JPS60220859A - 過酸化水素の定量方法 - Google Patents
過酸化水素の定量方法Info
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- JPS60220859A JPS60220859A JP7154884A JP7154884A JPS60220859A JP S60220859 A JPS60220859 A JP S60220859A JP 7154884 A JP7154884 A JP 7154884A JP 7154884 A JP7154884 A JP 7154884A JP S60220859 A JPS60220859 A JP S60220859A
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- C09B11/12—Amino derivatives of triarylmethanes without any OH group bound to an aryl nucleus
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- B41M5/1366—Organic colour formers, e.g. leuco dyes characterised solely by tri (aryl or hetaryl)methane derivatives
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- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
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- C12Q1/28—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving peroxidase
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、トリフェニルメタン誘導体を発色成分として
用いる過酸化水素の定量法に於て、感度を調節する目的
でアジ化物を用いる過酸化水素の定量方法に関する。
用いる過酸化水素の定量法に於て、感度を調節する目的
でアジ化物を用いる過酸化水素の定量方法に関する。
酵素を用いて、物質の量を定量しようとする酵素分析法
は、その特異性及び簡易迅速性がすぐれているため、体
液、動物臓器、植物１食品などの分析に広く利用されて
おり、特に血清成分を測定する臨床化学分析に於ては種
々の酵素分析法が開発され、採用されている。これら酵
素分析法のなかでも、オキシダーゼの作用により生成す
るＲ２０゜全ペルオキシダーゼ（、ＰＯＤ ）と発色成
分である被酸化性呈色試薬を用いてこれを発色系に導き
、その呈色を比色定量する方法が、コレステロール。
は、その特異性及び簡易迅速性がすぐれているため、体
液、動物臓器、植物１食品などの分析に広く利用されて
おり、特に血清成分を測定する臨床化学分析に於ては種
々の酵素分析法が開発され、採用されている。これら酵
素分析法のなかでも、オキシダーゼの作用により生成す
るＲ２０゜全ペルオキシダーゼ（、ＰＯＤ ）と発色成
分である被酸化性呈色試薬を用いてこれを発色系に導き
、その呈色を比色定量する方法が、コレステロール。
リン脂質、尿酸、グルコース、クレアチノ、トリグリセ
ライド等の測定や血清酵素の活性測定などに用いられて
いる。かかる目的に用いられる被酸化性呈色試薬として
は、４−アミノアンチピリンと、フェノール系化合物、
ナフトール系化合物又はアニリン系化合物との組合せ試
薬、３−メチルベンゾチアゾリノンヒドラゾン（ＭＢＴ
Ｈ） トアニリノ系化合物との組合せ試薬、２・２′−
アジノビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホ
ン酸） （ＡＢＴＳ ） 、ロイコメチレンブルー誘導
体などの試薬があり、測定する過酸化水素濃度に応じて
それぞれ使い分けられている。
ライド等の測定や血清酵素の活性測定などに用いられて
いる。かかる目的に用いられる被酸化性呈色試薬として
は、４−アミノアンチピリンと、フェノール系化合物、
ナフトール系化合物又はアニリン系化合物との組合せ試
薬、３−メチルベンゾチアゾリノンヒドラゾン（ＭＢＴ
Ｈ） トアニリノ系化合物との組合せ試薬、２・２′−
アジノビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホ
ン酸） （ＡＢＴＳ ） 、ロイコメチレンブルー誘導
体などの試薬があり、測定する過酸化水素濃度に応じて
それぞれ使い分けられている。
最近、上記呈色試薬のほかに、高感度の被酸化性呈色試
薬としてトリフェニルメタン誘導体が開発され、実用面
への応用が期待されている。この呈色剤は呈色波長が６
００１ｒ１１以上の長波長側にあり、分子吸光係数も７
万以上と太きく、シかも呈色後の経時的褪色がほとんど
ないなど従来の被酸化性呈色試薬と比べてすぐれた長所
を有している。しかしながら、高感度である為に、却っ
てそれが実用上障害になる場合もある。即ち、高感度で
ある為にその用途が超微量の過酸化水素の定量という狭
い測定範囲に限定され、例えば、４−アミンアンチピリ
ン−フェノール系程度の感度で充分であるような過酸化
水素濃度試料の測定では、試料採取量を超微量（例えば
１０μを以下）にしなければならないので計量誤差が大
きくなり測定値のバラツキの原因となったり、又、試料
採取誤差金小さくするためには試料を予め希釈する操作
を行う必要がある等実用上の問題点を有する。そこで、
呈色波長が長波長側にあり、呈色後の経時的褪色が殆ど
ないなどの長所をもつトリフェニルメタン誘導体の感度
を、下は５，０００位から上は１０万以上の高感度まで
広い範囲にわたって調節できる方法があればその応用範
囲は飛躍的に広くなり、従来の発色剤にみられないメリ
ットが期待できることになる。
薬としてトリフェニルメタン誘導体が開発され、実用面
への応用が期待されている。この呈色剤は呈色波長が６
００１ｒ１１以上の長波長側にあり、分子吸光係数も７
万以上と太きく、シかも呈色後の経時的褪色がほとんど
ないなど従来の被酸化性呈色試薬と比べてすぐれた長所
を有している。しかしながら、高感度である為に、却っ
てそれが実用上障害になる場合もある。即ち、高感度で
ある為にその用途が超微量の過酸化水素の定量という狭
い測定範囲に限定され、例えば、４−アミンアンチピリ
ン−フェノール系程度の感度で充分であるような過酸化
水素濃度試料の測定では、試料採取量を超微量（例えば
１０μを以下）にしなければならないので計量誤差が大
きくなり測定値のバラツキの原因となったり、又、試料
採取誤差金小さくするためには試料を予め希釈する操作
を行う必要がある等実用上の問題点を有する。そこで、
呈色波長が長波長側にあり、呈色後の経時的褪色が殆ど
ないなどの長所をもつトリフェニルメタン誘導体の感度
を、下は５，０００位から上は１０万以上の高感度まで
広い範囲にわたって調節できる方法があればその応用範
囲は飛躍的に広くなり、従来の発色剤にみられないメリ
ットが期待できることになる。
本発明者らはこの要望に応えるべく鋭意研究の結果、ト
リフェニルメタン誘導体とアジ化物を併用することによ
り試薬溶液の防腐効果と併せて発色感度の調節が可能と
なること全見出し本発明全完成するに到った。
リフェニルメタン誘導体とアジ化物を併用することによ
り試薬溶液の防腐効果と併せて発色感度の調節が可能と
なること全見出し本発明全完成するに到った。
即ち、本発明は、下記一般式（１）で表わされるトリフ
ェニルメタン誘導体を発色成分として用いる過酸化水素
の定量法に於て、感度を調節する目的でアジ化物を用い
ることを特徴とする過酸化水素の定量方法である。
ェニルメタン誘導体を発色成分として用いる過酸化水素
の定量法に於て、感度を調節する目的でアジ化物を用い
