JPS60137284A - 抗体産生細胞の取得方法、及びそれを用いた抗体の製造方法 - Google Patents
抗体産生細胞の取得方法、及びそれを用いた抗体の製造方法Info
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- JPS60137284A JPS60137284A JP58248452A JP24845283A JPS60137284A JP S60137284 A JPS60137284 A JP S60137284A JP 58248452 A JP58248452 A JP 58248452A JP 24845283 A JP24845283 A JP 24845283A JP S60137284 A JPS60137284 A JP S60137284A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はイン・ヴイトロ（ｉｎ ｖｊｔｒｏ ） によ
る抗体並生細胞の取得方法およびそれを用いた抗体の製
造方法に関する。
る抗体並生細胞の取得方法およびそれを用いた抗体の製
造方法に関する。
さらに詳しくは、動物由来の免疫担ず細胞をコンディシ
ョン・メチイウム（ＣｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄＭｅｄｉｕ
ｍ ）、すなわち胸腺細胞培養物を含む細胞培養液中さ
らに必要に応じコロニー刺激因子まｔこは／およびイン
ターロイキンを細胞培養液中、抗原で感作させろことを
特徴とする抗体産生細胞の取得方法および動物由来の免
疫担当細胞を、コンティジョン・メディウム（（３ｏｎ
ｄｉｔｉｏｎｅｄ Ｍｅｄｉｕｍ ）、 すなわち胸腺
細胞培養物を含む細胞培養液、さらに必要に応じコロニ
ー刺激因子または／およびインターロイキンを添加され
１こ細胞培養液中、抗原で感作させろことにより抗原産
生細胞を得ｔこ後、当該産生細胞に増夕１α付与操作を
旌して得ｙ＝インモータライズ（ｉｍｍｏｔａｌｉｚｅ
） Ｌ／ ｆこ該細胞を培養することを特徴とする抗
体の製造方法である。。
ョン・メチイウム（ＣｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄＭｅｄｉｕ
ｍ ）、すなわち胸腺細胞培養物を含む細胞培養液中さ
らに必要に応じコロニー刺激因子まｔこは／およびイン
ターロイキンを細胞培養液中、抗原で感作させろことを
特徴とする抗体産生細胞の取得方法および動物由来の免
疫担当細胞を、コンティジョン・メディウム（（３ｏｎ
ｄｉｔｉｏｎｅｄ Ｍｅｄｉｕｍ ）、 すなわち胸腺
細胞培養物を含む細胞培養液、さらに必要に応じコロニ
ー刺激因子または／およびインターロイキンを添加され
１こ細胞培養液中、抗原で感作させろことにより抗原産
生細胞を得ｔこ後、当該産生細胞に増夕１α付与操作を
旌して得ｙ＝インモータライズ（ｉｍｍｏｔａｌｉｚｅ
） Ｌ／ ｆこ該細胞を培養することを特徴とする抗
体の製造方法である。。
ｉｎ ｖｉｔｒｏ 免役により、抗体産生細胞を得る試
みは種々なされている。しかし、未だ完成された例はな
かつ１こ。
みは種々なされている。しかし、未だ完成された例はな
かつ１こ。
このような状況下、本発明者らはｉｎ ｖｉｔｒ。
免疫により、抗体産生細胞を取得する方法を鋭意検討し
Ｔコ結果、胸腺細胞培養物を含む細胞培養液中で、免疫
を行なうことにより、効果的に抗体産生細胞を取得し、
かつ当該細胞に増殖付与操作の後、培養を行ない抗体を
産生させることにより本発明を完成し１こものである。
