JPS60227689A - アクリル酸エステル生産菌によるアクリル酸エステルの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 狭止分野： 本発明はアクリル酸エステル生産菌を用いたアクリル酸
エステルの製造方法、特に水酸基を有するアクリル酸エ
ステルの製造方法に関する。

従来技術： エステル合成をエステラーゼの逆反応で行う研究は、古
くから行われている。その一つに、リパーゼを用いる反
応において、酸成分とアルコール成分を種々変えたとき
の研究報告がある（達成。

岩井、奥付ら、　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ　ｅｔ　Ｂｉｏ
ｐｈｙｓｉｃａ　Ａｃｔａ＋５７５　（１９７９）　ｐ
、１５’６４６５）。そこでは、酸成分として酢酸、プ
ロピオン酸、醋酸をはじめステアリン酸、オレイン酸、
リンゴ酸、コハク酸などが検討され、アルコール成分と
しては１級アルコール。

１級ジオール、フェノール類、２級アルコール。

２級ジオール、３級アルコール、Ｉ！アルコールなどの
あらゆるアルコール類が検討されている。そこに使用さ
れているリパーゼ類は４種であり、それぞれの起源は八
ｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ＋　ｌ’ｌｈｉｚｏ
ｐｕｓｄｅｌｅｍａｒ、　Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｃａ
ｎｄｉｄｕｍ、　Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｃｙｃｌｏｐ
ｉｕｍである。そのうちの前二者が特に低分子量の酸に
対してもエステル合成能を有することが示されている。

しかし、いずれにしろ、この研究には酸成分として、ア
クリル酸が用いられていない。本発明者は上記報告に開
示されたリパーゼ（天野製薬■製および生化学工業側製
）を用いて検討したが、アクリル酸はいかなるアルコー
ル類ともエステル合成し得ないことを確認した。その他
の従来のエステル合成に関する報告においても酸成分に
アクリル酸を用いた反応は報告されていない。

アクリル酸とアルコールとのエステル合成により得られ
るアクリル酸エステルは、ビニル基を有するため１種々
の工業材料となり得る重合体を合成するための単量体と
して極めて有用である。例えば、このアクリル酸エステ
ルを他の単量体と共重合して得られる高分子は、粘着剤
、接着剤、およびフィルムなどとして用いられる。さら
に、また、このアクリル酸エステルが水酸基を有するの
で親水性を持つ官能基としても作用し、それより得られ
る重合体は易架橋性ポリマーとなり、接着剤、塗料、そ
の他の多くの用途を有しかつ新規な用途開発も期待され
る。このようなアクリル酸エステルの合成は、化学合成
により可能ではある。

しかし、化学合成によると１反応条件が過酷であるため
、そのための付帯設備とスペースと費用がかさむ。しか
も１作業環境が汚染されやすく環境公害の原因にもなる
。このエステル合成を微生物を用いた生物学的反応によ
り行うと、低温・低圧という温和な条件下で反応できし
かも基質特異性を有するため、環境汚染のおそれがない
うえに設備費なども安くつく。

発明の目的： 本発明の目的は、アクリル酸と二価アルコールとにより
水酸基を有するアクリル酸エステルを生産する新規な微
生物を用いて、生物学的反応によりアクリル酸エステル
を製造する方法を提供することにある。本発明の他の目
的は、生物学的反応により安全かつ安価にアクリル酸エ
ステルを製造する方法を提供することにある。本発明の
さらに他の目的は、アクリル酸エステル１生産菌を用い
て。

工業材料となり得る有用な重合体を合成するための単量
体としてのアクリル酸エステルを製造する方法を提供す
ることにある。

光尻ｑ要首： 本発明のアクリル酸エステルの製造方法は、アルカリ土
類金属に属する菌により、アクリル酸と一般式ＨＯＲＯ
Ｈ（ただし、Ｒは炭素数２〜６の直鎖のアルキレン基）
で表されるアルコールとから水酸基を有するアクリル酸
エステルを生産するもので、そのことにより上記目的が
達成される。

