JPS60233560A - リパ−ゼ活性の測定方法 - Google Patents
リパ−ゼ活性の測定方法Info
- Publication number
- JPS60233560A JPS60233560A JP8858984A JP8858984A JPS60233560A JP S60233560 A JPS60233560 A JP S60233560A JP 8858984 A JP8858984 A JP 8858984A JP 8858984 A JP8858984 A JP 8858984A JP S60233560 A JPS60233560 A JP S60233560A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- sugar
- lipase
- activity
- substrate
- fatty acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
- C12Q1/44—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving esterase
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
ゼ活性を測定する方法に関するものである。
リノ４−ゼ活性を測定する方法としては、例えばオリー
ブオイルなどを懸濁させ、リパーゼの作用によるこの懸
濁液の澄明化度を測定する方法が知られている。この方
法は、オリーブオイルの懸濁状態を一定することが難し
いため、感度及び再現性に問題があった。このほか、古
くは遊離脂肪酸をアルカリ滴定するＣｈｅｒｒｙ−Ｇｒ
ａｎｄａｌ ｌらの方法があったが滴定操作が難かしい
ために個人差を生じやすいという問題があった。また、
αーナフ） −ル誘導体などの合成基質を用いる方法も
開発されているが、基質が水に不溶であること、アリル
エステラーゼなど他のエステラーゼも作用してしまうこ
となどによシ誤差を生じやすいという問題があった。
ブオイルなどを懸濁させ、リパーゼの作用によるこの懸
濁液の澄明化度を測定する方法が知られている。この方
法は、オリーブオイルの懸濁状態を一定することが難し
いため、感度及び再現性に問題があった。このほか、古
くは遊離脂肪酸をアルカリ滴定するＣｈｅｒｒｙ−Ｇｒ
ａｎｄａｌ ｌらの方法があったが滴定操作が難かしい
ために個人差を生じやすいという問題があった。また、
αーナフ） −ル誘導体などの合成基質を用いる方法も
開発されているが、基質が水に不溶であること、アリル
エステラーゼなど他のエステラーゼも作用してしまうこ
となどによシ誤差を生じやすいという問題があった。
本発明者は、これらの問題点を解決してリパーゼの活性
を正確かつ簡便に測定する方法を開発すべく種々検討の
結果、水溶性であるアルコール重合体の脂肪酸エステル
を新規なリパーゼ基質として開発するに至υ、この基質
を用いれば前記の問題点を解決してリパーゼ活性を正確
かつ簡便に測定しうろことを見出してこの内容を特許出
願（特願昭５９−２７２９６号）した。そして、その後
さらに検討を進めて水溶性の糖脂肪酸エステルを新規な
°リ・卆−ゼ基質として開発するに至シ、この基質を用
いることによシやはシ前記の問題点を解決してリ７や一
ゼ活性を、特異的に正確かつ簡単に測定しうろことを見
出して本発明を完成した。
を正確かつ簡便に測定する方法を開発すべく種々検討の
結果、水溶性であるアルコール重合体の脂肪酸エステル
を新規なリパーゼ基質として開発するに至υ、この基質
を用いれば前記の問題点を解決してリパーゼ活性を正確
かつ簡便に測定しうろことを見出してこの内容を特許出
願（特願昭５９−２７２９６号）した。そして、その後
さらに検討を進めて水溶性の糖脂肪酸エステルを新規な
°リ・卆−ゼ基質として開発するに至シ、この基質を用
いることによシやはシ前記の問題点を解決してリ７や一
ゼ活性を、特異的に正確かつ簡単に測定しうろことを見
出して本発明を完成した。
すなわち、本発明は、糖類の水酸基に脂肪酸がエステル
結合した水溶性の化合物（糖脂肪酸エステル）をリパー
ゼの反応基質として用いることを特徴とするＩＪ Ａ／