Ｔコ結果、胸腺細胞培養物を含む細胞培養液中で、免疫
を行なうことにより、効果的に抗体産生細胞を取得し、
かつ当該細胞に増殖付与操作の後、培養を行ない抗体を
産生させることにより本発明を完成し１こものである。
以下本発明を詳述する。
動物とは、ヒト、マウス等の哺乳動物が代表例として挙
げられる。
げられる。
免疫担当細胞とは、免疫学上免疫を付与され得る細胞で
あれば如何なるものでも良いが、牌臓、リンパ節、末梢
血および／ま１こは骨髄由来の細胞群が代表例として挙
げられる。
あれば如何なるものでも良いが、牌臓、リンパ節、末梢
血および／ま１こは骨髄由来の細胞群が代表例として挙
げられる。
胸腺は、本発明により用いられる免疫担当細胞と同一の
ま１こは異なつ１こ動物由来のものであり、ヒト、マウ
ス、生簀由来のものが代表例として挙げられる３、 胸腺細胞培養物は、胸腺細胞を公知、通常の方法により
、培養して得１こものである。培養後そのまま用いても
良いが、細胞を遠心分離等で分離し１こ後の培養上清を
用いるのが好ましい。
ま１こは異なつ１こ動物由来のものであり、ヒト、マウ
ス、生簀由来のものが代表例として挙げられる３、 胸腺細胞培養物は、胸腺細胞を公知、通常の方法により
、培養して得１こものである。培養後そのまま用いても
良いが、細胞を遠心分離等で分離し１こ後の培養上清を
用いるのが好ましい。
細胞培養液は動物細胞の通常の培養液に、前記胸腺細胞
培養物を添加したものである。通常前者に対して後者を
１／１０〜１の割合で添加する。
培養物を添加したものである。通常前者に対して後者を
１／１０〜１の割合で添加する。
本発明においては、胸腺が分泌する各種因子がＴ細胞と
か免疫担当各種細胞の増殖維持、機能維持に寄与してい
ると推定される。
か免疫担当各種細胞の増殖維持、機能維持に寄与してい
ると推定される。
本発明では、このような胸腺細胞培養物含有培養液に、
さらに必要に応じ適当なインタ−ロイキン（例えばイン
ターロイキン−■）および／または適当な細胞が産生ず
るコロニー刺激因子を添加す゛るのが好ましい。ここで
適当なとはヒト由来の免疫担当細胞に対しては、ヒト由
来のものを添加する必要があるが、マウス由来の免疫担
当細胞に対しては、ヒト由来、マウス由来いずれでも良
い等、該細胞が如何なる動物であるかにより適宜選択さ
れる等、その他を意味する。
さらに必要に応じ適当なインタ−ロイキン（例えばイン
ターロイキン−■）および／または適当な細胞が産生ず
るコロニー刺激因子を添加す゛るのが好ましい。ここで
適当なとはヒト由来の免疫担当細胞に対しては、ヒト由
来のものを添加する必要があるが、マウス由来の免疫担
当細胞に対しては、ヒト由来、マウス由来いずれでも良
い等、該細胞が如何なる動物であるかにより適宜選択さ
れる等、その他を意味する。
抗原とは、免疫学上前記免疫和尚細胞を感作し抗体を産
生じ得るものなら何でも良く、蛋白質、糖質、核酸等の
化学物質、これらを含む細胞等、免疫学上、抗原物質と
され得るものはいずれも良い。本発明ではインシュリン
等の従来抗体産生の困難であつｔコ低分子量抗原に対し
ても、効果的に抗体産生細胞が取得される。
生じ得るものなら何でも良く、蛋白質、糖質、核酸等の
化学物質、これらを含む細胞等、免疫学上、抗原物質と
され得るものはいずれも良い。本発明ではインシュリン
等の従来抗体産生の困難であつｔコ低分子量抗原に対し
ても、効果的に抗体産生細胞が取得される。
感作する方法は、免疫担当細胞を含むコンディション・
メチイウムに抗原を添加し、数日間通常の動物細胞培養
操作を誰すことにより行なわれる。