アルカリ土類金属菌はアルカリゲネス・フェーカリスで
あり、そのうちでも特に、アルカリゲネス・フェーカリ
スＴ８８３６株およびアルカリゲネス・フェーカリスＴ
Ｋ４９３５株のうちの少なくとも一方である。二価アル
コールとしては両末端に水酸基を有する炭素数２〜６の
直鎖状アルコールであり。

それはエチレングリコール、１・３ジヒドロキシプロパ
ン、１・４ジヒドロキシブタン、１・５ジヒドロキシペ
ンクンおよび１・６ジヒドロキシヘキサンである。

本発明のアクリル酸エステル製造方法を反応式％式％ の反応が行われる。

本発明のアクリル酸エステルの製造に用いられる微生物
は、化学工業原料を扱っている工場などの土壌（茨木市
、豊橋市）から分離・採集した新菌株である。この新菌
株は、後述する菌学的性状をもとにｒＢｅｒｇｅｙ’ｓ
　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆ　ＤｅｔｅｒｍｔｎａｔｉｖｅＢ
ａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ＋　８ｔｈ　ｅｄｉｔｏｒ、　
１９７４Ｊの細菌分類書を参考にして同定され、アルカ
リ土類金属に属する細菌であるところから、それぞれ、
アルカリゲネス・フェーカリス（八ｌｃａｌｉｇｅｎｅ
ｓ　ｆａｅｃａｌｉｅｓ）ＴＨ８３６株（受託番号：微
工研菌寄第７０８３号（ＦＥＲＭＰ−７０８３）　）お
よびアルカリゲネス・フェーカリス（Ａｌｃａｌｉｇｅ
ｎｅｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ）　ＴＫ４９３５　（受託番
号：微工研菌寄第７０８４号（ＦＥＲ門Ｐ−７０８４）
　）と命名された。

菌学的性質 本発明のアクリル酸エステルの製造に用いられるＡｌｃ
ａｌｉｇｅｎｅｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ　Ｔ１８３６株と
Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｆａｅｃａｌｉｓ　ＴＫ４９３
５株の菌学的性質を第１表に示す。

（以下余白） 状　側　州　状 　Ｏ ■　＠　、Ｃ）ｅ■■ 、？。

［株］◎ ＋　＋ １１１１１１１１１１１１１＋＋ ＋　＋ ＋　＋ １１１１１１１１１１１１１＋＋ １−」− Φ ［相］■■■　■　■◎■０■ ［株］■＠ 次に本発明に用いられる菌株をＡｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ
属に属する菌株であると同定した根拠を以下に示す。

本菌株ＴＩ（８３６株およびＴＫ４９３５株はいずれも
上記試験結果より「グラム陰性であり１分裂により増殖
する好気性細菌であり光合成によっては増殖しない」と
いう特徴を有する。このような細菌は。

Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ　Ｍａｎｕａｌによれば第７部に分類
されている。ここに属する科および属は次のようになる
。

１、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｄａｃｅａｅ科２、Δｚｏｔ
ｏｂａｃｔｅｒａＣｅａｅ科３、Ｒｈｙｚｏｂｉａｃｅ
ａｅ科 ４、Ｍｅｔｈｙｌｏｍｏｎａｄａｃｅａｅ科５、Ｈａｌ
ｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ科６、Ａｌｃａｌｉｇｅｎ
ｅｓ属 ７、Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ属 ８、ＢｒｕＣｅｌｌａ属 ９、　Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ属 １０、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ属 １１°Ｔｈｅｒｍｕｓ属 ７ これら１１の科と属の性状と９本菌株ＴＨ８８６株およ
びＴＫ４９３５株の砂状とを以下に比較する。

