Ｉｌｌ
、　ｌ　：　ｚｓｌｒｏ　＋　：　Ｉｎｔ。

七　ト／Ｒ：痰龍７ＪＬ 表　１７−８ に乙１４　（２ムｊ／うヱＩＬ） ４ｏｏ　ｍ’）／ｓ＞　２．３ン３剪”；　（Ｌ　２９
０２ａｏ　ｍ８ｈ３　１ｚ、４　’；Ｉ７／、７３１２
日まで何の抗体反応も観察されず、１２日に２００及び
４００１（］／　ｋ（］処理を受けたグループがコント
ロール処理を受番プだグループに対して有意な刺激作用
（４倍増）を示す。コントロールと処理されたグループ
間の差の類似したパターンが処理の停止後７日間を経て
１７日まで持続し、２００及び４００１１１（１／　ｋ
Ｑ投与量で未処理の抗原に敏感なコントロールに対して
８倍の増加を示している。

リンパ球増殖作用評価だけがＣｐｃｔ、ｉ処理のプロト
コールの完了に引き続いて約５日間たった１７日に実施
される。リンパ球ＤＮＡ合成に於ける統計的に有為な増
加が、Ｃｏｎ−Ａ又はＫＬＨミトゲンによって刺激され
る２００ｍＭ　ｋｇの処理を受けたマウスに於いてみら
れる。Ｃｏｎ−Ａ（Ｔ−細胞ミトゲン〉に対するリンパ
球ミトゲンの反応はＫＬＨに敏感な牌臓リンパ球のＫＬ
Ｈに対する積極的な反応と十分な関係があった。

例　２５ 細胞に有毒なリンパ球（ＣＴＬ）活動へのＣｐｃｔ、　
ｉの効果は、活きたＬ５１７８Ｙ腫瘍細胞へのチャレン
ジ後１０日間のＴＤＳの早期ステージに於ける５匹のＤ
ＢＡ／２マウスを用いて測定される。

０．００１．　０，０１　、　０．１．　１，０．１０
若しくは　１００μｇ／ＩＩｌβのＣｐｄ、１の６種投
与量又は緩衝剤のみがＤＢＡ／２マウスから採った洗浄
された婢臓リンパ球、エフェクター及び変化するＥ／Ｔ
比での１５１７８Ｙターゲツト細胞を含むＭＬＴＣ極微
有機体培養ウェルに、１００μβ体積づつ加えられる。

ＭＬＴＣ反応が、イブイエイトされたＬ　５１７８Ｙ刺
激性細胞の存在下又は非存在下で実施される。

／／ ／ ／″ 、、、、／’　、　−、−、−−− 表　１８−Ａ ＋ｏ　ｐｐ／Ｊ　’ｌ’１．３　→２０　＋Ｇ、”＋１
・ｏ　、ｂ８／ｍｌ　ｒｕ、ｓ　→６０　内、６”　ｈ
ｋ／Ｊ　翳Ｏｒ１．ｏ　ｚｏ、２ｔｏｏ　）Ａ＃／ｖ−
Ｊ　４２　０　ｌ　８−、Ｑ　Ｔ、’Ｉす）／％ｔ　３
ら、３　１＆、８　存、し１．０ノ１９−ｔ　今０．１
　スＯ，Ｑ　４．らＣｐｄ、　１は、採用されたＥ／Ｔ
比又は刺激因子細胞の存否に無関係な幾つかの濃度に於
いて、％リーシースとして表わされたＣＴＬ活動の有意
な増加を引き起こす。