−ゼ活性の測定方法に関するものである。
結合した水溶性の化合物（糖脂肪酸エステル）をリパー
ゼの反応基質として用いることを特徴とするＩＪ Ａ／
−ゼ活性の測定方法に関するものである。
糖類は単糖類、少糖類、多糖類のいずれであってもよい
。糖類を構成している糖残基の種類は問わないが、例え
ば、グルコース、フルクトース、ヘキソサミン、含硫黄
糖などを含む。
。糖類を構成している糖残基の種類は問わないが、例え
ば、グルコース、フルクトース、ヘキソサミン、含硫黄
糖などを含む。
分子量は１０万以下のものがよく、特に３５０〜；００
０程度のものが好適である。糖類の例としテハ、シュク
ロース、キシロース、オリゴマルトシド、キチン、キト
サン、ヘパリン、デキストラン、デンプンなどを挙げる
ことができる。
０程度のものが好適である。糖類の例としテハ、シュク
ロース、キシロース、オリゴマルトシド、キチン、キト
サン、ヘパリン、デキストラン、デンプンなどを挙げる
ことができる。
脂肪酸は炭素数が５〜２２程度のものが適当であシ、例
えば、２ウリン酸、ノ臂ルミチン酸、ステアリン酸、ベ
ヘン酸、オレイン酸、リルン酸、ヤシ油脂肪酸、硬化牛
脂肪酸などである。
えば、２ウリン酸、ノ臂ルミチン酸、ステアリン酸、ベ
ヘン酸、オレイン酸、リルン酸、ヤシ油脂肪酸、硬化牛
脂肪酸などである。
アルコール重合体に脂肪酸をエステル結合させる方法は
公知の方法に準じて行なえばよく、酸触媒を利用する方
法、アルカリ触媒を利用する方法、酸クロ２イド化法、
酸アミド化法などいずれも利用できる。エステル化部位
については、マルトースを例にとると第１級アルコール
（６位）の水酸基をエステル化すればよいが、１位の水
酸基をエステル化してもよく、マた、両方エステル化し
てもよい。また、ポリサッカライドの場合には還元末端
、非還元末端などの水酸基をエステル化すればよく、通
常全水酸基の１／１０００〜１／３程度をエステル化す
るのがよい。
公知の方法に準じて行なえばよく、酸触媒を利用する方
法、アルカリ触媒を利用する方法、酸クロ２イド化法、
酸アミド化法などいずれも利用できる。エステル化部位
については、マルトースを例にとると第１級アルコール
（６位）の水酸基をエステル化すればよいが、１位の水
酸基をエステル化してもよく、マた、両方エステル化し
てもよい。また、ポリサッカライドの場合には還元末端
、非還元末端などの水酸基をエステル化すればよく、通
常全水酸基の１／１０００〜１／３程度をエステル化す
るのがよい。
このような糖脂肪酸エステルは水溶性でなければならな
い。
い。
糖脂肪酸エステルの例としては、６−０−、イルミドイ
ルグルコース、６，６’−０−ジオレイルシュクロース
’ｔ ｏ−）リステアリルマルトヘプタオースなどを挙
げることができる。
ルグルコース、６，６’−０−ジオレイルシュクロース
’ｔ ｏ−）リステアリルマルトヘプタオースなどを挙
げることができる。
測定方法としては、この反応基質に測定対象であるリノ
ｆ−ゼを作用させて糖類と脂肪酸に分解し、この系の変
化を定量すればよい。リパーゼの反応条件は当該ジノ９
−ゼの活性、至適−１全適温度、測定機器の感度などを
考慮して定めればよい。
ｆ−ゼを作用させて糖類と脂肪酸に分解し、この系の変
化を定量すればよい。リパーゼの反応条件は当該ジノ９
−ゼの活性、至適−１全適温度、測定機器の感度などを
考慮して定めればよい。
系の変化量は、本発明の反応基質が水溶性である特徴を
活かして糖類又は脂肪酸の生成量を比色定量する方法が
簡便な点で好都合である。
活かして糖類又は脂肪酸の生成量を比色定量する方法が
簡便な点で好都合である。
糖類は公知の比色定量法によシ定量すればよく、例えば
マルトースの場合には、マルターゼを作用させて生成す
るグルコースを乙ルコースオキシダーゼで酸化し、それ
によって生成する過酸化水素を４−アミノアンチピリン
−フェノール−パーオキシダーゼ法で比色定量すればよ
い◎ 脂肪酸の比色定量法としては、例えば遊離してくる脂肪
酸に、アシルＣｏＡシンセターゼ、ＣＯＡオキシダーゼ
及びＡ−オキシダーゼを順次作用させて前記の方法と同
様に赤色キノンイミンの生成量を比色定量する方法、ア
ルカンモノオキシゲナーゼ及びルプレドキシンレダクタ