ることを特徴とする過酸化水素の定量方法である。
２
〔式中、Ｒ１＋ Ｒ２ｐ ＲＲ＋ Ｒ４は低級アルキル
基奮表わし、夫々同じであっても異っていても良く、ｘ
、 、 ｘ、はどちらも−〇 （ＣＨｔ ） ｎ Ｓ
Ｏｎ Ｍ＋ （但し、Ｍｌは水素又はアルカリ金属イオ
ン又はＮＨ，’に示し、ｎは２〜４の整数を示す。）を
示すか、又はどちらか一方が−ｏ（ｃｕｔ ）ｎｓｏ、
Ｍｌ （但し、Ｍｌ 、 ｎは前記と同じ）又は−８ｏ
、Ｍ２（但し、Ｍ２は水素又はアルカリ金属イオン又は
ＮＨ： ｋ示す。）を示し、地表が水素を示す〕アジ化
物、特にアジ化ナトリウムは一般に防腐剤として用いら
れており、又、カタラーゼ、ペルオキシダーゼ、ラッカ
ーゼ等の重金属酵素に対する阻害剤としても有名である
。
基奮表わし、夫々同じであっても異っていても良く、ｘ
、 、 ｘ、はどちらも−〇 （ＣＨｔ ） ｎ Ｓ
Ｏｎ Ｍ＋ （但し、Ｍｌは水素又はアルカリ金属イオ
ン又はＮＨ，’に示し、ｎは２〜４の整数を示す。）を
示すか、又はどちらか一方が−ｏ（ｃｕｔ ）ｎｓｏ、
Ｍｌ （但し、Ｍｌ 、 ｎは前記と同じ）又は−８ｏ
、Ｍ２（但し、Ｍ２は水素又はアルカリ金属イオン又は
ＮＨ： ｋ示す。）を示し、地表が水素を示す〕アジ化
物、特にアジ化ナトリウムは一般に防腐剤として用いら
れており、又、カタラーゼ、ペルオキシダーゼ、ラッカ
ーゼ等の重金属酵素に対する阻害剤としても有名である
。
しかしながら、本発明に於ては、トリフェニルメタン誘
導体とアジ化物全併用することにより、従来アジ化物に
於て知られていなかった効果、即ち、トリフェニルメタ
ン誘導体の発色感度を調節する効果が得られること？新
たに見出し、それによりトリフェニルメタン誘導体の使
用範囲が超微量物質の定量に限定されることなく、その
被酸化性発色試薬として優れた特性、即ち呈色波長が長
波長側にあり、且つ呈色後の経時的褪色が殆どな素反応
及び発色速度への影響は全くない。
導体とアジ化物全併用することにより、従来アジ化物に
於て知られていなかった効果、即ち、トリフェニルメタ
ン誘導体の発色感度を調節する効果が得られること？新
たに見出し、それによりトリフェニルメタン誘導体の使
用範囲が超微量物質の定量に限定されることなく、その
被酸化性発色試薬として優れた特性、即ち呈色波長が長
波長側にあり、且つ呈色後の経時的褪色が殆どな素反応
及び発色速度への影響は全くない。
本発明に用いられるトリフェニルメタン誘導体としては
例えば、ロイコ色素として従来から公知のロイコマラカ
イトグリーン、ロイコクリスタルヴアイオレットの他、
特開昭５６−２６１９９号公報記載のビス（ｐ−ジエチ
ルアミノフェニル）２−スルホフェニルメタン（以下、
ＢＳＰＭと略称する。）本発明者らが先に特許出願した
ビス（ｐ−ジエチルアミノフェニル）４−スルホプロポ
キシフェニルメタンナトリウム塩（以下、ＢＳｐｒｏＰ
Ｍと略称する。）、及びビス（ｐ−ジエチルアミンフェ
ニル）３．４−ジスルホプロポキシフェニルメタンジナ
トリウム塩（以下、Ｂ Ｓ ｄｉｐｒｏ ＰＭと略称す
る。）などがあるがこれらに限定されるものでないこと
は云うまでもない。
例えば、ロイコ色素として従来から公知のロイコマラカ
イトグリーン、ロイコクリスタルヴアイオレットの他、
特開昭５６−２６１９９号公報記載のビス（ｐ−ジエチ
ルアミノフェニル）２−スルホフェニルメタン（以下、
ＢＳＰＭと略称する。）本発明者らが先に特許出願した
ビス（ｐ−ジエチルアミノフェニル）４−スルホプロポ
キシフェニルメタンナトリウム塩（以下、ＢＳｐｒｏＰ
Ｍと略称する。）、及びビス（ｐ−ジエチルアミンフェ
ニル）３．４−ジスルホプロポキシフェニルメタンジナ
トリウム塩（以下、Ｂ Ｓ ｄｉｐｒｏ ＰＭと略称す
る。）などがあるがこれらに限定されるものでないこと
は云うまでもない。
アジ化物としてはアジ化水素のアルカリ塩、アルカリ土
類金属塩、その他の金属塩のいずれでもよいが、通常は
アジ化ナトリウムが好ましく用いられる。その濃度は発
色試液中０．００１％以上であれば発色感度低下の効果