それ故、このデータは、１５１７８ＹＩＩｉ瘍細胞に対
して敏感化されたＴＤＳマウス牌臓細胞の特定のＣＴ１
反応が投薬量に追従して拡大することをザポー１〜する
。

例　２６ 生ぎているＬ５１７８Ｙｌ！瘍細胞よる誘発の後の１０
日間に亘るＴＤＳの早期ステージに於ける５匹のＤＢＡ
／２マウスが、ＣＴＬ活動に対するＣｐｄ、　１の効果
を測定する為に使用された。１０若しくは１００／ｌ　
／　Ｈ！の２通りのＣｐｄ、　１投与量又は緩衝剤だけ
が、ＤＢＡ／２マウスからの洗浄された牌臓リンパ球、
エフェクタ及び変化するＥ／Ｔ比でのターゲット細胞を
含むＭＬＴＣ極微有機体培養ウェルに１００ｕｌづつ加
えられた。ＭＬＴＣ反応がイレディエイトされたＬ５１
７８ＹＮ激因子細胞の存在下又は非存在下で実施された
。

表　１９−Ａ ％１１−３人 Ｓ／Ｔ　ｒＬ 鳥ａ、ｔ４１　芝牡入　迎ａ　旦旦虱　夏Σ］Ｘｏｏ）
Ａｔｌ／ｍ１　ワ１．ら　ｑ’１．ｇ　下、’ｌ　ｒＡ
、３！ンウ／Ｊ−’７５．’ｌ　ワ２．Ｏｂ’７．１　
６０５０ｒ）Ａ＞ｌＪ　＆３．’ｌ　＆１．’ｌ　４’
ｌｒ、Ｉ）　ＲＳ、Ｓ表　１９−Ｂ ＼ｏｏオ辻ノー　２１８　１らら　１０　らＩＸｇ）ｑ
／ｍＡ　＋２．’ｉｌｔ　会１　ら９．９ｏ）Ａ３／１
．ｌｊ！　−ワ、５　−’５．０　−Ｒ，Ｓ　−１，’
３Ｃｐｄ、１は、採用されたＥ／Ｔ比又は刺激因子細胞
の存否に無関係な幾つかの濃度に於いて、％リーシース
として表わされたＣＴＬ活動の有意な増加を引き起こし
た。

例　２７ 生きているＬ　５１７８Ｙ　１ｍ　ｌ細胞による誘発に
先行するＴＤＳの早期ステージに於けるＤＢＡ／２マウ
スが、ＣＴＬ活動に対するＣｐｄ、　２の効果を測定す
る為に使用された。０．１．　１．０．１０若しくは１
００μｇ／ｍβのＣｐｄ、２か又は緩衝剤のみが、ＤＢ
Ａ／２マウスからの洗浄された牌臓リンパ球、エフェク
タ及び変化するＥ／Ｔ比での１５１７８Ｙターゲツト細
胞を含むＭＬＴＣ極微有機体培養ウェルに１００　ｕＩ
１体積づつ加えられた。ＭＬＴＣ反応はイレディエイト
されたＬ　５１７８Ｙ刺激因子細胞の存在下又は非存在
下に於いて実施された。

表　２０−Ａ 丘／Ｔｒｂ Ω（ん鼻Ｌ　圏　５圧ユ　剋旦互へ Ｘｏｏ　）ｔ＞／、１．　”ＩＥ、’５　’ｌＢ、’５
　６’Ｅ、Ｑ　４ワ、ＯＩら幡／ｌ１１１２　′１＆５
　ワ２５　η２ぢ　詰ぢｌ　）ｔ’Ｊ／Ｊ　ｒｌ’５．
５　’７２．”；　ｂ９５怜ＯＯ，Ｉ　％　ｌ　／−Ｊ
！　’７４ら　−、’５　Ｈ，ｏ　４７．５０／ｌＡ＞
／−碑ぢ　６ワ、０　５ワＯ萄５表　２Ｏ−Ｂ ｆ＋ｌｉ＋ａ）ＡｆＢＦｌｚＡ　１ｎＺ７’＞’ｉ’細
ＦｌｌａｔｉＭｌｔ’！ＭＬＴＹ’。