ーゼを作用させてＮＡＪ）ＰＨ減少量を比色定量する方
法、アルカンモノオキシゲナーゼ及びチトクロムＰ−４
５０レダクターゼを作用させてＮＡＤＨの減少量を比色
定量する嘴辻−ｐＰｙか伯！田乎判ノ？−／ Ｊ−ぬル
斗禍、め薄方＾士法もすべて利用しうる。
マルトースの場合には、マルターゼを作用させて生成す
るグルコースを乙ルコースオキシダーゼで酸化し、それ
によって生成する過酸化水素を４−アミノアンチピリン
−フェノール−パーオキシダーゼ法で比色定量すればよ
い◎ 脂肪酸の比色定量法としては、例えば遊離してくる脂肪
酸に、アシルＣｏＡシンセターゼ、ＣＯＡオキシダーゼ
及びＡ−オキシダーゼを順次作用させて前記の方法と同
様に赤色キノンイミンの生成量を比色定量する方法、ア
ルカンモノオキシゲナーゼ及びルプレドキシンレダクタ
ーゼを作用させてＮＡＪ）ＰＨ減少量を比色定量する方
法、アルカンモノオキシゲナーゼ及びチトクロムＰ−４
５０レダクターゼを作用させてＮＡＤＨの減少量を比色
定量する嘴辻−ｐＰｙか伯！田乎判ノ？−／ Ｊ−ぬル
斗禍、め薄方＾士法もすべて利用しうる。
上記の方法において酵素を利用する場合には、す・や−
ゼの反応後に他の酵素を加えてさらに反応させてもよく
、全ての酵素等の試薬を予込加えておいて反応を連続的
に行なわせてもよい。また、定量方法もレートアッセイ
法によってもよく、終点法を利用してもよい。
ゼの反応後に他の酵素を加えてさらに反応させてもよく
、全ての酵素等の試薬を予込加えておいて反応を連続的
に行なわせてもよい。また、定量方法もレートアッセイ
法によってもよく、終点法を利用してもよい。
本発明の方法で測定しうるリパーゼの種類は特に制限さ
れるものではなく、ヒトその他各種動物の膵液、胃液、
血清、尿等の各種体液由来の１７ Ａ？−ゼ、ヒマ、丸
タネ菜の種子由来のす／ダーゼ、カビ、酵母、細菌等各
種微生物由来のリノ臂−ゼなどその種類を問わず測定で
きる◎ 本発明の方法は基質に特徴があシ、基質として水溶性の
ものを使用したことによって容易にかつ正確にソノ４−
ゼを比色定量することができた。
れるものではなく、ヒトその他各種動物の膵液、胃液、
血清、尿等の各種体液由来の１７ Ａ？−ゼ、ヒマ、丸
タネ菜の種子由来のす／ダーゼ、カビ、酵母、細菌等各
種微生物由来のリノ臂−ゼなどその種類を問わず測定で
きる◎ 本発明の方法は基質に特徴があシ、基質として水溶性の
ものを使用したことによって容易にかつ正確にソノ４−
ゼを比色定量することができた。
次に、本発明の方法に使用される糖脂肪酸エステルの合
成例を示す。
成例を示す。
合成例１
シュ／ ｏ −、ｘ、 Ｑ、 １モルｆｔノメチルホル
ムアｓｐ８００−に加え、さらに塩化ノ々ルミトイル０
．（）８モル及びピリジンＩＱＱＭを加えて室温で１４
時間反応させた。反応物を減圧下で乾燥し、シリカゲル
を用いたクロマトグラフィーで精製して６−Ｏ−バルミ
トイルシュクロースを得た。このものの融点は１６０〜
１６５℃でアリ、ペースト法で測定した赤外線吸収スペ
クトルは第１図に示す通りであった。
ムアｓｐ８００−に加え、さらに塩化ノ々ルミトイル０
．（）８モル及びピリジンＩＱＱＭを加えて室温で１４
時間反応させた。反応物を減圧下で乾燥し、シリカゲル
を用いたクロマトグラフィーで精製して６−Ｏ−バルミ
トイルシュクロースを得た。このものの融点は１６０〜
１６５℃でアリ、ペースト法で測定した赤外線吸収スペ
クトルは第１図に示す通りであった。
合成例２
塩化オレイル０．１モルをジメチルホルムアミド８ＱＯ
ｌｄに加え、さらにマルトース０．１２モル及びピリジ
ン１００ｍ／を加えて室温で１４時間反応させた。反応
物を減圧下で乾燥し、シリカゲルを用いたクロマトグラ
フィーで精製して６−０−オレイルマルトースを得た。
ｌｄに加え、さらにマルトース０．１２モル及びピリジ
ン１００ｍ／を加えて室温で１４時間反応させた。反応
物を減圧下で乾燥し、シリカゲルを用いたクロマトグラ
フィーで精製して６−０−オレイルマルトースを得た。
このものの融点は１２６〜１２８℃であった。
合成例３
マルトヘゲタす一ス５００１ｖ（０，３９ｍＭ）を８０
１のぎりジンに溶解し、これに塩化・９ルミトイル２１
４ タ（０，７８ｍＭ）の１．４−ジオキサン溶液を加
えて１００℃で５時間反応させた。反応液から溶媒をエ