メチイウムに抗原を添加し、数日間通常の動物細胞培養
操作を誰すことにより行なわれる。
このようにして、抗体産生細胞が取得されるが、通常該
細胞は遠心分離等の分離操作により、培養物より分離さ
れる。
細胞は遠心分離等の分離操作により、培養物より分離さ
れる。
本発明では、このようにして分離取得した抗体産生細胞
に適当な増殖付与操作を施し、インモータライス（ｉｍ
ｍｏもａｌｉｚｅ、）した該細胞を得、当該抗体産生細
胞を、動物細胞の通常の細胞培養により抗体を産生せし
める。
に適当な増殖付与操作を施し、インモータライス（ｉｍ
ｍｏもａｌｉｚｅ、）した該細胞を得、当該抗体産生細
胞を、動物細胞の通常の細胞培養により抗体を産生せし
める。
ここに、適当な増殖付与操作とは、動物細胞にｉｎ Ｖ
ｉｔｒｏ で増殖できる能力を付与する通常一般の操作
であり、細胞融合法（ｙ、＝とえは骨髄腫細胞との融合
）、Ｅ’Ｂウィルス等のウィルスによる形質転換方法等
公知一般の方法が享げられる。
ｉｔｒｏ で増殖できる能力を付与する通常一般の操作
であり、細胞融合法（ｙ、＝とえは骨髄腫細胞との融合
）、Ｅ’Ｂウィルス等のウィルスによる形質転換方法等
公知一般の方法が享げられる。
本発明により、ｉｎ ｖｉｔ、ｒｏ 免疫による抗体産
生細胞の取得方法が完成されるに至った。その結果、従
来のｉｎ ｖｉｖｏ免疫操作は、被免疫動物に対し抗原
投与を複数回要し、それ故微量しかない貴重な抗原には
適用困難であつｔこのに対し、本発明は、細胞培養液に
抗原を１回添加するだけでも実施でき、微量しかない抗
原に対しても効果的に抗体産生細胞を取得し得、従って
該抗原に対する□抗体も首尾よく入手し得る。
生細胞の取得方法が完成されるに至った。その結果、従
来のｉｎ ｖｉｖｏ免疫操作は、被免疫動物に対し抗原
投与を複数回要し、それ故微量しかない貴重な抗原には
適用困難であつｔこのに対し、本発明は、細胞培養液に
抗原を１回添加するだけでも実施でき、微量しかない抗
原に対しても効果的に抗体産生細胞を取得し得、従って
該抗原に対する□抗体も首尾よく入手し得る。
以上、本発明により、任意の抗原に対し、特異的に抗体
の産生が可能になる。さらに１ｎｖｉｔｒｏ操作である
１こめ、腫睡細胞等、それでもってｉｎ ｖｉｖｏ免疫
することが人道上杵されない抗原に対しても、ヒト由来
の抗体産生細胞を得ることができる。
の産生が可能になる。さらに１ｎｖｉｔｒｏ操作である
１こめ、腫睡細胞等、それでもってｉｎ ｖｉｖｏ免疫
することが人道上杵されない抗原に対しても、ヒト由来
の抗体産生細胞を得ることができる。
以下、本発明の具体例の一例を実施例により示すが、本
発明はこれに限られるものではない。
発明はこれに限られるものではない。
実施例１ コンディション・メディウムの調製６匹（７
）７ウスＣ′Ｃａｎ／Ｈｅ 、１０〜２０ 日令）より
、胸腺を摘出した。得られ１こ約５×１０ の細胞を、
５０ ｍｌの培地［２ｍＭ−Ｌ−グルタミン、１ｍＭピ
ルビン酸ナトリウム、５０ ｐ Ｍ ２− Ｊ ルカ７
１− エタノール、２０％仔牛血清を含むイーグル最小
必要培地（Ｅａｇｌｅ’ｓ、１ｂａａ、）〕（以下培地
■と記載）９容量と、ヒトＴ−細胞増殖因子２（インタ
ーロイキン；エレクトロ・ヌクレオエックス・インター
ロイキン）ｌ容量との混合液］を用いて、組織培養容器
Ｔ−７５フラスコ中に懸澗シ、５チ００２−ｇ ５％空
気を含む−ＣＯ２培養装置を用いて、３７℃にて培養し
た。培養４日後に、培養物を６００ｘｇ１１５分間の遠
心分離操作により、培養上清４ｏ−を得た。以下、得ら
れた培養上清を、コンディション・メチ゛イウムＡ （
Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ Ｍｅｄｉｕｍ Ａ ） と記
載する。
）７ウスＣ′Ｃａｎ／Ｈｅ 、１０〜２０ 日令）より
、胸腺を摘出した。得られ１こ約５×１０ の細胞を、
５０ ｍｌの培地［２ｍＭ−Ｌ−グルタミン、１ｍＭピ
ルビン酸ナトリウム、５０ ｐ Ｍ ２− Ｊ ルカ７
１− エタノール、２０％仔牛血清を含むイーグル最小
必要培地（Ｅａｇｌｅ’ｓ、１ｂａａ、）〕（以下培地
■と記載）９容量と、ヒトＴ−細胞増殖因子２（インタ
ーロイキン；エレクトロ・ヌクレオエックス・インター
ロイキン）ｌ容量との混合液］を用いて、組織培養容器
Ｔ−７５フラスコ中に懸澗シ、５チ００２−ｇ ５％空
気を含む−ＣＯ２培養装置を用いて、３７℃にて培養し
た。培養４日後に、培養物を６００ｘｇ１１５分間の遠
心分離操作により、培養上清４ｏ−を得た。以下、得ら
れた培養上清を、コンディション・メチ゛イウムＡ （
Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ Ｍｅｄｉｕｍ Ａ ） と記
載する。
実権例２ コンディション・メチイウムのｍ製（２＋６
匹（７）ｖ ウス（ＯＪＨ／Ｈｅ、’１０〜２０ 日令
）より、胸腺を摘出した。得られた約５×１０ の細胞
を、５０ ｍｌの培地［２ｍ Ｍ、 −Ｌ−グルタミン
、１ｍＭピルビン酸ナトリウム、５０μＭ２−メルカプ
トエタノール、１０％非加熱仔牛血清を含む凡ＰＭＩ
ｌ’ ６４０培地〕〔以下培地■と記載）９容量とヒト
Ｔ−細胞増殖因子２（インターロイキン２；エレクトロ
・ヌクレオエックス書インコーポレイション）ｌ容量と
の混合液〕を用いて、組織培養容器Ｔ−７５フラスコ中
に懸濁し、５％ｃＯ２−９５％空気を含むＣＯ２培養装
置を用いて、３７℃にて培養し１こ。培養４日後に、培
養物を６００ｒｇ、１５分間の遠心分離操作にまり、培
養上清４ｏ−を得た。以下、得られ１こ培養上清を、コ
ンテ゛イション・メディウムＢ（Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅ
ｄ Ｍｅｄｉｕｍ Ｂ ）と記載する。
匹（７）ｖ ウス（ＯＪＨ／Ｈｅ、’１０〜２０ 日令
）より、胸腺を摘出した。得られた約５×１０ の細胞
を、５０ ｍｌの培地［２ｍ Ｍ、 −Ｌ−グルタミン
、１ｍＭピルビン酸ナトリウム、５０μＭ２−メルカプ
トエタノール、１０％非加熱仔牛血清を含む凡ＰＭＩ
ｌ’ ６４０培地〕〔以下培地■と記載）９容量とヒト
Ｔ−細胞増殖因子２（インターロイキン２；エレクトロ
・ヌクレオエックス書インコーポレイション）ｌ容量と
の混合液〕を用いて、組織培養容器Ｔ−７５フラスコ中
に懸濁し、５％ｃＯ２−９５％空気を含むＣＯ２培養装
置を用いて、３７℃にて培養し１こ。培養４日後に、培
養物を６００ｒｇ、１５分間の遠心分離操作にまり、培
養上清４ｏ−を得た。以下、得られ１こ培養上清を、コ
ンテ゛イション・メディウムＢ（Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅ
ｄ Ｍｅｄｉｕｍ Ｂ ）と記載する。
実権例３ 牛インシュリンに対する抗体を産生ずるマウ
ス細胞の取得 ４匹のマウス（Ｂａ１ｂ／ｃ 、４ ａｌ令） 、Ｊ：
’）、牌臓を摘出し、細胞懸濁液を調製した５、４×
１０ 細胞を得た。リン酸緩衝食塩水にて洗浄後、上記
に記載した培地Ｉ２０−に懸濁しｔこ。その後、実施例
Ｉのコンディション・メチ゛イウムＡ２０ｍを添加した
。１ｏ細胞／ｍｌを含む混合液を相識培養容器Ｔ−７５