ａ＠ｌＳ幇、ズ本ワ定ゴΦ５ｐ巳Ａ／λズトレＸン小々
ウスカゝろの１９祢１し島寒１７Ｄβ鯖ＲＪ＆’ｌユム
シＢｋめＣＴＬうｉｉＭ＋＝夕４１次ＢＣｐａ、２　＾
な１１呻１％　１１−５又 Ｅ／Ｔル Ｑａ、２鬼庫　泗旦　里　２顆２　＼２ヲ：亀Ｘｏ列１
．）、　Ｇ１．Ｅ　５Ｏ号　和０　２ム、９０．１．ｙ
Ｈんノ　４ｆｋ、ｏ　ｅ、”；　２’１．５　＋ｂ、Ｃ
；ｏ）ｑ／−Ｊ　５ど　剖Ｃ）　”Ｓ２ワ　１ｑ９、／ ／−一−−−−−−−−−−−−− Ｃｐｄ、２は、採用されたＥ／Ｔ比又は刺激剤細胞の存
否に無関係な幾つかの濃度に於いて、％リーシスとして
表わされたＣＴＬ活動の増加を引き起こした。１つの例
外は刺激因子細胞が存在しない場合の０．１μｇ／ＩＩ
Ｉβの投与量時であった。

例　２８ ＭＬＴＣ評価はＣＴＬ活動とＣｐｄ、　１に対する腫瘍
ターゲット細胞の特殊性を評価して実施される。腫瘍の
休止婢臓細胞及びＤＢＡ／２マウスの正常な牌臓細胞が
エフェクタ細胞として使用される。イレディエイトされ
た１５１７８Ｙ細胞は刺激剤細胞として使用される。５
１Ｃｒ−ラベルド（ｌａＭＩＮ　）の１５１７ＢＹ細胞
及びＦＬＣ−７４５Ｉ１１１胞がターゲット細胞として
使用される。エフェクタ／ターゲット比は１００：　１
．３０　：　１及び１０：１である。

９９− 表　２１ Ｅ　タｏ、９　：ｚ’ｆ、２　ワ・２ Ｎ＋８＋ｐ−ｑ、ｓ　−Ｑ、”ｌ　−ｔｏ、’ＩＮ”’
　−１４，２−１ｏ−′５−１１．２ｈｌｓ＋Ｄ　ｉ、
ｇ　−０，ｇ　−１，１＋−ｓｓ　ｓ、’？、　１．１
　−２６１−　工りり’９．ｙ１１４カ゛′イ本、配＝
ジＰヒ、Ｉｌ岬駿摩田り巴ｓ＋　倉ｔすμ因き、イレテ
ーユイト文出ＡヒしぢｌワきＹ＾犯Ｈ色ｐ：　ｃＰ沃、
１ ｈ、止＊なエフ１り９内旧記、正牟ｑ牌１系ｌ邑−１０
０− 刺激因子細胞の存在下でのエフェクタ細胞の有意で特異
なＣＴＬ活動の増大が、Ｃｐｄ、　１が存在する時の１
５１７８Ｙターゲツトコントロールシステムに於いて注
目された。この効果はＦＬＣ−７４５ターゲツトコント
ロールシステムでは観察されず又エフェクタ細胞単独で
も増大効果を生じなかった。これらの結果は、Ｃｐｄ、
１による刺激されたエフェクタ細胞の活動の増大、その
システムのＴ−細胞の復元活動及び刺激されたエフェク
タ細胞の特異性を示している。

ｆＬｕ史 Ｌ５１７８Ｙの腫瘍休止状態の確立に対するＣｐｄ。

１の効果が４０匹のＤＢＡ／２マウスをＴＤＳの誘発処
置を受けさせた後にＣｐｄ、　１で処理することによっ
て研究されている。マウスがｓｏ、ｏｏｏの生きたＬ　
５１７８Ｙ　ｌｉｉ　Ｉｆ細胞のｉ、ｐ、投与で誘発さ
れた後の２日間は、これらマウスの２０匹は一貫した７
日間の１００１１（Ｉｔ／　ｋＧのＣｐｄ、１によるｉ
、ｐ、処理を受け、残りの２０匹は緩衝剤のみの投与を
受ける。