バポレーターで留去し、固形物をジメチルホルムアミド
２０Ｍに溶解させた。この溶液にアセトン３０νを加え
、析出物ｔＦ別してアセトン１００ ｍｌで洗浄した。
１のぎりジンに溶解し、これに塩化・９ルミトイル２１
４ タ（０，７８ｍＭ）の１．４−ジオキサン溶液を加
えて１００℃で５時間反応させた。反応液から溶媒をエ
バポレーターで留去し、固形物をジメチルホルムアミド
２０Ｍに溶解させた。この溶液にアセトン３０νを加え
、析出物ｔＦ別してアセトン１００ ｍｌで洗浄した。
このものを減圧下で充分に乾燥して０−ジノ４ルミトイ
ルマルトへシタオシドを得た。融点は１０４〜１０８℃
であシ、イースト法で測定した赤外線吸収スペクトルは
第２図に示す通シであった。
ルマルトへシタオシドを得た。融点は１０４〜１０８℃
であシ、イースト法で測定した赤外線吸収スペクトルは
第２図に示す通シであった。
以下、実施例を示す。
実施例１
６−０−バルミトイルシュクロース５ ｍＭ、インベル
ターゼ２５００ Ｕ／ｌ、グルコースオキシダーゼ２０
００ Ｕ／ｌ、ノ母−オキシダーゼ４０００Ｕ／ｌ、４
−アミノアンチピリン０．５ ｍＭ及びフェノール６
ｍＭを含むｐ）Ｉ ｓ、 ２のトリス−ＨＣ／、緩衝液
１１にジノ９−ゼを含む検体１００ ｔｌｔを加えて３
７℃でｓｏｓｎｍにおける吸光度変化を測定した。尚、
基質を加えないはかは上記と同様にして吸光度を測定し
、この値をブランクとして差引いた。
ターゼ２５００ Ｕ／ｌ、グルコースオキシダーゼ２０
００ Ｕ／ｌ、ノ母−オキシダーゼ４０００Ｕ／ｌ、４
−アミノアンチピリン０．５ ｍＭ及びフェノール６
ｍＭを含むｐ）Ｉ ｓ、 ２のトリス−ＨＣ／、緩衝液
１１にジノ９−ゼを含む検体１００ ｔｌｔを加えて３
７℃でｓｏｓｎｍにおける吸光度変化を測定した。尚、
基質を加えないはかは上記と同様にして吸光度を測定し
、この値をブランクとして差引いた。
ジノ９−ゼ活性は次の式によシ算出した。
ΔＥ／ｍｉｎ ： １分間当シの吸光度の変化１２．０
Ｘ１０５： 赤色キノンイミン色素の分子吸光係数０．
１：検体量 １．１ ：反応総液量 １／２ ： Ｈ２０□２分子よ〕１分の赤色キノンイミ
ン色素が生成するための係数 得られた結果を次に示す。
Ｘ１０５： 赤色キノンイミン色素の分子吸光係数０．
１：検体量 １．１ ：反応総液量 １／２ ： Ｈ２０□２分子よ〕１分の赤色キノンイミ
ン色素が生成するための係数 得られた結果を次に示す。
Ａ １．７ Ｕ／Ａ １．９チ ０．８３ Ｕ／ｌ ３
．８チＢ １．７ ＃ ２．１１ （）、２７ ＃ ６
．９チＣ８，２１１，１１１，５１３，９％ 実施例２ ６−０−オレイルマルトース２０ｍＭ、α−グルコシダ
ーゼ３０００Ｕ／Ａ、グルコースオキシダーゼ２０００
Ｕ／ｌ、パーオキシダーゼ４０００Ｕ／ｌ、４−アミ
ノアンチピリン０．５ｍＭ及びフェノール６ ｍＭを含
むｐＨ８，２の緩衝液１ｖにリパーゼを含む検体５０μ
ｔを加えて３７℃で５０５馴における吸光度変化を測定
した。尚、基質を加えないほかは上記と同様にして吸光
度を測定し、この値をブランクとして差引いた。
．８チＢ １．７ ＃ ２．１１ （）、２７ ＃ ６
．９チＣ８，２１１，１１１，５１３，９％ 実施例２ ６−０−オレイルマルトース２０ｍＭ、α−グルコシダ
ーゼ３０００Ｕ／Ａ、グルコースオキシダーゼ２０００
Ｕ／ｌ、パーオキシダーゼ４０００Ｕ／ｌ、４−アミ
ノアンチピリン０．５ｍＭ及びフェノール６ ｍＭを含
むｐＨ８，２の緩衝液１ｖにリパーゼを含む検体５０μ
ｔを加えて３７℃で５０５馴における吸光度変化を測定
した。尚、基質を加えないほかは上記と同様にして吸光
度を測定し、この値をブランクとして差引いた。
ジノ９−ゼ活性は次の式によシ算出した。
０．０５：検体量
１．０５：反応総液量
測定結果を次に示す。
血清 本発明法 従来法
Ｄ １．２６Ｕ／ｌ Ｏ，３１Ｕμ
Ｅ ６．４３ ＃ １．２８ １
１？ １８．４ ＃ ４．１０ ＃
実施例３
０−ジパルミトイルマルトへゲタオシド２５ ｍＭ ％
アミラーゼ６０００ Ｕ／ｌ、マルターゼ（α−グルコ
シダーゼ）４０００Ｕ／ｌ、グルコースデヒドロゲナー
ゼ３０００ Ｕ／を及びＮＡＤＰＩ（０，２４ｍＭを含
む−８，２の緩衝液１プにリパーゼを含む検体５０μｔ