が認められるが、通常は０、Ｏ１〜０．５％が好ましく
用いられる。例えば、Ｂ Ｓ ｄｉｐｒｏ ＰＭではそ
の発色試液中にアジ化す） ＩＪウム０．２％を添加す
ることにより発色感度は最高１６５チまで低下し、しか
も検量線は原点を通る直線となる。又、本発明に於ては
アジ化物の添加量を適宜選択することにより、発色感度
を好ましい程度に適宜調節することが可能である。
類金属塩、その他の金属塩のいずれでもよいが、通常は
アジ化ナトリウムが好ましく用いられる。その濃度は発
色試液中０．００１％以上であれば発色感度低下の効果
が認められるが、通常は０、Ｏ１〜０．５％が好ましく
用いられる。例えば、Ｂ Ｓ ｄｉｐｒｏ ＰＭではそ
の発色試液中にアジ化す） ＩＪウム０．２％を添加す
ることにより発色感度は最高１６５チまで低下し、しか
も検量線は原点を通る直線となる。又、本発明に於ては
アジ化物の添加量を適宜選択することにより、発色感度
を好ましい程度に適宜調節することが可能である。
以上の如く、本発明は、過酸化水素をペルオキシダーゼ
（ＰＯＤ ）とトリフェニルメタン誘導体を用いて発色
系に導き、その呈色を比色定量することにより過酸化水
素全定量する過酸化水素の定量法に於て、アジ化物を併
用することにより、酵素反応及び発色速度に影響を与え
ることなく発色感度を適宜調節することが可能となり、
トリフェニルメタン誘導体の使用範囲を超微量物質の定
量のみならず、その被酸化性呈色試薬として優れた特性
、即ち呈色波長が長波長側にあり、且つ呈色後の経時的
ネ退色が殆どないなどの特性を生かして臨床化学分析等
、幅広い用途への応用を可能ならしめたものであり、生
体試料、特に血液や尿などの体液中の微量成分の酵素法
（Ｈ２０２生成系）による測定に於て極めて有効な測定
法を提供するものであって斯業に貢献するところ甚だ大
なるものである。
（ＰＯＤ ）とトリフェニルメタン誘導体を用いて発色
系に導き、その呈色を比色定量することにより過酸化水
素全定量する過酸化水素の定量法に於て、アジ化物を併
用することにより、酵素反応及び発色速度に影響を与え
ることなく発色感度を適宜調節することが可能となり、
トリフェニルメタン誘導体の使用範囲を超微量物質の定
量のみならず、その被酸化性呈色試薬として優れた特性
、即ち呈色波長が長波長側にあり、且つ呈色後の経時的
ネ退色が殆どないなどの特性を生かして臨床化学分析等
、幅広い用途への応用を可能ならしめたものであり、生
体試料、特に血液や尿などの体液中の微量成分の酵素法
（Ｈ２０２生成系）による測定に於て極めて有効な測定
法を提供するものであって斯業に貢献するところ甚だ大
なるものである。
以下に本発明を実施例により更に具体的に説明するが、
本発明はこれらに限定されるものではない。
本発明はこれらに限定されるものではない。
実施例Ｉ Ｈ，Ｏ，定量法
（１） 試薬の調製
■ 発色試液
０．０５Ｍリン酸緩衝液（ＰＨ７，０）にＢ Ｓ ｄｉ
ｐｒｏ ＰＭ Ｏ，０５ｍｙＡｅｊ／ｌペルオキシダー
ゼ３．０００ Ｕ／ｌ 、アジ化ナトリウム０．２％の
濃度になるように溶解して発色試液とする。
ｐｒｏ ＰＭ Ｏ，０５ｍｙＡｅｊ／ｌペルオキシダー
ゼ３．０００ Ｕ／ｌ 、アジ化ナトリウム０．２％の
濃度になるように溶解して発色試液とする。
■ Ｈ２Ｏ２標準液
１５ｍｆ／ｌ、３０■／ｌ、４５■／ｌ、６０■／ｌ、
７５■／ｌの各濃度のＨ２Ｏ２水溶液を調製する。
７５■／ｌの各濃度のＨ２Ｏ２水溶液を調製する。
（２） 測定操作
各濃度のＨ２Ｏ２標準液を夫々２０μｔとり、発色試液
３−を加えて３７℃恒温槽中ｌＯ分間加温後、試薬ブラ
ンクを対照として６２Ｑｎｍ［おける吸光度を測定する
。
３−を加えて３７℃恒温槽中ｌＯ分間加温後、試薬ブラ
ンクを対照として６２Ｑｎｍ［おける吸光度を測定する
。
検量線を第１図に示す。検量線は原点７通る直線であり
、Ｈ２Ｏ２濃度１５・ｍｙ／ｌのときの吸光度は、アジ
化ナトリウム金用いない参考例１に於ける対応する値の
１６５％である。