部分的な腹膜洗浄がＣ１）ｄ、１の最後の投与後２５日
間実施され、腹膜からにじみでた流体を腫瘍細胞数の決
定（腫瘍細胞定量評価）の為にプレートアウトする。生
きた１　５１７８Ｙ腫瘍細胞による誘発の後９０日間に
亘り生存時間が記録される。各グループについて死亡率
が計算される。

表　２２−Ａ ０　１　乙　＋　２２ ＜　ｔ、ｏｏｏ　６　兆　ら　３３ ＋、ｏｏｏ　−Ｉｏｏｌｏｏｏ　ｋ　４ｑ　”７　３ｃ
Ｉ＞１００．０ＯＣ１ｌ　ｌ’ｌ　ｌ　１表　２２−Ｂ ＊希＆’ＩＯ日Ｍ　ｌ：　、％　Ｉｔ　Ｂ　Ｔし５　Ｃ
）ＢＡ／２　ｑウス偽＞ｔ　電層（民１＆　！１−４ｒ
　＊＊＜ ＼ｏｏ　ｗ）／鴫　１０　’ｒＥら Ｏい）／に６　３１　Ｖ７　、Ｇ コントロールに対してｃｐｄ、　１処理された動物から
回復した腫瘍細胞の数に於いて有意な減少が見られる。

腹膜洗浄でより少ない腫瘍細胞を示すマウスの数は処理
されたグループの方でより多く見られる。Ｃｐｄ、１よ
って処理されたこれらマウスの生存数は未処理のコント
ロールより有意に多い。

例　３０ Ｌ５１７８Ｙの腫瘍休止状態の確立に対するＣｌ１ｄ。

１の効果が４０匹のＤＢＡ／２マウスをＴＤＳの誘発処
置を受けさせた後にＣｐｄ、　１で処理することによっ
て研究されている。マウスが５０，０００の生きた１５
１７８Ｙ１１！細胞の１．ｐ、投与で誘発された後の２
日間は、これらマウスの２０匹は一貫した７日間の１０
０１１（］／　ｋｇのＣｐｄ、１によるｉ、ｐ、処理を
受け、残りの２０匹は緩衝剤のみの投与を受ける。

部分的な腹膜洗浄がＣｐｄ、　１の最後の投与後２５日
間実施され、腹膜からにじみでた流体を腫瘍細胞数の決
定（腫瘍細胞定量評価）の為にプレートアウトする。生
きたｌ　５１７８Ｙ腫瘍細胞による誘発の後１１４日間
に亘り生存時間が記録される。各グループについて死亡
率が計算される。

表　２３−Ａ ３　１う、Ｏル　６ｔ　も ＜　＋、ｏｏｏ　ｇ　）４会２　＆、”ｌｌ、０００−
ＩＱＱ、ｏｏｏ　ｌ　Ｄ　４Ｒ＋、％　４　１７４＞　
ＬＤＩ＋、ＯＤＤ　２　ｔ６．’ｌ　”　’表　２３−
Ｂ ＠　１１−４１　’ｉｏｅＭ　１＝ｉｎ％Ｔ［）Ｓ　［
）ＢＡ／２　ｒつｚａ＞ｔ４＝身０１１　虫各Ｖ−曳４
卑 １ひＯ石繁／嶋　１’ｌ　’Ｅ？）、４０鴫Ａｌ　ｌＸ
４７．ｇ 旌−３１ Ｌ−１２１０白血病細胞が植え付けられたＢＤＦストレ
インのマウスが、２５．５０．　１００．　２００若し
くは４００ｍｇ、／　ｋｏのＣｐｄ、１又は緩衝剤のみ
の何れかで７日間処理される。ナショナル　キャンサー
　インスティチュートの新しい抗癌剤を審査する為のプ
ロトコールに従ってＴ／Ｃ比を計算する。