フラスコあ１こり１０πｅすつ、４本ζこ分注しｆこ。
ス細胞の取得 ４匹のマウス（Ｂａ１ｂ／ｃ 、４ ａｌ令） 、Ｊ：
’）、牌臓を摘出し、細胞懸濁液を調製した５、４×
１０ 細胞を得た。リン酸緩衝食塩水にて洗浄後、上記
に記載した培地Ｉ２０−に懸濁しｔこ。その後、実施例
Ｉのコンディション・メチ゛イウムＡ２０ｍを添加した
。１ｏ細胞／ｍｌを含む混合液を相識培養容器Ｔ−７５
フラスコあ１こり１０πｅすつ、４本ζこ分注しｆこ。
１群２本ずつ、２群に別け、第１群にはＴ−７５フラス
コあ１こり５ｐ９−の牛インシュリン（シグム製）を、
第２群には、１０μｇの牛インシュリンを添加し、５％
００２−９５ ％空気を含むＣＯ２培養装置を用いて、
３７℃にて４日間培養し１こ。この時点での細胞生存率
は約５０チであった。
コあ１こり５ｐ９−の牛インシュリン（シグム製）を、
第２群には、１０μｇの牛インシュリンを添加し、５％
００２−９５ ％空気を含むＣＯ２培養装置を用いて、
３７℃にて４日間培養し１こ。この時点での細胞生存率
は約５０チであった。
実権例ａ −’を
牛インシュリン５μｍを添加、 ４日間の培養後、遠心
分離により集められた牌臓由米細胞を、Ｅａｇｌｅ’ｓ
ＭＥＭにて２回洗滌した後、その生細胞１×ＩＯの細
胞およびマウス骨髄腫細胞Ｎ５−１ ２．５ｘＬＯの細
胞を混ぜ、仔牛血清を除いた培地ＣＩ）に懸濁した。
分離により集められた牌臓由米細胞を、Ｅａｇｌｅ’ｓ
ＭＥＭにて２回洗滌した後、その生細胞１×ＩＯの細
胞およびマウス骨髄腫細胞Ｎ５−１ ２．５ｘＬＯの細
胞を混ぜ、仔牛血清を除いた培地ＣＩ）に懸濁した。
細胞を８００ ｘｇで５分間ペレット化し、その後、上
清を注意深く除去し１こ。同様の操作により２回洗滌後
、細胞を３７℃に保ちながら、５０チ”Ｅ（）１５００
（ＢＤＨケミカルズ）を含んだ、しかし仔牛血清を除い
ｔコ培地（Ｉ）の１ｔｎ１．を１分間で徐々に加えた。
清を注意深く除去し１こ。同様の操作により２回洗滌後
、細胞を３７℃に保ちながら、５０チ”Ｅ（）１５００
（ＢＤＨケミカルズ）を含んだ、しかし仔牛血清を除い
ｔコ培地（Ｉ）の１ｔｎ１．を１分間で徐々に加えた。
１分間放置後、１Ｏｒｎｌの仔牛血清を除いた培地（Ｉ
）を更に１０分間かけて加えた。細胞を６００Ｘｇで５
分間遠心分前することによって集め、７０−の培地（Ｉ
）に再懸濁し、９６穴から成る組織培養マイクロプレー
ト７枚に０．１ｒｎ１．ずつ播種し１こ。１日間培養後
、０．１ ｔｎｌのＨＡ’Ｉ’培地［ＩＸＬＯＭヒボキ
サンチン、４Ｘ１０’Ｍアミノプテリンおよび１．６Ｘ
１０ Ｍ：ｆミジンを含む培地（１）〕と交換し１こ。
）を更に１０分間かけて加えた。細胞を６００Ｘｇで５
分間遠心分前することによって集め、７０−の培地（Ｉ
）に再懸濁し、９６穴から成る組織培養マイクロプレー
ト７枚に０．１ｒｎ１．ずつ播種し１こ。１日間培養後
、０．１ ｔｎｌのＨＡ’Ｉ’培地［ＩＸＬＯＭヒボキ
サンチン、４Ｘ１０’Ｍアミノプテリンおよび１．６Ｘ
１０ Ｍ：ｆミジンを含む培地（１）〕と交換し１こ。
２−３週間、３日毎に半量の培地を新しいＩ（ＡＴ培地
と交換後、培地をＨＴ培地［１０−’ Ｍヒボキサンチ
ンおよび１．６Ｘ１０ Ｍチミジンを含む培地（Ｉｌ
］に変え、更に１週間培養した。その結果、８０ケのウ
ニ、ルに細胞の増殖が認められ１こ。それら増殖の認め
られたウェルの培養上清を酵素免疫法（Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ
Ａ ）にて、牛インシュリンに対する抗体価を測定し
１こところ、２３ケのウェルの培養上清に抗体の産生を