本菌株はいずれもＡｌ　ｃａ　Ｉ　ｉｇｅｎｅｓ属を除
＜１０の科・属とは第２表に示す菌学的性質において全
く異なる。

第　２　表 Ｎ （１８） 以上の結果から１本発明のアクリル酸エステルの製造に
用いられる菌株７０．８３６株およびＴＫ４９３５株は
Ａ　ｌ　ｃａ　ｌ　ｉ　ｇｅｎｅｓ属に属する細菌であ
ると同定される。次に本菌株の種を決定するためにこの
属の既知の４種と比較した結果を第４表に示す。

第４表 １ 本＋ｅ菌株は、いずれもＡｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ　ｆａ
ｅｃａｌｉｓとは、プロピオン酸と酪酸の資化性能を欠
く点が異（２２） なるにすぎず、他の特徴はすべてこれと一致する。

よって９本菌株をＡｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ　ｆａｅｃａ
ｌｉｓにきわめて返球 ←の菌株でありＡｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ　ｆａｅｃａｌ
ｉｓと同定した。

培養条件 培地としては格別である必要はなく、肉エキヌ。

酵母エキス、麦芽エキス、ペプトンなどの有機栄養源、
およびリン酸塩、マグネシウム、ナトリウム、カリウム
、マンガン、鉄などの無機栄養源等を適宜含有する通常
の培知でよい。

炭素源としては、炭素源資化性試験において基質トなっ
た各種アミノ酸、ＴＣＡサイクルメンバーの有機酸など
が用いられる。窒素源としては。

硝酸塩、亜硝酸塩およびアンモニウム塩などの無機窒素
やアミノ基の有機窒素などが用いられる。

培養温度ば２０°Ｃ〜３５°Ｃ好ましくは２５°Ｃ〜３
０°Ｃである。培養ＰＩ（は５〜８好ましくは６．１５
−ｍ−〜、７．５であり、１日〜３日間好気的に攪拌又
は振とうしながら培養を行なう。

反応組成 本発明のエステル反応は、このような培養条件（２３） のもとて本命用菌株を培養し、その休止菌体、菌体抽出
液（粗酵素液）、精製酵素、固定化菌体および固定化酵
素状態のうちの少なくとも一つを適当に選んで用いる。

本発明の水酸基を有するアクリル酸エステルの合成に必
要な反応系の基本組成は第５表に示される。なお、この
合成に当って媒体を用いる場合には水媒体とするのが一
般的である。

第　５　表 リン酸バツ−ｙ−ｙ−（ｐＨ８，０）　０．２Ｍアクリ
ル酸　１％（ｙ’ｖ） ジヒドロキシアルコール　１０％Ｃ”’ｖ）水 菌体もしくは菌体抽出液 菌体掻−よ−・び抽出液０添加量ば・、菌体懸濁液とし
て最終濃度力６６０１ｍ　ｔ７）’ｌ光度（ＯＤ６６０
）？−０，１以上１通常は１．０〜２０の範囲にある。

菌体抽出液は。

（２４） 菌体を超音波破砕機やフレンチプレスで処理して得られ
、　２８０ｎｍの吸光度（Ａ２８０）が０．１以上。

通常は０，５〜２０．０の範囲で用いられる。

反応Ｐ　Ｈは５〜９の範囲にあればよい。好ましくは６
５〜７．５である。

アクリル酸の使用可能な濃度は、０．１％（ｙ′ｖ）〜
５％（／ｖ）であり、好ましくは０．５％（Ｖ／ｖ）〜
２％（ｖ／ｖ）の範囲に選ばれる。アクリル酸の使用に
より反応系組成のｐＨが低下しアクリル酸の消費と共に
ｐＨが上昇する。このようなｐ　Ｈ変動を極小にし反応
系のｐ　Ｈが常時７前後になるようにするために本基本
組成ではバッファーとして０．２Ｍ　のリン酸バッファ
ーが用いられる。リン酸バッファーに代えて重炭酸−炭
酸Ｎａバッファー、トリス塩酸バッファーなどを用いる
こともできる。バッファー濃度も０．２　Ｍに限定され
るととはなく、使用されるアクリル酸量や反応速度など
に応じて適宜選択される。