を加えて３７℃で３４０ ｎｍにおける吸光度変化を測
定した。尚、基質を加えない＃なかは上記と同様にして
吸光度を測定し、この値をブランクとして差引いた。
アミラーゼ６０００ Ｕ／ｌ、マルターゼ（α−グルコ
シダーゼ）４０００Ｕ／ｌ、グルコースデヒドロゲナー
ゼ３０００ Ｕ／を及びＮＡＤＰＩ（０，２４ｍＭを含
む−８，２の緩衝液１プにリパーゼを含む検体５０μｔ
を加えて３７℃で３４０ ｎｍにおける吸光度変化を測
定した。尚、基質を加えない＃なかは上記と同様にして
吸光度を測定し、この値をブランクとして差引いた。
リノや−ゼ活性は次の式によシ算出した。
６．２２Ｘ１０３： ＮＡＤＰＨの分子吸光係数測定結
果を次に示す。
果を次に示す。
血清 本発明法 従来法
Ｄ １．６７ ＶｔＯ，３１Ｕ／ｌ
Ｅ ７．０２＃ １．２８１
Ｆ ２２．３ ｚ ４．１０ ＃
実施例４
ノ４ルミトイルマルトース２５ ｒｎＭ、−、ＮＡＤＰ
Ｈ２０，２ｍＭ及びマルトース脱水素酵素２０００ Ｕ
／ｌを含むトリス−塩酸緩衝液（ｐＨｓ、ｏ 、 ５０
ｍＭ）ｌｄを３７℃に加温し、これにリパーゼを含む検
体５０μｔを加えて３４０ ｎｍにおける吸光度変化を
測定した。
Ｈ２０，２ｍＭ及びマルトース脱水素酵素２０００ Ｕ
／ｌを含むトリス−塩酸緩衝液（ｐＨｓ、ｏ 、 ５０
ｍＭ）ｌｄを３７℃に加温し、これにリパーゼを含む検
体５０μｔを加えて３４０ ｎｍにおける吸光度変化を
測定した。
すｉ＋−ゼ活性は実施例２と同じ式で算出した。
図面はいずれも本発明の測定方法に使用される糖脂肪酸
エステルの赤外線吸収ス（クトルである。 特許出願人 富士レビオ株式会社 代理人 弁理士田中政浩 手続補正書（方式） 昭和５９年８月１７日 特許庁長官 志 賀 学 殿 特願昭５９−８８５８９号 ２発明の名称 ＩＪ ｉ４−ゼ活性の測定方法 ３補正をする者 事件との関係 特許出願人 名称 富士レビオ株式会社 ４代理人 居所 〒１０４東京都中央区八丁堀三丁目２１番３−６
０７号電話（０３）５５５−００２２ 氏名 弁理士（８５１０）１）中 政 浩５補正命令の
日付 ７補正の内容 第１２頁第５行に記載された「である。」を以下の通り
に訂正する。 「であシ、第１図は５− Ｑ −ｔ９ルミトイルシュク
ロースについて、そして第２図は０−ツノ４ルミトイル
マルトへゲタオシドについていずれもペースト法で測定
して得られたものである。」
エステルの赤外線吸収ス（クトルである。 特許出願人 富士レビオ株式会社 代理人 弁理士田中政浩 手続補正書（方式） 昭和５９年８月１７日 特許庁長官 志 賀 学 殿 特願昭５９−８８５８９号 ２発明の名称 ＩＪ ｉ４−ゼ活性の測定方法 ３補正をする者 事件との関係 特許出願人 名称 富士レビオ株式会社 ４代理人 居所 〒１０４東京都中央区八丁堀三丁目２１番３−６
０７号電話（０３）５５５−００２２ 氏名 弁理士（８５１０）１）中 政 浩５補正命令の
日付 ７補正の内容 第１２頁第５行に記載された「である。」を以下の通り
に訂正する。 「であシ、第１図は５− Ｑ −ｔ９ルミトイルシュク
ロースについて、そして第２図は０−ツノ４ルミトイル
マルトへゲタオシドについていずれもペースト法で測定
して得られたものである。」
Claims (1)
- １ 糖類の水酸基に脂肪酸がエステル結合した水溶性の
化合物をリパーゼの反応基質として用いることを特徴と
するＩＪ ｉ４−ゼ活性の測定方法２ 糖類がアミン糖
、アセチルアミノ糖又は含硫黄糖を含むものである特許
請求の範囲第１項記載の測定方法
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8858984A JPS60233560A (ja) | 1984-05-02 | 1984-05-02 | リパ−ゼ活性の測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8858984A JPS60233560A (ja) | 1984-05-02 | 1984-05-02 | リパ−ゼ活性の測定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60233560A true JPS60233560A (ja) | 1985-11-20 |