、Ｈ２Ｏ２濃度１５・ｍｙ／ｌのときの吸光度は、アジ
化ナトリウム金用いない参考例１に於ける対応する値の
１６５％である。
参考例ｌＨ２Ｏ２定量法
（１）試薬の調製
■ 発色試練
実施例１の発色試液組成に於て、アジ化す） ＩＪウム
を除いた組成の発色試液を調製する。
を除いた組成の発色試液を調製する。
■ Ｈ２Ｏ２標準液
実施例１に同じ。
（２）測定操作
実施例１と同様にして吸光度音測定する。
検量線を第１図に示す。
実施例２ 総コレステロールの定量法
（１） 試薬の調製
■ 発色試液
０．１ Ｍ トリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７，０） ＫＢ
ＳｄｉｐｒｏＰＭ Ｏ，０５ｍｍｏｔ／ｌ、ウリカーゼ
３００Ｕ／ｌ 、コレステロールエステラーゼ１，００
０Ｕ／ｌ 、コレステロールオキシダーゼ１５０Ｕ／ｌ
、ペルオキシダーゼ３，０００ Ｕ／ｌ 、アジ化す
ト リ ウ ム ０．２ ％ 、ト リ ト ン Ｘ
−１０００，１５％になるように溶解して発色試液とす
る。
ＳｄｉｐｒｏＰＭ Ｏ，０５ｍｍｏｔ／ｌ、ウリカーゼ
３００Ｕ／ｌ 、コレステロールエステラーゼ１，００
０Ｕ／ｌ 、コレステロールオキシダーゼ１５０Ｕ／ｌ
、ペルオキシダーゼ３，０００ Ｕ／ｌ 、アジ化す
ト リ ウ ム ０．２ ％ 、ト リ ト ン Ｘ
−１０００，１５％になるように溶解して発色試液とす
る。
■ コレステロール標準液
１００ ｑ／ｄｉ 、 ２００ ｍ９７ｄｌ、 ３００
１ＮＩ／ｄｉ 、４００■／ｄｌ 、 ５００■／ｄｉ
、各濃度のコレステロールのイソプロパツール溶液を
調製する。
１ＮＩ／ｄｉ 、４００■／ｄｌ 、 ５００■／ｄｉ
、各濃度のコレステロールのイソプロパツール溶液を
調製する。
（２）測定操作
各濃度のコレステロール標準液を夫々２０μｔとり、発
色試液３ｍ１．’（ｊ加えて３７℃恒温槽中１０分間加
温後、試薬ブランクを対照として波長６２０ｎｍにおけ
る吸光度全測定し検量線を作成する。
色試液３ｍ１．’（ｊ加えて３７℃恒温槽中１０分間加
温後、試薬ブランクを対照として波長６２０ｎｍにおけ
る吸光度全測定し検量線を作成する。
検量線を第２図に示す。検量線は原点を通ル直線となり
、コレステロール濃度２００ ｍｆ／ｄｌで０．２９０
の吸光度全示し、通常の光度計による測定に適している
。
、コレステロール濃度２００ ｍｆ／ｄｌで０．２９０
の吸光度全示し、通常の光度計による測定に適している
。
参考例２ 総コレステロールの定量法
（１）試薬の調製
■ 発色試電
実施例２の発色試液組成に於て、アジ化す） ＩＪウム
を除いた組成の発色試液を調製する。
を除いた組成の発色試液を調製する。
■ コレステロール標準液
実施例２に同じ。
（２）測定操作
実施例２と同様にして吸光度音測定する。
検量線を第２図に示す。検量線は原点を通る直線になる
が、コレステロール濃度２００ ｍｆ／ｄｉで吸光度０
．７３１と高値であり、対数目盛を用いた、通常の光度
計では精度が悪くなる。
が、コレステロール濃度２００ ｍｆ／ｄｉで吸光度０
．７３１と高値であり、対数目盛を用いた、通常の光度
計では精度が悪くなる。
第１図は、実施例１及び参考例１に於て得られた検量線
を表わし、横軸の各Ｈ２Ｏ２濃度（■／１ ）について
得られた吸光度（ＯＤ ）ｋ、縦軸に沿ってプロットし
た点を結んだものである。但し、→→は実施例１−伽ｏ
−は参考例１を表わす。 第２図は、実施例２及び参考例２に於て得られた検量線
を表わし、横軸の各コレステロール濃度（ｍｙ／ｄｉ
）について得られた吸光度（ＯＤ ） ｋ、縦軸に沿っ
てプロットした点を結んだものである。 但し、−一←は実施例２．−ｏ−ｏ−は参考例２を表わ
す。尚、上記測定のセル層厚はいずれもｌｏ＋ｎである
。 特許出願人 和光純薬工業株式会社 第 １ 図 １５ ３０ ４５ ６０ ７５ Ｈ２０□濃度（ｑ／ｌ） コレステロール濃度（ｑ／ｄｚ） 手続補正書 昭和５０年 ９月２５８ １ 事件の表示 昭和Ｓ９年４寺釣プ限・第０すｌダ斗訃予２ 発明の名