認め１こ。その後、クローニングを２回繰り返し、抗体
の製造に使用し１こ。
と交換後、培地をＨＴ培地［１０−’ Ｍヒボキサンチ
ンおよび１．６Ｘ１０ Ｍチミジンを含む培地（Ｉｌ
］に変え、更に１週間培養した。その結果、８０ケのウ
ニ、ルに細胞の増殖が認められ１こ。それら増殖の認め
られたウェルの培養上清を酵素免疫法（Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ
Ａ ）にて、牛インシュリンに対する抗体価を測定し
１こところ、２３ケのウェルの培養上清に抗体の産生を
認め１こ。その後、クローニングを２回繰り返し、抗体
の製造に使用し１こ。
実施例３−２
牛インシュリン１０μ？を添加、 ４日後に遠心分離に
より集められｔコ婢臓由米の生細胞１×１０ の細胞を
用いて、実地例ａ−ｔに述べられた方法にて、融合細胞
１０４ケを得１こ。又、６ケのウェルに牛インシュリン
に対する抗体の産生を認めた。
より集められｔコ婢臓由米の生細胞１×１０ の細胞を
用いて、実地例ａ−ｔに述べられた方法にて、融合細胞
１０４ケを得１こ。又、６ケのウェルに牛インシュリン
に対する抗体の産生を認めた。
実施例４ 大腸菌由来ガラクトキナーゼに対する抗体を
産生ずるマウス細胞の取得 ４匹のマウス（Ｂａ１ｂ／ｃ 、４週令〕より得られた
４ ｘ ｔ ｏ８の牌臓細胞をリン酸緩衝食塩水にて洗
滌し、上記に記載した培地（１）の２０−に懸濁し１こ
。その後、実施例１のコンディション・メディウムＡの
２０ｒｎ！、を添加した。１０７細胞／ｍ７！を含む混
合液を組織培養容５Ｔ−７５フラスコあ１こりＩＯ−ず
つ、４本に分注し、２群に分けｔコ。第１群には、５μ
２の大腸菌由来ガラクトキナーゼを、第２群には、５０
／７Ｐの大腸菌由来カラクトキナ・−セを添加し、実施
例３のごとく融合細胞を取得しｔこ。第１群では、５０
％のウェルで細胞の増殖が観察され、４１ケのウェル（
１０，８悌）で大腸菌白米カラクトキナーゼに対する抗
体の産生ｆＪ−認めた。又、第２群では、５０チのウェ
ルで細胞の増殖が観察され、５９ケのウェル（１４，８
％）で抗体の産生を紹めた。
産生ずるマウス細胞の取得 ４匹のマウス（Ｂａ１ｂ／ｃ 、４週令〕より得られた
４ ｘ ｔ ｏ８の牌臓細胞をリン酸緩衝食塩水にて洗
滌し、上記に記載した培地（１）の２０−に懸濁し１こ
。その後、実施例１のコンディション・メディウムＡの
２０ｒｎ！、を添加した。１０７細胞／ｍ７！を含む混
合液を組織培養容５Ｔ−７５フラスコあ１こりＩＯ−ず
つ、４本に分注し、２群に分けｔコ。第１群には、５μ
２の大腸菌由来ガラクトキナーゼを、第２群には、５０
／７Ｐの大腸菌由来カラクトキナ・−セを添加し、実施
例３のごとく融合細胞を取得しｔこ。第１群では、５０
％のウェルで細胞の増殖が観察され、４１ケのウェル（
１０，８悌）で大腸菌白米カラクトキナーゼに対する抗
体の産生ｆＪ−認めた。又、第２群では、５０チのウェ
ルで細胞の増殖が観察され、５９ケのウェル（１４，８
％）で抗体の産生を紹めた。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 ｌ）動物由来の免疫をコンディション・メディウム（Ｃ
ｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ Ｍｅｄｉｕｍ ） 、すなわち
胸腺細胞培養物を含む細胞培養液、さらに必要ニ応シコ
ロニー刺激因子または／およびインターロイキンを細胞
培養液中、抗原で感作させることを特徴とする抗体産生
細胞の取得方法 ２）動物がヒトまたはマウスである特許請求の範囲第１