Family
ID=13947016
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8858984A Pending JPS60233560A (ja) | 1984-05-02 | 1984-05-02 | リパ−ゼ活性の測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60233560A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0346912A2 (en) * | 1988-06-17 | 1989-12-20 | Toyo Boseki Kabushiki Kaisha | Sugar ester derivatives, reagents for measurement of hydrolase activity and methods for measurement of hydrolase activity |
| NL1003375C2 (nl) * | 1996-06-19 | 1997-12-23 | Inst Voor Agrotech Onderzoek | Werkwijze voor de verestering van koolhydraten. |
| WO1998012350A1 (de) * | 1996-09-19 | 1998-03-26 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verbessertes verfahren zur bestimmung von lipase |
| US6258796B1 (en) | 1996-11-20 | 2001-07-10 | The University Of Montana | Water soluble lipidated arabinogalactan |
| CN107648255A (zh) * | 2017-10-11 | 2018-02-02 | 西南大学 | 一种含麦芽七糖的有机抗菌剂及其制备方法和应用 |
-
1984
- 1984-05-02 JP JP8858984A patent/JPS60233560A/ja active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0346912A2 (en) * | 1988-06-17 | 1989-12-20 | Toyo Boseki Kabushiki Kaisha | Sugar ester derivatives, reagents for measurement of hydrolase activity and methods for measurement of hydrolase activity |
| NL1003375C2 (nl) * | 1996-06-19 | 1997-12-23 | Inst Voor Agrotech Onderzoek | Werkwijze voor de verestering van koolhydraten. |
| WO1998012350A1 (de) * | 1996-09-19 | 1998-03-26 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verbessertes verfahren zur bestimmung von lipase |
| US6258796B1 (en) | 1996-11-20 | 2001-07-10 | The University Of Montana | Water soluble lipidated arabinogalactan |
| US6303584B1 (en) | 1996-11-20 | 2001-10-16 | The University Of Montana | Water soluble lipidated arabinogalactan |
| CN107648255A (zh) * | 2017-10-11 | 2018-02-02 | 西南大学 | 一种含麦芽七糖的有机抗菌剂及其制备方法和应用 |