前記二価アルコールは、酵素の安定化に悪影響を与える
ことがないため量的な制限は特にない。

［有］５） しかし、アクリル酸１モル当シ、少なくともＯ５５モル
の二価アルコールが用いられる。上記アルコールの使用
量の上限は前記のようにいくら多くてもよいが２通常０
５％（′ｌ／Ｖ）〜１０％（′！／ｖ）で用いられる。

モル比ではアクリル酸１モル当り通常０．５〜５０−ｒ
＝ｔｖ、　好ｔ　Ｌ　＜Ｂ　ｉ〜２０モルの二価アルコ
ールが用いられる。ジヒドロキシアルコールの添加量に
応じて生成する水酸基を有するアクリル酸エステルの量
も多くなる。反応温度は２０°Ｃ〜４０°Ｃの範囲内で
あれば良い。好ましくは２５°Ｃ〜３５°Ｃである。反
応時間は基質添加量によシ幾分異なるが約１０分以上で
あれば検出可能である。

反応終了後の系から菌体を遠心分離により除く。

その上澄液を直接ガスクロマトグラフあるいは液体クロ
マトグラフにかけ生成物質の検出定量を行なうか、もし
くはその上澄液を必要に応じてさらに熱処理（例えば１
００℃にて１分間）し夾雑する蛋白を除去してからガス
クロマトグラフもしくは液体クロマトグラフにかけ生成
物質の検出定量をＯ２６） 行なう。検出は次のような条件で行なわれる。

■　ガスクロマ１−グラフ 機種　日立１６３型ガスクロマトグラフ検出方法　ＦＩ
Ｄ カラムＴｅｎａｘ　ＧＣ（ｌ　ｍ　） カラム温度　２３０°Ｃ キャリアガス　窒　素 流量　３９ｍ１／ｍｉｎ ■　液体クロマトグラフ 機種　Ｖａｒｉａｎ　モデ／ｌ’　５０００カラム　Ｍ
ＣＨｌｏ 溶離液　水：アセトントリル−５０：　５０流量　１．
Ｑ　ｍ　Ｉ　／ｍｉ　ｎ。

波長　２００ｎｍ 例えば、アクリル酸と１・４ブタンジオールとの反応で
生成するヒドロキシブチルアクリレートについてはガス
クロマトグラフでは約５分後。液体クロマトグラフでは
約４分後にピークが現われる。

二価アルコールがエチレンダリコールでアレハヒドロキ
シエチルアクリレートが生成され、液体り（２７） ロマトグラフでは３．２分にピークが見られる。

生成物質の確認は次のようにして行なった。

１、　アクリル酸、二価アルコールおよび酵素の３者が
同時に存在したときだけ、生成物のピークが見られ（液
体クロマトグラフにて）、そのピークが時間とともに増
加する。

２、　ガスクロマトグラフおよび／もしくは液体クロマ
トグラフにより既知物質と同じリテンションタイムを示
しだ。（既知物質は化学合成にて入手した） ３．０Ｃ−ＭａＳＳ（日立製）によるＣＩ法により生成
物質が既知物質と同じ分子量であることを確認した。

生成されたアクリル酸エステルを採取するには常法の蒸
留もしくは溶剤抽出が用いられる。

Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ　ＴＨ８３
（３株のエステル化能を有する酵素の安定性について、
超音波破砕時（海上電気■のＴＡ４２８０振動子４２８
０８　．２〜４Ａにて（２８） 使用）の酵素の安定性を第１図に示す。図はソニック処
理時間とヒドロキシブチルアクリレートの生成反応活性
との関係を示している。活性は、１分間にヒドロキシブ
チルアクリレート１μｍｏ’ｌ　生成したとき１ユニツ
１−とした。第１図から本菌株ＴＨ８３６株のエステル
化酵素は比較的安定であることがわかる。