項記載の取得方法 ３）免疫担当細胞が牌臓、リンパ節、末梢血、および／
または骨髄白米の細胞群である特許請求の範囲第１項記
載の取得方法 ４）動物由来の免疫担当細胞を、フンディショ ：ン・
メゾ、イウム（Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ Ｍｅｄｉｕｍ
）、すなわち胸腺細胞培養物を含む細胞培養液、さらに
必要に応じコロニー刺激因子または／およびインターロ
イキンを添加され１こ細胞培養液中、抗原で感作させる
ことにより抗原産生細胞を得１こ後、当該産生細胞に増
殖付与操作を施して得ｔこインモータライズ（ｉｍｎｏ
ｔａｌ−ｉｚｅ）シ１コ該細胞を培養することを特徴と
する抗体の製造方法 ５）動物がヒトまたはマウスである特許請求の範囲第４
項記載の製造方法 ６）免疫担当細胞が婢臓、リンパ節、末梢血および／ま
たは省髄由米の細胞群である特許請求の範囲第４項記載
の製造方法 ７）増殖付与操作が細胞融合法である特許請求の範囲第
４項記載の製造方法 ８）増殖付与操作がウィルスによる形質転換方法である
特許請求の範囲第４項記載の製造方法
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58248452A JPS60137284A (ja) | 1983-12-23 | 1983-12-23 | 抗体産生細胞の取得方法、及びそれを用いた抗体の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58248452A JPS60137284A (ja) | 1983-12-23 | 1983-12-23 | 抗体産生細胞の取得方法、及びそれを用いた抗体の製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60137284A true JPS60137284A (ja) | 1985-07-20 |
Family
ID=17178340
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58248452A Pending JPS60137284A (ja) | 1983-12-23 | 1983-12-23 | 抗体産生細胞の取得方法、及びそれを用いた抗体の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60137284A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01502315A (ja) * | 1986-04-28 | 1989-08-17 | エンドトロニックス インコーポレーテッド | 白血球を培養する方法 |
| JPH0277372U (ja) * | 1988-12-05 | 1990-06-13 |
-
1983
- 1983-12-23 JP JP58248452A patent/JPS60137284A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01502315A (ja) * | 1986-04-28 | 1989-08-17 | エンドトロニックス インコーポレーテッド | 白血球を培養する方法 |
| JPH0277372U (ja) * | 1988-12-05 | 1990-06-13 |
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