表　２４ ４００ｍ＞／に’）　スＣ；１．２５ ：ＺＯＤ−＞／Ｑ　”５０　１．　′ｓＯ１００ｍｙ／
ｌ”３　５０　１．ｓ。

ｗｓｏｓ＞／Ｖ：ｃ＃：ｌＩ　１．０５方ｍ＞Ａ３　２
０　１．００ ０いｓ　／ｙｌ　２０　−−− ４００、　２００及び１００ｍｇ／ｋｇの投与ｉで夫々
　１．２５，１．５０及び１．５０のＴ　、、／　Ｃ値
を得ているが、これはナショナル　キャンサー　インス
ティチコートの評価基準により有意であると考えられる
。

例　３２ Ｌ　−１２１０白血病細胞が植え付けられたＢＤＦ。

ストレインのマウスが、１００ｍ０／　ｋｇのＣｐｄ、
１゜２０　ｒａＱ／　ｋｇノ抗癌剤として知られた５　
−ｆｌｏｕｒｏｕｒａｃｉｌ（５−ＦＵ）若しくは緩衝
剤のみの何れかで７日間処理される。ナショナル　キャ
ンサー　インステイチゴートの新しい抗癌剤を審査する
為のプロトコールに従ってＴ／Ｃ比を計算する。

表　２５ ＣｐｔＬ、　ｔ　ｔｏＤ＋１１３７％１　２８　１．４
０５−丁Ｕ　ｚｏｍｔ４ｋｌ　３ｏ　１．ｌＥｃ）ｍｅ
ｔ制　−−−−２０− １００ｍｐ／ｋｇｃｐｄ、　１投与処理で、ポジティブ
なコントロールとしての５−ＦＵの１．５０に対して１
．４０のＴ／Ｃ値を得ている。このデータは、例３１の
ポジティブな研究結果を実証したし、又、Ｃｐｄ、１の
使用後に観察された抗癌性結果を、既に容認されている
ポジティブなコントロール薬剤の５−ＦＵの使用後に観
察された結果と比較している。