称 邊醋Ａヒ水素っ定量ガ戒 連絡装置 ０３’−２７０−８５７１ 自 すさ ５、 補正の対象 明細書の発明の詳細な説明の欄。 ６、補正の内容 （１）明細書４頁７行目から同頁８行目にかけて記載の
［３−メチルベンゾチアゾリノンヒドラゾン（ＭＢＴＨ
）Ｊを［３−メチル−２−ベンゾチアゾリノンヒドラゾ
ン（ＭＢＴＨ）Ｊと補正する。 （２）明細書４頁９行目から同頁Ｕ行目にかけて記載の
［２・２°−アジノビス（３−エチルベンゾチアゾリン
−６−スルホン酸）（ＡＢＴＳ）Ｊを「２．２−アジノ
ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）
（ＡＢＴＳ）Ｊと補正する。 以上
を表わし、横軸の各Ｈ２Ｏ２濃度（■／１ ）について
得られた吸光度（ＯＤ ）ｋ、縦軸に沿ってプロットし
た点を結んだものである。但し、→→は実施例１−伽ｏ
−は参考例１を表わす。 第２図は、実施例２及び参考例２に於て得られた検量線
を表わし、横軸の各コレステロール濃度（ｍｙ／ｄｉ
）について得られた吸光度（ＯＤ ） ｋ、縦軸に沿っ
てプロットした点を結んだものである。 但し、−一←は実施例２．−ｏ−ｏ−は参考例２を表わ
す。尚、上記測定のセル層厚はいずれもｌｏ＋ｎである
。 特許出願人 和光純薬工業株式会社 第 １ 図 １５ ３０ ４５ ６０ ７５ Ｈ２０□濃度（ｑ／ｌ） コレステロール濃度（ｑ／ｄｚ） 手続補正書 昭和５０年 ９月２５８ １ 事件の表示 昭和Ｓ９年４寺釣プ限・第０すｌダ斗訃予２ 発明の名
称 邊醋Ａヒ水素っ定量ガ戒 連絡装置 ０３’−２７０−８５７１ 自 すさ ５、 補正の対象 明細書の発明の詳細な説明の欄。 ６、補正の内容 （１）明細書４頁７行目から同頁８行目にかけて記載の
［３−メチルベンゾチアゾリノンヒドラゾン（ＭＢＴＨ
）Ｊを［３−メチル−２−ベンゾチアゾリノンヒドラゾ
ン（ＭＢＴＨ）Ｊと補正する。 （２）明細書４頁９行目から同頁Ｕ行目にかけて記載の
［２・２°−アジノビス（３−エチルベンゾチアゾリン
−６−スルホン酸）（ＡＢＴＳ）Ｊを「２．２−アジノ
ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）
（ＡＢＴＳ）Ｊと補正する。 以上
Claims (6)
- （１）下記一般式〔Ｉ〕で表わされるトリフェニルメタ
ン誘導体を発色成分として用いる過酸化水素の定量法に
於て、感度を調節する目的でアジ化物を用いることを％
像とする過酸化水素の定量方法。 入 〔式中、Ｒ１＋ Ｒ２ｒ Ｒ３ｒ Ｒ４は截級アルキル
基を表わし、夫々同じであっても異っていても良く、Ｘ
、 、 Ｘ２はどちらも一〇 （ＣＨｔ ） ｎ Ｓ
ＯＢＭ＋（但し、ＭＩは水素又はアルカリ金属イオン又
はＮＨ４を示し、ｎは２〜４の整数を示す。）を示すか
、又はどちらか一方が−０（ＣＨ２）ｎｘｇ８０３ Ｍ
＋ （但し、Ｒｊｌ 、 ｎは前記と同じ）又はＳＯ３
Ｍａ （但し、Ｍ、は水素又はアルカリ金属イオン又は
ＮＨ４’！ｉｌ−示す。）全示し、他方が水 −素を示
す。〕 - （２）アジ化物がアジ化ナトリウムである特許請求の範
囲第１項に記載の過酸化水素の定量方法。 - （３） ペルオキシダーゼの存在下、発色成分を酸化発
色させてその呈色を特徴とする特許請求の範囲第１項又
は第２項に記載の過酸化水素の定量方法。 - （４） 過酸化水素が、酵素反応により生成する過酸化
水素である特許請求の範囲第１項、第２項又は第３項に
記載の過酸化水素の定量方法。 - （５）過酸化水素が、生体試料中の微量成分の定量に於
て酵素反応により生成する過酸化水素である特許請求の
範囲第４項に記載の過酸化水素の定量方法。 - （６）生体試料中の微量成分の定量が、基質、又は酵素
反応により生成した物質に酸化酵素全作用させ生成する
過酸化水素を定量することにより行う生体試料中の基質
又は酵素活性の定量である特許請求の範囲第５項に記載
の過酸化水素の定量方法。