反応系組成とそこに用いる各種バツファーヲ下記のよう
に調整し１本菌株ＴＨ８３６株を用いたヒドロキシブチ
ルアクリレートの生成に及ぼすｐＨの影響を調べだ。そ
の結果を第２図に示す。図から酵素活性はｐＨ５〜１０
付近までであることがわが各種バッファー　１ｍ１ １０％アクリル酸　Ｑ、５ｍ１ １０％１・４ブタンジオ−）Ｖ　Ｑ、５ｍ’１酵素　Ａ
２８０　＝　１４０　３．Ｑｍｌ（２９） 緩　衝　液 緩衝液　調製ｐＨ反応系のｐＨ ５３，５ リン酸カリウム　６　４１ （ＩＭ）　７　５．４ ８６．３ ９７．１ 重炭酸−炭酸Ｎａ　ｉｏ　８．１ （ＩＭ）　１１　９．３ 実施例： 以下に本発明を実施例により具体的に説明する。

実施例１ （菌体懸濁液の調製） 肉エキス１０ｇ、ポリペブトｙ　ｌＱｇ、　ＮａＣ１５
ｇ　。

蒸留水１１．そしてｐＨ７，０の組成の肉汁液体培地１
００ｍ１を調製した。これを５００ｍ１容坂ロフラスコ
に入れ殺菌して後、とれにＡＩＣａｌｉｇｅｎｅｓ　ｆ
ａｅｃａｌｉｓＴＨ８３６株を植菌した。これを３０°
Ｃにて２４時時間表う培養した。この培養液を遠心分離
（１０，０００（８０） ｒｐｍ、　ｌＱｍｉｎ、）　Ｌ、沈澱した菌体をｐＨ７
゜０のリン酸バッファー０．０５Ｍにて１回洗浄した。

この菌体を同じバッファーにて０Ｄ６６０＝１０．０に
なるように希釈し、これを菌体懸濁液とした。

（粗酵素液の調製） 得られた菌体懸濁液を海上電気製超音波破砕機にて氷冷
水で冷却しつつ２０分間破砕した。これを遠心分離（１
５，００Ｏｒｐｍ　、　３０分間）シ、その上澄液を粗
酵素液とした。

（反応組成） 次の反応組成にて３０°Ｃで反応し、得られた生成物を
ガスクロマトグラフを用いて分析した。

ＩＪ　７酸バツフア　−ＩＭ（ｐ）Ｉｇ、ｏ　）　０．
２　ｍｌアクリル酸　１０％水溶液（Ｙ’ｖ）　０．１
　ｍ１１・４　ブタンジオール　各種濃度　Ｑ、１ｍｌ
粗酵素液　Ａ２８Ｏ−１４，００，６ｍ１１・４ブタン
ジオールの濃度は最終濃度で１０．０％（文ｖ）　、５
．０％（ｙｖ）、ａ、ｏ％（％）、　１．０％ｆｆｖ）
　、　０．５％ｌＪ’ｖ）（３１） としだ。

（結果） ■・４　ブタンジオール濃度のエステル生成におよぼす
影響を調べた。その結果を第３図に示す。

エステル生成量は対アクリ）し醸成率（モル％）で表示
される。■・４ブタンジオ−）ｖ量が多くなるにつれ生
成するヒドロキシブチルアクリレ−１−の量も多くなる
ことがわかる。また、アクリル酸１０％（最終濃度）と
１・４ブタンジオ−／ｌ’ｌＯ％　（最終濃度）との（
１：１の）反応でもジアクリレートの生成は生成アクリ
ル酸エステルの１％以下であった。しかし、アクリル酸
と二価アルコールとの比が１：２以上になるとジアクリ
レートはまったく生成しなかった。化学合成においては
アクリル酸と二価アルコールとを１：１で反応させると
。

生成したアクリル酸エステルに対し５〜１５％のジアク
リレートが生成する。ジアクリレートは重合時の反応系
をゲル化させるため、それが生成しないようにすること
が必要である。化学合成ではそれは極めてむつかしい。