尚、本発明は上記の特定の実施例に限定されるべきもの
ではなく本発明の技術的範囲に於いて種々の変形が可能
であることは勿論である。

【図面の簡単な説明】

図面は実施例１の生成物のＸ線結晶構造を示す説明図で
ある。 特許出願人　ナショナル　ファウンデーションフォア　
キャンサー　リサーチ。 インコーホレイテッド １０７− ○ ／ ７ φ ／ １０８− 第１頁の続き 優先権主張　＠１９８３年４月４日■米国（ＵＳ）■４
８１９９８ ０発　明　者　ガボル・ビイ・フォードールアメリカ合
衆国ウェスト・バー リニア２６５０５モーガンタウン・ アウグスタ・アベニュー８２９ ０発　明　者　アルバート・スゼントーゲルギアメリカ
合衆国マサチューセッ ツ０２５４３ウツズ・ホール・セブ ン・ウィンス（番地の表示な し）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、化学式が゛ であって、前記式中、 Ｒ２は水素及び低級アルキルよりなる部類中から選択さ
   れ、 Ｒ５及びＲ６は水素及び低級アルキルよるなる部類中か
   ら選択されると共に同一でも−１−へ、、− 異なっていてもよく、 Ｒ７及びＲ８は水素及び低級アルキルよりなる部類中か
   ら選択されると共に同一でも異なっていてもよく、 Ｒ７は Ｆ’−＋ｏＯ−Ｃ−）１ に？ でもよく、 Ｒ９は よりなる部類中から選択され、 Ｒ＋ｏ及びＲ＋＋は水素、低級アルキル、低級２− アルキルのフェニル基及び水酸基の置換体よりなる部類
   中から選択されると共に同一でも異なっていてもよく、 Ｒ７はα、β若しくはγ位置に水酸基を含む場合にブチ
   ロラクトンの第３炭素とでカルボニル基の該炭素原子の
   陽子化によりヘミケタル閉鎖環を形成するものでもよく
   、そして、ＸはＯｌＳ及びＮＨよりなる部類中から選択
   されたものとする 化合物。 ２、上記第１項に於いて、前記化合物の有効量とその為
   に製薬上許容されるキャリアとからなる哺乳動物の癌処
   置の為のサイトスタティック（ｃｙｔｏｓｔａｔｉｃ）
   合成物。 ３、上記第２項に於いて、前記合成物の静脈注射からな
   る哺乳動物の癌処置方法。 ４、上記第２項に於いて、前記合成物の腹膜注射からな
   る哺乳動物の癌処置方法。 ５、上記第２項に於いて、前記合成物の経口投与からな
   る哺乳動物の癌処置方法。 ６、上記第２項に於いて、前記合成物の筋肉的投与から
   なる哺乳動物の癌処置方法。 ７、上記第２項に於いて、前記合成物の静脈内投与から
   なる哺乳動物の癌処置方法。 ８、上記第１項に於いて、前記式中、 Ｒ２は一〇Ｈ３で、 Ｒ５，Ｒ６及びＲｔ＋は夫々水素で、 ＸはＯで、 Ｒ９は一〇８２０８で、 そして、Ｒ７はカルボニル基の第３炭素の陽子化でブチ
   ロラクトンの第３炭素にヘミケタル（ハθｍ１ｋｅｔａ
   ｌ　）閉鎖間を形成することとした、 化合物。 ９、上記第８項に於いて、前記化合物の有効量とその為
   の製薬上許容されるキャリアとからなる哺乳動物の癌処
   置の為のサイトスタティック合成物。 １０、上記第９項に於いて、前記化合物の静脈注射から
   なる哺乳動物の癌処置の為の方法。 １１、上記第８項に於いて、前記化合物と琥珀酸無水物
   を２＝１のモル比で有する結晶性分子錯体。 １２、上記第１１項に於いて、前記結晶性錯体の有効量
   とその為に製薬上許容されるキャリアとならなる哺乳動
   物の癌処置の為のサイトスタティック合成物。 １３、上記第１２項に於いて前記合成物の静脈注射から
   なる哺乳動物の癌処置方法。 １４、上記第１２項に於いて、前記合成物の腹膜注射か
   らなる哺乳動物の癌処置方法。 １５、上記第１２項に於いて、前記合成物の経口投与か
   らなる哺乳動物の癌処置方法。 １６、上記第１２項に於いて、前記合成物の筋肉的投与
   からなる哺乳動物の癌処置方法。 １７、上記第１２項に於いて、前記合成物の静脈内投与
   からなる哺乳動物の癌処置方法。 １８、上記第８項に於いて、前記化合物とサクシンイミ