Priority Applications (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7154884A JPS60220859A (ja) | 1984-04-10 | 1984-04-10 | 過酸化水素の定量方法 |
| AT84902363T ATE56735T1 (de) | 1984-03-02 | 1984-06-12 | Triphenylmethanabkoemmlinge und verfahren zur bestimmung der oxydativen agenzien bei deren verwendung als farbstoffbilder. |
| EP19890117475 EP0355864A3 (en) | 1984-03-15 | 1984-06-12 | Method of quantitatively measuring an oxidative substance by using triphenyl methane type leuco compounds as coloring matter |
| EP19840902363 EP0174371B1 (en) | 1984-03-02 | 1984-06-12 | Triphenylmethane derivatives and method for determining oxidative substances using them as color-forming component |
| DE8484902363T DE3483269D1 (de) | 1984-03-02 | 1984-06-12 | Triphenylmethanabkoemmlinge und verfahren zur bestimmung der oxydativen agenzien bei deren verwendung als farbstoffbilder. |
| PCT/JP1984/000305 WO1985003942A1 (en) | 1984-03-02 | 1984-06-12 | Triphenylmethane derivatives and method for determining oxidative substances using them as color-forming component |
| US06/649,479 US4778753A (en) | 1984-03-15 | 1984-09-11 | Method of quantitatively measuring an oxidative substance using triphenyl methane type leuco-pigment as a coloring substance |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7154884A JPS60220859A (ja) | 1984-04-10 | 1984-04-10 | 過酸化水素の定量方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60220859A true JPS60220859A (ja) | 1985-11-05 |
Family
ID=13463895
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7154884A Pending JPS60220859A (ja) | 1984-03-02 | 1984-04-10 | 過酸化水素の定量方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60220859A (ja) |
-
1984
- 1984-04-10 JP JP7154884A patent/JPS60220859A/ja active Pending
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