| CN107648255B (zh) * | 2017-10-11 | 2020-06-09 | 西南大学 | 一种含麦芽七糖的有机抗菌剂及其制备方法和应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH047190B2 (ja) | ||
| JPS60233560A (ja) | リパ−ゼ活性の測定方法 | |
| JP2807949B2 (ja) | α−アミラーゼ活性測定用試薬および測定方法 | |
| US4663287A (en) | Biologically active conjugates and their preparation and use | |
| US4855232A (en) | Method for production of glucose by use of transglucosidase | |
| JP3310008B2 (ja) | オリゴ糖酸化酵素、オリゴ糖酸化酵素の製造方法、オリゴ糖の測定方法、オリゴ糖酸の製造方法、アミラーゼ活性測定法及び新規微生物 | |
| JPS5931699A (ja) | α−アミラ−ゼ活性の測定法 | |
| Satomura et al. | Kinetics of human pancreatic and salivary α-amylases with carboxymethylamyloses as substrates | |
| Wang et al. | Immobilization of lipase on epoxy activated (1→ 3)-α-d-glucan isolated from Penicillium chrysongenum | |
| JP2542700B2 (ja) | デオキシマルトオリゴシド誘導体、これを有効成分とするα―アミラ―ゼ活性測定用試薬及びこれを用いたα―アミラ―ゼ活性の測定方法 | |
| Lin et al. | Immobilization of glucooligosaccharide oxidase of Acremonium strictum for oligosaccharic acid production | |
| Uchida et al. | New enzymatic synthesis of 63-modified maltooligosaccharides and their inhibitory activities for human α-amylases | |
| JPH1175895A (ja) | １，５−アンヒドログルシトールの定量法及び定量用試薬 | |
| EP0005867A1 (en) | An alpha-amylase assay, a reagent composition and a reagent system therefor | |
| JPH04229196A (ja) | α‐アミラーゼアイソザイム活性の分別定量法 | |
| JP2559400B2 (ja) | マルトオリゴ糖生成アミラ−ゼ及びその製造法 | |
| JPH04279596A (ja) | 新規オリゴ糖およびその製造法 | |
| JP2004222506A (ja) | α−グルカンからのセロビオ−スの製造法 | |
| JP3190537B2 (ja) | 新規マルトース１−エピメラーゼの製造方法 | |
| JPH0236238B2 (ja) | Arufuaaamiraazekatsuseisokuteishaku | |
| JPS61202687A (ja) | 新規マルトテトラオ−ス生成酵素およびその製造方法 | |
| JPH0676430B2 (ja) | α−アミラ−ゼ活性の新規測定法 | |
| JPH0420287A (ja) | アシルポリアミンオキシダーゼ、その製造法および用途 | |
| Cho | Kinetic behavior of glucoamylase, glucose oxidase and gluconolactonase in solution | |
| JPH05208989A (ja) | マルトオリゴ糖誘導体およびその製造法 |