   ドを２：１のモル比で有する結晶性分子錯体。 １９、上記第１８項に於いて、前記結晶性分子錯体の有
   効量とその為に製薬上許容されるキャリアとからなる哺
   乳動物での癌処置の為のサイトスタティック合成物。 ２０、上記第１９項に於いて、前記合成物の静脈注射か
   らなる哺乳動物の癌処置方法。 ２１、上記第２０項に於いて、前記合成物の腹膜注射か
   らなる哺乳動物の癌処置方法。 ２２、上記第２１項に於いて、前記合成物の経口投与か
   らなる哺乳動物の癌処置方法。 ２３、上記第２２項に於いて、前記合成物の筋肉的投与
   からなる哺乳動物の癌処置方法。 ２４、上記第２３項に於いて、前記合成物の静脈内投与
   からなる哺乳動物の癌処置方法。 ２５、上記第８項に於いて、前記化合物とＮ−メチルサ
   クシンイミドを２：１のモル比で有する結晶性分子錯体
   。 ２６、上記第２５項に於いて、前記結晶性分子錯体の有
   効量とその為に製薬上許容されるキャリアとからなる哺
   乳動物の癌処置の為のサイトスタティック合成物。 ２７．上記第２６項に於いて、前記合成物の静脈注射か
   らなる哺乳動物の癌処置方法。 ２８、上記第２６項に於いて、前記合成物の腹膜注射か
   らなる哺乳動物の癌処置方法。 ２９、上記第２６項に於いて、前記合成物の経口投与か
   らなる哺乳動物の癌処置方法。 ３０、上記第２６項に於いて、前記合成物の筋肉内投与
   からなる哺乳動物の癌処置方法。 ３１、上記第２６項に於いて、前記合成物の静脈内投与
   からなる哺乳動物の癌処置方法。 ３２、化学式が ３７　Ｋ） であって、前記式中、 Ｒ２は水素及び低級アルキルよりなる部類中から選択さ
   れ、 Ｒ５及びＲ６は水素及び低級アルキルよりなる部類中か
   ら選択されると共に同一でも異なっていてもよく、 Ｒ７及びＲ８は水素及び低級アルキルよりなる部類中か
   ら選択されるとともに同一でも異なっていてもよく、 Ｒ７は し９ でもよく、 Ｒ９は ７− ＣＨ，ＣＨｓ　Ｃ）（＞ Ｏら、、、０１−１．　／Ｌ私・　ＯＨ□ＯＦ？／、Ｑ
   ｌ−１よ Ｏえ１− よりなる部類中から選択され、 Ｒ＋ｏ及びＲｕは水素、低級アルキル及びフェニル基よ
   りなる部類中から選択されると共に同一でも異なってい
   てもよく、 そして、Ｘは０．８及びＮ　Ｈよりなる部類から選択さ
   れたものとする 化合物の形成方法であり、反応生成物を採取し、酸無水
   物若しくは酸イミドで生成物を処理し、還流して、結晶
   状の新規な化合物を採取する方法。 ３３、上記第３２項に於いて、酸無水物は琥珀酸である
   方法。 ３４、上゛間第３２項に於いて、酸イミドはサクシンイ
   ミドである方法。 ３５、上記第３２項に於いて、酸イミドはＮ−９− ８− メチルサクシンイミドである方法。 ３６、上記第３２項に於いて、形成される新規な化合物
   の化学式中で、 Ｒ２は一〇Ｈｇであり、 Ｒ２、Ｒ６及びＲ１Ｇは夫々水素であり、ＸはＯであり
   、 Ｒ９は−ＣＨ２０Ｈであり、 そして、Ｒ７はブチロラクトンの第３炭素に第３炭素に
   於けるカルボニル基の陽子化によりヘミケタル（ｈｅｇ
   ＋１ｋｅｔａｌ　）閉鎖環を形成することとした 方法。 ３７、上記第３６項に於いて、前記化合物と琥珀酸無水
   物とを２：１のモル比で有する結晶性分子錯体。 ３８、上記第３６項に於いて、前記化合物とサクシンイ
   ミドを２：１のモル比で有する結晶性分子錯体。 ３９、上記第３６項に於いて、前記化合物とＮ−メチル
   サクシンイミドを２：１のモル比で有する結晶状分子錯
   体。 ４０．化学式が ２＆ｔ’２ｒ であって、前記式中、 Ｒ２は水素及び低級アルキルよりなる部類中から選択さ
   れ、 Ｒ５及びＲ６は水素及び低級アルキルよるなる部類中か
   ら選択されると共に同一でも異なっていてもよく、 Ｒ７及びＲ８は水素及び低級アルキルよりなる部類中か