それゆえ９重合時の仕（８２） 込み濃度を低くおさえねばならないという欠点があった
。本発明のエステル反応においてはジアクリレートの生
成は微量もしくは皆無であるだめ。

このような問題はない。

実施例２ 実施例１で示した培地にて同様にＡｌｃａｌ　ｉｇｅｎ
ｅｓｆａｅｃａｌｉｓ　ＴＨ８３６株とＡｌｃａｌｉｇ
ｅｎｅｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ　ＴＫ４９３５株をそれぞ
れ培養した。得だ各菌体を０Ｄ６６０−１０．０になる
ように０．０５Ｍのリン酸バッファー（ｐＴ（７，０）
にて、菌体懸濁液を調製した。との菌体懸濁液を実施例
１と同様に処理して粗酵素液を調製した。この菌体懸濁
液もしくは市販の酵素液を用いて次の反応組成にて３０
°Ｃで２時間反応を行った。市販のリパーゼとしては、
　Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓに属する糸状菌から生産され
たリパーゼ（リパーゼＡＰ二天野製薬■）およびＭｕｃ
ｏｒ　に属する糸状菌から生産されたリパーゼ（リパー
ゼＭ−ＡＰ　：　大野製本Ｃす）を用いた。

以下余白 （Ｒ３） リン酸バッファー　１Ｍ（ｐＨ８，０）　９２ｍ１アク
リル酸　１Ｏ％水溶液（吊り　Ｑ、１ｍｌエチレングリ
コールまたは１・４ブタンジオールまだは１・６ヘキサ
ンジオール　１００％　Ｑ、１ｍｌ菌体懸濁液まだは粗
酵素溶液　Ｑ、５ｍｌ市販リパーゼの酵素溶液濃度は８
ｍｇ／ｍ＋でやった。１・６　ヘキサンジオールの使用
量は０．１ｇであった。この場−合には反応系の固形濃
度を調整する意味で水Ｑ、１ｍｌを系にさらに添加した
。生成物質を液体クロマトグラフもしくはガスクロマト
グラフで確認した。いずれの反応系においてもジアクリ
レート生成は検出されなかった。結果を第６表に示す。

以下余白 （ＱＡ） 第６表 実施例３ 実施例１と同様にして得たＴＨ１６株およびＴＫ４９３
５株の培養菌体を遠心分離後、０．０５Ｍ　（ｐＨ７，
０）のリン酸バッファーにて０Ｄ６６０が１０．０の菌
体懸濁液を調製した。この菌体懸濁液に３倍量のアセト
ン（−２０°Ｃ）を加え、１０分間攪拌した後遠心分離
（１０，００Ｏｒｐｍ、　１０分）しだ。沈澱した菌体
をさらにアセトンにて２回洗浄した。これを吸引式デシ
ケータ中にて完全に乾燥し、アセトンドライ菌体を得だ
。この菌体を用いて反応を行なった。

（３５） アクリル酸　１０％水溶液ｆｆｖ）　０．１　ｍ　１１
．４ブタンジオ−／ｌ’　１００％　Ｑ、１ｍｌ水　。

（ｉｍｌ アセトンドライ菌体　２Ｑｍｇ 反応は３０′ｃにて２時間行なった。その結果。

対アクリル酸収率（モル％）はＴＨｇ３６株では４．２
％、そしてＴＫ４９３５株では４，５％であった。

実施例４ 実施例１と同様にして得たＴＨ８３６株の粗酵素液を第
７表に示したように常法に従って精製し。

比活性が４０倍になった帥ｋ１５精製酵素を得た。

以下余白 （３６） この活性は、アクリル酸と１・４ブタンジオールとの反
応におけるヒドロキシブチルアクリレートの生成によっ
て評価された。

次にこの辞父精製酵素をセファロース４ＢにＣＮＢｒ活
性化法（ＲｏＡｘｅｎ　、　Ｎａｔｕｒｅ、　２．１４
．　１３０２（１９６７））で固定化した。得られた固
定化酵素を内径１２〃ｌπ長さ３０ＣｍＯカラムに詰め
、上部から下記の組成の反応液をＬｏａｔ／１時間の流
速で流した。