   ら選択されると共に同一でも異なっていてもよく、 Ｒ７は 区、。０−Ｃ−Ｈ ム でもよく、 Ｒ９は んＲ２ξ’）、１．　ＣＨｒ Ｏし・＋　＋　ＣＲ２、σ−び　Ｃ，ｌ−１゜ＯＧｎ　
   ｃＮｚ ０区、１ よりなる部類中から選択され、 Ｒ＋ｎ及びＲｕは水素、低級アルキル、低級アルキルの
   フェニル基及び水酸基の置換体よりなる部類中から選択
   されると共に同一でも異なっていてもよく、 Ｒ７はα、β若しくはγ位置に水酸基を含む場合にブチ
   ロラクトンの第３炭素とてカルボニル基の該炭素原子の
   陽子化によりヘミケタル閉鎖環を形成するものでもよく
   、そ（）て、Ｘｌ、、ｔＯ，Ｓ及びＮ　Ｈよりなる部類
   中から選択されたものとする 効果的な量の化合物と、その為に製薬上許容されるキャ
   リアとからなる合成物を投与することを含む動物の免疫
   システムを調整する方法。 ４１、上記第４０項に於いて、Ｒ２は一〇）−１３であ
   り、Ｒ５、Ｒｓ及びＲ１０は夫々水素であり、ＸはＯで
   あり、Ｒ９は−ＣＨ２０Ｈであり、そしてＲ７はブチロ
   ラクトンの第３炭素とでカルボニル基の該第３炭素の陽
   子化によりヘミケタル閉鎖環を形成することとする方法
   。 ４２．１記第４０項に於いて、前記製薬上のキャリアは
   緩衝性の等張塩水溶液を含むこととする方法。 ４３、上記第４０項に於いて、免疫作用の抑制に効果的
   な量の特許請求の範囲第４０項の化合物とその為に製薬
   上許容されるキャリアとからなる免疫抑制用合成物を投
   与することを含んでおり、哺乳動物に於ける免疫システ
   ムが抑制される方法。 ４４、上記第４０項に於いて、免疫作用の刺激に効果的
   な量の特許請求の範囲第４０項の化合物とその為に製薬
   上許容されるキャリアとからなる免疫刺激用合成物を投
   与することを含んでおり、哺乳動物に於ける免疫システ
   ムが刺激される方法。 ４５、上記第４０項に於いて、前記免疫調整用合成物が
   体重の単位ｋＱ当り約１０乃至１　、０００ｍｇを含む
   治療上の単位投薬量で投与される方法。 ４６、上記第４０項に於いて、前記免疫調整用合成物が
   体重の単位ｋｇ当り約１０乃至３００１１１（］を含む
   治療上の単位投薬量で投与される方法。 ４７、上記第４０項に於いて、前記免疫調整用合成物が
   体重の単位Ｊｌ当り約３００乃至１，０００ｍｇを含む
   治療上の単位投薬量で投与される方法。 ４８、上記第４６項に於いて、前記免疫調整用合成物が
   免疫システムを刺激する方法。 ４９、上記第４８項に於いて、前記免疫調整用合成物が
   体重の単位ｋＱ当り約５０乃至２００ｍｇを含む好適な
   単位投薬量で投与される方法。 ５０、上記第４７項に於いて、前記免疫調整用合成物が
   免疫システムを抑制する方法。 ５１、上記第５０項に於いて、前記免疫調整用合成物が
   体重の単位ｋ（ｌ当り約４００乃至８００ＩＩｇを含む
   好適な単位投薬量で投与される方法。 ５２、上記第４０項に於いて、前記免疫調整用合成物の
   投与が腹膜を通す注射による方法。 ５３、上記第４０項に於いて、前記免疫調整用合成物の
   投与が経口である方法。 ５４、上記第４０項に於いて、前記免疫調整用合成物の
   投与が皮下である方法。 ５５、上記第４０項に於いて、前記免疫調整用合成物の
   投与が静脈内である方法。 ５６、上記第４０項に於いて、前記免疫調整用合成物の
   投与が筋肉内である方法。 ５７、上記第４０項に於いて、前記免疫システムの成分
   のキーモトクシツク（ｃｔ＋ｅｍｏｔｏｘ　ｉｃ　）反
   応が免疫の刺激に効果的な量の特許請求の範囲第４０項
   の化合物とその為の製薬上許容出来るキャリアを投与す
   ることによって刺激されることとする方法。 ５８、上記第４０項に於いて、前記免疫システムの成分
   のファゴシトクシック（ｐｈａｇｏｃｙｔｏｘ　ｉ　ｃ
   　）活動が免疫の刺激に効果的な量の特許請求の範囲第
   ４０項の化合物とその為の製薬上許容できるキャリアを
   投与することによって刺激されることとする方法。