その結果、″Ａアクリル酸当り１モル％の収率でヒドロ
キシブチルアクリレートが生成された。

リン酸バッファー　ＬＭ（ＰＨ８，０）　１００ｍ１ア
クリル酸　１０％水溶液（Ｙ’ｖ）　５Ｑｍ１１・４ブ
タンジオール　１００％　５０ｍ１水　３００ｍ１ 実施例５ 実施例１と同様にして得たＴＥ１０１株およびＴＥ４９
３５株の菌体懸濁液および粗酵素液をそれぞれ用い９次
の反応系のもとてジアクリレートの（３８） 加水分解能を調べた。

反応組成　添加量 １ル酸バッフｙ−ＩＭ（ｐｌ＋８．０）　０．２ｍｌシ
しトロキシアクリレート　０．２　％　０．２ｍｌ菌体
懸濁液　０Ｄ６６０＝１０．０　０．６ｍｌもしくは粗
酵素易　０ｎ２８０＝１５．０　（０，６ｍ１）上記反
応系を３０℃にインキュベートするとジヒドロキシアク
リレートは５〜１０時間のうちに消失し。

それに対応するアクリル酸エステルとアクリル酸とが生
成した。

発明の効果： 本発明のアクリル酸エステルの製造方法では。

菌株へｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ　ＴＩ
＋８３６およびＴＥ４９３５を用いて、アクリル酸と二
価アルコールとを含有する反応系から水酸基を有するア
クリル酸エステルを製造蓄積させることができる。エス
テル化に９ 必要な酵素は、培地の種類に無関係に、菌体増殖に比例
して生産される。この生成物アクリル酸エステルはビニ
ル基を有するため、工業材料となりうる重合体を合成す
るための単量体として極めて有用である。この生成物を
他の既知単量体と共重合して得られる高分子は粘着剤、
接着剤、フィルムなどとして用いられうる。しかも、こ
の生成物は水酸基を有するため、親水性をもちしかも官
能基としても作用するので、他の多くの用途に利用され
うる。

さらに２本発明のエステル反応において、ジアクリレー
トがほとんど生成されない。ジアクリレートが系内に生
成されなければ２重合反応中にゲル化が起こらず、した
がってエステル反応出発物質の高濃度仕込みが可能とな
る。その結果、新規な特徴をもつ高分子を得ることも可
能である。微量ながらジアクリレートが系内に生成され
ても。

本菌株はいずれもこれに対応するアクリル酸エステルと
アクリル酸とに加水分解する能力を有するという利点が
ある。

０

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明のアクリル酸エステルの製造に用いられ
る菌株へＩｃａｌｉｇｅｎｅｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ　Ｔ
Ｅ８３６のエステル化酵素の安定性を示す図、第２図は
同じ＜　Ｔｌ（８３６株のエステル化酵素のｐＨによる
影響を示す図、第３図は同じ＜　７１１８３６株のエス
テル生成能の１・４ブタンジオ一ル濃度による影響を示
す図である。 以上 代理人　弁理士　山木秀策 １ ■（・　♀１ｑ了

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、アルカリ土類金属に属する菌により、アクリル酸と
   一般弐ＨＯＲＯＨ（ただし、Ｒは炭素数２〜６の直鎖の
   アルキレン基）で表される二価アルコールとからアクリ
   ル酸エステルを生産する。 微生物によるアクリル酸エステルの製造方法。 ２、前記アルカリ土類金属菌がアルカリゲネス・フェー
   カリスである特許請求の範囲第１項に記載の製造方法。 ３、前記アルカリゲネス・フェーカリスがアルカリゲネ
   ス・フェーカリスＴＨＢ３６株およびアルカリゲネス・
   フェーカリスＴＫ４９３５株のうちの少なくとも一方で
   ある特許請求の範囲第２項に記載の製造方法。